一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法与流程

文档序号:12412262阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法,其特征在于:包括下述步骤:

A、抑稻瘟病菌的菌株的筛选:将新鲜的木樨果清洗、消毒后剔除种子,将果肉部分研磨至匀浆状,果实匀浆用无菌水稀释后涂布于PDA培养基上, 28℃恒温培养箱培养1~2天,挑选单菌落用对峙法筛选出对稻瘟病菌有抑制活性的菌,并选取一株抑菌效果好的备用;

B、抑稻瘟病菌的菌株发酵液制备:将步骤A中选取的抑菌效果好的菌株接种于PDB液体发酵培养基中在28~30℃,120~160rpm摇床恒温培养36~48h,得到发酵液;或是将步骤A中选取的抑菌效果好的菌株接种到PDB种子液培养基培养得到种子液,种子液接种到PDB液体发酵培养基,在28~30℃,120~160rpm摇床恒温培养36~48h,得到发酵液;

C、发酵液制备抑制剂:将步骤B得到的发酵液减压浓缩至膏状,然后加入无水硫酸钠去除水,最后用无水甲醇对膏状物进行洗脱得到洗脱液,收集洗脱液得到稻瘟病菌抑制剂。

2.根据权利要求1所述的一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法,其特征在于:在步骤A中,所述的清洗、消毒是将木樨果实依次用60%~85%乙醇、无菌水、0.5%~1.5%的次氯酸钠溶液、无菌水处理。

3.根据权利要求1所述的一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法,其特征在于:在步骤B中,所述种子液接种于PDB液体培养基的接种量为2%~4%。

4.根据权利要求1所述的一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法,其特征在于:在步骤C中,在步骤C中,所述发酵液减压浓缩条件为42~45℃,25~35mbar。

5.根据权利利要求1所述的一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法,其特征在于:在步骤C中,所述用无水甲醇对膏状物进行洗脱是加入发酵液体积的 1/50~1/40 的无水甲醇震荡洗脱。

6.根据权利利要求1所述的一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法,其特征在于:在步骤C中,所述无水硫酸钠的加入量为每升发酵液1.5~2.5g无水硫酸钠。

7.根据权利利要求5所述的一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法,其特征在于:每次所述震荡洗脱的时间为8~10min。

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