s)
[0046] 13C - NMR (DMSO - d6, 125MHz) δ :61. 24, 108. 13, 110. 82, 112. 45, 112. 74, 136. 65, 13 9. 90, 140. 64, 141. 99, 148. 48, 159. 30.
[0047] 化合物4 :3' -甲氧基鞣花酸-4 - 0 - β - D -吡喃木糖苷C2qH16O12[M - H_] :447. 2
[0048] 1H - NMR (DMSO - d6, 500MHz) δ : 7· 64 (IH)，7· 48 (IH)，4· 15 (3H)，4· 87 (IH)，3· 56 (1H ),3. 50 (IH), 3. 62 (IH), 3. 45 (IH), 4. 01 (IH)
[0049] 13C - NMR (DMSO - d6, 125ΜΗζ) δ ： 116. 60, 138. 40, 150. 72, 113. 49, 103. 19, 161. 68, 1 13. 70, 142. 99, 141. 57, 153. 62, 112. 56, 114. 90, 161. 48, 62. 00, 104. 56, 74. 64, 77. 26, 71. 0 8, 67. 14.
[0050] 实施例2本发明化合物5, 6的提取与表征
[0051] 取诃子药材2kg，粉碎，用20L的95%的乙醇回流提取3次，每次3小时，合并提 取液，40°C减压浓缩，浸膏用正己烷萃取，去除脂类后，使用S印hadex LH - 20进行柱层析， 分别用5 %，15%，25 %，35 %，60%，100 %的乙醇进行梯度洗脱并收集各洗脱组分，将5%， 15%洗脱组分减压浓缩除去溶剂后，分别使用反相C18色谱柱柱层析进行纯化，使用5%， 15%，25%，50,100 %含2%乙酸的甲醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩除去溶剂，可得5， 6两种化合物，用HPLC - ESI - MS及NMR检测，化合物5,6其检测表征数据如下：
[0052] 化合物54 - 0 - (4" - 0 -没食子酰基-a - L -吡喃鼠李糖基）鞣花酸
[0053] C27H20O16[Μ - H"] :599. 0
[0054] 1H - NMR(O)3OD, 500MHz) δ : 5. 637 (IH)，4. 297 (IH)，4. 317 (IH)，5. 250 (1H，），4. 036 (IH), 1. 190 (3Η), 7. 834 (IH), 7. 462 (IH), 7. 095 (2Η)
[0055] 13C-NMR(O)3OD, 100MHz) δ :101.44,71.95,70.21,75.26,69.29, 18.02, 116.25, 13 7. 90, 143. 87, 147. 93, 113. 40, 108. 35, 161. 29, 113. 36, 137. 91，141. 36, 150. 13, 111. 68, 10 9. 66, 161. 18, 121. 34, HO. 19, 146. 49, 139. 90, 168. 10.
[0056] 化合物64 - 0 - (3"，4" - 0 -双没食子酰基--α - L -吡喃鼠李糖基）鞣花酸 C34H24O20JM - H"] :751. 1
[0057] 1H -匪R(CD3OD, 500MHz) δ : 5. 69 (IH)，4. 57 (IH)，5. 66 (IH)，5. 59 (1H，），4. 25 (IH)， 1. 27 (3Η), 7. 89 (IH), 7. 48 (IH), 7. 07 (2Η), 7. 02 (2Η)
[0058] 13C-NMR(O)3OD, 100MHz) δ :101.75,69.79,73.58,72.39,69.47, 18.01，116.64, 13 8. 06, 144. 34, 147. 87, 113. 98, 138. 15, 142. 04, 150. 38, 111. 70, 109. 38, 161. 34, 120. 96, 11 0. 63, 146. 43, 140. 23, 167. 76.
[0059] 实施例3本发明化合物7, 8, 9的提取与表征
[0060] 取乌桕树药材3kg，粉碎，用30L的95%的乙醇回流提取3次，每次3小时，合并提 取液，40°C减压浓缩，浸膏分别用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇进行萃取，将乙酸乙酯萃取部位 减压浓缩出去溶剂后，反复用硅胶柱层析进行分离，使用氯仿-甲醇梯度洗脱（V g^ : =98 : 2-70 :30)，所得部位进重结晶纯化，可得化合物7,8,9。用HPLC - ESI -MS及NMR 检测，化合物7,8,9其检测表征数据如下：
[0061] 化合物 7 :3, 3'，4' -三甲氧基鞣花酸 C17H12OJM - H_] :343. 2
[0062] 1H - NMR(DMS0 - d6, 300MHz) δ :7. 55 (IH)，7. 64 (IH)，4. 05 (3H)，4. 06 (3H，），4. 01 ( 3Η)
[0063] 13C - NMR(DMSO - d6, 75ΜΗζ) δ : 111. 2, 140. 9, 140. 2, 152. 6, 111. 6, 111. 9, 158. 2, 11 2. 4, 141. 6, 140. 8, 153. 7, 107. 5, 113. 4, 158. 5, 60. 9, 61. 3, 56. 6.
[0064] 化合物8:3,3'-二甲氧基鞣花酸-4'-〇-0-〇-吡喃木糖苷（：21!1 18〇12[1-H"] :461. 3
[0065] 1H - NMR(DMS0 - d6, 300MHz) δ : 7· 55 (IH)，7· 76 (IH)，4· 05 (3H)，4· 08 (3H，），5· 17 ( 1Η)
[0066] 13C - NMR (DMSO - d6, 75ΜΗζ) δ : 111. 2, 140. 9, 140. 2, 151. 2, 111. 5, 111. 7, 158. 3, 11 4. 2, 141. 6, 141. 9, 152. 7, 111. 9, 112. 7, 158. 4, 61. 0, 61. 6, 101. 8, 72. 9, 76. 0, 69. 2, 65. 7.
[0067] 化合物9 3, 3' -二甲氧基鞣花酸-4' - 0 - β - D -吡喃葡萄糖苷C22H2Q013[M -H"] :491. I
[0068] 1H - NMR (DMSO - d6, 300MHz) δ : 8· 12 (IH)，8· 54 (IH)，4· 26 (3H) ·
[0069] 13C - NMR(DMSO - d6, 75ΜΗζ) δ : 111. 8, 141. 9, 141. 4, 152. 6, 112. 9, 113. 1，159. 1，14 2. 4, 154. 4, 113. 2, 159. 2, 61. 4, 61. 9, 103. 5, 74. 9, 79. 2, 71. 1, 78. 6, 62. 4.
[0070] 实施例4 :縣花酸类化合物对黄嘌呤氧化酶的体外抑制作用
[0071] 为评价受试化合物对黄嘌呤氧化酶的影响，以100%非布司他为阳性对照组，鞣花 酸、鞣花酸类化合物1 - 9为样品组来考察。
[0072] 本实验研究体外对黄嘌呤氧化酶的影响，具体方法如下：
[0073] 溶液配制：
[0074] 磷酸盐缓冲溶液：称取19. 48g的K2HPO4. 3H20和I. 99g的腿$04溶于500mL蒸馏 水中，配成浓度为0. 2mmol/L的磷酸盐缓冲溶液（pH = 7. 5);
[0075] 黄嘌呤底物溶液：称取黄嘌呤15. 2mg，溶解于250mL蒸馏水中，配成浓度为 0. 4mmol/L的黄嘌呤底物溶液；
[0076] 黄嘌呤氧化酶溶液：取黄嘌呤氧化酶5U，用上述磷酸盐缓冲溶液稀释至160mL，配 成浓度为80U/L的黄嘌呤氧化酶溶液，4°C保存；
[0077] 样品和阳性对照溶液：精密称取样品组、非布司他（作为阳性对照），分别用二甲 亚砜溶解、蒸馏水稀释，配成浓度为〇· 01 ymol/L - 2 ymol/L的不同浓度的溶液进行测试 (其中二甲亚砜的最终浓度小于1%，样品组浓度达不到所需抑制效果时，浓度加倍重新配 置）。
[0078] 抑制作用测试：
[0079] 样品组测试：在2mL离心管中依次加入黄嘌呤底物溶液200 μ L、样品溶液100 μ L 和黄嘌呤氧化酶溶液200 μ L，涡旋震荡5秒后置于25°C水浴锅中反应5分钟，反应完毕后 加入I. 5mL无水乙醇，涡旋震荡5秒终止反应。反应液经3500rpm离心5分钟，吸取200 μ L 到 I. 5mL离心管中，用生化分析仪分别检测每个样品的UA值，每个样品平行操作三次取平 均值。
[0080] 空白对照组测试：在2mL离心管中依次加入黄嘌呤底物溶液200 μ L、磷