本发明属于医药技术领域，具体涉及三并环类间变性淋巴瘤激酶抑制剂、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物制剂和药物组合物，以及该化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体在制备治疗和/或预防由间变性淋巴瘤激酶介导的癌症相关疾病的药物中的应用。
背景技术：
间变性淋巴瘤激酶(Anaplastic lymphoma kinase，ALK)是受体酪氨酸激酶家族成员，可通过自身磷酸化募集下游蛋白，进而表达特定的基因，调节细胞代谢和生长。间变性淋巴瘤激酶最早发现于间变性大细胞淋巴瘤(Anaplastic large cell lymphoma，ALCL)中，后来发现在非小细胞肺癌(NSCLC)中亦有高表达。ALK在某些ALCL/NSCLC中的异常表达来源于不同的染色体易位。这些染色体易位均可产生相应的融合蛋白。对这些融合基因分析表明，它们都含有ALK基因3’端编码胞内激酶区的基因序列，而与ALK融合的基因片段均含启动子元件及编码介导自身二聚化的序列，从而导致细胞内具有ALK激酶活性的融合蛋白高表达及过度激活，引起细胞的恶性转化。所以，ALK胞内激酶区的活性及相应的信号传导途径是导致ALCL形成的重要分子机制。
因此，研发针对ALK的小分子抑制剂，可以有效的降低突变的ALK基因对下游蛋白的影响，进而影响到肿瘤细胞侵袭、增殖等效应，最终影响肿瘤细胞的生长，起到抗肿瘤的作用。目前已经有辉瑞公司的克唑替尼(Crizotinib)成功上市，但已有大量临床证明一代ALK抑制剂Crizotinib，容易产生耐药性，因此，设计并筛选对Crizotinib产生耐药的患者也有良好的疗效的二代ALK抑制剂，具有显著的临床意义。
因此，通过化合物结构修饰寻找新的化合物结构，努力改善化合物的理化性质，提高成药性，如提高化合物的生物利用度，来寻找对ALK突变有活性的小分子抑制剂，对于临床上因ALK突变引起的疾病的治疗，具有重要的意义。
技术实现要素：
本发明以开发针对ALK的小分子抑制剂为目标，发明了对治疗和/或预防ALK介导的癌症相关疾病具有良好效果的三并环类间变性淋巴瘤激酶抑制剂。具体的技术方案为如下：
1.通式(Ⅰ)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体：
其中，
R1选自-COR5，-CO2R5，-CONRR5，-SOR5，-SO2R5、-S(O2)OR5或-SO2NRR5；
R2、R3、R、R5独立地选自氢原子、C1-6烷基或3～8元碳环；
R4选自氢原子、卤素原子、氰基、硝基、氨基、羧基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基羰基氧基、(C1-6烷基)2氨基、氨基C1-6烷基或磺酰基C1-6烷基；
A环选自任选被1～3个Q1取代的3～8元环烷基或3～8元杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、(C1-6烷基)2氨基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C2-8烯基、C2-8炔基或3～8元杂环基；
B环选自任选被1～3个Q2取代的3～8元杂环基，或任选被1～3个Q2取代的5～14元杂芳基，所述的取代基Q2选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、(C1-6烷基)2氨基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基、C2-8烯基、C2-8炔基或3～8元杂环基。
2.如技术方案1所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中，
R1选自-CONRR5，-SO2R5或-SO2NRR5，
R、R5独立地选自C1-6烷基；
R2、R3独立地选自氢原子或C1-6烷基；
R4选自氢原子、卤素原子、氰基、硝基、氨基、羧基、C1-6烷氧基或C1-6烷基；
A环选自任选被1～2个Q1取代的4～7元环烷基或4～7元杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基；
B环选自任选被1～2个Q2取代的5～6元杂环基，或任选被1～2个Q2取代的5～6元杂芳基，所述的取代基Q2选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基。
3.如技术方案2所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中，
R1选自-SO2R5或-SO2NRR5，
R、R5独立地选自C1-6烷基；
R2、R3独立地选自氢原子或C1-6烷基；
R4选自卤素原子；
A环选自任选被1～2个Q1取代的5～6元杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-4烷基；
B环选自任选被1～2个Q2取代的5～6元杂环基，所述的取代基Q2选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-4烷基。
4.如技术方案3所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中，
R1选自-SO2R5，
R5独立地选自C1-4烷基；
R2、R3独立地选自氢原子或C1-4烷基；
R4选自卤素原子；
A环选自任选被1～2个Q1取代的含1～2个O和/或S原子的5～6元杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-4烷基；
B环选自任选被1～2个Q2取代的含1～2个N原子的5～6元杂环基，所述的取代基Q2选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-4烷基。
5.如技术方案3所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中，
R1选自-SO2R5,
R5独立地选自甲基、乙基或异丙基；
R2、R3独立地选自氢原子或甲基；
R4选自氯原子；
A环选自任选被1～2个Q1取代的含1～2个O和/或S原子的5～6元杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、卤素原子或C1-4烷基；
B环选自任选被1～2个Q2取代的哌啶基、哌嗪基、吗啉基、吡咯烷基、二氢吡咯基、四氢呋喃基、四氢吡喃基或1,4-二氧杂环己烷基，所述的取代基Q2选自甲基、乙基、正丙基、异丙基或正丁基。
6.如技术方案1所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中，
R1选自-SO2R5或-SO2NRR5，
R、R5独立地选自C1-6烷基；
R2、R3独立地选自氢原子或C1-6烷基；
R4选自氢原子、卤素原子、氨基、C1-6烷氧基或C1-6烷基；
A环选自任选被1～2个Q1取代的5～6元饱和杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基；
B环选自任选被1～2个Q2取代的5～6元饱和杂环基，所述的取代基Q2选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基。
7.如技术方案6所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中，
A环选自任选被1～2个Q1取代的含1～2个O、S和/或N原子的5～6元饱和杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基；
B环选自任选被1～2个Q2取代的含1～2个O、S和/或N原子的5～6元饱和杂环基，所述的取代基Q2选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基。
8.如技术方案7所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中，
A环选自任选被1～2个Q1取代的含1～2个O和/或S原子的5～6元饱和杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基；
B环选自任选被1～2个Q2取代的含1～2个N原子的5～6元饱和杂环基，所述的取代基Q2选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基。
9.如技术方案8所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中，
A环选自任选被1～2个Q1取代的含1～2个O和/或S原子的5元饱和杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基；
B环选自任选被1～2个Q2取代的含1～2个N原子的5元饱和杂环基，所述的取代基Q2选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基。
10.如技术方案8所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体，其中，
A环选自任选被1～2个Q1取代的含1个O原子的5～6元饱和杂环基，所述的取代基Q1选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基；
B环选自任选被1～2个Q2取代的含1个N原子的5～6元饱和杂环基，所述的取代基Q2选自羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、卤素原子或C1-6烷基。
本发明的部分化合物
发明详述
本发明所述的“卤素原子”包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子等。
本发明所述的“C1-6烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，包括例如“C1-4烷基”、“C1-3烷基”等，具体实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、1,1-二甲基乙基、正戊基、3-甲基丁基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、正己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。
本发明所述的“C2-8烯基”是指含有至少一个双键的碳原子数为2-8的直链或支链或环状的烯基，包括例如“C2-6烯基”、“C2-4烯基”、“C2-3烯基”、“C3-6环烯基”等，具体实例包括但不限于：乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、2-甲基-1-丁烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、1,1-二甲基-2-丙烯基、1-乙基-2-丙烯基、2-己烯基、3-己烯基、2-甲基-1-戊烯基、3-甲基-1-戊烯基、1-甲基-2-戊烯基、3-甲基-2-戊烯基、2-甲基-3-戊烯基、1-甲基-4-戊烯基、3-甲基-4-戊烯基、1,1-二甲基-3-丁烯基、1,2-二甲基-3-丁烯基、1,3-二甲基-2-丁烯基、2,2-二甲基-3-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-1-丁烯基、2-乙基-1-丁烯基、2-乙基-3-丁烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、1-辛烯基、3-辛烯基、4-辛烯基、1,3-丁二烯基、2,4-戊二烯基、1,4-己二烯基、2,4-己二烯基、1,5-庚二烯基、2,5-庚二烯基、2,6-辛二烯基、环戊烯基、1,3-环戊二烯基、环己烯基、1,4-环己二烯基、环庚烯基、1,4-环庚二烯基、环辛烯基等。
本发明所述的“C2-8炔基”是指含有三键的碳原子数为2-8的直链或支链的炔基，其中包括例如“C2-6炔基”、“C2-4炔基”、“C2-3炔基”等，具体实例包括但不限于：乙炔基、1-丙炔基、2-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、2-甲基-3-丁炔基、1,1-二甲基-2-丙炔基、1-乙基-2-丙炔基、2-己炔基、3-己炔基、1-甲基-2-戊炔基、1-甲基-3-戊炔基、2-甲基-3-戊炔基、1,1-二甲基-3-丁炔基、2-乙基-3-丁炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-甲基-2-己炔基、5-甲基-2-己炔基、2-甲基-3-己炔基、5-甲基-3-己炔基、2-甲基-4-己炔基4-甲基-5-己炔基、2-辛炔基、3-辛炔基、4-辛炔基、4-甲基-2-庚炔基、5-甲基-3-庚炔基、6-甲基-3-庚炔基、2-甲基-4-庚炔基、2-甲基-5-庚炔基、3-甲基-6-庚炔基等。
本发明所述的“C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、(C1-6烷基)2氨基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基羰基氧基”是指以C1-6烷基-O-、C1-6烷基-NH-、(C1-6烷基)2-N-、C1-6烷基-S-、C1-6烷基-C(O)-、C1-6烷基-C(O)-O-方式形成的基团，其中“C1-6烷基”的定义如前文所述。
本发明所述的“C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基、(C1-4烷基)2氨基、C1-4烷基硫基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基羰基氧基是指以C1-4烷基-O-、C1-4烷基-NH-、(C1-4烷基)2-N-、C1-4烷基-S-、C1-4烷基-C(O)-、C1-4烷基-C(O)-O-方式形成的基团，其中“C1-4烷基”的定义如前文所述。
本发明所述的“卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、磺酰基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基”是指一至多个，例如1～4个、1～3个、1～2个卤素原子、羟基、氨基、磺酰基、C1-6烷氧基分别取代C1-6烷基、C1-6烷氧基中的氢原子所形成的基团。
本发明所述的“卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷氧基”是指一至多个， 例如1～4个、1～3个、1～2个卤素原子、羟基、氨基、磺酰基、C1-4烷氧基分别取代C1-4烷基、C1-4烷氧基中的氢原子所形成的基团。
本发明所述的“3～8元环烷基”，是指3～8个碳原子的烷烃部分去除一个氢原子衍生的单环环状烷基，包括例如“3～6元环烷基”、“4～7元环烷基”、“4～8元环烷基”、“4～6元环烷基”、“5～6元环烷基”等。其实例包括但不限于：环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环己烷基、环庚烷基、环辛烷基、甲基环丙烷基、二甲基环丙烷基、甲基环丁烷基、二甲基环丁烷基、甲基环戊烷基、二甲基环戊烷基、甲基环己烷基、二甲基环己烷基等。
本发明所述的“杂原子”是指N、O、C(O)、S、SO和/或SO2等，优选N、O、S，更优选N、O。
本发明所述的“3～8元杂环基”是指含有3～8个环原子、且含有至少一个杂原子(例如1、2、3、4或5个杂原子)的饱和或部分饱和的单环杂环化合物除去一个氢原子得到的基团，包括例如“3～7元杂环基”、“3～6元杂环基”、“4～7元杂环基”、“4～6元杂环基”、“5～6元杂环基”、“5～6元含氮杂环基”、“6元含氮杂环基”、“含1～2个N原子的5～6元杂环基”、“含1～2个N原子的5元杂环基”、“含1～2个O和/或S原子的5～6元杂环基”、“含1～2个O和/或S原子的5元杂环基”、“含1～2个O、S和/或N原子的5～6元饱和杂环基”、“含1～2个O和/或S原子的5～6元饱和杂环基”、“含1～2个N原子的5～6元饱和杂环基”、“含1～2个O和/或S原子的5元饱和杂环基”、“含1～2个N原子的5元饱和杂环基”、“含1个O原子的5～6元饱和杂环基”、“含1个N原子的5～6元饱和杂环基”等。具体实例包括但不仅限于：氮杂环丙烷基、2H-氮杂环丙烷基、二氮杂环丙烷基、3H-二氮杂环丙烯基、氮杂环丁烷基、1,4-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、1,4-二氧杂环己二烯基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、二氢吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氢咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氢吡唑基、2,5-二氢噻吩基、四氢噻吩基、4,5-二氢噻唑基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、4,5-二氢噁唑基、4,5-二氢异噁唑基、2,3-二氢异噁唑基、2H-1,2-噁嗪基、6H-1,3-噁嗪基、4H-1,3-噻嗪基、6H-1,3-噻嗪基、2H-吡喃基、2H-吡喃-2-酮基、3,4-二氢-2H-吡喃基等。
“3～8元碳环”是指含有3～8个碳原子的饱和、部分饱和或不饱和的单环化合物。包括例如“3～7元碳环”、“3～6元碳环”、“4～7元碳环”、“4～6元碳环”、“5～6元碳环”等。具体实例包括但不仅限于：环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环己烷基、环庚烷基、环辛烷基、环戊烯基、1,3-环戊二烯基、环己烯基、1,4-环己二烯基、环庚烯基、1,4-环庚二烯基、环辛烯基、苯基等。优选“5～6元饱和或部分饱和的碳环”。
本发明还提供了上述化合物的制备方法，但不仅限于以下方法，反应方程式如下：
反应步骤：
步骤1 中间体1的制备
购买或经适当方法制备得到中间体1。
步骤2 中间体2的制备
中间体1溶于溶剂(例如甲醇)中，加入钯碳，氢气保护下25℃反应(例如15-25小时)，过滤，浓缩得到中间体2。
步骤3 中间体3的制备
将中间体2溶于适当溶剂(例如乙腈)，冷却至0℃，加入N-溴代琥珀酰亚胺，室温搅拌(例如0.5-1.5小时)，反应完毕，加水淬灭，有机溶剂(例如乙酸乙酯)萃取，浓缩，经纯化(例如硅胶柱层析)得到中间体3。
步骤4 中间体4的制备
将中间体3溶于适当溶剂(例如N,N-二甲基甲酰胺)，加入氰化亚铜，150℃反应(例如1-3小时)，冷却，倒入氨水中，有机溶剂(例如乙酸乙酯)萃取，浓缩，经纯化(例如硅胶柱层析)得到中间体4。
步骤5 中间体5的制备
将中间体4溶于适当溶剂(例如甲醇)，加入氨水(10mL)和雷尼镍，25℃反应(15-25小时)，过滤，浓缩，经适当方法得到中间体5。
步骤6 本发明通式(I)化合物的制备
将中间体5溶于适当溶剂(例如仲戊醇)，加入中间体6和对甲苯磺酸，120℃下搅拌(例 如10-30小时)。加入饱和碳酸氢钠溶液，有机溶剂(例如乙酸乙酯)萃取，干燥，浓缩，经适当方法(例如硅胶柱层析)得到本发明通式(I)化合物。
反应方程式中，R1、R2、R3、R4、A环和B环如前文所定义，X代表氟原子、氯原子、溴原子和碘原子。
本发明式(I)化合物的“立体异构体”是指当式(I)化合物存在不对称碳原子时，会产生对映异构体，当化合物存在碳碳双键或环状结构时，会产生顺反异构体，当化合物存在酮或肟时，会产生互变异构体，所有式(I)化合物的对映异构体、非对映异构体、消旋异构体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物，均包括在本发明范围中。
本发明的通式(I)所示的任一化合物合成得到的若是消旋体，所需要的对映体纯的化合物可以通过手性拆分的方法得到：可以通过具有手性固定相的色谱法(像高压制备液相色谱、超临界流体色谱)。手性填料包括但不限于：Chiralcel OJ-H,Chiralpak AD-H，Chiralpak IA，Chiralpak AS-H。
本发明的通式(I)所示的任一化合物药学上可接受的盐是指由药学上可接受的、非毒性碱或酸制备的盐，包括有机酸盐、无机酸盐、有机碱盐、无机碱盐。
有机酸盐包括甲酸、乙酸、三氟乙酸盐、苯磺酸、苯甲酸、对甲苯磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、丙磺酸、富马酸、葡糖酸、谷氨酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、粘酸、双羟萘酸、泛酸、琥珀酸、酒石酸等的盐。
无机酸盐包括氢溴酸、氢氯酸、硝酸、硫酸、磷酸等的盐。
有机碱盐包括伯、仲和叔胺，被取代胺包括天然存在的取代胺、环胺和碱离子交换树脂，选自甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙胺基乙醇、2-二甲胺基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基-吗啉、N-乙基哌啶、葡甲胺、氨基葡萄糖、海巴明、异丙基胺、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等的盐。天然氨基酸盐如甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、正亮氨酸、酪氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、羟基脯氨酸、组氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、精氨酸、丝氨酸等的盐。
无机碱盐包括铵以及锂、钠、钾、钙、镁、锌、钡、铝、铁、酮、亚铁、锰、二价锰等的盐。
本发明式(I)化合物的“酯”是指，当式(I)化合物存在羧基时，可以与醇发生酯化反应而形成的酯，当式(I)化合物存在羟基时，可以有机酸、无机酸、有机酸盐等发生酯化反应而形成的酯。酯在酸或者碱存在的条件下，可以发生水解反应生成相应的 酸或醇。
通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体可以是溶剂化物形式。若溶剂化物是水合物的情况下，水合作用可以在制备过程中完成或者可以利用原始无水产物的吸湿性逐渐进行。
本发明进一步要求保护包括上述的式(I)所示的任一化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物，可以制成药学上可接受的任一剂型。以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服给药时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，可制成注射剂，包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配制注射剂时，可以不加入附加剂，也可根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，可制成栓剂等。用于经肺给药时，可制成吸入剂或喷雾剂等。
本发明进一步要求保护包括上面所述的式(I)任一化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体与其它一种或多种抗肿瘤剂和免疫抑制剂的药物组合物。所述的抗肿瘤剂和免疫抑制剂为抗代谢物，包括但不限于卡培他滨、吉西他滨、培美曲塞二钠；为生长因子抑制剂，包括但不限于帕唑帕尼、伊马替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、吉非替尼、凡德他尼；为抗体，包括但不限于赫赛汀、贝伐单抗；为有丝分裂抑制剂，选自紫杉醇、长春瑞滨、多西他赛、多柔比星；为抗肿瘤激素类，选自来曲唑、他莫西芬、氟维司群、氟他胺、曲普瑞林；为烷化剂类，包括但不限于环磷酰胺、氮芥、马法兰、瘤可宁、卡莫司汀；为金属铂类，包括但不限于卡铂、顺铂、奥沙利铂；为免疫抑制类，包括但不限于依维莫司、西罗莫司、特癌适；为嘌呤类似物，包括但不限于6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、硫唑嘌呤；为抗生素类，包括但不限于菌素D、柔红霉素、阿霉素、米托蒽醌、争光霉素、普卡霉素；为铂配合物，包括但不限于顺铂、卡波铂；为肾上腺皮质抑制剂类，包括但不限于氨鲁米特；为酶抑制剂，包括但不限于SAHA、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、羟基脲、羟喜树碱、拓扑特肯、拓扑替康、依立替康。
本发明还提供了本发明式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体在制备治疗和/或预防ALK介导的癌症相关疾病或增生性疾病的药物中的应用，所述癌症相关的疾病包括但不限于脑瘤，肺癌，非小细胞性肺癌，鳞状上皮细胞，膀胱癌，胃癌，卵巢癌，腹膜癌，胰腺癌，乳腺癌，头颈癌，子宫颈癌，子宫内膜癌，结直肠癌，肝癌，肾癌，食管腺癌，食管鳞状细胞癌，非霍奇金淋巴瘤，脑瘤，中枢神经系统肿瘤，即神 经胶质瘤，多形性胶质母细胞瘤，胶质肉瘤，前列腺癌，甲状腺癌，雌性生殖道癌，原位癌，淋巴瘤，组织细胞淋巴瘤，神经纤维瘤病，骨癌，皮肤癌，结肠癌，睾丸癌，小细胞肺癌，胃肠道间质瘤，前列腺肿瘤，肥大细胞肿瘤，多发性骨髓瘤，黑色素瘤，胶质瘤，胶质母细胞瘤，星形细胞瘤，神经母细胞瘤，肉瘤；增生性疾病，包括但不限于皮肤或前列腺的良性增生。
本发明化合物具有以下优点：
(1)本发明式(I)化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体具有优异的ALK抑制活性；
(2)本发明式(I)化合物、其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或其立体异构体显示出良好的生物稳定性，作用更持久，生物利用度高；
(3)本发明化合物制备工艺简单，药品纯度高，质量稳定，易于进行大规模工业生产。
以下通过体外酶学和细胞学抑制活性实验进一步阐述本发明化合物有益效果，但不应将此理解为本发明化合物仅具有下列有益效果。
实验例1本发明化合物的体外酶学活性实验
供试品：本发明化合物1，其化学名称和制备方法见化合物1的制备实施例。
对照药ceritinib，自制(参考专利WO2008/073687A2化合物66的制备方法制备)。
下述中实验的缩写所代表的含义如下：
DMSO：二甲基亚砜
DTT：二硫苏糖醇
ALK：间变性淋巴瘤激酶
HEPES：4-羟乙基哌嗪乙磺酸
Brij-35：十二烷基聚乙二醇醚
EDTA：乙二胺四乙酸
实验方法：采用Caliper Mobility Shift方法进行ALK激酶的抑制活性测定
1.1倍激酶缓冲液配制：
分别取pH7.5的HEPES、浓度为30％的Brij-35、母液浓度为1M的MgCl2溶液、母液浓度为1M的DTT，加入超纯水混匀，使HEPES的终浓度为50mM，Brij-35的终浓度为0.0015％，MgCl2的终浓度为10mM，DTT的终浓度为2mM。
2.终止液的配制
分别取母液浓度为4％的包被液Coating Reagent#3(Caliper仪器所使用的12-sipper chip中自带包被液)、母液浓度为1000mM pH7.5的HEPES、母液浓度为0.5M的EDTA、母液浓 度为30％的Brij-35，加入超纯水混匀，使Coating Reagent#3终浓度为0.2％，HEPES终浓度为100mM，EDTA终浓度为50mM，Brij-35终浓度为0.015％。
3.5倍供试品溶液配制：
供试品的DMSO储备液配制：分别称取化合物适量(具体称样量请见下表)，加入适量DMSO溶解，混匀，备用。
取供试品的DMSO储备液，用DMSO稀释制成浓度为50μM的溶液，作为母液。用DMSO将上述母液四倍逐级稀释，然后每个浓度分别用1倍激酶缓冲液稀释10倍，制成5倍供试品溶液。
4.各种其他试剂的配制
用1倍激酶缓冲液分别配制所需要的2.5倍ALK激酶溶液、2.5倍多肽溶液，备用。
5.酶学反应：
1)384孔板中相对应的孔中分别加入5μL配制好的5倍供试品溶液、10μL配制好的2.5倍激酶溶液，室温孵育10分钟。
2)相对应的孔中再分别加入10μL配制好的2.5倍多肽溶液，使测试物终浓度为1000nM、250nM、63nM、16nM、4nM、1nM、0.2nM、0.1nM、0.02nM、0.004nM。启动酶反应，28℃孵育1小时。
6.酶学检测：
每个相对应的孔中分别加入25μL终止液，终止反应。Caliper仪器读取数据，并通过数据计算抑制率，
抑制率(％)＝(最大值-样本值)/(最大值-最小值)×100，采用XLFIT软件进行曲线拟合，得出IC50值。
最大值：不加测试物的阳性对照，最小值：不加酶的阴性对照。
实验结果和结论：
表1 本发明化合物的体外酶学抑制活性
由表1可见，本发明化合物对ALK激酶具有良好的抑制活性，可用于治疗与激酶相 关的疾病，特别是ALK激酶介导的病症或病况，具有显著的临床意义。
实验例2本发明化合物的体外细胞活性实验
供试品：本发明化合物1,其化学名称和制备方法见化合物1的制备实施例。
对照药Ceritinib，自制(参考专利WO2008/073687A2化合物66制备方法制备)。
下述中实验的缩写所代表的含义如下：
rpm：转每分钟
DMSO：二甲基亚砜
MTS：溴化噻唑蓝四氮唑
RPMI1640：1640培养基(RPMI:Roswell Park Memorial Institute)
500×、1000×、10×其中的“×”：倍
实验方法：
NCI-H3122细胞：
(1)培养基配制：
配制含2.5％的胎牛血清的RPMI1640培养基，备用。
(2)细胞培养：
在5％CO2、37℃条件的培养箱中，将NCI-H3122细胞置T25培养瓶中用“(1)”中配制好的培养基培养细胞至80％融合。
(3)接种细胞：
用胰酶消化细胞，1000rpm离心4min，去除上清液，用培养基重新混悬，调整细胞密度，取该细胞混悬液90μL接种到96孔板中，获得最终细胞密度为：3000个细胞/孔；然后在5％CO2、37℃培养箱中培养24h。
(4)加入供试品：
(4.1)供试品溶液配制
对照药溶液：称取对照药2.17mg，加入适量DMSO溶解并分别用DMSO梯度稀释制成一系列浓度的母液(1000×对照药溶液)，再分别用培养基稀释该母液100倍得到10×对照药溶液，分别取该溶液10μL，加入到96孔板相应的孔中，得到对照药溶液最终浓度为：10μM、2.5μM、625nM、156nM、39nM、9.8nM、2.5nM、0.625nM。
化合物1溶液：称取化合物8mg，加入适量DMSO溶解并分别用DMSO梯度稀释制成一系列浓度的母液(1000×化合物1溶液)，再分别用培养基稀释该母液100倍得到10×化合物1溶液，分别取该溶液10μL，加入到96孔板相应的孔中，得到化合物1溶液最终浓度为： 10μM、2.5μM、625nM、156nM、39nM、9.8nM、2.5nM、0.625nM。
(4.2)对照孔设置：
溶媒对照：0.1％DMSO。
空白对照：培养基，仪器调零。
(4.3)将96孔板放37℃、5％CO2培养箱中培养72h。
(5)检测：
向96孔板的每个试验孔中加入CCK-8试剂10μL，放回5％CO2、37℃培养箱中培养1h。设置酶标仪检测波长450nm，读取结果。
(6)IC50计算：细胞存活率(％)＝(样本值－空白值)/(最大值－空白值)×100，采用Graph prism软件进行曲线拟合，得出IC50值。
最大值：不加化合物只加溶媒的的细胞对照即溶媒对照，空白值：培养基空白对照。
实验结果和结论：
表2 本发明化合物的细胞抑制活性
由表2可见，与对照药相比，本发明化合物对细胞NCI-H3122具有更好的抑制活性，可用于治疗ALK激酶介导的病症或病况，具有显著的临床意义。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例15-氯-N4-(2-异丙基磺酰基)苯基)-N2-(2,3,7,8-四氢-1H-呋喃并[3,2-e]异吲哚-5-基)嘧啶-2,4-二胺的制备
(1)2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯的制备
将2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸(15g,0.091mol)溶于甲醇(800mL)中，加入浓硫酸(2mL)，65℃反应20小时，冷却，加入碳酸氢钠，浓缩，加水(200mL)稀释，乙酸乙酯(150mL×3)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得产物(15.8g,产率97.5％)。
(2)7-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯的制备
将2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯(14g,78.6mmol)溶于乙酸酐(200mL)中，冷却至0℃，滴加浓硝酸(质量分数65％,7mL,102.2mmol)，滴加完毕后升至室温搅拌1小时，反应完倒入水(200mL)中，乙酸乙酯(150mL×3)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化得产物(13g,产率74.3％)。
(3)7-氨基-2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯的制备
将7-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯(10g,44.8mmol)溶于甲醇(300mL)中，加入钯碳(1g)，氢气氛围下25℃反应20小时，过滤，滤液浓缩得产物(6g,产率69.4％)。
(4)7-氨基-4-溴-2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯的制备
将7-氨基-2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯(5.4g,28mmol)溶于乙腈(100mL)中，冷却至0℃，分批加入N-溴代琥珀酰亚胺(5.98g,33.6mmol)，加毕升至室温搅拌1小时反应完全，倒入水(100mL)中，乙酸乙酯(150mL×3)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)纯化得产物(5g,产率65.6％)。
(5)7-氨基-4-氰基-2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯的制备
将7-氨基-4-溴-2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯(4g,14.7mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中，加入氰化亚铜(1.57g,17.6mmol)，150℃反应2小时，冷却，倒入氨水(80mL)中，乙酸乙酯(150mL×3)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝30:1)纯化得产物(1.4g,产率43.7％)。
(6)5-氨基-1,2,7,8-四氢-3H-呋喃并[3,2-e]异吲哚-3-酮的制备
将7-氨基-4-氰基-2,3-二氢苯并呋喃-5-羧酸甲酯(0.4g,1.83mmol)溶于甲醇(100mL),加入氨水(10mL)和雷尼镍(0.1g)，25℃反应20小时。过滤，滤液浓缩得产物(0.28g,产率80％)。
(7)叔丁基5-氨基-1,3,7,8-四氢-2H-呋喃并[3,2-e]异吲哚-2-羧酸酯的制备
将5-氨基-1,2,7,8-四氢-3H-呋喃并[3,2-e]异吲哚-3-酮(0.28g,1.47mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，0℃下滴加硼烷-二甲硫醚溶液(2mol/L,2.57mL,5.14mmol)，加完后65℃反应24小时。冷却至0℃，滴加甲醇(5mL)淬灭反应，再加入4mol/L盐酸(5mL)，65℃搅拌4小时。冷却后旋转蒸发除去溶剂，加水稀释，加入氢氧化钠溶液调至pH＝10，加入二碳酸二叔丁酯(416mg,1.91mmol)，室温搅拌1小时，乙酸乙酯(10mL×3)萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化得产物(75mg,产率18.5％)。
(8)2,5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺的制备
将2-(异丙基磺酰基)苯胺(1g,5mmol)和2,4,5-三氯嘧啶(1.1g,6mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中，加入氢化钠(含量60％,0.4g,10mmol)，25℃下反应12小时。加水，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相合并，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝25:1)得产物(0.8g,产率46％)。
(9)5-氯-N4-(2-异丙基磺酰基)苯基)-N2-(2,3,7,8-四氢-1H-呋喃并[3,2-e]异吲哚-5-基)嘧啶-2,4-二胺的制备
将叔丁基5-氨基-1,3,7,8-四氢-2H-呋喃并[3,2-e]异吲哚-2-羧酸酯(70mg,0.25mmol)溶于仲戊醇(8mL)中，加入2,5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺(104mg,0.3mmol)和对甲苯磺酸(86mg,0.5mmol)，120℃下搅拌20小时。旋转蒸发除去溶剂，加饱和碳酸氢钠溶液，乙酸乙酯(10mL×3)萃取，无水硫酸钠干燥，真空浓缩，粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇:氨水＝10:1:0.1)得终产物(10mg,产率8.2％)。
分子式:C23H24ClN5O3S分子量:485.99LC-MS(m/z):486[M]+
1H-NMR(400MHz,MeOD-d4)δ:8.49(d,J＝8.0Hz,1H),8.14(s,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.72(s,1H),7.70-7.67(m,1H),7.39-7.35(m,1H),4.65(t,J＝8.6Hz,2H),4.53(s,2H),4.45(s,2H),3.26(t,J＝8.8Hz,2H),1.19(d,J＝6.8Hz,6H)。