1.一种甲基营养型芽孢杆菌菌剂,其特征在于,包括质量份的原料:草炭10~14份、农作物秸秆粉40~56份、矿物质13~20份,以草炭、农作物秸秆粉和矿物质的质量总量计,该甲基营养型芽孢杆菌菌剂还包括250-450mL/kg的甲基营养型芽孢杆菌发酵液。
2.根据权利要求1所述的甲基营养型芽孢杆菌菌剂,其特征在于,所述的甲基营养型芽孢杆菌发酵液含有效活菌数大于或等于5.5×108/ml。
3.根据权利要求1所述的甲基营养型芽孢杆菌菌剂,其特征在于,所述甲基营养型芽孢杆菌发酵液通过以下步骤制备得到:
1.1)将保存在-4℃环境下的甲基营养型芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h;挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,30℃培养24h后的液体即为所需接种液;
1.2)将步骤1.1)中的接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,接菌量为10%,接菌后进行发酵;初始pH值6.9-7.1、温度28-35℃、转速180-220r/min;
1.3)当种子罐发酵9-10小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,控制条件同种子罐,培养28-30小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,即得甲基营养型芽孢杆菌发酵液;
其中,所述牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏5.0g,蛋白胨10.0g,琼脂15-20g,pH 7.2-7.6;
所述种子培养基:葡萄糖10g/L、蛋白胨2g/L、MgSO4 0.5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L;
所述发酵培养基:玉米粉30.0g/L,豆饼粉20.0g/L,MgSO40.2g/L,NaH2PO4 0.5g/L,CaCl2.2H2O 0.1g/L,K2HPO4 0.5g/L,pH 7.0;
各培养基灭菌条件为:0.1-0.15MPa,121℃灭菌30分钟。
4.根据权利要求1所述的甲基营养型芽孢杆菌菌剂,其特征在于,所述的农作物秸秆粉为木薯茎秆、甘蔗叶、菠萝茎叶、玉米秸秆、香蕉叶、荔枝枝叶、龙眼枝叶中的一种或几种的混合物经粉碎,并过80目筛后所得的秸秆粉。
5.根据权利要求1所述的甲基营养型芽孢杆菌菌剂,其特征在于,所述矿物质为沸石粉、蛭石粉、硅藻土、白炭黑、轻质碳酸钙中的一种或几种的混合物。
6.一种甲基营养型芽孢杆菌菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)制备甲基营养型芽孢杆菌发酵液;
2)称量:按照质量百分比称量以下组分:草炭10~14份、农作物秸秆粉40~56份、矿物质13~20份,以草炭、农作物秸秆粉和矿物质的质量总量计,该甲基营养型芽孢杆菌菌剂还包括250-450mL/kg的甲基营养型芽孢杆菌发酵液;
3)将称量好的草炭、甲基营养型芽孢杆菌发酵液倒入混拌机里进行吸附,混合均匀后,往混拌机中逐步添加农作物秸秆粉进行稀释混匀,最后加入矿物质,搅拌均匀后将物料进行粉碎,过100目筛,调整物料水分含量及pH值,即得甲基营养型芽孢杆菌菌剂。
7.根据权利要求6所述的甲基营养型芽孢杆菌菌剂的制备方法,其特征在于,所述的制备甲基营养型芽孢杆菌发酵液具体为:
1.1)将保存在-4℃环境下的甲基营养型芽孢杆菌菌株接种至牛肉蛋白胨平板上30℃培养48h;挑取单菌落接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中,30℃培养24h后的液体即为所需接种液;
1.2)将步骤1.1)中的接种液接种于装有种子培养基的300L种子罐中,接菌量为10%,接菌后进行发酵;初始pH值6.9-7.1、温度28-35℃、转速180-220r/min;
1.3)当种子罐发酵9-10小时,菌体生长处于对数期,此时将种子罐中的发酵液加入到装有发酵培养基的3000L发酵罐中继续发酵,控制条件同种子罐,培养28-30小时,当菌体芽孢形成90-95%时,结束发酵,即得甲基营养型芽孢杆菌发酵液。
8.根据权利要求7所述的甲基营养型芽孢杆菌菌剂的制备方法,其特征在于,所述牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏5.0g,蛋白胨10.0g,琼脂15-20g,pH 7.2-7.6;所述种子培养基:葡萄糖10g/L、蛋白胨2g/L、MgSO4 0.5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L;所述发酵培养基:玉米粉30.0g/L,豆饼粉20.0g/L,MgSO4 0.2g/L,NaH2PO4 0.5g/L,CaCl2.2H2O 0.1g/L,K2HPO40.5g/L,pH 7.0;各培养基灭菌条件为:0.1-0.15MPa,121℃灭菌30分钟。
9.根据权利要求6所述的甲基营养型芽孢杆菌菌剂的制备方法,其特征在于,所述甲基营养型芽孢杆菌菌剂的水分含量少于或等于29%,pH为6.9~7.5。