AT1酶的活性显 著上升(P<0.01)。说明甲基阿魏酸可以减轻脂质过氧化程度，降低MDA含量，并提高肝细胞 抗氧化的能力，使S0D、GSH-Px和CAT的活性升高，发挥了对酒精性肝病的防治作用。
[0031 ]实施例2甲基阿魏酸对急性酒精性肝病大鼠模型肝脏的保护作用：
[0032] 1.药物和动物
[0033] 1.1动物SD大鼠60只，雌雄各半，体重200±20g
[0034] 1.2动物分组:随机将动物分成6组，每组10只。
[0035] 1.3受试药物
[0036] (1)联苯双酯，此为传统保肝药，是经SFDA批准上市的药品，为用作阳性对照药；
[0037] (2)甲基阿魏酸，为试验药物，观察其对大鼠急性酒精性肝病模型肝脏的保护作 用；
[0038] (3)药物溶媒:1 %羧甲基纤维素钠溶液。
[0039] 2.实施方案
[0040]第1组为正常对照组:灌胃药物溶媒，剂量为10ml/kg;
[0041 ]第2组为模型对照组:灌胃药物溶媒，剂量为10ml/kg;
[0042] 第3组为联苯双酯治疗组:灌胃联苯双酯，剂量为200mg/kg;
[0043] 第4、5、6组依次分别为甲基阿魏酸低、中、高剂量治疗组:灌胃甲基阿魏酸，剂量依 次分别为 1 〇mg/kg、50mg/kg、100mg/kg。
[0044] 第4天开始除空白组外，其余各组每日上午正常给药，下午灌胃60 %酒精10ml/kg， 进食进水不限，连续酒精灌胃l〇d，末次灌胃60%酒精结束后lh，麻醉，随即取血和肝脏。测 定血清ALT、AST含量，测定结果见表4;取肝左叶同一部位组织，测定肝匀浆中MDA含量和 SOD、GSH-Px、CAI1酶的活性，测定结果见表5。
[0045] 3.结果
[0046] 表4甲基阿魏酸对急性酒精性肝病大鼠模型血清ALT、AST的影响
[0047]
[0048] 注：与正常对照组比较卞<0.05，bP<0.01;与模型组比较 CP<0.05，dP<0.01。
[0049] 与正常对照组比较，模型对照组大鼠 ALT、AST的活性显著升高(P<0.01)。与模型对 照组比较，甲基阿魏酸大鼠血清ALT、AST含量显著降低(P<0.01)。
[0050] 表5甲基阿魏酸对急性酒精性肝病大鼠模型肝组织MDA、SOD、GSH-Px、CAT的影响
[0051]
[0052] 注：与正常对照组比较叩<0.05，bP<0.01;与模型组比较叩<0.05， dP<0.01。
[0053]由表4、5可看出，与第1组正常对照组相比，第2模型组的ALT、AST、MDA明显升高(P< 0.01 )，而SOD明显降低(P<0.01 )，这表明急性酒精性肝大鼠模型成功建立;治疗组3、4、5、6 组血清中ALT、AST含量和肝组织中的MDA的含量降低，而肝组织中SOD、GSH-Px、CAT活性增 加，与模型组比较差异有统计学意义(P<〇.05或P<0.01)。甲基阿魏酸的作用与联苯双酯接 近或者好于联苯双酯，说明甲基阿魏酸对急性酒精性肝大鼠模型的肝脏有较好的保护作 用。
[0054] 实施例3甲基阿魏酸对慢性酒精性肝病大鼠模型肝脏的保护作用：
[0055] 1.药物和动物
[0056] 1.1动物:SD雄性大鼠60只，雌雄各半，体重200±20g。
[0057] 1.2动物分组:随机将动物分成6组，每组10只。
[0058] 1.3受试药物
[0059] (1)甲基阿魏酸，为试验药物，观察其对大鼠慢性酒精性肝病模型肝脏的保护作 用；
[0060] (2)药物溶媒:1 %羧甲基纤维素钠溶液。
[00611 2.实施方案
[0062]第1组为正常对照组：上午灌胃溶媒，剂量为10ml/kg;下午灌胃蒸馏水，剂量为 10ml/kg；
[0063] 第2组为酒精模型对照组：上午灌胃溶媒，剂量为10ml/kg;下午灌胃43%白酒 10ml/kg；
[0064] 第3组为甲基阿魏酸低剂量治疗组:上午灌胃甲基阿魏酸，剂量为lmg/kg;下午灌 胃 43%白酒1〇1111/1^;
[0065]第4组为甲基阿魏酸中剂量治疗组:上午灌胃甲基阿魏酸，剂量为5mg/kg;下午灌 胃 43%白酒1〇1111/1^;
[0066]第5组为甲基阿魏酸高剂量治疗组:上午灌胃甲基阿魏酸，剂量为10mg/kg;下午灌 胃43% 白酒 10ml/kg。
[0067] 大鼠饲喂普通饲料，自由进食水。共灌胃12周，大鼠于最后一次灌胃43%白酒后开 始禁食但不禁饮水，12h后处死，取血和肝脏。测定血清甘油三脂(TG)、ALT和AST的含量，测 定结果见表6;取肝左叶同一部位组织，测定肝匀浆中MDA含量和SOD、GSH-Px、CAT的活性，测 定结果见表7。
[0068] 3.结果
[0069] 表6.甲基阿魏酸对慢性酒精性肝病大鼠模型血清TG、ALT和AST含量的影响
[0070]
[0071] 注：与正常对照组比较卞<0.05，bP<0.01;与模型组比较 CP<0.05，dP<0.01。
[0072] 表7.甲基阿魏酸对慢性酒精性肝病大鼠模型肝组织1?从、500、65!1^^、041'的影响
[0073]
[0074] 注：与正常对照组比较叩<0.05，bP<0.01;与模型组比较叩<0.05， dP<0.01。
[0075]由表6、7可看出，第2组酒精所致慢性酒精性肝病模型组大鼠的TG、AST、ALT、MDA等 指标与第1组空白对照组比较均明显升高(？<〇.〇1)，300、63!1、041'则明显降低(？<0.01)，这 说明模型建立是成功的。第3~5组即用甲基阿魏酸治疗组的各项指标与模型对照组比较差 异有统计学意义(P<〇. 05或P<0.01 )，且呈量效关系，说明甲基阿魏酸对酒精所致慢性酒精 性肝病有较好的抑制与减轻作用。
[0076] 结论
[0077] 上述结果表明，甲基阿魏酸具有预防与治疗酒精性肝病的新用途，可以用于制备 预防和治疗酒精性肝病的药物，其剂量为l-l〇〇mg/kg甲基阿魏酸/日，可分成2-3次服用。
【主权项】
1.甲基阿魏酸在制备预防和治疗酒精性肝病药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了甲基阿魏酸在制备预防和治疗酒精性肝病药物中的应用，通过乙醇诱导L-02细胞损伤模型证实甲基阿魏酸可以降低MDA水平，并提高SOD、GSH-Px与CAT的活性。通过动物试验证明，甲基阿魏酸可以显著降低急性酒精性肝损伤大鼠的ALT、AST、MDA含量，显著提高SOD、GSH-Px？和CAT活性；甲基阿魏酸可以明显降低慢性酒精性肝损伤大鼠的甘油三酯（TG）、ALT、AST？和MDA？含量，显著提高SOD、GSH-Px和CAT活性。以上细胞与动物实验结果表明：甲基阿魏酸具有确切的预防和治疗酒精性肝病作用，可单方或复方用于制备预防和治疗酒精性肝病的药物。
【IPC分类】A61K31/192, A61K36/69, A61P1/16
【公开号】CN105582003
【申请号】CN201610107099
【发明人】李勇文, 李丽, 杨成芳, 吴丹, 钟毓娟, 陈莉
【申请人】桂林医学院
【公开日】2016年5月18日
【申请日】2016年2月26日