[0045]
[0046] 表 2
[0047]
[0048] 注：化合物1 (溶剂为dmso)和化合物2 (溶剂为methanol_d4)由400MHz核磁共振 仪测定；化合物3 (溶剂为dmso)和化合物4 (溶剂为dmso)由600MHz核磁共振仪测定；化 合物1的化学位移归属参考文献，其他化合物的化学位移归属根据DEPT、 1!!-1!! COSY、HSQC 和HMBC数据。
[0049] 表3化合物1~413C NMR数据
[0050]
[0051 ] 注：化合物1 (溶剂为dmso)和化合物2 (溶剂为methanol_d4)由400MHz核磁共振 仪测定；化合物3 (溶剂为dmso)和化合物4 (溶剂为dmso)由600MHz核磁共振仪测定；化 合物1的化学位移归属参考文献，其他化合物的化学位移归属根据DEPT、 1!!-1!! COSY、HSQC 和HMBC数据。
[0052] 实施例2本发明化合物抗氧化活性研究
[0053] 1 材料
[0054] 普析TU-1950紫外分光光度计（北京普析公司）；METTLER AE240型电子天平（梅 特勒一托利多（上海）有限公司），KQ-250B超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
[0055] DPPH(悌希爱（上海）化成工业发展有限公司）；抗坏血酸（广东光华科技股 份有限公司）；BHT(成都科龙化工试剂厂），其他试剂为分析纯，水为蒸馏水。实验样品： 化合物 lquercetin-3_〇-0 -D-glucopyrannosy-(l - 6)-0 -D-glucopyranoside，化合 物 2quercetin 3_0_[2'，' _0_acetyl_0 _D_glucopyranosyl_(l 一 6)_0 _D_glucopyranosi de，化合物3quercetin3-0-[6"' -0_acetyl-0 -D-glucopyranosyl_(l一6)-0 -D-glucopy ranoside，化合物4quercetin3-0-[3"' -0_acetyl-0 -D-glucopyranosyl_(l一6)-0 _D_g lucopyranoside。以上实验样品采用实施例1方法分离得到。
[0056] 2方法
[0057] DPPH溶液的配制：精密称取DPPH粉末7. 30mg，加入无水乙醇定容至50mL容量瓶 中，得DPPH储备液。将储备液再稀释5倍，得浓度为0. 074mmol/L、吸光度约为0. 7的DPPH 工作液。
[0058] 样品溶液的配制：精密称取样品粉末适量，加H20配制成0. 32mmol/L储备液，测定 时用 H20 稀释成 0? 16mmol/L、0. 08mmol/L、0. 04mmol/L、0. 02mmol/L、0. 005mmol/L〇
[0059] 3清除DPPH能力测定
[0060] DPPH自由基清除能力测定方法参考ZhouG等[17]的方法。吸取样品溶液0. 4mL 不同浓度样品溶液和2. 6mLDPPH工作液于比色管中，避光反应lh后，于517nm处测定吸光 度值。以H20代替样品溶液作为空白，以无水乙醇代替样品和DPPH溶液作为空白对照，以 相同浓度的Vc和BHT为阳性对照，清除率按下式计算。
[0061]
[0062] 式中As为空白，即70%乙醇加DPPH溶液的吸光度；AiS不同浓度样品溶液和DPPH 溶液的吸光度；A。为空白对照的吸光度。
[0063] 4结果与讨论
[0064]不同物质浓度样品和阳性对照物Vc和BHT对DPPH的清除率见图2，IC5。值分 别为化合物 1 (〇. 〇57mmol/L)，化合物 2 (0. 051mmol/L)，化合物 3 (0. 049mmol/L)，化合物 4(0. 067mmol/L)，Vc(0. 159mmol/L)，而在该浓度梯度下，BHT的最大DPPH清除率未超过 50 %，故无法计算IC5J；t。
[0065] 从结果可以看出，从全缘叶绿绒蒿花中分离得到的化合物1~4清除DPPH自由基 的能力要强于Vc和BHT，有很好的抗氧化活性。
[0066] 参考文献
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【主权项】
1. 如式4所示黄酮类化合物：2. 式4化合物的制备方法，其特征在于：它包括如下操作步骤： (1) 取罂粟科绿绒蒿属植物全缘叶绿绒蒿Meconopsisintegrifolia(Maxim.)Franch. 的花，粉碎，以60~70% v/v乙醇为溶剂进行提取，收集醇提液，减压回收乙醇，依次用 水-乙酸乙酯溶剂系统和水-正丁醇溶剂系统萃取，合并乙酸乙酯和正丁醇萃取液，除去溶 剂后，所得残渣即为粗提物； (2) 取乙酸乙酯：正丁醇：水=2 :3 :5v/v/v，充分振摇，静置分层，以上相为固定相，下 相为流动相，将固定相充满分离螺旋管，柱温30~35°C，主机正转，转速为890~920r/ min，然后以2mL/min的流速栗入流动相，至两相溶剂在管柱中达到平衡状态；将步骤（1)制 备的粗提物，以下相为溶剂溶解，制备样品溶液，将样品溶液进样，在254nm下监测，收集出 峰时间为420~450min的目标成分，即得式4化合物。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤（1)中，乙醇浓度为70% v/v。4. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤（2)中，柱温为35°C。5. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤（2)中，转速为900r/min。6. 式4化合物在制备抗氧化的药品或保健品中的用途。7. 根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述药品或保健品是清除自由基的药品 或保健品。8. 根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述自由基为DPPH自由基。9. 一种药物或保健品组合物，其特征在于：它是由式4化合物为活性成分制备而成的 制剂。
【专利摘要】本发明提供了如式4所示黄酮类化合物。本发明还提供了该化合物的制备方法和用途。本发明首次从全缘叶绿绒蒿花中分离得到了式4化合物，发现该化合物具有良好的抗氧化活性，可将其用于药用或保健品。
【IPC分类】C07D311/40, A61P39/06, C07D311/36, A61K31/352
【公开号】CN105153093
【申请号】CN201510543417
【发明人】刘圆, 黄艳菲, 韩亚涛, 李伯超
【申请人】西南民族大学, 刘圆
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年8月29日