4, 297、6, 165, 464、6, 365, 157、6, 406, 867、 6, 709, 659 ;6, 709, 873 ;6, 753, 407 ;6, 814, 965 ;6, 849, 259 ;6, 861，572 ;6, 875, 434 和 6, 891，024。本文中引用的和本文中的所有专利、专利申请公开案和其它出版物在此通过引 用并入本申请。
[0068] 可从任何动物来源（包括鸟类和哺乳动物）产生抗体。优选地，所述抗体是羊、鼠 (例如小鼠和大鼠）、兔、山羊、豚鼠、骆驼、马或鸡来源的。此外，新的技术允许开发人抗体 和从人组合抗体文库筛选人抗体。例如，噬菌体抗体表达技术允许在动物免疫不存在的情 况下生产特异性抗体，如在美国专利No. 6, 946, 546 (其通过引用并入本文）中所描述的。这 些技术在 Marks (1992) ;Ste_er (1994) ;Gram 等人（1992) ;Barbas 等人（1994);和 Schier 等人（1996)中进行了进一步描述。
[0069] 可完全预期针对HER3的抗体将具有中和或抵消HER3的作用而无论动物物种、单 克隆细胞系或抗体的其他来源的能力。某些动物物种对于产生治疗性抗体可能是不太优选 的，因为它们可以更容易引起因补体系统的激活（通过"Fc"部分）而导致的过敏反应。然 而，完整抗体可被酶促消化成"Fc"（补体结合）片段，和具有结合结构域或CDR的抗体片 段。Fc部分的除去减小抗原抗体片段将引发不期望的免疫应答的可能性，并且因此，无 Fc 的抗体对于预防性或治疗性治疗可以是优选的。如上所述，还可构建抗体，以成为嵌合抗体 或部分或完全人抗体，以减少或消除因向动物施用已在其它物种中产生的或具有来自其它 物种的序列的抗体而引起的不利免疫后果。
[0070] 替代变体通常在蛋白质内的一个或多个位点上含有一个氨基酸对另一个氨基酸 的交换，并且可被设计来调节多肽的一个或多个性质（具有或不具有其它功能或性质的丧 失）。取代可以是保守的，即，一个氨基酸被具有相似形状和电荷的氨基酸替代。保守取代 是本领域公知的，且包括例如如下变化：丙氨酸至丝氨酸、精氨酸到赖氨酸、天冬酰胺至谷 氨酰胺或组氨酸、天冬氨酸至谷氨酸、半胱氨酸至丝氨酸、谷氨酰胺至天冬酰胺、谷氨酸至 天冬氨酸、甘氨酸至脯氨酸、组氨酸至天冬酰胺或谷氨酰胺、异亮氨酸至亮氨酸或缬氨酸、 亮氨酸至缬氨酸或异亮氨酸、赖氨酸至精氨酸、甲硫氨酸至亮氨酸或异亮氨酸、苯丙氨酸至 酪氨酸、亮氨酸或甲硫氨酸、丝氨酸至苏氨酸、苏氨酸至丝氨酸、色氨酸至酪氨酸、酪氨酸至 色氨酸或苯丙氨酸、以及缬氨酸至异亮氨酸或亮氨酸。或者，取代可以是非保守，以使得多 肽的功能或活性受到影响。非保守性变化通常包括用化学上不同的残基取代残基，诸如用 极性或带电荷的氨基酸取代非极性或不带电荷的氨基酸，反之亦然。
[0071] 蛋白质可以是重组的或体外合成的。或者，可从细菌分离非重组或重组蛋白。还 设想可将含有此类变体的细菌应用于组合物和方法中。因此，不需要分离蛋白质。
[0072] 设想在组合物中，每ml存在约0.0 Olmg至约IOmg的总多肽、肽和/或蛋白质。 因此，组合物中蛋白质的浓度可以是为约、至少约或至多约0. 〇〇l、〇. 〇l〇、〇. 050、0. 1、0. 2、 0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5、3. 0、3. 5、4. 0、4. 5、5. 0、5. 5、6. 0、6. 5、 7. 0、7. 5、8. 0、8. 5、9. 0、9. 5、10. 0mg/ml或更多（或可源自其中的任何范围）。在这当中， 约、至少约或至多约 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、 24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、 49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、 74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99 或100 %可以是结合HER3的抗体。
[0073] 抗体或优选地抗体的免疫部分可被化学缀合于其它蛋白质或表达为与其它蛋白 的融合蛋白。为了本说明书和所附权利要求的目的，所有此类融合的蛋白质被包括在抗体 或抗体的免疫部分的定义中。
[0074] 实施方案提供针对HER3的抗体或抗体样分子、连接于至少一种试剂以形成抗体 缀合物或有效载荷的多肽和肽。为了增强抗体分子作为诊断剂或治疗剂的功效，常规地连 接或共价结合或复合至少一种所需的分子或部分。此类分子或部分可以是，但不限于至少 一种效应分子或报告分子。效应分子包含具有所需活性例如细胞毒性活性的分子。已被附 接于抗体的效应分子的非限定实例包括毒素、治疗性酶、抗生素、放射性标记的核苷酸等。 相反地，报告分子被定义为可使用测定进行检测的任何部分。已被缀合于抗体的报告分子 的非限定性实例包括酶、放射性标记、半抗原、荧光标记、磷光分子、化学发光分子、发色团、 发光分子、光亲和分子、有色颗粒或配体诸如生物素。
[0075] 在本领域中已知几种用于将抗体附接于或缀合于其缀合物部分的方法。一些附接 方法包括金属螯合物的使用，使用例如有机螯合剂诸如二亚乙基三胺五乙酸酐（DTPA);亚 乙基三胺四乙酸；N-对-甲苯磺酰胺；和/或附接于抗体的四氯-3-6 ?-二苯基甘脲-3。 单克隆抗体还可在偶联剂诸如二苯基甘脲或高碘酸盐存在的情况下与酶反应。在这些偶联 剂存在的情况下或通过与异硫氰酸酯反应来制备与荧光素标记的缀合物。
[0076] II.疾病的治疗
[0077] 本发明的实施方案的某些方面可用于预防或治疗与HER3信号转导相关的疾病或 病症。HER3的信号转导可利用任何适当的药物来减弱以阻止癌细胞增殖。优选地，此类物 质可以是抗-HER3抗体。
[0078] "治疗"和"医治"是指出于获得疾病或健康相关病况的治疗益处的目的向受试者 施用或施加治疗剂或对受试者进行手术操作或物理疗法。例如，治疗可包括施用药物有效 量的抑制HER3信号转导的抗体。
[0079] "受试者"和"患者"是指人或非人，诸如灵长类动物、哺乳动物和脊柱动物。在具 体实施方案中，所述受试者是人。
[0080] 如在整个本申请中所用的，术语"治疗益处"或"治疗上有效的"是指改善或提高 受试者在该病况的医学治疗方面的福利的任何效果。这包括，但不限于疾病的体征或症状 的频率或严重度。例如，癌症的治疗可包括，例如肿瘤尺寸的减小、肿瘤侵袭性的降低、癌症 生长速率的减小或转移的阻止。癌症的治疗还可指患有癌症的受试者的延长的存活。
[0081] A.药物制剂
[0082] 当进行含有抑制性抗体的治疗性组合物的临床应用时，通常有益地制备适合用于 期望的应用的药物或治疗性组合物。在某些实施方案中，药物组合物可包含例如至少约 0. 1 %的活性化合物。在其它实施方案中，活性化合物可包含例如约2 %至约75 %或约25% 至约60%的单位重量，以及可从源自其中的任何范围。
[0083] 有利地以可注射组合物的形式（作为液体溶液或悬浮液）施用本发明的实施方案 的治疗性组合物；还可制备适合在注射之前在液体中配制成溶液或悬浮液的固体形式。还 可乳化这些制剂。
[0084] 短语"药学上或药理学上可接受的"是指当（适当时）向动物诸如人施用时不产 生不利反应、过敏反应或其它不良反应的分子实体和组合物。根据本公开内容，包含抗体或 额外的活性成分的药物组合物的制备对于本领域普通技术人员来说是已知的。此外，对于 动物（例如，人）施用，应理解制剂应当满足如FDA生物标准办公室要求的无菌、致热原性、 一般安全性和纯度标准。
[0085] 如本文中所用，"药学上可接受的载体"包括任何和全部含水溶剂（例如，水、醇/ 含水溶液、盐水溶液、胃肠外媒介物，诸如氯化钠、林格氏葡萄糖等）、非含水溶剂（例如，丙 二醇、聚乙二醇，植物油和可注射的有机酯，诸如油酸乙酯）、分散介质，包衣，表面活性剂、 抗氧化剂、防腐剂（例如，抗细菌或抗真菌剂、抗氧化剂、螯合剂和惰性气体）、等渗剂、吸 附延迟剂、盐、药物，药物稳定剂、凝胶、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、调味剂、染 料、液体和营养补充剂、这样的类似材料及其组合，这对于本领域普通技术人中来说是已知 的。根据公知的参数调整药物组合物中的各种组分的pH和确切浓度。
[0086] 术语"单位剂量"或"剂量"是指适合用于受试者的物理上分开的单位，每一个单 位含有经计算产生上文中论述的与其施用（即，适当的途径和治疗方案）相关的期望的反 应的预定量的治疗性组合物。待施用的量（根据治疗的次数和单位剂量）取决于期望的效 果。向患者或受试者施用的本发明的实施方案的组合物的实际剂量可根据身体和生理因素 诸如受试者的体重、年龄、健康和性别、待治疗的疾病的类型、疾病渗透的程度、先前或当前 的治疗干预、患者的特发症、施用途径以及具体治疗物质的效力、稳定性和毒素来测定。例 如，剂量还可包含每施用约lyg/kg/体重至约1000mg/kg/体重（该这样的范围包括其间 的剂量）或更多以及可源自其中的任何范围。在可源自本文中所列的数字的范围的非限定 性实例中，可施用约5 μ g/kg/体重至约100mg/kg/体重、约5 μ g/kg/体重至约500mg/kg/ 体重的范围等。负责施用的医生在任何情况下将测定用于个体受试者的组合物和适当剂量 中的活性成分的浓度。
[0087] 可配制活性化合物以用于胃肠外施用，例如，配制用于通过静脉内、肌内、皮下或 甚至腹膜内途径的注射。通常地，可将此类组合物制备为液体溶液或悬浮液；还可制备适合 用于在注射之前在添加液体后制备溶液或悬浮液的固体形式；以及，还可乳化制剂。
[0088] 适合注射使用的药物形式包括无菌含水溶液或分散体；包含芝麻油、花生油或含 水丙二醇的制剂；和用于无菌可注射液或分散体的临时制备的无菌粉剂。在所有情况下，所 述形式必须是无菌的并且必须具有达到其可容易地被注射的程度的流动性。其还应当在制 造和贮存条件下是稳定的，并且必须进行防腐处理以抵抗微生物诸如细菌和真菌的污染作 用。
[0089] 可将蛋白质性质的组合物配制成中性或盐形式。药学上可接受的盐包括与无机酸 (诸如例如盐酸或磷酸）或这样的有机酸如例如乙酸、草酸、酒石酸、扁桃酸等形成的酸加 成盐（与蛋白质的游离氨基形成的）。与游离羧基形成的盐还可衍生自无机碱诸如例如氢 氧化钠、氢氧化钾、氢氧化氨、氢氧化钙或氢氧化铁，以及衍生自这样的有机碱如异丙胺、三 甲胺、组氨酸、普鲁卡因等。
[0090] 药物组合物可包含含有例如水、乙醇、多元醇（例如，甘油、丙二醇和液体聚乙二 醇等）、其适当的混合物以及植物油的溶剂或分散介质。适当的流动性可以例如通过使用 包衣诸如卵磷脂，在分散体的情况下通过维持所需粒度以及通过使用表面活性剂来维持。 微生物作用的防止可利用各种抗菌剂和抗真菌剂例如对羟苯甲酸、三氯叔丁醇、苯酚、山梨 酸、硫柳汞等来实现。在许多情况下，优选地包括等渗剂，例如糖类或氯化钠。可注射组合 物的延长的吸收可通过在组合物中使用延迟吸收剂例如单硬脂酸铝或明胶来实现。
[0091] Β·联合治疗
[0092] 在某些实施方案中，本发明的组合物和方法牵涉与第二或另外的疗法组合的抑制 HER3在癌细胞增殖中的活性的针对HER3的抗体或抗体片段。此类疗法可用于治疗与HER3 介导的细胞增殖相关的任何疾病。例如，所述疾病可以是癌症。
[0093] 所述方法和组合物（包括联合治疗）提高治疗或保护效果，和/或增强另一种抗 癌或抗过度增殖性疗法的疗效。可以以有效地实现所需效果诸如癌细胞的杀死和/或细胞 增殖的抑制的组合量提供治疗性和预防性方法和组合物。该方法可包括将所述细胞与抗 体或抗体片段和第二疗法接触。可将组织、肿瘤或细胞与一种或多种包含一种或多种试剂 (即，抗体或抗体片段或抗癌剂）的组合物或药物制剂接触，或通过将组织、肿瘤和/或细胞 与两种或更多种不同的组合物或制剂接触，其中一种组合物提供1)抗体或抗体片段，2)抗 癌剂或3)抗体或抗体片段和抗癌剂。同样地，设想可将这样的联合治疗与化学疗法、放射 疗法、手术疗法或免疫疗法结合使用。
[0094] 术语"接触的"和"暴露的"，当用于细胞时，在本文中用于描述籍以将治疗性构建 体和化学治疗剂或放射治疗剂递送至靶细胞或与靶细胞直接并置放置的过程。为了实现细 胞杀死，例如将两种试剂以有效地杀死细胞或阻止其分裂的组合量递送至细胞。
[0095] 可在抗癌治疗之前、期间、之后或以各种组合施用抑制性抗体。施用可具有从同时 至数分钟至数天至数周的间隔。在其中将抗体或抗体片段与抗癌试剂单独地向患者提供的 实施方案中，通常确保相当长的时间不在每一次递送的时间之间终止，以便两种化合物仍 然能够对患者产生有利地组合的效果。在此类情况下，设想可为患者提供彼此约在12至24 小时或72小时内，更具体地，彼此在约6-12小时内的抗体疗法和抗癌疗法。在一些情形下， 可能期望显著延长治疗时期，其中在各自施用之间经历数天（2、3、4、5、6或7)至数周（1、2、 3、4、5、6、7 或 8)。
[0096] 在某些实施方案中，治疗过程将持续1-90天或更多天（该这样的范围包括间隔天 数）。设想可在第1至第90天的任何天（该这样的范围包括间隔天数）或其任意组合施用 一种试剂，并且在第1至第90天的任何天（该这样的范围包括间隔天数）或其任意组合施 用另一种试剂。在一天（24小时的时期）内，可向患者施用试剂一次或多次。此外，在治疗 过程后，设想存在不施用抗癌治疗的一段时间。取决于患者的病况，诸如他们的预后、抵抗 力、健康等，该时间段可持续1-7天，和/或1-5周，和/或1-12个月或更长时间（该这样 的范围包括间隔天数）。预期必要时可重复治疗周期。
[0097] 可使用各种组合。对于下列实例，抗体疗法为"Α"并且抗癌疗法为"Β" ：
[0098] Α/Β/Α Β/Α/Β Β/Β/Α Α/Α/Β Α/Β/Β Β/Α/Α Α/Β/Β/Β Β/Α/Β/Β
[0099] Β/Β/Β/Α Β/Β/Α/Β Α/Α/Β/Β Α/Β/Α/Β Α/Β/Β/Α Β/Β/Α/Α
[0100] Β/Α/Β/Α Β/Α/Α/Β Α/Α/Α/Β Β/Α/Α/Α Α/Β/Α/Α Α/Α/Β/Α
[0101] 向患者施用本发明的任何化合物或疗法将遵从用于此类化合物的施用的一般方 案，考虑试剂的毒性（如果有的话）。因此，在一些实施方案中，存在监测可归因于联合治疗 的毒性的步骤。
[0102] i.化学疗法
[0103] 可按照本发明的实施方案使用许多化学治疗剂。术语"化学疗法"是指使用药物 治疗癌症。"化学治疗剂"用于意指在癌症的治疗中施用的化合物或组合物。这些试剂或药 物根据它们在细胞内的活性模式（例如它们是否影响细胞周期以及在什么阶段影响细胞 周期）来分类。或者，可基于其直接交联DNA、嵌入DNA或通过影响核酸合成诱导染色体和 有丝分裂异常的能力表征试剂。
[0104] 化学治疗剂的实例包括烷化剂诸如塞替派和环磷酰胺；烷基磺酸盐，诸如白消安， 英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶，诸如苯并多巴，卡巴醌，美妥替哌和uredopa ;乙烯亚胺和甲 基蜜胺，包括六甲蜜胺、三乙撑密胺、三亚乙基磷酰胺，三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基三 聚氰胺；番荔枝内酯（尤其是泡番荔枝辛和布拉它辛酮）；喜树碱（包括合成类似物托泊 替康）；苔藓抑素 ；callystatin ;CC-1065(包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类 似物）；隐藻素（特别是大环内酯1和大环内酯8);多拉司他汀；多卡米星（包括合成类 似物 KW-2189 和 CB1-TM1);艾植塞洛素（eleutherobin);水鬼蕉喊；sarcodictyin;海绵 抑素（spongistatin);氮芥，诸如苯丁酸氮芥、萘氮芥、胆磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、 氮芥、氧化氮芥盐酸盐、美法仑、新恩比兴、胆留醇苯乙酸氮芥、泼尼氮芥（Prednimustine)、 曲磷胺（Trofosfamide)和尿嘧啶氮芥；亚硝基脲，诸如卡莫司汀、氯脲菌素、福莫司汀、洛 莫司汀、尼莫司汀和雷诺氮芥；抗生素，诸如烯二炔类抗生素（例如，加利车霉素，尤其是加 利车霉素 γ II和加利车霉素 ω II);达内霉素，包括达内霉素 A ;二膦酸盐，诸如氯膦酸盐； 埃斯波霉素；以及新制癌菌素发色团和相关色蛋白烯二炔类抗生素生色团、阿克拉霉素 (aclacinomysins)、放线菌素、安曲霉素、偶氮丝氨酸、博莱霉素、放线菌素 C、carabicin、洋 红霉素、嗜癌霉素、色霉素（chromomycinis)、更生霉素、柔红霉素、地托比星、6-重氮-5-氧 代-L-正亮氨酸、阿霉素（包括吗啉代多柔比星、氰基吗啉基-阿霉素、2-吡咯啉基-阿 霉素和去氧阿霉素）、表阿霉素、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素诸如丝裂霉 素 C、麦考酚酸、