重复上述乙醇洗脱及之后的步骤，进行二次提 取，得到番泻叶巧A·Β盐化合物晶体纯品。 阳〇8引 实施例5
[0084] 取处方量的番泻叶，粉碎，加10倍量0.6wt%碳酸氨钢水液进行常溫揽拌提取3 小时，收集提取液，滤过，滤液加0. 5mol/L的盐酸酸化，调抑值至4. 5,揽拌，静置，滤过得 滤液，将所得药液经陶瓷膜过滤器进行分子截留滤过，陶瓷膜滤器孔径为0. 3μm，得到精 滤液；将精滤液加入5 %的活性白±，揽拌3小时，滤过，所得活性白±加3倍体积的水洗 除去杂质，再用90wt%乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，加无水硫酸巧脱去水分后，在溫度为 75°C、真空度为-0. 09MPa条件下减压浓缩1. 5小时；
[00化]将得到的浓缩物与0. 5mol/L氯化儀溶液混合，氯化儀溶液的体积为上述盐酸添 加体积，将得到的混合物在溫度为75°C、真空度为-0. 09MPa条件下继续减压揽拌进行成盐 反应3小时，；
[0086] 将成盐反应产物过滤后加5倍量丙酬，析出沉淀物，将得到的沉淀物在9W/g、真空 度为-0. 089MPa下进行真空微波干燥，得番泻巧A·B盐化合物的一次提取物；
[0087]番泻巧A ·Β盐化合物的一次提取物重复上述乙醇洗脱及之后的步骤，进行二次提 取，得到番泻叶巧A·Β盐化合物晶体纯品。 阳0蝴实施例6
[0089] 取处方量的番泻叶，粉碎，加10倍量0.6wt%碳酸氨钢水液进行常溫揽拌提取3 小时，收集提取液，滤过，滤液加0. 5mol/L的盐酸酸化，调抑值至4. 5,揽拌，静置，滤过得 滤液，将所得药液经陶瓷膜过滤器进行分子截留滤过，陶瓷膜滤器孔径为0.2μm，得到精 滤液；将精滤液加入5 %的活性白±，揽拌3小时，滤过，所得活性白±加3倍体积的水洗 除去杂质，再用90wt%乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，加无水硫酸巧脱去水分后，在溫度为 80°C、真空度为-0. 08MPa条件下减压浓缩2小时；
[0090] 将浓缩物与0. 5mol/L氯化儀溶液混合，氯化儀溶液的体积为上述盐酸添加体积， 将得到的混合物在溫度为80°C、真空度为-0. 08MPa条件下继续减压揽拌进行成盐反应2小 时；
[00川将成盐反应产物过滤后加10倍量丙酬，析出沉淀物，将得到的沉淀物在8W/g、真 空度为-0. 089MPa下真空微波干燥，得番泻巧A·B盐化合物的一次提取物；
[0092]番泻巧A ·Β盐化合物的一次提取物重复上述乙醇洗脱及之后的步骤，进行二次提 取，得到番泻叶巧A·Β盐化合物晶体纯品。 阳〇9引实施例7
[0094] 按照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VID)测定 阳0巧]色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；W乙腊为流动相A，W1 %醋酸溶液为流动相B，按表1所示程序进行梯度洗脱，流速1.Oml/min，检测波长 267nm，柱溫40°C，进样量10μ1。理论塔板数按番泻巧B峰计算，应不低于5000。
[0096] 表1本发明实施例7中梯度洗脱程序
[0097]
[0098] 对照品洛液的制备精酱称取番与甘A对照品、番扭甘B对照品适量，加0. 1 %NaHC〇3制成每1ml含番泻巧A对照品50μg、番泻巧B对照品100μg的溶液，即得。
[0099]供试品溶液的制备称取番泻叶提取物样品约25mg，精密称定，精密加入0.1%NaHC〇3溶液25ml溶解，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 阳100] 测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μ1，注入高效液相色谱仪，测 定并W面积归一法计算，结果如图1所示，图1为本发明实施例7得到的番泻叶提取物高效 液相色谱图，由图1可W看出，番泻叶提取物中含番泻叶巧A及番泻叶巧Β总和为86%。 阳101] 实施例8
[0102] 番泻巧A·Β巧对便秘模型大鼠的通便功能的影响，健康SPF级Wistar大鼠36只， 雌雄各半，随机分为：正常对照组、模型组、番泻巧AB巧高、中、低剂量组，果导片对照组。W上六组除正常对照组灌胃生理盐水之外，其余各组连续3d按3.Omg/kg剂量灌胃洛赃下胺， 造便秘模型。各组分别按2.Oml/kg的剂量连续7d灌胃相应受试样品，正常组和模型组同 法同量给予生理盐水。第7d灌胃之后，所有大鼠禁食不禁水2地，每只大鼠灌胃1.0ml炭末 液化Og炭末溶于50. 0ml0. 5%簇甲基纤维素钢溶液），30min后断颈处死，剖腹，将消化道 至回盲瓣部分完全取出，测量小肠全长及炭末推进长度。结果如表2所示，表2为本发明实 施例得到的泻巧A·B巧的药效试验结果。 阳10引表2本发明实施例得到的泻巧A·B巧的药效试验结果狂+SD，η=6) 阳104]
阳105]注：模型组与正常对照组比较，Αρ<0. 05, ΑΑρ<0. 01阳106] 药物治疗组与模型组比较，*Ρ<0. 05, **Ρ<0. 01 阳107] 结果表明，各给药组与模型组相比，大鼠的采食量明显提高（Ρ< 0.01)，大鼠体重 明显增加任<〇.〇1)，炭末推进率均明显增加任<〇.〇1)，且粪便粒数、含水量显著增加（Ρ<0.01)。表明给予番泻巧A·Β巧后可提高便秘动物的采食量及饮水量，对其无不良健康 影响并具有通便功能。且高中低剂量组均优于果导片对照组。
[0108] W上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可W做出若干改进和润饰，运些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种番涯?π+??A·R 物I.lfeilF#干式:T式:TTP斤元4吉核I，2. 根据权利要求1所述的番泻叶苷A·B盐化合物，其特征在于，所述的番泻叶苷A·B 盐化合物的纯度在80~90%之间。3. 根据权利要求1所述的番泻叶苷A·B盐化合物，其特征在于，所述的番泻叶苷A·B 盐化合物以晶体形式存在。4. 权利要求1~3任意一项所述番泻叶苷A·B盐化合物制备方法，包括以下步骤： (a) 将番泻叶用碳酸氢钠水溶液提取，得到提取液，提取液过100目~200目筛过滤，得 到过滤后的提取液； (b) 将所述步骤（a)得到的过滤后的提取液进行酸化后，将得到的酸化产物进行固液 分离，得到液相组分A，将所述液相组分A通过分子截留过滤得到精滤液； (c) 将活性白土与所述步骤（b)得到的精滤液混合，搅拌吸附，将吸附后的混合物进行 固液分离，将得到的固体物依次经水、含水醇洗脱，洗脱后的固体物进行固液分离，得到液 相组分B; (d) 将所述步骤（c)得到的液相组分B进行减压浓缩，将得到的减压浓缩产物与含钙镁 离子的化合物混合，进行成盐反应，得到番泻叶苷A·B盐化合物。5. 根据权利要求4所述的番泻叶苷Α·Β盐化合物制备方法，其特征在于，所述步骤（d) 后还包括以下步骤： (e) 将所述步骤（d)成盐反应后的物质中的番泻叶苷Α·Β盐化合物进行提取和晶体析 出，得到番泻叶苷A·Β盐化合物晶体。6. 根据权利要求4所述的番泻叶苷A·B盐化合物制备方法，其特征在于，步骤（a)所 述的碳酸氢钠水溶液的质量浓度为〇. 1 %~1. 0%。7. 根据权利要求4所述的番泻叶苷Α·Β盐化合物制备方法，其特征在于，步骤（b)中所 述的分子截留是通过陶瓷膜过滤器实现的，所述的陶瓷膜过滤器孔径为〇. 1μm~0. 3μm。8. 根据权利要求4所述的番泻叶苷A·B盐化合物制备方法，其特征在于，步骤（d)中 所述的含钙镁离子的化合物选自氯化钙、氯化镁中的一种或几种。9. 根据权利要求5所述的番泻叶苷A·B盐化合物制备方法，其特征在于，步骤（e)具 体为： (el)将所述步骤（d)得到的成盐反应后的物质与无水乙醇混合，析出沉淀物； (e2)将所述步骤（el)得到的沉淀物干燥和粉碎； (e3)将所述步骤（e2)粉碎后的沉淀物与有机溶剂混合，进行超声提取； (e4)将所述步骤（e4)得到的提取物浓缩后冷藏，得到番泻叶苷A·B盐化合物晶体。10. 权利要求1~3任意一项所述的番泻叶苷Α·Β盐化合物或权利要求4~9任意一 项所述制备方法得到的番泻叶苷A·Β盐化合物在制备预防或治疗便秘药物中的应用。
【专利摘要】本发明涉及一种番泻叶苷A·B盐化合物及其制备方法和用途。本发明的技术方案是：以番泻叶为原料，经过提取-过滤-酸化-精滤-提取-精制-化合物成盐-析出纯化得到高纯度有效成分番泻叶苷A·B盐化合物，纯度达到80～90％之间；本发明的番泻叶苷A·B盐化合物加以适宜辅料制成临床所需剂型，临床上用于预防或治疗便秘，效果显著，稳定性好。本发明的番泻叶苷A·B盐化合物具有良好的通便作用，用以治疗便秘具有安全性好、起效快、作用强、生物利用度高、疗效稳定、使用方便等优点。工业生产设备简洁、操作方便、成本低、自动化程度高、易于控制产品质量。
【IPC分类】C07H15/244, A61P1/10, C07H1/08
【公开号】CN105254689
【申请号】CN201510747540
【发明人】李晓亮, 邵旭, 牛海军
【申请人】安徽九方药物研究院有限公司
【公开日】2016年1月20日
【申请日】2015年11月4日