一种新的烯胺类化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从罗勒的干燥叶中分离得到的一种具有治疗 肾癌作用的烯胺类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 罗勒为唇形科罗勒属(Ocimum basihcum L.)植物，又名九层塔、毛罗勒、甜罗勒， 主要分布于东半球热带地区，我国西南省区多有分布。罗勒的叶、种子、果实在维吾尔民间 有着广泛的应用，临床用于治疗心虚，房颤，动脉硬化，高血压，高血脂，头痛，咳嗽，腹泻等。 原产非洲、美洲及亚洲热带地区。中国主要分布于新疆，吉林，河北，河南，浙江，江苏，安徽， 江西，湖北，湖南，广东，广西，福建，台湾，贵州，云南及四川，多为栽培，南部各省区有逸为 野生的。非洲至亚洲温暖地带也有。
[0003] 罗勒含有挥发油、黄酮、酚酸、脂肪酸等成分。罗勒中挥发油含量最大，主要为不饱 和及饱和醇类化合物、烯烃、酮、杂环、烷烃、环烷烃、芳烃、胺类等化合物，按其主要成分不 同分为5种化学类型：桂皮酸乙酯，柠檬醛、丁香酚、芳樟醇（Linalool)和百里香酚 (Thymol)〇
[0004] 现代药理研究表明罗勒具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化、抗血栓形成、降血脂、降血糖、 抗突变、杀虫等药理活性。又具备长期的民间应用和研究基础，有很高的药用、食用及经济 价值。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从罗勒的干燥叶中分离得到的一种具有治疗肾癌作用 的烯胺类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(I)，
[0008]
[0009]所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将罗勒的干燥叶粉碎，用75 ~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的 正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中乙酸 乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱10个柱体 积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸 膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、45 :1、25:1、12:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、12:1和 5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。
[0010] 进一步地，步骤(a)中，用80%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0012] 药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物(I)和药学上可接受的载体。
[0013] 所述的化合物(I)在制备治疗肾癌的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗肾癌的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物(I)结构式；
[0019 ]图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。
【具体实施方式】
[0020]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023]制备方法：（a)罗勒的干燥叶（10kg)粉碎，用80 %乙醇热回流提取（25L X 3次），合 并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和的正 丁醇(3LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(398g)和正丁醇萃取物；（b) 步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用 75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏（163g); (c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏用200-300目正相硅胶分离，依次用体积比为85:1(8个柱 体积）、45:1 (8个柱体积）、25:1 (8个柱体积）、12:1 (10个柱体积)和1:1 (5个柱体积）的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4(49g)用200-300目正相硅胶进一步 分离，依次用体积比为20:1(8个柱体积）、12:1(10个柱体积)和5:1(5个柱体积）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2(30g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶 0DS-C18分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I) (143mg)。
[0024] 结构确证:黄色油状物;HR-ESMS显示[M+Na] +为m/z 282.1118，结合核磁特征可 得分子式为C^H^NOs，不饱和度为8。核磁共振氢谱数据δΗ(ΡΡπι，DMS〇-d 6，600MHz): H-1 (4.42，s)，H-4(5.54，d，J = 0.96)，H-7(1.23，s)，Η-8(2· 16，d，J = 0.96)，H-9(7.99，d，J = 12.8)，H-10(12.07，d，J=12.8)，H-2'（7.41，d，J = 8.7)，H-3'（7.35，dd，J = 8.7,7.4)，H-4， (7.10，t，J = 7.4)，H-5'（7.34，dd，J = 8.7,7.4)，H-6'（7.39，d，J = 8.7);核磁共振碳谱数据 Sc(ppm，DMS〇-d6，150MHz):68.2(CH，卜C)，82.7(C，2-C)，197.8(C，3-C)，115.2(CH，4-C)， 154.4(C，5-C)，124.1(C，6-C)，27.8(CH 3,7-C)，19.7(CH3,8-C)，145.6(CH，9-C)，138.7(C， r-C)，117.4(CH，2'-C)，129.1(CH，3'-C)，124.5(CH，4'-C)，129.3(CH，5'-C)，117.4(CH， 6'_〇;碳原子标记参见图1。11?光谱表明该化合物含有羰基（1686〇^ 1)，羟基（3419〇^1)和 胺基（3252cm-4功能团。1H NMR谱显示两个甲基0H1.23，s，H-7#P0H2.16，d，J = O.96Hz， !1-8)，一个含氧次甲基0!14.42,8，!1-1)，两个烯属次甲基[0!15.54，(1，1 = 0.96抱，!1-4)和0 !17.99，(1，了 = 12.8泡，!1-9)]，以及五个芳族质子0!17.41，(1，了 = 8.7他，!1-2'；7.35，(1(1，了 = 8·7,7·4Ηζ，Η-3' ；7.10，t，J = 7.4Hz，H-4' ；7.34，dd，J = 8.7,7.4Hz，H-5' ；7.39，d，J = 8.7Hz，H-6'）。后者质子的低场化学位移及其耦合常数表明该化合物含有仲烯胺(δΗ12.07， (υ=12.8Η Ζ，Η-10)。^ NMR和HSQC谱显示15个碳信号，包括两个甲基，八个次甲基(一个含 氧，七个烯属次甲基），五个季碳(一个含氧，一个酮羰基，三个烯烃季碳）。上述数据，再结合 不饱和数，说明该化合物为两环结构。 1H-1!! COSY谱(DMS〇-d6)显示了三个主要的结构片段： 单取代的苯基环，稀胺自旋系统（=CH-NH_)和下部结构[C(CH 3)=CHLHMBC谱中，质子（δ HI. 23，3Η，s)与含氧季碳C-2(SC82.7)和羰基碳C-3(δ(：197.8)的交叉峰表明C-2位上连有一 个甲基和羟基。此外，烯属质子Η-4(δΗ5.54)与C-2，CH 3-8和C-6的相关性验证了这部分结 构。HMBC谱中，NH-10