本发明属于有机化合物技术领域，具体涉及一类诺蒎酮噻唑腙衍生物及其制备方法和应用。
背景技术：
噻唑类化合物是含有硫氮杂原子的独特杂环结构，因此容易通过氢键、配位键发生相互作用，也可通过多种非共价键与生物体内的多种酶和受体上的特定靶点结合，发挥其各种生物活性。噻唑环是一类重要的含氮硫杂原子的五元芳杂环，其特殊的结构使得噻唑类化合物在化学、药学、生物学和材料学等诸多领域具有广阔的应用前景，显示出巨大的开发价值，受到广泛关注。噻唑类化合物作为药物显示出巨大的开发价值，至今已有众多噻唑类药物用于临床治疗多种疾病，为保障人类健康发挥着重要作用。噻唑类化合物相关医药研究工作众多，较为活跃，在抗菌、抗结核、抗癌、抗病毒、抗糖尿病等领域显示出广阔的应用前景。
技术实现要素：
发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供一类诺蒎酮噻唑腙衍生物，满足抗肿瘤药物的使用要求。本发明的另一个目的是提供一种制备诺蒎酮噻唑腙衍生物的方法。本发明还有一目的是提供上述诺蒎酮噻唑腙衍生物的应用。
技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：
一类诺蒎酮噻唑腙衍生物，结构通式如下：
式中，r1为h、ch3、och3、cl、f、no2；r2为h，ch3，c6h5。
一种制备所述的诺蒎酮噻唑腙衍生物的方法，步骤如下：
1)以无水乙醇为溶剂，依次加入诺蒎酮、乙醇钠和取代苯甲醛，升温回流反应，反应结束后旋蒸除去溶剂，用有机溶剂萃取，有机相经水洗至中性，蒸去溶剂后重结晶，得到固体的α,β-不饱和烯酮；
2)将α,β-不饱和烯酮溶于有机溶剂中，加入氨基硫脲，升温至回流反应，反应结束后蒸馏出去溶剂，再经硅胶色谱柱分离提纯，得到缩氨基硫脲；
3)将缩氨基硫脲与a-溴代芳基乙酮溶于乙醇，室温条件下搅拌30-60min，反应结束后抽滤得固体粉末，用乙醇洗涤，干燥后得诺蒎酮噻唑腙类衍生物。
具体反应式如下：
式中，r1为h、ch3、och3、cl、f、no2；r2为h，ch3，c6h5。
步骤1)中，诺蒎酮、取代苯甲醛和乙醇钠的摩尔比为1:1.2:1。
步骤2)中，采用gc跟踪监测反应，显示至少一种原料消失，为反应结束。
步骤2)中，以tlc跟踪反应，显示至少一种原料消失，为反应结束。
步骤3)中，诺蒎酮噻唑腙与a-溴代芳基乙酮的摩尔比为1:0.95。
步骤3)中，采用tlc跟踪反应，显示至少一种原料消失，为反应结束。
所述的诺蒎酮噻唑腙衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。
有益效果：与现有技术相比，本发明提供的诺蒎酮噻唑腙类衍生物，制备方法简单，步骤少。经mtt法结果证实，化合物(2，6，10，14，18，22)对ct-26，smmc-7721和hela细胞表现出显著的抗肿瘤活性，其中化合物6的活性最强，其对hela细胞ic50值为3.48μm，对ct-26细胞的ic50值为8.84μm和对smmc-7721细胞的ic50值为6.69μm。此外，化合物4对两种癌细胞系(smmc-7721和hela细胞)表现出良好的抗肿瘤活性，化合物(11，23)仅对一种肿瘤细胞(hela细胞)有活性。此类化合物在制备抗癌药物中将具有广泛的应用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
化合物1：2-(2-(3-亚苄基-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)-4-苯基噻唑；结构式为：
制备方法为：将40ml无水乙醇、15mmol诺蒎酮、15.1mmol苯甲醛、1.0g乙醇钠依次加入100-ml三口烧瓶中，回流反应8h，反应结束后，蒸去溶剂，用饱和食盐水水洗至中性，甲醇重结晶。将1.0g结晶固体加入至50-ml三口烧瓶中，加入25ml乙醇溶解，再加入0.4g氨基硫脲，搅拌并滴加0.3ml盐酸作催化剂，回流反应，采用tcl跟踪检测，反应结束后，蒸去溶剂，经柱层析分离纯化，得到缩氨基硫脲衍生物。再将0.5g缩氨基硫脲衍生物溶于10ml乙醇中，搅拌均匀，加入0.23gα-溴代苯乙酮，室温条件下反应30-60min(tlc监测)，反应完全后抽滤得固体粉末，用乙醇洗涤3次，干燥后得黄色粉末状固体。得率78.4％；m.p.161.5-163.7℃。产物表征，数据如下：
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.71(m,2h),7.50(s,1h),7.40(d,j＝8.0hz,2h),7.20(d,j＝8.0hz,2h),7.15(t,j＝8.6hz,2h),6.67(s,1h),3.55(t,j＝5.4hz,1h),2.92(s,2h),2.61(m,1h),2.37(s,3h),2.22(m,1h),1.49(s,3h),1.33(d,j＝10.4hz,1h),0.93(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ21.66,26.10,27.87,31.75,39.41,42.34,44.52,100.82,125.65,128.17,128.52,129.64,130.14,130.40,130.70,130.99,136.36,140.59,165.86,169.38.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc25h25n3s[m+h]+400.1847,found400.1853。
实施例2：
化合物2：2-(2-(3-亚苄基-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)-4-(4-氟苯基)噻唑；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用α-溴-4’-氟苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率85.2％；m.p.204.2-204.7℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:12.56(s,1h),7.74(dd,j1＝8.7hz,j1＝5.0hz,2h),7.50(m,3h),7.43(t,j＝7.6hz,2h),7.31(m,1h),7.19(t,j＝8.5hz,2h),6.70(s,1h),3.60(t,j＝5.4hz,1h),2.97(d,j＝2.8hz,2h),2.65(m,1h),2.26(m,1h),1.37(d,j＝10.4hz,1h),0.97(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ:21.69,26.15,27.90,31.77,39.44,42.40,44.53,100.54(d,j＝1.7hz),116.92(d,j＝22.2hz),123.88(d,j＝3.4hz),127.82(d,j＝8.6hz),128.23,128.56,130.17,130.68,131.11,136.37,139.67,163.79(d,j＝3.4hz),166.02,169.41.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc25h24fn3s[m+h]+418.1753,found418.1761。
实施例3
化合物3：4-(2-(2-(3-亚苄基)-6,6-二甲基二环[3.1.1]庚烷-2-亚基)肼基)噻唑-4-基)苯酚；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用α-溴-4’-羟基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率81.3％；m.p.177.9-178.9℃；1hnmr(400mhz,c5d5n)δ:0.84(s,3h),1.22(s,1h),1.24(s,3h),2.04(m,1h),2.46(m,1h),2.83(m,1h),2.92(m,1h),3.79(t,j＝5.6hz,1h),7.10(s,1h),7.30(t,j＝8.9hz,3h),7.45(t,j＝7.7hz,2h),7.61(d,j＝7.4hz,2h),7.90(s,1h),8.08(d,j＝8.6hz,2h)；13cnmr(100mhz,c5d5n)δ:170.73,158.57,154.83,151.73,137.57,132.47,130.01,128.64,127.69,127.33,127.25,127.14,116.22,100.70,42.66,40.98,39.57,32.02,28.18,25.72,21.29.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc25h25n3os[m+h]+416.1797,found416.1776。
实施例4
化合物4：2-(2-(3-亚苄基)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)-4-(4-甲氧基苯基)噻唑；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用α-溴-4’-甲氧基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。
产物表征，数据如下：
产率81.0％；m.p.188.6-189.1℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:12.55(s,1h),7.66(m,2h),7.53(m,3h),7.41(dd,j1＝8.4hz,j2＝6.8hz,2h),7.34(m,1h),6.99(m,2h),6.59(s,1h),3.84(s,3h),3.61(t,j＝5.4hz,1h),3.01(m,2h),2.55(m,1h),2.24(m,1h),1.52(s,3h),1.36(d,j＝10.4hz,1h),0.96(s,3h)；13cnmr(100mhz,chloroform-d)δ:21.66,26.10,27.88,31.76,39.42,42.31,44.43,55.53,98.64,115.01,120.13,127.20,128.14,128.52,130.14,130.74,130.87,136.41,140.48,161.18,165.54,169.28.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc26h27n3os[m+h]+430.1953,found430.1957。
实施例5
化合物5：2-(6,6-二甲基-3-(4-硝基亚苄基)双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基-4-苯基噻唑；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对硝基苯甲醛替换苯甲醛。产物表征，数据如下：
产率87.2％；m.p.207.1-208.0℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ0.96(s,3h),1.36(d,j＝10.6hz,1h),1.53(s,3h),2.29(m,1h),2.69(m,1h),2.94(m,1h),3.00(m,1h),3.67(t,j＝5.3hz,1h),6.80(s,1h),7.47(m,3h),7.58(s,1h),7.66(d,j＝8.8hz,2h),7.72(d,j＝6.8hz,2h),8.26(d,j＝8.8hz,2h),12.76(s,1h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ21.68,26.00,27.92,31.93,39.25,42.41,44.59,100.98,123.77,125.68,128.41,129.70,130.56,130.59,135.02,140.85,142.77,146.82,164.74,169.60.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc25h24n4o2s[m+h]+445.1698,found445.1696。
实施例6
化合物7：4-(2-(2-6,6-二甲基-3-(4-硝基苯亚甲基)二环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)噻唑-4-基)苯酚；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对硝基苯甲醛替换苯甲醛，α-溴-4’-氟苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率70.6％；m.p.234.8-235.2℃。1hnmr(400mhz,c5d5n)δ:0.85(s,3h),1.23(s,1h),1.26(s,3h),2.08(tt,j1＝3.0hz,j2＝6.0hz,1h),2.51(m,1h),2.84(m,1h),2.94(m,1h),3.81(t,j＝5.6hz,1h),7.13(s,1h),7.28(d,j＝8.6hz,2h),7.67(d,j＝8.6hz,2h),7.84(s,1h),8.08(d,j＝8.4hz,2h),8.29(d,j＝8.9hz,2h)；13cnmr(100mhz,c5d5n)δ:171.92,160.14,155.25,153.20,147.59,145.48,138.57,131.85,129.21,128.61,126.26,117.73,102.39,44.12,42.43,40.94,33.72,29.81,27.11,22.77；hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc25h24n4o3s[m+h]+461.1647,found461.1642。
实施例7
化合物8：2-(2-(6,6-二甲基-3-(4-硝基苯亚甲基)二环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)-4-(4-甲氧基苯基)噻唑；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对硝基苯甲醛替换苯甲醛，α-溴-4’-甲氧基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率77.1％；m.p.204.9-207.2℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:12.68(s,1h),8.25(dd,j1＝11.0hz,j1＝8.7hz,4h),7.62(d,j＝8.7hz,2h),7.51(s,1h),7.00(d,j＝8.8hz,2h),3.86(s,3h),3.67(m,1h),2.99(m,2h),2.70(m,1h),2.28(s,1h),1.54(s,3h),1.37(d,j＝9.2hz,1h),0.97(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ:169.38,164.34,161.22,156.01,146.72,142.92,135.55,130.32,128.21,127.16,126.72,123.67,115.00,98.59,55.48,42.31,41.73,39.23,31.92,27.87,26.00,21.51；hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc26h26n4o3s[m+h]+474.1726,found474.1696。
实施例8
化合物9：2-(2-(3-(4-氟亚苄基)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)-4-苯基噻唑；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对氟苯甲醛替换苯甲醛。产物表征，数据如下：
产率80.4％；m.p.196.8-197.0℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:12.59(s,1h),7.70(d,j＝7.8hz,2h),7.45(m,6h),7.36(d,j＝8.5hz,2h),6.79(s,1h),3.62(t,j＝5.4hz,1h),2.90(m,2h),2.63(dt,j1＝10.5hz,j2＝5.5hz,1h),2.24(m,1h),1.50(s,3h),1.33(d,j＝10.4hz,1h),0.94(s,3h)；13cnmr(100mhz,chloroform-d)δ:21.68,26.13,27.92,31.72,39.43,42.40,44.57,100.67,115.61(d,j＝21.4hz),125.70,127.46,129.71,129.81,130.42(d,j＝22.2hz),130.48,131.94(d,j＝8hz),132.61(d,j＝3.5hz),140.75,162.38(d,j＝247.9hz),165.78,169.43.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc25h24fn3s[m+h]+418.1753,found418.1753。
实施例9
化合物11：4-(2-(2-(3-(4-氟亚苄基)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)噻唑-4-基)苯酚；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对氟苯甲醛替换苯甲醛，α-溴-4’-羟基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率69.8％；m.p.182.5-183.5℃。1hnmr(400mhz,c5d5n)δ:0.86(s,3h),1.24(d,j＝2.9,1h),1.26(s,3h),2.06(m,1h),2.48(m,1h),2.79(m,1h),2.89(m,1h),3.81(t,j＝5.6hz,1h),7.12(s,1h),7.24(t,j＝8.6hz,1h),7.58(dd,j1＝5.6hz,j2＝8.6hz,2h),7.83(s,1h),8.10(d,j＝8.6hz,2h).13cnmr(100mhz,c5d5n)δ:21.34,25.77,28.24,31.92,41.05,42.71,100.74,115.51(d,j＝21.2hz),116.29,125.94,127.28,127.75,131.86(d,j＝7.8hz),132.22(d,j＝2.2hz),133.98(d,j＝3.2hz),154.79,151.78,158.64,161.86(d,j＝24.5hz),170.76.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc25h24fn3os[m+h]+434.1702,found434.1540。
实施例10
化合物12：2-(2-(3-(4-氟亚苄基)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)-4-(4-甲氧基苯基)噻唑；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对氟苯甲醛替换苯甲醛，α-溴-4’-甲氧基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率81.5％；m.p.214.0-214.1℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:12.57(s,1h),7.66(d,j＝8.8hz,2h),7.50(m,3h),7.11(t,j＝8.6hz,2h),7.00(d,j＝8.9hz,2h),6.59(s,1h),3.85(s,3h),3.63(t,j＝5.4hz,1h),2.87(m,2h),2.66(m,1h),2.26(m,1h),1.53(s,3h),1.36(d,j＝10.4hz,1h),0.96(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ:21.68,26.13,27.92,31.73,39.43,42.37,44.49,55.57,98.52,115.07,115.59(d,j＝21.3hz),120.11,127.24,129.69,130.44(d,j＝2.1hz),131.92(d,j＝8.1hz),132.63(d,j＝3.4hz),140.59,161.25,162.36(d,j＝248hz),165.50,169.30.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc26h26fn3os[m+h]+448.1859,found448.1867。
实施例11
化合物15：4-(2-(2-(3-(4-甲氧基亚苄基)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)噻唑-4-基)苯酚；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对甲氧基苯甲醛替换苯甲醛，α-溴-4’-羟基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率81.5％；m.p.205.3-205.6℃；1hnmr(400mhz,c5d5n)δ:0.87(s,3h),1.26(s,3h),1.29(s,1h),2.08(m,1h),2.48(m,1h),2.92(m,2h),3.72(s,3h),3.80(t,j＝5.6hz,1h),7.10(m,3h),7.28(d,j＝8.6hz,2h),7.63(d,j＝8.7hz,2h),7.94(s,1h),8.11(d,j＝8.6hz,2h)；13cnmr(100mhz,c5d5n)δ:172.28,160.62,160.02,156.70,153.28,133.01,131.85,131.59,129.20,128.87,128.39,117.67,115.71,102.07,56.54,44.13,42.45,41.16,33.61,29.73,27.25,22.78.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc26h27n3o2s[m+h]+446.1902,found446.1871。
实施例12
化合物16：2-(2-(3-(4-甲氧基亚苄基)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)-4-(4-甲氧基苯基)噻唑；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对甲氧基苯甲醛替换苯甲醛，α-溴-4’-甲氧基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率74.4％；m.p.196.4-196.9℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:12.51(s,1h),7.65(d,j＝8.9hz,2h),7.50(s,1h),7.49(d,j＝8.9hz,2h),6.97(dd,j1＝15.5hz,j2＝8.8hz,4h),6.57(s,1h),3.85(d,j＝7.0hz,6h),3.60(t,j＝5.4hz,1h),2.93(s,2h),2.64(m,1h),2.25(m,1h),1.51(s,3h),1.36(d,j＝10.4hz,1h),0.95(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ:21.66,26.14,27.99,31.91,39.48,42.24,44.39,55.43,55.53,98.50,114.02,115.01,120.14,127.19,128.42,129.22,130.49,131.77,140.39,159.54,161.16,165.89,169.11.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc27h29n3o2s[m+h]+460.2059,found460.2053。
实施例13
化合物19：4-(2-(2-(6,6-二甲基-3-(4-甲基亚苄基)二环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)噻唑-4-基)苯酚；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对甲基苯甲醛替换苯甲醛，α-溴-4’-羟基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率61.0％；m.p.165.7-167.6℃。1hnmr(400mhz,c5d5n)δ:0.86(s,3h),1.25(s,4h),1.27(s,4h),2.06(m,1h),2.27(s,3h),2.47(m,1h),2.90(m,2h),3.80(t,j＝5.6hz,1h),7.11(s,1h),7.28(t,j＝7.9hz,4h),7.57(m,3h),7.94(s,1h),8.10(d,j＝8.6hz,2h)；13cnmr(100mhz,c5d5n)δ:172.01,159.81,156.21,153.01,138.29,132.71,131.30,130.59,128.94,128.40,117.45,101.86,58.36,43.88,42.19,40.85,33.36,29.46,26.98,22.53,22.19.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc26h27n3os[m+h]+430.1953,found430.1935。
实施例14
化合物21：2-(2-(3-(4-氯亚苄基)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)-4-苯基噻唑；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对氯苯甲醛替换苯甲醛。产物表征，数据如下：
产率85.2％；m.p.187.5-188.0℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:12.68(s,1h),7.74(d,j＝6.9hz,2h),7.58(m,6h),7.12(t,j＝8.7hz,2h),6.75(s,1h),3.64(t,j＝5.4hz,1h),2.93(m,2h),2.67(m,1h),2.26(m,1h),1.53(s,3h),1.37(d,j＝10.4hz,1h),0.97(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ:21.67,26.09,27.91,31.77,39.37,42.36,44.53,100.78,125.67,127.45,128.75,129.61,129.67,130.45,131.34,131.37,133.97,134.84,140.75,165.47,169.42.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc25h24cln3s[m+h]+434.1497,found434.1538。
实施例15
化合物23：4-(2-(2-(3-(4-氯亚苄基)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-亚基)肼基)噻唑-4-基)苯酚；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对氯苯甲醛替换苯甲醛，α-溴-4’-羟基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率62.3％；m.p.207.8-208.4℃；1hnmr(400mhz,c5d5n)δ:0.85(s,3h),1.24(s,1h),1.25(s,3h),2.06(m,1h),2.48(m,1h),2.79(m,1h),2.89(dd,j1＝2.4hz,j2＝17.1hz,1h),3.80(t,j＝5.6hz,1h),7.12(s,1h),7.28(d,j＝8.7hz,2h),7.48(d,j＝8.6hz,2h),7.54(d,j＝8.7hz,2h),7.82(s,1h),8.11(d,j＝8.7hz,2h)；13cnmr(100mhz,c5d5n)δ:172.14,160.11,155.88,153.26,137.73,134.75,134.03,132.87,130.16,129.21,128.77,127.17,117.71,102.19,44.12,42.45,41.02,33.44,29.70,27.18,22.76.hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc25h24cln3os[m+h]+450.1407,found450.1370。
实施例16
化合物24：2-(3-(4-氯亚苄基)-6,6-二甲基双环[3.1.1]庚-2-炔基)肼基)-4-(4-甲氧基苯基)噻唑；结构式为：
制备方法同实施例1，其中用对氯苯甲醛替换苯甲醛，α-溴-4’-甲氧基苯乙酮替换α-溴苯乙酮。产物表征，数据如下：
产率76.1％；m.p.212.2-212.8℃；1hnmr(400mhz,c5d5n)δ:0.85(s,3h),1.23(s,1h),1.26(s,3h),2.06(m,1h),2.48(m,1h),2.80(m,1h),2.88(m,1h),3.68(s,3h),3.81(t,j＝5.6hz,1h),7.04(d,j＝8.8hz,2h),7.17(s,1h),7.48(d,j＝8.6hz,2h),7.54(d,j＝8.6hz,2h),7.81(s,1h),8.08(d,j＝8.8hz,2h)；13cnmr(100mhz,c5d5n)δ:172.20,160.96,156.02,152.80,137.68,134.72,134.04,132.87,130.17,130.14,128.92,127.21,115.74,103.10,56.53,44.15,42.46,41.01,33.44,29.70,27.19,22.78；hr-ms(esi+):m/zcalculatedforc26h26cln3os[m+h]+464.1563,found464.1581。
实施例17：诺蒎酮噻唑腙类化合物对肿瘤抑制活性的研究
采用mtt法测定噻唑腙类化合物对人源宫颈癌细胞(hela)、人源结肠癌细胞(ct-26)、人源肺癌细胞(smmc-7721)半数抑制浓度(ic50)。具体如下：
1)培养液的配制：①传代培养液：高糖的dmem培养基900ml，新生胎牛血清100ml，青霉素-链霉素溶液(100×，双抗)1ml，混匀无菌保存。②实验培养液：高糖的dmem培养基1000ml，青霉素-链霉素溶液(100×，双抗)1ml，混匀无菌保存。
2)实验药液的配制：将测试样品用dmso溶液配置成10mmol/l的母液。再根据所需加药浓度用实验培养液稀释成所需终浓度。
3)细胞增殖实验：人源宫颈癌细胞hela、人源结肠癌细胞ct-26、人源肺癌细胞smmc-7721以1×104个/孔的密度培养在96孔板中，用含不同浓度的化合物培养液刺激，持续72h。培养结束，每孔加入10μlmtt，在培养箱中培养4h。结束后，除去培养液，加入100μldmso溶解甲瓒结晶。用酶联免疫吸附实验仪测试540nm下的吸光度。
4)统计分析：所有实验都重复3次，均得到类似结果。
抑制率的计算：细胞生长的抑制率按照下列公式计算：
生长抑制率＝(1-存活率)×100％＝[1-(od实验-od空白)/(od对照-od空白)]×100％(od实验表示测试药物组的平均光密度，od对照表示对照组的平均光密度，od空白表示对照组的平均光密度)。
半数抑制浓度(ic50)定义为当50％的细胞存活时的药物浓度。根据测定的光密度(od值)，制作细胞生长抑制率的标准曲线，在标准曲线上求得其对应的药物浓度。
本发明的诺蒎酮缩噻唑腙类化合物对细胞的抑制ic50值见表1。
表1诺蒎酮噻唑腙类化合物(1-24)的抗肿瘤活性
由表1可知，6种化合物(3，7，11，15，19，23)对体外三种的癌细胞系(hela，smmc-7721和ct-26细胞)表现出显著的抗肿瘤活性，其中化合物7的活性最强，其对hela细胞ic50值为3.48μm，对smmc-7721细胞的ic50值为6.69μm和对ct-26细胞的ic50值为8.84μm，并且对两株肿瘤细胞的抗增殖效果均高于阳性对照(依托泊苷对hela和smmc-7721细胞的ic50分别为7.89、40.44μm)。化合物4对两种癌细胞系(smmc-7721和hela细胞)表现出良好的抗肿瘤活性，化合物(8，24)仅对一种肿瘤细胞(hela细胞)有活性。