腈水解酶突变体及其编码基因和应用的制作方法

文档序号:11145155阅读:来源:国知局

技术特征:

1.根据权利要求1所述的腈水解酶突变体,其特征在于,所述突变体包含SEQ ID NO:1所示氨基酸序列中下述任何一个或多个氨基酸位点上的氨基酸取代,所述位点为135、41、192、120,其中,

第135位的缬氨酸被突变为丙氨酸或酪氨酸;

第41位的天冬氨酸被突变为丙氨酸;

第192位亮氨酸被突变为缬氨酸;

第120位的赖氨酸被突变为异亮氨酸。

2.根据权利要求1所述的腈水解酶突变体,其特征在于,所述腈水解酶突变体包含SEQ ID NO:1所示氨基酸序列中第135位的缬氨酸被突变为丙氨酸或酪氨酸,还包含下述任何一个或多个氨基酸位点上的氨基酸取代,所述位点选自41、134、120、82、192、319,其中,

第41位的天冬氨酸被突变为丙氨酸;

第134位的组氨酸被突变为缬氨酸;

第120位的赖氨酸被突变为异亮氨酸;

第82位的丙氨酸被突变为色氨酸;

第192位亮氨酸被突变为缬氨酸;

第319位的丝氨酸被突变为异亮氨酸。

3.根据权利要求1所述的腈水解酶突变体,其特征在于,所述腈水解酶突变体包含SEQ ID NO:1所示氨基酸序列中第135位的缬氨酸被突变为丙氨酸或酪氨酸,还包含第134位的组氨酸被突变为缬氨酸。

4.根据权利要求3所述的腈水解酶突变体,其特征在于,还包含下述任何一个或多个氨基酸位点上的氨基酸取代,所述位点选自41、82、192、120、319,其中,

第41位的天冬氨酸被突变为丙氨酸;

第82位的丙氨酸被突变为色氨酸;

第192位亮氨酸被突变为缬氨酸;

第120位的赖氨酸被突变为异亮氨酸;

第319位的丝氨酸被突变为异亮氨酸。

5.根据权利要求3所述的腈水解酶突变体,其特征在于,还包含下述任何一个或多个氨基酸位点上的氨基酸取代,所述位点选自41、192、120,其中,

第41位的天冬氨酸被突变为丙氨酸;

第192位亮氨酸被突变为缬氨酸;

第120位的赖氨酸被突变为异亮氨酸。

6.根据权利要求1所述的腈水解酶突变体,其特征在于,包含SEQ ID NO:1所示氨基酸序列中选自以下氨基酸突变组成的组:

1)V135A+D41A;

2)V135A+K120I;

3)V135A+L192V;

4)H134V+V135A;

5)H134V+V135A+L192V;

6)H134V+V135A+L192V+D41A;

7)H134V+V135A+L192V+K120I。

7.多核苷酸,其编码权利要求1-6中任意一项所述的腈水解酶突变体。

8.载体,其包含权利要求7所述的多核苷酸。

9.宿主细胞,其包含权利要求8所述的载体。

10.权利要求1-6中任意一项所述的腈水解酶突变体在制备光学活性2-芳基-丙酸方面的应用。

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