并且使用时无需进一步纯 化。
[0252] 中间体3:(S) -4,4-二氟吡咯烷-2-羧酸
[0253]
[0254] 起始于市售⑶-1-(叔丁氧基羰基）-4,4-二氟吡咯烷-2-羧酸（150mg， 1. Ommol)，根据上述步骤B以定量收率获得作为盐酸盐的产物并且使用时无需进一步纯 化。
[0255] 中间体4:(2S，4S) -4-(甲基硫基）吡咯烷-2-羧酸
[0256]
[0257] 起始于市售（2S，4S)-1_(叔丁氧基羰基）-4_甲基硫基-吡咯烷-2-羧酸（310mg， 1. 93mmol)，根据上述步骤B以定量收率获得作为盐酸盐的产物并且使用时无需进一步纯 化。
[0258] 中间体5 : (2S，4S)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸
[0259]
[0260] 起始于市售（2S，4S) -1-(叔丁氧基羰基）-4-甲基吡咯烷-2-羧酸（500mg， 2. 18mmol)，根据上述步骤B以定量收率获得作为盐酸盐的产物并且使用时无需进一步纯 化。
[0261] 中间体6 : (2S，4R)-4-乙酰氧基吡咯烷-2-羧酸
[0262]
[0263] 将市售的反式-L-羟脯氨酸（500mg，3. 81mmol)溶解于6N盐酸（lmL)中。添加冰 乙酸（lmL)，并且在冰浴中将溶液冷却至0°C。然后缓慢添加乙酰氯（10mL)。几分钟之后， 通过沉淀获得产物，这得益于醚的添加。盐酸盐形式的化合物（626mg，2. 98mmol)通过过滤 来分离，用醚洗涤、干燥并直接用于下一步骤。
[0264] 中间体7 :(2S，4R)-1-(4_(苄基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_甲氧基-吡 咯烷-2-羧酸
[0265]
[0266] 根据上述步骤C由中间体1(4-苄基氧基_3,5_二甲氧基苯甲酸）（425mg， 1. 5mmol)和中间体2((2S，4R)-4-甲氧基吡咯烷-2-羧酸）（1. 5mmol)制备。通过快速色谱 法纯化获得期望的产物（428mg，1. Ommol)。
[0267] 中间体8 : (2S，4R)-1-(4_(苄基氧基）-3,5_二甲氧基苯甲酰基）-4_氟吡咯 烷-2-羧酸
[0268]
[0269] 根据上述步骤C由中间体1(4-苄基氧基_3,5_二甲氧基苯甲酸）（714mg， 2. 5mmol)和市售（2S，4R)-4-氟吡咯烷-2-羧酸（363mg，2. 7mmol)制备。通过快速色谱法 纯化获得期望的产物（670mg，1. 7mmol)。
[0270] 中间体9 :(2S，4S)-1-(4_(苄基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_苯基吡咯 烷-2-羧酸
[0271]
[0272] 根据上述步骤C由中间体1 (4-苄基氧基-3，5-二甲氧基苯甲酸）（700mg， 2. 4mmol)和市售（2S，4S)-4-苯基吡咯烷-2-羧酸（608mg，2. 7mmol)制备。通过快速色谱 法纯化获得期望的产物（700mg，1. 5mmol)。
[0273] 中间体10 :(S)-1-(4_(苄基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4,4_二氟吡咯 烷-2-羧酸
[0274]
[0275] 根据上述步骤C由中间体1 (4-苄基氧基-3，5-二甲氧基苯甲酸）（260mg， 0. 9mmol)和中间体3(⑶-4,4-二氟吡咯烷-2-羧酸）（l.Ommol)制备。通过快速色谱法纯 化获得期望的产物（366mg，0. 9mmol)。
[0276] 中间体11:(25,45)-1-(4-(苄基氧基）-3,5-二甲氧基苯甲酰基）-4-(甲基硫 基）_吡咯烷-2-羧酸
[0277]
[0278] 根据上述步骤C由中间体1(4-苄基氧基_3,5_二甲氧基苯甲酸）（505mg， 1.75mmol)和中间体4((2S，4S)-4-(甲基硫基）吡咯烷-2-羧酸）（1.93mmol)制备。通过 快速色谱法纯化获得期望的产物（537mg，1. 24mmol)。
[0279] 中间体12 :(2S，4S)-1-(4_(苄基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_甲基吡咯 烷-2-羧酸
[0280]
[0281] 根据上述步骤C由中间体1(4-苄基氧基_3,5_二甲氧基苯甲酸）（384mg， 1.33mmol)和中间体5((2S，4S)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸）（1.47mmol)制备。通过快速色谱 法纯化获得期望的产物（342mg，0. 85mmol)。
[0282] 中间体13 : (2S，4R) -1- (4-(苄基氧基）-3, 5-二甲氧基苯甲酰基）-4-乙酰氧基吡 咯烷-2-羧酸
[0283]
[0284] 根据上述步骤C由中间体1 (4-苄基氧基-3，5-二甲氧基苯甲酸）（400mg， 1.39mmol)和中间体6((2S，4R)-4-乙酰氧基吡咯烷-2-羧酸）（1.53mmol)制备。通过快速 色谱法纯化获得期望的产物（342mg，0. 85mmol)。
[0285] 中间体14 :4_乙酰氧基-3, 5-二甲氧基苯甲酸
[0286]
[0287] 在0 °C下将4-羟基-3, 5-二甲氧基苯甲酸（300mg，1. 51mmol)溶解于吡啶 (732 yL，9.08mmol)中。在搅拌混合物的同时逐滴添加乙酸酐（214yL，2.27mmol)。保持 冰浴2小时，然后将混合物注入冰水中。混合物用DCM萃取（3 X)，有机相用IN HC1溶液洗 涤（3X)、用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发以产出4-乙酰氧基_3,5_二甲氧基 苯甲酸（266mg，1. lOmmol)。
[0288] 中间体15 :4_苯甲酰氧基-3, 5-二甲氧基苯甲酸
[0289]
[0290] 将4-羟基_3,5_二甲氧基苯甲酸（300mg，1. 51mmol)溶解于水（6mL)中，然后添 加异丙醇（2.5mL)，接着添加碳酸钾（523mg，3.78mm〇l)。将混合物保持于氩气下并冷却至 〇°C。然后，向剧烈搅拌的反应混合物中逐滴添加苯甲酰氯（185yL，1.59mm 〇l)。添加期间 形成粘稠的白色沉淀。将混合物再搅拌20min后用6M HC1淬灭，同时使反应混合物保持冷 却。固体通过过滤收集，经冷水洗涤并干燥以产出作为白色固体的4-苯甲酰氧基_3,5_二 甲氧基苯甲酸（401mg，1. 33mmol)。
[0291] 中间体16 :3,4-二苄基氧基-5-甲氧基苯甲酸
[0292]
[0293] 将3,4-二羟基-5-甲氧基苯甲酸甲醋（300mg，1. 51mmol)、碳酸钾（1. Og， 7. 3mmol)和碘化钾（161mg，0. 97mmol)引入圆底烧瓶中。添加丙酮（60mL)。在室温下将反 应物搅拌30分钟。然后，将苄基氯（1. 39mL，12. lmmol)添加至反应混合物中并在回流下 维持搅拌8小时。接着，将反应物放置至冷却到室温。添加水并用二乙醚进行三次萃取， 有机相用盐水洗绦，干燥并蒸发。通过快速色谱法来纯化粗制产物，得到377mg(l. Ommol)。 然后，根据上述步骤A对甲酯进行水解以产出3,4_二苄基氧基-5-甲氧基苯甲酸（144mg， 0. 4mmo1)。
[0294] 中间体17 :3,4-二苯甲酰氧基-5-甲氧基苯甲酸
[0295]
[0296] 将3,4_二羟基-5-甲氧基苯甲酸（300mg，1. 63mmol)溶解于水（6mL)中并然后 添加异丙醇（2. 5mL)，再添加碳酸钾（1. 13g，8. 15mmol)。将混合物保持在氩气下并冷却至 〇°C。然后，向剧烈搅拌的反应混合物中逐滴添加苯甲酰氯（388 y L，3. 34_〇1)。将混合物 再搅拌20min后用6MHC1淬灭，同时使反应混合物保持冷。接着，用AcOEt对其进行稀释并 且进行相分离。有机相依次用1M HC1溶液和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。通过快 速色谱法纯化粗制物来产出作为白色固体的3,4_二苯甲酰氧基-5-甲氧基苯甲酸（548mg， 1. 40mmo1)〇
[0297] 中间体18 :3-乙酰氧基-4, 5-二甲氧基苯甲酸
[0298]
[0299] 在0 °C下将3-羟基-4, 5-二甲氧基苯甲酸（300mg，1. 51mmol)溶解于R比啶 (732 yL，9.08mmol)中。在搅拌混合物的同时逐滴添加乙酸酐（214yL，2.27mmol)。保持 冰浴2小时，然后将混合物注入冰水中。混合物用DCM萃取（3X)，有机相用IN HC1溶液 (3X)、水（2X)和盐水（2X)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发以产出3-乙酰氧基_4,5_二 甲氧基苯甲酸（277mg，1. 15mmol)。
[0300] 中间体19 :3_特戊酰氧基-4, 5-二甲氧基苯甲酸
[0301]
[0302]将3-羟基-4,5-二甲氧基苯甲酸（30011^，1.51臟〇1)和吡啶（2441^，3.02臟〇1) 的氯仿（2mL)溶液搅拌30分钟。根据TLC，在室温下向该反应混合物中逐滴添加氯仿（2mL) 的特戊酰氯（196 y L，1. 59mmol)溶液，并且搅拌反应直至反应完成（约3h)。然后，用DCM 稀释反应混合物，添加1M HC1溶液并进行相分离。有机相依次用1M HC1溶液1MHC1 (2X)、 水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。通过快速色谱法纯化获得4-特戊酰氧基-3， 5_ 二甲氧基苯甲酸（321mg，1. 14mmo 1)。
[0303] 中间体20 :4_苄基氧基-3-三氟甲基苯甲酸
[0304]
[0305] 将4-羟基-3-三氟甲基苯甲酸（1. 0g，4. 9mmol)和碳酸钾（1. 6g，11. 6mmol)引入 圆底烧瓶中。添加DMF(lOmL)并在室温下将反应物搅拌5分钟。然后，将苄基氯（2. 2mL， 19. 4mmol)添加至反应混合物中，在回流下维持4小时。接着，放置反应物至冷却到室温。 添加水并用乙酸乙酯（3X50mL)进行三次萃取，有机萃取物经盐水洗涤，干燥并蒸发。通过 快速色谱法来纯化粗制产物，获得1. 3g (3. 4mmol)。然后，根据上述的步骤A对苄基酯进行 水解以产出4-苄基氧基-3-三氟甲基苯甲酸（320mg，1. lmmol)。
[0306] 中间体21 :4_苄基氧基-3-氟苯甲酸
[0307]
[0308] 将4-羟基-3-氟苯甲酸（1. 0g，6. 4mmol)、碳酸钾（2. 7g，19. 2mmol)和碘化钾 (532mg，3. 2mmol)引入圆底烧瓶中。添加丙酮（140mL)并在室温下将反应搅拌30分钟。然 后，将苄基溴（3. 8mL，32. Ommol)添加至反应混合物中，在回流下维持12小时。接着，放置 反应物至冷却到室温。添加水并用乙酸乙酯（3X50mL)进行三次萃取，有机萃取物经盐水 洗涤，干燥并蒸发。通过快速色谱法来纯化粗制产物，获得1. 2g(3. 5mmol)。然后，根据上述 的步骤A对苄基酯进行水解以产出4-苄基氧基-3-氟甲基苯甲酸（612mg，2. 5_〇1)。
[0309] 实施例1:
[0310] (S)-1-((2S，4R)-1-(4-(苄基氧基）-3,5_二甲氧基苯甲酰基）-4_甲氧基吡咯 烧 _2_幾基）R比略烧-2-甲腈
[0311]
[0312] 根据上述步骤D使市售（S)_吡咯烷-2-甲腈（58mg，0. 4mmol)与中间体7((2S， 4R) -1- (4-(苄基氧基）-3, 5-二甲氧基苯甲酰基）-4-甲氧基吡咯烷-2-羧酸）（220mg， 0. 5mmol)偶联。通过RP-HPLC纯化来获得10mg(0. 02mmol)的最终产物。
[0313] 实施例2:
[0314] (S)-1-((2S，4R)-1-(4_(苄基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_氟吡咯 烧 _2_幾基）R比略烧-2-甲腈
[0315]
[0316] 起始于市售Sieber酰胺树脂（500mg，0. 30mmol，1当量）、市售Fmoc保护的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (400mg，1. 2mmol)和中间体 8((2S，4R)-1-(4-(苄基氧基）-3,5_ 二甲 氧基苯甲酰基）-4-氟吡咯烷-2-羧酸）（239mg，0. 60mmol)，根据上述步骤E制备产物。通 过RP-HPLC纯化获得80mg(0. 17mmol)的最终产物。
[0317] 实施例3 :
[0318] (S)-1-((2S，4S)-1-(4_(苄基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_苯基吡咯 烧 _2_幾基）R比略烧-2-甲腈
[0319]
[0320] 起始于市售Sieber酰胺树脂（500mg，0. 38mmol，1当量）、市售Fmoc保护的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (516mg，1.53mmol)和中间体 9((25,45)-1-(4-(苄基氧基）-3,5-二甲 氧基苯甲酰基）-4-苯基吡咯烷-2-羧酸）（351mg，0. 76mmol)，根据上述步骤E制备产物。 通过RP-HPLC纯化获得16mg(0. 03mmol)的最终产物。
[0321] 实施例4:
[0322] (S) -1-((2S) -1- (4-(苄基氧基）-3，5-二甲氧基苯甲酰基）-4,4-二氟吡咯 烧_2_幾基）R比略烧-2-甲腈
[0323]
[0324] 起始于市售Sieber酰胺树脂（250mg，0. 19mmol，1当量）、市售Fmoc保护的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (258mg，0? 77mmol)和中间体 10 ((S) -1- (4-(苄基氧基）-3, 5-二甲氧 基苯甲酰基）-4,4-二氟吡咯烷-2-羧酸）（161mg，0. 38mmol)，根据上述步骤E制备产物。 通过RP-HPLC纯化获得18mg(0. 036mmol)的最终产物。
[0325] 实施例5:
[0326] (S)-1-((2S，4S)-1-(4_(苄基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）-4_(甲基硫基）吡 咯烷-2-羰基）吡咯烷-2-甲腈
[0327]
[0328]起始于市售Sieber酰胺树脂（500mg，0. 38mmol，1当量）、市售Fmoc保护的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (516mg，1.53mmol)和中间体 ll((2S，4S)-1-(4-(苄基氧基）-3,5_ 二 甲氧基苯甲酰基）-4-(甲基硫基）吡略烧-2-羧酸）（330mg，0. 76mmol)，根据上述步骤E制 备产物。通过RP-HPLC纯化获得22mg(0.043mmol)的最终产物。
[0329] 实施例6 :
[0330] (S) -1-((2S，4S) -1- (4-(苄基氧基）-3, 5-二甲氧基苯甲酰基）-4-甲基吡咯 烧_2_幾基）R比略烧-2-甲腈
[0331]
[0332] 起始于市售Sieber酰胺树脂（300mg，0. 18mmol，1当量）、市售Fmoc保护的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (247mg，0. 73mmol)和中间体 12((2S，4S)-1-(4-(苄基氧基）-3,5_ 二 甲氧基苯甲酰基）-4-甲基吡咯烷-2-羧酸）（146mg，0. 37mmol)，根据上述步骤E制备产物。 通过RP-HPLC纯化获得10mg(0. 02mmol)的最终产物。
[0333] 实施例7 :
[0334] (S)-1-((2S，4R)-1-(4_(苄基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_氰基吡咯 烧 _2_幾基）R比略烧-2-甲腈
[0335]
[0336] 通过以上步骤E所述的分步偶联将市售Fmoc保护的L脯氨酸（Fmoc-L-Pro-OH) (516mg，1. 53mmol)和Boc-反式-4-氰基-L-脯氨酸（368mg，1. 53mmol)依次偶联到市售 Sieber酰胺树脂（500mg，0. 38mmol，l当量）上。在二肽从树脂上裂解掉（cleavage)之后， 根据步骤C通过形成羧酸酰氯使中间体1 (4-苄基氧基-3, 5-二甲氧基苯甲酸）（145mg， 0. 5mmol)与所得二肽腈偶联。通过RP-HPLC纯化粗制物获得llmg(0. 03mmol)的最终产物。
[0337] 实施例8 :
[0338] (S) -1-((2S，4S) -1- (4-(苄基氧基）-3，5-二甲氧基苯甲酰基）-4-(三氟甲 基）_ R比略烧_2_幾基）R比略烧-2-甲腈
[0339]
[0340] 通过以上步骤E所述的分步偶联将市售Fmoc保护的L脯氨酸（Fmoc-L-Pro-OH) (135mg，0. 40mmol)、（2S，4S)-Fmoc-4-三氟甲基-吡咯烷-2-羧酸（162mg，0. 40mmol)和中 间体1 (4-苄基氧基-3, 5-二甲氧基苯甲酸）（115mg，0. 40mmol)依次偶联到市售Sieber酰 胺树脂（165mg，0. 10mmol，l当量）上。通过RP-HPLC纯化获得13mg(0. 045mmol)的最终产 物。
[0341] 实施例9:
[0342] (S)-1-((2S，4R)-1-(4_(苄基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）-4_(叔丁氧基）吡 咯烷-2-羰基）吡咯烷-2-甲腈
[0343]
[0344] 通过以上步骤E所述的分步偶联将市售Fmoc保护的L脯氨酸（Fmoc-L-Pro-OH) (135mg，0? 40mmol)、Fmoc-4-叔丁氧基 _L_ 腫氛酸（164mg，0? 40mmol)和中间体 1 (4-苄基 氧基-3,5-二甲氧基苯甲酸）（11511^，0.40_31)依次偶联到市售516匕61'酰胺树脂（16511^， 0? lOmmol，1当量）上。通过RP-HPLC纯化获得22m