瘤率为66. 64%，对 实验动物的体重具有显著性的影响；1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟高、中、低=组对SW-579 裸小鼠移植瘤的抑瘤率为65. 37 %，56. 62 %，53. 40 %。
[0181] 1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟对SW-579裸小鼠移植瘤生长抑制试验结果表明，与 阴性对照组相比，1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟高、中、低=组对SW-579移植瘤的生长有显 著性的抑制作用。各实验组小鼠体重均略有降低，1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟高、中、低 组均有小鼠死亡，阳性药组无小鼠死亡。
[0182] 实施例12
[0183] 1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟对人结肠癌HT-29裸鼠异种移植肿瘤生长抑制作用
[0184]将 1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟按照lOOmg/kg/ld(高）、70mg/kg/ld(中）、 40mg/kg/ld(低）给药剂量，于裸鼠皮下注射，一日一次，0. 2血/次；W紫杉醇为阳性对照组 lOmg/kg，于裸鼠皮下注射，每周一次。
[0185] 取生长旺盛期的瘤组织剪切成1. 5mm3左右，在无菌条件下，接种于裸小鼠右侧皮 下。小鼠移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径，待肿瘤生长至60-80mm3后动物随机分组。使 用测量瘤径的方法，动态观察被试药物抗肿瘤的效应。肿瘤直径的测量次数为每2天1次， 每次测量同时还需称量鼠重。实验组注射1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟，阴性组同时给等 量生理盐水。
[0186] 肿瘤体积计算公式：TV= 0. 52XaXb2;
[0187] 其中，a、b分别表示长宽。根据测量的结果计算出相对肿瘤体积（relativetumor volume,RTV)，计算公式为：RTV=Vt/VO,其中VO为分笼时测量所得的肿瘤体积，Vt为每一 次测量的肿瘤体积。抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率T/C(% )，公式如下：
[018引 T/C(% ) =Trtv/CrtvX100 %
[0189]Tktv:治疗组RTV;CKTV:阴性对照组RTVo
[0190] 表13 1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟对HT-29裸鼠异种移植肿瘤生长的抑制作用
[019引结果：见表13,紫杉醇lOmg/kg，对HT-29裸小鼠移植瘤的抑瘤率为68. 74%，对实 验动物的体重具有显著性的影响；1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟高、中、低S组对HT-29裸 小鼠移植瘤的抑瘤率为69. 21 % ,62. 92% ,52. 47%。
[0193] 1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟对HT-29裸小鼠移植瘤生长抑制试验结果表明，与 阴性对照组相比，3组加药组对HT-29移植瘤的生长有显著性的抑制作用。各实验组小鼠体 重均略有降低，1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟低组小鼠无死亡现象，其他加药组和阳性药 组小鼠均有死亡。
[0194] 实施例13
[0195] 1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟对人宫颈癌化Ia裸鼠异种移植肿瘤生长抑制作用
[0196]将 1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟按照lOOmg/kg/ld(高）、70mg/kg/ld(中）、 40mg/kg/ld(低）给药剂量，于裸鼠皮下注射，一日一次，0. 2mL/次；W紫杉醇为阳性对照组 lOmg/kg，于裸鼠皮下注射，每周一次。
[0197] 取生长旺盛期的瘤组织剪切成1. 5mm3左右，在无菌条件下，接种于裸小鼠右侧皮 下。小鼠移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径，待肿瘤生长至60-80mm3后动物随机分组。使 用测量瘤径的方法，动态观察被试药物抗肿瘤的效应。肿瘤直径的测量次数为每2天1次， 每次测量同时还需称量鼠重。实验组注射I-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟，阴性组同时给等 量生理盐水。
[019引肿瘤体积计算公式：TV= 0. 52XaXb2;
[0199] 其中，a、b分别表示长宽。根据测量的结果计算出相对肿瘤体积（relativetumor volume,RTV)，计算公式为：RTV=Vt/VO,其中VO为分笼时测量所得的肿瘤体积，Vt为每一 次测量的肿瘤体积。抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率T/C(% )，公式如下：
[0200] T/C(% ) =Trtv/CrtvX100 %
[020UTktv:治疗组RTV;CKTV:阴性对照组RTV。
[0202] 表14I-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟对化la裸鼠异种移植肿瘤生长的抑制作用
[0204] 结果：见表14,紫杉醇lOmg/kg，对化Ia裸小鼠移植瘤的抑瘤率为72. 12%，对实 验动物的体重具有显著性的影响；1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟高、中、低S组对化La裸 小鼠移植瘤的抑瘤率为52. 81 %，47. 91 %，36. 60%。
[0205] 1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟对化Ia裸小鼠移植瘤生长抑制试验结果表明，与阴 性对照组相比，1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟高、中、低=组对化Ia移植瘤的生长有显著性 的抑制作用。各实验组小鼠体重均略有降低，1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟高、中组有小鼠 死亡，其他加药组和阳性药组无小鼠死亡。
[0206] 通过实施例4~11，本领域技术人员可W发现1-甲氧基-4, 5-二径基异哇嘟在制 备抗肿瘤药物中的应用，尤其是起源于人的的头颈部、脑、甲状腺、膜腺、肺脏、肝脏、食管、 胃、乳腺、肾脏、胆囊、结肠或直肠、卵巢、子宫、子宫颈、前列腺、膀脫、睾丸的原发或继发的 癌W及肉瘤。
【主权项】
1. 一种异喹啉，其特征在于：其分子式为C1(]Η9Ν03，为1-甲氧基-4, 5-二羟基异喹啉， 结构式为：2. -种从蜈蚣中提取活性组分的方法，其步骤为： a. 用体积浓度为45-65 %的醇溶液制备蜈蚣醇提物； b. 采用葡聚糖凝胶层析法分离纯化步骤a中的蜈蚣醇提物，收集多个组分样品，检测 这些组分样品的抗肿瘤活性，抗肿瘤活性最好的组分记为组分样品A，组分样品A中含有权 利要求1所述的异喹啉。3. 根据权利要求2所述的从蜈蚣中提取活性组分的方法，其特征在于：步骤a中制备 蜈蚣醇提物的步骤为： (1) 制备蜈蚣粉末，然后加入5-10倍蜈蚣粉末体积的PBS溶液进行超声破碎匀浆； (2) 对匀浆液进行冷冻离心，取上清液，冷冻干燥得到冻干的蜈蚣水提物； (3) 取步骤（2)中的得到的水提物加入蜈蚣粉末体积5-10倍的醇溶液进行匀浆，然后 在4°C条件下浸取，醇溶液的体积浓度为45-65% ; (4) 对浸取液再次冷冻离心，取上清液，冷冻干燥得到冻干的蜈蚣醇提物。4. 根据权利要求2所述的从蜈蚣中提取活性组分的方法，其特征在于：步骤b中采用 葡聚糖凝胶层析法分离纯化蜈蚣醇提物的步骤为： (1) 将葡聚糖凝胶S印hadexG25注入层析柱中，用流动相冲洗，流动相为10~50 %乙 醇； (2) 将蜈蚁醇提物配置成20~50mg/mL，在层析柱中上样4~8mL，流速为0. 6~2mL/ min，按照层析图谱收集各组分样品，对各组分样品进行活性检测，抗肿瘤活性最好的组分 记为组分样品A。5. -种制备权利要求1所述的异喹啉的方法，其步骤为： (a) 用体积浓度为45-65 %的醇溶液制备蜈蚣醇提物； (b) 采用葡聚糖凝胶层析法分离纯化步骤（a)中的蜈蚣醇提物，收集多个组分样品，检 测这些组分样品的抗肿瘤活性，抗肿瘤活性最好的组分记为组分样品A; (c) 采用制备型RP-HPLC分离纯化步骤（b)中得到的组分样品A，进行梯度洗脱收集多 个活性峰组分，检测这些活性峰组分的抗肿瘤活性，抗肿瘤活性第二好的组分记为组分B; (d) 采用半制备型RP-HPLC分离纯化步骤（c)中的组分B，进行梯度洗脱收集多个活性 峰组分，检测这些活性峰组分的抗肿瘤活性，抗肿瘤活性最好的组分即为权利要求1中所 述的异喹啉。 6. 1-甲氧基-4, 5-二羟基异喹啉在制备抗疟疾药物、抗菌药物及抗肿瘤药物中的应 用。7. 根据权利要求6所述的1-甲氧基-4, 5-二羟基异喹啉在制备抗疟疾药物、抗菌药物 及抗肿瘤药物中的应用，其特征在于：所述的疟疾为起源于寄生于人体的间日疟原虫、三日 疟原虫、恶性疟原虫和卵形疟原虫。8. 根据权利要求6所述的1-甲氧基-4, 5-二羟基异喹啉在制备抗疟疾药物、抗菌药物 及抗肿瘤药物中的应用，其特征在于：所述的菌包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单 胞菌、甲/乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌和嗜血流感杆菌。9. 根据权利要求6所述的1-甲氧基-4, 5-二羟基异喹啉在制备抗疟疾药物、抗菌药物 及抗肿瘤药物中的应用，其特征在于：所述的肿瘤为起源于人的头颈部、脑、甲状腺、胰腺、 肺脏、肝脏、食管、胃、乳腺、肾脏、胆囊、结肠或直肠、卵巢、子宫、子宫颈、前列腺、膀胱、睾丸 的原发或继发的癌以及肉瘤。
【专利摘要】本发明公开了一种异喹啉及其制备方法和应用，属于药物领域。本发明中的异喹啉为1-甲氧基-4,5-二羟基异喹啉，从蜈蚣中提取得到，可用于治疗疟疾、杀菌和实体肿瘤的治疗。所述的疟疾为寄生于人体的间日疟原虫，三日疟原虫，恶性疟原虫和卵形疟原虫；所述的菌为大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌，甲/乙型溶血性链球菌，肺炎链球菌和嗜血流感杆菌；所述的肿瘤为起源于人的头颈部、脑、甲状腺、胰腺、肺脏、肝脏、食管、胃、乳腺、肾脏、胆囊、结肠或直肠、卵巢、子宫、子宫颈、前列腺、膀胱、睾丸的原发或继发的癌以及肉瘤。本发明毒副作用较小，可用于各种癌症的治疗和辅助治疗。
【IPC分类】A61P33/06, A61P35/00, A61P31/04, C07D217/24
【公开号】CN105294561
【申请号】CN201510844708
【发明人】徐寒梅, 丁丹
【申请人】中国药科大学
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年11月27日