技术总结
本发明提出了一种快速体内验证基因打靶靶点效率的方法，基于细胞内的DNA断裂后会激发同源片段发生重组修复来实现的，通过重组使得报告基因的活性恢复的方式验证靶点的活性。本方法只需构建一次插入了靶点的载体，然后通过有颜色的菌斑计数的方式快速评价靶点效率。本方法利用到大肠杆菌中天然重组系统，同源片段发生重组，将两个残缺的显色基因段重组成具有完整活性的蛋白，如果靶点具有活性将被切断，重组事件将被激活，显色基因被修复，从而产生有色菌斑，否则，为正常颜色的大肠杆菌菌落。该方法可以在大肠杆菌中快速实现候选靶点效率的验证，从而筛选出高效靶点,避免实验的失败。
技术研发人员：李阳;卢楠
受保护的技术使用者：武汉伯远生物科技有限公司
文档号码：201610596433
技术研发日：2016.07.26
技术公布日：2017.05.10