028] 并且，本实施方式的优化培养方法，缩短了枯草芽孢杆菌（BS224)菌株的培养时间， 控制其在对数生长期内，提高了菌株的活性；在发酵培养基中添加1%琼脂粉既延长抑菌 时间，又省去离心收集菌体的步骤，缩短了工时。原始工艺的工时为140h，改进工艺的工时 为 122h，缩短了 18h。
[0029] 而且，由于芦荟多糖是由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖及微量的岩藻糖、木糖组 成，在枯草芽孢杆菌活菌制剂中加入芦荟多糖，既可以为枯草芽孢杆菌活菌提供营养物质， 又可以促进伤口愈合，同时帮助枯草芽孢杆菌在创口形成一层保护膜，为枯草芽孢杆菌营 造厌氧的生长环境。
[0030] 薄荷多糖中主要含有葡萄糖，半乳糖和阿拉伯糖，另外还含有甘露糖和鼠李糖；薄 荷多糖可以为枯草芽孢杆菌提供营养物质；薄荷多糖具有低分子量糖类的特性，具有渗透 性和锁水性强的能力，可以即时成膜，具有较好的保湿效果；因此，薄荷多糖既可以为枯草 芽孢杆菌活菌提供营养物质，又可以促进伤口愈合，同时帮助枯草芽孢杆菌在创口形成一 层保护膜。因此，芦荟多糖和薄荷多糖又可以为枯草芽孢杆菌提供碳源，一举两用。
[0031] 本实施方式的枯草芽孢杆菌喷雾剂同时还具有如下功能：
[0032] 1、喷雾剂本身具有抑制菌类生长的功能；2、膜剂产生生物粘附性，牢牢地粘附于 患处；3、由于在喷雾剂中加入甘油，能够对烧烫伤后产生的组织液有吸附作用；4、有抑制 纤维细胞生长，减少疤痕的作用；5、不粘连皮肤，揭开取容易，不会造成二次出血和伤害； 6、加入分散剂后，使喷雾剂更容易喷出。
【具体实施方式】 [0033] 二：本实施方式与一不同点是：所述的无机盐是由质 量百分含量为0. 05 %的氯化1?溶液、质量百分含量为0. 05%的氯化猛溶液、质量百分含量 为0. 1 %的硫酸镁溶液和质量百分含量为0. 2%的磷酸氢二钠溶液按等比例混合而成。其 他步骤与一相同。
[0034]
【具体实施方式】三：本实施方式与【具体实施方式】一或二之一不同点是：所述的碳源 是由葡萄糖、芦荟多糖和薄荷多糖按质量比为1 :2 :2的比例组成。其他步骤与具体实施方 式一或二相同。
【具体实施方式】 [0035] 四：本实施方式与一至三之一不同点是：所述的芦荟 多糖的提取是按以下步骤进行：
[0036] -、芦荟前处理：取新鲜库拉索芦荟叶洗净去刺，横切成5mm薄片架在培养皿上， 用鼓风干燥箱55°C的条件下烘干12h，然后将烘干的芦荟叶放入粉碎机粉碎，得到芦荟粉， 置于棕色试剂瓶密封保存备用；
[0037] 二、按质量体积比为l:30g/mL的比例将芦荟干粉放入蒸馏水中，复水30min后用 超声波辅助进行提取，然后8000r/min离心15min，取上清液，再放入旋转发仪在0. 085MPa， 65°C的条件下浓缩至原体积的1/2~1/3,然后加入4倍体积的无水乙醇再置于4°C冰箱， 静置过夜，然后2500r/min离心lOmin，取沉淀，即完成。其他步骤与【具体实施方式】一至三相 同。
【具体实施方式】 [0038] 五：本实施方式与一至四之一不同点是：所述的薄荷 多糖是按以下步骤制备的：
[0039] -、称取干燥的薄荷药材，粉碎后过40目~60目筛，得到薄荷粉末；将薄荷粉末 加入到蒸馏水中浸泡12h~20h，再加热回流提取Ih~2h，得到混合物A;向混合物A中 加入纤维素酶，调节pH值至5~6,再在温度为40°C~55°C、pH值为5~6的条件下酶解 0. 5h~3h，得到纤维素酶水解后的混合物A;
[0040] 步骤一中所述的纤维素酶的加入量与混合物A的质量比为（0. 3~1. 5) : 100 ;
[0041] 二、向纤维素酶水解后的混合物A中加入蛋白酶和菠萝蛋白酶，调节pH至7~ 7. 5,再在温度为55°C~60°C下酶解0. 5h~3h，得到提取液；
[0042] 步骤二中所述的蛋白酶的加入量与纤维素酶水解后的混合物A的质量比为 (0. 3~0. 8) : 100 ;步骤二中所述的菠萝蛋白酶的加入量与纤维素酶水解后的混合物A的质 量比为（0. 3 ~0. 6) : 100 ;
[0043] 三、使用旋转蒸发仪在温度为62°C~68°C下将提取液的体积减压浓缩至原体积 的1/2~1/3,得到浓缩液；向浓缩液中加入无水乙醇，再在室温下静置8h~16h，再进行抽 滤，得到沉淀物质；依次使用无水乙醇、无水乙醚和丙酮洗涤对沉淀物质分别清洗3次~5 次，再在零下15°C~30°C，冷冻干燥5h~10h，得到薄荷多糖；
[0044] 步骤三中所述的浓缩液的体积与无水乙醇的体积比为1: (4~6)。其他步骤与具 体实施方式一至四相同。
【具体实施方式】 [0045] 六：本实施方式与一至五之一不同点是：所述的枯草 芽孢杆菌是按照以下步骤进行优化培养的：
[0046] -、取枯草芽孢杆菌接种于LB固体斜面培养基上，在37°C条件下，培养18~20h;
[0047] 二、取步骤一培养至第2~3代的枯草芽孢杆菌的菌种接种于LB液体培养基中， 在温度为37°C、转速为200rpm的条件下培养12~14h;
[0048] 三、取步骤二培养的枯草芽孢杆菌液接种至含有质量百分含量为0. 009~0. 08% 的氯化钙和质量百分含量为0. 01~0. 07%的氯化锰的LB液体培养基中，在培养温度为 37°C、转速为200rpm、pH为7. 2~7. 4、通气比例为1:1的条件下培养20h，然后将培养温度 降至15°C~20°C继续培养60h，即完成所述的枯草芽孢杆菌的优化。其他步骤与具体实施 方式一至五相同。
[0049]LB固体斜面培养基是由葡萄糖、酵母膏和蛋白胨混合而成，其中，葡萄糖的浓度为 4g/L、酵母膏的浓度为12g/L，蛋白胨的浓度为I. 5g/L。
【具体实施方式】 [0050] 七：本实施方式与一至六之一不同点是：所述的枯草 芽孢杆菌为BS224菌株。其他步骤与一至六相同。
【具体实施方式】 [0051] 八：本实施方式与一至七之一不同点是：所述的LB液 体培养基是由葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、氯化钙和氯化锰混合而成，其中，LB液体培养基中葡 萄糖的浓度为4g/L、酵母膏的浓度为12g/L，蛋白胨的浓度为I. 5g/L。其他步骤与具体实施 方式一至七相同。
【具体实施方式】 [0052] 九：本实施方式与一至八之一不同点是：一种枯草芽 孢杆菌喷雾剂的应用，它用于烧伤的抗菌感染中。其他步骤与一至八相同。
【具体实施方式】 [0053] 十：本实施方式与一至九之一不同点是：一种枯草芽 孢杆菌喷雾剂的应用，是按照以下步骤进行的：
[0054] 将【具体实施方式】一的枯草芽孢杆菌喷雾剂直接喷涂在烧伤创面，或者先在烧伤创 面涂喷涂【具体实施方式】一的枯草芽孢杆菌喷雾剂，然后再烧伤创面涂抹羧甲基纤维素钠和 海藻酸钠胶。其他步骤与【具体实施方式】一至九相同。
[0055] 本实施方式所述的羧甲基纤维素钠和海藻酸钠胶是按照以下步骤进行的：
[0056] -、将羧甲基纤维素钠和海藻酸钠在温度为50~60°C条件下加入到水中搅拌至 完全溶解后，得混液；
[0057] 调节步骤一混液的渗透压摩尔浓度至300~350m0smol/kg，然后加水调节羧甲基 纤维素钠的质量浓度至4%~10%，海藻酸钠质量浓度至0. 2%~0. 5%，得羧甲基纤维素 钠和海藻酸钠胶，将羧甲基纤维素钠和海藻酸钠胶灭菌后，即完成。
【具体实施方式】 [0058] 十一：本实施方式与一至十之一不同点是：一种枯草 芽孢杆菌喷雾剂它由枯草芽孢杆菌、85 %的营养液、10 %的甘油和5 %的分散剂制成，所述 的营养液是由碳源、氮源、无机盐和余量的水组成，其中，碳源、氮源和无机盐的质量比为 3:2:1 ;所述的碳源是由葡萄糖、芦荟多糖和薄荷多糖按质量比为1:2:2的比例组成。其他 步骤与一至十相同。
[0059]
【具体实施方式】十二：本实施方式与【具体实施方式】一至^^一之一不同点是：一种枯 草芽孢杆菌喷雾剂它由枯草芽孢杆菌和基质组成；所述枯草芽孢杆菌喷雾剂中枯草芽孢杆 菌的含菌量为5. 6~5. 9XIO8CFUAiL;所述的基质是按质量百分比由86%的营养液、10% 的甘油和4%的分散剂组成，所述的营养液是由碳源、氮源、无机盐及水混合而成，其中，营 养液中碳源的浓度为4mg/mL、营养液中氮源浓度为12mg/mL、营养液中无机盐是由浓度为 0. 5mg/mL的无水氯化妈和浓度为0. 5mg/mL的氯化猛混合而成；所述的碳源是由葡萄糖、芦 荟多糖和薄荷多糖按质量比为1 :3 :2的比例组成；所述的氮源为大豆蛋白胨、酵母粉、牛肉 膏和大豆粉中的一种或几种按任意比混合的混合物；所述的分散剂为萘磺酸钠甲醛缩合物 或吐温-80。其他步骤与【具体实施方式】一至十一相同。
[0060]
【具体实施方式】十三：本实施方式与【具体实施方式】一至十二之一不同点是：一种枯 草芽孢杆菌喷雾剂它由枯草芽孢杆菌和基质组成；所述枯草芽孢杆菌喷雾剂中枯草芽孢杆 菌的含菌量为5. 6~5. 9XIO8CFUAiL;所述的基质是按质量百分比由88%的营养液、8% 的甘油和4%的分散剂组成，所述的营养液是由碳源、氮源、无机盐及水混合而成，其中，营 养液中碳源的浓度为4mg/mL、营养液中氮源浓度为13mg/mL、营养液中无机盐是由浓度为 0. 5mg/mL的无水氯化妈和浓度为0. 5mg/mL的氯化猛混合而成；所述的碳源是由葡萄糖、芦 荟多糖和薄荷多糖按质量比为1 :2 :2的比例组成；所述的氮源为大豆蛋白胨、酵母粉、牛肉 膏和大豆粉中的一种或几种按任意比混合的混合物；所述的分散剂为萘磺酸钠甲醛缩合物 或吐温-80。其他步骤与【具体实施方式】一至十二相同。
[0061]
【具体实施方式】十四：本实施方式与【具体实施方式】一至十三之一不同点是：一种枯 草芽孢杆菌喷雾剂它由枯草芽孢杆菌和基质组成；所述枯草芽孢杆菌喷雾剂中枯草芽孢杆 菌的含菌量为5. 6~5. 9XIO8CFUAiL;所述的基质是按质量百分比由90%的营养液、7% 的甘油和3%的分散剂组成，所述的营养液是由碳源、氮源、无机盐及水混合而成，其中，营