本申请是申请号为201480009783.8、申请日为2014年2月11日、发明名称为“作为詹纳斯相关激酶(jak)抑制剂的吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物”的专利申请的分案申请。
本发明提供药学活性的吡咯并[2,3-d]嘧啶类化合物和类似物。此类化合物可用于抑制詹纳斯(janus)激酶(jak)。本发明亦涉及包含此类化合物的组合物和制造此类化合物的方法，以及用于治疗和预防由jak介导的病症的方法。
背景技术：
蛋白激酶是催化蛋白质中特定残基磷酸化的酶家族，并广义地分类为酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶。由于突变、过度表达或不适当调节、调节异常或失调，以及生长因子或细胞因子的过度产生或产生不足所导致的不适当的激酶活性涉及许多疾病，其包括但不限于癌症、心血管疾病、过敏、哮喘和其他呼吸疾病、自体免疫疾病、炎性疾病、骨病、代谢紊乱、及神经障碍和神经变性障碍(例如阿尔滋海默氏病)。不适当的激酶活性触发许多生物细胞反应，该生物细胞反应与涉及上述和相关疾病的细胞生长、细胞分化、存活、凋亡、有丝分裂、细胞周期控制和细胞运动性有关。
因此，蛋白激酶已成为一类重要的作为治疗性介入的靶标的酶。特别地，细胞内蛋白质酪氨酸激酶的jak家族(jak1、jak2、jak3和tyk2)在细胞因子信号传导上扮演重要的角色(kisseleva等人,gene,2002,285,1；yamaoka等人genomebiology2004,5,253)。当细胞因子与其受体结合时，细胞因子活化jak，接着jak磷酸化细胞因子受体，如此而产生信号传导分子的停靠位点，值得注意的是，最终导致基因表达的信号传导子和转录活化子(stat)家族成员。许多细胞因子已知可活化jak家族。这些细胞因子包含ifn家族(ifn-α、ifn-β、ifn-ω、限制素、ifn-γ、il-10、il-19、il-20、il-22)、gp130家族(il-6、il-11、osm、lif、cntf、nnt-1/bsf-3、g-csf、ct-1、瘦蛋白、il-12、il-23)、γc家族(il-2、il-7、tslp、il-9、il-15、il-21、il-4、il-13)、il-3家族(il-3、il-5、gm-csf)、单链家族(epo、gh、prl、tpo)、受体酪氨酸激酶(egf、pdgf、csf-1、hgf)、及g-蛋白偶合的受体(at1)。
仍然需要可有效和选择性抑制特定jak酶，特别是jak1(相对于jak2)的新颖化合物。jak1是由jak1、jak2、jak3和tyk2组成的詹纳斯家族蛋白激酶中的一员。jak1在所有组织中有不同程度的表达。许多细胞因子受体经由下列组合的jak激酶对传导信号：jak1/jak2、jak1/jak3、jak1/tyk2、jak2/tyk2或jak2/jak2。在这方面，jak1是最广泛的配对jak激酶，且是由γ-共同(il-2rγ)细胞因子受体、il-6受体家族、i、ii和iii型受体家族和il-10受体家族进行信号传导时所必须的。动物研究已显示，jak1是免疫系统的发展、产生作用和体内平衡时所必须的。通过抑制jak1激酶活性而调节免疫活性证实可有用于治疗多种免疫障碍(murray,p.j.,j.immunol.,178,2623–2629(2007)；kisseleva,t.,等人,gene,285,1–24(2002)；o'shea,j.j.,等人,cell,109,(suppl.)s121–s131(2002))且同时避免jak2依赖性的促红细胞生成素(epo)和促血小板生成素(tpo)的信号传导(neubauerh.,等人,cell,93(3),397-409(1998)；parganase.,等人,cell,93(3),385-95(1998))。
技术实现要素：
本发明提供一种具有下示结构的式i化合物：
或其药学上可接受的盐，其中r1是氢或c1-c4烷基，其中所述烷基进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、羟基、甲氧基、氨基、cf3和c3-c6环烷基；r2和r3独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、c1-c6直链或支链全氟烷基、c1-c6直链或支链烷氧基、c1-c6直链或支链全氟烷氧基、卤素、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基羰基、芳基、杂芳基、(芳基)c1-c6直链或支链烷基、(杂芳基)c1-c6直链或支链烷基、(杂环基)c1-c6直链或支链烷基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂环基、(c1-c6直链或支链烷氧基)羰基、(c1-c6直链或支链烷基)氨基-羰基氨基或(c1-c6直链或支链烷基)氨基羰基；r4是选自氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c1-c6直链或支链全氟烷基、芳基和烷基芳基；x选自--nh--和--crarb--，其中(a)ra和rb独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基、(芳基)c1-c6直链或支链烷基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、(杂芳基)c1-c6直链或支链烷基、(杂环基)c1-c6直链或支链烷基，或(b)ra和rb一起形成包含--(crcrd)j--的链，其中rc和rd独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、卤基、cn、cf3、羟基、conh2或so2ch3；y是-a-r5，其中a是键、--(ch2)k--或--(cd2)k--，及r5是c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基或--nra’rb’，或是具有1至3个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的总共含有5至11个原子的不饱和、饱和或部分饱和的单环或双环的环结构，其中所述烷基、c3-c6环烷基、芳基或单环或双环的环结构进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：氘、卤基、c1-c6直链或支链烷基、cn、羟基、cf3、--ore、--nrerf、--s(o)pre和c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、conh2和so2ch3，其中(a)ra’和rb’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基或(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个rc’取代，或(b)ra’和rb’一起形成包含--(crc’rd’)j--的链，其中rc’和rd’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、卤基、cn、羟基、cf3、conh2、--ore、--nrerf或--s(o)pre；其中re和rf独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基或c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、cf3和conh2；j是2、3、4或5；k是1、2、3或4；p是0、1或2；以及n是1或2。
在其它方面，本发明亦提供：
包含药学上可接受的载体和式i化合物的药物组合物；
治疗病症或障碍的方法，所述病症或障碍包括肌炎、血管炎、天疱疮、克罗恩氏病、狼疮、肾炎、牛皮癣、多发性硬化、重度抑郁症、过敏、哮喘、斯耶格伦氏病(sjogren’sdisease)、干眼综合征、移植排斥、癌症、炎性肠病、败血性休克、心肺功能障碍、急性呼吸疾病或恶病质，该方法包括对有需要的受治疗者给予治疗有效量的式i化合物或其药学上可接受的盐；
治疗病症或障碍的方法，所述病症或障碍包括异位性皮肤炎、湿疹、牛皮癣、硬皮症、狼疮、瘙痒、其它瘙痒症、过敏反应(包括哺乳动物的过敏性皮肤炎)、马过敏性疾病(包括叮咬过敏症)、夏季湿疹、马奇痒症(sweetitch)、马慢性肺气肿、炎性气道疾病、复发性气道阻塞、气道反应过度和慢性阻塞性肺部疾病，该方法包括对有需要的哺乳动物给予治疗有效量的式i化合物或其药学上可接受的盐；以及
制备本发明化合物的方法。通过下列说明(仅作为范例)，将进一步了解本发明。本发明涉及一类吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物。特别地，本发明涉及可用作jak(特别是jak1)的抑制剂的吡咯并[2,3-d]嘧啶化合物。尽管本发明并不如此受限，但通过下列讨论及实施例将对本发明的各方面获得了解。
术语“烷基”，单独或组合，意指式cnh2n+1的非环状的饱和烃基，其可为直链或支链。此基团的范例包含甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基和己基。除非特别指明，烷基包含1至6个碳原子。烷基和各种其它的含烃部分的碳原子含量是由表示该部分中的碳原子的上限值或下限值的前缀指明的，换言之，前缀ci-cj表示具有整数“i”至“j”(含)个碳原子的部分。因此，例如，c1-c6烷基意指具有1至6个碳原子(含端值)的烷基。
如本申请中使用的，术语“羟基”意指oh基团。术语“杂环基”意指饱和或部分饱和(即，非芳族)杂环且其可通过环氮原子连接(当杂环连接至碳原子时)，或通过环碳原子连接(所有的情况)。同样地，当被取代时，取代基可位于一个环氮原子上(如果该取代基通过碳原子连接时)或位于一个环碳原子上(所有的情况)。具体实例包括环氧乙烷基、氮杂环丙烷基、氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、四氢呋喃基、吡咯烷基、四氢吡喃基、哌啶基、1,4-二
术语“芳基”意指可通过环碳原子连接的芳族单环或双环的烃。同样地，当被取代时，取代基可位于一个环碳原子上。具体实例包括苯基、甲苯基、二甲苯基、三甲基苯基和萘基。芳基取代基的实例包括烷基、羟基、卤基、腈、烷氧基、三氟甲基、甲酰氨基、so2me、苄基和经取代的苄基。
术语“杂芳基”意指芳族杂环，且其可通过环碳原子连接(所有的情况)或通过具有适合价数的环氮原子连接(当该杂环连接至碳原子时)。同样地，当被取代时，取代基可位于一个环碳原子上(所有的情况)或位于一个具有适合价数的环氮原子上(如果该取代基通过碳原子连接时)连接。具体实例包含噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、
术语“卤基”和“卤素”意指氟(f)、氯(cl)、溴(br)或碘(i)。
术语“哺乳动物”意指人类、家畜或伴侣动物。
术语“伴侣动物”意指以宠物或家居动物形式饲养的动物。伴侣动物的实例包括狗、猫和啮齿类(包含仓鼠、豚鼠、沙鼠等)、兔、雪貂和鸟类。
术语“家畜”意指于农业环境中饲养或哺育以制备产品(例如食物或纤维)或用于其劳动的动物。在一些实施方案中，家畜适合于被哺乳动物(例如人类)所消费。家畜动物的实例包括牛、山羊、马、猪、绵羊(包含羔羊)和兔，以及禽类(例如鸡、鸭和火鸡)。
术语“治疗”意指减缓与疾病、障碍或病症有关的症状，或停止那些症状的进一步发展或恶化。取决于患者的疾病和病症，本申请中的“治疗”可包含治愈、缓和及预防性治疗的一种或多种。治疗可亦包括结合其它治疗给予本发明的药物制剂。
术语“治疗有效的”表示药剂预防疾病或改善疾病的严重程度，同时避免通常与交替治疗有关的不良副作用的能力。应将短语“治疗有效的”理解为等同于短语“对于治疗、预防或减缓是有效的”，且二者都欲用于界定用于组合治疗的各个药剂达到相对于以每个药剂本身治疗而言在癌症、心血管疾病或疼痛和发炎的严重程度和发病频率方面得到改善的目标而同时避免通常与交替治疗有关的不良副作用的量。
“药学上可接受的”意指适合用于哺乳动物、伴侣动物或家畜动物。
如果取代基被描述为“独立地选择”自某一组时，则每个取代基彼此独立地被选择。因此，每个取代基与其它取代基可以相同或不相同。
具体实施方式
本发明涉及新颖化合物，它们是可用于治疗与jak1调节异常相关的疾病和病症的选择性jak1调节剂。本发明另外提供包含所述jak1调节剂的药物组合物以及治疗和/或预防所述疾病和病症的方法。因此，本发明提供一种具有下示结构的式i化合物：
或其药学上可接受的盐，其中r1是氢或c1-c4烷基，其中所述烷基进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、羟基、甲氧基、氨基、cf3和c3-c6环烷基；r2和r3独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、c1-c6直链或支链全氟烷基、c1-c6直链或支链烷氧基、c1-c6直链或支链全氟烷氧基、卤素、氰基、羟基、氨基、羧基、氨基羰基、芳基、杂芳基、(芳基)c1-c6直链或支链烷基、(杂芳基)c1-c6直链或支链烷基、(杂环基)c1-c6直链或支链烷基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂环基、(c1-c6直链或支链烷氧基)羰基、(c1-c6直链或支链烷基)氨基-羰基氨基或(c1-c6直链或支链烷基)氨基羰基；r4是选自氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c1-c6直链或支链全氟烷基、芳基和烷基芳基；x选自--nh--和--crarb--，其中(a)ra和rb独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基、(芳基)c1-c6直链或支链烷基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、(杂芳基)c1-c6直链或支链烷基、(杂环基)c1-c6直链或支链烷基，或(b)ra和rb一起形成包含--(crcrd)j--的链，其中rc和rd独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、卤基、cn、cf3、羟基、conh2或so2ch3；y是-a-r5，其中a是键、--(ch2)k--或--(cd2)k--，及r5是c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基或--nra’rb’，或是具有1至3个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的总共含有5至11个原子的不饱和、饱和或部分饱和的单环或双环的环结构，其中所述烷基、c3-c6环烷基、芳基或单环或双环的环结构进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：氘、卤基、c1-c6直链或支链烷基、cn、羟基、cf3、--ore、--nrerf、--s(o)pre和c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、conh2和so2ch3，其中(a)ra’和rb’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基或(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个rc’取代，或(b)ra’和rb’一起形成包含--(crc’rd’)j--的链，其中rc’和rd’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、卤基、cn、羟基、cf3、conh2、--ore、--nrerf或--s(o)pre；其中re和rf独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基或c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、cf3和conh2；j是2、3、4或5；k是1、2、3或4；p是0、1或2；以及n是1或2。在一个实施方案中，本发明提供一种具有下示结构的式ia化合物：
或其药学上可接受的盐，其中y是-a-r5，其中a是键、--(ch2)k--或--(cd2)k--，及r5是c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基或--nra’rb’，或是具有1至3个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的总共含有5至11个原子的不饱和、饱和或部分饱和的单环或双环的环结构，其中所述烷基、c3-c6环烷基、芳基或单环或双环的环结构进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：氘、卤基、c1-c6直链或支链烷基、cn、羟基、cf3、--ore、--nrerf、--s(o)pre和c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、conh2和so2ch3，其中(a)ra’和rb’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基或(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个rc’取代，或(b)ra’和rb’一起形成包含--(crc’rd’)j--的链，其中rc’和rd’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、卤基、cn、羟基、cf3、conh2、--ore、--nrerf或--s(o)pre；其中re和rf独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基或c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、cf3和conh2；j是2、3、4或5；k是1、2、3或4；以及p是0、1或2。
在一个实施方案中，本发明提供一种式ia化合物，其中a是键，及r5是c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基或芳基。在另一个实施方案中，本发明提供一种式ia所示化合物，其中a是键或--(ch2)k--，及r5是c3-c6环烷基，其中所述c3-c6环烷基进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、c1-c6直链或支链烷基和cn，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、conh2和so2ch3；其中k是1、2或3。在再另一个实施方案中，本发明提供一种式ia所示化合物，其中a是键或--(ch2)k--，及r5是具有1至3个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的总共含有5至11个原子的不饱和、饱和或部分饱和的单环或双环的环结构，其中所述烷基、c3-c6环烷基、芳基或单环或双环的环结构进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：氘、卤基、c1-c6直链或支链烷基、cn、羟基、cf3、--nra’rb’、--ore、--s(o)pre和c3-c6环烷基；其中k是1、2或3。
在另一个实施方案中，本发明提供一种具有下示结构的式ib化合物：
或其药学上可接受的盐，其中(a)ra’和rb’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基或(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个rc取代，或(b)ra’和rb’一起形成包含--(crc’rd’)j--的链，其中rc’和rd’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、卤基、cn、羟基、cf3、conh2、--ore、--nrerf或--s(o)pre；其中re和rf独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基或c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、cf3和conh2；或(c)ra’和rb’一起形成具有1至3个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的总共含有5至11个原子的不饱和、饱和或部分饱和的单环或双环的环结构，其中所述单环或双环的环结构进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：氘、卤基、c1-c6直链或支链烷基、cn、羟基、cf3、--nra’rb’、--ore、--s(o)pre和c3-c6环烷基；j是2、3、4或5；以及p是0、1或2。
在另一个实施方案中，本发明提供一种具有下示结构的式ic化合物：
或其药学上可接受的盐，其中(a)ra’和rb’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基或(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个rc取代，或(b)ra’和rb’一起形成包含--(crc’rd’)j--的链，其中rc’和rd’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、卤基、cn、羟基、cf3、conh2、--ore、--nrerf或--s(o)pre；其中re和rf独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基或c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、cf3和conh2；或(c)ra’和rb’一起形成具有1至3个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的总共含有5至11个原子的不饱和、饱和或部分饱和的单环或双环的环结构，其中所述单环或双环的环结构进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：氘、卤基、c1-c6直链或支链烷基、cn、羟基、cf3、--nra’rb’、--ore、--s(o)pre和c3-c6环烷基；j是2、3、4或5；以及p是0、1或2。
在另一个实施方案中，本发明提供一种具有下示结构的式id化合物：
或其药学上可接受的盐，其中
y是-ar5，其中a是键或--(ch2)k--，及r5是c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基，或是具有1至3个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的总共含有5至11个原子的不饱和、饱和或部分饱和的单环或双环的环结构，其中所述烷基、c3-c6环烷基、芳基或单环或双环的环结构进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：氘、卤基、c1-c6直链或支链烷基、cn、羟基、cf3、--nra’rb’、--ore、--s(o)pre和c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、conh2和so2ch3，其中(a)ra’和rb’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、c3-c6环烷基、芳基、(芳基)c1-c6直链或支链烷基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、(杂芳基)c1-c6直链或支链烷基、(杂环基)c1-c6直链或支链烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个rc’取代，或(b)ra’和rb’一起形成包含--(crc’rd’)j--的链，其中rc’和rd’独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基、芳基、(c1-c6直链或支链烷基)芳基、杂芳基、(c1-c6直链或支链烷基)杂芳基、卤基、cn、羟基、cf3、conh2、--ore、--nrerf或--s(o)pre；其中re和rf独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基或c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、cf3和conh2；j是2、3、4或5；k是1、2或3；以及p是0、1或2。在一个实施方案中，本发明提供式id化合物，其中r5是c1-c6直链或支链烷基或c3-c6环烷基。
在另一个实施方案中，本发明提供式id化合物，其中a是键或--(ch2)k--，及r5是具有1至3个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的总共含有5至11个原子的不饱和、饱和或部分饱和的单环或双环的环结构，其中所述烷基、c3-c6环烷基、芳基或单环或双环的环结构进一步任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：氘、卤基、c1-c6直链或支链烷基、cn、羟基、cf3、--nra’rb’、--ore、--s(o)pre和c3-c6环烷基；其中re和rf独立地为氢、氘、c1-c6直链或支链烷基或c3-c6环烷基，其中所述烷基和环烷基可任选地被一个或多个选自由下列各项组成的组的取代基取代：卤基、cn、羟基、cf3和conh2；k是1、2或3；以及p是0、1或2。在另一个实施方案中，本发明提供式i化合物，其中r5是具有1或2个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的总共含有5至11个原子的不饱和的环结构。于其它实施方案中，本发明提供式i化合物，其中r5是呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、
在另一个实施方案中，本发明提供化合物，其选自由下列化合物组成的组：
4-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}吡啶-2-磺酰胺；
2,2,2-三氟-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-乙烷磺酰胺；
2-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-丙烷-1-磺酰胺；
n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}丙烷-1-磺酰胺；
1-环丙基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-甲烷磺酰胺；
n-{顺式-3-[(丁磺酰基)甲基]环丁基}-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；
1-环丙基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-氮杂环丁烷-3-磺酰胺；
3-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-氮杂环丁烷-1-磺酰胺；
(1r,5s)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-磺酰胺；
(3r)-3-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-吡咯烷-1-磺酰胺；
(3s)-3-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-吡咯烷-1-磺酰胺；
n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-1-(氧杂环丁烷-3-基)甲烷-磺酰胺；
1-(3,3-二氟环丁基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲烷-磺酰胺；
反式-3-(氰基甲基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷磺酰胺；
顺式-3-(氰基甲基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷-磺酰胺；
n-[顺式-3-({[(3,3-二氟环丁基)甲基]磺酰基}甲基)环丁基]-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；
(1s,5s)-1-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-磺酰胺；
(1r,5r)-1-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-磺酰胺；
(3r)-1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡咯烷-3-甲腈；
1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]-4-(三氟甲基)哌啶-4-醇；
n-(顺式-3-{[(4,4-二氟哌啶-1-基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；
(3s)-1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡咯烷-3-甲腈；
n-(顺式-3-{[(3-氯-4-氟苯基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；
n-(顺式-3-{[(2-环丙基乙基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；
n-甲基-n-[顺式-3-({[1-(丙-2-基)吡咯烷-3-基]磺酰基}甲基)环丁基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；
3,3-二氟-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-环丁烷-磺酰胺；
1-[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-甲烷磺酰胺；
顺式-3-(氰基甲基)-3-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-环丁烷磺酰胺；
反式-3-(氰基甲基)-3-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷磺酰胺；
n-(2-氰基乙基)-n-甲基-n'-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}硫酸二酰胺(sulfuricdiamide)；
n-{(1s,3r)-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环戊基}丙烷-1-磺酰胺；
3-(2-羟基丙-2-基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯-磺酰胺；
n-(环丙基甲基)-n'-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}硫酸二酰胺；
n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-4-(1h-吡唑-3-基)哌啶-1-磺酰胺；
2-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4h)-磺酰胺；
2-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡啶-4-甲腈；
(1s,3s)-3-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]环戊烷甲腈；
(1r,3r)-3-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]环戊烷甲腈；
1-环丙基-n-{反式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-甲烷磺酰胺；
3-氰基-n-{反式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-吡咯烷-1-磺酰胺；
n-甲基-n-{反式-3-[(丙磺酰基)甲基]环丁基}-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；以及，
2-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-1,3-噻唑-5-磺酰胺；或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本发明提供化合物，其选自由下列化合物组成的组：
1-(3,3-二氟环丁基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲烷磺酰胺；
反式-3-(氰基甲基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷磺酰胺；
n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}丙烷-1-磺酰胺；
3,3-二氟-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-环丁烷-磺酰胺；以及
n-{(1s,3r)-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环戊基}丙烷-1-磺酰胺；或其药学上可接受的盐。
在其它实施方案中，本发明提供化合物，其选自由下列化合物组成的组：
(3r)-3-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}吡咯烷-1-磺酰胺；
(1r,5s)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-磺酰胺；
(1s,5s)-1-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-磺酰胺；
n-(2-氰基乙基)-n-甲基-n'-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}硫酸二酰胺；以及
2-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4h)-磺酰胺；或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本发明提供化合物，其选自由下列化合物组成的组：
(3r)-1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡咯烷-3-甲腈；
1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]-4-(三氟甲基)哌啶-4-醇；
n-(顺式-3-{[(4,4-二氟哌啶-1-基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；以及
(3s)-1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡咯烷-3-甲腈；
或其药学上可接受的盐。
在再另一个实施方案中，本发明提供化合物，其选自由下列化合物组成的组：
(1r,3r)-3-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]环戊烷甲腈；
(1s,3s)-3-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]环戊烷甲腈；
2-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡啶-4-甲腈；
n-[顺式-3-({[(3,3-二氟环丁基)甲基]磺酰基}甲基)环丁基]-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；以及
n-{顺式-3-[(丁磺酰基)甲基]环丁基}-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺；或其药学上可接受的盐。
特别优选的实施方案包括2-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-1,3-噻唑-5-磺酰胺；n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-丙烷-1-磺酰胺；n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-1-氧杂环丁烷-3-基甲烷磺酰胺；1-(3,3-二氟环丁基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-甲烷磺酰胺；3,3-二氟-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷磺酰胺；反式-3-(氰基甲基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-环丁烷磺酰胺；(1s,5s)-1-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-磺酰胺；以及(3s)-1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡咯烷-3-甲腈；或其药学上可接受的盐。
本发明亦提供一种药物组合物或兽医组合物，其包含式i、ia、ib、ic或id的化合物，或其药学上可接受的盐，及药学上可接受的载体。
本发明亦提供一种治疗受治疗者的与jak(特别是jak1)调节异常相关的障碍或病症的方法，其包括给予该受治疗者治疗有效量的具有式i、ia、ib、ic或id结构的化合物，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，以该方法治疗的障碍或病症选自类风湿性关节炎、肌炎、血管炎、天疱疮、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、阿尔滋海默氏病、狼疮、肾炎、牛皮癣、异位性皮肤炎、自体免疫甲状腺病、多发性硬化、重度抑郁症、过敏、哮喘、斯耶格伦氏病、干眼综合征、器官移植排斥、异种器官移植、i型糖尿病和糖尿病并发症、癌症、白血病、t细胞急性淋巴细胞白血病、成人t细胞白血病、活化b细胞样，弥漫性大b细胞淋巴瘤、炎性肠病、败血性休克、心肺功能障碍、慢性阻塞性肺病、急性呼吸疾病和恶病质，该方法包括将有效量的包含式i、ia、ib、ic或id化合物的组合物给予受治疗者的步骤。在一些实施方案中，根据所述的方法的治疗有效量为0.01毫克/千克体重/天至100毫克/千克体重/天。于一些其它实施方案中，根据所述的方法的治疗有效量为0.1毫克/千克体重/天至10毫克/千克体重/天。在实施所述的方法时，式i化合物优选选自n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-丙烷-1-磺酰胺；n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-1-氧杂环丁烷-3-基甲烷磺酰胺；1-(3,3-二氟环丁基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-甲烷磺酰胺；3,3-二氟-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷磺酰胺；反式-3-(氰基甲基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-环丁烷磺酰胺；(1s,5s)-1-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-磺酰胺；以及(3s)-1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡咯烷-3-甲腈；或其药学上可接受的盐。
本发明另外提供一种治疗或预防选自异位性皮肤炎、湿疹、硬皮症、瘙痒、其它瘙痒症、过敏反应包含哺乳动物的过敏性皮肤炎、马的过敏性疾病包含叮咬过敏症、夏季湿疹、马奇痒症(sweetitch)、马慢性肺气肿、炎性气道疾病、复发性气道阻塞和气道反应过度的障碍或病症的方法，其包括对有需要的哺乳动物给予治疗有效量的式i、ia、ib、ic或id的化合物，或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，根据所述的方法的治疗有效量为0.01毫克/千克体重/天至100毫克/千克体重/天。于一些其它实施方案中，根据所述的方法的治疗有效量为0.1毫克/千克体重/天至10毫克/千克体重/天。根据所述的方法，经本发明化合物治疗的哺乳动物是选自伴侣动物、狗和家畜。在一些实施方案中，根据所述方法的式i、ia、ib、ic或id的化合物，或其药学上可接受的盐，可通过口、胃肠外或局部途径给予。在实施所述的方法时，式i化合物优选选自n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-丙烷-1-磺酰胺；n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-1-氧杂环丁烷-3-基甲烷磺酰胺；1-(3,3-二氟环丁基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲烷磺酰胺；3,3-二氟-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷磺酰胺；反式-3-(氰基甲基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-环丁烷磺酰胺；(1s,5s)-1-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-磺酰胺；以及(3s)-1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡咯烷-3-甲腈；或其药学上可接受的盐。
具有相同的分子式但其原子键结的性质或顺序或原子的空间排列不同的化合物称为“异构体”。原子的空间排列不同的异构体称为“立体异构体”。本领域技术人员均明白式i、ia、ib、ic或id所示化合物可以顺式-和反式-非手性非对映异构体的形式存在。
本文所述的化合物的所有异构体(例如顺式-、反式-或非对映异构体)单独或其任何混合物均涵盖在所述化合物的范围内。所有这些形态，包含对映异构体、非对映异构体、顺式(cis)、反式(trans)、同侧(syn)、反侧(anti)、溶剂合物(包含水合物)、互变异构体、及其混合物，均涵盖在所述化合物的范围内。立体异构混合物，例如非对映异构体的混合物，可以已知方式利用适合的分离方法而分离成其对应的异构体。非对映异构混合物例如可利用分级结晶、色谱法、溶剂分配法和类似的步骤而分离成个体非对映异构体。此分离可发生于起始化合物之一的层次或发生于式i、ia、ib、ic或id所示化合物本身。对映异构体可通过形成非对映异构盐而分离(例如利用与对映异构纯质的手性酸形成盐)，或使用具有手性配体的色谱法基质利用色谱法(例如hplc)而分离。
在治疗哺乳动物的障碍的治疗用途方面，本发明化合物或其药物组合物可通过口、胃肠外、局部、直肠、黏膜或小肠给予。胃肠外给予包含间接注射以产生全身效果或直接注射至患病的部位。局部给予包含可轻易地由局部施用而到达的皮肤或器官的治疗，例如眼或耳。亦包含经皮输送以产生全身效果。直肠给予包括栓剂的形式。优选的给予途径是经口和胃肠外。
式i、ia、ib、ic或id所示化合物的药学上可接受的盐包含其酸加成盐和碱盐。适合的酸加成盐系由可形成无毒性盐的酸所形成。其实例包括乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐(camsylate)、柠檬酸盐、环己胺磺酸盐(cyclamate)、乙二磺酸盐(edisylate)、乙磺酸盐(esylate)、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐(gluceptate)、葡糖酸盐(gluconate)、葡糖醛酸盐(glucuronate)、六氟磷酸盐、海苯酸盐(hibenzate)、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙磺酸盐(isethionate)、乳酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐、2-萘磺酸盐(2-napsylate)、烟碱酸盐、硝酸盐、乳清酸盐(orotate)、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐(pamoate)、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐(pyroglutamate)、蔗糖酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐和羟萘酸盐(xinofoate)。
适合的碱盐系由可形成无毒性盐的碱所形成。其实例包括铝、精氨酸、n-双苄乙二胺(benzathine)、钙、胆碱、二乙胺、二醇胺、甘氨酸、赖氨酸、镁、葡甲胺(meglumine)、乙醇胺(olamine)、钾、钠、氨基丁三醇(tromethamine)和锌的盐类。
可亦形成酸和碱的半盐，例如，半硫酸盐和半钙盐。适合的盐类的评论参见stahl和wermuth的handbookofpharmaceuticalsalts:properties,selection,anduse(wiley-vch，2002)。
式i、ia、ib、ic或id所示化合物的药学上可接受的盐可以分别通过下列三种方法之一而分别制得：(i)使式i、ia、ib、ic或id所示化合物与所期望的酸或碱反应；(ii)自式i、ia、ib、ic或id所示化合物的适合的前体除去酸或碱不稳定的保护基，或使用所期望的酸或碱对适合的环状前体(例如内酯或内酰胺)进行开环反应；或(iii)通过与适合的酸或碱反应或利用适合的离子交换柱将式i、ia、ib、ic或id所示化合物的一种盐转换成另一种盐。所有三种反应通常是于溶液中进行。所得的盐可沉淀出并利用过滤而收集或可利用蒸发溶剂的方式回收。所得的盐的离子化程度可由完全离子化变化至几乎未离子化。
本发明的药物组合物可利用本领域中已知的方法制备，例如，利用惯用的混合、溶解、粒化、制成糖衣药丸、研磨(levigating)、乳化、包封、包埋、冷冻干燥法或喷雾干燥。
根据本发明所用的药物组合物可依惯用的方法使用一种或多种药学上可接受的载体而制备，而该载体包括赋形剂和助剂且有利于将活性化合物加工成药学上可使用的制剂。适合的制剂取决于所择的给予途径。药学上可接受的赋形剂和载体通常已为本领域技术人员所已知，因而涵盖在本发明的范围内。所述的赋形剂和载体公开于，例如，“remington’spharmaceuticalsciences”,mackpub.co.,newjersey(1991)。本发明的制剂可设计成短效型、快速释出型、长效型和控释型。因此，药物制剂亦可调配成控释型或缓释形式。
适合用于本发明的药物组合物包括其中含有足量的活性成分以达到所期望的目的(即控制或治疗障碍或疾病)的组合物。更详言之，治疗有效量意指可有效地预防、减轻或改善疾病的症状/征兆或延长被治疗受治疗者的存活的化合物的量。
活性成分(本发明化合物)于药物组合物和其单位剂型中的量可依据给予方式、特定化合物的潜力及所期望的浓度而广泛地变化或调整。治疗有效量的确定在本领域技术人员的能力范围内。通常，活性成分的量是为组合物的0.01重量％至99重量％。
一般而言，活性成分的治疗有效剂量范围将为约0.01至约100毫克/千克体重/天，优选约0.1至约10毫克/千克体重/天，更佳约0.3至3毫克/千克体重/天，又更佳约0.3至1.5毫克/千克体重/天。须明白的是，剂量可根据个别受治疗者的要求及待治疗的障碍或疾病的严重程度而变化。
所期望的剂量可便利地以于适合的间隔给予(例如，以每日二、三、四或多个亚剂量给予)的单一剂量或分剂量的形式呈现。亚剂量本身可进一步分成，例如，许多不连续松散分开的给予剂量；例如由吹药器产生的多重吸入剂量或以施用数滴至眼睛的方式。
此外，须明白的是，为了快速达到所期望的血浆浓度，起始给予剂量可能增加至超出上限。反的，起始剂量可能低于最佳剂量，且治疗期间内的每日剂量可根据特定状况而渐渐增加。必要时，每日剂量亦可分割成多重剂量以供，例如，每日给予二至四次。
本发明化合物涉及可用作为詹纳斯激酶抑制剂(jak-i)的吡咯并[2,3-d]嘧啶化合物。这些化合物可用作与治疗或预防选自下列的障碍或病症有关的治疗剂：类风湿性关节炎、肌炎、血管炎、天疱疮、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、阿尔滋海默氏病、狼疮、肾炎、牛皮癣、异位性皮肤炎、自体免疫甲状腺病、多发性硬化、重度抑郁症、过敏、哮喘、斯耶格伦氏病、干眼综合征、器官移植排斥、异种器官移植、i型糖尿病和糖尿病并发症、癌症、白血病、t细胞急性淋巴细胞白血病、成人t细胞白血病、活化b细胞样弥漫性大b细胞淋巴瘤、炎性肠病、败血性休克、心肺功能障碍、慢性阻塞性肺病、急性呼吸疾病、恶病质和希望能免疫抑制/免疫调节的其它适应症，其包括将有效量的本发明化合物给予至受治疗者的步骤。
对用于控制与jak相关的障碍，例如人类和动物的异位性皮肤炎的安全和有效的试剂存在实质需求。治疗动物的异位性皮肤炎的市场目前主要是皮质类固醇，其于动物上造成令人苦恼和非所期望的副作用，特别是伴侣动物，例如狗类。亦可使用抗组织胺，但效果较差。环孢菌素的犬类制剂(atopicatm)是目前市场上用于异位性皮肤炎，但其价格昂贵且效力开始较慢。此外，atopicatm有胃肠道耐受性的问题。本发明化合物是jak抑制剂，且对jak1具有选择性效力。这些化合物预期可对类固醇的使用提供替代品，及对残存于异位性皮肤炎或在除去过敏原或致病物(例如跳蚤过敏性皮肤炎中的跳蚤)之后缓慢退去的慢性瘙痒和发炎提出解决方法。
本发明化合物可以药学上可接受的形式单独给予或与一种或多种可调节哺乳动物免疫系统的额外的药剂或与消炎剂一起合并给予。这些药剂可包含但不限于环孢菌素a(例如sandimmunetm或neoraltm)、雷帕霉素(rapamycin)、fk-506(tacrolimus)、来氟米特(leflunomide)、脱氧精胍啉(deoxyspergualin)、霉酚酸酯(mycophenolate)(例如cellcepttm)、硫唑嘌呤(azathioprine)(例如imurantm)、逹利珠单抗(daclizumab)(例如zenapaxtm)、okt3(例如orthocolonetm)、atgam、阿司匹林、乙酰胺苯酚(acetaminophen)、布洛芬(ibuprofen)、纳普生(naproxen)、匹洛西卡(piroxicam)和消炎性类固醇(例如泼尼松龙(prednisolone)或地塞米松(dexamethasone))。这些药剂可根据本领域技术人员已知的标准药学惯例，以相同或分开的剂型的一部分，通过相同或不同的给予途径，及按相同或不同的给予时间表给予。
因此，本发明提供一种治疗或预防受治疗者(例如人类或非人类哺乳动物)的与jak相关的疾病、病症或障碍的方法，其包括对受治疗者给予有效量的一种或多种本申请中所述的化合物。可被治疗的适合的对象包含驯养或野生的动物，伴侣动物，例如狗、猫、马等；家畜，包含牛和其它反刍动物、猪、家禽、兔类等；灵长类，例如猴类，例如恒河猴(rhesusmonkeys)和石蟹猴(cynomolgusmonkeys)(亦称为食蟹猴或长尾猴)、美洲狨猴(marmosets)、绢毛猴(tamarins)、黑猩猩(chimpanzees)、猕猴等；以及啮齿动物，例如大鼠、小鼠、沙鼠、天竺鼠等。在一个实施方案中，该化合物是以药学上可接受的形式，任选地于药学上可接受的载体中加以给予。
预期对jak途径的选择性靶向或jak激酶的调节(特别是jak1)具有治疗功效的病症包含，关节炎、哮喘、自体免疫疾病、癌症或肿瘤、糖尿病、一些眼睛疾病、障碍或病症、炎症、肠发炎、过敏或病症、神经变性疾病、牛皮癣和移植排斥。可由选择性抑制jak1而得到利益的病症将于下文中进行更详细的讨论。
因此，式i、ia、ib、ic或id所示化合物，或其药学上可接受的盐，及其药物组合物可用于治疗许多例如下列的病症或障碍：
关节炎，包含类风湿性关节炎、幼年型关节炎和牛皮癣性关节炎；
自体免疫疾病或障碍，包含单一种器官或单一种细胞类型自体免疫障碍，例如桥本氏甲状腺炎(hashimoto'sthyroiditis)、自体免疫溶血性贫血、恶性贫血的自体免疫性萎缩性胃炎、自体免疫性脑脊髓炎、自体免疫性睪丸炎、goodpasture氏病、自体免疫性血小板减少症、交感性眼炎、重症肌无力、graves氏病、原发性胆汁肝硬化、慢性侵袭性肝炎、溃疡性结肠炎和膜性肾小球病、涉及全身性自体免疫障碍者(例如全身性红斑狼疮、类风湿性关节炎、薛格连氏综合征(sjogren'ssyndrome)、雷德氏综合征(reiter'ssyndrome)、多发性肌炎-皮肌炎、全身性硬化、结节性多动脉炎、多发性硬化和大疱性类天疱疮)、及其它o-细胞(体液)型或t细胞型自体免疫疾病(包含cogan氏综合征)、僵直性脊椎炎、韦格纳肉芽肿(wegener'sgranulomatosis)、自体免疫性脱发、i型糖尿病或幼年发病型糖尿病或甲状腺炎；
癌症或肿瘤，包含消化道/胃肠道癌、结直肠癌、肝癌、皮肤癌(包含肥大细胞瘤和鳞状上皮细胞癌)、乳房和乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、淋巴瘤、白血病(包含急性骨髓细胞性白血病和慢性骨髓细胞性白血病)、肾癌、肺癌、肌瘤、骨癌、膀胱癌、脑癌、黑色素瘤(包含口腔和转移性黑色素瘤)、卡波济氏肉瘤(kaposi'ssarcoma)、骨髓瘤(包含多发性骨髓瘤)、骨髓增生性障碍、增生性糖尿病视网膜病变或与血管新生相关的障碍(包含实体肿瘤)；
糖尿病，包含i型糖尿病或糖尿病并发症；
眼睛疾病、障碍或病症，包含眼睛的自体免疫疾病、角膜结膜炎、春季结膜炎、葡萄膜炎(包含白塞氏(behcet)病葡萄膜炎和晶状体引发的葡萄膜炎)、角膜炎、疱疹病毒性角膜炎、圆锥形角膜炎、角膜内皮营养不良、角膜白斑、眼天疱疮、莫伦氏(mooren's)溃疡、巩膜炎、葛瑞夫兹氏(grave's)眼病变、vogt-koyanagi-harada综合征、干眼症、水疱、虹膜睫状体炎、类肉瘤病、内分泌性眼病、交感性眼炎、过敏性结膜炎或眼部新生血管；
肠发炎、过敏或病症，包含克罗恩氏病和/或溃疡性结肠炎、炎性肠病、乳糜病、直肠炎、嗜酸性胃肠炎或肥大细胞增生症；
神经变性疾病，包含运动神经元疾病、阿尔滋海默氏病、巴金森病、肌萎缩侧索硬化、亨廷顿舞蹈病、大脑缺血或创伤性损伤引发的神经变性疾病、中风、谷氨酸神经毒性或缺氧；中风中的缺血/再灌注伤害、心肌缺血、肾缺血、心脏病发作、心脏肥大、动脉粥样硬化和动脉硬化、器官缺氧或血小板凝集；
皮肤疾病、病症或障碍，包含异位性皮肤炎、湿疹、牛皮癣、硬皮症、瘙痒或其它瘙痒症；
过敏反应，包含哺乳动物的过敏性皮肤炎(包含马过敏性疾病，例如叮咬过敏症)、夏季湿疹、马奇痒症(sweetitch)、马慢性肺气肿、炎性气道疾病、复发性气道阻塞、气道反应过度或慢性阻塞性肺部疾病；
哮喘和其它阻塞性气道疾病，包含慢性或顽固型哮喘、晚期哮喘、支气管炎、支气管性哮喘、过敏性哮喘、内因性哮喘、外因性哮喘或尘螨哮喘；
移植排斥，包含胰岛移植排斥、骨髓移植排斥、移植物抗宿主病、器官和细胞移植排斥(例如骨髓、软骨、角膜、心脏、椎间盘、胰岛、肾、四肢、肝、肺、肌肉、肌肉母细胞、神经、胰脏、皮肤、小肠或气管)或异种器官移植；以及
另一种实施方案提供选择性抑制jak1酶的方法，其包括使所述jak酶与非治疗量或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物接触。所述的方法可于活体内或体外发生。体外接触可包括筛选试验以测定所述一种或多种化合物在各种用量或浓度下对抗所选择的酶的效力。与治疗有效量的所述一种或多种化合物的活体内接触可包括在发生接触的动物体内治疗所述的疾病、障碍或病症或预防器官移植排斥。所述一种或多种化合物对jak酶和/或宿主动物的效果亦可被测定或测量。测定jak活性的方法包括所述实施例中描述的方法以及wo99/65908、wo99/65909、wo01/42246、wo02/00661、wo02/096909、wo2004/046112和wo2007/012953中公开的方法。
化学合成
下列反应方案及书面说明提供有关本发明化合物的制备的一般细节。
磺酰胺类
式i化合物(其中p是2，x是nh，y是ar5，及a是键)可根据反应方案1而制备。
方案1
本领域技术人员将明白在合成本发明化合物期间，敏感性官能团(pg)可能需要保护和脱保护。保护和脱保护可利用惯用方法实现，例如“protectivegroupsinorganicsynthesis”,t.w.greeneandp.g.m.wuts,johnwiley&sonsinc.(1999)及其中所引用的参考文献中所公开的那些。因此，于反应方案1步骤1中，式ii所示化合物(其中q1是卤素)经保护剂处理而得式iii化合物，其中pg1是芳基磺酰基保护基，例如苯磺酰基或优选的对甲苯磺酰基(“tosyl”)。保护基可通过式ii化合物与芳基磺酰氯(优选是甲苯磺酰氯)在碱(例如氢氧化钠水溶液)和有机溶剂(例如丙酮)的存在下反应而导入。反应通常是在0℃至约50℃，优选约23℃(室温)进行。或者，可使用碱(例如氢化钠和叔丁醇钾)使用适合的溶剂(例如n,n-二甲基甲酰胺或四氢呋喃)。数种式ii化合物已知于文献且已由上述方法制备出。例如，式ii化合物(其中q1是cl及r2和r3是氢)的合成已报导于例如wo2007012953。
于反应方案1步骤2中，式iii的经保护的化合物与1-2当量的式iv的胺在1-3当量碱和质子性溶剂的存在下混合而得式v化合物。适合的碱包含三乙胺、二异丙基乙胺和碳酸钾，而适合的溶剂包括甲醇、乙醇、二异丙醇和水或其混合物。反应通常是在约23℃至约150℃，优选约75℃进行。须明白的是式iv的胺含有第二个氨基且其是经保护基pg2保护，且pg2可在不会损失pg1的条件下去除。适合的保护基pg2包含叔丁氧羰基(“boc”)和苄氧羰基(“cbz”)，优选是苄氧羰基。
于反应方案1步骤3中，在不会导致去除pg1的条件下自式v化合物去除保护基pg2而形成式vi的伯胺(或其盐)。当pg2是苄氧羰基时，该苄氧羰基保护基可通过氢解作用而去除，其中式v化合物是曝露于氢气或氢转移剂(例如环己烯)在氢化催化剂(例如氢氧化钯)的存在下使用溶剂(例如甲醇、乙酸，或优选是乙醇)。或者，当pg2是苄氧羰基，该苄氧羰基保护基可通过以溴化氢(约6当量)于乙酸中的溶液任选地在适合的溶剂(例如乙酸乙酯)的存在下在约-20℃至约40℃(优选低于25℃)的温度下处理式v化合物而去除。后者的脱保护方法是优选的，其中n是1，r2、r3和r4是氢，r1是甲基，pg1是甲苯磺酰基及pg2是苄氧羰基，及提供式vi所示的胺的二氢溴酸盐。当pg2是叔丁氧羰基，该叔丁氧羰基保护基可通过以过量的酸(例如盐酸或三氟乙酸)于溶剂(例如二氯甲烷或1,4-二
于反应方案1步骤4中，式vi所示的伯胺(或其盐)是可通过以式viii所示的活化的磺酸衍生物(其中q2是卤素、o-烷基或o-芳基)在碱的存在下处理而转换成式vii的磺酰胺衍生物。最常见的是，viii是磺酰氯衍生物，其中q2是cl。许多磺酰氯可得自商业来源。此外，许多种制备磺酰氯的方法已存在，且已为本领域技术人员所已知且已公开于教科书例如“advancedorganicchemistry”,j.march,johnwiley&sons(1985)。通常，式vi的胺是经式viii的磺酰氯衍生物(其中q2是cl)在至少一当量碱(例如三乙胺或二异丙基胺)的存在下于适合的溶剂(例如二氯甲烷、四氢呋喃或乙腈)中处理。当使用胺的盐形式时，对于每一当量的形成盐的酸，使用额外一当量的碱。例如，使用二氢溴酸盐时，则使用额外二当量的碱。反应可自约-20℃进行至约50℃，优选在约0℃下开始反应，及使反应升温至约23℃(室温)。
最后，于反应方案1步骤5中，式vii的磺酰胺衍生物经脱保护而得到式i化合物(其中p是2，x是nh，y是ar5及a是键)。通常使用二种方法，而方法的选择取决于该条件与分子内其它官能团的兼容性。第一种方法涉及将式vii化合物曝露于过量(约4当量)的碱(例如氢氧化锂或氢氧化钠)。反应于含有水和醇(例如甲醇或乙醇)的溶剂混合物中进行。反应亦可于水和四氢呋喃及任意的醇(例如甲醇或乙醇)的混合物中进行。反应可于约23℃至约100℃(通常约60℃)的温度下进行。第二种方法在分子内存在有羟基敏感性官能团(例如腈)的情况下是优选的，此方法涉及式vii化合物与过量的氟化四丁铵(4-25当量)于溶剂(例如1,2-二甲氧基乙烷或优选的四氢呋喃)中反应。脱保护是在约0℃至约60℃(优选约23℃)的温度下进行。
式ii化合物(其中q1是卤素)可购买得到或已见于化学文献。例如，4-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶，其中q1是cl及r2和r3均是氢，是可轻易在市场上购得的化合物。
式iv所示化合物已见于化学文献或可由本领域技术人员已知的标准化学反应制得。
另一种制备本发明化合物(其中p是2，x是nh，y是ar5，a是键)的方法显示在反应方案2中。
方案2
于反应方案2步骤1中，式ix化合物与式x的苄氧基氨基甲酸酯衍生物在碱(1-5当量)的存在下混合而得式xi的苄氧基氨基甲酸酯衍生物。反应于溶剂(例如水或醇，例如乙醇)且任选地添加可互溶的辅溶剂(例如四氢呋喃)中进行。适合的碱包含碳酸钾、碳酸铯、三乙胺和二异丙基乙胺。反应在约23℃至约100℃的温度下进行。当n是1，r2、r3和r4是氢，及r1是甲基时，优选的条件是于水中进行反应，使用碳酸钾(3当量)作为碱，在约23℃开始反应，接着升温至约95℃。
于反应方案2步骤2中，式xi的苄氧基氨基甲酸酯衍生物经曝露于氢气或氢转移剂(例如环己烯)在氢化催化剂(例如氢氧化钯)的存在下而脱保护。同时，在脱保护的条件下，7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶环的2-位置的氯原子经氢取代而形成式xii的胺盐酸盐。反应于溶剂(例如甲醇或乙醇)中在约50℃至约80℃的温度下进行。当r2、r3和r4是氢，及r1是甲基时，优选的条件是于乙醇中在约78℃使用氢氧化钯作为催化剂，及使用环己烯(约20当量)作为氢转移剂。
最后，于反应方案2步骤3中，式xii的胺盐酸盐通过与式viii所示的经活化的磺酸衍生物(其中q2是卤素、o-烷基或o-芳基)在至少二当量碱的存在下反应而转换成式i的磺酰胺(其中p是2，x是nh，y是ar5，a是键)。最常见地，viii是磺酰氯衍生物，其中q2是cl。适合的碱包含三乙胺、二异丙基乙胺和碳酸钾。适合的溶剂包括n,n-二甲基甲酰胺，及四氢呋喃和水的混合物。反应可在约-20℃至约50℃(优选约23℃)的温度下进行。或者，式xii的胺盐酸盐首先以约2当量的三甲基氯硅烷在约2-3当量碱(例如双(二甲基硅烷基)氨化锂或双(二甲基硅烷基)氨化钠)的存在下于适合的非质子性溶剂(例如四氢呋喃)中处理。接着，在约1小时之后，加入约1.2当量的式viii的磺酰氯(其中q2是cl)，在后处理之后，得到式i的磺酰胺(其中p是2，x是nh，y是ar5，a是键)。反应可在约-20℃至约50℃(优选约23℃)的温度下进行。
式ix所示化合物可在市场上购得或已见于化学文献。例如，2,4-二氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(其中r2和r3均是氢)可在市场上购得。其合成公开于pct国际公开文本wo2007/012953。
磺酰胺类
式i化合物(其中p是2，x是nh，和y是nrarb)可根据反应方案3而制备。
方案3
于反应方案3步骤1中，式vi的胺(或其盐)(其中pg1是芳基磺酰基保护基例如苯磺酰基或优选的甲苯磺酰基)被转换成式xiii的
于反应方案3步骤2中，式xiii的
于反应方案3步骤3中，使式xiv的化合物脱保护，去除芳基磺酰基保护基pg1而得式i的磺酰胺衍生物(其中p是2，x是nh，及y是nrarb)。反应可以反应方案1步骤5中所提及的两种一般方法之一来进行。同样地，脱保护方法的选择取决于该条件与分子内其它官能团的兼容性。或者，式xiv的磺酰胺可直接由式vi的胺(或其盐)得到。因此，于反应方案3步骤4中，式vi的胺(或其盐)根据反应方案1步骤4中所述以式cl-so2nrarb的氨磺酰氯和碱(例如三乙胺或二异丙基乙胺)处理。式cl-so2nrarb的氨磺酰氯因而可由式hnrarb的胺根据w.r.bowmanandr.j.marmon,“comprehensiveorganicfunctionalgrouptransformations,volume2”,pergamon(1995)所公开的步骤而制备。
式i化合物(其中p是2，x是nh，及y是nrarb)亦可直接由式xii的胺(或其盐)得到。因此，于反应方案3步骤5中，式xii的胺(或其盐)根据反应方案1步骤4中所述以式cl-so2nrarb的氨磺酰氯和碱(例如三乙胺或二异丙基乙胺)处理。式xii的胺根据反应方案2中所述而得到。式xii的胺(或其盐)可通过除去式vi化合物(参考反应方案1)的芳基磺酰基保护基pg1而得到。脱保护反应可以反应方案1步骤5中所提及的两种一般脱保护方法之一来进行。脱保护方法的选择取决于该条件与分子内其它官能团的兼容性。
反磺酰胺类
式i化合物(其中p是2，x是ch2，和y是nrarb)可根据反应方案4而制备。
方案4
于反应方案4步骤1中，式iii所示化合物(参考反应方案1)与式xv的氨基醇在碱和极性溶剂的存在下反应而得式xvi的化合物。适合的碱包含三乙胺和二异丙基乙胺，而适合的溶剂包括甲醇、二异丙醇和丙酮。反应通常是在约23℃至约70℃下进行。优选的是，将催化量的(约1摩尔％)碘化钾加至反应中。
于反应方案4步骤2中，式xvi的化合物转换成式xvii的化合物(其中lg是离去基例如溴基、碘基、甲烷磺酸酯基或优选对甲苯磺酸酯基)。导入此类离去基的方法为本领域技术人员已知，且已公开于教科书例如“advancedorganicchemistry”,j.march,johnwiley&sons(1985)中。在lg是对甲苯磺酸酯基的情况下，式xvi的化合物经对甲苯磺酰氯在碱(例如三乙胺、二异丙基乙胺或n,n-二甲基氨基吡啶)的存在下于非质子性溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中处理。反应在约-10℃至约40℃的温度下进行，优选起始自约0℃，且使反应升温至约23℃。
于反应方案4步骤3中，式xvii的化合物与硫代乙酸的盐(优选是硫代乙酸钾)混合，以得式xviii的硫代酯衍生物。反应于极性溶剂(例如n,n-二甲基甲酰胺或n-甲基吡咯烷)中在约23℃至约80℃(优选约55℃)的温度下进行。
于反应方案4步骤4中，式xviii的硫代酯衍生物通过与过氧化氢的水溶液(通常是30重量％)反应而转换成式xix的磺酸衍生物。反应于酸性溶剂(例如甲酸或乙酸)中在约0℃至约40℃(优选约23℃)的温度下进行。
于反应方案4步骤5中，式xix的磺酸衍生物转换成式xx的磺酰氯衍生物。数种进行此官能团转换的方法已公开于文献中。优选的方法是以过量的(3-15当量)亚硫酰氯在催化量的n,n-二甲基甲酰胺的存在下于非质子性溶剂(例如二氯甲烷或氯仿)中处理式xix的化合物。反应可于约-20℃至约100℃进行，优选地反应起始于约0℃，接着升温至约75℃。
或者，于反应方案4步骤6中，式xviii的硫代酯衍生物可通过以氯化剂处理而直接转换成式xx的磺酰氯衍生物。数种进行此官能团转换的方法已公开于文献中。氯化剂包含氯气和n-氯琥珀酰亚胺，及反应通常是在酸(例如盐酸或乙酸)的存在下进行。经常使用混合的含水溶剂系统，例如水和二氯甲烷及水和乙腈。
于反应方案4步骤7中，式xx的磺酰氯衍生物与1-3当量的式hnrarb的胺反应而形成式xxi的磺酰胺衍生物。反应在至少一当量的碱(例如三乙胺或二异丙基乙胺)的存在下在约-20℃至约50℃的温度下进行(优选地，反应起始自约0℃，及使反应升温至约23℃)。反应于非质子性溶剂(例如四氢呋喃或二氯甲烷)中进行。
最后，于反应方案4步骤8中，去除芳基磺酰基保护基pg1以形成式i的化合物(其中p是2，x是ch2，及y是nrarb)。反应可以反应方案1步骤5中所提及的两种一般脱保护方法之一来进行。脱保护方法的选择取决于该条件与分子内其它官能团的兼容性。式xv的氨基醇已见于化学文献或可由本领域技术人员已知的方法而制备。
砜类、亚砜类和硫醚类
式i化合物(其中p是0、1或2，x是ch2，y是ar5，及a是键)可根据反应方案5而制备。
方案5
于反应方案5步骤1中，式xvii的化合物(参考反应方案4)经1-2当量的式r5sh的硫醇在1-2当量碱的存在下处理而得式xxiii的硫醚。适合的碱包含氢化钠、双(三甲基硅基)氨化钠、1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(dbn)、及优选的1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)。反应于溶剂(例如n,n-二甲基甲酰胺或n-甲基吡咯烷酮)中在约0℃至约50℃(优选约23℃)的温度下进行。
于反应方案5步骤2中，式xxiii的化合物经脱保护，去除芳基磺酰基保护基pg1以形成式xxiv的化合物。反应可以反应方案1步骤5中所提及的两种一般脱保护方法之一来进行。脱保护方法的选择取决于该条件与分子内其它官能团的兼容性。
于反应方案5步骤3中，式xxiv的硫醚经氧化而得式i的砜(其中p是2，x是ch2，y是ar5及a是键)。数种方法已见于文献，且所有方法均涉及使用氧化剂，例如间氯过氧苯甲酸、过氧化氢或过一硫酸氢钾复合盐
须注意的是，反应方案5中的步骤2和3的顺序，可任选地颠倒，使得氧化步骤是在脱保护步骤之前进行。
式i的化合物(其中p是0，x是ch2，y是ar5，及a是键)于反应方案5步骤4中通过去除式xxiii的化合物中的芳基磺酰基保护基pg1而得到。反应可以反应方案1步骤5中所提及的两种一般脱保护方法之一来进行。同样地，脱保护方法的选择取决于该条件与分子内其它官能团的兼容性。
于反应方案5步骤5中，式xxiii的化合物或者是由式xviii的硫代乙酸酯衍生物制得。首先，式xviii的硫代乙酸酯溶于溶剂，例如乙醇、甲醇或水(或其混合物)。加入适合的碱，例如碳酸钾或碳酸铯(约2当量)，将氮气泡通入溶液中以除脱氧。接着加入式r5-lg的烷基化剂，其中lg是离去基，例如溴基、碘基、甲烷磺酸酯基或对甲苯磺酸酯基。反应是系在约-20℃至约30℃的温度下进行。优选地，反应起始于约0℃，接着升温至约23℃。
许多种式r5sh的硫醇与式r5-lg的烷基化剂可由商业来源购得。此外，目前已存在有许多种制备此类化合物的方法，其已为本领域技术人员所已知且已公开于教科书，例如“advancedorganicchemistry”,j.march,johnwiley&sons(1985)。
须明白的是，一些本发明化合物可以在合成的晚期阶段通过官能团转换而得到，例如，在进行反应方案1的步骤4或5，反应方案2的步骤3，反应方案3的步骤2、3或4，反应方案4的步骤7或8，和反应方案5的步骤2、3、4或5之后，使基团r4或r5进行化学改性。此种官能团转换可包含一个步骤或多个步骤，例如，酯还原成醇，再氧化成醛，加入有机镁试剂以形成二级醇，再氧化成酮，及最后，加入有机镁试剂以得到叔醇。
在执行本发明化合物的合成时，本领域技术人员将明白，在纯化处理之前，需要取样和分析反应混合物，以监测反应的进行并决定是否应继续进行反应或是已可进行纯化处理以得到所欲产物。分析反应混合物的常见方法包含薄层色谱法(tlc)、液相色谱法/质谱(lcms)和核磁共振(nmr)。
本领域技术人员亦将明白，本发明化合物可制成非对映异构体或几何异构体(例如，环己烷环上的顺式和反式取代)的混合物。这些异构体可由标准色谱法技术加以分离，例如硅胶正向色谱法，逆相制备型高压液相色谱法或超临界流体色谱法。本领域技术人员亦将明白，一些本发明化合物是手性的，因而可制成对映异构体的外消旋混合物或非外消旋(scalemic)混合物。对映异构体的分离方法已有数种，且已为本领域技术人员所已知。惯用的对映异构体分离优选是使用手性固定相的超临界流体色谱法。
实验部分
除非特别提及，否则反应在氮气气氛下进行的。硅胶色谱法使用250-400筛目的硅胶使用加压氮气(～10-15psi)以驱动溶剂通过柱(“急骤色谱法”)。当指明时，溶液和反应混合物于真空下利用旋转蒸发而进行浓缩。
实施例1：2,2,2-三氟-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}乙烷磺酰胺
步骤1：[顺式-3-(甲基氨基)环丁基]氨基甲酸苄酯和[反式-3-(甲基氨基)环丁基]氨基甲酸苄酯
在0℃下，将33％的甲基胺的无水乙醇溶液(1000ml，9.13mol)加至搅拌中的(3-氧代环丁基)氨基甲酸苄酯(wo2012/75381a1和wo2012/09678a1)(200g，0.913mol)和乙酸(88ml)于乙醇(1000ml)的混合物中。反应混合物在0℃搅拌1.5小时，接着在室温下搅拌2小时。在-70℃下将氢硼化锂(41g，2.05mol)分批加入反应混合物中。添加完成后，反应混合物在-70℃下搅拌1小时，接着使其升温至室温历时12小时。于反应混合物中加入水(400ml)以淬灭反应，在真空下浓缩以去除乙醇。水层用浓盐酸酸化至ph2，以乙酸乙酯(2×1000ml)冲洗，以10％氢氧化钠碱化至ph9-10，接着以二氯甲烷(3×1000ml)萃取。合并的有机层经盐水(1000ml)冲洗，以硫酸钠干燥，及浓缩，得到粗产物的淡棕色液体。将此粗产物溶于二氯甲烷(400ml)并冷却至0℃。在所得的溶液中加入由4mhcl于二
利用超临界流体色谱法自母液分离了反式异构体。
步骤2：{顺式-3-[(2-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)氨基]环丁基}氨基甲酸苄酯
在碳酸钾(20.47g，148mmol)于水(180ml)中所形成的溶液中加入[顺式-3-(甲基氨基)环丁基]氨基甲酸苄酯(13.57g，50.2mmol)，接着在室温下加入2,4-二氯-7h-吡咯并(2,3-d)嘧啶(9.0g，47.9mmol)。添加完成后，反应混合物在95℃下搅拌过夜。过滤混合物以收集固体。滤饼经水冲洗和在真空下干燥，得标题化合物(16.5g，89.7％)，为黄色固体。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ11.81(sm，1h)，7.65(d，1h)，7.38(m，5h)，7.16(m，1h)，6.67(d，1h)，5.02(s，2h)，4.81(m，1h)，3.85(m，1h)，3.25(s，3h)，2.53(m，2h)，2.25(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c19h20cln5o2的理论值；385.131，实验值(m+h+)；386.1。
步骤3：顺式-n-甲基-n-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基环丁烷-1,3-二胺盐酸盐
{顺式-3-[(2-氯-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)-氨基]环丁基}氨基甲酸酯(13.0g，34.0mmol)、pd(oh)2(40.3g，40.8mmol)和环己烯(72.5ml，0.71mol)于乙醇(300ml)中的混合物在回流的情况下搅拌3小时。反应混合物经
步骤4：2,2,2-三氟-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}乙烷磺酰胺
在室温下，在顺式-n-甲基-n-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基环丁烷-1,3-二胺盐酸盐(100mg，0.39mmol)于四氢呋喃(0.8ml)中所形成的溶液中加入双(三甲基硅基)氨化锂(1m的四氢呋喃溶液)(0.9ml，0.9mmol)和氯三甲基硅烷(94mg，0.88mmol)。搅拌反应混合物45分钟，接着缓缓加入2,2,2-三氟乙烷磺酰氯(86mg，0.47mmol)。混合物在室温下搅拌18小时，接着在二氯甲烷和水之间分配。水层经二氯甲烷萃取二次，浓缩合并的有机层，得粗产物的褐色固体。粗物质通过硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷和甲醇的混合物(93:7)洗脱，得标题化合物的白色固体(93mg，65％)。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ11.61(br.s.，1h)，8.20(d，1h)，8.08(s，1h)，7.13(d，1h)，6.60(d，1h)，4.80-4.94(m，1h)，4.34(q，2h)，3.58-3.71(m，1h)，3.23(s，3h)，2.55-2.67(m，2h)，2.17-2.30(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c13h16f3n5o2s的理论值；363.098，实验值(m+h+)；363.9。
下列化合物，实施例2-7，系由顺式-n-甲基-n-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基环丁烷-1,3-二胺盐酸盐(实施例1，步骤3)依与实施例1步骤4中所述类似的方法制备，以所示的磺酰氯替代2,2,2-三氟乙烷磺酰氯。
实施例2：n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-丙烷-1-磺酰胺
此化合物使用1-丙烷磺酰氯而制备。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷和甲醇的混合物(93:7)洗脱，得标题化合物的褐色固体(78％产率)。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ11.60(brs，1h)，8.08(s，1h)，7.46(d，1h)，7.12(d，1h)，6.61(d，1h)，4.81-4.94(m，1h)，3.47-3.62(m，1h)，3.23(s，3h)，2.87-2.96(m，2h)，2.52-2.63(m，2h)，2.14-2.27(m，2h)，1.60-1.73(m，2h)，0.96(t，3h)。lc/ms(精确质量)：c14h21n5o2s的理论值；323.142，实验值(m+h+)；324.1。
实施例3：2-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}丙烷-1-磺酰胺
此化合物使用2-甲基-1-丙烷磺酰氯而制备。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷和甲醇的混合物(93:7)洗脱，得标题化合物的白色固体(52％)。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ11.64(brs，1h)，8.12(s，1h)，7.51(d，1h)，7.03-7.26(m，1h)，6.65(d，1h)，4.82-5.02(m，1h)，3.52-3.70(m，1h)，3.26(s，3h)，2.87(d，2h)，2.55-2.67(m，2h)，2.18-2.30(m，2h)，2.11(dt，1h)，1.04(d，6h)。lc/ms(精确质量)：c15h23n5o2s的理论值；337.157，实验值(m+h+)；338.0。
实施例4a和实施例4b：顺式-和反式-3-(氰基甲基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷磺酰胺
这些化合物使用顺式-和反式-3-(氰基甲基)环丁烷磺酰氯的混合物(～1:1)而制备。顺式和反式异构体的粗质混合物通过硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷和甲醇的梯度(100:0至10:1)洗脱，得标题化合物的混合物(420mg)，为白色固体(67％)。顺式和反式异构体经超临界流体色谱法分离。
顺式-异构体4a：160mg(21％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.12(s，1h)，7.13-7.12(d，1h)，6.69-6.69(d，1h)，4.92-4.89(m，1h)，3.84-3.78(m，1h)，3.76-3.67(m，1h)，3.36(s，3h)，2.79-2.73(m，2h)，2.65-2.64(m，3h)，2.58-2.52(m，2h)，2.32-2.19(m，4h)。lc/ms(精确质量)：c17h22n6o2s的理论值；374.152，实验值(m+h+)；375.3。
反式-异构体4b：155mg(20％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.13(d，1h)，6.70(d，1h)，4.94-4.89(m，1h)，3.89-3.85(m，1h)，3.72-3.69(m，1h)，3.36(s，3h)，2.85-2.62(m，7h)，2.31-2.23(m，4h)。lc/ms(精确质量)：c17h22n6o2s的理论值；374.152，实验值(m+h+)；374.9。
顺式-和反式-3-(氰基甲基)环丁烷磺酰氯的混合物系由下列方法制备：
步骤1：[3-(苄氧基)亚环丁基]乙腈
在0℃下，在氢化钠(125mg，3.12mmol)于四氢呋喃(12ml)所形成的冷悬浮液中加入氰基甲基膦酸二乙酯(1.21g，3.40mmol)。混合物在室温下搅拌1小时，接着加入由3-(苄氧基)环丁酮(500mg，2.84mmol)于四氢呋喃(8ml)中所形成的溶液。混合物在室温下搅拌过夜，接着加入水以淬灭反应。混合物经乙酸乙酯(3×25ml)萃取，合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩。残余物通过硅胶色谱法，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(100:0至85:15)洗脱，得标题化合物(450mg，80％)，为黄色油状物。
步骤2：[3-(苄氧基)环丁基]乙腈
[3-(苄氧基)亚环丁基]乙腈(10.2g，51mmol)和10％pd/c(2.0g)于干四氢呋喃中的混合物以氢气加压至50psi，并在室温下搅拌3天。接着过滤混合物和在真空下浓缩。残余物通过硅胶色谱法，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(100:0至80:20)洗脱，得标题化合物(7g，70％)，为无色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ7.36-7.28(m，5h)，4.44-4.43(m，2h)，4.30-4.09(m，1h)，3.98-3.95(m，1h)，2.64-2.45(m，4h)，1.81-1.759(m，2h)。
步骤3：(3-羟基环丁基)乙腈
在0℃下，在[3-(苄氧基)环丁基]乙腈(1g，5.00mmol)于乙腈(15ml)中所形成的溶液中逐滴加入碘三甲基硅烷(1.5g，7.50mmol)。混合物在室温下搅拌过夜。于混合物中加入三乙胺以淬灭反应，浓缩，接着通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(1:0至1:1)洗脱，得标题化合物(340mg，62％)，为黄色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.55-4.15(m，1h)，2.49-2.46(m，2h)，2.25-2.21(m，2h)，2.14-2.08(m，1h)，1.79-1.72(m，2h)。
步骤4：4-甲基苯磺酸3-(氰基甲基)环丁酯
在(3-羟基环丁基)乙腈(333mg，3.0mmol)于干燥二氯甲烷(25ml)中所形成的溶液中加入4-二甲基氨基吡啶(732mg，6.0mmol)。混合物在室温下搅拌5分钟，接着加入对甲苯磺酰氯(859mg，4.5mmol)。所得的混合物在室温下搅拌过夜。以水(2×15ml)冲洗混合物。有机层经硫酸钠干燥和浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(10:0至7:3)洗脱，得标题化合物(520mg，65％产率)，为无色油状物。
步骤5：硫代乙酸s-[3-(氰基甲基)环丁基]酯
4-甲基苯磺酸3-(氰基甲基)环丁酯(1.5g，5.7mmol)和硫代乙酸钾(1.29g，3.00mmol)的混合物于n,n-二甲基甲酰胺(8ml)中在80℃下加热过夜。混合物经乙酸乙酯(15ml)稀释，以水(30ml)和盐水(2×30ml)冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩。残余物经制备型薄层色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯(3:1)的混合物洗脱，得标题化合物(750mg，78％)，为无色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.12-3.92(m，1h)，2.86-2.77(m，2h)，2.71-2.47(m，2h)，2.42-2.37(m，2h)，2.30-2.29(m，3h)，1.97-1.90(m，1h)。
步骤6：3-(氰基甲基)环丁烷磺酰氯
n-氯琥珀酰亚胺(1.6g，12.0mmol)于浓hcl(3ml)和乙腈(12ml)中的混合物在室温下搅拌10分钟。在0℃下，加入硫代乙酸s-[3-(氰基甲基)环丁基]酯(507mg，3.0mmol)于乙腈(3ml)中所形成的溶液并搅拌10分钟。混合物经碳酸氢钠水溶液(50ml)稀释，并以甲基叔丁基醚(3×50ml)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥及浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的混合物(100:0至50:50)洗脱，得标题化合物(400mg，69％)，为黄色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.45-4.40(m，1h)，3.06-2.71(m，3h)，2.61-2.49(m，4h)。
实施例5：1-[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲烷磺酰胺
此化合物系由[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]甲烷磺酰氯而制备。粗质化合物经制备型薄层色谱法纯化，以乙酸乙酯洗脱，得标题化合物的白色固体(32％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.14-7.13(m，1h)，6.71-6.70(m，1h)，5.06-5.05(m，1h)，4.85-4.81(m，2h)，4.52-4.50(m，2h)，3.77-3.75(m，1h)，3.63(m，2h)，3.39(s，3h)，3.29-3.26(m，2h)，2.85-2.78(m，2h)，2.38-2.30(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c17h22n6o3s的理论值；390.147，实验值(m+h+)；391.0。
[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]甲烷磺酰氯
步骤1：4-甲基苯磺酸[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]甲酯
此化合物根据实施例4步骤4的步骤以[3-(羟基甲基)-3-氧杂环丁烷基]乙腈替代(3-羟基环丁基)乙腈而而制备。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的混合物(1:0至1:1)洗脱，得标题化合物的白色固体(10％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ7.82-7.80(m，2h)，7.41-7.39(m，2h)，4.54-4.35(m，4h)，4.31(s，2h)，2.79(s，2h)，2.45(s，3h)。
步骤2：[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]甲基硫氰酸酯
搅拌4-甲基苯磺酸[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]甲酯(150mg，0.53mmol)和硫氰酸钾(104mg，1.07mmol)于乙醇(10ml)中所形成的溶液。将反应加热至85℃并搅拌16小时。蒸发溶剂，得粗质标题化合物的白色固体。
步骤3：[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]甲烷磺酰氯
在0℃下，将氯气气泡通入由[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]甲基硫氰酸酯(0.53mmol，粗产物)于水(10ml)中所形成的溶液历时30分钟。反应混合物经甲基叔丁基醚(2×20ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩，得标题化合物(20mg，18％)。
实施例6：n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-1-氧杂环丁烷-3-基甲烷磺酰胺
此化合物使用氧杂环丁烷-3-基甲烷磺酰氯而制备。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷和甲醇的混合物(85:15)洗脱，得标题化合物的白色固体(23％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(m，1h)，7.13(d，j＝4hz，1h)，6.70-6.69(m，j＝4hz，1h)，4.93-4.91(m,1h)，4.84-4.83(m，2h)，4.63-4.59(m，2h)，3.74-3.68(m，1h)，3.58-3.56(m，1h)，3.47-3.45(m，2h)，3.37(s，3h)，2.79-2.77(m，2h)，2.32-2.29(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c15h21n5o3s的理论值；351.136，实验值(m+h+)；352.1。
氧杂环丁烷-3-基甲烷磺酰氯
步骤1：氧杂环丁烷-3-基甲基硫氰酸酯
此化合物根据实施例5步骤2的步骤以4-甲基苯磺酸氧杂环丁烷-3-基甲酯(wo2012/117000a1)替代4-甲基苯磺酸[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]甲酯而制备，得粗质标题化合物的白色固体(100％)。
步骤2：氧杂环丁烷-3-基甲烷磺酰氯
根据实施例5步骤3的步骤以氧杂环丁烷-3-基甲基硫氰酸酯替代[3-(氰基甲基)氧杂环丁烷-3-基]甲基硫氰酸酯制得此化合物的粗质形式(25％产率)。
实施例7a和7b：顺式-和反式-3-(氰基甲基)-3-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷磺酰胺
这些化合物通过使用顺式-和反式-3-(氰基甲基)-3-甲基环丁烷磺酰氯的混合物(～1:1)而制备。顺式-和反式异构体的粗质混合物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚:乙酸乙酯的梯度(10:1至1:15)洗脱，得标题化合物的混合物(70mg)，为淡棕色固体(28％)。接着利用超临界流体色谱法(sfc)分离顺式和反式异构体。
顺式-异构体(7a)：26mg(10％)；sfc保留时间＝7.11分钟；1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.13-7.13(d，1h)，6.69(d，1h)，4.93-4.86(m，1h)，3.91-3.87(m，1h)，3.71-3.65(m，1h)，3.37-3.33(m，3h)，2.77-2.75(m，2h)，2.68(s，2h)，2.41-2.36(m，2h)，2.26-2.21(m，2h)，1.34(m，3h)。lc/ms(精确质量)：c18h24n6o2s的理论值；388.168，实验值(m+h+)；389.1。
反式-异构体(7b)24mg(10％)；sfc保留时间＝11.35分钟；1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.14(d，1h)，6.69(d，1h)，4.93-4.86(m，1h)，3.96-3.86(m，1h)，3.72-3.65(m，1h)，3.36-3.31(m，3h)，2.77-2.75(m，2h)，2.71(s，2h)，2.34-2.26(m，6h)，1.33(m，3h)。lc/ms(精确质量)：c18h24n6o2s的理论值；388.168，实验值(m+h+)；389.0。
顺式-和反式-3-(氰基甲基)-3-甲基环丁烷磺酰氯的混合物是依下列方法制备的：
步骤1：1-甲基-3-亚甲基环丁烷甲腈
在-78℃下，在3-亚甲基环丁烷甲腈(35.0g，373.0mmol)于四氢呋喃(200ml)中所形成的溶液中逐滴加入双(三甲基硅基)氨化锂(450ml，1m)。溶液在-78℃下搅拌1小时，将碘甲烷(30ml，448mmol)加至反应中。1小时后，混合物升温至室温并搅拌过夜。于反应混合物中加入氯化铵水溶液(380ml)以淬灭反应，并以甲基叔丁基醚(3×400ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩。粗产物在减压下蒸馏而纯化，得标题化合物(20g，50％)，为澄清油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.90-4.89(m，2h)，3.24-3.20(m，2h)，2.67-2.62(m，2h)，1.50(s，3h)。
步骤2：1-甲基-3-亚甲基环丁烷甲酸
在1-甲基-3-亚甲基环丁烷甲腈(10.0g，93.3mmol)于水(50ml)和乙醇(50ml)中所形成的溶液中加入氢氧化钾(25.6g，466.6mmol)。反应混合物经加热回流并搅拌过夜。在减压下去除乙醇，溶液冷却至低于10℃，以浓盐酸酸化至ph1。水层经乙酸乙酯(3×150ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩，得标题化合物(9g，77％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ11.90(s，1h)，4.88-4.85(m，2h)，3.23-3.17(m，2h)，2.53-2.41(m，2h)，1.45(s，3h)。
步骤3：1-甲基-3-亚甲基环丁烷甲酸乙酯
在0℃下，在1-甲基-3-亚甲基环丁烷甲酸(6g，47.6mmol)于二氯甲烷(30ml)中所形成的溶液中逐滴加入亚硫酰氯(11.0ml，143mmol)。溶液在0℃下搅拌1小时。在溶液中加入3滴n,n-二甲基甲酰胺。溶液在0℃下搅拌30分钟。蒸发溶剂，于残余物中加入二氯甲烷(20ml)和乙醇(125ml)。所得的溶液在室温下搅拌16小时。蒸发溶剂，于残余物中加入水(20ml)。水层经二氯甲烷(4×20ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(20:1至10:1)洗脱，得标题化合物(5g，68％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.85-4.83(m，2h)，4.17-4.12(m，2h)，3.18-3.12(m，2h)，2.48-2.42(m，2h)，1.41(s，3h)，1.27-1.23(m，3h)。
步骤4：(1-甲基-3-亚甲基环丁基)甲醇
1-甲基-3-亚甲基环丁烷甲酸乙酯(4.55g，29.5mmol)和氢化铝锂(2.8g，72mmol)于四氢呋喃(50ml)中的混合物在室温下搅拌过夜。于反应混合物中加入na2so4·10h2o(3.7g，11.5mmol)，所得的混合物在室温下搅拌1小时。过滤去除固体，滤液在真空下浓缩。残余物经二氯甲烷(3×50ml)萃取。合并的有机萃取液经硫酸钠干燥和浓缩，得标题化合物(2.6g，79％)，为无色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.79-4.78(m，2h)，3.48(s，2h)，2.53-2.48(m，2h)，2.36-2.27(m，2h)，1.16(s，3h)。
步骤5：4-甲基苯磺酸(1-甲基-3-亚甲基环丁基)甲酯
此化合物根据实施例4步骤4的步骤以(1-甲基-3-亚甲基环丁基)甲醇替代(3-羟基环丁基)乙腈而制备。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(20:1至4:1)洗脱，得标题化合物(70％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ7.79(d，2h)，7.34(d，2h)，4.79-4.78(m，2h)，3.90(s，2h)，2.51-2.47(m，2h)，2.44(s，3h)，2.35-2.31(m，2h)，1.15(s，3h)。
步骤6：(1-甲基-3-亚甲基环丁基)乙腈
4-甲基苯磺酸(1-甲基-3-亚甲基环丁基)甲酯(2.5g，9.4mmol)、氰化钾(1.3g，19mmol)和n,n-二甲基甲酰胺(8ml)的混合物在70℃下搅拌过夜。于混合物中加入水(10ml)和甲基叔丁基醚(20ml)，分离有机层。水层经甲基叔丁基醚(3×30ml)萃取。合并的有机层经饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)冲洗，以硫酸钠干燥，及浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(10:1至5:1)洗脱，得标题化合物(1.1g，97％)，为淡棕色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.88-4.87(m，2h)，2.62-2.54(m，2h)，2.50(s，2h)，1.33(s，3h)。
步骤7：(1-甲基-3-氧代环丁基)乙腈
在-78℃下，将臭氧气泡通入(1-甲基-3-亚甲基环丁基)乙腈(1.08g，8.91mmol)于二氯甲烷(30ml)中所形成的溶液中历时10分钟。以氮气冲刷溶液后，在-78℃下于溶液中逐滴加入二甲硫醚(10ml)。溶液在-78℃下搅拌30分钟，及在减压下去除溶剂。粗产物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(20:1至8:1)洗脱，得标题化合物(920mg，84％)，为无色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ3.11-3.06(m，2h)，2.96-2.91(m，2h)，2.69(s，2h)，1.53(s，3h)。
步骤8：(3-羟基-1-甲基环丁基)乙腈
在(1-甲基-3-氧代环丁基)乙腈(400mg，3.25mmol)于四氢呋喃(15ml)中所形成的溶液中加入氰硼化钠(246mg，6.5mmol)。混合物在室温下搅拌3小时。加入丙酮(2ml)，接着蒸发溶剂。于残余物中加入水(10ml)，水层经二氯甲烷(4×15ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(10:1至1:1)洗脱，得标题化合物(300mg，74％)，为无色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.38-4.34(m，2h)，2.46-2.27(m，4h)，1.94-1.86(m，2h)，1.33-1.12(m，3h)。
步骤9：4-甲基苯磺酸3-(氰基甲基)-3-甲基环丁酯
此化合物根据实施例7步骤5的步骤使用(3-羟基-1-甲基环丁基)乙腈替代(1-甲基-3-亚甲基环丁基)甲醇而制备。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(20:1至4:1)洗脱，得标题化合物(36％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ7.77(d，2h)，7.35(d，2h)，4.89-4.81(m，1h)，2.45(s，3h)，2.43-2.34(m，3h)，2.26-2.21(m，1h)，2.15-2.11(m，2h)，1.33(s，3h)。
步骤10：硫代乙酸s-[3-(氰基甲基)-3-甲基环丁基]酯
此化合物根据实施例4步骤5的步骤使用4-甲基苯磺酸3-(氰基甲基)-3-甲基环丁酯替代4-甲基苯磺酸3-(氰基甲基)环丁酯而制备，产率89％(粗产物)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ3.12(s，1h)，2.46-2.30(m，4h)，2.19(s，2h)，1.29(s，1h)，1.26-1.24(m，1h)，1.18-1.14(m，1h)，1.13(s，3h)。
步骤11：3-(氰基甲基)-3-甲基环丁烷磺酰氯
此化合物根据实施例4步骤6的步骤使用硫代乙酸s-[3-(氰基甲基)-3-甲基环丁基]酯替代硫代乙酸s-[3-(氰基甲基)-环丁基]酯而制备。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(90:10至30:70)洗脱，得标题化合物的黄色液体(66％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.45-4.38(m，1h)，2.67-2.55(m，4h)，2.46-2.40(m，2h)，1.42-1.40(m，3h)。
实施例8：4-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}吡啶-2-磺酰胺
步骤1：2-(苄硫基)异烟碱甲腈
将60％氢化钠的矿油悬浮液(8.36g，210.0mmol)悬浮于四氢呋喃(100ml)中。接着逐滴加入苄基硫醇(21.5g，173mmol)于四氢呋喃(50ml)中所形成的溶液。在添加期间形成浓稠淤浆。加入4-氰基-2-氯吡啶(12.5g，90.2mmol)，所得的混合物在室温下搅拌3小时。小心加入水以淬灭反应后，混合物在水和乙醚之间分配。乙醚层经饱和碳酸氢钠水溶液冲洗，以硫酸镁干燥和在减压下浓缩。于残余物中加入庚烷，快速地形成固体。过滤收集固体，以庚烷冲洗，及干燥，得标题化合物灰白色固体(33.02g，84％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ8.61(d，1h)，7.25-7.46(m，6h)，7.16-7.22(m，1h)，4.47(s，2h)。lc/ms(精确质量)：c13h10n2s的理论值；226.056，实验值(m+h+)；227.1。
步骤2：4-氰基吡啶-2-磺酰氯
在机械搅拌的2-(苄硫基)异烟碱甲腈(8.92g，39.4mmol)于二氯甲烷(139ml)和水(31ml)的混合物中逐滴加入硫酰氯(22.5ml，278mmol)，维持混合物的温度低于3℃。添加完成后，搅拌混合物30分钟且持续于冰浴中冷却。加入水(50ml)和冰(20g)的淤浆。水层经二氯甲烷萃取二次。合并的萃取液经硫酸镁干燥和在减压下浓缩，得粗质标题化合物。
步骤3：4-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}吡啶-2-磺酰胺
4-氰基吡啶-2-磺酰氯(9.7g，47.9mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中所形成的溶液在室温下加至由顺式-n-甲基-n-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基环丁烷-1,3-二胺盐酸盐(8.0g，36.8mmol)和4-二甲基氨基吡啶(150mg，0.03mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(90ml)中所形成的溶液中。加入二异丙基乙胺(13ml，77mmol)，所得的混合物在室温下搅拌2小时。混合物经乙酸乙酯(200ml)稀释，及加入饱和碳酸氢钠水溶液。加水以溶解沉淀的固体。水层经乙酸乙酯萃取3次。合并的有机萃取液经盐水冲洗4次，以无水硫酸镁干燥，及在减压下浓缩。于残余物中加入乙酸乙酯和己烷的1:1混合物。过滤收集固体，接着溶于二氯甲烷和最小量的甲醇中。使所得的溶液通过硅胶短柱，以5％甲醇/二氯甲烷溶液洗脱。蒸发溶剂，得到固体，在此固体中加入10％甲醇/二氯甲烷溶液。简单地搅拌混合物，接着使静置过夜。过滤固体，以二氯甲烷冲洗和干燥，得标题化合物(5.58g，39％)，为灰白色固体。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ11.62(br.s.，1h)，9.02(d，1h)，8.52(d，1h)，8.38(s，1h)，8.17(dd，1h)，8.07(s，1h)，7.10-7.15(m，1h)，6.59(dd，3.41hz，1h)，4.80-4.91(m，1h)，3.58-3.71(m，1h)，3.19(s，3h)，2.25-2.36(m，2h)，2.10(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c17h17n7o2s的理论值；383.116，实验值(m+h+)；384.1。
实施例9：3-(1-羟基-1-甲基乙基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺
步骤1：3-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}氨基)磺酰基]苯甲酸甲酯
在0℃下，在顺式-n-甲基-n-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基环丁烷-1,3-二胺盐酸盐(1.8g，8.29mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(100ml)所形成的悬浮液中分批加入三乙胺(6.7ml，49mmol)。在0℃下，加入3-(氯磺酰基)苯甲酸甲酯(2.3g，9.9mmol)。所得的混合物在室温下搅拌3小时。在真空下除去溶剂。残余物通过硅胶色谱法，以甲醇/二氯甲烷梯度(3％至10％)洗脱，得标题化合物(1.6g，47％)，为黄色固体。
步骤2：3-(羟基甲基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺
在0℃下，在3-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}氨基)磺酰基]苯甲酸甲酯(800mg，1.92mmol)于四氢呋喃(120ml)中所形成的溶液中加入氢化铝锂(0.25g，6.7mmol)。反应升温至25℃并搅拌3小时。在反应中加入水(2ml)以淬灭反应和搅拌15分钟。过滤反应混合物。滤饼于四氢呋喃(50ml)中搅拌并再次过滤。合并的滤液浓缩至干燥，得标题化合物(430mg，58％)，为黄色固体。
步骤3：3-甲酰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺
在3-(羟基甲基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺(400mg，1.03mmol)于氯仿(50ml)和甲醇(5ml)中所形成的溶液中加入二氧化锰(0.89g，10.0mmol)。反应混合物在25℃下搅拌过夜。过滤反应混合物，滤饼经氯仿(3×25ml)冲洗。浓缩合并的滤液。残余物通过硅胶色谱法，以甲醇/二氯甲烷梯度(2％至8％)洗脱，得标题化合物(240mg，60％)，为油状物。
步骤4：3-(1-羟基乙基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺
在0℃和氮气下，在3-甲酰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺(260mg，0.68mmol)于四氢呋喃(20ml)中所形成的溶液中加入溴化甲基镁(1.8ml，5.4mmol)。反应在25℃下搅拌过夜，接着加入氯化铵水溶液(10ml)以淬灭反应。反应混合物经乙酸乙酯(3×25ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩。残余物经制备型高效能液相色谱法纯化，得标题化合物(60mg，22％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ11.6(s，1h)，8.08(s，1h)，8.03(d，1h)，7.86(s，1h)，7.70(m，1h)，7.55(m，2h)，7.15(m，1h)，6.61(m，1h)，5.44(m，1h)，4.85(m，1h)，3.56(m，1h)，3.18(s，3h)，2.18(m，2h)，2.04(m，2h)，1.32(d，3h)。lc/ms(精确质量)：c19h23n5o3s的理论值；401.152，实验值(m+h+)；402.2。
步骤5：3-乙酰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺
在3-(1-羟基乙基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺(60mg，0.15mmol)于氯仿(30ml)和甲醇(5ml)中所形成的溶液中加入二氧化锰(190mg，2.2mmol)。反应混合物在45℃下搅拌过夜。接着过滤反应混合物，滤饼经氯仿(3×25ml)冲洗。浓缩合并的滤液。残余物经制备型高效能液相色谱法纯化，得标题化合物(15mg，25％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ11.58(s，1h)，8.31(s，1h)，8.21(m，2h)，8.16(m，2h)，7.76(m，1h)，7.09(d，1h)，6.56(s，1h)，4.82(m，1h)，3.54(m，1h)，3.14(s，3h)，2.81(m，3h)，2.26(m，2h)，1.98(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c19h21n5o3s的理论值；399.136，实验值(m+h+)；400.1。
步骤6：3-(1-羟基-1-甲基乙基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺
在0℃和氮气下，在3-乙酰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}苯磺酰胺(240mg，0.58mmol)于四氢呋喃(20ml)中所形成的溶液中加入溴化甲基镁(2.4ml，7.2mmol)。反应在25℃下搅拌2小时，加入氯化铵水溶液(10ml)以淬灭反应。反应混合物经乙酸乙酯(3×25ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩。残余物经制备型高效能液相色谱法纯化，得标题化合物(101mg，42％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ11.6(s，1h)，8.05(s，1h)，7.97(m，2h)，7.67(m，2h)，7.52(m，1h)，7.12(m，1h)，6.57(m，1h)，5.29(s，1h)，4.85(m，1h)，3.53(m，1h)，3.15(s，3h)，2.24(m，2h)，1.98(m，2h)，1.44(s，6h)。lc/ms(精确质量)：c20h25n5o3s的理论值；415.168，实验值(m+h+)；416.0。
实施例10：1-环丙基-n-{反式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲烷磺酰胺
此化合物系由[反式-3-(甲基氨基)-环丁基]氨基甲酸苄酯(实施例1步骤1)根据与实施例1步骤2和3所述类似的步骤而制备，得反式-n-甲基-n-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基环丁烷-1,3-二胺盐酸盐。在所得的盐酸盐(60mg，0.28mmol)的thf(10ml)溶液中加入碳酸钾(76mg，0.55mmol)、h2o(5ml)和环丙基甲烷磺酰氯(52mg，0.33mmol)。搅拌混合物2小时，以二氯甲烷稀释，以盐水冲洗，以硫酸钠干燥，过滤，和浓缩。粗产物经制备型高效能液相色谱法纯化，得标题化合物的白色固体(7mg；8％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.14(s，1h)，7.16(d，1h)，6.72(d，1h)，5.44-5.40(m，1h)，4.07-4.06(m，1h)，3.41(s，3h)，3.01-2.99(m，2h)，2.81-2.74(m，2h)，2.54-2.49(m，2h)，1.15-1.13(m，1h)，0.720-0.69(m，2h)，0.42-0.41(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c15h21n5o2s的理论值；335.142，实验值(m+h+)；336.1。
实施例11：n-{(1s,3r)-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环戊基}丙烷-1-磺酰胺
此化合物根据实施例10的步骤使用(1s,3r)-n-苄基-n'-甲基环戊烷-1,3-二胺替代[反式-3-(甲基氨基)-环丁基]氨基甲酸苄酯，使用(1r,3s)-n-甲基-n-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基环戊烷-1,3-二胺盐酸盐替代反式-n-甲基-n-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基环丁烷-1,3-二胺盐酸盐，及使用丙烷-1-磺酰氯替代环丙基甲烷磺酰氯而制备，得标题化合物的灰白色固体(11％)。粗质化合物经制备型高效能液相色谱法纯化。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.08(s，1h)，7.08(s，1h,)，6.65(s，1h)，5.27-5.23(m，1h)，3.81-3.76(m，1h)，3.31(s，3h)，2.33-2.29(m，1h)，2.13-2.04(m，1h)，1.98-1.92(m，2h)，1.82-1.75(m，4h)，1.06(t，3h)，0.42-0.41(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c15h23n5o2s的理论值；337.157，实验值(m+h+)；337.8。
(1s,3r)-n-苄基-n'-甲基环戊烷-1,3-二胺根据下列方法制备：
步骤1：[(1r,3s)-3-氨基环戊基]氨基甲酸苄酯
在室温下，将三氟乙酸(15ml，190mmol)加至由(1r,3s)-环戊烷-1,3-二基双氨基甲酸苄酯叔丁酯(依wo2011/086053a1所述制备)(5.02g，15.0mmol)于二氯甲烷(75ml)中所形成的溶液中。搅拌反应2小时及接着浓缩，得标题化合物的淡棕色油(6.70g，粗产物)。
步骤2：[(1r,3s)-3-(苄基氨基)环戊基]氨基甲酸苄酯
在室温下，将三乙酰氧基氢硼化钠(4.38g，20.0mmol)加至由[(1r,3s)-3-氨基环戊基]氨基甲酸苄酯(5.23g，15.0mmol)和苯甲醛(1.7ml，16.0mmol)于二氯甲烷(75ml)中所形成的溶液中。搅拌混合物21小时，接着加入1m氢氧化钠水溶液(75ml)以使溶液成为碱性。水层经二氯甲烷(2×25ml)萃取。合并的有机层经盐水(50ml)冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩。粗物质通过硅胶色谱法，以二氯甲烷和甲醇的混合物(100:0至88:12)洗脱，得标题化合物的黄色油状物(3.47g，71％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ7.35-7.31(m，5h)，7.30-7.26(m，5h)，5.07(s，2h)，4.17-4.07(m，1h)，3.76-3.68(m，2h)，3.27-3.20(m，1h)，2.02-1.51(m，6h)。
步骤3：(1s,3r)-n-苄基-n'-甲基环戊烷-1,3-二胺
在室温下，将氢化铝锂(1.02g，26.9mmol)分批加至由[(1r,3s)-3-(苄基氨基)环戊基]氨基甲酸苄酯(3.47g，10.7mmol)于四氢呋喃(70ml)中所形成的溶液中。加热反应混合物至使回流3.5小时。混合物接着于冰浴中冷却，依序加入水(1.0ml)、15％氢氧化钠水溶液(1.0ml)和水(3.0ml)以淬灭反应。悬浮液经乙酸乙酯稀释及以celite过滤。浓缩滤液，残余物置于0.5m盐酸水溶液中。混合物经乙醚(2×20ml)冲洗，并以氢氧化钠使水层溶液成为碱性(ph～11)。所得的混合物经二氯甲烷(3×25ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩。粗物质通过硅胶色谱法，以二氯甲烷和甲醇的混合物(90:10)洗脱，得标题化合物的黄色油状物(204mg，9％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ7.33-7.20(m，5h)，3.74(s，2h)，3.19-3.13(m，1h)，3.08-3.02(m，1h)，2.39(s，3h)，2.09-2.03(m，1h)，1.87-1.81(m，2h)，1.67-1.54(m，2h)，1.46-1.39(m，1h)。lc/ms(精确质量)：c13h20n2的理论值；204.163，实验值(m+h+)；205.1。
实施例12：1-(3,3-二氟环丁基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲烷磺酰胺
步骤1：[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]氨基甲酸苄酯
4-氯-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(15g，48.7mmol)和[顺式-3-(甲基氨基)环丁基]氨基甲酸苄酯(17.2g，63.5mmol)与异丙醇(180ml)和二异丙基乙胺(28ml，161mmol)混合。所得的淤浆在75℃下加热6小时。反应冷却至室温，过滤，以异丙醇(150ml)冲洗，于烘箱中在50℃下干燥，得标题化合物(23.5g，95％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ8.38(s，1h)，8.03(d，2h)，7.45(d，1h)，7.38-7.28(m，4h)，7.26(s，1h)，7.25(d，1h)，6.61(d，1h)，5.08(s，2h)，4.96(d，1h)，4.77(m，1h)，3.88(m，1h)，3.23(s，3h)，2.71(m，2h)，2.36(s，3h)，2.18(m，2h)。
步骤2：顺式-n-甲基-n-{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}环丁烷-1,3-二胺二氢溴酸盐
[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]氨基甲酸苄酯(15.2g，30.1mmol)悬浮乙酸乙酯(45ml)和乙酸(45ml)。在淤浆中缓缓加入4m的hbr的乙酸溶液(45ml，180mmol)，维持温度低于25℃。所得的淤浆在室温下搅拌2小时。过滤收集固体，以乙酸乙酯(450ml)冲洗，及在40℃干燥，得标题化合物(16g；100％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ8.31(s，1h)，8.20(s，2h)，7.97(d，2h)，7.72(d，1h)，7.44(d，2h)，7.08(d，1h)，4.93(m，1h)，3.54(m，1h)，3.30(s，3h)，2.50(m，4h)，2.35(s，3h)。lc/ms(精确质量)：c18h21n5o2s的理论值；371.142，实验值(m+h+)；372.1。
步骤3：({[(3,3-二氟环丁基)甲基]硫基}甲基)苯
4-甲基苯磺酸(3,3-二氟环丁基)甲酯(参见wo2010/032200a1)(4g，14.5mmol)、亚氨基硫氨基甲酸苄酯(benzylimidothiocarbamate)(3.53g，17.4mmol)、氢氧化钠溶液(1.45g，36.2mmol，溶于16ml水)和n,n-二甲基甲酰胺(16ml)的混合物在60℃下搅拌16小时。加入水(40ml)和乙酸乙酯(150ml)。有机层经水(40ml)冲洗，分层，以硫酸钠干燥和浓缩。残余物通过硅胶色谱法，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(100:0至95:5)洗脱，得标题化合物的无色油状物(3.2g，81％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ7.34-7.24(m，5h)，5.71(s，2h)，2.71-2.61(m，2h)，2.57-2.55(m，2h)，2.30-2.14(m，3h)。
步骤4：(3,3-二氟环丁基)甲烷磺酰氯
此化合物根据实施例8步骤2的方法使用硫代乙酸s-[3-(氰基甲基)-3-甲基环丁基]酯替代2-(苄硫基)异烟碱甲腈而制备，得标题化合物的无色油状物(93％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ3.88-3.86(m，2h)，3.03-2.94(m，3h)，2.61-2.49(m，2h)。
步骤5：1-(3,3-二氟环丁基)-n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲烷磺酰胺
在0℃下，(3,3-二氟环丁基)甲烷磺酰氯(2.5g，12.19mmol)于10ml二氯甲烷所形成的溶液逐滴加至由顺式-n-甲基-n-{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}环丁烷-1,3-二胺二氢溴酸盐(3.25g，6.10mmol)和三乙胺(3.08g，30.49mmol)于二氯甲烷(150ml)中所形成的溶液中历时15分钟。反应在室温下搅拌4小时。加入水(50ml)，和分离有机层。水层经二氯甲烷(2×150ml)萃取，合并分离出的有机层，以硫酸钠干燥。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷和甲醇的梯度(100:0至90:10)洗脱，得标题化合物的白色固体(2.0g，61％)。lc/ms(精确质量)：c23h27f2n5o4s2的理论值；539.147，实验值(m+h+)；540.1。
步骤6：1-(3,3-二氟环丁基)-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲烷磺酰胺
1-(3,3-二氟环丁基)-n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲烷磺酰胺(2g，3.71mmol)和氢氧化锂单水合物(780mg，18.6mmol)于乙醇(40ml)和水(20ml)中所形成的溶液在60℃下搅拌4小时。蒸发乙醇，残余的水层经盐酸中和至ph7，接着以二氯甲烷(2×200ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并以制备型高效能液相色谱法纯化，得标题化合物(800mg，56％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.15(s，1h)，8.13(s，1h)，7.16-7.15(m，1h)，6.73-6.62(m，1h)，4.95-4.88(m，1h)，3.73-3.71(m，1h)，3.38(s，3h)，3.28-3.26(m，2h)，2.87-2.78(m，4h)，2.63-2.61(m，1h)，2.56-2.48(m，2h)，2.35-2.28(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c16h21f2n5o2s的理论值；385.138，实验值(m+h+)；386.1。
下列化合物，实施例13-14，系由顺式-n-甲基-n-{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}环丁烷-1,3-二胺二氢溴酸盐(实施例12步骤2)根据与实施例12步骤5所述类似的方法使用所指明的磺酰氯替代(3,3-二氟环丁基)甲烷磺酰氯及使用实施例12步骤6所述的脱保护方法而制备。
实施例13：3,3-二氟-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}环丁烷磺酰胺
此化合物使用3,3-二氟环丁烷磺酰氯依据pct公开案wo2011/068881所述的步骤而制备。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(80:20至10:90)洗脱，得标题化合物的灰白色固体(2步骤共22％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.13(d，1h)，6.70(d，1h)，4.86-4.81(m，1h)，3.78-3.72(m，2h)，3.35(s，3h)，3.01-2.93(m，4h)，2.78-2.76(m，2h)，2.32-2.25(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c15h19f2n5o2s的理论值；371.123，实验值(m+h+)；372.1。
实施例14：1-环丙基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲烷磺酰胺
此化合物使用环丙基甲烷磺酰氯而制备，为白色固体(2步骤共73％)。1hnmr(400mhz，dmso-d6)：δ11.64(br.s.，1h)，8.11(s，1h)，7.53(d，1h)，7.12-7.19(m，1h)，6.64(m，1h)，4.84-4.97(m，1h)，3.54-3.70(m，1h)，3.26(s，3h)，2.93(d，2h)，2.55-2.66(m，2h)，2.29-2.22(m，2h)，0.96-1.09(m，1h)，0.53-0.64(m，2h)，0.29-0.39(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c15h19f2n5o2s的理论值；335.142，实验值(m+h+)；336.0。
实施例15：1-环丙基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}氮杂环丁烷-3-磺酰胺
步骤1：3-({[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]氨基}磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
顺式-n-甲基-n-{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}环丁烷-1,3-二胺二氢溴酸盐(7.0g，18.8mmol)通过于过量1n氢氧化钠水溶液中搅拌3分钟及接着萃取至二氯甲烷而成为游离碱。有机层经硫酸钠干燥和浓缩。残留的游离碱置于二氯甲烷(200ml)中，冷却至0℃，并以三乙胺(13ml，94mmol)和3-(氯磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯处理。反应在室温下搅拌10分钟。粗质混合物经水和盐水冲洗，接着以硫酸钠干燥和浓缩，得粗产物的白色固体。使用二氯甲烷和乙醚的混合物使固体结晶，得标题化合物的白色固体(9.61g，90％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.19(s，1h)，7.92-8.01(m，2h)，7.54(d，1h)，7.35(d，2h)，6.86(d，1h)，4.76-4.65(m，1h)，4.18(br.s.，2h)，3.99-4.10(m，3h)，3.66-3.78(m，1h)，3.25(s，3h)，2.64-2.78(m，2h)，2.37(s，3h)，2.10-2.25(m，2h)，1.41(s，9h)。lc/ms(精确质量)：c26h34n6o6s2的理论值；590.198，实验值(m+h+)；591.45。
步骤2：n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]氮杂环丁烷-3-磺酰胺
在0℃下，乙酰氯(0.20ml，2.8mmol)加至由3-({[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]氨基}磺酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.64g，2.78mmol)于无水二氯甲烷(18ml)和甲醇(7ml)中所形成的溶液中。反应混合物在室温下搅拌16小时。过滤出白色沉淀物并将的置于饱和碳酸氢钠水溶液(20ml)中。所得的溶液经二氯甲烷(3×20ml)萃取，合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩，得标题化合物(810mg，60％)，为白色固体。lc/ms(精确质量)：c21h26n6o4s2的理论值；490.146，实验值(m+h+)；491.0。
步骤3：1-环丙基-n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]氮杂环丁烷-3-磺酰胺
n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]氮杂环丁烷-3-磺酰胺(810mg，1.65mmol)、甲醇(10ml)、分子筛和[(1-乙氧基环丙基)氧基](三甲基)硅烷(0.53ml，2.64mmol)于可密封的反应容器中混合。反应容器经氮气冲刷及加入乙酸(1.28ml，8.26mmol)。密封反应容器，接着在80℃下加热2小时。混合物冷却至室温后，加入氰基氢硼化钠(273mg，4.13mmol)。再次密封反应容器，缓缓加热至40℃历时1.5小时。粗质混合物经celite垫过滤，以甲醇冲洗。浓缩滤液，及将残余物置于饱和碳酸氢钠水溶液中。所得的溶液经二氯甲烷(5×20ml)萃取，合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩，得标题化合物(576mg，74％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.23(s，1h)，7.95-8.05(m，2h)，7.58(d，1h)，7.39(d，2h)，6.90(d，1h)，4.69-4.83(m，1h)，3.94-4.09(m，1h)，3.65-3.75(m，3h)，3.54-3.64(m，2h)，3.29(s，3h)，2.67-2.79(m，2h)，2.41(s，3h)，2.15-2.29(m，2h)，2.02-2.15(m，1h)，0.43-0.51(m，2h)，0.29-0.39(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c24h30n6o4s2的理论值；530.177，实验值(m+h+)；531.0。
步骤4：1-环丙基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}氮杂环丁烷-3-磺酰胺
碳酸铯(976mg，3.0mmol)于水(5ml)中所形成的溶液加至由1-环丙基-n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]氮杂环丁烷-3-磺酰胺(530mg，1.0mmol)于乙醇(10ml)中所形成的溶液中。反应混合物经加热回流16小时。去除溶剂后，残余物置于水中，并以二氯甲烷和甲醇的混合物(96:4；3×10ml)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩。粗质固体以甲醇结晶，得标题化合物(225mg，59％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.10(s，1h)，7.09(d，1h)，6.66(d，1h)，4.88-4.80(m，1h)，4.03-3.96(m，1h)，3.73-3.65(m，3h)，3.61-3.57(m，2h)，3.32(s，3h)，2.77-2.68(m，2h)，2.28-2.19(m，2h)，2.08-2.03(m，1h)，0.46-0.41(m，2h)，0.34-0.31(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c17h24n6o2s的理论值；376.168，实验值(m+h+)；377.0。
实施例16：n-(环丙基甲基)-n'-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}磺酰胺
步骤1：n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-2-氧代-1,3-
在0℃下，在氯磺酰基异氰酸酯(1.76ml，20.6mmol)于二氯甲烷(150ml)中所形成的溶液中逐滴加入由2-溴乙醇(1.43ml，20.6mmol)于二氯甲烷(80ml)中所形成的溶液。在0℃下30分钟后，逐滴加入顺式-n-甲基-n-{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}环丁烷-1,3-二胺二氢溴酸盐(11.0g，20.6mmol)和三乙胺(10.42g，103.2mmol)于干燥二氯甲烷(80ml)中所形成的溶液，及使反应混合物升温至室温过夜。反应溶液溶于二氯甲烷(1l)，以1m盐酸水溶液(2×800ml)和盐水(500ml)冲洗。溶液经硫酸钠干燥和浓缩，得标题化合物的白色固体(8.5g，79％)。1hnmr(400mhz，cd3od)：δ8.22(s，1h)，8.00(d，2h)，7.58(d，1h)，7.38(d，2h)，6.91(d，1h)，4.88(m，1h)，4.45-4.41(m，2h)，4.06-4.02(m，2h)，3.75(m，1h)，3.29(s，3h)，2.72-2.69(m，2h)，2.40(s，3h)，2.30-3.27(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c21h24n6o6s2的理论值；520.120，实验值(m+h+)；521.4。
步骤2：n-(环丙基甲基)-n'-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]磺酰胺
n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-2-氧代-1,3-
步骤3：n-(环丙基甲基)-n'-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}磺酰胺
n-(环丙基甲基)-n'-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]磺酰胺(146mg，0.29mmol)和氢氧化锂单水合物(48mg，1.15mmol)于乙醇(5ml)和水(2.5ml)中所形成的溶液在100℃下搅拌1小时。反应混合物在真空下浓缩和粗产物经制备型高效能液相色谱法纯化，得标题化合物(14mg，14％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.12(s，1h)，7.13(d，1h)，6.90(d，1h)，4.90-4.86(m，1h)，3.63-3.59(m，1h)，3.37(s，3h)，2.85-2.83(m，2h)，2.78-2.71(m，2h)，2.33-2.26(m，2h)，1.05-1.03(m，1h)，0.57-0.52(m，2h)，0.30-0.25(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c15h22n6o2s的理论值；350.152，实验值(m+h+)；351.2。
下列化合物，实施例17-18，系由n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-2-氧代-1,3-
实施例17a和17b：(r)-和(s)-3-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}吡咯烷-1-磺酰胺
这些化合物使用外消旋吡咯烷-3-甲腈盐酸盐而制备。粗质外消旋混合物系利用高效能液相色谱法纯化，得白色固体(60mg，2步骤共52％)。利用超临界流体色谱法分离对映异构体。
对映异构体a(17a)：24mg(21％)；1hnmr(400mhz，cd3od)：δ8.13(s，1h)，7.13(d，j＝3.2hz，1h)，6.69(d，1h，j＝3.6hz，1h)，4.87-4.84(m，1h)，3.73-3.67(m，1h)，3.65-3.57(m，1h)，3.53-3.50(m，2h)，3.48-3.44(m，2h)，3.405(s，3h)，2.77-2.75(m，2h)，2.42-2.20(m，4h)。lc/ms(精确质量)：c16h21n7o2s的理论值；375.148，实验值(m+h+)；376.1。手性hplc保留时间＝5.97分钟。
对映异构体b(17b)：25mg(21％)；1hnmr(400mhz，cd3od)：δ8.13(s，1h)，7.13(d，j＝3.2hz，1h)，6.69(d，1h，j＝3.6hz，1h)，4.87-4.84(m，1h)，3.73-3.67(m，1h)，3.65-3.57(m，1h)，3.53-3.50(m，2h)，3.48-3.44(m，2h)，3.405(s，3h)，2.77-2.75(m，2h)，2.42-2.20(m，4h)。lc/ms(精确质量)：c16h21n7o2s的理论值；375.148，实验值(m+h+)；376.1。手性hplc保留时间＝5.16分钟。
实施例18：2-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}2,6-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4h)-磺酰胺
此化合物使用2-甲基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-c]吡唑盐酸盐而制备。粗质化合物经高效能液相色谱法纯化，得标题化合物的灰白色固体(2步骤共24％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.08(s，1h)，7.38(s，1h)，7.10(d，1h)，6.66(d，1h)，4.87-4.86(m，1h)，4.42-4.41(m，4h)，3.87(s，3h)，3.71-3.67(m，1h)，3.31(s，3h)，2.68-2.61(m，2h)，2.27-2.22(m，3h)。lc/ms(精确质量)：c17h22n8o2s的理论值；402.159，实验值(m+h+)；403.2和(m+na)；425.1。
实施例19：n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-磺酰胺
步骤1：n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-磺酰胺
n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-2-氧代-1,3-
步骤2：n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-磺酰胺
n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-磺酰胺(229mg，0.43mmol)加至1m氟化四丁铵的四氢呋喃溶液(6.5ml，6.4mmol)中。反应在室温下搅拌10小时。浓缩混合物，残余物通过硅胶色谱法，以甲醇和乙酸乙酯的混合物(1:9)洗脱。单离出黄色油状物，将此油状物与乙酸乙酯和庚烷的混合物一起碾制至得黄色固体。固体在乙酸乙酯和水之间分配。水层经乙酸乙酯萃取，合并的有机层经盐水冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩，得灰白色固体。将此固体先以乙醚接着以异丙醇碾制，得标题化合物的白色固体(14mg，9％)。1hnmr(cd3od)δ8.08(s，1h)，7.09(d，1h)，6.66(s，1h)，4.90-4.81(m，1h)，4.62(d，2h)，3.86-8.84(m，1h)，3.66(t，1h)，3.56-3.49(m，3h)，3.33(s，3h)，3.19-3.13(m，1h)，2.75-2.70(m，2h)，2.32-2.24(m，2h)，2.05-2.03(d，1h)。lc/ms(精确质量)：c16h22n6o3s的理论值；378.147，实验值(m+h+)；379.5。
下列化合物，实施例20-24，系由n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-2-氧代-1,3-
实施例20：3-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}氮杂环丁烷-1-磺酰胺
此化合物使用氮杂环丁烷-3-甲腈而制备。粗质化合物经高效能液相色谱法纯化，得标题化合物的白色固体(2步骤共23％)。1hnmr(400mhz，cd3od)：δ8.10(s，1h)，7.11(d，1h)，6.68(d，1h)，4.80(m，1h)，4.02(m，2h)，3.90(m，2h)，3.58(m，2h)，3.32(s，3h)，2.72(m，2h)，2.25(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c15h19n7o2s的理论值；361.132，实验值(m+h+)；362.1。
实施例21：n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-4-(1h-吡唑-3-基)哌啶-1-磺酰胺
此化合物使用而制备4-(1h-吡唑-3-基)哌啶。粗质化合物通过硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷和甲醇的混合物(9:1)洗脱。单离出的物质先经乙醚接着以乙酸乙酯碾制，得标题化合物的白色固体(2步骤共10％)。1hnmr(300mhz，cd3od)：δ8.09(s，1h)，7.48(s，1h)，7.12-7.05(m，1h)，6.71-6.60(m，1h)，6.22-6.08(m，1h)，4.92-4.73(m，1h)，3.80-3.55(m，3h)，3.41(s，3h)，2.90-2.65(m，5h)，2.38-2.19(m，2h)，2.09-1.90(m，2h)和1.83-1.65(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c19h26n8o2s的理论值；430.190，实验值(m+h+)；431.1。
实施例22：n-(2-氰基乙基)-n-甲基-n'-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}磺酰胺
此化合物使用3-甲基氨基丙腈而制备。粗质化合物经高效能液相色谱法纯化，得标题化合物(2步骤共7％)。lc/ms(精确质量)：c15h21n7o2s的理论值；363.148，实验值(m+h+)；364.0。
实施例23和27：(1s,5s)-1-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-磺酰胺和(1r,5r)-1-氰基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-磺酰胺
这些化合物使用外消旋3-氮杂双环[3.1.0]己烷-1-甲腈而制备。粗质外消旋化合物通过硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷和甲醇的梯度(30:1至5:1)洗脱，为白色固体(92mg，2步骤共21％)。利用超临界流体色谱法分离出标题的对映异构体。
对映异构体23：41mg(9％)；sfc保留时间＝4.28分钟；1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.13(d，1h)，6.70(d，1h)，4.61(s，1h)，3.57-3.72(m，2h)，3.43-3.51(m，3h)，3.36(s，3h)，2.70-2.77(m，2h)，2.24-2.38(m，3h)，1.41-1.48(m，1h)，1.32(t，1h)。lc/ms(精确质量)：c17h21n7o2s的理论值；387.148，实验值(m+h+)；388.1。
对映异构体27：40mg(9％)；sfc保留时间＝4.84分钟1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.13(d，1h)，6.70(d，1h)，4.61(s，1h)，3.57-3.72(m，2h)，3.43-3.51(m，3h)，3.36(s，3h)，2.70-2.77(m，2h)，2.24-2.38(m，3h)，1.41-1.48(m，1h)，1.32(t，1h)。lc/ms(精确质量)：c17h21n7o2s的理论值；387.148，实验值(m+h+)；388.1。
外消旋3-氮杂双环[3.1.0]己烷-1-甲腈系依下列方法而制备。
步骤1：外消旋rac-1-甲酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯
1,1,1-三乙酰氧基-1,1-二氢-1,2-苯并二恶茂(benziodoxol)-3(1h)-酮(6.5g，15.2mmol)加至由外消旋1-(羟基甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(synlett2009，921)(2.5g，11.7mmol)于无水二氯甲烷(60ml)中所形成的溶液中。反应混合物在室温下搅拌2小时。混合物经二氯甲烷(60ml)稀释，以饱和亚硫酸钠水溶液、饱和碳酸氢钠(30ml)和盐水(50ml)冲洗。有机层经硫酸钠干燥和浓缩，得标题化合物的无色油状物(1.7g，68％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ9.01(d，1h)，3.83(d，1h)，3.68(t，1h)，3.59(dd，1h)，3.50-3.36(m，1h)，2.25-2.09(m，1h)，1.63(t，1h)，1.43(s，9h)，1.19-1.06(m，1h)。
步骤2：外消旋1-[(羟基亚氨基)甲基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯
在室温下，碳酸钾(3.89g，28.2mmol)和羟基胺盐酸盐(671mg，9.7mmol)加至由外消旋1-甲酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(1.7g，8.05mmol)于无水二氯甲烷(40ml)中所形成的溶液中，接着搅拌16小时。混合物经乙酸乙酯(80ml)稀释，并以水(30ml)和盐水(30ml)冲洗。有机层经硫酸钠干燥和浓缩。残余物通过硅胶色谱法，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(0:100至83:17)洗脱，得标题化合物的黄色油状物(1.6g，88％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ7.18(s，1h)，3.74-3.55(m，3h)，3.44-3.40(m，1h)，1.74-1.72(m，1h)，1.44(s，9h)，1.10(t，1h)，0.86-0.83(m，1h)。
步骤3：外消旋1-氰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯
在外消旋1-[(羟基亚氨基)甲基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(925mg，4.09mmol)于无水四氢呋喃(100ml)中所形成的溶液中加入n-(三乙铵基磺酰基)氨基甲酸甲酯(2.92g，12.3mmol)。反应混合物经加热回流3小时。蒸发溶剂后，残余物通过硅胶色谱法，以石油醚和乙酸乙酯的混合物(5:1)洗脱，得标题化合物的无色油状物(570mg，67％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ3.84(dd，1h)，3.64(dd，1h)，3.50(d，1h)，3.46(dd，1h)，2.21-2.12(m，1h)，1.44(s，9h)，0.96(t，1h)。
步骤4：外消旋3-氮杂双环[3.1.0]己烷-1-甲腈
外消旋1-氰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯于三氟乙酸(1ml)和二氯甲烷(10ml)中所形成的溶液在室温下搅拌1小时。去除溶剂，得标题化合物(205mg，100％)，为棕色油状物。
实施例24：外消旋3-氰基-n-{反式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}吡咯烷-1-磺酰胺
此化合物系依据实施例10的步骤使用3-氰基吡咯烷-1-磺酰氯取替环丙基甲烷磺酰氯而制备。粗产物经制备型高效能液相色谱法纯化，得标题化合物的灰白色固体(5％)。1hnmr(400mhz，cd3od)：δ8.13(s，1h)，7.14(d，1h)，6.67(d，1h)，5.45-5.41(m，1h)，4.00-3.64(m，1h)，3.62-3.52(m，1h)，3.51-3.47(m，2h)，3.45-3.39(m，2h)，3.369(s，3h)，2.78-2.70(m，2h)，2.53-2.47(m，2h)，2.39-2.36(m，1h)，2.27-2.24(m，1h)。lc/ms(精确质量)：c16h21n7o2s的理论值；375.148，实验值(m+h+)；375.9。
外消旋3-氰基吡咯烷-1-磺酰氯
在-78℃下，将外消旋吡咯烷-3-甲腈(53mg，0.4mmol)和三乙胺(101g，1mmol)于干燥二氯甲烷(1.0ml)中所形成的溶液逐滴加至搅拌中的由硫酰氯(64.8mg，0.48mmol)于二氯甲烷(3.0ml)中所形成的溶液中。反应在-78℃下搅拌30分钟，接着使其升温至室温历时1小时。反应溶液经1m盐酸水溶液(5ml)和盐水(5ml)冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩，得标题化合物的无色油状物(68mg，粗产物)。
实施例25：n-(顺式-3-{[(4,4-二氟哌啶-1-基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
步骤1：顺式/反式-3-[(叔丁氧羰基)氨基]环丁烷甲酸乙酯
在0℃下，在顺式-和反式-3-氨基环丁烷甲酸乙酯盐酸盐混合物(顺式/反式＝10:1)(wo2009/60278)(10g，55.7mmol)和三乙胺(19.4ml，139.1mmol)于二氯甲烷(370ml)中所形成的溶液中逐滴加入二碳酸二(叔丁酯)(15.8g，72.3mmol)。添加完成后，混合物在室温下搅拌过夜。在减压下蒸发溶剂，所得的残余物通过硅胶色谱法，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(10:1至3:1)洗脱，得标题混合物的白色固体(19g，92％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ4.77(s，1h)，4.13(q，3h)，2.68-2.82(m，1h)，2.60(d，2h)，1.99-2.17(m，2h)，1.43(s，9h)，1.25(t，3h)。
步骤2：顺式/反式-[3-(甲基氨基)环丁基]甲醇
氢化铝锂(9.14g，240.4mmol)悬浮于干燥四氢呋喃(350ml)中。混合物冷却至0℃，于其中逐滴加入由顺式/反式-3-[(叔丁氧羰基)氨基]环丁烷甲酸乙酯(顺式/反式＝10:1)(11.7g，48.1mmol)于干燥四氢呋喃(170ml)中所形成的溶液。添加完成后，所得的混合物经回流加热过夜。冷却至室温后，反应经四氢呋喃(1.5l)稀释，接着冷却至0～5℃。加入小份量na2so4·10h2o直到不再产生气体。过滤混合物以去除固体，以更多的四氢呋喃(500ml)冲洗固体。浓缩滤液至干燥，得标题混合物(顺式/反式＝10:1)的油状物(10g，>100％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ3.58(d，j＝3.8hz，2h)，3.06-3.17(m，1h)，2.34-2.43(m，3h)，2.32(s，3h)，1.48-1.57(m，2h)。
步骤3：顺式/反式-[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲醇
碘化钾(173mg)和三乙胺(13ml，93.8mmol)加至由顺式/反式-[3-(甲基氨基)环丁基]甲醇(6.0g，52.1mmol)于丙酮(250ml)中所形成的溶液中。接着加入4-氯-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(14.4g，46.9mmol)，所得的混合物经回流加热过夜。在减压下蒸发溶剂后，残余物经二氯甲烷(500ml)稀释。溶液依序经水(300ml)、2％柠檬酸(300ml)和盐水(300ml)冲洗，接着以硫酸钠干燥。过滤后，溶液经过滤和浓缩，得标题混合物的淡色固体(15.3g，85％)。顺式/反式-[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)-环丁基]甲醇混合物的一部分(5.0g)使用chiralpak-ad柱利用超临界流体色谱法而分离：
顺式异构体，4.6g：1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.20(s，1h)，7.98(d，2h)，7.53(d，1h)，7.34(d，2h)，6.83(d，2h)，4.99-4.95(m，1h)，3.56(d，j＝5.6hz，1h)，3.24(s，3h)，2.36(s，3h)，2.34-2.28(m，2h)，2.24-2.19(m，1h)，2.11-2.03(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c19h22n4o3s的理论值：386.14，实验值(m+h+)：387.3。
反式异构体，0.4g：1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.20(s，1h)，7.98(d，2h)，7.55(d，1h)，7.35(d，2h)，6.84(d，2h)，5.26-5.22(m，1h)，3.69(d，1h)，3.30(s，3h)，2.46-2.41(m，3h)，2.39(s，3h)，2.19-2.14(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c19h22n4o3s的理论值：386.14，实验值(m+h+)：387.3。
步骤4：顺式-4-甲基苯磺酸[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲酯
在0℃下，在顺式-[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲醇(20g，51.8mmol)和n,n-二甲基氨基吡啶(12.6g，103.6mmol)于二氯甲烷(500ml)中所形成的溶液中加入对甲苯磺酰氯(14.8g，77.7mmol)。反应混合物在室温下搅拌16小时，接着以水(500ml)冲洗。合并的水性洗液经二氯甲烷(2×800ml)萃取。合并的有机层经干燥、过滤和在真空下浓缩。残余物通过硅胶色谱法，以二氯甲烷和甲醇的梯度(100:0至95:5)洗脱，得标题化合物(23g，82％)，为白色固体。lc/ms(精确质量)：c26h28n4o5s2的理论值：540.150，实验值(m+h+)：541.3。
步骤5：硫代乙酸s-{[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲基}酯
在室温下，在硫代乙酸钾(678mg，5.93mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中所形成的溶液中逐滴加入由4-甲基苯磺酸[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲酯(2.0g，3.70mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(6ml)中所形成的溶液历时5分钟。接着混合物在50-55℃下加热过夜。混合物冷却至室温，将混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液(60ml)中以淬灭反应。混合物经乙酸乙酯(3×30ml)萃取，合并的有机层经水(3×30ml)和盐水(30ml)冲洗。以na2so4干燥后，浓缩溶液。残余物通过硅胶色谱法，以二氯甲烷和甲醇的梯度(100:0至80:20)洗脱，得标题化合物(1.2g，73％)，为黄色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ8.39(s，1h)，8.04(d，2h)，7.45(d，1h)，7.27(d，2h)，6.63(d，1h)，4.98-4.88(m，1h)，3.22(s，3h)，3.02-3.00(m，2h)，2.45-2.44(m，2h)，2.47(m，3h)，2.22(m，3h)，2.21-2.24(m，1h)，1.92-1.87(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c21h24n4o3s2的理论值：444.129，实验值(m+h+)：445.1。
步骤6：[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲烷磺酸
在室温下，在硫代乙酸s-{[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲基}酯(580mg，1.31mmol)于甲酸(10ml)中所形成的溶液中加入30％过氧化氢水溶液(0.7ml，6.92mmol)。所得的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入33％硫酸氢钠水溶液(1.12ml)中，接着搅拌10分钟。接着加入33％氢氧化钠水溶液(1.8ml)以调整至ph5。所得的混合物在室温下搅拌1小时。过滤收集固体，以水(10ml)冲洗，及在约60℃下真空干燥，得标题化合物(634mg，粗产物)，为白色固体。lc/ms(精确质量)：c19h22n4o5s2的理论值；450.103，实验值(m+h+)；451.3。
步骤7：顺式-[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲烷磺酰氯
在0℃下，将亚硫酰氯(0.3ml，3.33mmol)逐滴加至由顺式-[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲烷磺酸(150mg，0.33mmol)于二氯甲烷(20ml)中所形成的溶液中历时5分钟。于溶液中加入2滴n,n-二甲基甲酰胺，接着溶液在75℃下加热2小时。冷却混合物及蒸发溶剂。残余物经无水二氯甲烷(3×10ml)冲洗，得粗质标题化合物(170mg)，为黄色固体。lc/ms(精确质量)：c19h21cln4o4s2的理论值；468.069，实验值(m+h+)；469.2。
步骤8：n-(顺式-3-{[(4,4-二氟哌啶-1-基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
在0℃下，将4,4-二氟哌啶(77mg，0.64mmol)和三乙胺(97mg，0.96mmol)于四氢呋喃(20ml)的混合物逐滴加至由顺式-[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲烷磺酰氯(150mg，0.320mmol)于四氢呋喃(10ml)中所形成的溶液中。使混合物升温至室温历时过夜。蒸发溶剂，残余物置于乙酸乙酯(80ml)。溶液经盐水(30ml)冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩，得粗质标题化合物(134mg)，为白色固体。lc/ms(精确质量)：c24h29f2n5o4s2的理论值；553.651，实验值(m+h+)；554.3。
步骤9：n-(顺式-3-{[(4,4-二氟哌啶-1-基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
n-(顺式-3-{[(4,4-二氟哌啶-1-基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(134mg，0.24mmol)和氢氧化锂单水合物(51mg，1.21mmol)于乙醇(14ml)和水(7ml)的混合物中混合，接着在50℃下加热过夜。反应混合物在真空下浓缩及以乙酸乙酯(100ml)稀释。所得的溶液经盐水(30ml)冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩。残余物使用制备型薄层色谱法进行色谱法，以乙酸乙酯和甲醇混合物(20:1)洗脱，得标题化合物(31mg，32.3％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.13(d，j＝3.6，1h)，6.70(d，j＝3.6，1h)，5.12(m，1h)，3.49-3.47(m，4h)，3.46(m，3h)，3.33(m，2h)，2.62-2.54(m，3h)，2.25-2.20(m，1h)，2.11-2.05(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c17h23f2n5o2s的理论值；399.154，实验值(m+h+)；400.3。
实施例26至29.下列化合物系由顺式-[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲烷磺酰氯(实施例25步骤7)根据实施例25步骤8(磺酰化)和步骤9(脱保护)的步骤使用适合的胺替代步骤8中的4,4-二氟哌啶而制备。
实施例26：1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]-4-(三氟甲基)哌啶-4-醇
标题化合物(31mg)使用4-(三氟甲基)哌啶-4-醇于磺酰化步骤而制备，并使用实施例25步骤9的方法而脱保护。此化合物使用制备型薄层色谱法纯化，以乙酸乙酯和甲醇的混合物(20:1)洗脱。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.13(d，j＝3.6，1h)，6.70(d，j＝3.6，1h)，5.10-5.08(m，1h)，3.74-3.71(m，2h)，3.36(m，3h)，3.32-3.27(m，2h)，3.19-3.13(m，2h)，2.62-2.54(m，3h)，2.25-2.21(m，2h)，1.86-1.84(m，4h)。lc/ms(精确质量)：c18h24f3n5o3s的理论值；447.155，实验值(m+h+)；448.3。
实施例28和29：(3r)和(3s)-1-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡咯烷-3-甲腈
标题化合物(全部330mg)使用以(3r)-吡咯烷-3-甲腈和(3s)-吡咯烷-3-甲腈对映异构体的80:20的非外消旋混合物形式的经浓缩的吡咯烷-3-甲腈于磺酰化步骤而制备，并使用实施例19步骤2的方法而脱保护。化合物通过硅胶色谱法纯化，以石油醚和乙酸乙酯的梯度(10:1至1:10)洗脱。lc/msm/z＝375.2(m+1)。利用制备型超临界流体色谱法分离对映异构体：
3r-对映异构体(28)：178mg。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ8.31(s，1h)，7.06(d，1h)，6.58(d，1h)，5.19-5.10(m，1h)，3.77-3.75(m，1h)，3.61-3.54(m，3h)，3.33(s，3h)，3.21-3.19(m，3h)，2.69-2.66(m，3h)，2.36-2.31(m，2h)，2.14-2.11(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c17h22n6o2s的理论值；374.15，实验值(m+h+)；375.2。手性hplc保留时间＝2.65分钟。
3s-对映异构体(29)：31mg。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ8.31(s，1h)，7.06(d，1h)，6.58(d，1h)，5.19-5.10(m，1h)，3.77-3.75(m，1h)，3.61-3.54(m，3h)，3.33(s，3h)，3.21-3.19(m，3h)，2.69-2.66(m，3h)，2.36-2.31(m，2h)，2.14-2.11(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c17h22n6o2s的理论值；374.15，实验值(m+h+)；375.2。手性hplc保留时间＝2.53分钟。
实施例30：n-{顺式-3-[(丁磺酰基)甲基]环丁基}-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
步骤1：n-{顺式-3-[(丁硫基)甲基]环丁基}-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
来自实施例25步骤4的顺式-4-甲基苯磺酸[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲酯(23g，42.6mmol)的溶液于n-甲基吡咯烷(100ml)中搅拌。接着于反应混合物中加入1,8-二氮杂双环十一碳-7-烯(12.8g，85.2mmol)和1-丁硫醇(7.8g，85.2mmol)。反应混合物在室温下搅拌16小时。加入水(200ml)和乙酸乙酯(500ml)。水层经乙酸乙酯(2×500ml)萃取，合并的有机层经干燥和浓缩。残余物通过硅胶色谱法，以二氯甲烷和甲醇的梯度(100:0至90:10)洗脱，得标题化合物(11.8g，91％)。lc/ms(精确质量)：c16h24n4s的理论值；304.172，实验值(m+h+)；305.3。
步骤2：n-{顺式-3-[(丁磺酰基)甲基]环丁基}-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
n-{顺式-3-[(丁硫基)甲基]环丁基}-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(12g，39.5mmol)溶于四氢呋喃(200ml)、乙醇(200ml)和水(200ml)的混合物中。加入过一硫酸氢钾复合盐(48.6g，79.0mmol)，反应混合物在室温下搅拌1小时。接着过滤混合物；以四氢呋喃(40ml)、乙醇(40ml)和水(20ml)的混合物冲洗固体。滤液经10％硫酸氢钠水溶液(200ml)处理及在室温下搅拌20分钟。加入饱和碳酸氢钠水溶液以调整ph至～7。混合物经二氯甲烷(3×800ml)萃取，合并的有机层经干燥和在真空下浓缩。粗质残余物通过硅胶色谱法，以二氯甲烷和甲醇的梯度(100:0至95:5)洗脱，得标题化合物(11.4g，86％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.13(s，1h)，7.13-7.12(m，1h)，6.70-6.69(m，1h)，5.13-5.10(m，1h)，3.42(s，3h)，3.33(m，2h)，3.11-3.07(m，2h)，2.65-2.63(m，3h)，2.29-2.25(m，2h)，1.86-1.78(m，2h)，1.55-1.50(m，2h)，1.03-0.99(m，3h)。lc/ms(精确质量)：c16h24n4o2s的理论值；336.162，实验值(m+h+)；337.3。
实施例31：n-甲基-n-(反式-3-((丙磺酰基)甲基)环丁基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
由顺式和反式-4-甲基苯磺酸[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲酯(顺式/反式＝10:1)(实施例25步骤4)起始，根据与实施例30步骤1和2类似的步骤，于步骤2中使用丙烷-1-硫醇替代丁烷-1-硫醇而制得标题化合物的顺式和反式异构体的混合物(50mg)。顺式和反式异构体的混合物经逆相高效能液相色谱法纯化，以水和乙腈的梯度(95:5至5:95)洗脱。lc/ms(精确质量)：c15h22n4o2s的理论值；322.15，实验值(m+h+)；323.2。
接着利用制备型超临界流体色谱法分离顺式和反式异构体。
反式异构体(31)，12mg：1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.12(s，1h)，7.13-7.12(m，1h)，6.69-6.66(m，1h)，5.45-5.41(m，1h)，3.46-3.44(m，2h)，3.36(s，3h)，3.11-3.09(m，2h)，2.88-2.86(m，1h)，2.75-2.67(m，2h)，2.40-2.38(m，2h)，1.91-1.86(m，2h)，1.12-1.10(m，3h)。lc/ms(精确质量)：c15h22n4o2s的理论值；322.15，实验值(m+h+)；323.2。
顺式异构体，36mg：1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.12(s，1h)，7.13-7.12(m，1h)，6.70-6.69(m，1h)，5.10-5.20(m，1h)，3.36(s，3h)，3.33-3.32(m，2h)，3.08-3.04(m，2h)，2.64-2.61(m，3h)，2.24-2.22(m，2h)，1.90-1.84(m，2h)，1.13-1.09(m，3h)。lc/ms(精确质量)：c15h22n4o2s的理论值；322.15，实验值(m+h+)；323.2。
实施例32：n-(顺式-3-{[(2-环丙基乙基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
步骤1：n-(顺式-3-{[(2-环丙基乙基)硫基]甲基}环丁基)-n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
在0℃下，将氮气气泡通入硫代乙酸s-{[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲基}酯(实施例25步骤5)(190mg，0.43mmol)和碳酸钾(129mg，0.94mmol)于甲醇(10ml)的混合物中历时2分钟。接着加入4-甲基苯磺酸2-环丙基乙酯(159mg，1.53mmol)，溶液在室温下搅拌6小时。加入二氯甲烷(30ml)和水(20ml)，水层经二氯甲烷(2×20ml)萃取。合并的有机层经盐水冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩。粗产物经制备型薄层色谱法纯化，使用乙酸乙酯-石油醚(1:2)洗脱，得标题化合物的白色固体(62mg，31％)。lc/ms(精确质量)：c24h30n4o2s2的理论值；470.18，实验值(m+h+)；471.1。
步骤2：n-(顺式-3-{[(2-环丙基乙基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
n-(顺式-3-{[(2-环丙基乙基)硫基]-甲基}环丁基)-n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(24mg，0.051mmol)和过一硫酸氢钾复合盐(49mg，0.079mmol)于四氢呋喃(1.2ml)、水(0.6ml)和乙醇(1.2ml)的混合物在室温下搅拌20分钟。加入硫酸氢钠水溶液，接着加入二氯甲烷(20ml)。水层经二氯甲烷(2×20ml)萃取，合并的有机层经盐水萃取，以硫酸钠干燥和浓缩。粗物质直接用于下一步骤。lc/ms(精确质量)：c24h30n4o4s2的理论值；502.17，实验值(m+h+)；503.3。
步骤3：n-(顺式-3-{[(2-环丙基乙基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
n-(顺式-3-{[(2-环丙基乙基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(49mg，0.097mmol)和氢氧化锂(30mg，1.3mmol)于水(5ml)和乙醇(10ml)的混合物在50℃下搅拌2小时。接着，加入二氯甲烷(20ml)，水层经二氯甲烷萃取。合并的有机层经盐水冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩。粗产物经逆相高效能液相色谱法纯化，使用水和乙腈的梯度(95:5至5:95)洗脱，得标题化合物(14mg，40％)，为白色固体。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.12(s，1h)，7.13(d，2h)，6.70(d，2h)，5.12-5.09(m，1h)，3.34(s，3h)，3.34-3.33(m，2h)，3.20-3.17(m，2h)，2.64-2.61(m，3h)，2.26-2.22(m，2h)，1.75-1.69(m，2h)，0.89-0.86(m，2h)，0.56-0.52(m，2h)，0.18-0.17(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c17h24n4o2s的理论值；348.16，实验值(m+h+)；349.1。
实施例33：n-[顺式-3-({[(3,3-二氟环丁基)甲基]磺酰基}甲基)环丁基]-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
步骤1：n-[顺式-3-({[(3,3-二氟环丁基)甲基]硫基}甲基)环丁基]-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
在0℃下，将氮气气泡通入硫代乙酸s-{[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲基}酯(实施例25步骤5)(250mg，0.56mmol)和碳酸钾(194mg，1.41mmol)于甲醇(100ml)的混合物中历时2分钟，接着加入4-甲基苯磺酸(3,3-二氟环丁基)甲酯(依wo2004/032834所述而制备)(310mg，1.12mmol)。混合物在室温下搅拌6小时，过滤，及浓缩，得标题化合物的白色固体(270mg，粗产物)。lc/ms(精确质量)：c17h22f2n4s的理论值；352.15，实验值(m+h+)；353.2。
步骤2：n-[顺式-3-({[(3,3-二氟环丁基)甲基]磺酰基}甲基)环丁基]-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
n-[顺式-3-({[(3,3-二氟环丁基)甲基]硫基}甲基)环丁基]-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(45mg，0.13mmol)和过一硫酸氢钾复合盐(157mg，0.26mmol)的混合物于四氢呋喃(20ml)、水(10ml)和乙醇(20ml)的混合物中在室温下搅拌20分钟。接着加入亚硫酸氢钠水溶液，接着加入二氯甲烷(20ml)。水层经二氯甲烷(2×20ml)萃取，合并的有机层经盐水萃取，以硫酸钠干燥，及浓缩。粗产物经逆相高效能液相色谱法纯化，使用水-乙腈梯度(95:5至5:95)洗脱，得标题化合物的白色固体(34mg，39％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.29(s，1h)，7.42(d，1h)，7.03(d，1h)，4.86(m，1h)，3.51(s，3h)，3.39-3.33(m，4h)，2.84(m，1h)，2.76-2.71(m，4h)，2.53(m，2h)，2.37-2.34(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c17h22f2n4o2s的理论值；384.14，实验值(m+h+)；385.1。
实施例34a和34b：(1r,3r)和(1s,3s)-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]环戊烷甲腈
(1r,3r)和(1s,3s)-3-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]环戊烷甲腈的标题化合物混合物系由硫代乙酸s-{[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲基}酯(实施例25步骤5)根据实施例30步骤1和2的步骤而制备。
标题化合物(180mg)系利用制备型超临界流体色谱法使用chiralpakas柱而分离：
(1r,3r)对映异构体34a：60mg，1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.12(s，1h)，7.13-7.12(d，1h)，6.70-6.69(d，1h)，5.17-5.11(m，1h)，3.86-3.78(m，1h)，3.41-3.36(m，5h)，3.15-3.11(m，1h)，2.63-2.53(m，4h)，2.37-2.13(m，6h)，2.03-1.91(m，1h)。lc/ms(精确质量)：c17h22f2n4o2s的理论值；373.16，实验值(m+h+)；374.1。
(1s,3s)对映异构体34b：27mg，lc/ms(精确质量)：c17h22f2n4o2s的理论值；373.16，实验值(m+h+)；374.1。
步骤-1中所用的中间物4-甲基苯磺酸3-氰基环戊酯系依据下列方法制备：
4-甲基苯磺酸3-氰基环戊酯
4-甲基苯-1-磺酰氯(6.9g，36mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(100mg)加至由化合物3-羟基环戊烷甲腈(j.org.chem.2007,72,7423)(2g，18mmol)和三乙胺(5.5g，54mmol)于二氯甲烷(100ml)中所形成的溶液中。反应混合物在室温下搅拌15小时，接着于混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液(20ml)以淬灭反应。混合物经二氯甲烷(4×50ml)萃取。合并的有机层经硫酸镁干燥和浓缩。残余物通过硅胶色谱法，以石油醚和乙酸乙酯的混合物(1:1)洗脱，得标题化合物的黄色油状物(0.5g，11％产率)。lc/ms(精确质量)：c13h15no3s的理论值；265.08，实验值(m+23)；287.9。
实施例35：外消旋n-甲基-n-[顺式-3-({[1-(丙-2-基)吡咯烷-3-基]磺酰基}甲基)环丁基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
步骤1：3-({[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲基}硫基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
搅拌得自实施例25步骤4的顺式-4-甲基苯磺酸[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲酯(2g，3.7mmol)于n-甲基吡咯烷(40ml)中的溶液。接着于反应混合物中加入1,8-二氮杂双环十一碳-7-烯(1.13g，7.4mmol)和3-巯基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.13g，5.6mmol)。反应混合物在室温下搅拌16小时。加入水(200ml)和乙酸乙酯(500ml)。水层经乙酸乙酯(2×500ml)萃取。合并的有机层经干燥和在真空下浓缩，得标题化合物的白色固体(2.6g，118％)。lc/ms(精确质量)：c28h37n5o4s2的理论值；571.23，实验值(m+h+)：572.1。
步骤2：n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-n-{顺式-3-[(吡咯烷-3-基硫基)甲基]环丁基}-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
在3-({[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲基}硫基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.6g，4.5mmol)于甲醇(15ml)中所形成的溶液中加入3m盐酸的甲醇溶液(40ml)。所得的溶液在室温下搅拌1小时。溶液经浓缩至得粗产物，此粗产物通过硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷和甲醇的梯度(100:0至85:15)洗脱，得标题化合物的无色油状物(1.7g，52％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.21(s，1h)，7.99(d，2h)，7.56(d，1h)，7.37(d，2h)，6.88(d，1h)，4.95-4.87(m，1h)，3.29(s，1h)，3.27(s，3h)，3.21-3.17(m，1h)，3.04-3.96(m，1h)，2.92-29(m，1h)，2.72-2.01(m，3h)，2.50-2.43(m，2h)，2.39(s，3h)，2.29-2.15(m，2h)，2.03-2.01(m，2h)，1.98-1.65(m，1h)。lc/ms(精确质量)：c23h29n5o2s2的理论值；471.18，实验值(m+23)：494。
步骤3：n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-n-[顺式-3-({[1-(丙-2-基)吡咯烷-3-基]硫基}甲基)环丁基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
在n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-n-{顺式-3-[(吡咯烷-3-基硫基)甲基]环丁基}-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(472mg，1mmol)于二氯甲烷(50ml)中所形成的溶液中加入丙酮(174mg，3mmol)、
步骤4：n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-n-[顺式-3-({[1-(丙-2-基)吡咯烷-3-基]磺酰基}甲基)环丁基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-n-[顺式-3-({[1-(丙-2-基)吡咯烷-3-基]硫基}甲基)环丁基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(500mg，1.0mmol)和过一硫酸氢钾复合盐(1.23g，2.0mmol)于四氢呋喃(20ml)、水(10ml)和乙醇(20ml)的混合物在室温下搅拌30分钟。反应溶液经乙酸乙酯(100ml)和水(50ml)稀释。水层经乙酸乙酯(3×50ml)萃取，合并的有机层经盐水(100ml)冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩，得标题化合物的无色油状物(420mg，90％)。lc/ms(精确质量)：c26h35n5o4s2的理论值；545.21，实验值(m+h+)：546.3。
步骤5：n-甲基-n-[顺式-3-({[1-(丙-2-基)吡咯烷-3-基]磺酰基}甲基)环丁基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
n-甲基-7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-n-[顺式-3-({[1-(丙-2-基)吡咯烷-3-基]磺酰基}甲基)环丁基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(330mg，0.6mmol)和氢氧化锂(126mg，3mmol)混合物于水(5ml)和乙醇(10ml)的混合物中在50℃下搅拌2小时。接着浓缩混合物，残余物置于乙酸乙酯中。有机层经盐水冲洗，以硫酸钠干燥和浓缩。粗产物经逆相高效能液相色谱法纯化，以水和乙腈的梯度(95:5至5:95)洗脱，得标题化合物的白色固体(89mg，38％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ8.32(s，1h)，7.07(d，1h)，6.57(d，1h)，5.13(m，1h)，3.57(m，1h)，3.33(s，3h)，3.05-3.22(m，3h)，2.92(m，1h)，2.78-2.87(m，1h)，2.58-2.77(m，4h)，2.50(m，1h)，2.19-2.34(m，2h)，2.06-2.19(m，2h)，1.12(d，6h)。lc/ms(精确质量)：c19h29n5o2s的理论值；391.20，实验值(m+h+)；392.3。
实施例36：n-(顺式-3-{[(3-氯-4-氟苯基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
步骤1：n-(顺式-3-{[(3-氯-4-氟苯基)硫基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
在3-氯-4-氟硫酚(93mg，0.55mmol)于四氢呋喃(1.5ml)中所形成的溶液中加入50％氢氧化钠水溶液(44mg，0.55mmol)和乙醇(1.5ml)。混合物在室温下搅拌1小时。将来自实施例25步骤4的顺式-4-甲基苯磺酸[3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲酯(200mg，0.37mmol)于四氢呋喃(1.5ml)中所形成的溶液加至反应混合物中。合并的混合物在40℃下加热过夜。浓缩反应混合物，并以硅胶柱纯化，以庚烷和乙酸乙酯的梯度(90:10至0:100)洗脱，得标题化合物(69mg，49.6％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ8.18(s，1h)，7.39(dd，1h)，7.28(s，1h)，7.03-7.08(m，1h)，7.00(d，1h)，6.52(d，1h)，4.97-5.07(m，1h)，3.35(m，2h)，3.23(s，3h)，2.89(s，1h)，2.43-2.52(m，2h)，2.19-2.30(m，2h)。
步骤2：n-(顺式-3-{[(3-氯-4-氟苯基)磺酰基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺
在n-(顺式-3-{[(3-氯-4-氟苯基)硫基]甲基}环丁基)-n-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(75mg，0.2mmol)于二氯甲烷(10ml)中所形成的溶液中加入3-氯过苯甲酸(107mg)。反应在室温下搅拌过夜，接着浓缩。粗质残余物通过硅胶色谱法，以二氯甲烷和2m氨的甲醇溶液的梯度(80:20)洗脱，得标题化合物(48mg，59.2％)。1hnmr(400mhz，甲醇-d4)：δ8.31(s，1h)，8.02(m，1h)，7.81-7.83(m，1h)，7.37-7.27(m，1h)，7.09(d，1h)，6.65(s，1h)，5.18-5.10(m，1h)，4.15-4.09(m，1h)，3.32(m，5h)，2.59-2.54(m，2h)，2.44-2.42(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c18h18clfn4o2s的理论值；408.08，实验值(m+h+)；409。
实施例37：2-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡啶-4-甲腈
步骤1：2-({[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲基}硫基)吡啶-4-甲腈
1,8-二氮杂双环十一碳-7-烯(24.6g，161mmol)和2-巯基-异烟碱甲腈(16.1g，118mmol)加至由甲烷磺酸[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-甲酯(50g，110mmol)于n-甲基吡咯烷(250ml)中所形成的溶液中。反应混合物在50℃下加热过夜。加入额外的2-巯基异烟碱甲腈(8.1g，59mmol)以使反应完全。混合物冷却至约0℃，接着于反应混合物中逐滴添加水以淬灭反应。过滤收集固体，以水冲洗，在真空和50℃下干燥，得标题化合物的亮黄色固体(45.8g，82.8％)。lc/ms(精确质量)：c25h24n6o2s2的理论值；504.14，实验值(m+h+)；505.1。
步骤2：2-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)硫基]吡啶-4-甲腈
在2-({[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]甲基}硫基)吡啶-4-甲腈(45.3g，89.8mmol)于四氢呋喃(180ml)中所形成的溶液中加入1m氟化四丁铵的四氢呋喃溶液(269ml)。反应混合物经加热回流6小时，接着冷却至室温。逐滴加入水历时45分钟。过滤收集固体，以20％四氢呋喃(33ml)和水(97ml)的混合物冲洗。湿滤饼在真空和50℃下干燥，得标题化合物的褐色固体(25g，79％)。lc/ms(精确质量)：c18h18n6s2的理论值；350.13，实验值(m+h+)；351.1。
步骤3：2-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)磺酰基]吡啶-4-甲腈
在0℃下，将过一硫酸氢钾复合盐(236.8g，385.2mmol)缓缓加至2-[({顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}甲基)硫基]吡啶-4-甲腈(22.5g，64.2mmol)于甲醇(337ml)和水(56ml)的混合物中。反应在3℃下搅拌20小时。于反应混合物中加入10％硫酸氢钠水溶液(40ml)以淬灭反应。所得的淤浆在室温下搅拌2小时。加入10％碳酸钾水溶液直到ph为4至5。过滤此物质，并以水冲洗。湿滤饼在真空和40℃下干燥，得灰白色固体。此物质置于四氢呋喃(50ml)中并加热回流3小时。混合物冷却至室温和过滤以收集固体，使此固体在真空和40℃下干燥，得标题化合物的淡褐色粉末(17.3g，70.46％)。1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ11.97(s，1h)，8.95(d，1h)，8.33-8.28(m，2h)，7.81(d，1h)，7.1(d，1h)，6.54(d，1h)，5.13-5.08(m，1h)，3.63(m，2h)，3.30(s，3h)，2.54-2.48(m，3h)，2.09-2.07(m，2h)。lc/ms(精确质量)：c18h18n6o2s2的理论值；382.12，实验值(m+h+)；383.1。
实施例38：2-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-1,3-噻唑-5-磺酰胺
步骤1：2-甲基-n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-1,3-噻唑-5-磺酰胺
三乙胺(62.0g，0.613mol)加至由顺式-n-甲基-n-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基环丁烷-1,3-二胺盐酸盐(22.2.g，0.102mol)于二氯甲烷(250ml)中所形成的溶液中。在室温下将2-甲基噻唑-5-磺酰氯(28.0g，0.142mol)于二氯甲烷(250ml)中所形成的溶液加至反应混合物历时30分钟。1.5小时后，在减压下去除溶剂，将所得固体溶于4:1乙酸乙酯：二氯甲烷(400ml)。溶液经40g硅胶垫过滤，以乙酸乙酯(800ml)和二氯甲烷(100ml)冲洗。在减压下去除滤液中的溶剂，得固体(59g)。固体经硅胶柱色谱法纯化，以1:1二氯甲烷：乙酸乙酯至纯乙酸乙酯洗脱，得标题化合物(44.4g，81％)；m/z(ci)533[m+h]+。
步骤2：2-甲基-n-{顺式-3-[甲基(7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]环丁基}-1,3-噻唑-5-磺酰胺
将氢氧化锂(12.1g，0.505mol)于水(290ml)中所形成的溶液加至2-甲基-n-[顺式-3-(甲基{7-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基}氨基)环丁基]-1,3-噻唑-5-磺酰胺(43.8g，82.2mmol)于异丙醇(435ml)中所形成的溶液中，混合物经加热60℃过夜。冷却至室温后，过滤反应混合物，以水(145ml)冲洗。使用6m盐酸水溶液将滤液的ph调整至6-7。反应淤浆在减压下浓缩。加入水(370ml)，混合物冷却至0℃。过滤收集所得物质，以冰水(150ml)冲洗，接着在60℃下真空干燥过夜，得标题化合物(25.0g，80％)；1hnmr(dmso-d6)：δ11.66-11.71(1h)，8.44-8.47(1h)，8.11-8.08(2h)，7.16-7.17(1h)，6.63-6.65(1h)，4.86-4.94(1h)，3.58-3.68(1h)，3.22(3h)，2.74(3h)，2.40-2.46(2h)，2.10-2.18(2h)。m/z(ci)379[m+h]+。
生物学评价
1mmatp下jakcaliper酶试验
将测试物品溶于二甲亚砜(dmso)至浓度为30mm的储备浓度。利用dmso产生11个半对数连续稀释液，最高浓度为600μm。测试化合物板还包括阳性对照组孔，其含有已知的抑制剂以定义100％抑制作用，以及含有dmso以定义无抑制作用的阴性对照组孔。化合物板经1比60稀释以使最终分析化合物的最高浓度为10μm及dmso浓度为2％。
将测试物品和分析对照组加至384孔板中。反应混合物含有20mmhepes(ph＝7.4)、10mm氯化镁、0.01％牛血清白蛋白(bsa)、0.0005％吐温20、1mmatp及1μm肽底物。jak1和tyk2分析液含有1μmirstide肽(5fam-kksrgdymtmqid)，而jak2和jak3分析液含有1μmjaktide肽(fitc-kggeeeeyfelvkk)。这些分析液通过添加20nmjak1、1nmjak2、1nmjak3或1nmtyk2及在室温下培育下列时间而引发反应：jak1培育3小时，jak2培育60分钟，jak3培育75分钟或tyk2培育135分钟。对各个新的酶制剂的酶浓度和培育时间均进行优化，并且随时间略作修正以确保有20％-30％的磷酸化作用。于分析液中加入最终浓度的10mmedta、0.1％涂覆剂和100mmhepes(ph＝7.4)以使测定反应停止。将分析板置于caliperlifesciencelabchip3000(lc3000)仪器上，且使用适当的分离条件对各孔进行取样以测量未磷酸化和磷酸化的肽。
表1.1mmatp下jakcalipertm酶试验的数据
hwbinfα诱发的stat3磷酸化试验
将测试物品于100％dmso中制成30mm母液，接着稀释成5mm。于dmso中形成10个2.5倍连续稀释液，最高浓度为5mm。将4μl上述测试物品溶液分别加至96μlpbs中以作进一步稀释，最高浓度为200μm。
在96孔聚丙烯板(vwr82007-292)的每一孔中加入90μlhwb，接着加入5μl上述制备的测试物品溶液，得10μm的最高浓度。将此板在37℃下混合和培育45分钟。在每一孔中加入5μl人类ifnα(universaltypeiifn，r&dsystems#11200-2；最终浓度5000u/ml)或d-pbs(未刺激的对照组)，在37℃下混合和培育15分钟。于所有的孔中加入1000μl/孔的裂解/固定缓冲液[bdphosflow5xlyse/fixbuffer(bd#558049)]以淬灭反应，并在37℃下混合和培育20分钟；在以facs缓冲液[d-pbs(invitrogencat#14190)，含0.1％bsa和0.1％叠氮化钠]冲洗后，于各孔中加入400μl冰冷的90％甲醇/水，并在冰上培育30分钟。再以冰冷的facs缓冲液进行一次冲洗，全部样品最后悬浮于250μl/孔的所期望的alexafluor647缀合的抗-磷-stat3(py705)抗体(bd#557815)(1:125倍稀释于facs缓冲液)。全部样品在4℃培育过夜后，转移至96孔聚丙烯u-型底板(falcon#353077)并以流式细胞仪检查。所获得的实施例1～9、11～23、25～38的ic50值在22至2610nm的范围内。
犬体外t细胞增殖试验
t细胞活化作用在多种炎性病症和自体免疫疾病以及哮喘、过敏和瘙痒症中扮演重要的角色。由于t细胞活化可部分由通过jak-stat途径传导信号的细胞因子触发，因此jak抑制剂可有效对抗此类涉及异常t细胞活化的疾病。
方法：自29只比格(beagle)犬和23只混种犬收集犬全血于肝素钠管中。将全血(20μl)置于96孔板(costar3598)中，且该板含有180μl培养基(rpmi1640，gibco#21870-076，含有1％加热失活的胎牛血清，gibco#10082-39；292μg/mll-谷氨酰胺，gibco#250030-081；100μ/ml青霉素和100μg/ml链霉素，gibco#15140-122)，且含有载体对照组或测试化合物(0.001至10μm)、刀豆球蛋白a(cona；1μg/ml，sigmac5275)、及犬白介素-2(il-2；50ng/ml，r&dsystems1815-cl/cf)。含有全血、含载体对照的培养基及无cona或il-2的孔用作背景对照组。将板在37℃下培育48小时。加入0.4μci/孔的氚化胸腺嘧啶核苷(perkinelmer，net027a-005mc)并继续培育20小时。冷冻板，接着解冻，冲洗，及使用brandelmlr-96细胞收集器和预湿滤垫(wallac1205-401，perkinelmer)过滤。滤器在60℃下干燥1小时(precision16eg烘箱)，并与10ml闪烁计数液(wallac1205-440，perkinelmer)一起置于过滤样品袋(wallac1205-411，perkinelmer)。将密封的滤器置于lkbwallac1205betaplate液体闪烁计数器上进行计数。利用gtermbetaplateprogramv1.1收集数据，并使用下列方程式计算而将数据转换成百分比抑制：
________________________
使用graphpadprism4.0将百分比抑制形式的数据以图形方式表示，并使用点对点分析拟合ic50曲线。
在此试验中，实施例38的ic50为48.5nm。此数据表明本发明化合物有效抑制t细胞增殖，而t细胞增殖是jak调节异常所导致的疾病的主要特征。