专利名称：制备含有新的甾酯类化合物的药物组合物的方法
技术领域：
本发明涉及新的、具有消炎和抗过敏活性的化合物、其制备方法、含有这些化合物的药物组合物和所述化合物和组合物的药理学应用方法。
本发明的目的是提供具有消炎、免疫抑制和抗过敏活性的糖皮质甾类，或其药物组合物，所述糖皮质甾类或其药物组合物在给药部位(如呼吸道内、皮肤上、直肠内、关节内或眼内)具有很高的活性，在将其直接给于既定的目标区域时，由此而造成的糖皮质激素全身反应很低。
本发明的另一目的是为了改善药物释放和最大限度地降低治疗副作用，提供了含有脂质体的药物组合物，该脂质体包覆着本发明的具有药理活性的甾族脂肪酸酯。
糖皮质甾类(GCS)是用于缓解气喘和鼻炎的有价值的药物。一般认为GCS在呼吸道和肺组织内通过消炎和抗过敏作用而发挥其疗效。但由于它们在肺外会引起严重的副作用，这就大大限制了GCS的长期口服应用。因此，一般只有极少数患者能够耐受口服GCS治疗。采用吸入法给予GCS较为安全。但是目前临床上广泛使用的有效的吸入GCS(氯地米松17α，21-二丙酸酯和丁地去炎松)安全范围相当窄，据报道，采用推荐吸入剂量的上限服用上述两个药物，会在全身循环体系内引起不希望的GCS作用。
脂质体是由与亲水性腔隙交替的同心双分子脂质层列组成的膜样囊泡。为改善药物释放并最大限度地降低治疗的副反应，已将脂质体用作不同种类的药物活性化合物的载体。
糖皮质甾类通常只能以很低的浓度掺入脂质体，并且在囊泡中的滞留时间很短。将GCS的21位用脂肪酸酯化，可以增加该甾类在囊泡中的掺入程度和滞留时间。已经证实该脂肪酸链起着疏水性“固定器(anchor)”的作用，该“固定器”将甾核束缚在磷脂的水合极性头部基团中，由此改善了糖皮质甾类和脂质体之间的相互作用。
已有文献(M.De Silva等人，Lancet 8130，1320(1979))描述了用于治疗的脂质体包覆的糖皮质甾类，美国专利说明书4693999号描述了用于吸入的糖皮质甾类的脂质体制剂。
本发明的目的之一是提供新的GCS化合物。所述新化合物的特征是在用药部位具有消炎、免疫抑制和抗过敏的效力，特别是它们可以明显地改善该效力与在治疗区域外诱发GCS作用的能力之间的关系。当希望的用药部位是在呼吸道内时，吸入法是所述新化合物的优选给药方式。
本发明的另一目的是提供一种具有消炎和抗过敏作用的、用于局部给药(例如，呼吸道)的、含有甾族酯脂质体的药物组合物。这种组合物通过延长甾族酯在呼吸道的滞留时间、并使药物定向地作用于特定的靶细胞来改进甾族酯的治疗性质。
本发明化合物可用下式I或其立体异构体来表征
式中，1，2-位之间为饱和的或者是双键，R1是氢或含有1-4个碳原子的直链或支链烃链，R2是氢或含有1-10个碳原子的直链或支链烃链，
R3是含有4-20个碳原子、直链或支链、饱和或不饱和的烃链的酰基，X1和X2中至少一个是氟，而另一个是氢或氟，其前提是1)R1和R2不能同时为氢，2)当1，2-位是双键时，R1和R2不能同时为甲基，3)当1，2-位是双键、R1是氢原子而R2是含有1-10个碳原子的直链或支链烃链时，R3是含有11-20个碳原子的酰基。
所述酰基可以衍生于C3H7COOH丁酸；C4H9COOH戊酸；C5H11COOH己酸；C6H13COOH庚酸；C7H15COOH辛酸；C8H17COOH壬酸；C9H19COOH癸酸；C10H21COOH十一酸；C11H23COOH十二酸；C12H25COOH十三酸；C13H27COOH十四酸；C14H29COOH十五酸；C15H31COOH十六酸；C16H33COOH十七酸；C17H35COOH十八酸；C17H33COOH油酸；C17H31COOH亚油酸；C17H29COOH亚麻酸；C18H37COOH十九酸；
C19H39COOH二十酸。优选的酰基衍生于C11H23COOH十二酸；C13H27COOH十四酸；C15H31COOH十六酸；C17H35COOH十八酸；C17H33COOH油酸；C17H31COOH亚油酸；C17H29COOH亚麻酸。特别优选的是十六酸。
含有1-4个碳原子的直链或支链烃链优选含有1-4个碳原子的烷基，特别是甲基。
含有1-10个碳原子的直链或支链烃链优选含有1-10个碳原子，更优选是1-4个碳原子的烷基，特别优选的是甲基或丙基。
本发明的优选化合物是下式I化合物，其中1，2-位是饱和的。
本发明的特别优选的化合物是下述式I化合物，其中1，2-位是饱和的，R1是氢原子，R2是丙基，R3是含有11-20个碳原子的酰基，X1是氟，X2是氟。
本发明更加优选的化合物是下述式I化合物，其中1，2-位是双键，R1是氢原子，R2是丙基，R3是十六酰基，X1是氟，
X2是氟。
最优选的本发明化合物具有下述结构式
本发明的优选实施方案是含有与脂质体结合的本发明优选化合物的组合物。
如果本发明的目的是提供含有脂质体的药物组合物，那么，该组合物的活性化合物应该是式中R3是含有11-20个碳原子的酰基的式I化合物。
如果本发明的目的是提供不含脂质体的药物组合物，那么，该组合物的活性化合物应该是式中R3是含有1-10个碳原子、优选5-10个碳原子的酰基的式I化合物。
根据其22位碳原子的手性，并根据R2取代基的取向，可以按下述方法描述存在于前述式(I)甾类化合物混合物中的各个立体异构体
(差向异构体22S)
(差向异构体22R)优选的立体异构体具有22R构型。
采用任何一种下述可供选择的方法，可制得下式甾族酯
式中St是
X1、X2、R1、R2的定义如前文所述，R4是含有3-19个碳原子的直链或支链、饱和或不饱和的烷基，1，2-位是饱和的或者是双键。A.由式St-OH化合物(式中St的定义如前文所述)与下式化合物反应
式中，R4的定义如前文所述。
采用已知的方法可以将21-羟基化合物酯化，例如，最好是在三氟乙酐存在下，并且优选在酸催化剂例如对甲苯磺酸的存在下，使母体21-羟基甾族化合物与适宜的羧酸反应。
该反应最好在有机溶剂(如苯或二氯甲烷)中进行；在20-100℃下可方便地进行该反应。B.式St-OH化合物(式中St的定义如前文所述)与下述化合物反应
式中R4如前文所限定，X是卤原子(如氯、溴、碘和氟)或下式基团
式中R4如前文所限定。
优选在溶剂，例如在卤代烃(如二氯甲烷)或醚(如二噁烷)中，在碱(如三乙胺或吡啶)存在下，优选在低温(如-5℃至+30℃)下，用适宜的羧酸酰卤或酸酐处理母体21-羟基化合物。C.式St-Y化合物与下式化合物反应
式中R4的定义如前文所述，A是阳离子，在式St-Y中，St的定义如前文所述，Y选自卤素(如，Cl、Br和I)或选自甲磺酸酯基或对甲苯磺酸酯基。
适宜羧酸的碱金属盐(如锂盐、钠盐或钾盐)或三乙基铵盐或三丁基铵盐可以与适宜的式St-Y烷化剂反应。该反应优选在极性溶剂(如丙酮、甲乙酮、二甲基甲酰胺或二甲亚砜)中进行，其反应温度一般为25-100℃。
在方法A-C中的任一方法中，如果要求得到纯的差向异构体，那么用于将差向异构混合物拆分成各异构体的最后一步反应都是必要的。
根据炎症部位不同，可以通过各种局部给药的方式使用本发明化合物，例如，经皮肤给药、非胃肠道给药，或者通过吸入法在呼吸道内局部给药。配方设计的主要目的是使活性甾体成份达到最佳生物利用度。就用于经皮给药的配方而言，如果所述甾体以高热力学活性溶解在载体中，那么它就利于达到上述目的。采用适宜的溶剂体系即可达到这一效果。所述溶剂体系包括适宜的二醇，例如，丙二醇或1，3-丁二醇，这些二醇既可直接使用，也可以与水混合使用。
借助于表面活性剂作为加溶剂，也可能使甾体完全或部分溶解在亲脂相中。经皮给药的组合物可以是软膏、水包油霜剂、油包水霜剂或洗液。在乳剂载体中，包括被溶解活性成份的体系可以形成分散相或连续相。甾体也可以以微粉化的固体物质的形式存在于上述组合物中。
甾体的加压气雾剂是用于经口腔吸入或鼻吸入给药的剂型。该气雾剂体系的设计方法使得每一释放剂量含有10-1000μg，优选20-250μg活性甾体。活性最高的甾体的给药剂量应在上述剂量范围中的较低剂量。微粉化甾体由基本上小于5μm的颗粒组成，这些颗粒借助于分散剂悬浮于抛射剂混合物中，所述分散剂的例子有脱水山梨醇三油酸酯，油酸，卵磷脂或二辛基磺基琥珀酸钠盐。
也可借助于干粉吸入器服用甾体。
一种可行的方法是将微粉化的甾体与诸如乳糖或葡萄糖之类的载体物质混合。将该粉末混合物分装于硬明胶胶囊中，每粒中含有所期剂量的甾体。然后将该胶囊放入粉末吸入器中，该药剂通过吸入送入患者的呼吸道。
另一种可行的方法是将微粉化粉末加工成在服药期间会破裂的小球体。将该球化后的粉末装入多剂吸入器(如Turbuhaler)中的储药器中。将计量表调至所期剂量，然后使患者吸入。采用这一系统，将含或不含载体物质的甾体给予患者。
也可以将甾体加入设计用来治疗肠炎类疾病(或口服或直肠给药)的配方中。用于口服的配方组成应使甾体到达肠道的发炎部位。将肠内释放和/或缓释或控制释放的原理做不同的组合，即可达到这一目的。就直肠给药而言，灌肠型配方是适用的。
脂质体组合物的制备用于本发明的卵磷脂含有不同长度的脂肪酸链，因此具有不同的转相温度。所采用的卵磷脂的实例是得自鸡蛋和大豆的卵磷脂以及像二肉豆蔻酰基卵磷脂(DMPC)、二棕榈酰基卵磷脂(DPPC)和二硬脂酰基卵磷脂(DSPC)之类的合成卵磷脂。通过控制卵磷脂的结构，就可以制得具有不同生物降解性质的稳定载体。这样就能够延长包覆甾族酯的释放。
甾族酯与例如二棕榈酰基卵磷脂(DPPC)载体的相互作用程度取决于该酯的链长，据观察随着链长的增加，相互作用程度也增加。
由于胆甾醇或胆甾醇衍生物具有增加脂质体稳定性的作用，因此，在脂质体配方中掺入胆甾醇或胆甾醇衍生物已极为普遍。
制备本发明所述脂质体的前几步操作可按文献中所述方法方便地进行，即，将各成份溶解在溶剂(如乙醇或氯仿)中，然后蒸除溶剂。继之将所得脂质层分散在所选择的含水介质中，然后振荡或超声处理该溶液。本发明的脂质值直径优选在0.1和10μm之间。
除了形成脂质体的主要成份脂质(通常为磷脂)外，还可以加入占总脂质0-40％(W/W的其他脂质(如胆甾醇或胆甾醇硬脂酸酯)，借以改善脂质体膜的结构。为了使脂质体的摄取达到最佳，还可掺入提供负电荷的第三种组份(例如，二棕榈酰基磷脂酰甘油)或提供正电荷的第三种组份(例如，硬脂胺乙酸盐或氯化十八烷基吡啶鎓)。
根据所采用的脂质和条件，可采用各种不同比例的甾族酯和脂质。可以在乳糖存在下将脂质体干燥(冷冻干燥或喷雾干燥)，而且在最终组合物中乳糖含量可为0-95％。
特别优选的本发明组合物含有脂质体和(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。给药方式包括粉末气雾剂法、灌注、喷雾法和加压气雾剂法。
下文非限定性实施例进一步说明本发明。在实施例中，制备层析操作所采用的流速为2.5ml/cm2·h-1。所有实施例中的分子量采用化学电离质谱法(CH4为试剂气体)测定，用LeitzWetzlar热载台显微镜测定熔点。除特别指明外，用μBondapak C18柱(300×3.9mm i.d.)、以1.0ml/分的流速、以乙醇/水(其比例在40∶60和60∶40之间)作为流动相进行HPLC(高效液相色谱)分析。
实施例1(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将十六烷酰氯(1.2g)在10rml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-酮(200mg)在25ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌16小时。加入二氯甲烷(150ml)，依次用1M的盐酸、5％碳酸钾水溶液和水洗涤该溶液，干燥。蒸发后，将粗产物在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上层析纯化，用氯仿作为流动相。收集级份210-225ml，蒸发后得到203mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝87-90℃；分子量为706(计算值707.0)，纯度为96％(HPLC分析)。
实施例2(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(50mg)和十六酰氯(35mg)溶解在10ml二氯甲烷中，滴加三乙胺(13mg)在2ml二氯甲烷中的溶液。将该反应混合物在室温下搅拌2小时。再加50ml二氯甲烷，按照实施例1对该反应混合物进行后处理。在Sephadex LH-20柱(85×2.5cm)上将粗产物纯化，采用氯仿作为流动相，收集级份210-250ml，蒸发后得到34mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量为706(计算值为707.0)，纯度为95％(HPLC分析)。
实施例3(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将十六烷酰氯(0.4ml)在10ml二噁烷中的溶液滴加到(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(70mg)在25ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌16小时，按实施例1进行后处理。在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上将粗产物纯化，采用氯仿作为流动相。收集级份225-265ml，蒸发后得到92mg(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，为油状物。分子量为706(计算值为707.0)。纯度为97％(HPLC分析)。
实施例4(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十四烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将十四烷酸(7.0g)和亚硫酰氯(9ml)在三氯乙烯(100ml)中回流3小时，合成了十四烷酰氯。然后蒸掉溶剂。
将十四烷酰氯(32mg)加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(51mg)在10ml二氯甲烷中的溶液中，然后加入溶解在二氯甲烷(5ml)中的三乙胺(13mg)。将该反应混合物在室温下搅拌4小时。补加二氯甲烷，依次用0.1M盐酸和水(3×50ml)洗涤该混合物，经干燥、蒸发后，将残留物在MerckKieselgel60上进地层析纯化，用庚烷∶丙酮(6∶4)作为流动相，得到27mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十四烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量678(计算值678.9)。纯度96.8％(HPLC分析)。
实施例5(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将十二烷酰氯(28ml)加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(51mg)在5ml二氯甲烷中的溶液中，然后加入溶解在2ml二氯甲烷中的三乙胺(13mg)。将该反应混合物在室温下搅拌3小时，补加二氯甲烷，依次用0.1M盐酸和水(3×30ml)洗涤有机相。经干燥、蒸发后，在Merck Kieselgel 60上将残留物层析纯化，采用己烷∶丙酮(6∶4)作为流动相。所得产物进行第二次层析纯化，用石油醚∶乙酸乙酯(3∶2)作为流动相，得到33mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量650(计算值650.8)。纯度96.9％(HPLC分析)。
实施例6(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮将十六烷酰氯(2.3ml)在15ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(700mg)在30ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理，在Sephadex LH-20柱(76×6.3cm)上将粗产物纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份1020-1350ml，蒸发后得到752mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝141-145℃；[α]D25＝+71.6°(c＝0.204；CH2Cl2)；分子量704(计算值704.9)。纯度97.7％(HPLC分析)。
实施例7(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮将十六烷酰氯(0.5ml)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(150mg)在10ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份215-315ml，蒸发后得到132mg(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝176-180℃；[α]D25＝+47.5°(c＝0.198；CH2Cl2)；分子量704(计算值704.9)。纯度99％(HPLC分析)。
实施例8(22R)-21-乙酰氧基-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮将乙酰氯(38mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(75mg)在5ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌16小时。蒸发后加入二氯甲烷(75ml)，依次用冷的5％碳酸钾水溶液和饱和氯化钠溶液洗涤该溶液。蒸发后，在Sephadex LH-20柱(85×2.5cm)上将粗产物纯化，采用氯仿作为流动相。收集级份365-420ml，蒸发后得到57mg(22R)-21-乙酰氧基-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝182-189℃；[α]D25＝+112.0°(c＝0.225；CH2Cl2)；分子量510(计算值510.6)。纯度99.0％(HPLC分析)。
实施例9
(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-戊酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将戊酰氯(60mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(75mg)在5ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌16小时。蒸发后，加入二氯甲烷(75ml)，依次用冷的5％碳酸钾水溶液和氯化钠溶液洗涤该溶液。蒸发后，粗产物在Sephadex LH-20柱(85×2.5cm)上层析纯化，用氯仿作流动相。收集级份265-325ml，蒸发，得到50mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-戊酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝181-185℃；[α]D25＝+109.4°(c＝0.212；CH2Cl2)；分子量552(计算值552.7)。纯度99.8％(HPLC分析)。
实施例10(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-癸酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮将癸酰氯(0.2ml)在3ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(100mg)在6ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过液，按照实施例1进行后处理。在Sephadex LH-20柱(71×6.3cm)上将粗产物纯化，采用氯仿作为流动相。收集级份1470-1725ml，蒸发后得到113mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-癸酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝182-184℃；[α]D25＝+71.5°(c＝0.186；CH2Cl2)；分子量620(计算值620.9)。纯度97.7％(HPLC分析)。
实施例116α，9α-二氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]孕甾-4-烯-3，20-二酮在室温、常压下，将0.9g氯化三(三苯膦)铑在250ml脱气甲苯中的悬液氢化45分钟。加入1.0g 16α，17α-肤轻松(fluocinolone 16α，17α-acetonide)在100ml无水乙醇中的溶液，然后再氢化40小时。蒸发反应产物，采用闪式硅胶层析法纯化残余物，以丙酮-石油醚作为流动相，借以除去大部分催化剂。将洗脱液蒸发，在Sephadex LH-20柱(72.5×6.3cm)上将残余物进一步纯化，以氯仿作为流动相。收集级份3555-4125ml，蒸发后得到0.61g 6α，9α-二氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝146-151℃。[α]D25＝+124-5°(c＝0.220；CH2Cl2)；分子量454(计算值454.6)。纯度98.5％(HPLC分析)。
实施例126α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将十六烷酰氯(2.1ml)在15ml二噁烷中的溶液滴加到6α，9α-二氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]孕甾-4-烯-3，20-二酮(310mg)在30ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物在Sephadex LH-20柱(76×6.3cm)上纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份1035-1260ml，蒸发后得到158mg6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝82-86℃。[α]D25＝+85.3°(c＝0.232；CH2Cl2)；分子量692(计算值692.9)。纯度98.6％(HPLC分析)。
实施例13(22R)-和(22S)-21-乙酰氧基-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮将(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(68mg)溶解在1ml吡啶中。加入乙酐(1ml)，将该反应混合物在室温下搅拌1小时，倒入冰-水中，用3×25ml二氯甲烷提取。将提取液干燥，蒸发。通过在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上层析。以庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相来拆分残留的22RS-混合物。分别收集级份3 80-400ml(A)和420-440ml(B)，蒸发。
级份A从二氯甲烷-石油醚中沉淀后得到14mg(22S)-21-乙酰氧基-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝179-186℃。[α]D25＝+86.2°(c＝0.188；CH2Cl2)。分子量492(计算值492.6)。纯度97.5％(HPLC分析)。
级份B经沉淀后，得到20mg(22R)-21-乙酰氧基-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝169-172℃。[α]D25＝+139.0°(c＝0.200；CH2Cl2)。分子量492(计算值492.6)。纯度97.9％(HPLC分析)。
实施例14(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-二烯-3，20-二酮将1170mg 6α-氟-11β，16α，17α，21-四羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮在250ml无水乙醇中的溶液加到1.4g氯化三(三苯膦)铑在300ml甲苯中的悬液中。在室温、常压下，将该混合物氢化22小时，蒸发。残留物从丙酮-氯仿沉淀，得到661mg 6α-氟-11β，16α，17α，21-四羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量396(计算值396.5)。纯度96.6％(HPLC分析)。
将6α-氟-11β，16α，17α，21-四羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(308mg)分次加到丁醛(115mg)和70％高氯酸(0.2ml)在50ml二噁烷中的溶液中。将该混合物在室温下搅拌6小时。加入二氯甲烷(200ml)，依次用10％碳酸钾水溶液和水洗涤该溶液，干燥。蒸发后，残余物在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上纯化，用氯仿作流动相。收集级份420-500ml，蒸发，得到248mg(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝85-96℃；[α]D25＝+119.8°(c＝0.192；CH2Cl2)。分子量450(计算值450.6)。纯度96.1％(HPLC分析)。22R-和22S-差向异构体之间的比例是59/41(HPLC分析)。
将十六烷酰氯(0.21ml)在3ml二噁烷中的溶液滴加到(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(50mg)在6ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上将粗产物纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份185-230ml，蒸发，得到42mg(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，为油状物。分子量688(计算值688.97)。纯度99.0％，22R和22S差向异构体之间的比例为15/85(HPLC分析)。
实施例15(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二-酮采用制备HPLC，在μBondapak C18柱(150×19mm)上，以乙醇∶水(40∶60)作流动相，分次拆分(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(225mg)。收集集中于265ml处的级份(A)和310ml处的级份(B)，蒸发。经从二氯甲烷-石油醚中沉淀后，由级份A得到68mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝180-192℃；[α]D25＝+138.9°(c＝0.144；CH2Cl2)；分子量450(计算值450.6)。纯度99.4％(HPLC分析)。
级份B经沉淀后得到62mg(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝168-175℃；[α]D25＝+103.7°(c＝0.216；CH2Cl2)；分子量450(计算值450.6)。纯度99.5％(HPLC分析)。
将十六烷酰氯(0.22ml)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(32mg)在10ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上将粗产物纯化，用氯仿作流动相。收集级份215-250ml，蒸发，得到38mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，为油状物。分子量688(计算值688.97)。纯度96.0％(HPLC分析)。
实施例16(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(68mg)溶解在1ml吡啶中。加入乙酐(1ml)，将该反应混合物在室温下搅拌1小时，倒入冰-水中，用3×25ml二氯甲烷提取。将提取液干燥，蒸发。Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上层析拆分残留的22RS差向异构体混合物，以庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份380-400ml(A)和420-440ml(B)，蒸发。
经从二氯甲烷-石油醚中沉淀后，从级份A得到14mg(22S)-21-乙酰氧基-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝179-186℃；[α]D25＝+86.2°(c＝0.188；CH2Cl2)；分子量492(计算值492.6)。纯度97.5％(HPLC分析)。
经沉淀后，从级份B得到20mg(22R)-21-乙酰氧基-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基孕甾-4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝169-172℃；[α]D25＝+139.0°(c＝0.200；CH2Cl2)；分子量492(计算值492.6)。纯度97.9％(HPLC分析)。
将2ml 2M盐酸加到14mg(22S)-21-乙酰氧基-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基孕甾-4-二烯-3，20-二酮在2ml乙醇中的溶液中。于60℃搅拌5小时后，用饱和碳酸氢钠水溶液中和该反应混合物，用二氯甲烷(3×25ml)提取。合并提取液，用水洗涤，干燥，蒸发。在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上将残留物纯化，以氯仿作为流动相。收集级份455-510ml，蒸发，得到7mg(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-二烯-3，20-二酮。分子量450(计算值450.6)。纯度96.6％。
将十六烷氯(195mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(32mg)在10ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。在Sephadex LH-20柱(89-2.5cm)上将粗产物纯化，以庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份205-245ml，蒸发，得到37mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，为油状物。分子量688(计算值688.97)。纯度96.4％(HPLC分析)。
实施例17(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将十二烷酰氯(0.4ml)在3ml二噁烷中的溶液滴加到(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(50mg)在6ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上将粗产物纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份215-250ml，蒸发，得到15mg(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝125-143℃。[α]D25＝+92.8°(c＝0.208；CH2Cl2)；。分子量632(计算值632.9)。纯度96.2％(HPLC分析)。22R-与22S-差向异构体之间的比例为58/42(HPLC分析)。
实施例18(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮将6α-氟-11β，16α，17α，21-四羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(400mg)分次加到丁醛(0.18ml)和70％高氯酸(0.2ml)在50ml二噁烷中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌16小时。加入二氯甲烷(200ml)，用10％碳酸钾水溶液和水洗涤该溶液，干燥。蒸发后，在Sephadex LH-20柱(75×6.3cm)上纯化得残留物，以氯仿作为流动相。收集级份2880-3300ml，蒸发，得到1209mg(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。分子量448(计算值448.5)。纯度95.7％；22R-和22S-差向异构体之间的比例为55/45(HPLC分析)。
在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上层析(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(36mg)，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份1720-1800ml(A)和1960-2025ml(B)，蒸发。从二氯甲烷-石油醚中沉淀，得到两个产物。1H-NMR和质谱鉴定，来自级份(A)的产物(12mg)为(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮，来自级份(B)的产物(10mg)是22R差向异构体。
所述差向异构体具有下述性质差向异构体22Sm.p.＝172-180℃；[α]D25＝+62.3°(c＝0.132；CH2Cl2)；分子量448(计算值448.5)。差向异构体22Rm.p.＝95-106℃；[α]D25＝+105.9°(c＝0.152；CH2Cl2)；分子量448(计算值448.5)。经HPLC分析测得差向异构体22S的纯度为98.9％；差向异构体22R的纯度为97.7％。
将十六烷酰氯(172mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(56mg)在10ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份225-285ml，蒸发，得到31mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝95-100℃。[α]D25＝+68.0°(c＝0.200；CH2Cl2)；分子量686(计算值686.95)。纯度97.7％(HPLC分析)。
实施例19
(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮将十六烷酰氯(110mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(46mg)在10ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上进行纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份185-225ml，蒸发，得到37mg(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝65-68℃；[α]D25＝+53.0°(c＝0.200；CH2Cl2)；分子量686(计算值686.95)。纯度95.9％(HPLC分析)。
实施例206α-氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]孕甾-4-烯-3，20-二酮在室温、常压下，将2.1g氯化三(三苯膦)铑在500ml甲苯中的悬液氢化45分钟，此时催化剂溶解。加入2.0g 6α-氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮在1000ml无水乙醇中的溶液，再继续氢化65小时。将该反应混合物蒸发，将残留物在Sephadex LH-20柱(71×6.3cm)上进行纯化，用氯仿作为流动相。收集级份2010-2445ml，蒸发，得到1.51g 6α-氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝209-219℃。[α]D25＝+133.5°(c＝0.230；CH2Cl2)；分子量436(计算值436.5)。纯度99.6％(HPLC分析)。
实施例216α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将十六烷酰氯(0.21ml)在3ml二噁烷中的溶液滴加到6α-氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚丁基)二氧基]孕甾-4-烯-3，20-二酮在6ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物在Sephadex LH-20柱(76×6.3cm)上进行纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份1035-1230ml，蒸发，得到63mg 6α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝99-101℃。[α]D25＝+89.8°(c＝0.206；CH2Cl2)；分子量674(计算值674.94)。纯度97.9％(HPLC分析)。
实施例229α-氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]孕甾-4-烯-3，20-二酮在室温、常压下，将675mg氯化三(三苯膦)铑在200ml甲苯中的溶液氢化45分钟。加入1g 16α，17α-丙酮缩去炎松在100ml无水乙醇中的溶液，再继续氢化40小时。将该反应混合物蒸发，通过闪式层析、以丙酮∶石油醚(b.p.40-60℃)(40∶60)作为流动相，除去大部分催化剂。将粗产物在Sephadex LH-20柱(72.5×6.3cm)上进一步纯化，用氯仿作为流动相。收集级份2746-3195ml，蒸发，得到404mg9α-氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝238-41℃；[α]D25＝+145.2°(c＝0.288；CH2Cl2)；分子量436(计算值436.5)。纯度99％(HPLC分析)。
实施例239α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将十六烷酰氯(0.69ml)在10ml二噁烷中的溶液滴加到9α-氟-11β，21-二羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]孕甾-4-烯-3，20-二酮在20ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物用Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)进行纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份240-305ml，蒸发，得到102mg 9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，为油状物。分子量674(计算值674.94)。纯度98％(HPLC分析)。
实施例24(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮将新蒸过的丁醛(100mg)和0.2ml高氯酸(70％)溶解在50ml经过纯化、干燥的二噁烷中，搅拌下，在20分钟内，分小批量加入9α-氟-11β，16α，17α，21-四羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(340mg)。将该反应混合物在室温再搅拌5小时。加入二氯甲烷(200ml)，用碳酸钾水溶液和水洗涤该溶液，用无水硫酸镁干燥，蒸发后，所得粗产物在SephadexLH-20柱(72.5×6.3cm)上进行纯化，用氯仿作为流动相。收集级份2760-3195ml，蒸发，得到215mg(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量450(计算值450.6)。纯度97.4％(HPLC分析)。
将十六烷酰氯(0.13ml)在2.5ml二噁烷中的溶液滴加到(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(40ml)在5ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上进行纯化，用氯仿作流动相。收集级份220-300ml，蒸发，得到(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，为油状物。分子量688(计算值688.97)。22R-和22S差向异构体之间的比例为61/39(HPLC分析)。
实施例25(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮采用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)混合物作为流动相，通过在Sephadex LH-20柱(76×6.3cm)上进行层析，拆分(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(200mg)。收集级份7560-8835ml(A)和8836-9360ml(B)，蒸发。经1H-NMR和质谱鉴定，来自级份A的产物(128mg)是(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮，而来自级份B的产物(50mg)是22R-差向异构体。
各差向异构体的性质如下差向异构体22Sm.p.＝180-190℃；[α]D25＝+105.6°(c＝0.214；CH2Cl2)；分子量450(计算值450.6)。差向异构体22Rm.p.＝147-151℃；[α]D25＝+133.7°(c＝0.196；CH2Cl2)；分子量450(计算值450.6)。经HPLC分析测定22S-差向异构体的纯度为95.6％；22R-差向异构体的纯度为98.2％。
将十六烷酰氯(0.34ml)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(50mg)在10ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上进行纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作流动相。收集级份180-205ml，蒸发，得到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，为油状物。纯度为96.3％(HPLC分析)。分子量688(计算值688.97)。
实施例26(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮)将十六烷酰氯(0.14ml)在15ml二噁烷中的溶液滴加到(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羟基孕甾-4-烯-3，20-二酮(41mg)在3ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上进行纯化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作为流动相。收集级份215-260ml，蒸发，得到26mg(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，为油状物。纯度91.4％(HPLC分析)。分子量688(计算值688.97)。
实施例27(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮将十六烷酰氯(75mg)在2.5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-二羟基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(25mg)在5ml吡啶中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，按实施例1进行后处理。将粗产物在Sephadex LH-20柱(85×2.5cm)上进行纯化，用氯仿作流动相。收集级份235-285ml，蒸发，得到27mg(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝116-121℃；[α]D25＝+67.4°(c＝0.172；CH2Cl2)；分子量686(计算值687.0)。纯度96.5％(HPLC分析)。
下述非限定性实施例说明用于不同局部给药方式的配方。在经皮给药的配方中，活性甾体的用量一般为0.001-0.2％(W/W)，优选0.01-0.1％(W/W)。配方1 软膏微粉化甾体 0.025g液体石蜡10.0g软白蜡 加至100.0g配方2 软膏甾体0.025g丙二醇 5.0g脱水山梨醇倍半油酸酯5.0g液体石蜡10.0g软白蜡 加至100.0g配方3 水包油霜剂甾体0.025g十六醇 5.0g单硬脂酸甘油酯 5.0g液体石蜡 10.0gCe tomacrogol 1000 2.0g柠檬酸 0.1g柠檬酸钠 0.2g丙二醇 35.0g水 加至100.0g配方4水包油霜剂微粉化甾体 0.025g软白蜡 15.0g液体石蜡 5.0g十六醇 5.0gSorbimacrogol stearate 2.0g脱水山梨醇单硬脂酸酯 0.5g山梨酸 0.2g柠檬酸 0.1g柠檬酸钠 0.2g水 加至100g配方5 油包水霜剂甾体 0.025g软白蜡 35.0g液体石蜡 5.0g脱水山梨醇倍半油酸酯 5.0g山梨酸 0.2g柠檬酸 0.1g柠檬酸钠 0.2g水 加至100.0g配方6 洗剂甾体 0.25mg异丙醇 0.5ml羧基乙烯基聚合物 3mgNaOH 适量水 加至1.0g配方7注射用悬浮液微粉化甾体 0.05-10mg羧甲基纤维素钠 7mgNaCl 7mg聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯 0.5mg苯甲醇 8mg无菌水 加至1.0ml配方8 用于口腔和鼻吸入的气雾剂微粉化甾体 0.1％W/W脱水山梨醇三油酸酯 0.7％W/W三氯氟甲烷 24.8％W/W二氯四氟乙烷 24.8％W/W二氯二氟甲烷 49.6％W/W配方9 雾化溶液甾体 7.0mg丙二醇 5.0g水 加至10.0g配方10 用于吸入的粉剂用下述成份的混合物填充明质胶囊微粉化甾体 0.1mg乳糖 20mg借助于吸入装置吸入该粉末配方11 用于吸入的粉剂将球化的粉剂装入多剂粉末吸入器，每剂含有微粉化甾体 0.1mg配方12 用于吸入的粉剂将球化的粉剂装入多剂粉末吸入器，每剂含有微粉化甾体 0.1mg微粉化乳糖 1mg配方13 用于治疗小肠疾患的胶囊剂甾体 1.0mg小糖球 321mgAquacoat ECD 306.6mg乙酰柠檬酸三丁酯 0.5mg吐温-800.1mgEudragit L100-55 17.5mg柠檬酸三乙酯 1.8mg滑石粉 8.8mg消泡剂MMS 0.1mg配方14用于治疗大肠疾患的胶囊剂甾体 2.0mg小糖球 305mgAquocoat ECD 305.0mg乙酰柠檬三丁酯 0.4mg吐温-800.14mgEudragit NE30D 12.6mgEudragit S100 12.6mg滑石粉 0.16mg配方15 直肠灌肠剂甾体 0.02mg羧甲基纤维素钠25mg乙二胺四乙酸二钠 0.5mg对羟基苯甲酸甲酯 0.8mg对羟基苯甲酸丙酯 0.2mg氯化钠7.0mg无水柠檬酸1.8mg吐温-80 0.01mg纯水 加至1.0ml配方16 含有脂质体结合的甾体的配方A.滴注配方的制备在一玻璃管中混合合成的二棕榈酰基卵磷脂(45mg)，二肉豆蔻酰基卵磷脂(7mg)，二棕榈酰基磷脂酰甘油(1mg)和(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮(5mg)。将所有组份溶解在氯仿中。用N2蒸发掉大部分溶剂，然后减压，由此，在玻璃管表面形成脂质薄膜。在该脂质中加入水溶液(0.9％NaCl)。在高于脂质的转相温度下形成脂质体。所得悬液含有大小范围为极小囊泡至2μm的脂质体。
B.吸入用配方的制备按实施例A制备脂质体，其中的水溶液含有10％乳糖。乳糖与脂质之比为7∶3。将该脂质体悬液用干冰冷冻，并且进行冷冻干燥。将干燥产物微粉化，所得颗粒的质均空气动力学直径(MMAD)约为2μm。
药理学采用下述呼吸道模型可以举例说明局部消炎活性的选择性。
吸入后的GCS绝大部分沉积在咽部，吞咽在肠中消失。这一部分GCS由于其作用于预计治疗在区域(肺)之外，因此而引起不希望的甾体副作用。因此，最好是使用口服后在肺部具有高局部消炎作用，但GCS诱发作用低的GCS。为此进行的研究是为了确定在肺部局部给药后以及经口服给药后GCS诱发的作用，并且，按下述方法检验治疗肺区中和该区域之外糖皮质甾醇激素作用之间的差别。
试验模型A)在呼吸道粘膜(左肺叶)上进行的所期局部消炎作用的试验模型用Ephrane使Sprague Dawley大鼠(250g)轻度麻醉，以0.5ml/kg的体积将糖皮质甾类试验制备物(包覆于脂质体中，并悬浮在盐水中)滴注到左肺叶(只滴入左肺叶)。两个小时后，将Sephadex悬液(5mg/kg，体积为1ml/kg)滴入气管叉上方的气管中，这样，使悬液既进入左肺叶也进入右肺叶。20小时后，将大鼠处死，分离出左肺叶，称重。对照组用赋形剂代替糖皮质甾类制备物，用盐水代替Sephadex悬液，以确定非药物处理的Sephadex水肿的重量和正常肺的重量。
B)检测口服吸收糖皮质甾类引起的不希望的体内作用的试验模型用Ephrane使Sprague Dawley大鼠(250g)轻度麻醉，并口服给予GCS试验制备物，用药体积为1.0ml/kg。两小时后将Sephadex悬液(5mg/kg，体积为1ml/kg)滴入气管叉上方的气管中，这样使悬液既进入左肺叶也能进行右肺叶。20小时后，处死大鼠，将肺叶称重。对照组用赋形剂代替糖皮质甾类制备物，用盐水代替Sephadex悬液，借以测定非药物处理的Sephadex水肿和正常重量。
表1列出了比较研究的结果。比较本发明化合物的药理分布和用脂质体包覆的丁地去炎松-21-十六烷酸酯及氟地塞米松-21-十六烷酸酯的药理分布。在肺中局部给药后，所有本发明甾体的局部消炎作用效力都高于脂质体包覆的丁地去炎松-21-十六烷酸酯。此外，这些结果也证实与选用的先有技术化合物相比，本发明受试化合物具有较高的肺选择性，其理由是与局部给药于肺部时抑制肺水肿所需药物剂量相比，口服上述化合物抑制肺水肿所需剂量(ED50)分别高于前者158倍(实施例3)、247(实施例7)和559倍(实施例1)，而口服丁地去炎松-21-十六烷酸酯和氟地塞米松-21-十六烷酸酯的ED50则分别高于前者66倍和8倍。
由此可以得出结论本发明化合物特别适用于皮肤及身体各种腔体(如肺、鼻子、肠和关节)之炎症的局部治疗。
表1脂质体包覆的受试糖皮质甾类对在大鼠体内用Sephadex诱发的肺水肿模型的作用。相对于相应的服用Sephadex的对照组给出结果
x)ED50＝减少水肿50％所需糖皮质甾类的剂量
权利要求
1.制备包含作为活性成分的式I化合物或其立体异构体与可药用的载体的药物组合物的方法，
式中1，2-位是饱和的或者是双键，R1是氢或含有1-4个碳原子的直链或支链烃链，R2是氢或含有1-10个碳原子的直链或支链烃链，R3是含有4-20个碳原子的、直链或支链的、饱和或不饱和的烃链的酰基，X1和X2中至少一个是氟，而另一个为氢或氟，条件是1)R1和R2不同时为氢，2)当1，2-位是双键时，R1和R2不同时是甲基，3)当1，2-位是双键，R1是氢原子和R2是含有1-10个碳原子的直链或支链烃链时，R3是含有11-20个碳原子的酰基，所述方法包括，将所述的活性成分与所述的载体混合。
2.根据权利要求1的方法，其中，在通式I中，1，2-位是饱和的。
3.根据权利要求1或2的方法，其中，R3是含有11-20个碳原子的酰基。
4.根据权利要求3的方法，其中，R3是十六烷酰基。
5.根据权利要求1或2的方法，其中R3是具有4-10个碳原子的酰基。
6.根据权利要求1的方法，其中X1是氢或氟，X2是氟。
7.根据权利要求6的方法，其中X1和X2都是氟。
8.根据权利要求1的方法，其中R1是氢。
9.根据权利要求3的方法，其中1，2-位是饱和的，R1是氢，R2是丙基，X1是氟，X2是氟。
10.根据权利要求1的方法，其中1，2-位是双键，R1是氢，R2是丙基，R3是十六烷酰基，X1是氟，X2是氟。
11.根据权利要求1的方法，其中式I化合物是16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。
12.根据权利要求1的方法，其中式I化合物是(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十四烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮，(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮，(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-戊酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羟基-21-癸酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮，6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮，(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-6α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮，6α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)二氧基]-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22RS)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，(22S)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，或(22R)-16α，17α-亚丁基二氧基-9α-氟-11β-羟基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。
13.根据权利要求1的方法，其中式I化合物具有下式结构
14.根据权利要求1的方法，其中所述的药物组合物被制成含有与脂质体结合的甾体的制剂。
15.根据权利要求1的方法，其中所述的药物组合物被制成适于吸入的形式。
16.根据权利要求15的方法，其中所述的适于吸入的形式是适于口腔或鼻吸入用的加压气雾剂。
17.根据权利要求16的方法，其中适于吸入的形式是适于用干粉吸入器给药的形式。
全文摘要
本发明提供了制备含有通式I化合物或其立体异构体的药物组合物的方法，式I中，各个取代基的定义如说明书中所述。所述的药物组合物用于治疗炎症和过敏症。
文档编号A61P37/08GK1158726SQ96122759
公开日1997年9月10日 申请日期1996年10月22日 优先权日1991年2月4日
发明者B·I·阿克塞尔, R·L·布拉特桑德, L·A·卡尔斯特伦, A·B·塔伦 申请人:阿斯特拉公司