3mg，2mmol)、DMAP(6mg，0.05mmol)，室温下搅拌5分钟，加入化合物 16 (20mg，0. 038mmol)，加热至60°C反应48小时后，过滤、减压浓缩后，经乙酸乙酯萃取，有 机相经无水硫酸钠干燥，浓缩后得到的产品溶于8mL吗啉中，室温搅拌1小时后，浓缩，经 硅胶柱层析（洗脱剂为EtOAc/石油醚=10:1~6:1)，得到淡黄色固体20mg，即为化合物 340,产率 82. 3%，ESI-MS(m/z) :641. 4[M+H]+，663. 4[M+Na] +。
[0114] 化合物340可进一步经历步骤（4)还原双键同时脱除苄基得到化合物403。
[0115]
[0116] 步骤（4):称取 IOmg 化合物 340 (0? 01561mmol)溶于 5mLCH30H-CH2Cl2* (体积比 1:1)，加入催化量的Pd-C，室温下于Iatm H2作用下反应6h后，过滤除去Pd-C，浓缩得淡黄 色固体 8mg，即为化合物 403,产率 92. 7%，ESI-MS(m/z) :553. 3[M+H]+，575. 3[M+Na]+。
[0117] 实施例7
[0118]
[0119] 步骤（I):称取 50mg 化合物AflaquinoloneC(0? 1148mmo1)溶于 10mT,DMF中，于 室温下加入IOOmgK2CO3,20 yL烯丙基溴（0.2296mmol)，室温下搅拌反应4小时后，TLC检 测原料消失，减压浓缩后，加入50mL乙酸乙酯稀释，依次用水、饱和NaCl洗涤，无水Na2SO4 干燥，过滤、减压浓缩后，经硅胶柱层析（石油醚/EtOAc=12/1)，得到淡黄色固体50mg，即 为化合物17,产率91.6%，ESI-MS(m/z) :498. 2[M+Na]+。
[0120]
[0121] 步骤（2):称取40mg化合物17溶于20mL THF中，冰浴下加入25mg NaBH4,冰浴下 反应2h后，加入2mL饱和NH4Cl终止反应，蒸除THF后，乙酸乙酯萃取，有机相经无水硫酸 钠干燥，浓缩后，经硅胶柱层析（洗脱剂为EtOAc/石油醚=10 :1~8 :1)，得到淡黄色固体 36mg，即为化合物 18,产率 89. 6%，ESI-MS m/z:500. 2[M+Na] +。
[0122]
[0123] 步骤（3):称取Fmoc-L-组氨酸（755mg，2mmol)溶于干燥的甲苯（15mL) 中，加入DCC(413mg，2mmol)、DMAP(6mg，0.05mmol)，室温下搅拌5分钟，加入化合物 18 (20mg，0. 042mmol)，加热至60°C反应48小时后，过滤、减压浓缩后，经乙酸乙酯萃取，有 机相经无水硫酸钠干燥，浓缩后得到的产品溶于8mL吗啉中，室温搅拌1小时后，浓缩，经硅 胶柱层析（洗脱剂为EtOAc/石油醚=6:1~3:1)，得到淡黄色固体20mg，即为化合物256， 产率 77. 7%，ESI-MS(m/z) :615. 3[M+H]+，637. 3[M+Na] +。
[0124] 化合物256可进一步经历步骤（4)还原双键得到化合物404。
[0125]
[0126]步骤（4):称取 IOmg 化合物 256 (0? 01627mmol)溶于 5mLCH30H-CH2Cl2* (体积比 1:1)，加入催化量的Pd-C，室温下于Iatm H2作用下反应6h后，过滤除去Pd-C，浓缩得淡黄 色固体 9mg，即为化合物 404,产率 89. 4%，ESI-MS(m/z) :619. 3[M+H]+，641. 3[M+Na]+。
[0127] 实施例8
[0128]
[0129] 实施例4中的化合物182、401可按照实施例5-7步骤⑷中记载的还原条件，还 原得到化合物405-406。
[0130] 实施例9
[0131] 采用实施例1-8任一项中记载的制备方法或现有技术中类似反应官能团间的反 应或在其基础上进行本领域常规替换，可制备得到化合物21-380、401-406,以上所有化合 物均经iHNMR、ESI-MS (见表1)进行结构确证，部分化合物经OK1H-1H COSY、HMQC、HMBC、 NOESY进行结构确证。
[0132] 实施例10
[0133] 本发明测试了所有化合物对呼吸道合胞病毒（RSV)的抑制活性，为了本发明撰写 的方便以及便于更加简明直观的理解本发明，以下仅列出本发明化合物的ESI-MS及呼吸 道合胞病毒（RSV)的抑制活性数据（见表1)。
[0134] 本发明化合物对呼吸道合胞病毒（RSV)的抑制活性按照如下文献方法测试： Zhang,Y.J. ；Stein,D.A. ；Fan,S.M. ；Wang,K.Y. ；Kroeker,A.D.；Meng,X.J. ；Iversen,P. L. ;Matson，D.O. Vet. Microbiol. 2006, 117(2-4)，117-129 ;或可按照现有技术中其他类似 文献中报道的方法进行测试。本发明所有化合物（21-380、401-406)对RSV均具有显著的 抑制作用，其半数有效浓度（EC 5tl)在0. 1至120ng/mL，且半数中毒浓度（TC5tl)在1-100 y g/ mL，抑毒指数（TI) =TC5tZEC5tl最高达600,可见本发明化合物或其立体异构体、其几何异构 体、其溶剂化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物可用于制备高效低毒的抗RSV感 染药物。
[0135] 表1本发明化合物（21-380、401-406)的ESI-MS数据及其对呼吸道合胞病毒 (RSV)的抑制活性数据。
[0136]
[0137]
[0139] 表1中"A"表示化合物浓度为0. 1-2. 0ng/mL，"B"表示化合物浓度为10-25ng/mL， "C"表示化合物浓度为50-75ng/mL，"D"表示化合物浓度为90-120ng/mL ;"++++"表示LC5tl/ EC5。在 500-600 之间，"+++"表示 LC 5Q/EC5Q在 350-450 之间，"++"表示 LC 5Q/EC5Q在 200-300 之间，" + "表示LC5Q/EC5Q在50-150之间。
[0140] 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考文献，就如同每一篇文献被 单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述内容之后，本领域的技术人员 可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的 范围。
【主权项】
1. 一种式1-1结构的喹啉酮生物碱衍生物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物，其特征在于式1-1化合物具有如下结构：其中&为羧基端脱掉羟基的氨基酸残基，R2为H、C1-C4烷基、C3-C6环烷基、C1-C4卤 代烷基、C1-C4烷基酰基、C1-C4卤代烷基酰基、C3-C6环烷基酰基、C2-C4烯基、C7-C10芳 基烷基，"--"表示单键或不存在"表示指向纸面里的键" 或指向纸面外的键 所述氨基酸为丙氨酸（Ala)、缬氨酸（Val)、亮氨酸（Leu)、异亮氨酸（lie)、脯氨酸 (Pro)、苯丙氨酸（Phe)、色氨酸（Trp)、蛋氨酸（Met)、甘氨酸（Gly)、丝氨酸（Ser)、苏氨酸 (Thr)、半胱氨酸（Cys)、酪氨酸（Tyr)、天冬酰胺（Asn)、谷氨酰胺（Gin)、赖氨酸（Lys)、精 氨酸（Arg)、组氨酸（His)、天冬氨酸（Asp)、谷氨酸（Glu)中的一种，其中氨基酸的构型为 D型、L型、或DL型，氨基酸中的氨基任选被C1-C4烷基、C3-C6环烷基、C1-C4卤代烷基或 C1-C4烷基酰基、C1-C4烷氧基羰基中的一个或两个取代，氨基酸中的亚烷基或芳基任选被 C1-C4烷基、C3-C6环烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷基或C1-C4烷基酰基、羟基、卤素、 硝基、氰基中的一个或多个取代。2. 权利要求1所述的式1-1化合物选自如下化合物：3. -种抗病毒剂，其特征在于该抗病毒剂含有权利要求1-2任一项所述的式1-1化合 物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物中 的任一种或几种作为有效成分。4. 一种药物组合物，其特征在于该药物组合物包含权利要求1-2任一项所述的式1-1 化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化 物中的任一种或几种，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。5. -种药物组合物，其特征在于包含权利要求1-2任一项所述的式1-1化合物、其立体 异构体、其几何异构体、其溶剂化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物中的任一种或 几种，以及至少一种其他抗病毒药物。6. 权利要求5所述的药物组合物为注射剂、口服制剂、冻干粉针剂、悬浮剂。7. 权利要求1-2任一项所述的式1-1化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物在制备抗病毒药物中的用途。8. 权利要求1-2任一项所述的式1-1化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物在制备治疗和/或预防呼吸道疾病的药物中的 应用。9. 权利要求1-2任一项所述的式1-1化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物在制备治疗和/或预防由RSV引起的疾病的药 物中的应用。10. 权利要求1-2任一项所述的式1-1化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物的制备方法，其特征在于采用本申请说明书中 方法一至六中任意一种方法或采用实施例1-9中任意一种方法。
【专利摘要】本发明涉及一种抗RSV活性的喹啉酮生物碱衍生物及其制备方法，具体涉及式I-1化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物及其作为抗病毒剂的应用。本发明提供的喹啉酮生物碱衍生物具有高效、低毒的特点，具有被开发为抗病毒药物的潜力，尤其是可用于预防和/或治疗RSV感染引起的疾病。
【IPC分类】C07D401/12, A61P31/14, A61P31/12, A61K31/4709, A61K31/4704, A61P11/00, C07D215/22
【公开号】CN104945320
【申请号】CN201510150737
【发明人】陈敏, 于跃
【申请人】于跃
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年3月31日