专利名称：冻干治疗颗粒的稳定制剂的制作方法
冻干治疗颗粒的稳定制剂相关申请的交叉參考本申请请求2009年12月11日提交的美国临时专利申请号61/285，722的利益和优先权，将该文献完整引入本文參考。
背景技术：
长期以来，将ー些药物递送给患者(例如靶向至特定组织或细胞类型或靶向至特定患病组织、但不是正常组织)或控制药物释放的系统被视为有益的。例如，包括活性药物和例如靶向至特定组织或细胞类型或靶向至特定患病组织、但不是正常组织的治疗剂可以减少无需治疗的身体组织的药物用量。当治疗例如癌症这样的病症时特别重要，其中期望将药物的细胞毒性剂量递送至癌细胞，而不杀伤周围的非癌 性组织。此外，这种治疗剂可以减少在抗癌疗法中常见的不期望和有时威胁生命的副作用。此外，这种治疗剂可以使得药物达到它们在另外的情况下不能达到的ー些组织。可以通过胃肠外注射纳米颗粒的重构(reconstituted)悬浮液递送治疗纳米颗粒。冻干即冷冻干燥原始的纳米颗粒悬浮液，在重构前贮存。冷冻干燥纳米颗粒悬浮液可能产生贮存稳定性远优于其冷冻悬浮液对应物的重构产品。此外，冷冻干燥可以提供更便利的贮存，可能无需恒定、极低的温度。然而，重构的冻干物必须具有与原始悬浮液相差无几或优于原始悬浮液的物化和性能属性。再分散成相同大小的颗粒(而无因微量聚集导致的痕量颗粒或未分散的颗粒)是纳米颗粒悬浮液冻干的最富有挑战性的方面。因此，对纳米颗粒治疗剂和这种纳米颗粒的制备方法存在需求，它们能够递送治疗水平的药物以治疗例如癌症这样的疾病并且具有优良的贮存能力。
发明内容
在一个方面中，本发明提供了包含聚合物纳米颗粒(polymeric nanoparticle)的冻干的药物组合物，其中在用小于或约IOOmL水性介质重构该冻干的药物组合物时，适合于胃肠外给药的重构的组合物包含低于6000个大于或等于10微米的微粒；和低于600个大于或等于25微米的微粒。在一个实施方案中，重构的组合物包含低于3000个大于或等于10微米的微粒；和低于300个大于或等于25微米的微粒。在一些实施方案中，纳米颗粒浓度约为50mg/mL。可以借助于例如USP 32〈788>、通过光阻粒子计数试验(light obscurationparticle count test), USP 32〈788>、微观粒子计数试验(microscopic particle counttest)、激光衍射和/或单粒光学传感这样的方式测定微粒数量。纳米颗粒可以包含活性剂或治疗剂，例如紫杉烷和ー种、两种或三种生物相容性聚合物。例如，本文公开了治疗纳米颗粒，其包含约0. 2-约35重量百分比的的治疗剂；约10-约99重量百分比的聚乳酸-嵌段-聚こニ醇共聚物或聚乳酸-共聚-聚こ醇酸-嵌段-聚こニ醇共聚物；和约0-约50重量百分比的聚乳酸或聚こ醇酸-共聚-聚こ醇酸。典型的治疗剂包括抗肿瘤药，例如紫杉烷类，例如多西他赛，且可以包含约10-约30重量百分比的治疗剂，例如紫杉烷药剂。例如，共聚物的聚乳酸部分可以具有约16kDa的重均分子量且共聚物的聚こニ醇部分可以具有约5kDa的重均分子量。所关注的冻干的药物组合物还可以包含糖例如ニ糖、单糖或多糖和离子卤盐。ニ糖可以是，例如蔗糖或海藻糖或其混合物。离子卤盐可以选自氯化钠、氯化钙和氯化锌或其混合物。在其他实施方案中，冻干的药物组合物还可以包含环糊精。例如，冻干的药物组合物还可以包含糖例如ニ糖、离子卤盐和环糊精。或者，冻干的药物组合物还可以包含ニ糖和环糊精，但不含离子卤盐。环糊精可以选自a-环糊精、￠-环糊精、Y-环糊精或其混合物。重构的组合物与不含离子卤盐和/或环糊精的重构的组合物相比可以具有最低的聚集(aggregation)。重构的组合物可以具有小于0. 2的多分散性指数。在一些实施方案中，纳米颗粒可以具有约10-100mg/mL、例如40-60mg/mL或约50mg/mL的浓度。 在ー个方面中，本说明书提供了重构时适合于胃肠外应用的药物组合物，其包含多个治疗颗粒，其各自包含具有疏水性聚合物链节和亲水性聚合物链节的共聚物；和活性剂；ニ糖；和离子卤盐和/或环糊精例如￠-环糊精(例如羟丙基环糊精(HPb⑶)。药物组合物也可以包含环糊精。在另ー个方面中，本说明书提供了重构时适合于胃肠外应用的药物组合物，其包含多个治疗颗粒，其各自包含具有疏水性聚合物链节和亲水性聚合物链节的共聚物；和活性剂；ニ糖；和环糊精。离子卤盐可以选自氯化钠、氯化钙和氯化锌或其混合物。环糊精可以选自a-环糊精、^ -环糊精、Y -环糊精或其混合物。例如，共聚物可以是聚乳酸-嵌段-聚こニ醇共聚物。重构时，IOOmL水性样品可以包含具有大于或等于10微米大小的低于6000个的颗粒；和具有大于或等于25微米大小的低于600个的颗粒。在另ー个方面中，本发明提供了用于胃肠外给药的药学可接受的制剂，其通过ー种方法制备，该方法包括a)提供包含多个治疗颗粒的组合物，所述治疗颗粒各自包含具有疏水性聚合物链节和亲水性聚合物链节的共聚物；和活性剂；b)向所述组合物中添加ニ糖、离子卤盐和任选的环糊精；c)冻干该组合物以形成冻干的组合物；d)重构冻干的组合物以形成适合于胃肠外给药的制剂。该制剂还可以包含环糊
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不同o在另ー个方面中，本发明提供了用于胃肠外给药的药学可接受的制剂，其通过ー种方法制备，该方法包括a)提供包含多个治疗颗粒的组合物，所述治疗颗粒各自包含具有疏水性聚合物链节和亲水性聚合物链节的共聚物；和活性剂；b)向所述组合物中添加ニ糖和环糊精；c)冻干该组合物以形成冻干的组合物；d)重构冻干的组合物以形成适合于胃肠外给药的制剂。冻干的组合物可以具有大于约40mg/mL的治疗颗粒浓度。适合于胃肠外给药的制剂可以在IOmL剂量中具有低于约600个具有大于10微米的大小的颗粒。
添加ニ糖和/或离子卤盐的步骤可以包含添加约5-约15重量百分比的蔗糖或约5-约20重量百分比的(例如约10-约20重量百分比)海藻糖和约10-约500mM离子卤盐。该步骤还可以包含添加约I-约25重量百分比的环糊精。在另ー个实施方案中，添加ニ糖和环糊精的步骤可以包含添加约5-约15重量百分比的蔗糖或约10-约20重量百分比的海藻糖和约I-约25重量百分比的环糊精。冻干步骤可以包含在高于约_40°C的温度或低于_30°C的温度冻干组合物，例如约_40°C至约_30°C或约_40°C至约_25°C，形成冷冻的组合物；和通过例如升华干燥冷冻的组合物，形成冻干的组合物。
在另ー个方面中，本说明书提供了防止药物纳米颗粒组合物中颗粒显著聚集的方法，包括将糖和盐添加到冻干的制剂中，以防止重构时纳米颗粒聚集。在一个实施方案中，还向冻干的制剂中加入环糊精。在另ー个方面中，本说明书提供了防止重构的药物纳米颗粒组合物中颗粒显著聚集的方法，包括将糖和环糊精添加到包含纳米颗粒的冻干的制剂中；重构冻干的制剂，其中重构的组合物不具有显著的纳米颗粒聚集。本文还提供了防止药物納米颗粒组合物中颗粒显著聚集的方法，包括将糖和环糊精添加到冻干的制剂中，以防止重构时纳米颗粒聚集。
图I是形成所公开的纳米颗粒的乳液(emulsion)加工的流程图。图2是所公开的乳液加工的流程图。图3描述了盐浓度和蔗糖对重构的纳米颗粒悬浮液中粒度的效应。图4描述了用于不同冻干制剂的温度循环。图5描述了通过本文公开的不同重构的纳米颗粒悬浮液的动态光散射(DLS)得到的大小。图6描述了本文公开的不同重构的纳米颗粒悬浮液的颗粒计数。图7描述了不同冻干制剂的温度循环。图8描述了本文公开的不同重构的纳米颗粒悬浮液的纳米颗粒大小(使用DLS测定)。图9描述了本文公开的不同重构的纳米颗粒悬浮液的颗粒计数。图10描述了本文公开的不同重构的纳米颗粒悬浮液的颗粒计数。图11描述了本文公开的不同重构的纳米颗粒悬浮液的颗粒计数。图12描述了本文公开的不同纳米颗粒悬浮液的多西他赛的体外释放。图13描述了具有5%海藻糖和10%羟丙基环糊精的纳米颗粒悬浮液的示差扫描量热法(DSC)測定。图14描述了具有10%海操糖和10%轻丙基环糊精的纳米颗粒悬浮液的DSC特性。图15描述了具有20%海藻糖和15%羟丙基环糊精的纳米颗粒悬浮液的DSC特性。图16描述了具有10%海藻糖和10%羟丙基环糊精的纳米颗粒悬浮液的DSC特性。发明详述本发明一般涉及冻干的聚合物納米颗粒组合物和这种治疗组合物的制备和使用方法。这种组合物可以从冻干的组合物重构并且可以包含最少的纳米颗粒和/或其他材料的大聚集物(aggregate)。因此，公开了可以适合于胃肠外应用的组合物。纳米颗粒一般而言，组合物可以包含纳米颗粒，该纳米颗粒包含活性剤。本文所公开的〃纳米颗粒〃是指具有小于lOOOnm、例如约IOnm-约200nm的直径的任意颗粒。所公开的治疗纳米颗粒可以包含具有约60nm_约120nm或约70nm_约130nm或约60nm_约140nm直径的纳米颗粒。所公开的纳米颗粒可以包含约0. 2-约35重量百分比、约3-约40重量百分比、约5-约30重量百分比、10-约30重量百分比、15-25重量百分比乃至约4-约25重量百分比的活性剤，例如抗肿瘤药，例紫杉烷药剂(例如多西他赛)。本文公开的纳米颗粒包含ー种、两种、三种或更多种生物相容性和/或生物可降解的聚合物。例如，所关注的纳米颗粒可以包含约10-约99重量百分比的一种或多种嵌段 共聚物，其包括生物可降解的聚合物和聚こニ醇和约0-约50重量百分比的生物可降解的均聚物。典型的治疗纳米颗粒可以包含约40-约90重量百分比的聚乳酸-聚こニ醇共聚物或约40-约80重量百分比的聚乳酸-聚こニ醇共聚物。这种聚乳酸-嵌段聚こニ醇共聚物可以包含具有约15-20kDa (或例如15-约IOOkDa,例如约15-约80kDa)数均分子量的聚乳酸和具有约2-约IOkDa例如约4-约6kDa数均分子量的聚こニ醇。例如,所公开的治疗纳米颗粒可以包含约70-约95重量百分比的PLA-PEG和约5-约25重量百分比的多西他赛。在另ー个实例中，所公开的治疗纳米颗粒可以包含约30-约50重量百分比的PLA-PEG、约30-约50重量百分比的PLA或PLGA和约5-约25重量百分比的多西他赛。这种PLA (聚乳酸)可以具有约5-约IOkDa的数均分子量。这种PLGA(聚乳酸-共聚-こ醇酸)可以具有约8-约12kDa的数均分子量。在一个实施方案中，所公开的治疗纳米颗粒可以包含靶向配体，例如有效治疗有此需要的受试者的疾病或障碍例如前列腺癌低分子量PSMA配体。在一些实施方案中，低分子量配体与聚合物缀合，且纳米颗粒包含一定比例的配体-缀合的聚合物(例如PLA-PEG-配体)与非官能化聚合物(例如PLA-PEG或PLGA-PEG)。纳米颗粒可以具有最佳比例的这两种聚合物，使得有效量的配体与纳米颗粒结合以治疗疾病或障癌，例如癌症。在一些实施方案中，所公开的纳米颗粒还可以包含约0. 2-约10重量百分比的被靶向配体官能化的PLA-PEG和/或可以包含约0. 2-约10重量百分比的被靶向配体官能化的聚乳酸-共聚聚こ醇酸嵌段-PEG。在一些实施方案中，这种靶向配体可以是与PEG共价结合，例如与PEG通过亚烷基连接基共价结合，例如PLA-PEG-亚烷基-GL2。例如，所公开的纳米颗粒可以包含约0. 2-约10摩尔百分比的PLA-PEG-GL2或聚乳酸-共聚聚こ醇酸-PEG-GL2。应理解所涉及的PLA-PEG-GL2或PLGA-PEG-GL2是指可以包含连接PEG与GL2的亚烷基连接基(例如C1-C2。，例如(CH2)5)的部分。在一个实施方案中，治疗纳米颗粒可以包含约0. 2-约35重量百分比的治疗剂；约30-约99重量百分比的聚乳酸-聚こニ醇共聚物或聚乳酸-共聚-聚こ醇酸-聚こニ醇共聚物；约0-约50重量百分比的聚乳酸或聚乳酸-共聚-聚こ醇酸；和约0. 2-约10重量百分比的或约0. 2-约30重量百分比的PLA-PEG-GL2或聚乳酸-共聚聚こ醇酸-PEG-GL2。例如，PLA-PEG-GL2可以包含具有约10，OOODa-约20，OOODa数均分子量的聚乳酸和具有约4，OOO-约8，000数均分子量的聚こニ醇。聚合物在一些实施方案中，本发明的纳米颗粒包含聚合物基质和治疗剂。在一些实施方案中，治疗剂和/或靶向部分(即低分子量PSMA配体)可以与至少部分聚合物基质结合。例如，在一些实施方案中，靶向部分(例如配体)可以与聚合物基质表面共价结合。在ー些实施方案中，共价结合通过连接基介导。治疗剂可以结合在聚合物基质表面、包囊在其中和/或遍布在其中分散。各种聚合物和由它们形成颗粒的方法是递药领域公知的。在一些实施方案中，本说明书涉及至少两种大分子的纳米颗粒，其中第一种大分子包含结合低分子量配体(例如靶向部分)的第一聚合物；和第二种大分子包含不与靶向部分结合的第二聚合物。纳米颗粒可以任选包含ー种或多种另外的未官能化的聚合物。可以根据本发明使用任意的聚合物。聚合物可以是天然或非天然的(合成的)聚·合物。聚合物可以是包含两种或多种单体的均聚物或共聚物。就顺序而言，共聚物可以是随机的、嵌段或包含随机和嵌段顺序的组合。典型地，本发明的聚合物是有机聚合物。本文所用的术语〃聚合物〃根据其在本领域中使用的一般性含义使用，即包含一个或多个重复单元(单体)的通过共价键连接的分子结构。重复单元可以均相同或在ー些情况中，在聚合物内可以存在一种类型以上的重复单元。在一些情况中，聚合物可以是生物衍生的，即生物聚合物。非限制性实例包括肽类或蛋白质。在一些情况中，聚合物中还可以存在另外的部分，例如生物部分，例如如下所述的那些。如果聚合物存在一种类型以上的重复单元，则认为该聚合物是"共聚物"。应理解，在使用聚合物的任意的实施方案中，所用的聚合物在一些情况中可以是共聚物。形成共聚物的重复单元可以以任意的方式排列。例如，重复单元可以以随机顺序、交替顺序或作为嵌段共聚物排列，即含有各自包含第一重复单元(例如第一嵌段)的一个或多个区和各自包含第二重复单元(例如第二嵌段)的ー个或多个区等。嵌段共聚物可以具有两个(ニ嵌段共聚物)、三个(三嵌段共聚物)或多个成员的不同嵌段。所公开的颗粒可以包含共聚物，在一些实施方案中，其描述的是两种或多种聚合物(例如本文所述的那些)，它们通常通过两种或多种聚合物共同的共价键合彼此結合。因此，共聚物可以包含第一聚合物和第二聚合物，它们彼此缀合成嵌段共聚物，其中第一聚合物可以是嵌段共聚物的第一嵌段，第二聚合物可以是嵌段共聚物的第二嵌段。当然，本领域技术人员可以理解，在一些情况中，嵌段共聚物包含聚合物的多个嵌段，且本文所用的"嵌段共聚物"不仅限于仅具有単一第一嵌段和単一第二嵌段的嵌段共聚物。例如，嵌段共聚物可以包含含有第一聚合物的第一嵌段、含有第二聚合物的第二嵌段和包含第三聚合物或第一聚合物的第三嵌段等。在一些情况中，嵌段共聚物可以包含任意数量的第一聚合物的第一嵌段和第二聚合物的第二嵌段(在一些情况中，还包含第三嵌段、第四嵌段等)。此外，应注意，在一些情况中，还可以由其他嵌段共聚物形成嵌段共聚物。例如，第一嵌段共聚物可以与另一聚合物(可以是均聚物、生物聚合物、另ー嵌段共聚物等)缀合，形成新的包含多种类型的嵌段的嵌段共聚物；和/或与其他部分(例如与非聚合物的部分)缀合。在一些实施方案中，聚合物(例如共聚物，例如嵌段共聚物)可以是两亲的，即具有亲水性部分和疏水性部分或相对亲水性部分和相对疏水性部分。亲水性聚合物可以是ー般吸引水的聚合物，疏水性聚合物可以是一般排斥水的聚合物。例如，可以通过制备聚合物样品并且测定其与水的接触角(典型地，聚合物具有小于60°的接触角，而疏水性聚合物具有大于约60°的接触角)鉴定亲水性聚合物或疏水性聚合物。在一些情况中，測定两种或多种聚合物彼此的亲水性，即第一聚合物的亲水性可以高于第二聚合物。例如，第一聚合物可以具有小于第二聚合物的接触角。在一组实施方案中，本文所关注的聚合物(例如共聚物，例如嵌段共聚物)包括生物相容性聚合物，即在插入或注入有生命的受试者时不典型地诱导不良反应，例如无明显的炎症和/或免疫系统对聚合物的急性排斥，例如通过T-细胞应答。因此，本文所关注的治疗颗粒可以是非免疫原性的。本文所用的术语非免疫原性是指在其天然状态下通常不引起或仅引起最低水平的循环抗体、T-细胞或反应性免疫细胞且通常在个体中对其自身不引起免疫应答的内源性生长因子。生物相容性典型地指至少部分免疫系统对材料的急性排斥，即植入受试者的非生物相各性材料在受试者中弓I起免疫应答，它可能足够严重，使得免疫系统排斥该材料不能 得到充分控制且通常具有必须将该材料从受试者中除去的程度。測定生物相容性的ー种简单的试验可以是使聚合物在体外接触细胞；生物相容性聚合物是在中等浓度例如在50微克/106细胞的浓度下典型地不导致显著的细胞死亡的聚合物。例如，即使吞噬或以其它方式被这种细胞摄入，但是生物相容性聚合物在接触细胞例如成纤维细胞或上皮细胞时可以导致低于约20%的细胞死亡。可以用于本发明不同实施方案的生物相容性聚合物的非限制性实例包括聚ニ噁烷酮(PDO)、聚羟基链烷酸酷、聚羟基丁酸酷、聚(癸ニ酸甘油酷)、聚こ醇酸交酯(polyglycolide)、聚丙交酯(polylactide)、PLGA、聚己酸内酯或包含这些和/或其他聚合物的共聚物或衍生物。在一些实施方案中，所关注的生物相容性聚合物可以是生物可降解的，即该聚合物能够在生理环境中、例如在体内以化学和/或生物学方式降解。本文所用的"生物可降解"聚合物是这样的聚合物，在导入细胞时，它们被细胞器(生物可降解的)和/或被化学过程例如水解(可化学降解)分解成可以再利用或处理的成分，而对细胞无显著的毒性效应。在一个实施方案中，生物可降解聚合物及其降解副产物可以是生物相容性的。例如，所关注的聚合物可以是在接触水时(例如在受试者体内)自发水解的聚合物，该聚合物可以在接触热(例如在约37°C温度)时降解。聚合物降解可以以不同速率进行，这取决于所用的聚合物或共聚合物。例如，聚合物的半衰期(50%的聚合物可以降解成単体和/或其他非聚合物部分的时间)可以约为数天、数周、数月或数年，这取决于聚合物。例如，聚合物可以通过酶活性或细胞器被生物降解，在一些情况中，例如通过接触溶菌酶(例如具有相对低的pH)。在一些情况中，聚合物可以分解成単体和/或细胞可以再利用或处理而对细胞无显著的毒性效应的其他非聚合物部分(例如，聚丙交酯可以水解成乳酸，聚こ醇酸交酯可以水解成こ醇酸等)。在一些实施方案中，聚合物可以是聚酯类，包括共聚物，其包含乳酸和こ醇酸单元，例如聚(乳酸-共聚-こ醇酸)和聚(丙交酷-共聚-こ交酷)(poly (lactide-co-glycolide)),其在本文中共同称作〃PLGA〃 ；和均聚物,其包含こ醇酸单元，本文称作〃PGA〃，和乳酸単元，例如聚-L-乳酸、聚-D-乳酸、聚-D，L-乳酸、聚-L-丙交酷(Iactide)、聚-D-丙交酯和聚-D，L-丙交酷，它们在本文中共同称作"PLA"。在ー些实施方案中，典型的聚酯类包括，例如，多羟基酸类；聚こニ醇化聚合物和丙交酯和こ交酯的共聚物(例如聚こニ醇化PLA、聚こニ醇化PGA、聚こニ醇化PLGA及其衍生物。在一些实施方案中，聚酯类包括，例如，聚酐类、聚(原酸酷)聚こニ醇化聚(原酸酷)、聚(己内酷)、聚こニ醇化聚(己内酷)、聚赖氨酸、聚こニ醇化聚赖氨酸、聚(こ烯亚胺)、聚こニ醇化聚(こ烯亚胺)、聚(L-丙交酷-共聚-L-赖氨酸)(poly (L-lactide-co-L-lysine))、聚(丝氨酸酯)、聚(4-羟基-L-脯氨酸酯)、聚[a -(4-氨基丁基)-L-こ醇酸]及其衍生物。在一些实施方案中，聚合物可以是PLGA。PLGA是乳酸和こ醇酸的生物相容性和生物可降解的共聚物，且PLGA的不同形式的特征可以在于乳酸こ醇酸之比。乳酸可以是L-乳酸、D-乳酸或D，L-乳酸。可以通过改变乳酸-こ醇酸之比调整PLGA的降解速率。在一些实施方案中，本发明所用的PLGA的特征可以在于约85:15、约75:25、约60:40、约50:50、约40:60、约25:75或约15:85的乳酸こ醇酸之比。在一些实施方案中，可以选择颗粒聚合物(例如，PLGA嵌段共聚物或PLGA-PEG嵌段共聚物)中乳酸与こ醇酸单体之比，以优化不同參数，例如可以优化水摄取、治疗剂释放和/或聚合物降解动力学。 在一些实施方案中，聚合物可以是ー种或多种丙烯酸聚合物。在一些实施方案中，丙烯酸聚合物包括，例如，丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸甲酯共聚物、甲基丙烯酸こ氧基こ酷、甲基丙烯酸氰基こ酯(cyanoethyl methacrylate)、甲基丙烯酸氨基烧基酯共聚物、聚(丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸)、甲基丙烯酸烷基酰胺共聚物、聚(甲基丙烯酸甲酷)、聚(甲基丙烯酸聚丙烯酰胺、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物、甲基丙烯酸缩水甘油酯共聚合物、聚氰基丙烯酸酯类和包含上述聚合物的一种或多种的组合。丙烯酸聚合物可以包含具有低含量季铵基团的丙烯酸和甲基丙烯酸酯类的完全聚合的共聚物。在一些实施方案中，聚合物可以是阳离子聚合物。一般而言，阳离子聚合物能够缩合和/或保护核酸(例如DNA、RNA或其衍生物)的带负电荷的链。在一些实施方案中，关注包含胺的聚合物例如聚(赖氨酸)、聚こ烯亚胺(PEI)和聚(酰氨基胺)树状聚合物(dendrimer)在所公开的颗粒中的应用。在一些实施方案中，聚合物可以是带有阳离子侧链的可降解的聚酯类。这些聚酯类的实例包括聚(L-丙交酯-共聚-L-赖氨酸)、聚(丝氨酸酯)、聚(4-羟基-L-脯氨酸酷)。本文公开的颗粒可以包含PEG，也可以不含PEG。此外，一些实施方案可以涉及包含聚(酷-醚)的共聚物，例如具有通过酯键(例如R-C(0)-0-R’键)和醚键(例如R-0-R’键)连接的重复单元的聚合物。在本发明的一些实施方案中，包含羧酸基团的生物可降解的聚合物例如可水解的聚合物可以与聚(こニ醇)重复单元缀合，形成聚(酷-醚)。包含聚(こニ醇)重复单元的聚合物(例如共聚物，例如嵌段共聚物)也可以称作〃聚こニ醇化〃聚合物。关注,例如，当PEG不与配体缀合时,PEG可以是封端的(terminated)且包含端基。例如，PEG可以端接羟基、甲氧基或其他烷氧基、甲基或其他烷基、芳基、羧酸、胺、酰胺、こ酰基、胍基或咪唑。其他所关注的端基包括叠氮化物、炔、马来酰亚胺、醛、酰肼、羟基胺、烷氧基胺或疏基部分。本领域技术人员了解使聚合物聚こニ醇化的方法和技术，例如，通过使用EDC(1-こ基-3-(3-ニ甲氨基丙基)碳ニ亚胺盐酸盐)和NHS (N-羟基琥珀酰亚胺)使聚合物向端接胺的PEG基团反应；通过开环聚合技术(ROMP)等来进行。在一个实施方案中，可以如本文所公开的为有效治疗优化聚合物的分子量。例如，聚合物的分子量可以影响颗粒降解速率(例如当生物可降解聚合物的分子量可以调整吋)、溶解度、水摄取和药物释放动力学。例如，可以调整聚合物的分子量，使得颗粒在治疗的受试者体内在合理时间期限内(几小时到1-2周、3-4周、5-6周、7-8周等)降解。所公开的颗粒可以例如包含PEG和PL(G)A的ニ嵌段共聚物，其中，例如，PEG部分具有约1,000-20，000、例如约2，000-20，000、例如约2-约10,000的数均分子量，且PL(G)A部分可以具有约5，000-约20，000或约5，000-100，000、例如约20，000-70，000、例如约15，000-50, 000的数均分子量。例如，本文公开了典型的治疗纳米颗粒，其包括约10-约99重量百分比的聚乳酸-聚こニ醇共聚物或聚乳酸-共聚-聚こ醇酸-聚こニ醇共聚物或约20-约80重量百分比、约40-约80重量百分比的或约30-约50重量百分比或约70-约90重量百分比的聚乳酸-聚こニ醇共聚物或聚乳酸-共聚-聚こ醇酸-聚こニ醇共聚物。典型的聚乳酸-聚 こニ醇共聚物可以包含约15-约20kDa或约10-约25kDa数均分子量的聚乳酸和约4-约6或约2kDa-约IOkDa数均分子量的聚こニ醇。所公开的纳米颗粒可以任选包含约I-约50重量百分比的聚乳酸或聚乳酸-共聚-聚こ醇酸(不包含PEG)或可以任选包含约I-约50重量百分比的或约10-约50重量百分比或约30-约50重量百分比的聚乳酸或聚乳酸-共聚-聚こ醇酸。例如，聚乳酸或聚乳酸-共聚-聚こ醇酸可以具有约5-约15kDa或约5-约12kDa的数均分子量。典型的PLA可以具有约5-约IOkDa的数均分子量。典型的PLGA可以具有约8-约12kDa的数均分子量。在一些实施方案中，纳米颗粒的聚合物可以与脂质(Iipid)缀合。聚合物可以是，例如，脂质-封端的PEG。如下所述，聚合物的脂质部分可以用于与另ー种聚合物自装配，从而有利于形成纳米颗粒。例如，亲水性聚合物可以与和疏水性聚合物自装配的脂质缀合。在一些实施方案中，脂质是油。一般而言，本领域公知的任意油可以与本发明所用的聚合物缀合。在一些实施方案中，油可以包含ー种或多种脂肪酸基团或其盐。在ー些实施方案中，脂肪酸基团可以包含可消化的长链(例如C8-C5tl)取代或未取代的烃类。在ー些实施方案中，脂肪酸基团可以是Cltl-C2tl脂肪酸或其盐。在一些实施方案中，脂肪酸基团可以是C15-C2tl脂肪酸或其盐。在一些实施方案中，脂肪酸基团可以是不饱和的。在一些实施方案中，脂肪酸基团可以是单不饱和的。在一些实施方案中，脂肪酸基团可以是多不饱和的。在一些实施方案中，不饱和脂肪酸基团的双键可以是顺式构象。在一些实施方案中，不饱和脂肪酸的双键可以是反式构象。在一些实施方案中，脂肪酸基团可以是ー种或多种丁酸、己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蘧酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、山嵛酸或木蜡酸。在一些实施方案中，脂肪酸基团可以是ー种或多种棕榈油酸、油酸、异油酸、亚油酸、a-亚麻酸、Y-亚麻酸、花生四烯酸、鳕烯酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十ニ碳六烯酸或芥酸。在一个实施方案中，使任选的小分子靶向部分与纳米颗粒的脂质成分键合，例如共价键合。例如，本文提供了纳米颗粒，其包含治疗剂、包含官能化和未官能化聚合物的聚合物基质、脂质和低分子量PSMA靶向配体，其中靶向配体与纳米颗粒的脂质成分键合，例如共价键合。在一个实施方案中，与低分子量靶向部分键合的脂质成分具有式V
权利要求
1.包含聚合物纳米颗粒的冻干的药物组合物，其中在用小于或约IOOmL水性介质重构该冻干的药物组合物时，适合于胃肠外给药的重构的组合物包括 低于6000个大于或等于10微米的微粒；和 低于600个大于或等于25微米的微粒。
2.权利要求I的冻干的药物组合物,其中重构的组合物包括 低于3000个具有大于或等于10微米大小的微粒；和 低于300个具有大于或等于25微米大小的微粒。
3.权利要求I或2的冻干的药物组合物，其中根据USP32〈788>、通过光阻粒子计数试验测定微粒数量。
4.权利要求I或2的冻干的药物组合物，其中根据USP32〈788>、通过微观粒子计数试验测定微粒数量。
5.权利要求I或2的冻干的药物组合物，其中使用单粒光学传感测定微粒数量。
6.权利要求1-6任一项的冻干的药物组合物，其中所述纳米颗粒包含聚乳酸-嵌段-聚こニ醇共聚物或聚乳酸-共聚-聚こ醇酸-嵌段-聚こニ醇共聚物。
7.权利要求1-6任一项的冻干的药物组合物，其中所述重构的组合物具有约10-100mg/mL的纳米颗粒浓度。
8.权利要求6或7的冻干的药物组合物，其中所述共聚物的聚乳酸部分具有约16kDa的重均分子量且所述共聚物的聚こニ醇部分具有约5kDa的重均分子量。
9.权利要求1-8任一项的冻干的药物组合物，其中所述纳米颗粒包含治疗剂。
10.权利要求9的冻干的药物组合物，其中所述治疗剂是多西他赛。
11.权利要求1-10任一项的冻干的药物组合物，其中该冻干的药物组合物还包含糖和尚子齒盐。
12.权利要求1-11任一项的冻干的药物组合物，其中该冻干的药物组合物还包含ニ糖和尚子齒盐。
13.权利要求12的冻干的药物组合物，还包含环糊精。
14.权利要求1-10任一项的冻干的药物组合物，其中该冻干的药物组合物还包含ニ糖和环糊精。
15.权利要求12-14任一项的冻干的药物组合物，其中所述ニ糖是蔗糖或海藻糖或其混合物。
16.权利要求11-15任一项的冻干的药物组合物，其中所述离子卤盐选自氯化钠、氯化钙和氯化锌或其混合物。
17.权利要求13-16任一项的冻干的药物组合物，其中所述环糊精选自a-环糊精、 环糊精、Y-环糊精或其混合物。
18.权利要求15-17任一项的冻干的药物组合物，其中该冻干的药物组合物包含约I-约15重量百分比的蔗糖。
19.权利要求14-16任一项的冻干的药物组合物，其中该冻干的药物组合物包含约I-约25重量百分比的海藻糖。
20.权利要求12-196任一项的冻干的药物组合物，其中该冻干的药物组合物包含约10-约IOOmM的氯化钠。
21.权利要求12-19任一项的冻干的药物组合物，其中该冻干的药物组合物包含约100-约500mM的ニ价离子氯化物盐。
22.权利要求21的冻干的药物组合物，其中该冻干的药物组合物包含约100-约500mM的氯化钙或氯化锌。
23.权利要求14-21任一项的冻干的药物组合物，其中该冻干的药物组合物包含约I-约25重量百分比的￠-环糊精。
24.权利要求14-23任一项的冻干的药物组合物，其中所述重构的组合物与不含离子卤盐的重构的组合物相比具有最低的聚集。
25.权利要求14-23任一项的冻干的药物组合物，其中所述重构的组合物与不含环糊精的重构的组合物相比具有最低的聚集。
26.权利要求1-25任一项的冻干的药物组合物，其中所述重构的组合物具有小于0.2的多分散性指数。
27.权利要求1-26任一项的冻干的药物组合物，其中所述纳米颗粒具有约40-60mg/mL的浓度。
28.适合于重构时胃肠外应用的药物组合物，包括 多个治疗颗粒，其各自包含具有疏水性聚合物链节和亲水性聚合物链节的共聚物；和活性剂 糖；和 尚子齒盐。
29.权利要求28的药物组合物，还包含环糊精。
30.权利要求28或29的药物组合物，其中所述离子卤盐选自氯化钠、氯化钙和氯化锌或其混合物。
31.权利要求30的药物组合物，包含约10-约IOOmM的氯化钠。
32.权利要求30的药物组合物，包含约100-约500mM的氯化钙或氯化锌。
33.适合于重构时胃肠外应用的药物组合物，包括 多个治疗颗粒，其各自包含具有疏水性聚合物链节和亲水性聚合物链节的共聚物；和活性剂； 糖；和 环糊精。
34.权利要求33的药物组合物，其中所述环糊精选自a-环糊精、￠-环糊精、Y-环糊精或其混合物。
35.权利要求34的药物组合物，包含约I-约25重量百分比的￠-环糊精。
36.权利要求28-35任一项的药物组合物，其中所述共聚物是聚乳酸-嵌段-聚こニ醇。
37.权利要求28-36任一项的药物组合物，其中重构时，IOOmL水性样品包含低于6000个具有大于或等于10微米大小的颗粒；和低于600个具有大于或等于25微米大小的颗粒。
38.权利要求28-36任一项的药物组合物，其中重构时，IOmL水性样品包含低于600个具有大于或等于10微米大小的颗粒/ml ;和低于60个具有大于或等于25微米大小的颗粒/ml。
39.权利要求37或38的药物组合物，其中重构时，所述纳米颗粒具有约40-60mg/mL的浓度。
40.用于胃肠外给药的药学可接受的制剂，通过ー种方法制备，该方法包括 a)提供包含多个治疗颗粒的组合物，所述治疗颗粒各自包含具有疏水性聚合物链节和亲水性聚合物链节的共聚物；和活性剂； b)向所述组合物中添加ニ糖、离子卤盐和任选的环糊精； c)冻干该组合物以形成冻干的组合物； d)重构冻干的组合物以形成适合于胃肠外给药的制剂。
41.用于胃肠外给药的药学可接受的制剂，通过ー种方法制备，该方法包括 a)提供包含多个治疗颗粒的组合物，所述治疗颗粒各自包含具有疏水性聚合物链节和亲水性聚合物链节的共聚物；和活性剂； b)向所述组合物中添加ニ糖和环糊精； c)冻干该组合物以形成冻干的组合物； d)重构冻干的组合物以形成适合于胃肠外给药的制剂。
42.权利要求40-41任一项的药学可接受的制剂，其中所述冻干的组合物具有大于约40mg/mL的治疗颗粒浓度。
43.权利要求40-42任一项的药学可接受的制剂，其中适合于胃肠外给药的该制剂在IOmL剂量中具有低于约600个具有大于10微米的大小的颗粒。
44.权利要求40-43任一项的药学可接受的制剂，其中添加ニ糖和离子卤盐包括添加约5-约15重量百分比的蔗糖或约10-约20重量百分比的海藻糖和约10-约500mM离子卤盐。
45.权利要求40、42或43任一项的药学可接受的制剂，其中添加ニ糖、离子卤盐和环糊精包括添加 约5-约15重量百分比的蔗糖或约5-约20重量百分比的海藻糖； 约10-约500mM离子卤盐，和 约I-约25重量百分比的环糊精。
46.权利要求40、41或45任一项的药学可接受的制剂，其中离子卤盐选自氯化钠、氯化钙和氯化锌或其混合物。
47.权利要求40、41或45任一项的药学可接受的制剂，其中添加ニ糖和环糊精包括添加约5-约15重量百分比的蔗糖或约10-约20重量百分比的海藻糖和约I-约25重量百分比的环糊精。
48.权利要求45-47任一项的药学可接受的制剂，其中环糊精选自a-环糊精、￠-环糊精、Y-环糊精或其混合物。
49.权利要求40-48任一项的药学可接受的制剂，其中冻干包括 在低于约_30°C的温度下冻干组合物； 形成冷冻的组合物；和 干燥冷冻的组合物以形成冻干的组合物。
50.权利要求49的药学可接受的制剂，其中干燥在约50mTorr、在约_30°C至_40°C的产品温度下进行。
51.防止重构的药物纳米颗粒组合物中颗粒显著聚集的方法，包括将糖和盐添加到包含纳米颗粒的冻干的制剂中；重构冻干的制剂，其中重构的组合物不具有显著的纳米颗粒聚集。
52.权利要求51的方法，还包括添加环糊精。
53.防止重构的药物纳米颗粒组合物中颗粒显著聚集的方法，包括将糖和环糊精添加到包含纳米颗粒的冻干的制剂中； 重构冻干的制剂，其中重构的组合物不具有显著的纳米颗粒聚集。
全文摘要
本发明一般涉及包含聚合物纳米颗粒的冻干的药物组合物，在重构时，它们具有大于10微米为粒度的低水平。本发明的其他方面包括这种纳米颗粒的制备方法。
文档编号A61K47/40GK102811743SQ201080061714
公开日2012年12月5日 申请日期2010年12月10日 优先权日2009年12月11日
发明者G·特洛伊阿诺, S·E·采尔, J·赖特, T·范吉恩沃文, 宋扬浩 申请人:佰恩德生物科学股份有限公司