专利名称：N－取代－n′－取代脲衍生物及含有它的药物组合物的制作方法
背景技术：
本发明涉及新的N-取代-N’-取代脲衍生物，含有该化合物的药物组合物，TNF-α生成抑制剂和自身免疫疾病治疗剂。
TNF-α(Tumor Necrosis Factor-α肿瘤坏死因子)现在，虽然作为在生物防御免疫机构中广泛相关的细胞因子被认识，但TNF-α持续且过量的产生会引起组织障碍，成为各种疾病的原因或造成恶化主要原因。例如，作为与TNF-α相关疾病的例子，可列举关节风湿病，系统性红斑狼疮(SLE)，恶液质，急性感染性疾病，变态反应，发热，贫血，糖尿病等(山崎，临床免疫，27，1270，1995)。另外，有报道说TNF-α在作为自身免疫疾病的慢性风湿病和克罗恩氏病的发病中起到重要作用。(Andreas Eigler et al.，Immunology Today，18，487，1997)。
因此，可抑制TNF-α的产生或其作用的化合物，可期待在上述疾病的治疗中是有用的，对此进行了各种研究(上述文献山崎，临床免疫，27和Andreas Eigler et al.，Immunology Today，18)。
另一方面，在下述通式I中，R1和R3和R4同时为氢原子，R6和R7都是甲基的化合物，作为增敏染料的一种(II-40)记载于特开平1-224758号公报。另外，下述通式I中，R1是芳基或呋喃基甲基，R3是异丙基，R6和R7都是甲基的化合物，作为有效的心律失常治疗剂化合物的例子(实施例1、2、34、37、52和58)，被记载于特开昭57-209267号公报中。
本发明的另一目的是提供在制造该化合物中有用的中间体。
本发明的另一目的是提供含有该化合物的药物组合物，TNF-α生成抑制剂和自身免疫疾病治疗剂。
本发明者对于以往基本上没有作为药物进行研究的具有脲结构作为基本结构的化合物的合成进行了深入研究，创制了很多新的化合物，并发现其中下述通式I所示的N-取代的-N’-取代的脲衍生物具有优秀的TNF-α生成抑制活性，并基于此发现完成了本发明。
即，本发明提供了下述通式I所示的N-取代的-N’-取代的脲衍生物及其药学上可接受的盐。 (式中，R1表示氢原子，低级烷基，芳基，或式II所示的基团， R2表示氢原子，低级烷基，环烷基，芳基，羧基或酯基，或与R1一起形成环，R3和R4可相同或不同，表示氢原子，低级烷基，环烷基烷基，芳烷基，环烷基或芳基，R5表示氢原子，低级烷基，羟基，低级烷氧基或芳基，R6和R7可相同或不同，表示氢原子，低级烷基，环烷基烷基，环烷基或芳基，
A1和A2可相同或不同，表示低级亚烷基，条件是R6和R7都是甲基时，R1和R3和R4不同时为氢原子，或R3是异丙基，R6和R7都是甲基时，R1不是芳基或呋喃基甲基。)本发明还提供了下述通式III所示的N-取代的-N’-取代的脲衍生物及其盐。 本发明还提供了含有上述N-取代的-N’-取代的脲衍生物或其药学上可接受的盐的药物组合物，TNF-α生成抑制剂和自身免疫疾病治疗剂。发明实施的最佳方案在本说明书中，作为低级烷基可列举甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、异己基等碳原子数1～8的直链或支链烷基，优选碳原子数1～6的烷基，更优选碳原子数1～3的烷基，特别优选甲基。作为环烷基，可列举环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等碳原子数3～10的环烷基，优选碳原子数3～6的环烷基，特别优选环己基。作为低级烷氧基，可列举甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、己氧基等碳原子数1～8的直链或支链烷氧基，优选碳原子数1～5的烷氧基，特别优选碳原子数1～3的烷氧基。
这些低级烷基，环烷基和低级烷氧基可被卤原子(氟原子，氯原子，碘原子，溴原子等)，羟基等取代基取代。另外，环烷基可被低级烷基或低级烷氧基取代。
作为低级亚烷基，可列举亚甲基，亚乙基，亚丙基，亚异丙基，甲基亚甲基，四亚甲基，2-甲基三亚甲基，六亚甲基等碳原子数1～8的直链或支链亚烷基，优选碳原子数1～5的亚烷基，更优选碳原子数2～4的亚烷基，特别优选碳原子数2或3的亚烷基。
另外，作为芳基，可列举取代或未取代的碳原子数6～12的苯基，萘基和芳香杂环基，优选取代或未取代的苯基，特别优选未取代的苯基或联苯基。这里，作为取代基，可列举卤原子(氟原子、氯原子、碘原子、溴原子等)，羟基，氨基，低级烷基，低级烷氧基，环烷基，苯基等。
作为环烷基烷基和芳烷基，可列举碳原子数1～8的直链或支链烷基，优选碳原子数1～5的烷基，更优选碳原子数1～3的烷基，特别优选乙基与上述环烷基或芳基连接的基团。
作为酯基，可列举低级烷基酯，苄基酯，苯基酯等。
作为R2与R1一起形成的环，是R1连接的硫原子也包括在内形成的5或6员非芳香族杂环，可列举例如四氢噻吩，硫内酯和二硫戊环。
本发明通式I所示化合物具有巯基、羟基或氨基时，这些基团可用惯用的保护基进行保护。
作为巯基的保护基，可列举酰基，取代的硫基等作为巯基保护基惯用的基团。具体可列举低级烷酰基，苯基羰基，噻吩甲酰基，烟酰基，低级烷氧羰基，取代的低级烷氧羰基，取代的氨基甲酰基等酰基；低级烷硫基，苯基硫基等取代的硫基。另外，上述苯基羰基和苯基硫基的苯环可被卤原子，低级烷基，低级烷氧基或硝基取代。
这其中优选乙酰基，丙酰基，丁酰基，新戊酰基，苯甲酰基，噻吩甲酰基，叔丁氧羰基，苄氧羰基等酰基；乙基硫基，叔丁基硫基，苯基硫基等取代的硫基，更优选低级烷基羰基(特别是碳原子数2～5者)。
作为羟基保护基，可列举酰基，取代的低级烷基，取代的甲硅烷基等作为羟基保护基惯用的基团。具体可列举甲酰基，低级烷酰基，卤代低级烷酰基，苯基羰基，低级烷氧羰基，苯基低级烷氧羰基等酰基；烯丙基，低级烷氧低级烷基，取代的低级烷氧低级烷基，苯基低级烷基，四氢吡喃基，四氢呋喃基等取代的低级烷基；低级烷基甲硅烷基，苯基甲硅烷基等取代的甲硅烷基。另外，上述苯基羰基，苯基低级烷氧羰基，苯基低级烷基和苯基甲硅烷基中的苯环可被卤原子，低级烷基，低级烷氧基或硝基取代。
这其中，作为保护基优选甲酰基，乙酰基，新戊酰基，单氯乙酰基，三氯乙酰基，三氟乙酰基，苯甲酰基，甲氧羰基，乙氧羰基，异丁氧羰基，叔丁氧羰基，苄氧羰基等酰基；烯丙基，甲氧甲基，1-乙氧乙基，2-甲氧乙氧甲基，苄氧甲基，苄基，4-甲氧苄基，三苯甲基，2-四氢吡喃基，2-四氢呋喃基等取代的烷基；三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，三异丙基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基，叔丁基二苯基甲硅烷基等取代的甲硅烷基，更优选三低级烷基甲硅烷基。
作为氨基保护基，可列举酰基，取代的低级烷基，取代的磺酰基等作为氨基保护基惯用的基团。具体可列举甲酰基，低级烷酰基，卤代低级烷酰基，苯基羰基，低级烷氧羰基，取代的低级烷氧羰基，苯氧羰基等酰基；烯丙基，苯基低级烷基，苯甲酰低级烷基等取代的低级烷基；低级烷基磺酰基，苯基磺酰基等取代的磺酰基。另外，上述苯基羰基，苯氧羰基，苯基低级烷基，苯甲酰低级烷基和苯基磺酰基中的苯环可被卤原子，低级烷基，低级烷氧基或硝基取代。
这其中，作为保护基优选甲酰基，乙酰基，三氯乙酰基，三氟乙酰基，苯甲酰基，甲氧羰基，异丁氧羰基，叔丁氧羰基，烯丙氧羰基，2，2，2-三氯乙氧羰基，苄氧羰基，二苯基甲氧羰基，苯氧羰基等酰基；烯丙基，苄基，三苯甲基，(4-甲氧苯基)二苯基甲基等取代的烷基；苯磺酰基，2，4，6-三甲基苯磺酰基，甲苯磺酰基等取代的磺酰基，更优选低级烷氧羰基。
在本发明的通式I中，作为R1，优选氢原子，低级烷基或式II所示基团，且R1是氢原子时，优选用巯基保护基保护。另外，作为R1，优选氢原子或式II所示基团，且R1是氢原子时，优选必须用巯基保护基保护。且R1是低级烷基时，优选未取代的基团。
作为R2，优选氢原子或芳基。R2是芳基时，A1中与S原子连接的碳原子被定义为第1碳原子，优选芳基与第2或第3碳原子连接，更优选与第2碳原子连接。
R3和R4可相同或不同，优选氢原子，低级烷基，环烷基烷基或芳烷基。进一步优选R3是氢原子，环烷基烷基或芳烷基，R4是氢原子，低级烷基或芳烷基。
优选上述R3和R4表示不同基团，其中优选一方表示氢原子。且，作为R3和R4中的低级烷基，优选碳原子数4～8的直链或支链烷基，特别优选碳原子数4～6的烷基，进一步优选异戊基。
优选R5表示氢原子，低级烷基，羟基或芳基，更优选表示氢原子、低级烷基或芳基。R5表示羟基时，可用羟基保护基保护。R5是氢原子以外的取代基时，将与构成尿素的N原子连接的A2的碳原子定义为第1碳原子，优选R5与第1、2或3碳原子连接，更优选与第1或2碳原子连接。
R6和R7可相同或不同，优选表示氢原子，低级烷基或芳基，更优选R6是氢原子或低级烷基，R7是氢原子，低级烷基或芳基。且R6和/或R7是氢原子时，可用氨基保护基保护。
A1和A2可相同或不同，优选表示碳原子数2～4的低级亚烷基，特别优选A1表示碳原子数2或3的低级亚烷基。
另外，通式I中，R6和R7都是甲基时，优选R1和R3和R4不同时为氢原子。且R3和R6和R7都是烷基时，优选R1不是芳基或取代的低级烷基。)本发明的通式I中，优选下列物质。(i)通式I中，R1表示氢原子，低级烷基，或式II所示的基团，R2表示氢原子或芳基，R3和R4可相同或不同，表示氢原子，低级烷基，环烷基烷基或芳烷基，R5表示氢原子，低级烷基，羟基，或芳基，R6和R7可相同或不同，表示氢原子，低级烷基或芳基，A1和A2可相同或不同，表示碳原子数2～4的低级亚烷基。(ii)通式I中，或上述(i)中，R6表示氢原子或低级烷基，R7表示氢原子，低级烷基或芳基，A1是碳原子数2或3的亚烷基，A2表示碳原子数2～4的低级亚烷基。(iii)上述(i)或(ii)中，R3为氢原子，环烷基烷基或芳烷基，R4表示氢原子，低级烷基或芳烷基，R3和R4任意一方是氢原子。(iv)上述(i)～(iii)中，R5表示氢原子，低级烷基或芳基。(v)上述(i)～(iv)中，巯基用低级烷基羰基保护，羟基用三低级烷基甲硅烷基保护，氨基用低级烷氧羰基保护。
作为上述化合物的具体例子，优选下列化合物及其药学上可接受的盐1-[2-(乙酰基硫)乙基]-3-[(1S)-1-苄基-2-(二甲基氨基)乙基]-1-苯乙基脲，1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-苄基乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-异戊基脲，1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-[(4-联苯基)甲基]乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-异戊基脲，双[(2S)-2-[3-(2-氨基乙基)-3-异戊基脲基]-3-苯基丙烷]二硫化物，双[(2S)-2-[3-(2-氨基乙基)-3-异戊基脲基]-3-(4-联苯基)丙烷]二硫化物。
本发明中的盐，只要是作为药物可允许的盐都可以，对此没有特别的限制，可列举与盐酸、硝酸、硫酸等无机酸成的盐，与乙酸，富马酸，马来酸，酒石酸，柠檬酸等有机酸成的盐，或与钠、钾、钙等碱金属或碱土金属成的盐。另外，本发明化合物中存在几何异构体或光学异构体时，这些异构体也包括在本发明范围内。另外，本发明化合物也可以水合物的形式存在。
本发明通式I所示化合物，例如可用下述代表性方法或这些方法的类似方法合成。 上述方法中，包括下述2个合成方法。合成方法A式[IV]化合物→式[III]化合物→通式I所示化合物合成方法B式[IV]化合物→通式I所示化合物下面对这些方法进行具体说明。合成方法A 将式[IV]化合物与氨基醇衍生物[VI]在缩合剂(例如1，1’-羰基二咪唑[VII])存在下反应，得到式[III]化合物，然后，将所得式[III]化合物与硫醇衍生物[VIII]用Mitsunobu反应缩合，得到本发明的通式I所示化合物。合成方法B 将式[IV]化合物与式[IX]化合物在缩合剂(例如1，1’-羰基二咪唑[VII])存在下反应，直接得到本发明的通式I所示化合物。这里，式[IV]化合物和式[IX]化合物可通过特愿平10-79154号说明书中记载的方法容易地合成。
上述[III]化合物是新化合物，是本发明通式I所示化合物的有用的制备中间体。式中，R2，R3，R4，R5，R6，R7，A1和A2具有与通式I中相同的定义，且优选的基团也与通式I中一样。
在上述合成方法中，反应物的分子内具有巯基、羟基或氨基时，可根据需要将这些基团用适当的保护基保护，且它们的保护基可在反应后用常规方法除去。另外，反应物分子内有羧基时，可根据需要将羧基酯化，然后通过水解可将酯转化为羧酸。
本发明化合物中，R2与和A1相邻接的硫原子连接形成硫内酯环时，除了上述路径以外，还可使用下述方法合成。即，在式[I]中，R2代表羧基，R1代表氢原子时，通过缩合这些基团可合成硫内酯环。
按照上述方法得到的化合物可用常规方法转化为前述的盐。
本发明化合物的TNF-α生成抑制作用可用后述的药理试验明示，在试验中对于脂多糖(LPS)刺激引起的TNF-α释放的抑制效果进行了体外和体内研究，结果表明本发明化合物显示优秀的TNF-α生成抑制作用。
由于已知TNF-α的产生与类风温性关节炎，克罗恩氏病，系统性红斑狼疮等自身免疫疾病，恶液质，急性感染性疾病，变态反应，发热，贫血，糖尿病等的发病密切相关，因此可期待象本发明化合物那样的可抑制其产生的化合物，在这些疾病的治疗中是有用的。
本发明化合物可经口服给药，或非口服给药。作为给药剂型，可列举片剂，胶囊剂，颗粒剂，粉末剂，注射剂等，可使用常规技术进行制剂化。例如，在制备片剂，胶囊剂，颗粒剂，粉末剂等口服给药剂型时，可根据需要加入乳糖，结晶纤维素，淀粉，植物油等填料，硬脂酸镁，滑石等润滑剂，羟丙基纤维素，聚乙烯基吡咯烷酮等粘合剂，羧甲基纤维素钙，低取代的羟丙基甲基纤维素等崩解剂，羟丙基甲基纤维素，聚乙烯醇，硅树脂等包衣剂，明胶薄膜等薄膜形成剂等。
本发明化合物的给药量可根据症状、年龄、剂型等进行适当选择，如果口服给药，通常为每天0.1～5000mg，优选1～1000mg一次或分数次给药。
下面，揭示本发明化合物的制备例，制剂例和药理试验的结果，这些例子用于更好地理解本发明，并不用于限定本发明的范围。参考例1(1S)-1-苄基-2-(二甲基氨基)乙胺(参考化合物1-1) 在氮气氛围下，冰冷却的同时将氢化铝锂(759mg)悬浮于无水乙醚(20ml)中，滴加入(2S)-2-氨基-N1，N1-二甲基-3-苯基丙酰胺(1.92g)的无水四氢呋喃(10ml)溶液。在室温搅拌1.5小时。在冰冷却下，向反应液中慢慢滴加入乙酸乙酯直到不再发泡为止。然后，加入2N氢氧化钠水溶液，用氯仿萃取。有机层用无水硫酸钠干燥后减压浓缩，所得油状物用硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(参考化合物1-1，1.35g)。D20+15.3°(c＝1.0，氯仿)IR(Film，cm-1)3289，2940，2769，1601，1495，1357，1264使用与参考例1同样的方法得到下列化合物。
·(1S)-1-苄基-2-(二甲基氨基)-N-苯乙基乙胺2盐酸盐(参考化合物1-2)[α]D20+4.0°(c＝1.0，甲醇)IR(Film，cm-1)3407，2950，2691，1456，750，701参考例2N-苯乙基-2-(二甲基氨基)乙胺2盐酸盐(参考化合物2-1) 向苯乙基溴(3.00g)的乙醇(54ml)溶液中，加入2-(二甲基氨基)乙胺(2.14g)和碘化钠(7.29g)，搅拌的同时加热回流过夜。将反应液减压浓缩，向残留物中加入水，用氯仿萃取。有机层用饱和食盐水洗净，用无水硫酸镁干燥后，减压浓缩。将所得油状物溶解于氯仿(5ml)中，在冰冷却下，加入4.6N氯化氢乙酸乙酯溶液(8ml)。过滤收集析出物，得到标题化合物(参考化合物2-1，2.23g)，为结晶。
mp 180℃IR(KBr，cm-1)3400，2957，2710，2442，1471，762，702使用与参考例2同样的方法得到下列化合物。
·N-异戊基-2-(二甲基氨基)乙胺(参考化合物2-2)IR(Film，cm-1)3307，2954，2818，1464，753·2-(叔丁氧甲酰胺基)-N-异戊基乙胺(参考化合物2-3)IR(Film，cm-1)3339，2957，1701，1522，1367，1274，1251，1174，755
在氮气氛围下，将1，1，-羰基二咪唑(0.43g)溶解于2-(二甲基氨基)乙胺(0.19g)的无水四氢呋喃(11ml)溶液中，在室温搅拌20分钟。向反应液中加入N-(2-羟基乙基)-2-环己基乙胺盐酸盐(0.50g)，加热回流3小时。在冰冷却下，向反应液中加入氯仿，用饱和碳酸氢钠水溶液，饱和食盐水洗净，用无水硫酸镁干燥后减压浓缩。所得油状物用硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(化合物1-1，0.68g)。
IR(Film，cm-1)3354，2922，2851，1628，1538，1448，1405，1374，1268，1054使用与实施例1同样的方法得到下列化合物。
·1-(2-环己基乙基)-3-[3-(二甲基氨基)丙基]-1-(2-羟基乙基)脲(化合物1-2)IR(Film，cm-1)3339，2923，2851，1626，1536，1448，1406，1372，1266，1171，1053·1-[(1S)-1-苄基-2-(二甲基氨基)乙基]-3-(2-羟基乙基)-3-苯乙基脲(化合物1-3)IR(Film，cm-1)3117，2939，1623，1534，1496，1454，1407，1326，1257，1063·1-(2-环己基乙基)-1-(2-羟基乙基)-3-[3-[(N-甲基)苯基氨基]丙基]脲(化合物1-4)IR(Film，cm-1)3323，2922，2850，1621，1600，1541，1507，1448，1407，1372，1270，1229，1197，1132，1054，748
·1-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-(2-羟基乙基)-3-异戊基脲(化合物1-5)IR(Film，cm-1)3353，2954，1632，1537，1467，1406，1367，1236，1056，756·1-(2-环己基乙基)-1-(2-羟基乙基)-3-[2，2-二甲基-3-(二甲基氨基)丙基]脲(化合物1-6)IR(Film，cm-1)3178，2923，2852，2777，1624，1533，1451，1257，1064，843，745D20-10.7°(c＝1.0，氯仿)IR(Film，cm-1)2944，1647，1496，1453，1253，1027，746，699使用与实施例2同样的方法得到下列化合物。
·1-[(1S)-1-苄基-2-(苄氧基)乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-异戊基脲(化合物2-2)[α]D20-8.5°(c＝0.57，氯仿)IR(Film，cm-1)3357，3222，2952，1647，1496，1454，1252，747，700·1-[(1S)-1-苄基-2-(苄氧基)乙基]-3-[(1S)-1-苄基-2-(二甲基氨基)乙基]-3-苯乙基脲(化合物2-3)[α]D20-40.1°(c＝1.0，氯仿)IR(Film，cm-1)3458，3026，2937，2858，1646，1496，1454，746，700·1-[(1S)-1-苄基-2-(苄氧基)乙基]-3-[2-(叔丁氧甲酰胺基)乙基]-3-异戊基脲(化合物2-4)[α]D20-17.4°(c＝0.66，氯仿)IR(Film，cm-1)3324，2956，2868，1688，1631，1516，1366，1283，1251，1171，764，699实施例31-[(1S)-1-苄基-2-羟基乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-苯乙基脲(化合物3-1) 在氮气氛围下，向1-[(1S)-1-苄基-2-(苄氧基)乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-苯乙基脲(化合物2-1，414mg)的乙醇(4.5ml)溶液中，加入20％氢氧化钯炭(100mg)。在氢气氛围下，搅拌3天。用硅藻土过滤除去氢氧化钯炭，将滤液减压浓缩，得到标题化合物(化合物3-1，299mg)。D20-54.6°(c＝1.0，二甲基亚砜)IR(Film，cm-1)3346，2949，1622，1538，750，702使用与实施例3同样的方法得到下列化合物。
·1-[(1S)-1-苄基-2-羟基乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-异戊基脲(化合物3-2)[α]D20-47.6°(c＝0.50，二甲基亚砜)IR(Film，cm-1)3423，2957，1626，1538
·1-[(1S)-1-苄基-2-(二甲基氨基)乙基]-3-[(1S)-1-苄基-2-羟乙基]-1-苯乙基脲(化合物3-3)[α]D20-52.1°(c＝0.52，氯仿)IR(Film，cm-1)3384，3027，2951，1631，1525，1455，751，702·1-[(1S)-1-苄基-2-羟基乙基]-3-[2-(叔丁氧甲酰胺基)乙基]-3-异戊基脲(化合物3-4)[α]D20-26.8°(c＝0.95，氯仿)IR(Film，cm-1)3328，2956，1687，1627，1524，1367，1283，1251，1171，756，701
在氮气氛围下，向4-联苯基-L-丙氨酸苄基酯盐酸盐(270mg)的无水四氢呋喃(2ml)悬浮液中加入咪唑(50mg)和1，1’-羰基二咪唑(155mg)，在室温搅拌10分钟。然后，加入N-异戊基-2-(二甲基氨基)乙胺(参考化合物2-2，589mg)的无水四氢呋喃(3ml)溶液，加热回流1.5小时。在冰冷却下，向反应液中加入氯仿，用饱和碳酸氢钠水溶液，饱和食盐水洗净，用无水硫酸钠干燥后减压浓缩。所得油状物用硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(化合物4-1，402mg)。D20-8.7°(c＝0.49，氯仿)IR(Film，cm-1)2953，1741，1650，1519，1487，1466，1252，758，698使用与实施例同样的方法得到下列化合物。
·1-[(1S)-1-(苄氧羰基)-2-(4-联苯基)乙基]-3-[2-(叔丁氧甲酰胺基)乙基]-3-异戊基脲(化合物4-2)[α]D20-18.8°(c＝0.97，氯仿)IR(Film，cm-1)3324，2957，1740，1684，1637，1518，1454，1172，756D20-37.9°(c＝0.20，氯仿)IR(Film，cm-1)3358，2953，1628，1521，1487，1467，762，698使用与实施例5同样的方法得到下列化合物。
·1-[(1S)-1-(4-联苯基)甲基]-2-羟基乙基]-3-[2-(叔丁氧甲酰胺基)乙基]-3-异戊基脲(化合物5-2)[α]D20-35.1°(c＝0.48，氯仿)IR(Film，cm-1)3329，2956，1687，1627，1520，1366，1250，1170，761实施例61-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-环己基乙基)-3-[2-(二甲基氨基)乙基]脲(化合物6-1) 在氮气氛围下，将1-(2-环己基乙基)-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-1-(2-羟基乙基)脲(化合物1-1，0.57g)和三苯基膦(1.04g)溶解于无水四氢呋喃(10ml)中，在氯化钠-冰冷却下搅拌30分钟。保持液温50℃以下的同时滴加入偶氮二羧酸二异丙基酯(0.78ml)，然后滴加入硫代乙酸(0.30g)的无水四氢呋喃(1ml)溶液。搅拌1小时后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(40ml)，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗净，用无水硫酸镁干燥后减压浓缩。所得油状物用硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(化合物6-1，0.43g)。
IR(Film，cm-1)3367，2924，2852，2771，1692，1633，1533，1449，1406，1356，1294，1187，1137使用与实施例6同样的方法得到下列化合物。
·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-环己基乙基)-3-[3-(二甲基氨基)丙基]脲(化合物6-2)IR(Film，cm-1)3352，2923，2851，2816，1692，1632，1534，1448，1405，1356，1294，1217，1135·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-3-[(1S)-1-苄基-2-(二甲基氨基)乙基]-1-苯乙基脲(化合物6-3)[α]D20-26.2°(c＝1.0，甲醇)IR(Film，cm-1)3392，2940，1682，1644，1531，1497，1454，1138，750，701·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-环己基乙基)-3-[3-[(N-甲基)苯基氨基]丙基]脲(化合物6-4)IR(Film，cm-1)3348，2922，2850，1690，1630，1599，1506，1291，1217，1135·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-异戊基-3-[2-(二甲基氨基)乙基]脲(化合物6-5)IR(Film，cm-1)3367，2954，2361，1690，1632，1532，1360，1296，1235，1136，950，766·1-[2-(乙酰基硫)乙基]-1-(2-环己基乙基)-3-[2，2-二甲基-3-(二甲基氨基)丙基]脲(化合物6-6)
IR(Film，cm-1)3305，2923，2852，2776，1693，1641，1524，1450，1355，1293，1218，1136，1040，950，844，753·1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-苄基乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-苯乙基脲(化合物6-7)[α]D20+15.9°(c＝1.0，氯仿)IR(Film，c m-1)3350，2943，1691，1648，1602，1253，1136，701·1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-苄基乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-异戊基脲(化合物6-8)[α]D20+22.4°(c＝0.44，氯仿)IR(Film，cm-1)3351，2953，1694，1651，1524，701·1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-苄基乙基]-3-[(1S)-1-苄基-2-(二甲基氨基)乙基]-3-苯乙基脲(化合物6-9)[α]D20-32.0°(c＝0.55，氯仿)IR(Film，cm-1)3416，2937，1690，1644，1496，749，700·1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-苄基乙基]-3-[2-(叔丁氧甲酰胺基)乙基]-3-异戊基脲(化合物6-10)D20+7.0°(c＝0.52，氯仿)IR(Film，cm-1)3316，2957，1690，1632，1528，1252，701·1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-[(4-联苯基)甲基]乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-异戊基脲(化合物6-11)[α]D20+15.9°(c＝0.47，氯仿)IR(Film，cm-1)2953，1693，1651，1519，1250，1136，762·1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-[(4-联苯基)甲基]乙基]-3-[2-(叔丁氧甲酰胺基)乙基]-3-异戊基脲(化合物6-12)[α]D20+6.0°(c＝0.49，氯仿)IR(Film，cm-1)3316，2956，1686，1632，15201366，761
向1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-苄基乙基]-3-[2-(叔丁氧甲酰胺基)乙基]-3-异戊基脲(化合物6-10，169mg)的四氢呋喃(4ml)溶液中，加入28％氨水(10ml)和少量碘结晶，在室温搅拌过夜。向反应液中加入乙醚萃取。有机层用10％硫代硫酸钠水溶液，水和饱和食盐水洗净，用无水硫酸钠干燥后减压浓缩。所得油状物用硅胶柱层析纯化，得到标题化合物(化合物7-1，70mg)。D20+30.7°(c＝0.14，氯仿)IR(Film，cm-1)3316，2956，1684，1629，1532，1454，1366，1171，752使用与实施例7同样的方法得到下列化合物。
·双[(2S)-2-[3-[2-(叔丁氧甲酰胺基)乙基]-3-异戊基脲基]-3-(4-联苯基)丙烷]二硫化物(化合物7-2)[α]D20+12.8°(c＝0.26，氯仿)IR(Film，cm-1)3321，2957，1684，1630，1520，1366，1250，1170，760
在氮气氛围下，向双[(2S)-2-[3-[2-(叔丁氧甲酰胺基)乙基]-3-异戊基脲基]-3-苯基丙烷]二硫化物(化合物7-1，53mg)的氯仿(0.6ml)溶液中，加入4.6N氯化氢乙酸乙酯溶液(0.3ml)。在室温搅拌24小时后，减压浓缩。向残留物中加入异丙基醚，过滤收集析出物，得到标题化合物(化合物8-1，21mg)，为结晶。
mp 100℃(分解)IR(KBr，cm-1)3326，2956，1619，1535，748，701使用与实施例8同样的方法得到下列化合物。
·双[(2S)-2-[3-(2-氨基乙基)-3-异戊基脲基]-3-(4-联苯基)丙烷]二硫化物2盐酸盐(化合物8-2)mp 132.0～136.0℃IR(KBr，cm-1)2956，1617，1531，762，699[制剂例]下面列出本发明化合物的口服制剂和注射剂的一般制剂例。
1)片剂处方1 100mg中本发明化合物 1mg乳糖 66.4mg玉米淀粉 20mg羧甲基纤维素钙 6mg羟丙基纤维素 4mg硬脂酸镁 0.6mg
对于上述处方的片剂使用2mg包衣剂(例如，羟丙基甲基纤维素，聚乙烯醇或硅树脂等常用包衣剂)进行包衣，得到所需的包衣片剂(以下处方的片剂也一样)。另外，可通过适当改变本发明化合物和添加物的量，得到所需的片剂。
2)胶囊剂处方1 150mg中本发明化合物 5mg乳糖 145mg通过适当改变本发明化合物和乳糖的混合比，可得到所需胶囊剂。
3)注射剂处方1 10ml中本发明化合物 10～100mg氯化钠 90mg氢氧化钠(或盐酸) 适量灭菌纯化水 适量通过适当改变本发明化合物和添加物的混合比，可得到所需的注射剂。[药理试验]按照McGeehan等的方法(Nature，370，558-561(1994))，对于脂多糖(LPS)刺激引起的TNF-α生成的抑制效果以如下所示体外试验进行研究。
该试验是测定LPS刺激引起的从人单核细胞系THP-1产生的TNF-α的量。
培养基使用含有胎牛血清(10％)，L-谷酰胺(2mM)，2-巯基乙醇(50μM)，青霉素(50单位/ml)和链霉素(50μg/ml)的RPMI1640培养基。
将在上述培养基中培养的人单核细胞系THP-1细胞在100×g离心5分钟除去上清液后，再悬浮于培养基中使用。LPS使用S.Typhimurium产生的物质，将其溶解于纯化水中，用培养基稀释使用。将被测化合物溶解于二甲基亚砜(DMSO)后，用培养基稀释使用。
将如上所述配制的细胞(106个/ml)，LPS(2μg/ml)和被测化合物(10-5M)混合，在37℃保温培养2小时后，在1000×g离心5分钟分离。使用人TNF-α特异性ELISA试剂盒测定培养上清液中的TNF-α水平。另外，没有LPS时(对照组)，确认在培养上清液中没有TNF-α的产生。
被测化合物的TNF-α生成抑制率，用下式求出。
抑制率(％)＝100×(A-B)/AA没有被测化合物时，培养上清液中的TNF-α水平B被测化合物存在时，培养上清液中的TNF-α水平(结果)作为试验结果的例子，在10-5M浓度时TNF-α的抑制率(％)显示于表1。
如表1所示，可确认本发明化合物在低浓度对TNF-α的产生有抑制作用。
从以上可知，本发明化合物具有优秀的TNF-α生成抑制作用，因此作为与TNF-α相关疾病例如类风温性关节炎，克罗恩氏病，系统性红斑狼疮等自身免疫疾病，恶液质，急性感染性疾病，变态反应，发热，贫血，糖尿病等的治疗剂，具有广泛的医药用途。
权利要求
1.下述通式I所示的N-取代的-N’-取代的脲衍生物及其药学上可接受的盐， 式中，R1表示氢原子，低级烷基，芳基，或式II所示的基团， R2表示氢原子，低级烷基，环烷基，芳基，羧基或酯基，或与R1一起形成环，R3和R4可相同或不同，表示氢原子，低级烷基，环烷基烷基，芳烷基，环烷基或芳基，R5表示氢原子，低级烷基，羟基，低级烷氧基或芳基，R6和R7可相同或不同，表示氢原子，低级烷基，环烷基烷基，环烷基或芳基，A1和A2可相同或不同，表示低级亚烷基，条件是，R6和R7都是甲基时，R1和R3和R4不同时为氢原子，且R3是异丙基，R6和R7都是甲基时，R1不是芳基或呋喃甲基。
2.权利要求1中记载的脲衍生物及其药学上可接受的盐，通式I中，R1表示氢原子，低级烷基，或式II所示的基团，R2表示氢原子或芳基，R3和R4可相同或不同，表示氢原子，低级烷基，环烷基烷基或芳烷基，R5表示氢原子，低级烷基，羟基，或芳基，R6和R7可相同或不同，表示氢原子，低级烷基或芳基，A1和A2可相同或不同，表示碳原子数2～4的低级亚烷基。
3.权利要求2中记载的脲衍生物及其药学上可接受的盐，通式I中，R6表示氢原子或低级烷基，R7表示氢原子，低级烷基或芳基，A1是碳原子数2或3的亚烷基，A2表示碳原子数2～4的低级亚烷基。
4.权利要求1～3任一项中记载的脲衍生物及其药学上可接受的盐，通式I中，R3为氢原子，环烷基烷基或芳烷基，R4表示氢原子，低级烷基或芳烷基，R3和R4任意一方是氢原子。
5.权利要求1～4任一项中记载的脲衍生物及其药学上可接受的盐，通式I中，R5表示氢原子，低级烷基或芳基。
6.权利要求1～5任一项中记载的脲衍生物及其药学上可接受的盐，通式I中，R1是氢原子时，用低级烷基羰基保护。
7.选自下列的化合物及其药学上可接受的盐1-[2-(乙酰基硫)乙基]-3-[(1S)-1-苄基-2-(二甲基氨基)乙基]-1-苯乙基脲，1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-苄基乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-异戊基脲，1-[(1S)-2-(乙酰基硫)-1-[(4-联苯基)甲基]乙基]-3-[2-(二甲基氨基)乙基]-3-异戊基脲，双[(2S)-2-[3-(2-氨基乙基)-3-异戊基脲基]-3-苯基丙烷]二硫化物，双[(2S)-2-[3-(2-氨基乙基)-3-异戊基脲基]-3-(4-联苯基)丙烷]二硫化物。
8.下述通式III所示N-取代的-N’-取代的脲衍生物及其药学上可接受的盐， 式中，R2，R3，R4，R5，R6，R7，A1和A2与权利要求1中定义相同。
9.含有权利要求1～7任一项中记载的N-取代的-N’-取代的脲衍生物或其药学上可接受的盐的药物组合物。
10.含有权利要求1～7任一项中记载的N-取代的-N’-取代的脲衍生物或其药学上可接受的盐的TNF-α生成抑制剂。
11.含有权利要求1～7任一项中记载的N-取代的-N’-取代的脲衍生物或其药学上可接受的盐的自身免疫疾病治疗剂。
全文摘要
本发明提供了下式所示的N－取代的－N’－取代的脲衍生物,其类似物或它们的药学上可接受的盐。该化合物具有TNF－α生成抑制活性。
文档编号A61K31/17GK1348443SQ00806672
公开日2002年5月8日 申请日期2000年4月7日 优先权日1999年4月7日
发明者三田四郎, 堀内正人, 伴正和, 须原宽 申请人:参天制药株式会社