作为丝氨酸蛋白酶抑制剂的模板固定肽模拟物的制作方法

专利名称：作为丝氨酸蛋白酶抑制剂的模板固定肽模拟物的制作方法
专利说明作为丝氨酸蛋白酶抑制剂的模板固定肽模拟物 本发明提供定义如下的引入7或11个α-氨基酸残基的模板固定链的模板固定β-发夹肽模拟物(peptidomimetics)，所述残基根据其在链中的位置是Gly，或Pro，或某些种类。这些模板固定β-发夹肽模拟物可用作蛋白酶的抑制剂。它们尤其有价值地用作各种丝氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，人组织蛋白酶G，和凝血酶的抑制剂。另外，本发明提供一种有效方法，这样这些化合物可根据需要制成库形式。该库法提供一种用于鉴定特异丝氨酸蛋白酶抑制剂的有效新型工具。
蛋白酶抑制剂因为在治疗疾病中具有有希望的治疗用途而出现，所述疾病例如有癌症(R.P.Beckett，A.Davidson，A.H.Drummond，M.Whittaker，Drug Disc.Today 1996，1，16-26；L.L.Johnson，R.Dyer，D.J.Hupe，Curr.Opin.Chem.Biol.1998，2，466-71；D.Leung，G.Abbenante，和D.P.Fairlie，J.Med.Chem.2000，43，305-341)，寄生虫，真菌，和病毒感染[如血吸虫病(M.M.Becker，S.A.Harrop，J.P.Dalton，B.H.Kalinna，D.P.McManus，D.P.Brindley，J.Biol.Chem.1995，270，24496-501)；疟疾(A.M.Silva，A.Y.Lee，S.V.Gulnik，P.Maier，J.Collins，T.N.Bhat，P.J.Collins，R.E.Cachau，K.E.Luker，I.Y.Gluzman，S.E.Francis，A.Oksman，D.E.Goldberg，J.W.Erikson，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A 1996，93，10034-9)，白色念珠菌(C.Abad-Zapetero，R.Goldman，S.W.Muchmore，C.Hutchins，K.Stewart，J.Navaza，C.D.Payne，T.L.Ray，蛋白质科学，1996，5，640-52)，HIV(A.Wlodawer，J.W.Erickson，Annu.Rev.Biochem.1993，62，543-85；P.L.Darke，J.R.Huff，Adv.Pharmacol.1994，5，399-454)，肝炎(J.L.Kim，K.A.Morgenstern，C.Lin，T.Fox，M.D.Dwyer，J.A.Landro，S.P.Chambers，W.Markland，C.A.Lepre，E.T.O’Malley，S.L.Harbeson，C.M.Rice，M.A.Murcko，P.R.Caron，J.A.Thomson，细胞，1996，87，343-55；R.A.Love，H.E.Parge，J.A.Wickersham，Z.Hostomsky，N.Habuka，E.W.Moomaw，T.Adachi，Z.Hostomska，细胞，1996，87，331-342)，疱疹(W.Gibson，M.R.Hall，Drug.Des.Discov.1997，15，39-47)]，和炎性，免疫性，呼吸性疾病(P.R.Bernstein，P.D.Edwards，J.C.Williams，Prog.Med.Chem.1994，31，59-120；T.E.Hugli，Trends Biotechnol.1996，14，409-12)，心血管疾病(M.T.Stubbs，W.A.Bode，Thromb.Res.1993，69，1-58)，和神经变性缺陷，包括阿尔茨海默病(R.Vassar，B.D.Bennett，S.Babu-Kahn，S.Kahn，E.A.Mendiaz，科学，1999，286，735-41)。
因为大多数蛋白酶与其底物以延伸的或β-链构象结合，良好的抑制剂必须因此能够模拟这种构象。B-发夹模拟物因此理想地适用于锁定延伸构象中的肽序列。
在蛋白酶中，丝氨酸蛋白酶成为重要的治疗靶。丝氨酸蛋白酶根据其底物特异性，尤其根据存在于P1上的残基的种类而划分为胰蛋白酶样(带正电荷的残基Lys/Arg，优选在P1上)，弹性蛋白酶样(在P1上的小憎水残基Ala/Val)，或胰凝乳蛋白酶样(在P1上的大憎水残基Phe/Tyr/Leu)。可在PDB数据库(PDBwww.rcsb.org/pdb)上得到蛋白酶-抑制剂X-射线晶体数据的丝氨酸蛋白酶包括胰蛋白酶，α-胰凝乳蛋白酶，γ-胰凝乳蛋白酶，人嗜中性弹性蛋白酶，凝血酶，枯草溶菌素，人巨细胞病毒，蛋白酶A，无色细菌，人组织蛋白酶G，谷氨酸特异性蛋白酶，carbopeptidase D，血液凝固因子VIIa，猪因子1XA，mesentericopiptedase，HCV蛋白酶，和thermitase。具有治疗价值的其它丝氨酸蛋白酶包括类胰蛋白酶，补体转化酶，肝炎C-NS3蛋白酶。凝血酶(如J.L.Metha，L.Y.Chen，W.W.Nichols，C.Mattsson，D.Gustaffson，T.G.P.Saldeen，J.Cardiovasc.Pharmacol.1998，31，345-51；C.Lila，P.Gloanec，L.Cadet，Y.Herve，J.Fournier，F.Leborgne，T.J.Verbeuren，G.DeNanteuil，Synth.Comm.1998，28，4419-29)和因子Xa(如J.P.Vacca，Annu.Rep.Med.Chem.1998，33，81-90)的抑制剂在临床上被评估为抗血栓药，弹性蛋白酶(J.R.Williams，R.C.Falcone，C.Knee，R.L.Stein，A.M.Strimpler，B.Reaves，R.E.Giles，R.D.Krell，Am.Rev.Respir.Dis.1991，144，875-83)的抑制剂正在临床试验中用于气肿和其它肺病，而类胰蛋白酶抑制剂目前正处于哮喘I I期临床试验(C.Seife，科学，1997，277，1602-3)。最后，组织蛋白酶G和弹性蛋白酶与对细胞因子和其受体的活性的调节密切相关。尤其在炎症部位，高浓度的组织蛋白酶G，弹性蛋白酶和蛋白酶3从浸润多形核细胞中释放，与炎症细胞因子的提高的水平在时间上密切相关，这明显表明这些蛋白酶参与对细胞因子生物活性和可用性的控制(U.Bank，S.Ansorge，J.Leukoc.Biol.2001，69，177-90)。因此凝血酶和组织蛋白酶G的抑制剂成为候选新型药物的有价值的靶。
在许多存在的蛋白质类丝氨酸蛋白酶抑制剂中，一种是来自向日葵籽的14个氨基酸环状肽，称作向日葵胰蛋白酶抑制剂(SFTI-1)(S.Luckett，R.Santiago Garcia，J.J.Barker，A.V.Konarev，P.R.Shewry，A.R.Clarke，R.L.Brady，J.Mol.Biol.1999，290，525-533；Y.-Q.Long，S.-L.Lee，C.-Y.Lin，I.J.Enyedy，S.Wang，P.Li，R.B.Dickson，P.P.Roller，Biorg.& Med.Chem.Lett.2001，11，2515-2519)，其显示出与Bowman-Birk家族丝氨酸蛋白酶抑制剂的胰蛋白酶反应性环具有序列和构象相似性。该抑制剂在结合牛β-胰蛋白酶的活性位上时采取β-发夹构象。SFTI-1抑制β-胰蛋白酶(Ki＜0.1nM)，组织蛋白酶G，弹性蛋白酶(Ki约105μM)，胰凝乳蛋白酶(Ki约7.4μM)和凝血酶(Ki约136mM)。
我们在此提出一种抑制剂设计途径，包括将β-发夹环由自然存在的肽移植到发夹诱导模板上。根据β-发夹模拟物的非常明确的3D-结构，可设计出化合物库，最终可得到对几类蛋白酶具有不同的特异性分布的新型抑制剂。
模板结合的发夹模拟肽已被描述于文献(D，Obrecht，M.Altorfer，J.A.Robinson，Adv.Med.Chem.1999，4，1-68；J.A.Robinson，Syn.Lett.2000，4，429-441)，但这些分子以前已经被评估用于开发抑制蛋白酶和构成延伸的肽构象的模拟物的肽。但目前已经确立使用组合和平行合成方法产生β-发夹肽模拟物的能力(L.Jiang，K.Moehle，B.Dhanapal，D.Obrecht，J.A.Robinson，Helv.Chim.Acta.2000，83，3097-3112)。该技术使得能够快速合成蛋白酶抑制剂库和研究出确定对给定丝氨酸蛋白酶的特异性的关键残基。
本发明的β-发夹肽模拟物是具有以下通式的化合物
其中
是具有以下结构式之一的基团


其中
是L-α-氨基酸的残基，其中B是具有式-NR20CH(R71)-的残基或定义如下的基团A1-A69之一的对映异构体；
是具有以下结构式之一的基团



R1是H；低级烷基；或芳基-低级烷基； R2是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56； -(CH2)m(CHR61)sNR33R34；-(CH2)m(CHR61)sOCONR33R78； -(CH2)m(CHR61)sNR20CONR33R78；-(CH2)o(CHR61)sCOOR57； -(CH2)o(CHR61)sCONR58R59；-(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2；-(CH2)o(CHR61)sSO2R62； 或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R3是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56； -(CH2)m(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R4是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56；-(CH2)m(CHR61)sNR33R34； -(CH2)p(CHR61)sCOOR57；-(CH2)p(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)p(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)p(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R5是烷基；链烯基；-(CH2)o(CHR61)sOR55；-(CH2)o(CHR61)sSR56； -(CH2)o(CHR61)sNR33R34；-(CH2)m(CHR61)sOCONR33R78； -(CH2)m(CHR61)sNR20CONR33R78；-(CH2)o(CHR61)sCOOR57； -(CH2)o(CHR61)sCONR58R59；-(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2；-(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R6是H；烷基；链烯基；-(CH2)o(CHR61)sOR55；-(CH2)o(CHR61)sSR56； -(CH2)o(CHR61)sNR33R34； 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R11是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56； -(CH2)m(CHR61)sNR33R34；-(CH2)m(CHR61)sOCONR33R78； -(CH2)m(CHR61)sNR20CONR33R78；-(CH2)o(CHR61)sCOOR57； -(CH2)o(CHR61)sCONR58R59；-(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2；-(CH2)o(CHR61)sSO2R62； 或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R12是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56； -(CH2)m(CHR61)sNR33R34；-(CH2)r(CHR61)sCOOR57；-(CH2)r(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)r(CHR61)sPO(OR60)2；-(CH2)r(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)r(CHR61)sC6H4R8； R13是烷基；链烯基；-(CH2)q(CHR61)sOR55；-(CH2)q(CHR61)sSR56； -(CH2)q(CHR61)sNR33R34； -(CH2)q(CHR61)sCOOR57；-(CH2)q(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)q(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)q(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)q(CHR61)sC6H4R8； R14是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sNR33R34； -(CH2)q(CHR61)sCOOR57；-(CH2)q(CHR61)sCONR58R59；-(CH2)q(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)q(CHR61)sSOR62；或-(CH2)q(CHR61)sC6H4R8； R15是烷基；链烯基；-(CH2)o(CHR61)sOR55；-(CH2)o(CHR61)sSR56； -(CH2)o(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)8COOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； 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R26是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56；-(CH2)m(CHR61)sNR33R34；-(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59；-(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2；-(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8；或 R25和R26在一起可形成-(CH2)2-6-；-(CH2)rO(CH2)r-；-(CH2)rS(CH2)r-；或 -(CH2)rNR34(CH2)r-； R27是H；烷基；链烯基；-(CH2)o(CHR61)sOR55；-(CH2)o(CHR61)sSR56； -(CH2)o(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R28是烷基；链烯基；-(CH2)o(CHR61)s-OR55；-(CH2)o(CHR61)sSR56； -(CH2)o(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R29是烷基；链烯基；-(CH2)o(CHR61)sOR55；-(CH2)o(CHR61)sSR56； -(CH2)o(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R30是H；烷基；链烯基；或芳基-低级烷基； R31是H；烷基；链烯基；-(CH2)p(CHR61)sOR55；-(CH2)p(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59；-(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R32是H；低级烷基；或芳基-低级烷基； R33是H；烷基，链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56； -(CH2)m(CHR61)sNR34R63；-(CH2)m(CHR61)sOCONR34R78； -(CH2)m(CHR61)sNR20CONR34R78；-(CH2)o(CHR61)sCOR64； -(CH2)o(CHR61)s-CONR58R59，-(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2；-(CH2)o(CHR61)sSO2R62； 或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R34是H；低级烷基；芳基，或芳基-低级烷基； R35是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sNR33R34； -(CH2)p(CHR61)sCOOR57；-(CH2)p(CHR61)sCONR58R59；-(CH2)p(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)p(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)p(CHR61)sC6H4R8； R36是H，烷基；链烯基；-(CH2)o(CHR61)sOR55；-(CH2)p(CHR61)sNR33R34； -(CH2)p(CHR61)sCOOR57；-(CH2)p(CHR61)sCONR58R59；-(CH2)p(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)p(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R37是H；F；Br；Cl；NO2；CF3；低级烷基；-(CH2)p(CHR61)sOR55； -(CH2)p(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R38是H；F；Br；Cl；NO2；CF3；烷基；链烯基；-(CH2)p(CHR61)sOR55； -(CH2)p(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R39是H；烷基；链烯基；或芳基-低级烷基； R40是H；烷基；链烯基；或芳基-低级烷基； R41是H；F；Br；Cl；NO2；CF3；烷基；链烯基；-(CH2)p(CHR61)sOR55； -(CH2)p(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R42是H；F；Br；Cl；NO2；CF3；烷基；链烯基；-(CH2)p(CHR61)sOR55； -(CH2)p(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R43是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59；-(CH2)o(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)o(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R44是烷基；链烯基；-(CH2)r(CHR61)sOR55；-(CH2)r(CHR61)sSR56； -(CH2)r(CHR61)sNR33R34； -(CH2)r(CHR61)sCOOR57；-(CH2)r(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)r(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)r(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)r(CHR61)sC6H4R8； R45是H；烷基；链烯基；-(CH2)o(CHR61)sOR55；-(CH2)o(CHR61)sSR56； -(CH2)o(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)s(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)s(CHR61)sPO(OR60)2； -(CH2)s(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)s(CHR61)sC6H4R8； R46是H；烷基；链烯基；或-(CH2)o(CHR61)pC6H4R8； R47是H；烷基；链烯基；或-(CH2)o(CHR61)sOR55； R48是H；低级烷基；低级链烯基；或芳基-低级烷基； R49是H；烷基；链烯基；-(CHR61)sCOOR57；(CHR61)sCONR58R59；(CHR61)sPO(OR60)2； -(CHR61)sSOR62；或-(CHR61)sC6H4R8； R50是H；低级烷基；或芳基-低级烷基； R51是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56； -(CH2)m(CHR61)sNR33R34；-(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)pPO(OR60)2；-(CH2)p(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)p(CHR61)sC6H4R8； R52是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56； -(CH2)m(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)pPO(OR60)2； -(CH2)p(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)p(CHR61)sC6H4R8； R53是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sSR56； -(CH2)m(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)sCOOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； -(CH2)o(CHR61)pPO(OR60)2； -(CH2)p(CHR61)sSO2R62；或-(CH2)p(CHR61)sC6H4R8； R54是H；烷基；链烯基；-(CH2)m(CHR61)sOR55；-(CH2)m(CHR61)sNR33R34； -(CH2)o(CHR61)COOR57；-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59；或-(CH2)o(CHR61)sC6H4R8； R55是H；低级烷基；低级链烯基；芳基-低级烷基； -(CH2)m(CHR61)sOR57； -(CH2)m(CHR61)sNR34R63；-(CH2)o(CHR61)s-COR64；-(CH2)o(CHR61)COOR57； 或-(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； R56是H；低级烷基；低级链烯基；芳基-低级烷基； -(CH2)m(CHR61)sOR57； -(CH2)m(CHR61)sNR34R63；-(CH2)o(CHR61)s-COR64；或 -(CH2)o(CHR61)sCONR58R59； R57是H；低级烷基；低级链烯基；芳基低级烷基；或杂芳基低级烷 基； R58是H；低级烷基；低级链烯基；芳基；杂芳基；芳基-低级烷基；或杂芳基-低级烷基； R59是H；低级烷基；低级链烯基；芳基；杂芳基；芳基-低级烷基；或杂芳基-低级烷基；或 R58和R59在一起可形成-(CH2)2-6-；-(CH2)2O(CH2)2-；-(CH2)2S(CH2)2-；或-(CH2)2NR34(CH2)2-； R60是H；低级烷基；低级链烯基；芳基；或芳基-低级烷基； R61是烷基；链烯基；芳基；杂芳基；芳基-低级烷基；杂芳基-低级烷基；-(CH2)mOR55； -(CH2)mNR33R34；-(CH2)oCOOR37；-(CH2)oNR58R59；或-(CH2)oPO(COR60)2； R62是低级烷基；低级链烯基；芳基，杂芳基；或芳基-低级烷基； R63是H；低级烷基；低级链烯基；芳基，杂芳基；芳基-低级烷基； 杂芳基-低级烷基； -COR64；-COOR57；-CONR58R59；-SO2R62；或-PO(OR60)2； R64是H；低级烷基；低级链烯基；芳基；杂芳基；芳基-低级烷基；杂芳基-低级烷基； -(CH2)p(CHR61)sOR65；-(CH2)p(CHR61)sSR66；或-(CH2)p(CHR61)sNR34R63； R65是H；低级烷基；低级链烯基；芳基，芳基-低级烷基；杂芳基-低级烷基；-COR57； -COOR57；或-CONR58R59； R66是H；低级烷基；低级链烯基；芳基；芳基-低级烷基；杂芳基-低级烷基；或-CONR58R59； m是2-4；o是0-4；p是1-4；q是0-2；r是1或2；s是0或1； Z是n个α-氨基酸残基的链，n是整数7或11，所述氨基酸残基在所述链中的位置从N-端氨基酸开始计数，这样这些氨基酸残基是(根据其在链中的位置)Gly，或Pro，或具有式-A-CO-，或以下种类中的一种 C -NR20CH(R72)CO-； D -NR20CH(R73)CO-； E -NR20CH(R74)CO-； F -NR20CH(R84)CO-；and H -NR20-CH(CO-)-(CH2)4-7-CH(CO-)-NR20-； -NR20-CH(CO-)-(CH2)pSS(CH2)p-CH(CO-)-NR20-； -NR20-CH(CO-)-(-(CH2)pNR20CO(CH2)p-CH(CO-)-NR20-；and -NR20-CH(CO-)-(-(CH2)pNR20CONR20(CH2)p-CH(CO-)-NR20-； R71是H；低级烷基；低级链烯基；-(CH2)p(CHR61)sOR75； -(CH2)p(CHR61)sSR75；-(CH2)pNR78R79； -(CH2)o(CHR61)sCOOR75；-(CH2)pCONR78R79；-(CH2)pPO(OR62)2； -(CH2)pSO2R62；或 -(CH2)o-C6R67R68R69R70R76； R72是H；低级烷基；低级链烯基；-(CH2)p(CHR61)sOR85；或 -(CH2)p(CHR61)sSR85； R73是-(CH2)oR77；-(CH2)rO(CH2)oR77；-(CH2)rS(CH2)oR77；或 -(CH2)rNR20(CH2)oR77； R74是-(CH2)pNR78R79；-(CH2)pC(＝NR80)NR78R79；-(CH2)pC(＝NOR50)NR78R79； -(CH2)pC(＝NNR78R79)NR78R79；-(CH2)pNR80C(＝NR80)NR78R79；-(CH2)pC6H4NR78R79； -(CH2)pC6H4C(＝NR80)NR78R79；-(CH2)pC6H4C(＝NOR50)NR78R79； -(CH2)pC6H4C(＝NNR78R79)NR78R79；-(CH2)pC6H4NR80C(＝NR80)NR78R79； -(CH2)rO(CH2)mNR78R79；-(CH2)rO(CH2)pC(＝NR80)NR78R79；- (CH2)rO(CH2)pC(＝NOR50)NR78R79； -(CH2)rO(CH2)pC(＝NNR78R79)NR78R79；-(CH2)rO(CH2)mNR80C(＝NR80)NR78R79； -(CH2)rO(CH2)pC6H4CNR78R79；-(CH2)rO(CH2)pC6H4C(＝NR80)NR78R79； -(CH2)rO(CH2)pC6H4C(＝NOR50)NR78R79；-(CH2)rO(CH2)pC6H4C(＝NNR78R79)NR78R79； -(CH2)rO(CH2)pC6H4NR80C(＝NR80)NR78R79；-(CH2)rS(CH2)mNR78R79； -(CH2)rS(CH2)pC(＝NR80)NR78R79；-(CH2)rS(CH2)pC(＝NOR50)NR78R79； -(CH2)rS(CH2)pC(＝NNR78R79)NR78R79；-(CH2)rS(CH2)mNR80C(＝NR80)NR78R79； -(CH2)rS(CH2)pC6H4CNR78R79；-(CH2)rS(CH2)pC6H4C(＝NR80)NR78R79； -(CH2)rS(CH2)pC6H4C(＝NOR50)NR78R79；-(CH2)rS(CH2)pC6H4C(＝NNR78R79)NR78R79； -(CH2)rS(CH2)pC6H4NR80C-(＝NR80)NR78R79；-(CH2)pNR80CONR78R79；或 -(CH2)pC6H4NR80CONR78R79； R75是低级烷基；低级链烯基；或芳基-低级烷基； R76是H；低级烷基；低级链烯基；芳基-低级烷基；-(CH2)oOR72； -(CH2)oSR72；-(CH2)oNR33R34； -(CH2)oCOOR75；-(CH2)oCONR58R59；-(CH2)oPO(OR60)2；-(CH2)pSO2R62；或 -(CH2)oCOR64； R77是-C6R67R68R69R70R76；或具有以下式之一的杂芳基基团


R78是H；低级烷基；芳基；或芳基-低级烷基； R79是H；低级烷基；芳基；或芳基-低级烷基；或 R78和R79在一起时可以是-(CH2)2-7-；-(CH2)2O(CH2)2-；或-(CH2)2NR33(CH2)2-； R80是H；或低级烷基； R81是H；低级烷基；或芳基-低级烷基； R82是H；低级烷基；芳基；杂芳基；或芳基-低级烷基； R83是H；低级烷基；芳基；或-NR78R79； R84是-(CH2)m(CHR61)sOH；-(CH2)pCONR78R79；-(CH2)pNR80CONR78R79；-(CH2)pC6H4CONR78R79；-(CH2)pCOOR80或-(CH2)pC6H4NR80CONR78R79； R85是低级烷基；或低级链烯基； 前提是在n个α-氨基酸残基的所述链Z中 -如果n是7，那么1-7位上的氨基酸残基是 ·P1种类C或种类F或种类D； ·P2种类E或种类C或种类D或种类F； ·P3种类F或种类C，或残基是Gly或Pro； ·P4种类C或种类D或种类F，或残基是Gly或Pro； ·P5种类F或具有式-A-CO-，或残基是Gly或Pro； ·P6种类C或种类E或具有结构式-A-CO-，或残基是Pro； ·P7种类C或种类F或种类D； 如果n是11，那么1-11位上的氨基酸残基是 ·P1种类E或种类F或种类C； ·P2种类C或种类F或种类E； ·P3种类C或种类F； ·P4种类E或种类C或种类D或种类F，或残基是Gly或Pro； ·P5种类F或种类C，或残基是Gly或Pro； ·P6种类C或种类D或种类F，或残基是Gly或Pro； ·P7种类F或具有结构式-A-CO-，或残基是Gly或Pro； ·P8种类C或种类E或具有结构式-A-CO-，或残基是Gly或Pro； ·P9种类C或种类F； ·P10种类F或种类C； ·P11种类D或种类E或种类F或种类C；或 ·P2和P10在一起可形成种类H基团； 和其药物可接受盐。
按照本发明，这些β-发夹肽模拟物可通过以下方法而制成，所述方法包括 (a)将适当官能化固体载体与在所需最终产物中处于n/2+1/2或n/2-1/2位的氨基酸的适当N-保护衍生物偶联，可存在于所述N-保护氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护； (b)从如此得到的产物中去除N-保护基团； (c)将如此得到的产物与在所需最终产物中离N-端氨基酸残基近一个位的氨基酸的适当N-保护衍生物偶联，可存在于所述N-保护氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护； (d)从如此得到的产物中去除N-保护基团； (e)如果需要，重复步骤(c)和(d)直至N-端氨基酸残基已被引入； (f)将如此得到的产物偶联至具有以下通式的化合物
其中
定义如上，X是N-保护基团，或，如果
是以上的基团(a1)或(a2)，可替代地， (fa)将在步骤(d)或(e)中得到的产物与具有以下通式的氨基酸的适当N-保护衍生物偶联 HOOC-B-H III 或 HOOC-A-HIV 其中B和A定义如上，可存在于所述N-保护氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护； (fb)从如此得到的产物中去除N-保护基团；和 (fc)将如此得到的产物分别与具有以上通式IV和III的氨基酸的适当N-保护衍生物偶联，可存在于所述N-保护氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护； (g)从在步骤(f)或(fc)中得到的产物中去除N-保护基团； (h)将如此得到的产物偶联至在所需最终产物中处于n位的氨基酸的适当N-保护衍生物，可存在于所述N-保护氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护； (i)从如此得到的产物中去除N-保护基团； (j)将如此得到的产物偶联至在所需最终产物中比n位远一个位的氨基酸的适当N-保护衍生物，可存在于所述N-保护氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护； (k)从如此得到的产物中去除N-保护基团； (l)如果需要，重复步骤(j)和(k)直至所有的氨基酸残基已被引入； (m)如果需要，选择性地去保护存在于该分子中的一个或若干个保护官能团和适当地取代如此释放的反应性基团； (o)将如此得到的产物与固体载体分离； (p)环化从固体载体上断裂的产物； (q)如果需要，在β-链区域的相对的位置上形成适当的氨基酸残基的侧链之间的链间键； (r)去除存在于氨基酸残基链的任何成分的官能团上的任何保护基团和，如果需要，另外可存在于分子中的任何保护基团；和 (r)如果需要，将如此得到的产物转化成药物可接受盐或将如此得到的药物可接受的，或不可接受的盐转化成具有结构式I的相应的游离化合物或转化成不同的药物可接受盐。
本说明书中所用的术语″烷基″单独或组合时表示具有最高24，优选最高12个碳原子的饱和，直链或支化烃基团。类似地，术语″链烯基″表示具有最高24，优选最高12个碳原子和包含至少一个或，取决于链长，最高四个烯双键的直链或支化烃基团。术语″低级″表示具有最高6个碳原子的基团和化合物。因此，例如，术语″低级烷基″表示具有最高6个碳原子的饱和，直链或支化烃基团，如甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，异丁基，叔丁基和类似物。术语″芳基″表示包含一个或两个六元环的芳族碳环烃基团，如苯基或萘基，可被最高三个取代基如Br，Cl，F，CF3，NO2，低级烷基或低级链烯基取代。术语″杂芳基″表示包含一个或两个五-和/或六元环的芳族杂环基团，其中至少一个环包含最高三个选自O，S和N的杂原子而且所述环视需要被取代；这些视需要取代的杂芳基基团的代表性例子以上在定义R77时给出。
结构成分-A-CO-表示氨基酸结构单元，它与结构成分-B-CO-一起形成模板(a1)和(a2)。模板(a)-(p)构成具有在空间中定向的N-末端和C-末端使得这两个基团之间的距离可以是4.0-5.5A的结构单元。肽链通过相应的N-和C-末端连接到模板(a)-(p)的C-末端和N-末端上，这样模板和链形成一种环状结构，如在结构式I中描述的那种。在象这里模板的N-和C-末端之间的距离是4.0-5.5A的情况下，该模板将诱导对于在肽链Z中形成β-发夹构象所需的H-键网络。这样模板和肽链形成β-发夹模拟物。
β-发夹构象对于本发明β-发夹模拟物的蛋白酶抑制活性是高度相关的。模板(a)-(p)的β-发夹稳定化构象性能不仅对于蛋白酶抑制活性而且对于定义如上的合成工艺起着关键作用，因为该模板在线性保护肽前体的中部附近的引入明显增加环化反应产率。
结构单元A1-A69属于一类氨基酸，其中N-末端是形成环的一部分的仲胺。在基因编码的氨基酸中，仅脯氨酸落入该种类。结构单元A1-A69的构型是(D)，且它们与(L)-构型的结构单元-B-CO-组合在一起。模板(a1)的优选的组合是-DA1-CO-LB-CO-至DA69-CO-LB-CO-。因此，例如，DPro-LPro构成模板(a1)的原型。不太优选的，但可能的是其中模板(a2)是-LA1-CO-DB-CO-至LA69-CO-DB-CO-的组合。因此，例如，LPro-DPro构成模板(a2)的不太优选的原型。
可以理解，其中A具有(D)-构型的结构单元-A1-CO-至-A69-CO-在相对N-末端的α-位上携带基团R1。R1的优选值是H和低级烷基，最优选的R1值是H和甲基。本领域熟练技术人员可以理解，A1-A69显示为(D)-构型，如果R1是H和甲基，则对应于(R)-构型。根据Cahn，Ingold和Prelog-规则，该构型也可因为R1的其它值的优先而必须表示为(S)。
除了R1，结构单元-A1-CO-至-A69-CO-还可携带其它的称作R2-R17的取代基。该其它取代基可以是H，和如果它不是H，它优选为小至中等大小的脂族或芳族基团。R2-R17的优选值的例子是 -R2H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mOCONR33R78(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)mNR20CONR33R78(其中R20H或低级烷基；R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R3H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R4H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R5低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mOCONR33R78(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)mNR20CONR33R78(其中R20H或低级烷基；R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64烷基；链烯基；芳基；和芳基-低级烷基；杂芳基-低级烷基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R6H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R7低级烷基；低级链烯基；(CH2)qOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qSR56(其中R56H或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)qN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)rCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)rPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)rSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H或低级烷基)；(CH2)oOCONR33R78(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)oNR20CONR33R78(其中R20H或低级烷基；R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R9低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R10低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R11H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mOCONR33R78(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)mNR20CONR33R78(其中R20H；或低级烷基；R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)mNR20COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R12H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)rCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)rCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)rPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R13低级烷基；低级链烯基；(CH2)qOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)qN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)rCOO57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)rPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)rSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R14H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R15低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；尤其有利的是NR20CO低级烷基(R20＝H；或低级烷基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60；低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R16低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R17低级烷基；低级链烯基；(CH2)qOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)qN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)rCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)qCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)rPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)rSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
在结构单元A1-A69中，以下是优选的其中R2是H的A5，A8，A22，A25，其中R2是H的A38，A42，A47，和A50。最优选的是A8’和A8”型结构单元
其中R20是H或低级烷基；和R64是烷基；链烯基；芳基；芳基-低级烷基；或杂芳基-低级烷基；和R75是低级烷基；低级链烯基；或芳基-低级烷基；尤其是其中R75是烯丙基(A8’-1)和R64是正己基(A8’′-1)的那些。
结构单元A70属于开链α-取代的α-氨基酸种类，结构单元A71和A72属于相应的β-氨基酸类似物，结构单元A73-A104属于A70的环状类似物。这些氨基酸衍生物已经表现出以良好定义的回折或U-形构象限制小肽(C.M.Venkatachalam，生物聚合物，1968，6，1425-1434；W.Kabsch，C Sander，生物聚合物(Biopolymers)，1983，22，2577)。这些结构单元或模板理想地适用于在肽环稳定β-发夹构象(D.Obrecht，M.Altorfer，J.A.Robinson，″用于有效引导寻找的新型肽模拟结构和策略″，Adv.Med Chem.1999，Vol.4，1-68；P.Balaram，″肽设计和蛋白质工程中的非标准氨基酸″，Curr.Opin.Struct.Biol.1992，2，845-851；M.Crisma，G.Valle，C.Toniolo，S.Prasad，R.B.Rao，P.Balaram，″包含α，α-二取代的氨基酸的模式肽的晶体结构中的β-转角构象″，生物聚合物，1995，35，1-9；V.J.Hruby，F.Al-Obeidi，W.Kazmierski，Biochem.J.1990，268，249-262)。
已经发现，与L-构型的结构单元-B-CO-相结合的结构单元-A70-CO-至A104-CO-的对应异构体可有效地稳定和诱导β-发夹构象(D.Obrecht，M.Altorfer，J.A.Robinson，″用于有效引导寻找的新型肽模拟结构单元和策略″，Adv.Med Chem.1999，Vol.4，1-68；D.Obrecht，C.Spiegler，P.Sch_nholzer，K.Müller，H.Heimgartner，F.Stierli，Helv.Chim.Acta 1992，75，1666-1696；D.Obrecht，U.Bohdal，J.Daly，C.Lehmann，P.Sch_nholzer，K.Müller，四面体(Tetrahedron)，1995，51，10883-10900；D.Obrecht，C.Lehmann，C.Ruffieux，P.Sch_nholzer，K.Müller，Helv.Chim.Acta 1995，78，1567-1587；D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.Bur，C.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，563-580；D.Obrecht，H.Karajiannis，C.Lehmann，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，703-714)。
因此，就本发明的目的而言，模板(a1)也可由其中结构单元A70至A104是(D)-或(L)-构型的-A70-CO-至A104-CO-，结合(L)-构型的结构单元-B-CO-组成。
A70至A104中的R20的优选值是H或低级烷基，其中甲基是最优选的。结构单元A70至A104中的R18，R19和R21-R29的优选值如下 -R18低级烷基 -R19低级烷基；低级链烯基；(CH2)pOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)pN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)oC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R21H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R22低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R23H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；尤其有利的是NR20CO低级烷基(R20＝H；或低级烷基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R24低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；尤其有利的是NR20CO低级烷基(R20＝H；或低级烷基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R25H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R26H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-可替代地，R25和R26在一起时可以是-(CH2)2-6-；-(CH2)2O(CH2)2-；-(CH2)2S(CH2)2-；或-(CH2)2NR34(CH2)2-； -R27H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R28低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R29低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；尤其有利的是NR20CO低级烷基(R20＝H；或低级烷基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
对于模板(b)-(p)，如(b1)和(c1)，各种符号的优选值如下 -R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；(CH2)oOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；或低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R20H；或低级烷基 -R30H，甲基 -R31H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)pOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)pN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)rC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)；最优选的是CH2CONR58R59(R58H；或低级烷基；R59低级烷基；或低级链烯基)。
-R32H，甲基 -R33低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mOCONR33R78(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)mNR20CONR33R78(其中R20H或低级烷基；R33低级烷基；或低级链烯基；R78H；或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)。
-R34H；或低级烷基。
-R35H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)。
-R36低级烷基；低级链烯基；或芳基-低级烷基。
-R37H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)pOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)pN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R38H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)pOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)pN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R39H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)。
-R40低级烷基；低级链烯基；或芳基-低级烷基。
-R41H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)pOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)pN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R42H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)pOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)pN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基，或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R43H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mSR56(其中R56低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；(CH2)oPO(OR60)2(其中R60低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oSO2R62(其中R62低级烷基；或低级链烯基)；或(CH2)qC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R44低级烷基；低级链烯基；(CH2)pOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pSR56(其中R56 H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)pN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；或(CH2)oC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R45H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)sOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)sSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；或(CH2)sC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R46H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)sOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)sSR56(其中R56H；或低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)oN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；或(CH2)sC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R47H；或OR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)。
-R48H；或低级烷基。
-R49H；低级烷基；(CH2)oCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)oCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；或(CH2)sC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R50H；甲基 -R51H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；或(CH2)rC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R52H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；或(CH2)rC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R53H；低级烷基；低级链烯基；(CH2)mOR55(其中R55低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)mNR33R34(其中R33低级烷基；或低级链烯基；R34H；或低级烷基)；(CH2)mN(R20)COR64(其中R20H；或低级烷基；R64低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCOOR57(其中R57低级烷基；或低级链烯基)；(CH2)pCONR58R59(其中R58低级烷基；或低级链烯基；和R59H；低级烷基)；或(CH2)rC6H4R8(其中R8H；F；Cl；CF3；低级烷基；低级链烯基；或低级烷氧基)。
-R54低级烷基；低级链烯基；或芳基-低级烷基。
在结构单元A70至A104中，以下是优选的其中R22是H的A74，A75，A76，其中R22是H的A77，A78和A79。
在模板(a1)和(a2)内的结构单元-B-CO-表示L-氨基酸残基。B的优选值是-NR20CH(R71)-和其中R2是H的A5，A8，A22，A25，其中R2是H的A38，A42，A47，和A50的对映异构体。最优选的是 Ala L-丙氨酸 Arg L-精氨酸 Asn L-天冬酰胺 Cys L-半胱氨酸 Gln L-谷氨酰胺 Gly 甘氨酸 His L-组氨酸 Ile L-异亮氨酸 Leu L-亮氨酸 Lys L-赖氨酸 Met L-甲硫氨酸 Phe L-苯丙氨酸 Pro L-脯氨酸 Ser L-丝氨酸 Thr L-苏氨酸 Trp L-色氨酸 Tyr L-酪氨酸 Val L-缬氨酸 Cit L-瓜氨酸 Orn L-鸟氨酸 tBuAL-叔丁基丙氨酸 Sar 肌氨酸 t-BuG L-叔丁基甘氨酸 4AmPhe L-对-氨基苯基丙氨酸 3AmPhe L-间-氨基苯基丙氨酸 2AmPhe L-邻-氨基苯基丙氨酸 Phe(mC(NH2)＝NH)L-间-脒基苯基丙氨酸 Phe(pC(NH2)＝NH)L-对-脒基苯基丙氨酸 Phe(mNHC(NH2)＝NH) L-间-胍基苯基丙氨酸 Phe(pNHC(NH2)＝NH) L-对-胍基苯基丙氨酸 Phg L-苯基甘氨酸 Cha L-环己基丙氨酸 C4alL-3-环丁基丙氨酸 C5alL-3-环戊基丙氨酸 Nle L-正亮氨酸 2-Nal L-2-萘基丙氨酸 1-Nal L-1-萘基丙氨酸 4Cl-Phe L-4-氯苯基丙氨酸 3Cl-Phe L-3-氯苯基丙氨酸 2Cl-Phe L-2-氯苯基丙氨酸 3，4Cl2-Phe L-3，4-二氯苯基丙氨酸 4F-PheL-4-氟苯基丙氨酸 3F-PheL-3-氟苯基丙氨酸 2F-PheL-2-氟苯基丙氨酸 Tic L-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸 Thi L-β-2-噻吩基丙氨酸 Tza L-2-噻唑基丙氨酸 Mso L-甲硫氨酸亚砜 AcLys L-N-乙酰基赖氨酸 Dpr L-2，3-二氨基丙酸 A2Bu L-2，4-二氨基丁酸 Dbu (S)-2，3-二氨基丁酸 Abu γ-氨基丁酸(GABA) Aha ε-氨基己酸 Aib α-氨基异丁酸 Y(Bzl)L-O-苄基酪氨酸 Bip L-联苯丙氨酸(L-Biphenylalanine) S(Bzl)L-O-苄基丝氨酸 T(Bzl)L-O-苄基苏氨酸 hCha L-高环己基丙氨酸 hCys L-高半胱氨酸 hSer L-高丝氨酸 hArg L-高精氨酸 hPhe L-高苯基丙氨酸 Bpa L-4-苯甲酰基苯基丙氨酸 Pip L-哌可酸 OctG L-辛基甘氨酸 MePhe L-N-甲基苯基丙氨酸 MeNle L-N-甲基正亮氨酸 MeAla L-N-甲基丙氨酸 MeIle L-N-甲基异亮氨酸 MeVal L-N-甲基缬氨酸(L-N-Methvaline) MeLeu L-N-甲基亮氨酸 另外，B的最优选的值还包括(L)-构型的A8″’型基团
A8″’ 其中R20是H或低级烷基，R64是烷基；链烯基；芳基；芳基-低级烷基；或杂芳基-低级烷基；尤其是其中R64是正己基的那些(A8″’-1)。
本文所述的β-发夹模拟物的肽链Z一般用属于以下种类之一的氨基酸残基来定义 -种类C-NR20CH(R72)CO-；《憎水小至中等大小》 -种类D-NR20CH(R73)CO-；《憎水大芳族或杂芳族》 -种类E-NR20CH(R74)CO-；″极性-阳离子的″和″脲衍生的″ -种类F-NR20CH(R84)CO-；″极性-非带电的″和“阴离子的” -种类H-NR20-CH(CO-)-(CH2)4-7-CH(CO-)-NR20-； -NR20-CH(CO-)-(CH2)pSS(CH2)p-CH(CO-)-NR20-； -NR20-CH(CO-)-(-(CH2)pNR20CO(CH2)p-CH(CO-)-NR20-；和 -NR20-CH(CO-)-(-(CH2)pNR20CONR20(CH2)p-CH(CO-)-NR20-； ″链间键″ 另外，链Z中的氨基酸残基也可具有结构式-A-CO-，其中A定义如上。
种类C包括根据对取代基R72的一般定义具有小至中等大小憎水侧链基团的氨基酸残基。憎水残基是指在生理pH下不带电和被水溶液排斥的氨基酸侧链。另外，这些侧链一般不包含氢键给体基团，如(但不限于)伯和仲酰胺，伯和仲胺和其相应的质子化盐，硫醇，醇，膦酸酯(phosphonates)，磷酸酯(phosphates)，脲或硫代脲。但它们可包含氢键受体基团如醚，硫醚，酯，叔酰胺，烷基-或芳基膦酸酯和磷酸酯或叔胺。基因编码的小至中等大小的氨基酸包括丙氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，甲硫氨酸和缬氨酸。
种类D包括根据对取代基R73的一般定义具有芳族和杂芳族侧链基团的氨基酸残基。芳族氨基酸残基是指具有包含至少一个环的侧链的憎水氨基酸，所述环具有共轭π-电子体系(芳族基团)。另外它们可包含氢键给体基团如(但不限于)伯和仲酰胺，伯和仲胺和其相应的质子化盐，硫醇，醇，膦酸酯，磷酸酯，脲或硫代脲，和氢键受体基团如(但不限于)醚，硫醚，酯，叔酰胺，烷基-或芳基膦酸酯-和磷酸酯或叔胺。基因编码的芳族氨基酸包括苯基丙氨酸和酪氨酸。
杂芳族氨基酸残基是指根据对取代基R77的一般定义具有包含至少一个环的侧链的憎水氨基酸，所述环具有其中引入至少一个杂原子如(但不限于)O，S和N的共轭π-体系。另外，它们可包含氢键给体基团如(但不限于)伯和仲酰胺，伯和仲胺和其相应的质子化盐，硫醇，醇，膦酸酯，磷酸酯，脲或硫代脲，和氢键受体基团如(但不限于)醚，硫醚，酯，叔酰胺，烷基-或芳基膦酸酯-和磷酸酯或叔胺。基因编码的杂芳族氨基酸包括色氨酸和组氨酸。
种类E包括根据对取代基R74的一般定义包含具有极性-阳离子和脲衍生的残基的侧链的氨基酸。极性-阳离子是指在生理pH下被质子化的碱性侧链。基因编码的极性-阳离子氨基酸包括精氨酸，赖氨酸和组氨酸。瓜氨酸是包含脲衍生的残基的氨基酸的一个例子。
种类F包括根据对取代基R84的一般定义包含具有极性-非带电或阴离子残基的侧链的氨基酸。极性-非带电或阴离子残基是指在生理pH下分别不带电和是阴离子的(包括羧酸)，但不被水溶液排斥的亲水侧链。这些侧链典型地包含氢键给体基团如(但不限于)伯和仲酰胺，羧酸和酯，伯和仲胺，硫醇，醇，膦酸酯，磷酸酯，脲或硫代脲。这些基团可与水分子形成氢键网络。另外它们也可包含氢键受体基团如(但不限于)醚，硫醚，酯，叔酰胺，羧酸和羧酸盐，烷基-或芳基膦酸酯-和磷酸酯或叔胺。基因编码的极性-非带电和阴离子氨基酸包括天冬酰胺，半胱氨酸，谷氨酰胺，丝氨酸和苏氨酸以及天门冬氨酸和谷氨酸。
种类H包含可形成链间键的β-链区域的相对的位置上优选(L)-氨基酸的侧链。最常见的键是由位于β-链的相对的位置上的半胱氨酸和高半胱氨酸所形成的二硫键。各种方法已知用于形成二硫键，包括以下描述的那些J.P.Tam等人，合成(Synthesis)，1979，955-957；Stewart等人，固相肽合成，2d Ed.，Pierce Chemical Company，III.，1984；Ahmed等人，J.Biol.Chem.1975，250，8477-8482；和Pennington等人，肽(Peptides)，页数164-166，Giralt和Andreu，Eds.，ESCOMLeiden，荷兰，1990。最有利地，就本发明范围而言，二硫键可按照以下在相关实施例(程序3)中所述，使用乙酰氨基甲基(Acm)-保护基团(用于半胱氨酸)而制备。一种确立良好的链间键在于利用酰胺键形成分别连接鸟氨酸和赖氨酸与位于相对的β-链位置的谷氨酸和天门冬氨酸残基。用于鸟氨酸和赖氨酸的侧链氨基基团的优选的保护基团是烯丙基氧基羰基(Alloc)，而对于天门冬氨酸和谷氨酸优选的保护基团是烯丙基酯。最后，链间键也可通过将位于相对的β-链位置的赖氨酸和鸟氨酸的氨基基团与试剂如N，N-羰基咪唑键接形成环状脲而确立。
如上所述，链间键的位置如下 -如果n＝11P2和P10位在一起。
这些链间键已知能够稳定β-发夹构象并因此构成用于设计β-发夹模拟物的重要的结构成分。
链Z中的最优选的氨基酸残基是衍生自天然α-氨基酸的那些。以下列举其或其残基适用于本发明的氨基酸，其中简称对应于一般采用的惯例 其或其残基适用于本发明的其它α-氨基酸包括 种类C的尤其优选的残基是 种类D的特别优选的残基是 种类E的尤其优选的残基是 种类F的尤其优选的残基是 一般，本发明β-发夹模拟物内的肽链Z包含7或11个氨基酸残基(n＝7或11)。链Z中的每个氨基酸残基的P1-Pn位明确定义如下P1表示以其N-末端偶联到模板(b)-(p)或模板(a1)中的基团-B-CO-，或模板(A2)中的基团-A-CO-的C-末端上的链Z中的第一个氨基酸，而且Pn表示以其C-末端偶联到模板(b)-(p)或模板(a1)中的基团-A-CO-或模板(A2)中的基团-B-CO-的N-末端上的链Z中的最后氨基酸。P1-Pn位分别优选包含属于以上种类C-F一个或两个或三个种类，或是Pro的氨基酸残基，如下所示 -如果n是7，第1-7位的氨基酸残基优选为 ·P1种类C或种类F； ·P2种类E或种类D或种类C； ·P3种类F或种类C； ·P4种类C或种类F或种类D； ·P5种类F，或残基是Pro； ·P6种类C或种类E，或残基是Pro； ·P7种类C或种类F； -如果n是11，第1-11位的氨基酸残基优选为 ·P1种类E或种类F； ·P2种类C或种类F； ·P3种类C； ·P4种类E或种类D或种类C； ·P5种类F或种类C； ·P6种类C，或种类D； ·P7种类F，或残基是Pro； ·P8种类C或种类E，或残基是Pro； ·P9种类C或种类F； ·P10种类F或种类C； ·P11种类D或种类E；或 P2和P10，在一起可形成种类H的基团； 本发明尤其优选的β-肽模拟物包括描述于实施例1，4，7，8和15的那些。
本发明方法可有利地作为平行阵列合成而进行，得到具有以上通式I的模板固定的β-发夹肽模拟物的库。这些平行合成可以以高产率和规定纯度得到许多(通常24-192，典型地96个)具有通式I的化合物的阵列，尽量减少形成二聚体和聚合物副产物。对官能化固体载体(即固体载体加上连接体分子)，模板和环化反应位点的适当选择因此起着重要作用。
官能化固体载体适宜地衍生自使用，优选1-5％的，二乙烯基苯交联的聚苯乙烯；涂有聚乙二醇间隔物(TentagelR)的聚苯乙烯；和聚丙烯酰胺树脂(也参见Obrecht，D.；Villalgordo，J.-M，“小分子量化合物库的固体承载的组合和平行合成”，四面体有机化学丛书，Vol.17，Pergamon，Elsevier Science，1998)。
固体载体利用连接体，即在一端包含固定基团用于连接到固体载体上和在另一端包含可选择性断裂的官能团用于随后化学转化和断裂步骤的双官能间隔分子而官能化。就本发明目的而言，连接体必须设计成在不影响存在于各种氨基酸侧链中的任何官能团上的保护基团的温和酸性条件下最终释放羧基基团。适用于本发明的连接体与氨基酸的羧基基团形成酸不稳定的酯，通常是酸不稳定的苄基，二苯甲基和三苯甲基酯；这种连接体结构的例子包括2-甲氧基-4-羟基甲基苯氧基(SasrinR连接体)，4-(2，4-二甲氧基苯基-羟基甲基)-苯氧基(Rink连接体)，4-(4-羟基甲基-3-甲氧基苯氧基)丁酸(HMPB连接体)，三苯甲基和2-氯三苯甲基。
优选，载体衍生自用最优选1-5％二乙烯基苯交联的聚苯乙烯和利用2-氯三苯甲基连接体官能化。
如果作为平行阵列合成而进行，本发明方法可以有利地如下所述而进行，但对本领域熟练技术人员显然立即知道在需要合成具有以上式I的单个化合物时如何对该程序进行必要修改。
反应容器(通常24-192，典型96个)的数目等于通过平行方法所要合成的化合物的总数，向其中加载25-1000mg，优选100mg的适当的官能化固体载体，优选1-3％交联聚苯乙烯或tentagel树脂。
所要使用的溶剂必须能够溶胀树脂和包括，但不限于，二氯甲烷(DCM)，二甲基甲酰胺(DMF)，N-甲基吡咯烷酮(NMP)，二_烷，甲苯，四氢呋喃(THF)，乙醇(EtOH)，三氟乙醇(TFE)，异丙基醇和类似物。包含极性溶剂作为至少一种组分的溶剂混合物(如20％TFE/DCM，35％THF/NMP)对于确保树脂结合的肽链的高反应性和溶剂化是有益的(Fields，G.B.，Fields，C.G.，J.Am.Chem.Soc.1991，113，4202-4207)。
随着开发出在不影响保护侧链中官能团的酸不稳定基团的温和酸性条件下释放C-端羧酸基团的各种连接体，已在保护肽链段的合成方面取得显著进展。2-甲氧基-4-羟基苄基醇衍生的连接体(SasrinR连接体，Mergler等人，四面体通讯(Tetrahedron Lett.)，1988，29 4005-4008)可用稀三氟乙酸(0.5-1％TFA，在DCM中)断裂和在肽合成过程中对Fmoc去保护条件稳定，其中Boc/tBu-基附加保护基团与该保护方案相适应。适用于本发明方法的其它连接体包括超酸不稳定的4-(2，4-二甲氧基苯基-羟基甲基)-苯氧基连接体(Rink连接体，Rink，H.四面体通讯，1987，28，3787-3790)，其中肽的去除需要10％乙酸(在DCM中)或0.2％三氟乙酸(在DCM中)；4-(4-羟基甲基-3-甲氧基苯氧基)丁酸衍生的连接体(HMPB-连接体，Fl_rsheimer&Riniker，肽(Peptides)，1991，1990 131)。它也用1％TFA/DCM断裂以得到包含所有的酸不稳定的侧链保护基团的肽链段；和，另外，2-氯三苯甲基氯连接体(Barlos等人，四面体通讯，1989，30，3943-3946)，它使得能够在30分钟使用冰乙酸/三氟乙醇/DCM(1∶2∶7)的混合物进行肽脱离。
分别适用于氨基酸和适用于其残基的保护基团是，例如， -对于氨基基团(如也存在于赖氨酸的侧链中) Cbz苄基氧基羰基 Boc叔丁基氧基羰基 Fmoc 9-芴基甲氧基羰基 Alloc 烯丙基氧基羰基 Teoc 三甲基甲硅烷基乙氧基羰基 Tcc三氯乙氧基羰基 Npso-硝基苯基磺酰基； Trt三苯基甲基或三苯甲基 -对于羧基基团(如也存在于天门冬氨酸和谷氨酸的侧链中)，其中与醇组分反应而转化成酯 tBu叔丁基 Bn 苄基 Me 甲基 Ph 苯基 Pac苯甲酰甲基 烯丙基 Tse三甲基甲硅烷基乙基 Tce三氯乙基； -对于胍基基团(如存在于精氨酸的侧链中) Pmc2，2，5，7，8-五甲基色满-6-磺酰基 Ts 甲苯磺酰基(即p-甲苯磺酰基) Cbz苄基氧基羰基 Pbf五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基 -对于羟基基团(如存在于苏氨酸和丝氨酸的侧链中) tBu叔丁基 Bn 苄基 Trt三苯甲基 -和对于巯基基团(如存在于半胱氨酸的侧链中) Acm乙酰氨基甲基 tBu叔丁基 Bn 苄基 Trt三苯甲基 Mtr4-甲氧基三苯甲基。
9-芴基甲氧基羰基-(Fmoc)-保护的氨基酸衍生物优选用作结构单元用于构建具有结构式I的模板固定β-发夹环模拟物。为了去保护，即Fmoc基团断裂，可以使用2 0％哌啶(在DMF中)或2％DBU/2％哌啶(在DMF中)。
反应物(即氨基酸衍生物)的量通常是1-20当量，基于起始称重至反应管中的官能化固体载体的毫当量/克(meq/g)加载量(典型地0.1-2.85meq/g，对于聚苯乙烯树脂)。如果需要驱使反应在合理时间内完成，可以使用其它当量的反应物。反应管以及夹具块和岐管被重新插入储器块中并使该装置固定在一起。开始使气流流过岐管以提供受控环境，例如，氮，氩，空气和类似环境。气流也可在流过岐管之前被加热或冷却。反应井的加热或冷却通过加热反应块或外部用异丙醇/干冰和类似物冷却以达到所需合成反应而实现。搅动通过振荡或磁力搅拌(在反应管内)而实现。优选的工作站(但不限于)是Labsource′sCombi-chemstation和MultiSyn Tech′s-Syro合成仪。
酰胺键形成需要活化用于酰基化步骤的α-羧基基团。如果该活化利用常用的碳二亚胺如二环己基碳二亚胺(DCC，Sheehan & Hess，J.Am.Chem.Soc.1955，77，1067-1068)或二异丙基碳二亚胺(DIC，Sarantakis等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.1976，73，336-342)而进行，则所得二环己基脲不溶于和二异丙基脲可溶于一般使用的溶剂。在碳二亚胺方法的一个变型中，包括作为偶联混合物的添加剂的1-羟基苯并三唑(HOBt，K_nig & Geiger，Chem.Ber 1970，103，788-798)。HOBt防止脱水，抑制活化氨基酸的外消旋和用作催化剂以促进缓慢的偶联反应。某些磷_试剂已被用作直接偶联试剂，如苯并三唑-1-基-氧基-三-(二甲基氨基)-磷_六氟磷酸盐(BOP)(Castro等人，四面体通讯，1975，14，1219-1222；合成，1976，751-752)，或苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷基-磷_六氟磷酸盐(Py-BOP，Coste等人，四面体通讯，1990，31，205-208)，或2-(1H-苯并三唑-1-基-)1，1，3，3-四甲基脲_四氟硼酸盐(TBTU)，或六氟磷酸盐(HBTU，Knorr等人，四面体通讯，1989，30，1927-1930)；这些磷_试剂也适用于与保护的氨基酸衍生物现场形成HOBt酯。最近，二苯氧基磷酰基叠氮化物(DPPA)或O-(7-氮杂-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲_四氟硼酸盐(TATU)或O-(7-氮杂-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲_六氟磷酸盐(HATU)/7-氮杂-1-羟基苯并三唑(HOAt，Carpino等人，四面体通讯，1994，35，2279-2281)也被用作偶联试剂。
由于近定量偶联反应是必需的，所以期望掌握反应完成的实验证据。茚三酮试验(Kaiser等人，分析生物化学，1970，34，595)可在每个偶联步骤之后容易和快速地进行，其中对树脂结合肽的等分试样的阳性比色响应定性地表示伯胺的存在。Fmoc化学能够在Fmoc发色团用碱释放时对其进行分光光度检测(Meienhofer等人，Int.J.Peptide ProteinRes.1979，13，35-42)。
在个反应管内的树脂结合中间体通过两种以下方法之一通过重复暴露于纯溶剂而被洗掉过量残留试剂，溶剂，和副产物 1)反应井用溶剂(优选5ml)填充，将反应管以及夹具块和岐管浸入并搅拌5-300分钟，优选15分钟，然后通过重力而流干，随后通过岐管入口(在关闭出口的同时)施加气压以排出溶剂； 2)岐管从夹具块中去除，将溶剂的等分试样(优选5ml)通过反应管的顶部分配并利用重力通过过滤器排放至接受容器如试验管或小瓶中。
以上两种洗涤程序重复最高约50次(优选约10次)，其中通过例如TLC，GC，或检查洗涤物之类的方法检测试剂，溶剂，和副产物去除的效率。
对于每个接续转化，重复上述使树脂结合的化合物与试剂在反应井内反应然后除去过量试剂、副产物和溶剂的程序，直至制备出最终树脂结合的完全保护的线性肽。
在该完全保护的线性肽从固体载体上脱离之前，如果需要，可选择性地去保护一个或多个存在于分子中的保护官能团和适当地取代如此释放出的反应性基团。为此，所述官能团必须起始被保护基团所保护，所述保护基团可选择性地被去除而不会影响所存在的其余保护基团。Alloc(烯丙基氧基羰基)是氨基的这种保护基团的一个例子，它可例如利用Pd0和苯基硅烷在CH2Cl2中被选择性地去除而不会影响存在于分子中的其余保护基团，如Fmoc。如此释放的反应性基团可随后用一种适用于引入所需取代基的试剂处理。因此，例如，氨基基团可利用对应于所要引入的酰基取代基的酰基化剂而被酰基化。
完全保护的线性肽从固体载体上脱离通过将反应管，以及夹具块和岐管浸入在包含断裂试剂的溶液(优选3-5ml)的反应井中而实现。气体流动，温度控制，搅拌，和反应检测如上所述进行并根据需要进行脱离反应。反应管，以及夹具块和岐管从储器块中拆开并升高到溶液液位之上但低于反应井的上唇，然后通过岐管入口(在关闭出口的同时)施加气压以有效地将最终产物溶液排出到储器井中。留在反应管中的树脂随后如上用3-5ml适当的溶剂洗涤2-5次以提取(洗出)尽可能多的脱离产物。将如此得到的产物溶液合并，注意避免交叉混合。各个溶液/提取物随后根据需要进行处理以分离出最终化合物。典型的处理包括，但不限于此，蒸发，浓缩，液体/液体萃取，酸化，碱化，中和或在溶液中的其它的反应。
蒸发包含已从固体载体上切除并用碱中和的完全保护的线性肽衍生物的溶液。环化反应随后在溶液中使用溶剂如DCM，DMF，二_烷，THF和类似物来进行。较早提及的各种不同的偶联试剂可用于环化反应。环化反应持续时间是约6-48小时，优选约24小时。反应进行之后是如RP-HPLC(反相高效液体色谱)。随后溶剂通过蒸发而被去除，将完全保护的环状肽衍生物溶解在与水不混溶的溶剂，如DCM中，并将溶液用水或水混溶性溶剂的混合物萃取以去除所有过量的偶联试剂。
在将保护基团从完全保护的环状肽中去除之前，如果需要，可在β-链区域的相对的位置的适当氨基酸残基的侧链之间的形成链间键。链间键和其形成以上已在解释种类H基团时讨论，例如，可以是通过在β-链的相对位置上半胱氨酸和高半胱氨酸形成的二硫键，或通过酰胺键形成而分别连接位于相对的β-链位置上的鸟氨酸和赖氨酸的谷氨酸和天门冬氨酸残基。这些链间键的形成可通过本领域熟知的方法而进行。
最后，种类I的完全保护的肽衍生物用9 5％TFA，2.5％H2O，2.5％TIS或另一清除剂组合进行处理以进行保护基团的断裂。断裂反应时间通常是30分钟-12小时，优选约2小时。然后大多数TFA被蒸发并将产物用乙醚/己烷(1∶1)或适用于此的其它溶剂沉淀。在小心去除溶剂之后，可分离出作为最终产物得到的环状肽衍生物。根据其纯度，该肽衍生物可直接用于生物分析，或它必须例如通过制备HPLC而进一步纯化。
如上所述，根据需要，可随后将如此得到的完全去保护产物转化成药物可接受盐或将如此得到的药物可接受的或不可接受的盐转化成结构式I的相应的游离化合物或转化成不同的药物可接受盐。任何这些操作可通过本领域熟知的方法进行。
现详细讨论用于本发明方法的起始原料，用于此的预起始原料，以及这些起始和预起始原料的制备。
种类A的结构单元可根据下述的文献方法而合成。相应的氨基酸已作为未保护或作为Boc-或Fmoc-保护外消旋物，(D)-或(L)-异构体而描述。可以理解，未保护氨基酸结构单元可通过标准保护基团处理而容易转化成本发明所需的相应的Fmoc-保护氨基酸结构单元。描述用于合成α-氨基酸的一般方法的概述包括R.Duthaler，四面体(报道)1994，349，1540-1650；R.M.Williams，“光学活性α-氨基酸的合成”，四面体有机化学系列(Tetrahedron Organic Chemistry Series)，Vol.7，J.E.Baldwin，P.D.Magnus(Eds.)，Pergamon Press.，Oxford1989。一种特别有用的合成与本发明相关的光学活性α-氨基酸的方法包括使用水解酶的动力学拆解(M.A.Verhovskaya，I.A.Yamskov，Russian Chem.Rev.1991，60，1163-1179；R.M.Williams，“光学活性α-氨基酸的合成”，四面体有机化学系列，Vol.7，J.E.Baldwin，P.D.Magnus(Eds.)，Pergamon Press.，Oxford 1989，第7章，p.257-279)。水解酶包括酰胺和腈通过氨肽酶或腈水解酶而水解，通过酰基转移酶断裂N-酰基基团，和通过脂肪酶或蛋白酶进行酯水解。完全证实的是，某些酶特异地导致纯(L)-对应异构体，而其它的酶则得到相应的(D)-对应异构体(如R.Duthaler，四面体报道1994，349，1540-1650；R.M.Williams，“光学活性α-氨基酸的合成”，四面体有机化学系列，Vol.7，J.E.Baldwin，P.D.Magnu s(Eds.)，PergamonPress.，Oxford 1989)。
A1参见D.BeN-Ishai，四面体，1977，33，881-883；K.Sato，A.P.Kozikowski，四面体通讯，1989，30，407 3-4076；J.E.Baldwin，C.N.Farthing，A.T.Russell，C.J.Schofield，A.C.Spirey，四面体通讯，1996，37，3761-3767；J.E.Baldwin，R.M.Adlington，N.G.Robinson，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1987，153-157；P.Wipf，Y.Uto，四面体通讯，1999，40，5165-5170；J.E.Baldwin，R.M.Adlington，A.O’Neil，A.C.Spirey，J.B.Sweeney，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1989，1852-1854(用于R1＝H，R2＝H)；T.Hiyama，Bull.Chem.Soc.Jpn.1974，47，2909-2910；T.Wakamiya，K.Shimbo，T.Shiba，K.Nakajima，M.Neya，K.Okawa，Bull.Chem.Soc.Jpn.1982，55，3878-3881；I.Shima，N.Shimazaki，K.Imai，K.Hemmi，M.Hashimoto，Chem.Pharm.Bull.1990，38，564-566；H.Han，J.Yoon，K.D.Janda，J.Org.Chem.1998，63，2045-2048(R1＝H，R2＝Me)；J.Legters，G.H.Willems，L.Thijs，B.Zwannenburg，Recl.Trav.Chim.Pays-Bas1992，111，59-68(R1＝H，R2＝己基)；J.Legters，L.Thijs，B.Zwannenburg，Recl.Trav.Chim.Pays-Bas 1992，111，16-21；G.A.Molander，P.J.Stengel，J.Org.Chem.1995，21，6660-6661(R1＝H，R2＝Ph)；I.Funaki，L.Thijs，B.Zwannenburg，四面体，1996，52，9909-9924(R1＝H，R2＝Bn)；A.S.Pepito，D.C.Dittmer，J.Org.Chem.1997，62，7920-7925；(R1＝H，R2＝CH2OH)；M.Egli，A.S.Dreiding，Helv.Chim.Acta 1986，69，1442-1460(R2＝CH(OH)CH2OH)；M.Carduccu，S.Fioravanti，M.A.Loreto，L.Pellacani，P.A.Tardella，四面体通讯，1996，37，3777-3778；F.J.Lakner，L.P.Hager，四面体Asymmetry 1997，21，3547-3550(R1＝Me，R2＝H，Me)；G.A.Molander，P.J.Stengel，四面体，1997，26，8887-8912；M.A.Loreto，F.Pompei，P.A.Tardella，D.Tofani，四面体，1997，53，15853-15858(R1＝Me，R2＝CH2SiMe3)；H.Shao，J.K.Rueter，M.Goodman，J.Org.Chem.1998，63，5240-5244(R1＝Me，R2＝Me)。
A2参见A.Rao，M.K.Gurj_r，V.Vivarr，TetrahedronAsymmetry 1992，3，859-862；R.L.Johnson，G.Rayakumar，K.-L.Yu，R.K.Misra，J.Med.Chem.1986，29，2104-2107(R1＝H，R2＝H)；J.E.Baldwin，R.M.Adlington，R.H.Jones，C.J.Schofield，C.Zarcostas，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1985，194-196；J.E.Baldwin，R.M.Adlington，R.H.Jones，C.J.Schofield，C.Zarcostas，四面体，1986，42，4879-4888(R1＝H，R2＝CH2OH，CH2CHO，CH2CH2COOH，CH2CH2OH)；A.P.Kozikowski，W.Tueckmantel，I.J.Reynolds，J.T.Wroblewski，J.Med.Chem.1990，33，1561-1571；A.P.Kozikowski，W.Tueckmantel，Y.Liao，H.Manev，S.IkonomovicJ.T.Wroblenski，J.Med.Chem.1993，36，2706-2708(R1＝H，R2＝CH2OH，CHCONH2，CONHCH2COOH，COOtBu)；D.Seebach，T.Vettiger，H.-M.Müller，D.Plattner，W.Petter，Liebigs Ann.Chem.1990，687-695(R1＝芳基CH(OH)，R2＝H)；D.Seebach，E.Dziadulewicz，L.Behrendt，S.Cantoreggi，R.Fitzi，Liebigs Ann.Chem.1989，1215-1232(R1＝Me，Et，R2＝H)。
A3参见A.P.Kozikowski，Y.Liao，W.Tueckmantel，S.Wang，S.Pshsenichkin，Bioorg.Med.Chem.Lett.1996，6，2559-2564(R1＝H；R2＝CHCHO，CH2OH，CH2CH2OH，CH2COOH，COOH)；Isono，J.Am.Chem.Soc，1969，91，7490(R1＝H；R2＝Et)；P.J.Blythin，M.J.Green，M.J.Mary，H.Shue，J.Org.Chem.1994，59，6098-6100；S.Hanessian，N.Bernstein，R.-Y.Yang，R.Maquire，Bioorg.Chem.Lett.1994，9，1437-1442(R1＝H；R2＝Ph)。
A4参见G.Emmer，四面体，1992，48，7165-7172；M.P.Meyer，P.L.Feldman，H.Rapoport，J.Org.Chem.1985，50，5223-5230(R1＝H；R2＝H)；A.J.Bose，M.S.Manhas，J.E.Vincent，I.F.Fernandez，J.Org.Chem.1982，47，4075-4081(R1＝H；R2＝NHCOCH2OPh)；D.L.Boger，J.B.Meyers，J.Or g.Chem.1991，56，5385-5390(R1＝H；R2＝NHCOCH2Ph)；K.-D.Kampe，四面体通讯，1969，117-120(R1＝CH2OH；R2＝Ph)；M.D.Andrews，M.G.Maloney，K.L.Owen，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1996，227-228(R1＝CH2OH；R2＝H)。
A5参见C.Bi sang，C.Weber，J.Inglis，C.A.Schiffer，W.F.van Gunsteren，J.A.Robinson J.Am.Chem.Soc.1995，117，7904(R1＝CH3；R2＝H)；S.Takano，M.Morija，Y.Iwabuki，K.Ogasawara，四面体通讯，1989，30，3805-3806(R1＝H；R2＝COOH)；M.D.Bachi，R.Breiman，H.Meshulam，J.Org.Chem.1983，48，1439-1444(R1＝H；R2＝CH(Et)COOH)；D.S.Kemp，T.P.Curran，四面体通讯，1988，29，4931-4934；D.S.Kemp，T.P.Curran，W.M.Davies，J.Org.Chem.1991，56，6672-6682(R1＝H；R2＝CH2OH)；F.Manfre，J.-M.Kern，J.-F.Biellmann，J.Org.Chem.1992，57，2060-2065(R1＝H；R2＝H，CH＝CH2，CCH)；B.W.Bycroft，S.R.Chabra，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1989，423-425(R1＝H；R2＝CH2COOtBu；Y.Xu，J.Choi，M.I.Calaza，S.Turner，H.Rapoport，J.Org.Chem.1999，64，4069-4078(R1＝H；R2＝3-吡啶基)；E.M.Khalil，W.J.Ojala，A.Pradham，V.D.Nair，W.B.Gleason，J.Med.Chem.1999，42，628-637；E.M.Khalil，N.L.Subasinghe，R.L.Johnson，四面体通讯，1996，37，3441-3444(R1＝烯丙基；R2＝H)；A.DeNicola，J.-L.Luche，四面体通讯，1992，33，6461-6464；S.Thaisrivongs，D.T.Pals，J.A.Lawson，S.Turner，D.W.Harris，J.Med.Chem.1987，30，536-541；E.M.Khalil，N.L.Subasinghe，R.L.Johnson，四面体通讯，1996，37，3441-3444；A.Lewis，J.Wilkie，T.J.Rutherford，D.Gani，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1998，3777-3794(R1＝Me；R2＝H)；A.Lewis，J.Wilkie，T.J.Rutherford，D.Gani，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1998，3777-3794(R1＝CH2COOMe；R2＝H)；N.L.Subasinghe，E.M.Khalil，R.L.Johnson，四面体通讯，1997，38，1317-132 0(R1＝CH2CHO；R2＝H)；D.J.Witter，S.J.Famiglietti，J.C.Gambier，A.L.Castelhano，Bioorg.Med.Chem.Lett.1998，8，3137-3142；E.H.Khalil，W.H.Ojada，A.Pradham，V.D.Nair，W.B.Gleason，J.Med.Chem.1999，42，628-6 37(R1＝CH2CH2CHO；R2＝H)。
A6参见DeNardo，Farmaco Ed.Sci.1977，32，522-529(R1＝H；R3＝H)；P.J.T.Floris，N.Terhuis，H.Hiemstra，N.W.Speckamp，四面体，1993，49，8605-8628；S.Kanemasa，N.Tomoshige，O.Tsuge，Bull.Chem.Soc.Jpn.1989，62，3944-3949(R1＝H；R3＝H)；Sucrow，Chem.Ber.1979，112，1719。
A7参见Fichter，J.Prak t.Chem.1906，74，310(R1＝Me；R4＝Ph)。
A8参见L.Lapantsanis，G.Milias，K.Froussios，M.Kolovos，合成，1983，641-673；H.Nedev，H.Naharisoa，四面体通讯，1993，34，4201-4204；D.Y.Jackson，C.Quan，D.R.Artis，T.Rawson，B.Blackburn，J.Med.Chem.1997，40，3359-3368；D.Konopinska，H.Bartosz-Bechowski，G.Rosinski，W.Sobotka，Bull.Pol.Acad.Sci.Chem.1993，41，27-40；J.Hondrelis，G.Lone rgan，S.Voliotis，J.Matsukas，四面体，1990，46，565-576；T.Nakamura，H.Matsuyama，H.Kanigata，M.Iyoda，J.Org.Chem.1992，57，3783-3789；C.E.O′Connell，K.Ackermann，C.A.Rowell，A.Garcia，M.D.Lewis，C.E.Schwartz，Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，9，2095-2100；G.Lowe，T.Vilaivan，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1997，547-554；B.Bellier，I.McCourt-Tranchepain，B.Ducos，S.Danascimenta，H.Mundal，J.Med.Chem.1997，40，3947-3956；M.Peterson，R.VinceJ. Med. Chem. 1991，34，2787-2797；E. M. Smith，G. F. Swiss，B.R.Neus tadt，E.H.Gold，J.A.Sommer，J.Med.Chem.1988，31，875-885；E.Rubini，C.Gilon，Z.Selinger，M.Chorev，四面体，1986，42，6039-6045(R1＝H；R5＝OH)；C.R.Noe，M.Knollmueller，H.Voellenkle，M.Noe-Letschnig，A.Weigand，J.Mühl，Pharmazie，1996，51，800-804(R1＝CH3；R5＝OH)；J.Kitchin，R.C.Berthell，N.Cammack，S.Dolan，D.N.Evans，J.Med.Chem.1994，37，3703-3716；D.Y.Jackson，C.Quan，D.R.Artis，T.Rawson，B.Blackburn，J.Med.Chem.1997，40，3359-3368(R1＝H；R5＝OBn)；J.E.Baldwin，A.R.Field，C.C.Lawrence，K.D.Merritt，C.J.Schofield，四面体通讯，1993，34，7489-7492；K.Hashimoto，Y.Shima，H.Shirahama，杂环(Heterocycles)，1996，42，489-492(R1＝H；R5＝OTs)；T.R.Webb，C.Eigenbrot，J.Org.Chem.1991，56，3009-3016；D.C.Cafferty，C.A.Slate，B.M.Nakhle，H.D.Graham，T.L.Anstell，四面体，1995，51，9859-9872(R1＝H；R5＝NH2)；T.R.Webb，C.Eigenbrot，J.Org.Chem.1991，56，3009-3016(R1＝H；R5＝CH2NH2)；J.K.Thottathil，J.L.Moniot，四面体通讯，1986，27，151-154(R1＝H；R5＝Ph)；K.Plucinska，T.Kataoka，M.Yodo，W.Cody，J.Med.Chem.1993，36，1902-1913(R1＝H；R5＝SBn)；J.Krapcho，C.Turk，D.W.Cushman，J.R.Powell，J.Med.Chem.1988，31，1148-1160(R1＝H；R5＝SPh)；A.J.Verbiscar，B.Witkop，J.Org.Chem.1970，35，1924-1927(R1＝H；R5＝SCH2(4-OMe)C6H4)；S.I.Klein，J.M.Denner，B.F.Molino，C.Gardner，R.D′Alisa，Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996，6，2225-2230(R1＝H；R5＝0(CH2)3Ph)；R.Zhang，F.Brownewell，J. S.Madalengoita，四面体通讯，1999，40，2707-2710(R1＝H；R5＝CH2COOBn)。
A9参见Blake，J.Am.Chem.Soc.1964，86，5293-5297；J.Cooper，R.T.Gallagher，D.T.Knight，J.Chem.Soc.Chem.Perkin Trans.1，1993，1313-1318；D.W.Knight，A.W.Sibley，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1997，2179，2188(R1＝H；R6＝H)；Blake，J.Am.Chem.Soc.1964，86，5293-5297；Y.Yamada，T.Ishii，M.Kimura，K.Hosaka，四面体通讯，1981，1353-1354(R1＝H；R6＝OH)；Y.Umio，Yakugaku Zasshi，1958，78，727(R1＝H；R6＝iPr)；Miyamoto，YakugakuZasshi，1957，77，580-584；Tanaka，Proc.Jpn.Acad.1957，33，47-50(R1＝H；R6＝CH(CH3)CH2N(CH3)2)；L.E.Overman，B.N.Rodgers，J.E. Tellew，W. C. Trenkle，J. Am. Chem. Soc. 1997，119，7159-7160(R1＝H；R6＝烯丙基)；Ohki，Chem.Pharm.Bull.1976，24，1362-1369(R1＝CH3；R6＝H)。
A10参见J.Mulzer，A.Meier，J.Buschmann，P.Luger，合成，1996，123-132(R1＝H；R7＝CH＝CH2)；J.Cooper，P.T.Gallagher，D.W.Knight，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1988，509-510；E.G_tschi，C.Jenny，P.Reindl，F.Ricklin，Helv.Chim.Acta 1996，79，2219-2234(R1＝H；R7＝OH)；N.A.Sasaki，R.Pauli，C.Fontaine，A.Chiaroni，C.Riche，P.Potier，四面体通讯，1994，35，241-244(R1＝H；R7＝COOH)；R.Cotton，A.N.C.Johnstone，M.North，四面体，1995，51，8525-8544(R1＝H；R7＝COOMe)；J. S.Sabol，G. A.Flynn，D.Friedrich，E.W.Huber，四面体通讯，1997，38，3687-3690(R1＝H；R7＝CONH2)；P.P.Waid，G.A.Flynn，E.W.Huber，J.S.Sabol，四面体通讯，1996，37，4091-4094(R1＝H；R7＝(4-Bno)C6H4)；N.A.Sasaki，R.Pauli，P.Potier，四面体通讯，1994，35，237-240(R1＝H；R7＝SO2Ph)；R.J.Heffner，J. Jiang，M.Jouillié，J.Am.Chem.Soc.1992，114，10181-10189；U.Schmidt，H.Griesser，A.Lieberknecht，J.H_usler，Angew.Chem.1981，93，272-273(R1＝H；R7＝O芳基)；H.Mosberg，A.L.Lomize，C.Wang，H.Kroona，D.L.Heyl，J.Med.Chem.1994，37，4371-4383(R1＝H；R7＝4-OHC6H4)；S.A.Kolodziej，G.V.Nikiforovich，R.Sceean，M.-F.Lignon，J.Martinez，G.R.Marshall，J.Med.Chem.1995，38，137-149(R1＝H；R7＝SCH2(4-Me)C6H4)。
A11参见Kuhn，Osswald，Chem. Ber. 1956，89，1423-1434；Patchett，Witkop，J.Am.Chem.Soc.1957，79，185-189；Benz，Helv.Chim. Acta 1974，57，2459-2475；P. Wessig，Synlett，1999，9，1465-1467；E.M.Smit，G.F.Swiss，B.R.Neustadt，E.H.Gold，J.A.Sommer，J.Med.Chem.1988，31，875-885；J.Krapcho，C.Turk，D.W.Cushman，J.R.Powell，J.M.DeForrest，J.Med.Chem.1988，31，1148(R1＝H；R6＝H)；D.BenIshai，S.Hirsh，四面体，1988，44，5441-5450(R1＝H；R6＝CH3)；M.W.Holladay，C.W.Lin，C.S.Garvey，D.G.Witte，J.Med.Chem.1991，34，455-457(R1＝H；R6＝烯丙基)；P.Barralough，P.Hudhomme，C.A.Spray，D.W.Young，四面体，1995，51，4195-4212(R1＝H；R6＝Et)；J.E.Baldwin，M.Rudolf，四面体通讯，1994，35，6163-6166；J.E.Baldwi n，S.J.Bamford，A.M.Fryer，M. Rudolf，M. E. Wood，四面体，1997，53，5233-5254(R1＝H；R6＝CH2COOtBu)；P. Gill，W. D. Lubell，J. Org. Chem. 1995，60，2658-2659(R1＝H；R6＝CH3；Bn；烯丙基；CH2COOMe)；M.J.Blanco，F.J.Sardina，J.Org.Chem.1998，63，3411-3466(R1＝H；R6＝OCH2OMe)。
A12参见Ahmed，Cheeseman，四面体，1977，33，2255-2257；J.S.New，J.P.Yevich，J.Heterocycl.Chem.1984，21，1355-1360；R.Kikumoto，Y.Tamao，K.Ohkubo，T.Tezuka，S.Tonomura，J.Med.Chem.1980，23，1293-1299；C.J.Blankley，J.S.Kaltenbronn，D.E.DeJohn，A.Werner，L.R.Bennett，J.Med.Chem.1987，30，992-998；S.Klutcho，C.J.Blankley，R.W.Fleming，J.M.Hinkley，R.E.Werner，J.Med.Chem.1986，29，1953-1961(R1＝H；R8＝H)；L.J.Beeley，C.J.M.Rockwell，四面体通讯，1990，31，417-420(R1＝COOEt；R8＝H)。
A13参见G.Flouret，W.Brieher，T.Majewski，K.Mahan，J.Med.Chem.1991，43，2089-2094；G.Galiendo，P.Grieco，E.Perissuti，V.Santagada，Farmaco，1996，51，197-202；D.F.McComsey，M.J.Hawkins，P.Andrade-Gordon，M.F.Addo，B.E.Maryanoff，Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，9，1423-1428；G.B.Jones，S.B.Heaton，B. J. Chapman，M. Guzel，TetrahedronAsymmetry 1997，8，3625-3636；M.Asami，H.Watanabe，K.Honda，S.Inoue，TetrahedronAsymmetry 1998，9，4165-4174；K.Gross，Y.M.Yun，P.Beak，J.Org.Chem.1997，62，7679-7689(R1＝H；R6＝H；R8＝H)；K.Gross，Y.M.Yun，P.Beak，J.Org.Chem.1997，62，7679-7689(R1＝H；R6＝H；R8＝6-Cl)；Ch.Noe，M.Knollmueller，C.Schoedl，M.L.Berger，Sci.Pharm.1996，64，577-590；E.Reiman，W.Erdle，H.Unger，Pharmazie，1994，54，418-421(R1＝H；R6＝CH2COOH；R8＝H)；V.Collot，M.Schmitt，A.K.Marwah，B.Norberg，J.-J.Bourgignon，四面体通讯，1997，38，8033-8036(R1＝H；R6＝Ph；R8＝H)；L.V.Dunkerton，H.Chen，B.P.McKillican，四面体通讯，1988，29，2539-2542(R1＝C(CH3)2CH＝CH2；R6＝H；R8＝H)；E.J.Corey，J.Am.Chem.Soc.1970，92，2476-2488；Neunhoeffer，Lehmann，Chem.Ber.1961，94，2960-2963(R1＝CH3；R6＝H；R8＝H)。
A14种类A14的氨基酸可根据方案1制成。
方案1
iNaH，BrCH(R1)COOMe，DMF；iiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；iii多磷酸(PPA)；ivNaH，ClCOOMe，THF；v酶拆分(如脂肪酶)；viNaOH，MeOH，H2O，加热；viiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A15参见D.S.Perlow，J.M.Erb，N.P.Gould，R.D.Tung，R.M.Freidinger，J.Org.Chem. 1992，57，4394-4400；D.Y.Jackson，C.Quan，D.R.Artis，T.Rawson，B.Blackburn，J.Med.Chem.1997，40，3359-3368(R1＝H；R2＝H)；H.H.Wasserman，K.Rodrigues，K.Kucharczyk，四面体通讯，1989，30，6077-6080(R1＝H；R2＝COOH)。
A16参见Beyerman，Boekee，Recl.Trav.Chim.Pays-Bas，1959，78，648-653；M.E.Freed，A.R.Day，J.Org.Chem.1960，25，2105-2107；D.R.Adams，P.D.Bailey，I.D.Collier，J.D.Heferman，S.Slokes，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1996，349-350；J.E.Baldwin，R.M.Adlington，C.R.A.Godfrey，D.W.Collins，J.D.Vaughan，J.Chem. Soc.Chem.Commun.1993，1434-1435；Y.Matsumura，Y.Takeshima，H.Ohita，Bull.Chem.Soc.Jpn.1994，67，304-306(R1＝H；R6＝H)；C. Herdeis，W.Engel，Arch.Pharm.1991，324，670(R1＝COOMe；R6＝CH3)。
A17，A18参见C.R.Davies，J.S.Davies，J.Chem.Soc.PerkinTrans 1，1976，2390-2394；K.Bevan，J.Chem.Soc.C，1971，514-522；K.Umezawa，K.Nakazawa，Y.Ikeda，H.Naganawa，S.Kondo，J.Org.Chem.1999，64，3034-3038(R1＝R3＝H)；P.D.Williams，M.G.Bock，R.D.Tung，V.M.Garsky，D.S.Parlow，J.Med.Chem，1992，35，3905-3918；K.Tamaki，K.Tanzawa，S.Kurihara，T.Oikawa，S.Monma，Chem.Pharm.Bull.1995，43，1883-1893(R1＝R5＝H；R3＝COOBn)；K.J.Hale，J.Cai，V.Delisser，S.Manaviazar，S.A.Peak，四面体，1996，52，1047-1068；M.H.Chen，O.P.Goel，J.-W.Hyun，J.Magano，J.R.Rubin，Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，9，1587-1592(R1＝R5＝H；R3＝COOtBu)；R.Baenteli，I.Brun，P.Hall，R.Metternich，四面体通讯，1999，40，2109-2112(R1＝R5＝H；R3＝COR)；K.J.Hale，N.Jogiya，S.Manaviazar，四面体，1998，39，7163-7166(R1＝H；R3＝COOBn；R5＝OBn)；T. Kamenecka，S.J.Danishewsky，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1998，37，2995-2998(R1＝H；R3＝COO(CH2)2SiMe3；R5＝OSiMe2tBu。
A19参见Beilstein，注册号648833(R1＝R4＝R8＝H)。这类化合物可根据方案2制成。
方案2。

iNaH，CH2(COOMe)2，DMSO；iiNaH，R1-X，DMSO；iiiNaOH水溶液，MeOH，75度；ivDBU，Mel，DMF；vLDA，BocN＝NBoc；viTFA，CH2Cl2；viiCbzCl，Na2CO3水溶液，二_烷；viii酶拆分(如脂肪酶)；随后DBU，Mel，DMF；ixNaH，R4-X，THF；xPd/C，H2，EtOH；xiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A20参见D.Hagiwara，H.Miyake，N.Igari，M.Karino，Y.Maeda，J.Med.Chem.1994，37，2090-2099(R1＝H；R9＝OH)；Y.Arakawa，M.Yasuda，M.Ohnishi，S.Yoshifuji，Chem.Pharm.Bull.1997，45，255-259(R1＝H；R9＝COOH)；P.J.Mur ray，I.D.Starkey，四面体通讯，1996，37，1875-1878(R1＝H；R9＝(CH2)2NHCOCH2Ph)；K.Clinch，A.Vasella，R.Schauer，四面体通讯，1987，28，6425-6428(R1＝H；R9＝NHAc)。
A21参见A.Golubev，N.Sewald，K.Burger，四面体通讯，1995，36，2037-2040；F.Machetti，F.M.Cordero，F.DeSario，A.Guarna，A.Brandi，四面体通讯，1996，37，4205-4208；P.L.Ornstein，D.D.Schoepp，M.B.Arnold，J.D.Leander，D.Lodge，J.Med.Chem.1991，34，90-97；R1＝R6＝H)；P.D.Leeson，B.J.Williams，R.Baker，T.Ludduwahetty，K.W.Moore，M.Rowley，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1990，1578-1580；D.I.C.Scopes，N.F.Hayes，D.E.Bays，D.Belton，J.Brain，J.Med.Chem.1992，35，490-501；H.Kessler，M.Kuehn，T.L_schner，Liebigs Ann.Chem.1986，1-20(R1＝R6＝H)；C.Herdeis，W.Engel，Arch.Pharm.1992，7，419-424(R1＝R6＝Bn)；C.Herdeis，W.Engel，Arch.Pharm.1992，411-418(R1＝COOMe；R6＝H)；C.Herdeis，W.Engel，Arch.Pharm.1992，419-424(R1＝COOMe；R6＝Bn)。
A22参见P.D.Leeson，B.J.Williams，R.Baker，T.Ladduwahetty，K.W.Moore，M.Rowley，J.Chem.Soc.Chem.Comm.1990，1578-1580(R1＝H；R10＝NHOBn)。
A23参见Beyerman，Boekee，Recl.Trav.Chim.Pays-Bas 1959，78，648-653；D.R.Adams，P.D.Bailey，I.D.Collier，J.D.Heffernan，S.Stokes J.Chem.Soc.Chem.Commun.1996，349-350；J.E.Baldwin，R.M.Adlington，C.Godfrey，D.W.Collins，J.G.Vaughan，J.Chem.Soc.Chem.Comm.1993，1434-1435(R1＝R6＝H)；C.Herdeis，W.Engel，Arch. Pharm. 1993，297-302(R1＝COOMe；R6＝H)。
A24参见Plieninger，Leonh_user，Chem. Ber. 1959，92，1579-1584；D.W.Knight，N.Lewis，A.C.Share，D.Haigh，J.Chem.Soc.Perkin Trans.11998，22，3673-3684；J.Drummond，G.Johnson，D.G.Nickell，D.F.Ortwine，R.F.Bruns，B.Welbaum，J.Med.Chem.1989，32，2116-2128；M.P.Moyer，P.L.Feldman，H.Rapoport，J.Org.Chem.1985，50，5223-5230(R1＝R6＝H)；McElvain，Laughton，J.Am.Chem.Soc.1951，73，448-451(R1＝H；R6＝Ph)；McElvain，Laughton，J.Am.Chem.Soc.1951，73，448-451(R1＝Ph；R6＝H)； A25参见L.-Y.Hu，T.R.Ryder，S.S.Nikam，E.Millerman，B.G.Szoke，M.F.Rafferty，Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，9，1121-1126；W.C.Lumma，R.D.Hartman，W.S. Saari，E.L.Engelhardt，V.J.Lotti，C.A.Stone，J.Med.Chem.1981，24，93-101；N.Hosten，M.J.O.Antenuis，Bull.Soc.Chim.Belg.1988，97，48-50；C.F.Bigge，S.J.Hays，P.M.Novak，J.T.Drummond，G.Johnson，T.P.Bobovski，四面体通讯，1989，30，5193-5191；B.Aebischer，P.Frey，H.-P.Haerter，P.L.Herrling，W.Müller，Helv.Chim.Acta 1989，72，1043-1051；W.J.Hoeckstra，B.E.Maryanoff，B.P.Damiano，P.Andrade-Gordon，J.H.Cohen，M.J.Constanzo，B.J.Haertlein，L.R.Hecker，B.L.Hulshizer，J.A.Kauffman，P.Keane，J.Med.Chem.1999，42，5254-5265(R1＝H；R11＝H)；B.D.Dor sey，R.B.Levin，S.L.McDaniel，J.P.Vacca，J.P.Guare，J.Med.Chem.1994，37，3443-3451；M.Cheng，B. De，S.Pikul，N.G.Almstaed，M.G.Natchus，M.V.Anastasio，S.J.McPhail，C.J.Snider，Y.O.Taiwo，L.Chen，C.M.Dunaway，J.Med.Chem.2000，43，369-380；R.Kuwano，Y.Ito，J.Org.Chem.1999，64，1232-1237(R1＝H；R11＝COOtBu)；J.Kitchin，R.C.Bethell，N.Cammack，S.Dolan，D.N.Evans，J.Med.Chem.1994，37，3707-3716(R1＝H；R11＝COOPh)；C.F.Bigge，S.J.Hays，P.M.Novak，J.T.Drummond，G.Johnson，T.P.Bobovski，J.Med.Chem.1990，33，2916-2924(R1＝H；R11＝COOtBu；(CH2)3COOEt；(CH2)3PO(Me)OH；CH2PO(OH)2；(CH2)2PO(OEt)2；(CH2)2PO(OH)2)。
种类A25的化合物也可根据方案3制备 方案3
iLawesson试剂，甲苯，80度；iiDBU，Mel，DMF；iiiNaBH4或NaCNBH3，MeOH；ivBoc2O，THF；vLiOHx1H2O，MeOH，H2O；viPd/C，H2，EtOH；viiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A26参见Koegel，J.Biol.Chem.1953，201，547(R1＝R12＝H)。
A27参见G.Makara，G.R.Marshall，四面体通讯，1997，38，5069-5072；R.N.Patel，A.Banerjee，R.L.Hanson，D.B.Brzozowski，L.W.Parker，L.J.Szarka，TetrahedronAsymmetry1999，10，31-36(R1＝H；R13＝OH，OtBu)；J.E.Johanson，B.D.Christie，H.Rapoport，J.Org.Chem.1981，46，4914-4920；N.Moss，J.-S.Duceppe，J.-M-Ferland，J.Gauthier，J.Med.Chem.1996，39，2178-2187(R1＝H；R13＝CONHMe)；G.M.Makara，G.R.Marshall，四面体通讯，1997，38，5069-5072(R1＝H；R13＝SCH2(4-MeO)C6H4)。
A28参见A.Golubev，N.Sewald，K.Burger，四面体通讯，1995，36，2037-2040；P.L.Ornstein，D.D.Schoepp，M.B.Arnold，J.D.Leander，D.Lodge，J.Med.Chem.1991，34，90-97(R1＝R6＝H)；P.D.Leeson，B.J.Williams，R.Baker，T.Ladduwahet ty，K.W.Moore，M.Rowley，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1990，22，1578-1580；C.Herdeis，W.Engel，Arch.Pharm.1991，324，670(R1＝H；R6＝Me)；C.Herdeis，W.Engel，Arch.Pharm.1991，324，670(R1＝COOMe；R6＝H，Me)。
A29参见Kawase，Masami，Chem.Pharm.Bull. 1997，45，1248-1253；I.G.C.Coutts，J.A.Hadfield，P.R.Huddleston，J.Chem. Res. Miniprint，1987，9，2472-2500；I.G.C.Coutts，J.A.Hadfield，P.R.Huddleston，J.Chem.Res.Miniprint，1987，9，2472-2500；V.J.Hrubi，W.L.Cody，A.M.Castrucci，M.E.Hadley，Collect.Czech.Chem.Commun.1988，53，2549-2573；R.T.Shuman，R.B.Rothenberger，C.S.Campbell，G.F.Smith，D.S.Gifford-Moore，P.D.Gesellchen，J.Med.Chem.1993，36，314-319；M.Kawase，Y.Okada，H.Miyamae，杂环，1998，48，285-294(R1＝R8＝H)；Kawase，Masami，Chem.Pharm.Bull.1997，45，1248-1253(R1＝H；R8＝6，7-(MeO2)；D.F.Ortwine，T.C.Malone，C.F.Bigge，J.T.Drummond，C.Humblet，J.Med.Chem.1992，35，1345-1370(R1＝H；R8＝7-CH2PO(OEt)2)；E.J.Corey，D.Y.Gin，四面体通讯，1996，37，7163-7166(R1＝CH2SCOOtBu)；P.Dostert，M.Varasi，A.DellaTorre，C.Monti，V.Rizzo，Eur.J.Med.Chim.Ther.1992，27，57-59(R1＝Me；R8＝6，7-(OH)2)；Z.Czarnocki，D.Suh，D.B.McLean，P.G.Hultin，W.A.Szarek，Can.J.Chem.1992，70，1555-1561；B.Sch_nenberger，A.Brossi，Helv.Chim.Acta 1986，69，1486-1497(R1＝Me；R8＝6-OH；7-MeO)；Hahn，Stiel，Chem.Ber.1936，69，2627；M.Chrzanowska，B.Sch_nenberger，A.Brossi，J.L.FlippeN-Ander son，Helv.Chim.Acta 1987，70，1721-1731；T.Hudl icky，J.Org.Chem.1981，46，1738-1741(R1＝Bn；R8＝6，7-(OH)2)；A.I.Meyers，M.A.Gonzalez，V.Struzka，A.Akahane，J.Guiles，J.S.Warmus，四面体通讯，1991，32，5501-5504(R1＝CH2(3，4-亚甲基二氧基)C6H3；R8＝6，7-(OMe)2)。
A30和A31可根据方案4和5制备。
方案4
iNaH，N-苯甲酰基甘氨酸叔丁基酯，DMF；iiNaH，Pd(O)，甲苯；iiiTFA，CH2Cl2；iv多磷酸酸；vNaOH水溶液，MeOH，75度；随后HCl水溶液；viDBU，Mel，DMF；viilithium hexamethyl-disilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R1-X；viii酶拆分(如脂肪酶)；随后分离为甲基酯DBU，Mel，DMF；ixNaOH水溶液，MeOH，加热；xFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 方案5
iBoc2O，Na2CO3水溶液，二_烷；iiDBU，Mel，DMF；iiilithiumhexamethyldisilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度然后R2-X；ivLiOHx 1H2O，MeOH，H2O；vTFA，CH2Cl2；viFmocDSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A32可根据以下而制备P.W.Schiller，G.Weltrowska，T.M.-D.Nguyen，C.Lemieux，N.Nga，J.Med.Chem.1991，34，3125-3132；V.S.Goodfellow，M.V.Marathe，K.G.Kuhlman，T.D.Fitzpatrick，D.Cuadrato，J.Med.Chem.1996，39，1472-1484；G.Caliendo，F.Fiorino，P.Grieco，E.Perissutti，S.DeLuca，A.Guiliano，G.Santelli，D.Califano，B.Severino，V.Santagada，Farmacao，1999，54，785-790；V.S.Goodfellow，M.V.Marathe，K.G.Kuhlman，T.D. Fitzpatrick，D.Cuadro，J.Med.Chem.1996，39，1472-1484(R1＝R8＝H)；D.Tourwe，E.Mannekens，N.T.Trang，P.Verheyden，H.Jaspers，J.Med.Chem.1998，41，5167-5176；A.-K.Szardenings，M.Gordeev，D.V.Patel，四面体通讯，1996，37，3635-3638；W.Wiczk，K.Stachowiak，P.Skurski，L.Lankiewicz，A.Michniewicz，A.Roy，J.Am.Chem.Soc.1996，118，8300-8307；K.Verschuren，G.Toth，D.Tourwe，M.Lebl.，G.van Binst，V.Hrubi，合成Synthesis，1992，458-460(R1＝H；R8＝6-OH)；P.L.Ornstein，M.B.Arnold，N.K.Augenstein，J.W.Paschal，J.Org.Chem.1991，56，4388-4392(R1＝H；R8＝6-MeO)；D.Ma，Z.Ma，A.P.Kozikowski，S.Pshenichkin，J.T.Wroblenski，Bioorg.Med.Lett.1998，8，2447-2450(R1＝H；R8＝6-COOH)；U.Sch_llkopf，R.Hinrichs，R.Lonsky，Angew.Chem.1987，99，137-138(R1＝Me；R8＝H)；B.O.Kammermeier，U.Lerch，C.Sommer，合成，1992，1157-1160(R1＝COOMe；R8＝H)；T.Gees，W.B.Schweizer，D.Seebach，Helv.Chim.Acta 1993，76，2640-2653(R1＝Me；R8＝6，7-(MeO2)。
A33参见Hinton，Mann，J.Chem.Soc.1959，599-608。
A34参见G.P.Zecchini，M.P.Paradisi，J.Heterocycl.Chem.1979，16，1589-1597；S.Cerrini，J.Chem.Soc.Perkin Trans. 1，1979，1013-1019；P.L.Ornstein，J.W.Paschal，P.D.Gesellchen，J.Org.Chem.1990，55，738-741；G.M.Ksander，A.M.Yan，C.G.Diefenbacher，J.L.Stanton，J.Med.Chem.1985，28，1606-1611；J.A.Robl，D.S.Karanewsky，M.M.Asaad，四面体通讯，1995，36，1593-1596；S.Katayama，N.Ae，R.Nagata，TetrahedronAsymmetry1998，9，4295-4300(R1＝R8＝H)；K.Hino，Y.Nagai，H.Uno，Chem.Pharm.Bull.1988，36，2386-2400(R1＝Me；R8＝H)。
A35参见Beilstein注册号530775，883013(R1＝R8＝H)。
A36参见R.W.Carling，P.D.Leeson，A.M.Moseley，R.Baker，A.C.Foster，J.Med.Chem.1992，35，1942-1953；S.Kano，T.Ebata，S.Shibuya，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1980，2105-2111(R1＝R8＝H)；R.W.Carling，P.D.Leeson，A.M.Moseley，R.Baker，A.C.Foster，J.Med.Chem.1992，35，1942-1953(R1＝H；R8＝5-Cl；7-Cl)。
A37参见Nagarajan，Indian J.Chem.1973，11，112(R1＝CH2COOMe；R8＝H)。
A38参见R.Pauly，N.A.Sasaki，P.Potire，四面体通讯，1994，35，237-240；J.Podlech，D.Seebach，Liebigs Ann.Org.Bioorg.Chem.1995，7，1217-1228；K.C.Nicolaou，G.-Q.Shi，K.Namoto，F.Bernal，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1998，1757-1758(R1＝H；R2＝H)。
A39参见Beilstein，注册号782885。
A40参见F.P.J.C.Rutjes，N.M.Terhuis，H.Hiemstra，N.W.Speckamp，四面体，1993，49，8605-8628(R1＝H；R3＝Bn)；这类化合物可根据方案6制备。
方案6
iBocNHNH2，NaCNBH3，MeOH，AcOH；iiCbzCl，Et3N，CH2Cl2；iiiTFA，CH2Cl2；随后吡啶，DMAP，加热；iv拆分(如脂肪酶)；vDBU，Mel，DMF；viLawesson试剂，甲苯，75度；viiDBU，Mel，DMF；viiiNaBH4或NaCNBH3，MeOH；ix通过还原胺化，烷基化或酰基化引入R3；xLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xiPd/C，H2，EtOH；xiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A41这类化合物可根据方案7制备。
方案7
i拆分(如脂肪酶)；随后分离为甲基酯DBU，Mel，DMF；iiNaH，R4-X，THF；iiiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；ivPd/C，H2，EtOH；vFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A42-A46这类化合物可根据方案8-12制备。涉及该结构单元的重要中间体34和α-氨基酸合成包括R.M.Williams，M.-N.Im，四面体通讯，1988，29，6079-6082；R.M.Williams，M.-N.Im，J.Am.Chem.Soc.1991，113，9276-9286；J.F.Dellaria，B.D.Santarsiero，四面体通讯，1988，29，6079-6082；J.F.Dellaria，B.D.Santarsiero，J.Org.Chem.1989，54，3916-3926；J.E.Baldwin，V.Lee， C.J.Schofield，Synlett 1992，249-251；J.E.Baldwin，V.Lee，C.J.Schofield，杂环，1992，34，903-906。
方案8
ilithium hexamethyl-disilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R5-X；iiHBr；iiiDBU，Mel，DMF；ivDIBAL-H，THF；vEtOH，p-甲苯磺酸吡啶_，分子筛4A；vilithium hexamethyl-disilazide，THF，-78度，33；viiPd/C，H2，EtOH；随后DBU，Mel，DMF；随后TFA，CH2Cl2；viiiHCl水溶液，THF；随后Na(OAc)3BH，AcOH，二氯乙烷；ixLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 方案9
ilithium hexamethyl-disilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R6-X；iiHBr；iiiDBU，Mel，DMF；ivDIBAL-H，THF；vEtOH，p-甲苯磺酸吡啶_，分子筛4A；vilithium hexamethyl-disilazide，THF，-78度，39；viiPd/C，H2，EtOH；随后DBU，Mel，DMF；随后TFA，CH2Cl2；viiiHCl水溶液，THF；随后Na(OAc)3BH，AcOH，二氟乙烷；viiiBoc2O，Et3N，CH2Cl2；ixBu4NFx10H2O，THF；ix氯铬酸吡啶_；xLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xiTFA，CH2Cl2；xiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 方案10
iHBr；iiDBU，Mel，DMF；iiiDIBAL-H，THF；ivBtOH，p-甲苯磺酸吡啶_，分子筛4A；vlithium hexamethyl-disilazide，THF，-78度，43；viPd/C，H2，EtOH；随后DBU，Met，DMF；随后TFA，CH2Cl2；viiHCl水溶液，THF；随后Na(OAc)3BH，AcOH，二氯乙烷；viiiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；ixFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 方案11
iHBr；iiDBU，Mel，DMF；ii iDIBAL-H，THF；ivEtOH，p-甲苯磺酸吡啶_，分子筛4A；vlithium hexamethyl-disilazide，THF，-78度，47；viPd/C，H2，EtOH；随后DBU，Met，DMF；随后TFA，CH2Cl2；viiHCl水溶液，THF；随后Na(OAc)3BH，AcOH，二氯乙烷；viii Boc2O，Et3N，CH2Cl2；ixBu4NFx10H2O，THF；x氯铬酸吡啶_；xiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xiiTFA，CH2Cl2；xiiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 方案12
iHBr；iiDBU，Mel，DMF；iiiDIBAL-H，THF；ivEtOH，p-甲苯磺酸吡啶_，分子筛4A；vlithium hexamethyl-disilazide，THF，-78度，51；viPd/C，H2，EtOH；随后DBU，Me)，DMF；随后TFA，CH2Cl2；viiHCl水溶液，THF；随后Na(OAc)3BH，AcOH，二氯乙烷；viiiBoc2O，Et3N，CH2Cl2；ixBu4NFx10H2O，THF；x氯铬酸吡啶_；xiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xiiTFA，CH2Cl2；xiiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A47参见P.Barraclough，R.D.Farrant，D.Kettle，S.Smith，J.Chem.Res.Miniprint 1991，11，2876-2884(R1＝R11＝H，Bn，(CH2)2PO(OEt)2)。
A48参见A.Nouvet，M.Binard，F.Lamaty，J.Martinez，R.Lazaro，四面体，1999，55，4685-4698(R1＝R12＝H)。
A49参见M.Y.Kolleganov，I.G.Kolleganova，M.D.Mitrofanova，L.I.Martynenko，P.P.Nazarov，V.I.Spitsyn，Bull.Acad.Sci.USSR Div.Chem.Sci(Engl.Trans.)1983，32，1293-1299；Izv.Akad.Nauk SSSR Ser.Khim.1983，6，1293-1299；V.P.Vasilev，T.D.Orlova，S.F.Ledenkov，J.Gen.Chem.USSR(Engl.Trans.1989，59，1629-1634；Zh. Obshch.Khim.1989，59，1828-1833(R1＝H；R12＝CH(COOH)CH2COOH)。种类A49的化合物也可根据方案13制备。
方案13
iNaH，CbzNH(CH2)2Br，THF；iiPd/C，H2，EtOH；iiiEDCl，CH2Cl2，二异丙基乙基胺；ivNaH，R12-X，THF；vLiOHx1H2O，MeOH，H2O；viTFA，CH2Cl2；viiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A50和A51这些种类的化合物可根据方案14和15制备。
方案14
iHBr；iiDBU，Mel，DMF；iiiDIBAL-H，THF；ivEtOH，p-甲苯磺酸吡啶_，分子筛4A；vlithium hexamethyl-disilazide，THF，-78度，59；viPd/C，H2，EtOH；随后DBU，Mel，DMF；随后TFA，CH2Cl2；viiHCl水溶液，THF；随后Na(OAc)3BH，AcOH，二氯乙烷；viiiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；ixFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 方案15
iHBr；iiDBU，Mel，DMF；iiiDIBAH，THF；ivEtOH，p-甲苯磺酸吡啶_，分子筛4A；vlithium hexamethyl-disilazide，THF，-78度，63 viPd/C，H2，EtOH；随后DBU，Mel，DMF；随后TFA，CH2Cl2；viiHCl水溶液，THF；随后Na(OAc)3BH，AcOH，二氯乙烷；viiiBoc2O，Et3N，CH2Cl2；ixBu4NFx10H2O，THF；x氯铬酸吡啶_；xiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xiiTFA，CH2Cl2；xiiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A53参见P.Barraclough，R.D.Farrant，D.Kettle，S.Smith，J.Chem.Res.Miniprint 1991，11，2876-2884(R1＝R11＝H；R1＝H；R11＝Bn，(CH2)3PO(OH)2)；(CH2)3PO(Et)2)；J.I.Levin，J.F.DiJoseph，L.M.Killar；A.Sung，T.Walter，Bioorg.Med.Chem.Lett.1998，8，2657-2662(R1＝H；R11＝4CF3OC6H4CO)。
A52和A54这类化合物可根据方案16和17制备。
方案16
iiBuMgCl，THF；iiNaH，THF；iiilithium hexamethyl-disilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R6-X；ivNaOH水溶液，MeOH，75度；随后HCl水溶液；vDBU，Mel，DMF；vilithium hexamethyl-disilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R1-X；vii拆分(如脂肪酶)；随后DBU，Mel，DMF；viiiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；ixTFA，CH2Cl2；xFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 方案17
iNaN3，DMSO；iiNaH，THF，CH2＝CHCOOBn；iiiPd/C，H2，EtOH；ivEDCl，CH2Cl2，二异丙基乙基胺；vNaH，R12-X，THF；viLiOHx1H2O，MeOH，H2O；viiTFA，CH2Cl2；viiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A55和A56这类化合物可根据方案18和19制备。
方案18
iNaH，THF，CbzNH(CH2)3Br；iiPd/C，H2，EtOH；随后甲苯，加热；iii拆分(如脂肪酶)；ivDBU，Mel，DMF；vNaH，R12-X，THF；viLiOHx1H2O，MeOH，H2O；viiTFA，CH2Cl2；viiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 方案19
iHBr；iiDBU，Mel，DMF；iiiDIBAL-H，THF；ivEtOH，p-甲苯磷酸吡啶_，分子筛4A；vlithium hexamethyl-disilazide，THF，-78度，86；viPd/C，H2，EtOH；随后DBU，Mel，DMF；随后TFA，CH2Cl2；viiHCl水溶液，THF；随后Na(OAc)3BH，AcOH，二氯乙烷；viiiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；ixFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A57这类化合物可根据方案20制备。
方案20
iNaOMe，MeOH；iiNaH，THF；iiiNaOH水溶液，MeOH，75度；随后HCl水溶液；ivDBU，Mel，DMF；vlithium hexamethyl-disilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R1-X；vi拆分(如脂肪酶)；随后分离甲基酯DBU，Mel，DMF；viiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；viiiTFA，CH2Cl2；ixFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A58参见C.-H.Lee，H.Kohn，J.Org.Chem.1990，55，6098-6104(R1＝R8＝H)。
A59可根据方案21制备。
方案21
iNaOMe，MeOH；iiNaH，THF；iiiNaOH水溶液，MeOH，75；随后HCl水溶液；ivDBU，Mel，DMF；vlithium hexamethyl-disilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R1-X；vi拆分(如脂肪酶)；随后分离甲基酯DBU，Mel，DMF；viiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；viiiTFA，CH2Cl2；ixFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A60这类化合物可根据方案22制备。
方案22
iNaH，DMSO；iiNaOH水溶液，MeOH，75；随后HCl水溶液；iiiDBU，Mel，DMF；ivNaOMe(2.2equiv.)，R1-X；vRaney-Ni，H2，EtOH；viCbzCl，Et3N，CH2Cl2；viiNaH，Br(CH2)2Br，THF；viii拆分(如脂肪酶)；随后DBU，Mel，DMF；ixPd/C，H2，EtOH；xNaH，R14-X，THF；xiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xiiTFA，CH2Cl2；xiiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A61参见D.R.Armour，K.M.Morriss，M.S.Congreve，A.B. Hawcock，Bioorg.Med.Chem.Lett.1997，7，2037-2042(R1＝R12＝H)。
A62这类化合物可根据方案23制备。
方案23
i拆分(如脂肪酶)；随后DBU，Mel，DMF；iilithium hexamethyl-disilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R6-X；iiiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；ivTFA，CH2Cl2；vFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A63参见S.E.Gibson，N.Guillo，R.J.Middleton，A.Thuilliez，M.J.Tozer，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1997，4，447-456；S.E.Gibson，N.Guillo，S.B.Kalindjan，M.J.Tozer，Bioorg.Med.Chem.Lett，.1997，7，1289-1292(R1＝H；R8＝H)；Beilstein注册号459155(R1＝H；R8＝4，5-MeO2)。
A64这类化合物可根据方案24制备。
方案24
iNaH，DMSO；iiPd/C，H2，EtOH；iiiiBuOCOCl，二异丙基乙基胺，CH2Cl2；随后重氮甲烷；ivHBr，CH2Cl2；vNaH，THF；viNaOH水溶液，MeOH，75度；随后HCl水溶液；viiDBU，Mel，DMF；viii锂二异丙基酰胺，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R1-X；ix拆分(如脂肪酶)；随后分离甲基酯DBU，Mel，DMF；xLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xiTFA，CH2Cl2；xiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A65和A67这些种类的化合物可根据方案25和26制备。
方案25
iNaH，DMSO，BrCH(R1)COOMe；iiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；iii多磷酸；ivNaH，ClCOOMe，THF；v拆分(如脂肪酶)；随后分离为甲基酯DBU，Mel，DMF；viLiOHx1H2O，MeOH，H2O；viiTFA，CH2Cl2；viiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 方案26
iNaH，THF，CH2I2；iiNaH，DMSO；iiiBu4NFx10H2O，THF；iv甲烷磺酰氯，Et3N，CH2Cl2；随后NaH，THF；vNaOH水溶液，MeOH，75度；随后HCl水溶液；viDBU，Mel，DMF；viilithium hexamethyi-disilazide，THF，氯三甲基硅烷，-78度；随后R1-X；viiiPd/C，H2，EtOH；ixNaH，THF，R14-X；x拆分(如脂肪酶)；随后分离甲基酯DBU，Mel，DMF；xiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；xiiTFA，CH2Cl2；xiiiFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 A66参见G.L.Grunewald，L.H.Dahanukar，J.Heterocycl.Chem.1994，31，1609-1618(R1＝H；R8＝H，8-NO2；C(1)＝0)。
A68参见Griesbeck，H.Mauder，I.M üller，Chem.Ber.1992，11，2467-2476；(R1＝R8＝H；C(1)＝0)。
A69R. Kreher，W. Gerhardt，Liebigs Ann. Chem. 1981，240-247(R1＝R8＝H)。
如上所述，结构单元A70属于开链α-取代的α-氨基酸类，A71和A72属于相应的β-氨基酸类似物而A73-A104属于A70的环状类似物。
种类A70和A73-A104的结构单元已通过几种不同的一般方法合成通过烯酮与亚胺的[2+2]环加成(I. Ojima，H.J.C.Chen，X.Quin，四面体通讯，1988，44，5307-5318)；通过非对称的醛醇缩合反应(Y.Ito，M.Sawamura，E.Shirakawa，K.Hayashikazi，T.Hayashi，四面体通讯，1988，29，235-238；通过_唑烷酮方法(J.S.Amato，L.M.Weinstock，S.Karady，US 4508921 A；M.Gander-Coquoz，D.Seebach，Helv.Chim.Acta 1988，71，224-236；A.K.Beck，D.Seebach，Chimia1988，42，142-144；D.Seebach，J.D.Aebi，M.Gander-Coquoz，R.Naef，Helv.Chim.Acta 1987，70，1194-1216；D.Seebach，A.Fadel，Helv.Chim.Acta 1995，68，1243-1250；J.D.Aebi，D.Seebach，Helv.Chim.Acta 1985，68，1507-1518；A.Fadel，J.Salaun，四面体通讯，1987，28，2243-2246)；通过α，α-二取代的α-酮酯的Schmidt-重排(G.I.Georg，X.Guan，J.Kant，四面体通讯，1988，29，403-406)；利用手性Ni(II)衍生的Schiff-碱的非对称的合成(Y.N.Belokon，V.I.Bakhmutov，N.I.Chernoglazova，K.A.Kochetov，S.V.Vitt，N.S.Garbalinskaya，V.M.Belikov，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1988，305-312；M.Kolb，J.Barth，Liebigs Ann.Chem.1983，1668-1688)；通过二-内酰亚胺醚合成(U.Sch_kllkopf，R.Hinrichs，R.Lonsky，Angew.Chem.1987，99，137-138)；通过微生物拆分(K.Sakashita，I.Watanabe，JP 62/25 3397 A2)和通过乙内酰脲方法，并用衍生自L-苯丙氨酸酰胺的手性助剂拆分外消旋氨基酸(D.Obrecht，C.Spiegler，P.Sch_nholzer，K.Müller，H.Heimgartner，F.Stierli，Helv.Chim.Acta 1992，75，1666-1696；D.Obrecht，U.Bohdal，J.Daly，C.Lehmann，P.Sch_nholzer，K.M üller，四面体，1995，51，10883-10900；D.Obrecht，C.Lehmann，C.Ruffieux，P.Sch_nholzer，K.M üller，Helv.Chim.Acta 1995，78，1567-1587；D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.Bur，C.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，563-580；D.Obrecht，H.Karajiannis，C.Lehmann，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，703-714；D.Obrecht，M.Altorfer，C.Lehmann，P.Sch_nholzer，K.Müller，J.Org.Chem.1996，61，4080-4086；D.Obrecht，C.Abrecht，M.Altorfer，U.Bohdal，A.Grieder，P.Pfyffer，K.Müller，Helv.Chim.Acta 1996，79，1315-1337)。后一方法尤其可用于制备种类A70(参见方案27)和A73-A104(参见方案28)的结构单元的纯形式的对映异构体。
方案27
iKCN，(NH4)2CO3，EtOH/H2O；iiBa(OH)2，H2O；iiiNaOH水溶液，PhCOCl，二_烷；随后DCC，CH2Cl2；ivNaH，DMF，R18-X或R19-X；vL-苯基丙氨酸环己基酰胺，N-甲基吡咯烷酮，70度；viCH3SO3H，MeOH，80度；vii6N HCl水溶液，二_烷，100度；viiiMe3SiCl，DIEA，CH2Cl2；随后FmocCl 描绘于方案27的方法包括，将适当的酮126用KCN，(NH4)2CO3在乙醇/水的混合物中处理(E.Ware，J.Chem.Res.1950，46，403；L.H.Goodson，I.L.Honigberg，J.J.Lehmann，W.H.Burton，J.Org.Chem.1960，25，1920；S.N.Rastogi，J.S.Bindra，N.Anand，Ind.J.Chem.1971，1175)，得到相应的乙内酰脲127，然后用Ba(OH)2在水中在120-140°下水解(R.Sarges，R.C.Schur，J.L.Belletire，M.J.Paterson，J Med.Chem.1988，31，230)，得到高产率的128。Schotten-Baumann酰基化(HoubeN-Weyl，’Methoden der OrganischenChemie’，XI/2卷，Stickstoff-Verbindungen II und III’，GeorgTieme Verlag，Stuttgart，pp 339)，随后使用N，N’-二环己基碳二亚胺环化得到二氢唑酮129(D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.BurC.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，563-580；D.Obrecht，C.Spiegler，P.Sch_nholzer，K.Müller，H.Heimgartner，F.Stierli，Helv.Chim.Acta 1992，75，1666-1696)。或者，二氢唑酮129也可由氨基酸130和131开始制备，Schotten-Baumann酰基化和用N，N’-二环己基碳二亚胺环化成二氢唑酮132和133并烷基化得到129(D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.Bur，C.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，563-580；D.Obrecht，C.Spiegler，P.Sch_nholzer，K.Müller，H. Heimgartner，F.Stierli，Helv.Chim.Acta 1992，75，1666-1696)(参见方案1)。将129用L-苯丙氨酸环己基酰胺处理(D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.Bur，C.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，563-580)，得到非对映体肽134和135，然后可适宜地通过急骤色谱或结晶而分离。将134和135用甲烷磺酸在甲醇中在80°下处理，得到酯136a和136b，然后转化成相应的Fmoc-保护的最终结构单元137a和137b。
方案28
iKCN，(NH4)2CO3，EtOH/H2O；iiBa(OH)2，H2O；iiiNaOH水溶液，PhCOCl，二_烷；随后DCC，CH2Cl2；ivL-苯基丙氨酸环己基酰胺，N-甲基吡咯烷酮，70度；vCH3SO3H，MeOH，80度；vi6N HCl水溶液，二_烷，100度；viiMe3SiCl，DIEA，CH2Cl2；FmocCl 根据描述于方案28的一般方法(D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.Bur，C.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim. Acta 1995，78，563-580；D. Obrecht，C. Spiegler，P.Sch_nholzer，K.Müller，H.Heimgartner，F.Stierli，Helv.Chim.Acta 1992，75，1666-1696)，A73-A104可由相应的酮138开始制备，乙内酰脲形成(139)(E.Ware，J.Chem.Res.1950，46，403；L.H.Goodson，I.L.Honigberg，J.J.Lehmann，W.H.Burton，J.Org.Chem.1960，25，1920；S.N.Rastogi，J.S.Bindra，N.Anand，Ind.J.Chem.1971，1175；D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.Bur，C.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，563-580)和皂化(Ba(OH)2)得到外消旋氨基酸140，然后通过Schotten-Baumann-酰基化和用N，N‘-二环己基碳二亚胺环化得到二氢唑酮141。与L-苯基丙氨酸环己基酰胺反应(D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.Bur，C.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，563-580)得到非对映体肽142和143，通过急骤色谱或结晶而分离。将142和143用甲烷磺酸在甲醇中在80°下处理得到酯144a和144b，然后转化成相应的适当地保护的氨基酸前体145a和145b，可用于肽合成。
A71这类氨基酸结构单元(参见结构式147)可适宜地由相应的二取代的琥珀酸酯146通过方案29所示的Curtius-重排而制备。
方案29
i二苯基磷酰基叠氮化物，甲苯，80度；随后苄基醇 A71参见D.Seebach，S.Abele.T.Sifferlen，M.Haenggi，S.Gruner，P.Seiler，Helv.Chim.Acta 1998，81，2218-2243(R18和R19形成-(CH2)2-；-(CH2)3-；-(CH2)4-；-(CH2)5-；R20＝H)；L.Ducrie，S.Reinelt，P.Seiler，F.Diederich，D.R.Bolin，R.M.Campbell，G.L.Olson，Helv.Chim.Acta 1999，82，2432-2447；C.N.C.Drey，R.J.Ridge，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1981，2468-2471；U.P.Dhokte，V.V.Khau，D.R.Hutchinson，M.J.Martinelli，四面体通讯，1998，39，8771-8774(R18＝R19＝Me；R20＝H)；D.L.Varie，D.A.Hay，S.L.Andis，T.H.Corbett，Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，9，369-374(R18＝R19＝Et)；Testa，J.Org.Chem.1959，24，1928-1936(R18＝Et；R19＝Ph)；M.Haddad，C.Wakselman，J.FluorineChem.1995，73，57-60(R18＝Me；R19＝CF3；R20＝H)；T.Shono，K.Tsubata，N.Okinaga，J.Org.Chem.1984，49，1056-1059(R18＝R19＝R20＝Me)；K.Ikeda，Y.Terao，M.Sekiya，Chem.Pharm.Bull.1981，29，1747-1749(R18和R19形成-(CH2)5-；R20＝Me)。
氨基酸结构单元种类A72可以适宜地根据方案30通过种类A70的化合物的Arndt-Eistert C1-同系化反应(homologation)而制备。
方案30
iiBuOCOCl，二异丙基乙基胺，CH2Cl2；随后重氮甲烷，hv或Cu(I) A72参见Y.V.zeifman，J.Gen.Chem.USSR(Engl.Trans.)1967，37，2355-2363(R18＝R19＝CF3)；W.R.Schoen，J.M.Pisano，K.Pendergast，M.J.Wyvratt，M.H.Fisher，J.Med.Chem.1994，37，897-906；S.Thaisrivongs，D.T.Pals，D.W.DuCharme，S.Turner，G.L.DeGraaf，J.Med. Chem.1991，34，655-642；T.K.Hansen，H.Thoegersen，B.S.Hansen，Bioorg. Med.Chem.Lett.1997，7，2951-2954；R.J.DeVita，R.Bochis，A.J.Frontier，A.Kotliar，M.H.Fisher，J.Med.Chem.1998，41，1716-1728；D.Seebach，P.E.Ciceri，M.Overhand，B.Jaun，D.Rigo，Helv.Chim.Acta 1996，79，2043-2066；R.P.Nargund，K.H.Barakat，K.Cheng，W.Chan，B.R.Butler，A.A.Patchett，Bioorg.Med.Chem.Lett.1996，6，1265-1270(R18＝R19＝Me)；E.Altmann，K.Nebel，M.Mutter，Helv.Chim.Acta 1991，74，800-806(R18＝Me；R19＝COOMe)。
A73这类化合物可根据以下而制备C.Mapelli，G.Tarocy，F.Schwitzer，C.H.Stammer，J.Org.Chem.1989，54，145-149(R21＝4-OHC6H4)；F.Elrod，E.M.Holt，C.Mapelli，C.H.Stammer，J.Chem.Soc.Chem.Commun.1988，252-253(R21＝CH2COOMe)；R.E.Mitchell，M.C.Pirrung，G.M.McGeehan，Phytochemistry1987，26，2695(R21＝CH2OH)，J.Bland，A.Batolussi，C.H.Stammer，J.Org.Chem.1988，53，992-995(R21＝CH2NH2)。A73其它的衍生物已描述于T.Wakamiya，Y.Oda，H.Fujita，T.Shiba，四面体通讯，1986，27，2143-2134；U.Sch_llkopf，B.Hupfeld，R.Gull，Angew.Chem.1986，98，755-756；J.E.Baldwin，R.M.Adlington，B.J.Rawlings，四面体通讯，1985，26，481-484；D.Kalvin，K.Ramalinggam，R.Woodard，Synth.Comm.1985，15，267-272和L.M.Izquierdo，I.Arenal，M.Bernabe，E.Alvarez，四面体通讯，1985，41，215-220。
A74这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的环丁酮开始制备。
A75和A76这类化合物可使用以下方法制备P.Hughes，J.Clardy，J.Org.Chem.1988，53，4793-4796；E.A.Bell，M.Y.Qureshi，R.J.Pryce，D.H.Janzen，P.Lemke，J.Clardy，J.Am.Chem.Soc.1980，102，1409；Y.Gaoni，四面体通讯，1988，29，1591-1594；R.D.Allan，J.R.Haurahan，T.W.Hambley，G.A.R.Johnston，K.N.Mewett，A.D.Mitrovic，J.Med.Chem.1990，33，2905-2915(R23＝COOH)；G.W.Fleet，J.A.Seijas，M.Vasquez Tato，四面体，1988，44，2077-2080(R23＝CH2OH)。
A77这类化合物可以根据J.H.Burckhalter，G.Schmied，J.Pharm.Sci.1966，55，443-445(R23＝芳基)制备。
A78这类化合物可根据J.C.Watkins，P.Kroosgard-Larsen，T.Honeré，TIPS 1990，11，25-33；F.Trigalo，D.Brisson，R.Azerad，四面体通讯，1988，29，6109(R24＝COOH)而制备。
A79这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的吡咯烷-3-酮开始制备。
A80-A82这类化合物可根据D.M.Walker，E.W.Logusch，四面体通讯，1989，30，1181-1184；Y.Morimoto，K.Achiwa，Chem.Pharm.Bull.1989，35，3845-3849；J.Yoshimura，S.Kondo，M.Ihara，H.Hashimoto，碳水化合物研究(Carbohydrate Res.)，1982，99，129-142而制备。
A83这类化合物可以制备根据描述于方案28的一般方法由相应的吡唑啉-4-酮开始制备。
A84这类化合物可根据R.M.Pinder，B.H.Butcher，D.H.Buxton，D.J.Howells，J.Med.Chem.1971，14，892-893；D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.Bur，C.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，563-580而制备。
A85这类化合物可以制备根据描述于方案28的一般方法由相应的茚满-1，3-二酮开始制备。
A86这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的茚满-2-酮开始制备。
A87这类化合物和其类似物可根据C.Cativiela，M.D.Diaz deVillegas，A.Avenoza，J.M.Peregrina，四面体，1993，47，10987-10996；C.Cativiela，P.Lopez，J.A.Mayoral，四面体，Assymmetry 1990，1，379；C.Cativiela，J.A.Mayoral，A.Avenoza，M.Gonzalez，M.A.Rey，合成，1990，1114而制备。
A87和A88这类化合物可根据L.Munday，J.Chem.Soc.1961，4372；J.Ansell，D.Morgan，H.C.Price，四面体通讯，1978，47，4615-4616而制备。
A89这类化合物可以制备根据描述于方案28的一般方法由相应的哌啶-3-酮开始而制备。
A90这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的四氢噻喃-3-酮开始制备。
A91这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的四氢吡喃-3-酮开始制备。
A92这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的哌啶-2，5-二酮开始而制备。
A93这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的环己酮开始制备。
A94这类化合物可根据J.Org.Chem.1990，55，4208而制备。
A95这类化合物可根据N.J.Lewis，R.L.Inloes，J.Hes，R.H.Matthews，G.Milo，J.Med.Chem.1978，21，1070-1073而制备。
A96这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的四氢吡喃-4-酮开始制备。
A97这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的哌啶-2，4-二酮开始制备。
A98这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的1-四氢萘酮开始制备(D.Obrecht，C.Spiegler，P.Sch_nholzer，K.Müller，H.Heimgartner，F.Stierli，Helv.Chim.Acta 1992，75，1666-1696)。
A99这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的1，2，3，4-四氢化萘-1，4-二酮单-二乙基缩醛开始制备。
A100这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的四氢喹啉-4-酮开始制备。
A101这类化合物可根据描述于方案28的一般方法由相应的四氢喹啉-2，4-二酮开始制备。
A102这类化合物可根据以下而制备K.Ishizumi，N.Ohashi，N.Tanno，J.Org.Chem.1987，52，4477-4485；D.Obrecht，U.Bohdal，C.Broger，D.Bur，C.Lehmann，R.Ruffieux，P.Sch_nholzer，C.Spiegler，Helv.Chim.Acta 1995，78，563-580；D.Obrecht，C.Spiegler，P.Sch_nholzer，K.Müller，H.Heimgartner，F.Stierli，Helv.Chim.Acta 1992，75，1666-1696；D.R.Haines，R.W.Fuller，S.Ahmad，D.T.Vistica，V.E.Marquez，J.Med.Chem.1987，30，542-547；T.Decks，P.A.Crooks，R.D.Waigh，J.Pharm.Sci 1984，73，457-460；I.A.Blair，L.N.Mander，Austr.J.Chem.1979，32，1055-1065。
有关种类(b)-(p)的结构单元的概述是S.Hanessian，G.McNaughton-Smith，H.-G.Lombart，W.D.Lubell，四面体，1997，38，12789-12854；D.Obrecht，M.Altorfer，J.A.Robinson，″用于有效引导寻找的新型肽模拟结构单元和策略″，Adv.Med.Chem.1999，Vol.4，1-68 种类(b1)的模板可根据方案31和32制备。
方案31
i将150用脱水试剂如亚硫酰氯在甲醇中在升高的温度下，适宜地在回流下处理。
ii例如在适当的溶剂如二氯甲烷中使用二碳酸二叔丁基酯(di-tert.-butyl dicarbonate)和三乙基胺，引入Boc；任何其它适当的N-保护基团(在反应方案31中没有显示)可按照类似方式引入。
iii所形成的产物与邻苯二甲酰亚胺，重氮二羧酸二乙基酯和三苯基膦(triphenylphoshine)在标准Mitsunobu条件(Mit sunobu，O.；Wada，M.；Sano，T.J.J.Am.Chem.Soc.1972，94，672)下反应以适宜地得到151。
iv将151用三氟乙酸在二氯甲烷中处理。
v152在标准肽偶联条件下与Cbz-Asp(tBu)OH在DMF中使用试剂如HBTU和1-羟基苯并三唑(HOBt)以及碱如二异丙基乙基胺偶联得到153。
vi适宜地通过使用H2和催化剂如在木炭上的钯，在溶剂如乙醇，DMF和乙酸乙酯中氢化，去除Cbz-基团。
vii邻苯二甲酰亚胺基团适宜地通过用肼在适当的溶剂如乙醇中在升高的温度，适当地在约80℃下处理并将所形成的产物用三氟乙酸在CH2Cl2中分解而从所得产物中断裂。
viii所形成的氨基酸适宜地使用碱如碳酸钠或三乙基胺在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护得到154，参见Bisang，C.；Weber，C.；Robinson，J.A.Helv.Chim.Acta 1996，79，1825-1842。
方案32
i将150用脱水试剂如亚硫酰氯在适当的溶剂如甲醇中在升高的温度，适宜地在回流下处理。
ii所得氨基酸酯在标准条件下，例如在适当的溶剂如二氯甲烷中使用苄基氧基羰基氯和三乙基胺而被N-保护用于引入Cbz-基团。
iiiCbz-保护的氨基酸甲基酯用三甲基甲硅烷基氯和碱如三乙基胺在溶剂如四氢呋喃中处理，冷却，适宜地至约-78℃，随后与强碱如二异丙基氨基化锂或六甲基二甲硅烷基叠氮化锂(Lithiumhexamethyldisilylazide)和溴乙酸叔丁基酯反应得到作为非对映体混合物的155，参见Bisang，C.；Jiang，L.；Freund，E.；Emery，F.；Bauch，C.；Matile，H，；Pluschke，G.；Robinson，J.A.J.Am.Chem.Soc.1998，120，74 39-7449；Emery，F.；Bisang，C.；Favre，M.；Jiang，L.；Robinson，J.A.J.Chem.Soc.Chem.Commun.1996，2155-2156。
iv155与邻苯二甲酰亚胺，重氮二羧酸二乙基酯和三苯基膦在标准Mitsunobu条件(Mitsunobu，O.；Wada，M.；Sano，T.J.J.Am.Chem.Soc.1972，94，672)下反应。
v所得产物使用H2和适当的催化剂如在木炭上的钯在溶剂如乙酸乙酯，DMF或乙醇中氢化；随后分离非对映体并得到156。
vi156与Fmoc-Asp(烯丙基)OH在标准肽偶联条件下使用试剂如HATU，HOAt和碱如二异丙基乙基胺在适当的溶剂如DMF中偶联。
vii适宜地用DBU在DMF中环化得到157。
viii邻苯二甲酰亚胺基团适宜地通过肼解，如用甲基肼在适当的溶剂如DMF中处理而从所得产物中断裂。
ix所形成的产物适宜地使用碱如碳酸钠或三乙基胺在适当的溶剂或溶剂的混合物，如二_烷和水或二氯甲烷中用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护得到158。
x使用例如钯(O)作为催化剂进行烯丙基酯基团的标准去除，得到159。
(b2)类型模板可根据方案33制备。
方案33
i160(可得自维生素C，如同描述于Hubschwerlen，C.(合成，1986，962)用邻苯二甲酰亚胺，重氮二羧酸二乙基酯和三苯基膦在标准Mitsunobu条件(Mitsunobu，O.；Wada，M.；Sano，T.J.J.Am.Chem.Soc.1972，94，672)下处理。
ii邻苯二甲酰亚胺基团适宜地通过肼解，如通过用甲基肼在适当的溶剂如DMF中处理而从产物上断裂。
iii氨基基团通过用苯甲酰基化试剂如苯甲酸酐或苯甲酰氯和碱如三乙基胺或4-二甲基氨基吡啶在适当的溶剂如二氯甲烷或DMF中处理而被保护。
iv例如用K2S2O8和Na2HPO4在含水乙腈中在升高的温度，如在约80℃下，去除2，4-二甲氧基苄基基团。
v在适当的溶剂如二氯甲烷中使用例如二-叔丁基氧基羰基二碳酸酯(di-tert.-butyloxycarbonyl dicarbonate)，三乙基胺和催化量的4-二甲基氨基吡啶而引入叔丁氧基羰基基团。
vi与含水碳酸钠在四氢呋喃中反应，随后酸化。
vii适宜地用重氮甲烷在适当的溶剂如二乙基醚中，酯化羧酸基团，得到161。
Viii适宜地通过用H2在催化剂如在木炭上的钯的存在下在溶剂如DMF中氢化而去除Cbz-基团，得到161，参见Pfeifer，M.；Robinson，J.A.J.Chem.Soc.Chem.Commun.1998，1977。
ix161在标准肽偶联条件下与Cbz-Asp(tBu)OH在DMF中使用试剂如HBTU和1-羟基苯并三唑使用碱如二异丙基乙基胺偶联得到162，参见Pfeifer，M.；Robinson，J.A.J.Chem.Soc.Chem.Commun.1998，1977。
x通过例如使用H2和催化剂如在木炭上的钯在标准条件下氢化而去除Cbz-基团，得到163，参见Pfeifer，M.；Robinson，J.A.J.Chem.Soc.Chem.Commun.1998，1977。
xi适宜地使用在二氯甲烷中的三氟乙酸或在二_烷中的4N氢氯酸，断裂叔丁基酯和叔丁基氧基羰基基团。
xii形成的中间体游离氨基酸适宜地通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护得到164，参见Pfeifer，M.；Robinson，J.A.J.Chem.Soc.Chem.Commun.1998，1977。
(c1)类型模板可根据方案34-37制备。
方案34
i166可根据P.Waldmeier，“用于合成β-转角稳定化环状肽库的高度取代的咕吨衍生的模板的固体承载的合成”(博士论文，苏黎世大学，1996)而由165合成。为了断裂邻苯二甲酰亚胺基团，166适宜地进行肼解，如用水合肼在适当的溶剂如乙醇中在升高的温度，如在约80℃下处理。
ii中间体氨基腈适宜地在碱性条件下，例如使用含水氢氧化钠在适当的溶剂如乙醇中在升高的温度，适宜地在回流下皂化，得到167。
iii所形成的中间体游离氨基酸适宜地通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护得到168，参见P.Waldmeier，“用于合成β-转角稳定化环状肽库的高度取代的咕吨衍生的模板的固体承载的合成”(博士论文，苏黎世大学，1996)。
iv167的区域选择性溴化优选使用溴在乙酸和二氯甲烷中进行。按照类似的方式，R37＝NO2可通过用HNO3在乙酸中处理而引入和R37＝CH2-NPht通过用羟基甲基邻苯二甲酰亚胺在H2SO4中处理而引入。
v氨基基团适宜地用试剂如苄基氧基羰基氯或琥珀酰亚胺在适当的溶剂如二_烷中在碱如含水氢氧化钠的存在下进行Cbz-保护。
vi羧酸基团优选使用DBU和甲基碘在DMF中被酯化，得到169。
vii适宜地通过钯(O)-催化Stille-(Stille，J.K.Angew.Chem.1986，68，504)和Suzuki-偶联(Oh-e，T.；Mijaura，N.；Suzuki，A.J.Org.Chem.1993，58，2201)而引入低级烷基，取代的低级烷基和芳基取代基(R37)。已知用于芳基溴的任何其它官能化可用于引入取代基R37。
viii例如通过使用H2和催化剂如在木炭上的钯在适当的溶剂如乙醇，DMF和乙酸乙酯中氢化而去除Cbz-基团。
ix适宜地在酸性条件下，如使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，优选在约100℃下水解酯基团。
x形成的中间体游离氨基酸适宜地通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护得到170。
方案35
i171的双邻溴化优选使用过量溴在乙酸和二氯甲烷中进行。按照类似的方式，R37＝R38＝NO2可通过用HNO3在乙酸中处理而引入，R37＝R38＝CH2-NPht可通过用羟基甲基邻苯二甲酰亚胺在H2SO4中处理而引入。
ii氨基基团使用试剂如苄基氧基羰基氯或琥珀酰亚胺在适当的溶剂如二_烷中在碱如含水氢氧化钠的存在下被保护，适宜地Cbz-保护。
iii羧酸基团优选使用DBU和甲基碘在DMF中被酯化，得到172。
iv例如通过钯(O)-催化Stille-(Stille，J.K.Angew.Chem.1986，68，504)和Suzuki-偶联(Oh-e，T.；Mijaura，N.；Suzuki，A.J.Org.Chem.1993，58，2201)而引入低级烷基，取代的低级烷基和芳基取代基(R37＝R38)。已知用于芳基溴的任何其它官能化可用于引入取代基R37和R38。
v例如通过使用H2和催化剂如在木炭上的钯在适当的溶剂如乙醇，DMF或乙酸乙酯中氢化而去除173的Cbz-基团。
vi适宜地在酸性条件下，如使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，适宜地在约100℃下水解酯基团。
vii所形成的中间体游离氨基酸适宜地通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护得到174。
方案36
i优选通过用过量硼三溴化物在适当的溶剂如二氯甲烷中处理而断裂166的甲氧基基团。
ii氰基基团在酸性条件下，优选使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，适宜地在约100℃下水解。
iii所得酸用脱水剂如亚硫酰氯在适当的溶剂如二_烷中处理得到175。
iv175用适当的triflating试剂，优选三氟甲烷磺酸酐在碱如2，6-二叔丁基-吡啶的存在下在适当的溶剂如二氯甲烷中处理。
v适宜地在适当的溶剂如甲醇中加热中间体。
vi通过烷基化引入低级烷基或芳基-低级烷基(R35)，得到177。已知用于酚基团的任何其它官能化可用于引入取代基R35。
vii适宜地通过钯(O)-催化的Suzuki-偶联(Oh-e，T.；Mijaura，N.；Suzuki，A.J.Org.Chem.1993，58，2201)而引入低级烷基或芳基(R36)，得到178。已知用于芳基溴的任何其它官能化可用于引入取代基R36。
viii酯基团在酸性条件下，适宜地与25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，如在约100℃下水解。
ix适宜地通过肼解，如在适当的溶剂如乙醇中使用水合肼而断裂邻苯二甲酰亚氨基基团。
x所形成的中间体游离氨基酸适宜地通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护得到179。
方案37
i175使用试剂如溴在乙酸和二氯甲烷的混合物中在约0℃至约室温的温度下溴化。
ii羟基基团使用适当的酰基化剂如苯甲酰氯或苯甲酸酐，碱如吡啶或三乙基胺和适当的溶剂如二氯甲烷而苯甲酰基化得到180。
iii180在加热下用甲醇和催化量的酸性催化剂如樟脑磺酸处理。
iv通过在溶剂如四氢呋喃，二甲氧基乙烷或DMF中使用碱如氢化钠或叔丁醇钾烷基化而引入低级烷基或芳基-低级烷基(R35)，得到181。
v低级烷基，取代的低级烷基和芳基取代基(R38)如通过钯(O)-催化的Stille-(Stille，J.K.Angew.Chem.1986，68，504)和Suzuki-偶联(Oh-e，T.；Mijaura，N.；Suzuki，A.J.Org.Chem.1993，58，2201)而被引入。已知用于芳基溴的任何其它官能化可用于引入取代基R38。
vi为了断裂苄基氧基基团，中间体适宜地与吸附在氧化铝上的氰化钠和甲醇一起加热。
vii用适当的triflating试剂，优选三氟甲烷磺酸酐，在碱如2，6-二叔丁基-吡啶的存在下在适当的溶剂如二氯甲烷中处理。
viii例如通过钯(O)-催化的Stille-(Stille，J.K.Angew.Chem.1986，68，504)和Suzuki-偶联(Oh-e，T.；Mijaura，N.；Suzuki，A.J.Org.Chem.1993，58，2201)引入低级烷基和芳基取代基(R36)，产生182。已知用于芳基溴的任何其它官能化可用于引入取代基R36。
ix在标准条件下如使用溴在乙酸和二氯甲烷在约0℃至约室温的温度下溴化。
x低级烷基，取代的低级烷基和芳基取代基(R37)例如通过钯(0)-催化Stille-(Stille，J.K.Angew.Chem.1986，68，504)和Suzuki-偶联(Oh-e，T.；Mijaura，N.；Suzuki，A.J.Org.Chem.1993，58，2201)而被引入以得到184。已知用于芳基溴的任何其它官能化可用于引入取代基R37。
xi酯基团在酸性条件下，适宜地使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，如在约100℃下水解。
xii邻苯二甲酰亚氨基基团例如通过肼解，适宜地使用水合肼在适当的溶剂如乙醇中而断裂。
xiii所形成的中间体游离氨基酸适宜地通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护得到185。
(c2)类型模板可如方案38和39所示而制备。
方案38
i根据Müller，K.；Obrecht，D.；Knierzinger，A.；Spiegler，C.；Bannwarth，W.；Trzeciak，A.；Englert，G.；Labhardt，A.；Sch_nholzer，P.药用化学展望，Editor Testa，B.；Kyburz，E.；Fuhrer，W.；Giger，R.，Weinheim，New York，Basel，CambridgeVerlag Helvetica Chimica Acta，1993，513-531；Bannwarth，W.；Gerber，F.；Grieder，A.；Knierzinger，A.；Müller，K.；Obrecht.D.；Trzeciak，A.Can.Pat.Appl.CA2101599(131页)制备出3，7-二甲氧基吩噻嗪186并转化成187。苄基基团适宜地通过如用H2和催化剂如在木炭上的钯在适当的溶剂如乙醇，DMF或乙酸乙酯中氢化而从187中断裂下来。
ii通过使用适当的烷基化剂(R43-X′；X′＝OTf，Br，I)和强碱如氨基化钠在液体氨中或氢化钠在四氢呋喃，二_烷或DMF中在相转移催化剂如TDA-I的存在下烷基化而引入低级烷基(R43)。按照类似方式，可引入取代的低级烷基(R43)；因此，例如R43＝CH2COOR55和CH2CH2COOR55可通过分别用适当的2-卤代乙酸和3-卤代丙酸衍生物处理而被引入。已知用于二芳基胺的任何其它官能化可用于引入取代基R43。
iii188的甲氧基基团适宜地通过用过量三溴化硼在适当的溶剂如二氯甲烷中在约-20℃ 至约室温的温度下处理而断裂。
iv为了引入低级烷基，取代的低级烷基或芳基-低级烷基取代基(R39和R40)，中间体二酚衍生物适宜地与具有结构式R39-和R40-X′(X′＝OTf，Br，I)的试剂在强碱如氢化钠的存在下在四氢呋喃，二_烷或DMF中在相转移催化剂如TDA-I的存在下反应。已知用于酚基团的任何其它官能化可用于引入取代基R39和R40。
v188和189的氰基基团分别适宜地在酸性条件下，如使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，如在约100℃下水解。
vi中间体的邻苯二甲酰亚胺基团适宜地通过肼解，如在适当的溶剂如乙醇中使用水合肼而断裂。
vii游离氨基基团适宜地通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护，分别得到190和191。
方案39
i188的氰基基团适宜地在酸性条件下，如使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，如在约100℃下水解。
ii中间体的邻苯二甲酰亚胺基团适宜地通过肼解，如在适当的溶剂如乙醇中使用水合肼而断裂，得到192。
iii192的双邻-溴化优选使用过量溴在乙酸和二氯甲烷中进行。按照类似的方式，R41＝R42＝NO2可通过用HNO3在乙酸中处理而引入和R41＝R42＝CH2＝NPht可通过用羟基甲基邻苯二甲酰亚胺在H2SO4中处理而引入。已知用于亲电性芳族取代的任何其它官能化可用于引入取代基R41和R42。
iv氨基基团使用试剂如苄基氧基羰基氯或琥珀酰亚胺在适当的溶剂如二_烷中在碱如含水氢氧化钠的存在下被保护，适宜地Cbz-保护。
v羧酸基团优选使用DBU和甲基碘在DMF中被酯化，得到193。
vi192的区域选择性溴化优选使用溴在乙酸和二氯甲烷中进行。按照类似的方式，R41＝NO2可通过用HNO3在乙酸中处理而被引入和R41＝CH2＝NPt可通过用羟基甲基邻苯二甲酰亚胺在H2SO4中处理而被引入。已知用于亲电性芳族取代的任何其它官能化可用于引入取代基R41。
vii氨基基团使用试剂如苄基氧基羰基氯或琥珀酰亚胺在适当的溶剂如二_烷中在碱如含水氢氧化钠的存在下被适宜地Cbz-保护。
viii羧酸基团优选使用DBU和甲基碘在DMF中被酯化，得到194。
ix194(R41)和193(R41和R42)的低级烷基，取代的低级烷基和芳基取代基适宜地通过钯(0)-催化的Stille-(Stille，J.K.Angew.Chem.1986，68，504)和Suzuki-偶联(Oh-e，T.；Mijaura，N.；Suzuki，A.J.Org.Chem.1993，58，2201)而被引入。已知用于芳基溴的任何其它官能化可用于引入取代基R41和R42。
x例如通过使用H2和催化剂如在木炭上的钯在适当的溶剂如乙醇，DMF和乙酸乙酯中氢化而去除Cbz-基团。
xi酯基团适宜地在酸性条件下，如使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，优选在约100℃下水解。
xii所形成的中间体游离氨基酸通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而适宜地用试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护，得到195和196。
(c3)类型模板可如方案40和41而制备。
方案40 试卤灵
i根据Müller，K.；Obrecht，D.；Knierzinger，A.；Spiegler，C.；Bannwarth，W.；Trzeciak，A.；Englert，G.；Labhardt，A.；Sch_nholzer，P.药用化学展望，Editor Testa，B.；Kyburz，E.；Fuhrer，W.；Giger，R.，Weinheim，New York，Basel，CambridgeVerlag Helvetica Chimica Acta，1993，513-53l；Bannwarth，W.；Gerber，F.；Grieder，A.；Knierzinger，A.；Müller，K.；Obrecht.D.；Trzeciak，A.Can.Pat.Appl.CA2101599(131页)，197可由商业试卤灵制备和转化成198。为了切下苄基基团，198适宜地例如使用H2和催化剂如在木炭上的钯在适当的溶剂如乙醇，DMF或乙酸乙酯中氢化。
ii使用强碱如氨基化钠在液体氨中或氢化钠在四氢呋喃，二_烷或DMF中在相转移催化剂如TDA-I的存在下通过用R43-X′(X′＝OTf，Br，I)烷基化而引入低级烷基(R43)，得到199。按照类似方式，取代的低级烷基(R43)可被引入；因此，例如，R43＝CH2COOR55和CH2CH2COOR55可通过分别用适当的2-卤代乙酸和3-卤代丙酸衍生物处理而被引入。已知用于二芳基氨基基团的任何其它官能化可用于引入取代基R43。
iii199的甲氧基基团适宜地通过用过量三溴化硼在二氯甲烷中在约-20°至约室温的温度下处理而断裂。
iv中间体二-酚衍生物优选与R39和R40-X′(X′＝OTf，Br，I)在强碱如氢化钠的存在下在四氢呋喃，二_烷或DMF中在相转移催化剂如TDA-I的存在下反应。用于酚基团的任何其它官能化可用于引入取代基R39和R40。
v199和200的氰基基团分别在酸性条件下，如使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，适宜地在约100℃下水解。
vi邻苯二甲酰亚胺基团适宜地通过肼解，如在适当的溶剂如乙醇中使用水合肼而断裂。
vii游离氨基基团适宜地通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而被试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护，分别得到201和202。
方案41
i199的氰基基团适宜地在酸性条件下，如使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，如在约100℃下水解。
ii中间体的邻苯二甲酰亚胺基团适宜地通过肼解，如在适当的溶剂如乙醇使用水合肼而断裂，得到203。
iii203的双邻-溴化优选使用过量溴在乙酸和二氯甲烷中进行。按照类似的方式，R41＝R42＝NO2可通过用HNO3在乙酸中处理而引入和R41＝R42＝CH2-NPht可通过用羟基甲基邻苯二甲酰亚胺在H2SO4中处理而引入。已知用于亲电性芳族取代的任何其它官能化可用于引入取代基R41和R42。
iv氨基基团使用试剂如苄基氧基羰基氯或琥珀酰亚胺在适当的溶剂如二_烷中在碱如含水氢氧化钠的存在下保护，适宜地Cbz-保护。
v羧酸基团优选使用DBU和甲基碘在DMF中酯化，得到204。
vi203的区域选择性溴化优选使用溴在乙酸和二氯甲烷中进行。按照类似的方式，R41＝NO2可通过用HNO3在乙酸中处理而被引入和R41＝CH2-NPht可通过用羟基甲基邻苯二甲酰亚胺在H2SO4中处理而被引入 vii氨基基团适宜地使用试剂如苄基氧基羰基氯或琥珀酰亚胺在适当的溶剂如二_烷中在碱如含水氢氧化钠的存在下被Cbz-保护。
viii羧酸基团优选使用DBU和甲基碘在DMF中酯化得到205。
ix适宜地通过钯(O)-催化Stille-(Stille，J.K.Angew.Chem.1986，68，504)和Suzuki-偶联(Oh-e，T.；Mijaura，N.；Suzuki，A.J.Org.Chem.1993，58，2201)而引入205(R41)和204(R41和R42)的低级烷基，取代的低级烷基和芳基取代基。已知用于芳基溴的任何其它官能化可用于引入取代基R41和R42。
x例如通过使用H2和催化剂如在木炭上的钯在适当的溶剂如乙醇，DMF和乙酸乙酯中氢化而去除Cbz-基团。
xi酯基团适宜地在酸性条件下，如使用25％含水氢氯酸在适当的溶剂如二_烷中在升高的温度，优选在约100℃下水解。
xii所形成的中间体游离氨基酸适宜地通过在适当的溶剂或溶剂如二_烷和水的混合物，或二氯甲烷中使用碱如碳酸钠或三乙基胺而被试剂如9-芴基甲氧基羰基氯或9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺保护，得到206和207。
模板(d)可根据D.Obrecht，U.Bohdal，C.Lehmann，P.Sch_nholzer，K.Müller，四面体，1995，51，10883；D.Obrecht，C.Abrecht，M.Altorfer，U.Bohdal，A.Grieder，M.Kleber，P.Pfyffer，K.Müller，Helv.Chim.Acta 1996，79，1315-1337而制备。
模板(e1)和(e2)参见R.Mueller，L.Revesz，四面体通讯，1994，35，4091；H.-G.Lubell，W.D.Lubell，J.Org.Chem.1996，61，9437；L.Colombo，M.DiGiacomo，G.Papeo，O.Carugo，C.Scolastico，L.Manzoni，四面体通讯，1994，35，4031。
模板(e3)参见S.Hanessian，B.Ronan，A.Laoui，Bioorg.Med.Chem.Lett.1994，4，1397。
模板(e4)参见S.Hanessian，G.McNaughton-Smith，Bioorg.Med.Chem.Lett.1996，6，1567。
模板(f)参见T.P.Curran，P.M.McEnay，四面体通讯，1995，36，191-194。
模板(g)参见D.Gramber g，C.Weber，R.Beeli，J.Inglis，C.Bruns，J.A.Robinson，Helv.Chem.Acta 1995，78，1588-1606；K.H.Kim，J.P.Dumas，J.P.Germanas，J.Org.Chem.1996，61，3138-3144。
模板(h)参见S.de Lombart，L.Blanchard，L.B.Stamford，D.M.Sperbeck，M.D.Grim，T.M.Jenson，H.R.Rodriguez，四面体通讯，1994，35，7513-7516。
模板(i1)参见J.A.Robl，D.S.Karanewski，M.M.Asaad，四面体通讯，1995，5，773-758。
模板(i2)参见T.P.Burkholder，T.-B.Le，E.L.Giroux，G.A.Flynn，Bioorg.Med.Chem.Let t.1992，2，579。
模板(i3)和(i4)参见L.M.Simpkins，J.A.Robl，M.P.Cimarusti，D.E.Ryono，J.Stevenson，C.-Q.Sun，E.W.Petrillo，D.S.Karanewski，M.M.Asaad，J.E.Bird，T.R.Schaeffer，N.C.Trippodo，论文摘要，210th Am.Chem.Soc Meeting，Chicago，I11，MEDI 064(1995)。
模板(k)参见D.BenIshai，A.R.McMurray，四面体，1993，49，6399。
模板(l)参见如von Roedern，H.Kessler，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1994，33，687-689。
模板(m)参见R.Gonzalez-Muniz，M.J.Dominguez，M.T.Garcia-Lopez，四面体，1992，48，5191-5198。
模板(n)参见F.Esser，A.Carpy，H.Briem，H.K_ppen，K.-H.Pook，Int.J.Pept.Res.1995，45，540-546。
模板(o)参见N.De la Figuera，I.Alkorta，T.Garcia-Lopez，R.Herranz，R.Gonzalez-Muniz，四面体，1995，51，7841。
模板(p)参见U.Slomcynska，D.K.Chalmers，F.Cornille，M.L.Smythe，D.D.Benson，K.D.Moeller，G.R.Mar shall，J.Org.Chem.1996，61，1198-1204。
包含通式I的β-发夹模拟物，其溶剂化物或盐的药物同样是本发明的主题，本发明的主题还有用于制造这些药物的方法，包括将一种或多种所述化合物和，如果需要的话，一种或多种其它的治疗有价值物质制成盖仑剂量形式。
为了控制或预防可被蛋白酶抑制剂治疗的已知疾病，本发明的β-发夹模拟物可单个地，作为几种β-发夹模拟物的混合物，与蛋白酶酶的其它抑制剂结合或与其它药物活性剂结合而给药。本发明的β-发夹模拟物可原样或作为药物组合物而给药。活性物质，即，具有结构式I的化合物的剂量可在宽限度内变化，而且当然将适应在每种特定情况下不同的要求。一般来说，在口服或肠胃外(例如，静脉或皮下)给药的情况下，每天约0.1-29mg/kg，优选约0.5-5mg/kg的给药剂量对成人应该是适当的，但以上给出的上限也可根据需要而增加或减少。
包含本发明β-发夹肽模拟物的药物组合物可利用常规混合，溶解，造粒，包衣片剂-制造，磨光，乳化，胶囊化，包埋或冻干工艺而制造。药物组合物可按照常规方式使用一种或多种有助于将活性β-发夹肽模拟物加工成可药用的制剂的生理可接受的载体，稀释剂，赋形剂或助剂而配制。适当的配方取决于所选的给药方法。
全身性制剂包括设计通过注射，如皮下，静脉内，肌内，鞘内或腹膜内注射而给药的那些，以及设计用于经皮，经粘膜，口服或肺部给药的那些。
对于注射，本发明的β-发夹肽模拟物可在水溶液，优选在生理相容的缓冲剂如Hink’s溶液，Ringer’s溶液，或生理盐水缓冲剂中配制。该溶液可包含配制剂如悬浮，稳定化和/或分散剂。或者，本发明的β-发夹肽模拟物可以是粉末形式，在使用之前与适当的载体，如，无菌无热原的水混合。
对于经粘膜给药，适合所要渗透的屏障的渗透剂用于配方，这是本领域已知的。
对于口服给药，化合物可通过将本发明的活性β-发夹肽模拟物与本领域熟知的药物可接受的载体相结合而容易配制。这些载体使得本发明的β-发夹肽模拟物能够配制成片剂，丸剂，糖衣丸，胶囊，液体，凝胶，糖浆，软胶，悬浮液等，用于所要治疗的病人的口服摄入。对于口服制剂如，例如，粉末，胶囊和片剂，适当的赋形剂包括填料如糖，如乳糖，蔗糖，甘露糖醇和山梨醇；纤维素制品如玉米淀粉，小麦淀粉，米淀粉，马铃薯淀粉，明胶，黄芪胶，甲基纤维素，羟基丙基甲基纤维素，羧基甲基纤维素钠，和/或聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)；成粒剂；和粘结剂。如果需要，可以加入崩解剂，如交联聚乙烯基吡咯烷酮，琼脂，或海藻酸或其盐，如海藻酸钠。如果需要，固体剂型可使用标准技术糖包衣或肠道包衣。
对于口服液体制剂如，例如，悬浮液，酏剂和溶液，适当的载体，赋形剂或稀释剂包括水，二醇，油，醇，等。另外，可以加入增香剂，防腐剂，着色剂和类似物。
对于口腔给药，组合物可以是按照常规配制的片剂，糖锭，等形式。
为了通过吸入而给药，本发明的β-发夹肽模拟物适宜地以气溶胶喷剂形式从增压包装或喷雾器中，利用适当的抛射剂，如二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氧化碳或另一适当的气体而传输。在增压气溶胶的情况下，剂量单位可通过提供阀而确定以传输计量的量。用于吸入器或吹入器的如明胶的胶囊和药筒可配制成包含本发明β-发夹肽模拟物和适当的粉末基质如乳糖或淀粉的粉末混合物。
这些化合物也可与适当的栓剂基质如可可脂或其它甘油酯一起配制成直肠或阴道组合物如栓剂。
除了以前描述的制剂，本发明的β-发夹肽模拟物也可配制成储存制剂。这些长效制剂可通过植入(如皮下或肌内)或通过肌内注射而给药。为了制造这些储存制剂，本发明的β-发夹肽模拟物可与适当的聚合物或憎水材料(如作为在可接受的油中的乳液)或离子交换树脂一起，或作为几乎不可溶盐配制。
另外，可以使用其它药物传输体系如本领域熟知的脂质体和乳液。也可使用某些有机溶剂如二甲基亚砜。另外，本发明的β-发夹肽模拟物可使用持续释放体系，如包含治疗剂的固体聚合物的半透基质而传输。各种持续释放材料已被确立和为本领域熟练技术人员所熟知。持续释放胶囊可根据其化学性质释放化合物数周至100天以上。根据治疗剂的化学性质和生物稳定性，可以使用其它策略用于蛋白质稳定。
因为本发明的β-发夹肽模拟物可包含带电残基，它们可作为游离碱或作为药物可接受盐包括在任何上述制剂中。药物可接受盐往往比相应的游离碱形式更可溶于含水和其它质子溶剂。
本发明的β-发夹肽模拟物，或其组合物一般以有效地实现预期目的的量使用。可以理解，用量取决于特定应用。
为了用于治疗或预防对蛋白酶抑制剂治疗有反应的疾病，本发明的β-发夹肽模拟物或其组合物以治疗有效量给药或施用。治疗有效量是指有效地改善与蛋白酶活性有关的疾病的症状，或改善，治疗或预防与蛋白酶活性有关的疾病的量。治疗有效量的确定完全在本领域熟练技术人员的能力之内，尤其是考虑到本文所提供的详细描述。
起始剂量也可根据体内数据，如动物模型，使用本领域熟知的技术而确定。本领域普通技术人员可根据动物数据容易地优化对人的给药。
剂量和时间间隔可单个地调节以提供足以保持治疗作用的本发明β-发夹肽模拟物的血浆含量。注射给药的常规的病人剂量是约0.1-5mg/kg/天，优选约0.5-1mg/kg/天。治疗有效血清水平可通过每天供给多个剂量而实现。
β-发夹肽模拟物的供给量当然取决于所要治疗的主体，主体的重量，疾病的严重性，给药的方式和处方医师的判断。
通常，本文所述β-发夹肽模拟物的治疗有效的剂量提供治疗益处而不会引起实质的毒性。
本发明β-发夹肽模拟物的毒性在此可通过标准药物程序在细胞培养物或实验动物中，如，通过确定LD50(群体50％致死的剂量)或LD100(群体100％致死的剂量)而测定。毒性和治疗作用之间的剂量比率是治疗指数。具有高治疗指数的化合物是优选的。由这些细胞培养物分析和动物研究得到的数据可用于计算对人使用没有毒性的剂量范围。本发明β-发夹肽模拟物的剂量优选在包括具有很小或没有毒性的有效剂量的循环浓度范围内。剂量取决于所用剂量形式和所用给药途径可在该范围内变化。确切的制剂，给药途径和剂量可由各个医师根据病人的状态而选择(参见，如Fingl等人，1975治疗的药理基础，Ch.1，p.1)。
包含游离硫醇基团的具有结构式I的化合物，即包含具有结构式-(CH2)m(CHR61)sSR56(其中R56是H)的残基作为R2-R6，R8-R10，R12，R13，R15-R19，R21-R29，R33或R64的化合物可被固定在金涂覆薄片(wawers)上，且与配体的相互作用可利用所谓的表面等离子体共振(SPR)生物传感器分析而确定(参见M.Fivash，E.M.Towler和R.J.Fisher，Curr.Opin.inBiotechnol.1998，9，97-101；和R.L.Rich和D.G.Myszka，Curr.Opin.in Biotechnol.2000，11，54-61)。
以下实施例更详细说明本发明，但无意于以任何方式限定其范围。以下简称在这些实施例中使用 HBTU1-苯并三唑-1-基-四甲基脲_六氟磷酸盐 (Knorr等人，四面体通讯，1989，30，1927-1930) HOBt1-羟基苯并三唑 DIEA二异丙基乙基胺 HOAT7-氮杂-1-羟基苯并三唑 HATUO-(7-氮杂-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲_六氟磷酸盐 Carpino等人，四面体通讯，1994，35，2279-2281) 实施例 1.肽合成 第1个保护的氨基酸残基的偶联 将0.5g 2-氯三苯甲基氯树脂(Barlos等人，四面体通讯，1989，30，3943-3946)(0.83mMol/g，0.415mmol)填充到干燥烧瓶中。将树脂悬浮在CH2Cl2(2.5ml)中和在室温下在恒定搅拌下溶胀。树脂用0.415mMol(4eq)第一适当地保护的氨基酸残基(参见下文)和284μl(4eq)二异丙基乙基胺(DIEA)在CH2Cl2(2.5ml)中处理，将混合物在25℃下振荡15分钟，倒入预溶胀的树脂中并在25℃下搅拌18小时。树脂颜色变为紫色和溶液保持黄色。树脂被充分洗涤(CH2Cl2/MeOH/DIEA17/2/1；CH2Cl2，DMF；CH2Cl2；Et2O，分别3次)和在真空下干燥6小时。
加载量典型地是0.6-0.7mMol/g 制备以下预加载树脂Fmoc-Ser(tBu)O-氯三苯甲基树脂和Fmoc-AlaO-氯三苯甲基树脂。
1.1.程序1 合成使用Syro-肽合成仪(Multisyntech)使用24-96个反应容器而进行。在每个容器中放置60mg(树脂在加载之前的重量)以上树脂。以下反应循环被编程和进行 重复步骤3-6以加入每种氨基酸。
完全保护的肽片段的断裂 在合成完成之后，将树脂悬浮在1ml(0.39mMol)的TFA在CH2Cl2(v/v)的1％溶液中3分钟，过滤并将滤液用1毫升(1.17mMol，3eq.)DIEA在CH2Cl2(v/v)中的20％溶液中和。该程序重复两次以保证断裂的完成。滤液被蒸发至干燥并将产物完全去保护以通过反相-HPLC(柱C18)进行分析，检测线性肽合成的效率。
线性肽的环化反应 100mg完全保护的线性肽溶解在DMF(9ml，conc.10mg/ml)中。随后加入41.8mg(0.110mMol，3 eq.)HATU，14.9mg(0.110mMol，3eq)HOAt和1ml(0.584mMol)10％DIEA(在DMF(v/v)中)并将混合物在20℃下旋涡16小时和随后在高真空下浓缩。残余物在CH2Cl2和H2O/CH3CN(90/10v/v)之间分配。CH2Cl2相被蒸发得到完全保护的环状肽。
环状肽的去保护和纯化 将所得环状肽溶解在1ml包含95％三氟乙酸(TFA)，2.5％水和2.5％三异丙基硅烷(TIS)的断裂混合物中。将混合物在20℃下放置2.5小时并随后在真空下浓缩。将残余物溶解在H2O/乙酸(75/25v/v)的溶液中并将混合物用二-异丙基醚萃取。
水相在真空下干燥并随后将产物通过制备型反相HPLC纯化。
在冻干之后，得到一种作为白色粉末的产物并通过ESI-MS进行分析。包括HPLC停留时间和ESI-MS的分析数据在表1中给出。
实施例ex.1-11(n＝7)如表1所示。肽由偶联到树脂上的P3位氨基酸开始合成。起始树脂是Fmoc-Ser(tBu)O-氯三苯甲基树脂和Fmoc-AlaO-氯三苯甲基树脂，制备如上。线性肽在固体载体上根据程序1按以下顺序合成P4-P6-P7-DPro-Pro-P1-P2-P3-树脂，按照所述进行断裂，环化，去保护和纯化。
实施例ex.12和13(n＝7)也在表1中给出。肽由接枝到树脂上的P3位氨基酸开始合成。起始树脂是Fmoc-Ser(tBu)O-氯三苯甲基树脂，制备如上。线性肽在固体载体上根据程序1分别按以下顺序合成P4-P5-P6-P7-DPro-(A8’-1)-P1-P2-P3-树脂(ex 12)和P4-P5-P6-P7-DPro-(A8”-1)-P1-P2-P3-树脂(ex.13)，按照所述进行断裂，环化，去保护和纯化。
实施例ex.14(n＝7)也在表1中给出。肽由接枝到树脂上的P3位氨基酸开始合成。起始树脂是Fmoc-Ser(tBu)O-氯三苯甲基树脂，制备如上。线性肽在固体载体上根据程序1按以下顺序合成P4-P5-P6-P7-(c1-1)-P1-P2-P3-树脂，按照所述进行断裂，环化，去保护和纯化。
结构单元(c1-1)描述如下。
实施例ex.15(n＝11)同样在表1中给出。肽由偶联到树脂上的P5位氨基酸开始合成。起始树脂是Fmoc-Ser(tBu)O-氯三苯甲基树脂，制备如上。线性肽在固体载体上根据程序3(见下文)按以下顺序合成P6-P7-P8-P9-P10-P11-DPro-Pro-P1-P2-P3-P4-P5-树脂，按照所述进行断裂，环化，氧化，去保护和纯化。
表1实施例ex.1-15
a)Vydac C-18-柱；梯度5％MeCN/H2O+0.1％CF3COOH 2min.；随后50％MeCN/H2O+0.1％CF3COOH 15min.和50-100％MeCN/H2O+0.1％CF3COOH 4min. b)Vydac C-18-柱；梯度5-60％MeCN/H2O+0.1％CF3COOH 20min. c)Nd没有测定 1.2.程序2 实施例ex.13也使用程序2合成。
肽合成通过固体相方法在肽合成仪-ABI 433A上使用标准Fmoc化学而进行。
第一个氨基酸，Fmoc-Ser(tBu)-OH(0.68g，1.2当量)在CH2Cl2(20mL)中的DIEA(1.12mL，4当量)的存在下通过在室温下旋流3hr而被偶联至2-氯三苯甲基氯树脂(Barlos等人，四面体通讯，1989，30，394 3-3946)(2g，0.83mmol/g)。树脂随后用3×CH2Cl2/MeOH/DIEA(17∶2∶1)，3×CH2Cl2，2×DMF，2×CH2Cl2，2×MeOH洗涤。最后，树脂在真空下干燥，取代水平以重量增加来度量(约0.6mmol/g)。
如果希望使用不同的酰基化剂，具有合成线性肽的树脂，Ile-Lys(Boc)-Pro-Pro-Ile-DPro-212-Thr(tBu)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-树脂，优选被分成相等的部分并放在不同的反应容器中以按照平行形式进行酰基化反应。在以下步骤中的偶联和去保护反应通过Kaiser’s试验而检测(Kaiser等人，分析生物化学，1970，43，595)。
Alloc保护基团的去除 在氩下向线性肽树脂(100mg/反应容器)中加入Pd(PPh3)4(15mg，0.5当量)，随后加入无水CH2Cl2(10mL)和苯基硅烷(17μL，30当量)。反应混合物在暗处放置1小时，过滤，并将该树脂用CH2Cl2，DMF，和CH2Cl2洗涤两次。
4-氨基-脯氨酸基团的酰基化 在DMF(2mL)中在室温下向树脂中加入相应的酰基化剂(通常羧酸(R64’COOH，3当量)，HBTU(22.3mg，4当量)，HOBt(8mg，4当量)和DIEA(125μL，6当量)1.5-2hrs。将树脂过滤，用2×DMF，3×CH2Cl2，2×DMF洗涤。
Nα-Fmoc基团的去保护 Fmoc-基团的去保护通过将树脂用20％哌啶在DMF中处理20min而实现。树脂随后被过滤和用DMF，和CH2Cl2洗涤三次，并用DMF，和CH2Cl2洗涤两次。
肽从树脂的断裂 线性侧链保护的肽通过在室温下使用AcOH∶TFE∶CH2Cl2(2∶2∶6，v/v/v)2 hrs而从树脂断裂。树脂被过滤并用AcOH∶TFE∶DCM的混合物洗涤两次和用CH2Cl2洗涤一次。滤液随后用己烷稀释(14倍，体积计)并浓缩。用己烷重复两次蒸发以去除痕量的AcOH。残余物在真空下干燥。线性保护肽的产率一般是约40-50mg。
线性保护肽的环化反应 环化反应在DMF中在浓度5mg/mL下使用HATU(13.12mg，3当量)，HOAT(4.7mg，3当量)，DIEA(153μL，6当量)进行。反应混合物在室温下搅拌16hrs并通过HPLC检测反应的完成。在蒸发DMF之后，将CH3CN/H2O(90/10，v/v)加入残余物中并用DCM萃取。有机层用水洗涤一次并蒸发至无水。在真空下干燥。
侧链保护基团的断裂 侧链保护基团的最终去保护通过将肽用TFA∶三异丙基硅烷∶H2O(95∶2.5∶2.5，v/v/v)在室温下处理3hrs而进行。TFA随后被蒸发并将残余物用冷却醚研磨。
纯化 将如此得到的粗肽通过HPLC在VYDAC C18制备柱上使用在30min内5-60％CH3CN/H2O+0.1％TFA作为梯度和流速10毫升/min而分析和纯化。最终肽的纯度通过分析型HPLC和ESI-MS而检查。
1.3.程序3 程序3描述了具有β-链二硫键的β-发夹模拟物的合成。
n＝11肽根据程序1由偶联到树脂上的P5位氨基酸开始合成。线性肽在固体载体上根据程序1按以下顺序合成P6-P7-P8-P9-P10-P11-DPro-Pro-P1-P2-P3-P4-P5-树脂，其中在P2和P10位引入了Fmoc-Cys(Acm)OH或Fmoc-Cys(Tr)OH。线性肽按照程序1所述进行断裂和环化。
如果Cys(Acm)作为保护的结构单元被引入，则将环化侧链保护β-发夹模拟物溶解在甲醇(0.5毫升)中，在室温下向其中滴加碘在甲醇(1N，1.5当量)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌4小时并将溶剂蒸发。粗品随后按照步骤1所述进行去保护和纯化。
如果Cys(Tr)作为保护的半胱氨酸结构单元被引入，则将环状完全保护的保护β-发夹模拟物用包含三氟乙酸/苯硫基甲烷/苯酚/H2O/乙烷-二硫酚/三异丙基硅烷(82.5∶5∶5∶2.5∶2.5∶2.5)的混合物在室温下处理2小时。将还原的肽通过在乙酸铵缓冲剂中搅拌30分钟而经受空气氧化并按照程序1纯化。
2.模板的合成 2.1.(2S，4S)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]-1-[(9H-芴-9-基)甲氧基羰基]-脯氨酸(212)和(2S，4R)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]-1-[(9H-芴-9-基)甲氧基-羰基]脯氨酸(217)的合成如方案42和43所示。
方案42
iSOCl2，MeOH；iiBoc2O，DMAP，Et3N；iiipNO2C6H4SO2Cl，Et3N；ivNaN3，DMF；vSnCl2，二_烷/H2O；viClCOOCH2CH＝CH2，含水NaHCO3，二_烷viiLiOH，MeOH，H2O；viiiTFA，CH2Cl2；ixFmoc-OSu，DIBA (2S，4S)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]-1-[(9H-芴-9-基)甲氧基羰基]-脯氨酸(212) i，ii在0℃下向(2S，4R)-4-羟基脯氨酸(30g，0.18mol)在无水甲醇(300ml)中的溶液中逐滴加入亚硫酰氯(38ml，2.5eq，0.45mol)。该溶液在氮下被加热回流并搅拌3h。随后溶液通过旋转蒸发而浓缩并将酯通过加入二乙基醚而沉淀。在过滤之后，将白色固体用二乙基醚洗涤，随后在HV下干燥(2S，4R)-4-羟基脯氨酸-甲基酯-盐酸盐，一种白色固体(29.9g，90％)。％)。TLC(CH2Cl2/MeOH/水70∶28∶2)Rf0.82。IR(KBr)3378s(br.)，2950m，2863w，1745s，1700s，1590m，1450s，1415s，1360s，1215s，1185s，1080m，700m。1H-NMR(300MHz，MeOH-d4)4.66-4.55(m，2H，H-C(4)，H-C(2))；3.85(s，3H，H3C-O)；3.45(dd，J＝12.2，3.8，1H，H-C(5))；3.37-3.25(m，1H，H-C(5))；2.44-2.34(m，1H，H-C(3))，2.27-2.12(m，1H，H-C(3))。13C-NMR(75MHz，MeOH-d4)170.8(s，COOMe)；70.8(d，C(4))；59.6(d，C(2))；55.2(t，C(5))；54.2(q，Me)；38.7(t，C(3))。CI-MS(NH3)146.1([M-Cl]+)。
将(30g，0.17mmol)的以上中间体溶解在CH2Cl2(300ml)中，冷却至0℃并逐滴加入三乙基胺(45ml，1.5eq，0.25mol)。随后加入在CH2Cl2(15ml)中的二碳酸二叔丁基酯(54.0g，1.5eq，0.25mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(2.50g，0.1eq，17mmol)并将溶液在室温下搅拌过夜。随后溶液用1N柠檬酸水溶液，饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，蒸发并将残余物在高真空下干燥(2S，4R)-4-羟基-1-[(叔-丁氧基)羰基]脯氨酸-甲基酯(209)，一种白色固体(39.6g，78％)。TLC(CH2Cl2/MeOH 9∶1)Rf 0.55。[α]24D＝-55.9(c＝0.983，CHCl3)。IR(KBr)3615w，3440w(br.)，2980m，2950m，2880m，1750s，1705s，1680s，1480m，1410s，1370s，1340m，1200s，1160s，1130m，1090m，1055w，960w，915w，895w，855m，715m。1H-NMR(300MHz，CDCl3)4.47-4.37(m，2H，H-C(4)，H-C(2))；3.73(s，3H，H3C-O))；3.62(dd，J＝11.8，4.1，1H，H-C(5))；3.54-3.44(m，1H，H-C(5))；2.32-2.25(m，1H，H-C(3))；2.10-2.03(m，1H，H-C(3))；1.46+1.41(2s，9H，tBu)。13C-NMR(75MHz，CDCl3)173.6(s，COOMe)；154.3+153.9(2s，COOtBu)；80.3(s，C-tBu)；70.0+69.3(2d，C(4))；57.9+57.4(2d，C(2))；54.6(t，C(5))；51.9(q，Me)；39.0+38.4(2t，C(3))；28.1+27.6(2q，tBu)。CI-MS246.2([M+H]+)；190.1([M-tBu+H]+)；146.1([M-BOC+H]+)。
iii，iv在0℃下将(39g，0.16mol)209溶解在CH2Cl2(300ml)中，随后加入4-硝基苯磺酰氯(46g，1.3eq，0.21mol)和Et3N(33ml，1.5eq，0.24mol)。随后将溶液搅拌过夜并逐渐达到室温，用1N氢氯酸，饱和NaHCO3水溶液洗涤和干燥(Na2SO4)。溶剂被蒸发并将粗产物通过在硅胶上用(2∶1)己烷/AcOEt过滤而纯化。产物从己烷/AcOEt中结晶(2S，4S)-4-[(对-硝基苄基)磺酰基氧基]-1-[(叔-丁氧基)羰基]脯氨酸甲基酯，一种白色晶体(46.4g，65％)。TLC(己烷/AcOEt 1∶1)Rf 0.78.M.p.93-95℃。[α]20D＝-32.3°(c＝0.907，CHCl3)。IR(KBr)3110w，3071w，2971w，1745s，1696s，1609s，1532s，1414s，1365s，1348m，1289m，1190m，1173m，1122w，1097w，1043w，954w，912w，755w，578w.1H-NMR(600MHz，CDCl3)8.42-8.34(m，2H，H-C(Nos))；8.11-8.04(m，2H，H-C(Nos))；5.14(s，1H，H-C(4))；4.39-4.28(m，1H，H-C(2))；3.70-3.56(m，5H，H2-C(5)，H3C-O)；2.58-2.38(m，1H，H-C(3))；2.25-2.11(m，1H，H-C(3))；1.37+1.33(2s，9H，tBu)。13C-NMR(150MHz，CDCl3)172.4+172.2(2s，COOMe)；153.6+153.0(2s，COOtBu)；150.8+142.0(2s，C(Nos))；129.0+124.6(2d，C(Nos))；80.4(s，C-tBu)；80.8+79.9(2d，C(4))；57.1+56.9(2d，C(2))；52.2+51.7(2t，C(5))；52.3(q，Me)；37.1+35.9(2t，C(3))；28.0(q，tBu)。ESI-MS(MeOH+NaI)453.0([M+Na]+)。
将(38g，88mmol)的以上中间体溶解在DMF(450ml)中，随后在加入叠氮化钠(34g，6eq，0.53mol)时加热至40℃并将溶液搅拌过夜。DMF被蒸发并将固体悬浮在二乙基醚中。悬浮液用水洗涤并干燥(Na2SO4)。溶剂被蒸发并将产物在高真空下干燥(2S，4S)-4-叠氮基-1-[(叔-丁氧基)羰基]脯氨酸甲基酯(210)，黄色油(21.1g，88％)。[α]20D＝-36.9(c＝0.965，CHCl3)。1H-NMR(600MHz，CDCl3)4.46-4.25(2m，1H，H-C(2))；4.20-4.10(m，1H，H-C(4))；3.80-3.65(m，4H，H-C(5)，H3C-O)；3.53-3.41(m，1H，H-C(5))；2.54-2.39(m，1H，H-C(3))；2.21-2.12(m，1H，H-C(3))；1.47+1.41(2s，9H，tBu)。13C-NMR(150MHz，CDCl3)172.2+171.9(2s，COOMe)；153.9+153.4(2s，COOtBu)；80.5(s，C-tBu)；59.2+58.2(2d，C(4))；57.7+57.3(2d，C(2))；52.4+52.2(2q，Me)；51.2+50.7(2t，C(5))；36.0+35.0(2t，C(3))；28.3+28.2(2q，tBu)。EI-MS(70ev)20.1([M]+)；227.1([M-CO2+H]+)；169.1([M-BOC+H]+)；。
v，vi将(21.1g，78mmol)的以上中间体溶解在二_烷/水的(3∶1)-混合物(500ml)并将SnCl2(59.2g，4eq，0.31mol)在0°下加入，然后将该溶液搅拌30min.并逐渐达到室温和搅拌另外5h。在用固体NaHCO3调节pH至8之后，加入氯甲酸烯丙基酯(41.5ml，5eq，0.39mol)并将溶液在室温下搅拌过夜。反应混合物被蒸发并用AcOEt萃取。有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，溶剂蒸发并将产物在高真空下干燥(2S，4S)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]-1-[(叔-丁氧基)羰基]脯氨酸甲基酯(211)，一种透明浓稠油(22.3g，87％)。[α]20D＝-30.2°(c＝1.25，CHCl3)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)5.98-5.77(m，1H，H-C(β)(Alloc))；5.32-5.12(m，2H，H2-C(γ)(Alloc)；4.59-4.46(m，2H，H2-C(α)(Alloc))；4.40-4.16(m，2H，H-C(4)，H-C(2))；3.80-3.53(m，4H，H-C(5)，H3C-O)；3.53-3.31(m，1H，H-C(5))；2.54-2.17(m，1H，H-C(3))；1.98-1.84(m，1H，H-C(3))；1.41+1.37(2s，9H，tBu)。ESI-MS(MeOH+CH2Cl2)351.2([M+Na]+)；229.0([M-BOC+H]+)。
vii-ix将22g，67mmol)211溶解在甲醇/水的(4∶1)-混合物(100ml)中并在室温下加入LiOH(5g，2eq，134mmol)，然后将溶液搅拌3.5h。反应混合物被蒸发并用1N氢氯酸(100ml)和AcOEt萃取。溶剂被去除并将所得固体溶解在1∶1 TFA/CH2Cl2(200毫升)中和搅拌2h。溶剂被蒸发并将产物在高真空下干燥(2S，4S)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]脯氨酸，一种透明油(21g，96％)1H-NMR(600MHz，MeOH-d4)5.98-5.85(m，1H，H-C(β)(Alloc))；5.30(dd，J＝17.1，1.5Hz，1H，H-C(γ)(Alloc))；5.12(d，J＝10.7Hz，1H，H-C(g)(Alloc))；4.54(d，J＝4.4Hz，2H，H2-C(α)(Alloc))；4.44(t，J＝8.9Hz，1H，H-C(2))；4.36-4.27(m，1H，H-C(4))；3.58(dd，J＝12.2，7.3Hz，1H，H-C(5))；3.34-3.32(m，1H，H-C(5))；2.73(ddd，J＝13.6，8.7，7.2Hz，1H，H-C(3))；2.23-2.15(m，1H，H-C(3))。13C-NMR(150MHz，MeOH-d4)171.3(s，COOMe)；158.3(s，COOAllyl)；134.1(d，C(β)(Alloc))；118.0(t，C(γ)(Alloc))；66.8(t，C(α)(Alloc))；59.7(d，C(2))；51.3(d，C(4))；51.1(t，C(5))；34.9(t，C(3))。ESI-MS(DCM+MeOH)237.0([M+Na]+)；215.0([M+H]+)。
将(15g，70mmol)的以上中间体和9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺(28g，1.2eq，84mmol)溶解在DCM(700ml)中并加入DIEA(48ml，6eq，0.42mol)，然后将该溶液在室温下搅拌过夜。溶剂被去除并将残余物溶解在AcOEt中，然后用1N氢氯酸洗涤并干燥(Na2SO4)。在蒸发之后，粗产物通过在硅胶上使用(3∶1)己烷/AcOEt至AcOEt的梯度过滤而纯化。溶剂被蒸发和并将残余物在-20℃下从己烷中结晶。产物在高真空下干燥(2S，4S)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]-1-[(9H-芴-9-基)甲氧基羰基]-脯氨酸(212)，一种白色固体(23.8mg，78％)[α]20D＝-27.0(c＝1.1，CHCl3)。IR(KBr)3321w(br.)，3066w，2953w，1707s，1530m，1451s，1422s，1354m，1250m，1205m，1173m，1118m，1033m，977m，936m，759m，739s，621m，597w，571w，545s.1H-NMR(300MHz，MeOH-d4)7.88-7.78(m，2H，H-C(4‘)(Fmoc))；7.71-7.61(m，2H，H-C(1‘)(Fmoc))；7.49-7.29(m，4H，H-C(3‘)(Fmoc)，H-C(2‘)(Fmoc))；6.08-5.68(m，1H，H-C(β)(Alloc))；5.41-5.17(m，2H，H2-C(γ)(Alloc)；4.58(s，2H，H2-C(α)(Alloc))；4.74-4.17(m，5H，H2-C(10‘)(Fmoc)，H-C(9‘)(Fmoc)，H-C(4)，H-C(2))；3.94-3.73(m，1H，H-C(5))；3.41-3.26(m，1H，H-C(5))；2.74-2.54(m，1H，H-C(3))；2.12-1.92(m，1H，H-C(3))。ESI-MS(DCM+MeOH)459.3([M+Na]+)；437.3([M+H]+)。
方案43
iAc2O，AcOH；iiSOCl2，MeOH；iiiBoc2O，DMAP，Et3N；vipNO2C6H4SO2Cl，Et3N；vNaN3，DMF；viSnCl2，二_烷/H2O；viiClCOOCH2CH＝CH2，含水NaHCO3，二_烷viiiLiOH，MeOH，H2O；ixTFA，CH2Cl2；xFmoc-OSu，DIEA 2.2.(2R，4S)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]-1-[(9H-芴-9-基)甲氧基羰基]-脯氨酸(217) i乙酸酐(1.02kg，5.3eq，10mol)在冰乙酸(31)中的溶液被加热至50℃ 并将(2S，4R)-4-羟基脯氨酸(208)(247g，1.88mol)一次加入。溶液回流5.5h.，冷却至室温并将溶剂在减压下被去除，得到一种浓稠油。油随后溶解在2N氢氯酸(3.51)中和加热回流4h，然后用木炭处理并通过硅藻土(Celite)滤过。随着溶液被蒸发，形成白色针，然后过滤。产物干燥在高真空下干燥(2R，4R)-4-羟基脯氨酸-盐酸盐(213)，白色晶体针(220.9g，70％)。M.p.117℃。[α]20D＝+19.3 °(c＝1.04，水)。IR(KBr)3238s 3017s，2569m，1712s，1584m，1376s，1332m，1255s，1204m，1181w，1091w，1066w，994w，725m，499s.1H-NMR(600MHz，MeOH-d4)9.64(s，1H，H-N)；8.89(s，1H，H-N)；4.55-4.53(m，1H，H-C(4))；4.51(dd，J＝10.4，3.6Hz，1H，H-C(2))；3.44-3.35(m，2H，H2-C(5))；2.54-2.48(m，1H，H-C(3))；2.40-2.34(m，1H，H-C(3))。13C-NMR(150MHz，MeOH-d4)171.9(s，COOH)；70.3(d，C(4))；59.6(d，C(2))；55.0(t，C(5))；38.5(t，C(3))。EI-MS(NH3)132.1([M-Cl]+)。滤液进一步浓缩得到另外59.5g(19％)。
ii，iii在0℃下向213(30g，0.18mol)在无水甲醇(550ml)中的溶液逐滴加入亚硫酰氯(38ml，2.5eq，0.45mol)。溶液在氮气氛下回流3h。溶液被蒸发并且酯盐酸盐通过加入二乙基醚而沉淀。在过滤之后，将白色固体用二乙基醚洗涤并在高真空下干燥(2R，4R)-4-羟基脯氨酸甲基酯-盐酸盐，白色固体(29g，89％)。[α]20D＝+8.6°(c＝0.873，MeOH)。IR(KBr)3388s(br.)，2980s(br.)，1730s，1634m，1586s，1384s，1248s，1095s，1064s，1030m，877m。1H-NMR(300MHz，MeOH-d4)4.59-4.44(m，2H，H-C(4)，H-C(2))；3.81(s，3H，H3C-O)；3.37-3.31(m，2H，H2-C(5))；2.50-2.37(m，1H，H-C(3))，2.37-2.27(m，1H，H-C(3))。13C-NMR(75MHz，MeOH-d4)170.9(s，COOMe)；70.2(d，C(4))；59.8(d，C(2))；55.1(t，C(5))；))；54.1(q，C(Me))；38.4(t，C(3))。EI-MS(NH3)146.1([M-Cl]+)。
将(10g，55mmol)的以上中间体溶解在CH2Cl2(100ml)中，冷却至0℃并逐滴加入三乙基胺(15.2ml，2eq，0.11mol)。随后加入在CH2Cl2(10ml)中的二碳酸二叔丁基酯(18.0g，1.5eq，83mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(0.67g，0.1eq，5mmol)并将溶液在RT下搅拌过夜。溶液用1M柠檬酸水溶液和饱和含水NaHCO3溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，溶剂蒸发并在高真空下干燥(2R，4R)-4-羟基-1-[(叔丁氧基)-羰基]脯氨酸甲基酯(214)，一种白色固体(13g，97％)。[α]20D＝+13.0°(c＝1.06，CHCl3)。IR(KBr)3466s(br.)，2985s，2930m，1729s，1679s，1424s，1283m，1262m，1122s，1089s，969m，770m。1H-NMR(300MHz，CDCl3)4.43-4.26(m，2H，H-C(4)，H-C(2))；3.80+3.79(2s，3H，H3C-O))；3.76-3.47(m，2H，H2-C(5))；2.44-2.24(m，1H，H-C(3))；2.16-2.03(m，1H，H-C(3))；1.47+1.43(2s，9H，tBu)。ESI-MS268.1([M+Na]+)。
iv，v将214(12.2g，50mmol)溶解在CH2Cl2(130ml)中，冷却至0℃并加入4-硝基苯磺酰氯(14.3g，1.3eq，65mmol)和Et3N(10.3ml，1.5eq，75mmol)。反应混合物搅拌过夜并逐渐达到室温。该溶液用1N氢氯酸和饱和含水NaHCO3溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，溶剂被蒸发并将粗产物通过在硅胶上使用己烷/AcOEt的(2∶1)-混合物过滤而纯化18g(84％)。产物随后从己烷/AcOEt中重结晶(2R，4R)-4-[(对-硝基苄基)磺酰基氧基]-1-[(叔-丁氧基)羰基]脯氨酸-甲基酯，一种白色晶体(13.7g，64％)。TLC(己烷/AcOEt 1∶1)Rf 0.76.M.p.113-115℃。[α]20D＝+21.6°(c＝0.924，CHCl3)。IR(KBr)3112s(br.)，2981s，2955s，2882m，1755s，1683s，1532s，1413s，1375s，1348s，1192s，928s，911s，759m，745s，610s.1H-NMR(600MHz，CDCl3)8.45-8.35(m，2H，H-C(Nos))；8.15-8.06(m，2H，H-C(Nos))；5.27-5.16(m，1H，H-C(4))；4.53-4.32(m，1H，H-C(2))；3.75-3.60(m，5H，H2-C(5)，H3C-O)；2.59-2.35(m，2H，H2-C(3))；1.42+1.39(2s，9H，tBu)。13C-NMR(150MHz，CDCl3)171.8+171.6(s，COOMe)；153.8+153.4(s，COOtBu)；151.0+142.6(s，C(Nos))；129.2+124.7(d，C(Nos))；81.0(s，C-tBu)；80.8+79.7(d，C(4))；57.4+57.1(d，C(2))；52.6+52.5+52.3+51.8(t，C(5)，q，Me)；37.2+36.3(t，C(3))；28.5+28.3(q，tBu)。ESI-MS(DCM+MeOH+NaI)453.2([M+Na]+)。
将(13g，30mmol)的以上中间体溶解在DMF(200ml)中，加热至40℃并加入叠氮化钠(14.3g，6eq，180mmol)，然后将反应混合物搅拌过夜。反应混合物被蒸发并将残余物悬浮在二乙基醚中。将悬浮液过滤，滤液用水洗涤并将有机相干燥(Na2SO4)。溶剂被蒸发并将产物在高真空下干燥(2R，4S)-4-叠氮基-1-[(叔丁氧基)羰基]脯氨酸甲基酯(215)，一种黄色油(8.15g，99％)。[α]20D＝+42.8 °(c＝1.05，CHCl3)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)4.58-4.37(m，1H，H-C(2))；4.34-4.23(m，1H，H-C(4))；3.92-3.51(m，5H，H2-C(5)，H3C-O)；2.52-2.33(m，1H，H-C(3))；2.33-2.20(m，1H，H-C(3))；1.56+1.51(2s，9H，tBu)。CI-MS(NH3)288.2([M+NH4]+)；271.1([M+H]+)。
vi，vii将215(8g，30mmol)溶解在二_烷/水的(3∶1)-混合物(400ml)中，冷却至0℃并加入SnCl2(22.4g，4eq，120mmol)，然后将反应混合物在0°下搅拌30min.，逐渐暖至室温并搅拌另外5h。在用固体NaHCO3调节溶液的pH至8之后，加入氯甲酸烯丙基酯(15.7ml，5eq，150mmol)。反应混合物在室温下搅拌过夜，蒸发和用AcOEt萃取，然后将有机相用盐水洗涤。在干燥有机相(Na2SO4)之后，溶剂被蒸发并将产物在高真空下干燥(2R，4S)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]-1-[(叔-丁氧基)羰基]脯氨酸-甲基酯，一种透明浓稠油(216)(8.7g，89％)。[α]20D＝+41.9°(c＝0.928，CHCl3)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)5.98-5.87(m，1H，H-C(β)(Alloc))；5.34-5.02(m，2H，H2-C(γ)(Alloc)；4.62-4.49(m，2H，H2-C(α)(Alloc))；4.41-4.23(m，2H，H-C(4)，H-C(2))；3.82-3.66(m，4H，H-C(5)，H3C-O)；3.43-3.20(m，1H，H-C(5))；2.33-2.07(m，2H，H2-C(3))；1.43+1.39(2s，9H，tBu)。CI-MS(NH3)329.1([M+H]+)。
vii-x将216(8.4g，25mmol)在室温下溶解在甲醇/水的(4∶1)-混合物(100ml)中，加入LiOH(2.2g，2eq，50mmol)并将溶液搅拌过夜。甲醇被蒸发并将残余物倒入1N氢氯酸(100ml)和用AcOEt萃取。溶剂被去除并将残余物溶解在TFA/CH2Cl2的(1∶1)-混合物(2O0毫升)中和搅拌2h。溶剂被蒸发并将产物在高真空下干燥(2R，4R)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]脯氨酸，一种透明油(5.2g，96％)1H-NMR(300MHz，MeOH-d4)6.04-5.88(m，1H，H2-C(B)(Alloc))；5.38-5.19(m，2H，H2-C(γ)(Alloc)；4.64-4.54(m，3H，H2-C(α)(Alloc)，H-C(4))；4.39-4.22(m，1H，H-C(2))；3.71-3.60(m，1H，H-C(5))；3.45-3.32(m，1H，H-C(5))；2.51-2.41(m，2H，H2-C(3))。CI-MS(NH3)215.1([M+H]+)。
将(200mg，0.86mmol)的以上中间体和9-芴基甲氧基羰基琥珀酰亚胺(440mg，1.5eq，1.3mmol)溶解在CH2Cl2(10ml)中并加入DIEA(466μl，4eq，3.44mmol)，然后将溶液在室温下搅拌过夜。溶剂被去除并将残余物溶解在AcOEt中，用1N氢氯酸洗涤并干燥(Na2SO4)。在蒸发之后，粗产物通过在硅胶上使用(3∶1)己烷/AcOEt至AcOEt的梯度过滤而纯化。溶剂与CH2Cl2共蒸发并将产物在高真空下干燥(2R，4S)-4-[(烯丙基氧基)羰基氨基]-1-[(9H-芴-9-基)甲氧基-羰基]-脯氨酸(217)，白色固体(90mg，33％)[α]20D＝+29.3°(c＝1.08，CHCl3)。IR(KBr)3314s(br.)，3066s(br.)，2952s(br.)，1708s(br.)，1536m，1424s，1353s，1126m，1030m，909m，759m，738s，620m。1H-NMR(300MHz，CDCl3)8.74(s，1H，H-N)；7.7 9-7.66(m，2H，H-C(4‘)(fmoc))；7.6 2-7.4 9(m，2H，H-C(1‘)(fmoc))；7.44-7.22(m，4H，H-C(3‘)(fmoc)，H-C(2‘)(fmoc))；6.03-5.74(m，1H，H-C(β)(Alloc))；5.41-5.07(m，2H，H2-C(γ)(Alloc)；4.74-4.17(m，7H，H2-C(10‘)(fmoc)，H-C(9‘)(fmoc)，H-C(4)，H-C(2)，H2-C(α)(Alloc))；3.91-3.76(m，1H，H-C(5))；3.48-3.25(m，1H，H-C(5))；2.45-2.08(m，2H，H2-C(3))。ESI-MS(MeOH)437.3([M+H]+)；ESI-MS(MeOH+Na)459.1([M+Na]+)。
2.3.从衍生物210和215开始，重要前体219a和221a可根据方案44而制备。
R64正己基(219a，221a)。
方案44
iSnCl2，二_烷/H2O；iiR64COCl，二异丙基乙基胺，CH2Cl2；iiiLiOHx1H2O，MeOH，H2O；ivTFA，CH2Cl2；vFmocOSu，Na2CO3水溶液，二_烷 i，ii典型的程序 在0℃下向78mmol叠氮化物210和215在二_烷/水的(3∶1)-混合物(500ml)中加入SnCl2(59.2g，4eq，0.31mol)并将溶液搅拌30分钟。反应混合物逐渐暖至室温并搅拌另外5小时。在用固体NaHCO3调节pH至8之后，反应混合物用CH2Cl2萃取，有机级分干燥(MgSO4)，蒸发并将残余物在减压下干燥。将残余物溶解在CH2Cl2(300毫升)中，用冰浴冷却至4°，随后在4℃下加入DIEA(20.0毫升，117mmol)和适当的酰氯R64’COCl(101.0mmol)在CH2Cl2(50毫升)中的溶液。反应混合物在4°下搅拌1小时和在室温下搅拌18小时并用HCl aq. (0.5N，200毫升)和CH2Cl2萃取。有机级分被干燥(MgSO4)，蒸发和并将残余物在SiO2上使用乙酸乙基酯/己烷的梯度进行色谱处理，得到218a和220a，然后按照216转化成217时所述转化成最终产物219a和221a。总产率是50-60％。
模板(b1) (2S，6S，8aR)-8a-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}全氢-5，8-二氧代-{[(9H-芴-9-基)甲氧基羰基]氨基}-吡咯并[1，2-a]吡嗪-6-乙酸(222)的合成
在氩下向250mg(0.414mmol){(2S，6S，8aR)-8a-[(叔丁基)氧基羰基]甲基}全氢-5，8-二氧代-{[(9H-芴-9-基)甲氧基羰基]氨基}-吡咯并[1，2-a]吡嗪-6-乙酸烯丙基酯在二氯甲烷/甲醇的脱气混合物(9∶1，3毫升)中的搅拌溶液加入25mg(0.0216mmol)四(三苯基膦)钯，0.05毫升乙酸和0.025毫升N-甲基吗啉。反应混合物在室温下搅拌48小时，然后倾倒到水和二氯甲烷上。有机相被干燥(MgSO4)，蒸发并将残余物在SiO2上使用二氯甲烷/甲醇(9∶1)色谱处理，得到180mg(77％)(2S，6S，8aR)-8a-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}全氢-5，8-二氧代-{[(9H-芴-9-基)-甲氧基羰基]氨基}-吡咯并[1，2-a]吡嗪-6-乙酸(222)，一种白色粉末。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)8.30(s，1H)；7.88(d，J＝7.2，2H)；7.67(d，J＝7.4，2H)；7.62(br.s，1H)；7.41(t，J＝7.2，2H)；7.33(t，J＝7.4，2H)；4.35-4.2(m，5H)；3.55(br.d，J＝6.3，2H)；2.8-2.55(m，3H)；2.45-2.25(m，2H)；2.1-1.95(m，1H)；1.35(s，9H)；MS(ESI)586.1(M+Na)+，564.1(M+H)+。
模板(c1)
实验程序描述于W.Bannwarth，A.Knierzinger，K.Müller，D.Obrecht，A.Trzeciak，EP 0 592 791 A2，1993。
3.生物方法 3.1.酶分析 活性酶浓度使用Hendersen描述的公式(P.J.F.Hendersen，Biochem.J.1972，127，321-333)计算。抑制剂浓度通过定量氨基酸分析而确定。所有的分析重复一式四份。
抗胰蛋白酶活性的测定 胰蛋白酶的溶液与递增浓度抑制剂一起温育5分钟。分析在20℃下在包含10mM CaCl2的Tris-HCl缓冲剂(pH7.8，100mM)中进行。底物是N-α-苯甲酰基-L-精氨酸-4-硝基苯胺(3.2mM)，起始反应速率在30分钟内在405nm下监测。
抗弹性蛋白酶活性的测定 如上，除了底物是N-琥珀酰-L-丙氨酰-L-丙氨酰-L-脯氨酰-L-苯丙氨酸-4-硝基苯胺(1.6mM)。
表观Ki值通过将起始速率数据拟合至以下等式而计算，其中假设竞争性紧密结合抑制(J.F.Williams，J.F.Morrison，Methods Enzymol.1979，63，437-467) 抗组织蛋白酶G活性的测定 10毫升组织蛋白酶G的溶液(0.2U/mL，对应于约2μM，购自Calbiochem)与递增浓度的抑制剂一起温育15分钟。分析在37℃下在总体积700毫升的包含0.05mol/L CaCl2的HEPES缓冲剂(pH7.5；0.1mol/L)中进行。然后，加入70微升底物(N-琥珀酰-L-丙氨酰-L-丙氨酰-L-脯氨酰-L-苯丙氨酸-4-硝基苯胺，20mM，在DMSO中)。对硝基N-酰苯胺的释放在405nm下监测以确定反应的起始速率。每种测量重复三次(A.J.Barrett，酶学中的方法(Methods in Enzymology)，1981，80，561-565)。
3.2.结果 Nd没有测定
序列表
<110>POLYPHOR LTD
<120>作为丝氨酸蛋白酶抑制剂的模板固定肽模拟物
<130>P927PCT
<140>PCT/EP 01/14528
<141>2001-12-11
<160>15
<170>PatentIn Ver.2.1
<210>1
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>1
Thr Lys Ser Ile Pro Pro Ile Xaa Pro
1 5
<210>2
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>2
Ala Lys Ser Ile Pro Pro Ile Xaa Pro
1 5
<210>3
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>3
Thr Ala Ser Ile Pro Pro Ile Xaa Pro
1 5
<210>4
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>4
Thr Lys Ala Ile Pro Pro Ile Xaa Pro
1 5
<210>5
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>5
Thr Lys Ser Ala Pro Pro Ile Xaa Pro
1 5
<210>6
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>6
Thr Lys Ser Ile Ala Pro Ile Xaa Pro
1 5
<210>7
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>7
Thr Lys Ser Ile Pro Ala Ile Xaa Pro
1 5
<210>8
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>8
Thr Lys Ser Ile Pro Pro Ala Xaa Pro
1 5
<210>9
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>9
Thr Tyr Ser Ile Pro Pro Ile Xaa Pro
1 5
<210>10
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>10
Thr Trp Ser Ile Pro Pro Ile Xaa Pro
1 5
<210>11
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<400>11
Thr Phe Ser Ile Pro Pro Ile Xaa Pro
1 5
<210>12
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>第8位的Xaa是D-Pro；第9位的Xaa是
4-(烯丙基氧基羰基氨基)-Pro
<400>12
Thr Lys Ser Ile Pro Pro Ile Xaa Xaa
1 5
<210>13
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>第8位的Xaa是D-Pro；第9位的Xaa是
4-(正己基羰基氨基)-Pro
<400>13
Thr Lys Ser Ile Pro Pro Ile Xaa Xaa
1 5
<210>14
<211>8
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>Xaa是5-氨基甲基-9，9-二甲基-3，6-二甲氧基夹氧蒽-4-乙酸的二价基团
<220>
<223>人工序列说明掺入了7个氨基酸残基的链的模板固定的肽模拟物
<400>14
Thr Lys Ser Ile Pro Pro Ile Xaa
1 5
<210>15
<211>13
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人工序列说明环状肽
<220>
<223>Xaa是D-Pro
<220>
<221>二硫键
<222>(2)..(10)
<400>15
Arg Cys Thr Lys Ser Ile Pro Pro Ile Cys Phe Xaa Pro
1 5 10
权利要求
1.具有以下通式(I)的化合物或其药物可接受盐
其中
是基团DPro-LPro；
Z是n个α-氨基酸残基的链，n是整数7或11，所述氨基酸残基在所述链中的位置从N-端氨基酸开始计数；而且
-n是7；且第1-7位的氨基酸残基是
· P1 Thr；
· P2 Lys；
· P3 Ser；
· P4 Ile；
· P5 Pro；
· P6 Pro；
· P7 Ile；或者
· P1 Thr；
· P2 Lys；
· P3 Ala；
· P4 Ile；
· P5 Pro；
· P6 Pro；
· P7 Ile；或者
· P1 Thr；
· P2 Lys；
· P3 Ser；
· P4 Ile；
· P5 Pro；
· P6 Ala；
· P7 Ile；或者
· P1 Thr；
· P2 Lys；
· P3 Ser；
· P4 Ile；
· P5 Pro；
· P6 Pro；
· P7 Ala；
或者
-n是11；且第1-11位的氨基酸残基是
· P1 Arg；
· P2 Cys；
· P3 Thr；
· P4 Lys；
· P5 Ser；
· P6 Ile；
· P7 Pro；
· P8 Pro；
· P9 Ile；
· P10 CyS；
· P11 Phe，
两个Cys残基形成二硫键。
2.包含根据权利要求1的化合物或盐和药物惰性载体的药物组合物。
3.根据权利要求1的化合物或盐用于制造抑抑丝氨酸蛋白酶的药物的用途。
4.一种用于制造根据权利要求1的化合物或盐的方法，该方法包括
(a)将适当官能化的固体载体与在所需最终产物中处于n/2+1/2或n/2-1/2位的氨基酸的适当N-保护的衍生物偶联，可存在于所述N-保护的氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护；
(b)从如此得到的产物中去除N-保护基团；
(c)将如此得到的产物与在所需最终产物中离N-端氨基酸残基近一个位置的氨基酸的适当N-保护的衍生物偶联，可存在于所述N-保护的氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护；
(d)从如此得到的产物中去除N-保护基团；
(e)重复步骤(c)和(d)直至N-端氨基酸残基已被引入；
(f)将如此得到的产物偶联至具有以下通式的化合物
其中
定义如上且X是N-保护基团，或者，可替代地，
(fa)将在步骤(d)或(e)中得到的产物与DPro的适当N-保护的衍生物偶联；
(fb)从如此得到的产物中去除N-保护基团；和
(fc)将如此得到的产物与LPro的适当N-保护的衍生物偶联；
(g)从在步骤(f)或(fc)中得到的产物中去除N-保护基团；
(h)将如此得到的产物偶联至在所需最终产物中处于n位的氨基酸的适当N-保护的衍生物，可存在于所述N-保护的氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护；
(i)从如此得到的产物中去除N-保护基团；
(j)将如此得到的产物偶联至在所需最终产物中比n位远一个位的氨基酸的适当N-保护的衍生物，可存在于所述N-保护的氨基酸衍生物中的任何官能团同样被适当保护；
(k)从如此得到的产物中去除N-保护基团；
(l)重复步骤(j)和(k)直至所有的氨基酸残基已被引入；
(m)如果需要，选择性地去保护存在于分子中的一个或若干个被保护的官能团和适当取代如此释放的反应性基团；
(o)从固体载体上脱离如此得到的产物；
(p)环化从固体载体切离的产物；
(q)如果需要，在β-链区域的相对的位置处的适当氨基酸残基的侧链之间形成链间键；
(r)去除存在于氨基酸残基链的任何成分的官能团上的任何保护基团和，如果需要，可另外存在于分子中的任何保护基团；和
(r)如果需要，将如此得到的产物转化成药物可接受盐或将如此得到的药物可接受的或不可接受的盐转化成具有结构式I的相应的游离化合物或转化成不同的药物可接受盐。
全文摘要
具有以通式(1)的模板固定β-发夹肽模拟物和其盐具有抑制蛋白酶，尤其是丝氨酸蛋白酶的性能，其中Z是7或11个α-氨基酸残基的模板固定的链，所述残基根据其在链中的位置(从N-端氨基酸开始计数)是Gly，或Pro，或某些种类，以上结构式中的其余符号在说明书和权利要求中定义。这些β-发夹肽模拟物可通过一种基于混合固体相和溶液相合成策略的方法而制成。
文档编号C07K5/12GK101157720SQ200710153710
公开日2008年4月9日 申请日期2001年12月11日 优先权日2001年12月11日
发明者D·奥布莱希特, J·A·罗宾逊, A·德施库尔斯 申请人:波利弗尔有限公司, 苏黎士大学