棉花根际溶磷菌株的筛选及溶磷效率的鉴定方法与流程

文档序号:12410778阅读:来源:国知局

技术特征:

1.棉花根际溶磷菌株的筛选及溶磷效率的鉴定方法,其特征在于,包括如下步骤:

1)棉花根际土壤的采集

采集常用的棉花品种新陆早42号、45号、50号根际的土壤;

2)棉花根际土壤理化性质的测定

理化性质的测定包括:含水量、PH值、有机质、全氮、全磷、速效磷、全钾的测定;

3)棉花根际溶磷菌株的分离纯化

通过有关微生物分离、纯化、培养及功能鉴定的多种实验技术,对棉花根际的溶磷菌株进行分离纯化;

4)溶磷菌种的鉴定

通过对菌株的形态观察、革兰氏染色、抗酸性染色和采用CTAB法提取溶磷细菌的总DNA,利用细菌16SrDNA通用引物进行PCR扩增,将扩增产物回收纯化后,送生工公司测序,将菌株的测序序列在GenBank和EMBL核酸序列数据库进行序列比对;

5)溶磷能力的鉴定

溶磷能力的鉴定包括定性和定量两部分,每天测量并记录溶磷圈与菌落直径的比值(D/d),大约测量10天;制备纯化各个菌株的发酵液。绘制磷标准曲线后,采用铝锑比色法测定发酵液中水溶性磷含量。

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