地，所述反应可两步程序，通过首先用合适的胺，例如 甲醇中的氨和异丙醇铁（IV)，在没有其他溶剂的情况下，在〇°C至室溫之间处理，或在溶剂 如甲醇或甲苯中，优选在室溫至溶剂的回流溫度之间的溫度处理，并且接着优选在〇°C至室 溫之间加入还原剂如化肌4进行。此夕h酬中间体4a可W利用氨化物还原剂如B出或化肌4 (例 如在甲醇中，大约室溫;方案2,步骤e)或通过使用侣还原剂如LiAlH4转化为相应径基化合 物5(rU是H)。可W将在此反应期间产生的对映异构体或非对映异构体通过本领域技术人员 已知的方法如例如手性色谱或结晶分离。在适当的手性配体（例如手性氧氮杂棚晚 (oxazaborolidines),Ε.J. Corey,R.Κ.Bakshi,S.Shibata,J. Am.Chem.Soc.1987,109, 5551)的存在下，反应还可W W对映选择性的方式进行，W高的对映体过量获得单个对映异 构体(通常ee>95% )。备选地，4a的不对称还原还可W通过利用还原酶，在适当的还原剂 (例如面包酵母；对于综述，参见：K . Nakamura，R . Yamanaka，T . Matsuda，T . Harada， Tetrahe化on 437111.2003，14,2659)的存在下生物催化实现。酬4曰与格氏试剂1?12]\1巧^=面 素，RU不同于Η)或与裡试剂RUlKrU不同于Η)，在溶剂如THF或二乙酸中，在裡盐如氯化裡 的存在下，并且在-78°C至室溫的溫度范围的反应，通过本领域公知的方法获得化合物5(方 案2,步骤e)。化合物5和6可W通过经典方式如二氧化娃柱色谱，MPLC或制备型HPLC纯化，提 供外消旋物或非对映异构混合物。在此反应期间产生的对映异构体或非对映异构体可W通 过本领域技术人员已知的方法如例如手性色谱或结晶获得。
[0103] 方案 2
[0104]
[010日]如方案1(步骤a)中所述，一般结构7的簇酸可W通过Kon化at'eva反应从2-环戊-2-締-1-基乙酸(类型2的化合物，其中B是-(CR1 4r15)p-C00H)和相应芳基囉挫1制备。酷胺化 合物8通过使用公知的偶联方法如例如使用邸CI，任选地在册BT或DMAP和碱如许尼希碱(N， N-二异丙基乙胺）的存在下，在溶剂如N，N-二甲基甲酯胺中，优选在0°C至室溫之间或通过 使用HATU或TBTU和Ξ乙胺或N，N-二异丙基乙胺，在N，N-二甲基甲酯胺中，优选在0°C至室溫 之间，化合物8和伯胺或仲胺化NRISr")之间的酷胺偶联反应形成巧案3,步骤f)。结构9的 簇酸醋可通过用适当的醇(例如甲醇，乙醇，异丙醇），在酸催化剂如硫酸、对甲苯横酸或安 伯来特(Amberlite)离子交换树脂的存在下回流母体簇酸7来获得(方案3,步骤g)。在胺碱 如许尼希碱或Ξ乙胺的存在下，在溶剂如DMF中，优选在0°C至室溫之间，簇酸7与醇的备选 醋化反应使用偶联试剂如HATU或TBTU。备选地，在DMAP或簇酸氯化物或酢的存在下，可W使 用DCC或EDCI，所有方法对于本领域技术人员而言是公知的。簇酸7的醋化也可W利用烷基 化剂如甲基舰，乙基舰，乙基漠或硫酸二甲醋，在碱如碳酸钟或碳酸钢或胺碱如DBU的存在 下，在溶剂如丙酬或THF中进行。酷胺化合物8也可W通过在反应胺的存在下，在溶剂如甲苯 或THF中，优选0°C至室溫的溫度范围内，从簇酸醋9用Ξ甲基侣(TMA)处理来获得(方案3,步 骤h)。化合物9可W通过形成相应伯酷胺(方案3,步骤i，例如在适当的溶剂如甲醇中与氨形 成酷胺，或通过皂化，接着与氨的标准酷胺偶联），接着霍夫曼重排:在溶剂如乙醇中，优选 在约〇°C至溶剂的回流溫度之间，用氨氧化钢和漠处理(方案3,步骤j)，转变为氨基化合物 10。
[0106] 备选地，醋化合物9可W经Weinreb酷胺转化为酬13(方案5)，其中RWa是烷基，面代 烧墓，环烷基或面代环烷基:水解醋9(步骤1)，转化为甲氧基-N-甲基-酷胺(步骤m)，接着与 格氏试剂RMsM巧或裡试剂RWaLi在溶剂如THF中，在-78°C至室溫的溫度范围反应(步骤η)， 提供酬13。化合物13可W与氨化物还原剂如棚氨化钢(例如在甲醇中，大约室溫)或与格氏 试剂R1S3M巧或与裡试剂Ri^Li，在溶剂如THF中，在介于-78°C的溫度范围反应，通过本领域 公知的方法得到化合物14(步骤〇)。14中的径基取代基可W通过本领域已知的方法转化为 离去基团如面素，甲苯横酸根，甲横酸根或Ξ氣甲横酸根(步骤P)，并随后与氨基化合物15， 任选地在碱如许尼希碱或氨化钢的存在下，在溶剂如DMF，DMA或1-甲基-2-化咯烧酬，在0°C 至约100°C的溫度范围反应，得到取代的氨基化合物16(步骤qKRis和RU可W如方案4中所 述进一步修饰，得到式(I)的最终化合物。
[0107] 构建单元14巧案5,步骤r)可W使用相应Ris-面化物，Ris-甲横酸醋或Ris-甲苯横 酸醋，在碱如氨化钢的存在下或在例如与氨化钢形成阴离子后，在溶剂如DMF，DMA或1-甲 基-2-化咯烧中，在0°C至约100°C的溫度范围，进一步转化为酸17,其中Ris是烷基，面代烧 基，环烷基，径基烷基，烷氧基烷基或面代烷氧基烷基。
[010引方案5
[0109]
[0110] 此外，本发明的实施方案是制备如上文所限定的式(I)的化合物的方法，所述方法 包括:式(II)的化合物在式(III)的化合物存在下的反应；
[0111]
[0112] 其中 Rl，R2，R3，R4，R5，R6，R 7，R8，R9，RW，Rll，Rl2，Rl4，Rl 5，Rl6，R"，n和p如本文中所限 定，R24 是烷基并且a1 是-(CRMrIs ) -C (0) NRISr"。
[0113] 尤其是，在抓Cl的存在下，并且任选地在册BT或DMAPW及碱如许尼希碱(N，N-二异 丙基乙胺）的存在下，在溶剂如N，N-二甲基甲酯胺中，优选在0°C至室溫或通过使用HATU或 TBTU和Ξ乙胺或N，N-二异丙基乙胺，在N，N-二甲基甲酯胺中，优选在0°C至室溫之间。
[0114] 此外，本发明的目的是如本文中所述的根据式（I)的化合物，其用作治疗活性物 质。
[0115] 同样，本发明的目的是药物组合物，其包含如本文中所述的根据式(I)的化合物和 治疗惰性载体。
[0116] 本发明还设及如本文中所述的根据式（I)的化合物用于治疗或预防慢性肾病、充 血性屯、力衰竭、高血压、原发性醒固酬过多症和库欣综合征的用途。
[0117] 本发明还设及如本文中所述的根据式(I)的化合物用于治疗或预防糖尿病肾病的 用途。
[0118] 本发明还设及如本文中所述的根据式(I)的化合物用于治疗或预防肾或屯、脏纤维 化的用途。
[0119] 本发明还设及如本文中所述的根据式(I)的化合物用于治疗或预防慢性肾病的用 途。
[0120] 本发明还设及如本文中所述的根据式(I)的化合物用于治疗或预防充血性屯、力衰 竭的用途。
[0121] 本发明还设及如本文中所述的根据式（I)的化合物用于治疗或预防高血压的用 途。
[0122] 本发明还设及如本文中所述的根据式(I)的化合物用于治疗或预防原发性醒固酬 过多症的用途。
[0123] 本发明的特定实施方案是如本文中所述的根据式（I)的化合物，其用于治疗或预 防慢性肾病、充血性屯、力衰竭、高血压、原发性醒固酬过多症和库欣综合征。
[0124] 此外，本发明的特定实施方案是如本文中所述的根据式(I)的化合物，其用于治疗 或预防糖尿病肾病。
[0125] 本发明的另一特定实施方案是如本文中所述的根据式（I)的化合物，其用于治疗 或预防肾或屯、脏纤维化。
[0126] 此外，本发明的特定实施方案是如本文中所述的根据式(I)的化合物，其用于治疗 或预防慢性肾病。
[0127] 此外，本发明的特定实施方案是如本文中所述的根据式(I)的化合物，其用于治疗 或预防充血性屯、力衰竭。
[0128] 此外，本发明的特定实施方案是如本文中所述的根据式(I)的化合物，其用于治疗 或预防高血压。
[0129] 此外，本发明的特定实施方案是如本文中所述的根据式(I)的化合物，其用于治疗 或预防原发性醒固酬过多症。
[0130] 本发明还设及如本文中所述的根据式（I)的化合物用于制备药物的用途，所述药 物用于治疗或预防慢性肾病、充血性屯、力衰竭、高血压、原发性醒固酬过多症和库欣综合 征。
[0131] 本发明还设及如本文中所述的根据式（I)的化合物用于制备药物的用途，所述药 物用于治疗或预防糖尿病肾病。
[0132] 本发明还设及如本文中所述的根据式（I)的化合物用于制备药物的用途，所述药 物用于治疗或预防肾或屯、脏纤维化。
[0133] 此外，本发明的实施方案是本文所述的根据式(I)的化合物用于制备药物的用途， 所述药物用于治疗或预防慢性肾病。
[0134] 此外，本发明的实施方案是本文所述的根据式(I)的化合物用于制备药物的用途， 所述药物用于治疗或预防充血性屯、力衰竭。
[0135] 此外，本发明的实施方案是本文所述的根据式(I)的化合物用于制备药物的用途， 所述药物用于治疗或预防高血压。
[0136] 此外，本发明的实施方案是本文所述的根据式(I)的化合物用于制备药物的用途， 所述药物用于治疗或预防原发性醒固酬过多症。
[0137] 此外，本发明的目的是一种治疗或预防慢性肾病、充血性屯、力衰竭、高血压、原发 性醒固酬过多症和库欣综合征的方法，所述方法包括施用有效量的本文所述的根据式（I) 的化合物。
[0138] 此外，本发明的目的是一种治疗或预防糖尿病肾病的方法，所述方法包括施用有 效量的如本文中所述的根据式(I)的化合物。
[0139] 此外，本发明的目的是一种治疗或预防肾或屯、脏纤维化的方法，所述方法包括施 用有效量的如本文中所述的根据式(I)的化合物。
[0140] 此外，本发明的实施方案是治疗或预防慢性肾病的方法，所述方法包括施用有效 量的本文所述的根据式(I)的化合物。
[0141] 此外，本发明的实施方案是治疗或预防充血性屯、力衰竭的方法，所述方法包括施 用有效量的本文所述的根据式(I)的化合物。
[0142] 此外，本发明的实施方案是治疗或预防高血压的方法，所述方法包括施用有效量 的本文所述的根据式(I)的化合物。
[0143] 此外，本发明的实施方案是治疗或预防原发性醒固酬过多症的方法，所述方法包 括施用有效量的本文所述的根据式(I)的化合物。
[0144] 此外，本发明的实施方案是根据所述方法中的任一种制备的如本文所述的式（I) 化合物。
[0145] 测试程序
[0146] 本文中发明人确定G-402细胞系作为宿主细胞来异位表达（瞬时地或稳定地） CYP11家族的酶的用途。特别地，发明人开发了异位表达人CYP11B1，人CYP11B2，人CYP11A1， 雜猴CYP11B1或雜猴CYP11B2酶活性的稳定G-402细胞。重要地，确定的细胞系G-402表达对 于CYP11家族的活性重要的辅因子(皮质铁氧还蛋白和皮质铁氧还蛋白还原酶)并且在运些 细胞中没有检测到CYP11家族(与H295R细胞相比）的相关酶活性。因此G-402细胞系独特地 适于作为用于异位表达来自CYP11家族的酶的宿主细胞。
[0147] G-402细胞可W获自ATCC( CRkl440)并且原本来源于肾成平滑肌瘤。
[0148] 表达质粒含有在合适的启动子(CMV-启动子)和合适的耐药标记(新霉素）的控制 下用于人/雜猴(cyno)CYPllBl或CYP11B2的ORF。使用标准技术将表达质粒转染到G-402细 胞中，然后选择运些细胞用于表达给定的耐药标记。然后选择个体细胞-克隆并使用11-脱 氧皮质酬(CypllB2)或11-脱氧皮质醇(CypllBl)作为底物对于显示所需酶活性进行评估。
[0149] 表达CYP11构成物的G-402细胞如上所述建立并在37°C、在5%C02/95%空气的气 氛下保持在含有10%FCS和400μg/ml G418(遗传霉素(Geneticin))的McCoy 5a改良培养基 (Medium Modified)，ATCC目录号（Catalog No. )30-2007中。细胞酶测试在含有2.5%炭处 理的FCS和适宜浓度的底物(0.3-lOuM 11-脱氧皮质酬，11-脱氧皮质醇或皮质酬）的DMEM/ F12培养基中进行。对于测试酶活性，将细胞接种到96孔板上并溫育16h。然后将上清液的等 分试样转移并分析预期产物(对于CYP11B2为醒固酬;对于CYP11B1为皮质醇）的浓度。运些 类固醇的浓度可W使用分析醒固酬或皮质醇的来自CisBio的HTRF测试确定。
[0150] 对产生的类固醇的释放的抑制可W用作在细胞酶测试期间加入的测试化合物的 各个酶抑制的度量。化合物对酶活性的剂量依赖性抑制通过将加入的抑制剂浓度(X-轴)相 对于测量的类固醇/产物水平(y-轴)作图计算。然后通过使用最小二乘法将W下4-参数S形 函数模型)拟合到原始数据点计算抑制：
[0151]
[0152] 其中，A是最大y值，B是使用XLFit确定的EC50因子，C是最小y值并且D是斜率值。
[0153] 最大值A对应于在不存在抑制剂时产生的类固醇的量，值C对应于当酶被完全抑制 时检测到的类固醇的量。
[0154] 本文中请求保护的化合物的EC50值用所述的基于G402的测试系统测定。切P11B2 酶活性在ΙμΜ脱氧皮质酬和各种量的抑制剂存在下测定;切pi 1B1酶活性在ΙμΜ脱氧皮质醇 和各种量的抑制剂存在下测定。
[0155]
[0156] 如本文所述的式（I)化合物及其药用盐或醋具有在O.OOOOOluM至lOOOuM之间的 ECso(CYPl 1B2)值，特别的化合物具有在0.00005UM至500uM之间的EC50(CYP1 1B2)值，更特别 的化合物具有在0.0005UM至50uM之间的EC50(CYP1 1B2)值，再特别的化合物具有在0.0005UM 至加 Μ之间的ECso (CYP11B2)值。运些结果已通过使用所述酶测试获得。
[0157] 式（I)化合物及其药用盐可W用作药物(例如W药物制剂形式）。药物制剂可W内 部给药，如经口（例如W片剂，包衣片剂，糖衣药丸，硬和软明胶胶囊，溶液剂，乳剂或混悬剂 形式），经鼻（例如W鼻喷剂形式)或经直肠（例如W栓剂形式）。但是，给药还可W经胃肠道 外进行，如肌内或静脉内（例如W针剂形式）。
[0158] 式(I)化合物及其药用盐可W与用于制备片剂，包衣片剂，糖衣药丸和硬明胶胶