注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明提出了一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂及其制备方法，包括冻干如下组分的溶液：重组人白细胞介素-2和药学上可接受的增溶剂；所述溶液pH为6.0-8.0；所述增溶剂为甘露醇、山梨醇、氯化钠、十二烷基硫酸钠SDS、葡萄糖、蔗醣、乳糖或右旋糖苷中的一种或几种的混合物。制备包括：（1）配制含有重组人白细胞介素-2和药学上可接受的增溶剂的溶液，所述溶液的pH值为6.0～8.0；（2）将所得的溶液按常规方法除去热原、过滤除菌；（3）将所得的溶液冷冻干燥。本发明的重组人白细胞介素-2冻干粉针制剂性能稳定，易于运输和贮存，方便临床使用；本发明的制备方法简单易行，成本低，有利于大规模生产。
【专利说明】注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及白细胞介素-2【技术领域】，特别是指一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]人白细胞介素-2(hIL_2)可提高人体对病毒、细菌、真菌、原虫等感染的免疫应答，使细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、天然杀伤细胞(NK)、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)和肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)增值，并使其杀伤活性增强，进而清除体内肿瘤细胞和病毒感染细胞等。它还可以增加抗体和干扰素(IFN)等细胞因子的分泌，在机体的免疫应答中具有非常重要的作用，是一种免疫增强剂，具有抗病毒、抗肿瘤和提高机体免疫功能等作用。
[0003]白细胞介素-2作为一种具有广泛的免疫调节作用的细胞因子，不管是全身系统应用、局部应用、与其它细胞因子类生物应答调节剂合用、与化疗药物合用、与LAK细胞合用、与TIL细胞合用等都可以产生较好的抗肿瘤作用。
[0004]由于注射用重组人白细胞介素-2在储存和运输过程中性能容易发生改变，主要成分降解导致活性下降，影响产品的质量和使用效期。因此保证白细胞介素-2的稳定性在制剂生产和临床应用都有重要的现实意义。
【发明内容】
[0005]针对现有技术存在的 缺点，本发明提出一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂及其制备方法。
[0006]本发明的技术方案是这样实现的:
[0007]一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂，包括冻干如下组分的溶液:
[0008]重组人白细胞介素_2、药学上可接受的增溶剂以及保护剂；
[0009]所述溶液pH 为 6.0-8.0 ；
[0010]所述的增溶剂为甘露醇、山梨醇、氯化钠、十二烷基硫酸钠(SDS)、葡萄糖、蔗醣、乳糖或右旋糖苷中的一种或几种的混合物。
[0011]上述的药学上可接受的增溶剂通常是用于制备冻干制剂，作填充支架作用，使干燥的药物能保持一定的体积的物质，优选甘露醇。
[0012]作为优选的技术方案，所述溶液pH为6.5-7.5。
[0013]作为优选的技术方案，所述溶液还包括保护剂，保护剂为药学上可接受的保护剂，通常用于保护白细胞介素-2的活性，如人血白蛋白，用量为0.1% -1%。
[0014]作为优选的技术方案，所述溶液还包括药学上可接受的可调节所述溶液pH值的pH调节剂。
[0015]作为优选的技术方案，所述药学上可接受的pH调节剂为磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐和乳酸盐在内的缓冲系统中的一种或几种的缓冲系统。其中磷酸盐为磷酸钠盐和/或磷酸钾盐。[0016]作为优选的技术方案，所述的增溶剂用量是通常制备冻干制剂所用增溶剂的常规用量；所述的溶液以水和(或)药学上可接受的有机溶剂为溶剂。
[0017]一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂的制备方法，包括:
[0018](I)配制含有重组人白细胞介素-2和药学上可接受的增溶剂的溶液，所述溶液的pH值为6.0~8.0;
[0019](2)将第(I)步骤所得的溶液按常规方法除去热原、过滤除菌；
[0020](3)将第(2)步骤所得的溶液冷冻干燥。
[0021]作为优选的技术方案，所述步骤(2)中使用微孔滤膜过滤除菌，所述微孔滤膜的孔径为 0.22-0.45um。
[0022]本发明通过使用增溶剂复配，达到改善注射用重组人白细胞介素-2冻干粉针稳定性的目的，可有效地解决制剂的溶解、稳定性、运输贮存等问题。本发明的注射用重组人白细胞介素-2冻干粉针制剂在使用之前，可以把它溶解于注射用水或其它注射液。所述的注射液可以是常规的注射液，如用于静脉输注的等渗水性介质，如5%葡萄糖注射液或
0.9%氯化钠注射液。根据治疗过程和病人的状况，使用本发明注射用重组人白细胞介素-2冻干粉针制剂的用量一般以白细胞介素-2的量每次为5万IU-100万IU为宜。
[0023]由于白细胞介素-2易失活，在配制过程中要控制温度，一般为室温，同时添加药学上可接受的保护剂，使得本发明的冻干制剂性能稳定，有利于贮存和运输。
[0024]有益效果
[0025](I)本发明的重组人白细胞介素-2冻干粉针制剂性能稳定，易于运输和贮存，方便临床使用；
[0026](2)本发明的制备方法简单易行，成本低，有利于大规模生产。
【具体实施方式】
[0027]下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0028]实施例1
[0029]取适量重组人白细胞介素-2原液及适量甘露醇注射液，加入柠檬酸钠溶液，加入SDS，加入人血白蛋白，搅拌均匀，控制pH值在6.0~8.0之间，用注射用水定容，得到每毫升含重组人白细胞介素-210万IU和甘露醇0.1g的溶液。将溶液用0.22 μ m微孔滤膜过滤除菌，在无菌条件下将所得的溶液按每瓶1.0ml置无菌西林瓶中，用通气胶塞半加塞，置冷冻干燥机内冷冻干燥约24小时后，全真空压塞，即得本发明的重组人白细胞介素-2冻干粉针剂A。
[0030]实施例2~4
[0031]分别取适量重组人白细胞介素-2原液及适量甘露醇注射液，加磷酸二氢钠和磷酸氢二钠缓冲液，加入SDS，加入人血白蛋白，搅拌均匀，控制pH值在6.0~8.0之间，用注射用水定容，得到每毫升含重组人白细胞介素-210万IU和甘露醇0.05g、0.lg、0.15g的溶液。将溶液用0.22 μ m微孔滤膜过滤除菌，在无菌条件下将所得的溶液按每瓶1.0ml置无菌西林瓶中，用通气胶塞半加塞，置冷冻干燥机内按照实施例8的方法冷冻干燥后，全真空压塞，即得本发明的重组人白细胞介素-2冻干粉针剂B、C、D0
[0032]实施例5
[0033]取适量重组人白细胞介素-2原液及适量乳糖水溶液，加入磷酸二氢钠和磷酸氢二钠缓冲液，加入SDS，加入人血白蛋白，搅拌均匀，控制pH值在6.0~8.0之间，用注射用水定容，得到每毫升含重组人白细胞介素-210万IU和乳糖0.1g的溶液。将溶液用0.22 μ m微孔滤膜过滤除菌，在无菌条件下将所得的溶液按每瓶1.0ml置无菌西林瓶中，用通气胶塞半加塞，置冷冻干燥机内按照实施例8的方法冷冻干燥后，全真空压塞，即得本发明的重组人白细胞介素-2冻干粉针剂E。
[0034]实施例6
[0035]取适量重组人白细胞介素-2原液及适量氯化钠水溶液，加入磷酸二氢钠和磷酸氢二钠缓冲液，加入SDS，加入人血白蛋白，搅拌均匀，控制pH值在6.0~8.0之间，用注射用水定容，得到每毫升含重组人白细胞介素-210万IU和氯化钠0.1g的溶液。将溶液用
0.22 μ m微孔滤膜过滤除菌，在无菌条件下将所得的溶液按每瓶1.0ml置无菌西林瓶中，用通气胶塞半加塞，置冷冻干燥机内按照实施例8的方法冷冻干燥后，全真空压塞，即得本发明的重组人白细胞介素-2冻干粉针剂F。
[0036]实施例7
[0037]取适量重组人白细胞介素-2原液及适量右旋糖苷葡萄糖注射液,加入柠檬酸钠溶液，加入SDS，加入人血白蛋白，搅拌均匀，控制pH值在6.0~8.0之间，用注射用水定容，得到每毫升含重组人白细胞介素-210万IU和右旋糖苷葡萄糖0.1g的溶液。将溶液用
0.22 μ m微孔滤膜过滤除菌，在无菌条件下将所得的溶液按每瓶1.0ml置无菌西林瓶中，用通气胶塞半加塞，置冷冻干燥机内冷冻干燥约25小时后，全真空压塞，即得本发明的重组人白细胞介素-2冻干粉针剂G。
[0038]实施例8
[0039]将实施例2至6所得溶液按照以下方法冷冻干燥，制备本发明的重组人白细胞介素-2冻干粉针剂:
[0040]预冻:把分装好的待冻干溶液放入冻干箱内搁板上进行预冻，分别将冻干箱内温度降至-25 °C、-30 °C、-35 °C、-40 V、-50 V 左右。
[0041]升华干燥:待冷凝器温度下降至_45°C以下，控制冻干箱内真空度在10_30Pa之间。通过搁板下的加热系统缓缓加热，将搁板适当加热至10°C左右，以供给冰的升华所需的热量，进行升华干燥12、11、13、15、12小时。
[0042]再干燥:将干燥温度分别控制再15°C、20°C、25°C、30°C、10°C，板温控制在3(TC以下，直至制品温度与板温重合，即达到干燥的终点。冷凝器温度下降至-50°C以下，再干燥
11、10、13、12、15 小时。
[0043]实施例9
[0044]对实施例1-7制得的本发明制剂的溶解性能考察，本发明制剂A、B、C、D、E、F、G在加入注射用水后，均能很好地溶解，可见异物符合规定。
[0045]实施例10
[0046]对实施例制得的本发明制剂的稳定性能进行考察。[0047]( I)稳定性试验
[0048]将本发明制剂B置于600勒克司照度、85% RH、60°C的条件下，分别于10、20天取样，考察外观、PH值、水分、含量的变化，试验结果见下表。
[0049]表1本发明制剂稳定性的试验
[0050]
【权利要求】
1.一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂，包括冻干如下组分的溶液: 重组人白细胞介素-2和药学上可接受的增溶剂； 所述溶液PH为6.0-8.0 ； 所述增溶剂为甘露醇、山梨醇、氯化钠、十二烷基硫酸钠SDS、葡萄糖、蔗醣、乳糖或右旋糖苷中的一种或几种的混合物。
2.根据权利要求1所述的一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂，其特征在于，所述溶液还包括保护剂，保护剂为人血白蛋白，质量百分比用量为0.1 % -1 %。
3.根据权利要求1或2所述的一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂，其特征在于，所述溶液PH为6.5-7.5。
4.根据权利要求1或2所述的一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂，其特征在于，所述溶液还包括药学上可接受的可调节所述溶液PH值的pH调节剂。
5.根据权利要求4所述的一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂，其特征在于，所述药学上可接受的pH调节剂为磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐和乳酸盐在内的缓冲系统中的一种或几种的缓冲系统。
6.根据权利要求5所述的一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂，其特征在于，所述磷酸盐为磷酸钠盐和/或磷酸钾盐。
7.根据权利要求1所述的一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂，其特征在于，所述溶液以水和/或药学上可接受的有机溶剂为溶剂。
8.根据权利要求1或2所述的一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂，其特征在于，所述冻干制剂在使用前溶解于水或其它注射液中。
9.根据权利要求1-8任一权利要求所述的一种注射用重组人白细胞介素-2冻干制剂的制备方法，包括: (1)配制含有重组人白细胞介素-2和药学上可接受的增溶剂的溶液，所述溶液的pH值为 6.0 ~8.0 ; (2)将第(I)步骤所得的溶液按常规方法除去热原、过滤除菌； (3)将第(2)步骤所得的溶液冷冻干燥。
【文档编号】A61K9/19GK103565757SQ201210274514
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2012年8月2日 优先权日:2012年8月2日
【发明者】杜连强 申请人:江苏金丝利药业有限公司