新苷类化合物及其制备和用途的制作方法

专利名称：新苷类化合物及其制备和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种制备各种新的苷类化合物的意想不到的新方法。该方法包括糖基化(即苷化)具有官能团的糖苷配基化合物，例如羟基化合物如羟基甾族化合物或羟基非甾族化合物。重要的是，本发明涉及具有各种用途的作为新化合物所得到的苷类化合物，这些化合物具有所希望的活性包括药效活性，本发明还涉及含有这些化合物的药剂。
根据本发明，现已意想不到地发现糖苷配基化合物-在一优选的实施方案中，羟基甾族化合物被作为甾族醇或甾族酚-可以一步与下式配糖的乙烯基醚3，4，6-三-O-酰基-D-己烯糖
其中Ac是低级酰基，优选C1-4酰基，在作为催化剂的分子卤的存在下，如碘I2、氯Cl2、溴Br2、和氟F2，优选碘，进行反应而高产率地得到相应的苷。因此，在此反应步骤中不需要昂贵的和/或有毒的试剂。更进一步地，作为本发明的一优选方面，甾族苷一由此方法得到的3-β-醇胆甾醇吡喃糖苷，即胆甾烯基4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷-已被发现可作为药理活性剂而用作药剂，特别是作为抗肿瘤剂，或在老年病医疗中，作为镇静剂或增活剂。为了便于本发明的描述，4，6-二-O-酰基(或乙酰基)-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷在本文中有时简单地称作为DDH吡喃糖苷。
在与本发明的优选实施例有关的附图中

图1是实施例1反应中所用的己烯糖的红外光谱;
图2是实施例1的糖苷化产物的红外光谱;
图3是实施例1的同样的糖苷化产物的NMR谱;
图4和5分别是实施例2的酮产物的IR谱和NMR谱;
图6和7分别是实施例3的7β-OHC产物的IR谱和NMR谱;
图8是描述在细胞培养液中，通过选择7β-OH胆甾醇的浓度抑制肿瘤细胞生长的曲线。
根据一优选实施方案，本发明涉及制备吡喃糖苷化合物的方法，在此方法中糖苷配基化合物(它选自脂族、脂环族、脂族-芳香族或芳香族化合物，这些化合物具有伯、仲或叔官能团，它们优选选自-OH、-SH、-COOH、-NH2和-NHR1，其中R1是C1-4低级烷基或苯基)被糖基化，其特征在于糖苷配基化合物在溶剂中与下式3，4-6-三-O酰基-己烯糖
在作为催化剂的分子或离子化的卤素存在下，如碘I2、氯Cl2、溴Br2和氟F2、优选碘，进行反应得到所述糖苷配基化合物的相应的4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷，其中酰基是低级酰基。在另一优选实施方案中，羟基甾族化合物，优选3β-羟基甾醇化合物，较优选△5-3β-羟基甾族化合物如胆甾醇(例如△5-胆甾烯-3β醇)通过与3，4，6-三-O-酰基-D-己烯糖反应而被糖基化，该反应在溶剂中，在分子或离子化的卤素优选碘作为催化剂的存在下进行，另外，正如下文详细所述，非甾族化合物也可被糖基化。该反应可以一步且高产率地完成。因此，受C4，C6-酰基强烈阻碍而惰性的双键，被引入在分子的配糖部分的C2＝C3之间，从而对于羟基甾族化合物来说，甾环骨架的△5双键被稳定化而保持不变。
此外，本发明包括将所得的不饱和苷作为最终产物或作为中间体而进一步反应得到官能衍生物，它可以是甾族化合物如胆甾醇衍生物。因此，在胆甾醇的情况下，官能团被引入到不饱和的酰基苷的全氢化环戊并菲骨架中，其中，对于菲骨架的C3上的原始OH-基来说，酰基苷的α-键同时起着保护基的作用。
本方法使用溶于惰性溶剂中的分子态碘，这些惰性溶剂包括如二氯甲烷CH2Cl2，氯仿CHCl3，四氯化碳CCl4，二甲苯C6H4(CH3)2，莱C6H3(CH3)3，繖花烃C6H5CH(CH3)2，环己烷C6H12及其甲基衍生物，以及轻石油，石油醚和饱和烃，如正戊烷或正庚烷，优选苯C6H6或甲苯C6H5CH3。使用另一种溶剂硝基甲烷CH3NO2时，糖基化反应可在室温下用碘催化2小时定量完成。本发明的制备DDH吡喃糖苷的方法还可使用溶于离子化溶剂中的碘。使用酮如丙酮、甲乙酮(2-丁酮)和环己酮作为另一溶剂时，可用碘催化3，4，6-三-O-乙酰基-D-己烯糖和胆甾醇之间的反应，该反应在20℃下仅用60至90分钟可定量完成。作为一作优选实施方案，还可使用四氢呋喃(THF)类醚等。
使用低级醇如甲醇、乙醇、丙醇等时，可用碘催化3，4，6-三-O-乙酰基-D-己烯糖和糖苷配基化合物之间的反应，该反应在20℃下30分钟可定量完成。
根据上述优选实施方案，糖基化方法是指3，4，6-三-O-酰基-D-己烯糖的乙烯基醚与胆甾醇如△5-胆甾烯-3β-醇反应，该反应是在上述溶剂中，并使用以分子态溶解的卤素，即碘作为催化剂。因此，该反应在碳原子2和3之间引入双键，同时除去C3位上的酰基，并且在所得的胆甾醇苷的苷部分的C2上不引入碘原子。该反应可方便地用IR光谱跟踪，当己烯糖峰1650cm-1消失时，反应便完成。用作催化剂的碘可用合适的反滴定试剂如0.1N硫代硫酸钠(Na2S2O3)水溶液进行定量反滴定，由胆甾醇化合物而得到下文将举例说明的相应的二-O-酰基苷的方法不仅适用于甾族化合物和胆甾醇化合物及前体，而且适用于糖苷配基化合物。一般来说，即具有上述类型的伯、仲或叔官能团的脂族、脂环族、脂族-芳香族和芳香族化合物。优选可利用其药理活性的糖苷配基化合物，这是因为根据本发明所得到的其相应的苷具有相同的效用和有用的活性。并且，由于糖残体的存在，人工可识辩的剂量状态可能增加生物药效率，例如，在细胞膜中。对于糖基化来说，优选的羟基化合物包括胆甾醇、胆汁盐、甾族激素、维生素D化合物及前体，正如Stryer的Bio chemistry。(3rd Ed.PP.559-570，freeman and Company，New York，1988)中所述，该文献在此引入作为参考。这些化合物的实例是胆酸及衍生物，25-羟基-胆甾醇、25-羟基-钙化醇、孕甾烯醇酮、17α-羟基黄体酮、17α-羟基-孕甾烯醇酮、11-脱氧皮质甾酮、11-脱氧-皮质甾醇、皮质甾酮、皮质甾醇、可的松、多萜醇、雄甾酮、睾甾酮、雌甾酮、17β-雌甾二醇、雌甾三醇-3，16α，17β，3α，5β-四氢-皮质甾酮、5-羟色胺、尿皮质醇和别皮甾酮四醇等。优具有△5-3β-OH甾类基团部分的甾环化合物
如上述其中△5双键通过3β-OH糖基化得到吡喃糖苷而被稳定化。
对于糖基化来说，其他优选的糖苷配基化合物包括a)吗啡和吗啡衍生物如可待因，乙基吗啡、二氢可待因，二氢吗啡酮、羟氢可待酮、N-烯丙原吗啡、羟甲左吗喃等;
b)α-和β-拟交感神经药(肾上腺素药)化合物如对羟基苯乙醇胺，去甲苯福林，对羟福林、乙苯福林、苯福林、octapamine，异丙肾上腺素、二氯异丙肾上腺素、异丙喘宁、叔丁喘宁、苄丙酚胺等;
c)抗高血压药化合物如甲基多巴等;
d)血管收缩剂化合物如α-甲基去甲肾上腺素等;
e)抗胆碱药(抗副交感神经药)和解痉药化合物如阿托品、后马托品、东莨菪碱及其溴甲东莨菪和溴丁东莨菪季铵化合物，podine硫酸二甲酯、莨菪醇二苯乙醇酸酯等;
f)抗精神病药化合物如乙酰奋乃静、氟奋乃静、羟乙氧拉嗪、奋乃静、羟嗪、哌氰嗪、卤哌啶醇、三氟哌啶醇、甲基哌啶醇等。
g)强心药化合物如洋地黄毒甙元;异羟洋地黄毒甙元、双羟洋地黄毒甙元等;
h)雌激素和避孕药化合物如炔雌醇、炔雌醇甲醚、炔雌醚等;
i)抗菌剂化合物如羟氨苄青霉素、氯霉素、甲砜霉素、四环素、金霉素、土霉素等;
j)镇咳药化合物如氯苯胺丙醇、氯苯胺丁醇、双苯哌丙醇等;
k)镇痛药化合物如羟甲左吗喃、胺酚环醇、戊唑辛、醇苯哌酯、甘氨苯喹、水杨酰胺等;
l)催产药化合物如麦角新碱、前列腺素F2α等;
m)抗肿瘤药化合物如氟尿嘧啶等;
n)抗疟药化合物如奎宁等;
o)杀真菌剂化合物如放线菌酮等;
p)抗风湿药化合物如羟基保泰松等;
q)抗胆碱药化合物如鹅去氧胆酸等;
r)利胆药化合物如羟甲香豆素等;
s)抗痛风化合物如别嘌呤醇;
t)抗帕金森神经机能障碍化合物如左旋多巴、卡别多巴、droxidops等;
u)镇痉药化合物如麻黄碱等;
v)鼻减充血剂化合物如咖啡氨醇等;
w)肌肉松弛化合物如苯丙醇氨酯、愈创木酚甘油醚等;
x)抗炎药化合物如地塞米松、氯地米松等;
y)维生素和维生素类化合物如原维生素D，叶黄素、维生素A、维生素E、维生素B1、维生素C等。
根据本发明，用于糖基化的其他优选糖苷配基化合物包括Merck Index XI中“Therapeutic Category and Biological Actiyity Index”pp.THER-5至THER-29(Merck & Co.，Inc.Rahway NJ，)所列化合物，该文献在此引入作为参考文献。
该糖基化方法以及下文描述的有关的氧化和还原方法可用使用起始原料胆甾醇的一优选实施方案来阐述如下
在本发明的另一方法中，由糖基化方法得到的甾烯基DDH吡喃糖苷产物可通过将甾类部分氧化而转化为α-糖基化7-酮-甾醇如α-糖基化7-酮-胆甾醇。该方法可用于各种甾醇化合物的氧化，优选的是具有△5-3β-OH甾烯基4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷部分的甾环化合物
得到具有下面相应部分的7-酮-甾醇
该氧化反应优选用含有铬的氧化剂来完成，优选吡啶-三氧化铬(C2H5N)2CrO3或吡啶-氯铬酸盐(C5H5NHCrO3)Cl，特别优选铬酸正丁酯。由于被C4、C6酰基(例如乙酰基)保护，在C2＝C3间的惰性糖基化双键保持不变。根据本发明，用合适的还原剂将7-酮还原，优选络合金属氢化物，如LiAlH4、NaBH4和KBH4中的一种或几种，较优选LiALH4，从而得到甾族苷。在一优选实施方案中，重要的是该方法得到下式7β-羟基胆甾醇基2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷(7β-OHC)，
该类胆甾醇系统上是生物相容的。产品可通过处理反应混合物后得到，例如，在合适的溶剂混合物优选含有二氯甲烷∶丙酮(优选1∶1)的混合物中，色谱分离C7β-羟基异构体和C7α-羟基异构体。
在一优选方面，本发明包括具有上述通式的新吡喃糖苷。特别是该新的7β-羟基胆甾醇DDH吡喃糖苷及其7-酮前体具有有用的药理活性。例如，在治疗已述的类似增生相生长中，为了符合规格上的考虑和在临床诊断上的实际运用，优选的肠胃外剂量规格要求给每70kg体重服用约10至约40mg 7β-OHC DDH吡喃糖苷，一天一次，而当用肿瘤标志如CEA、TPA等进行分析时，次数常常减少，以便剂量能够随时调节而使肿瘤标志水平正常。α-异构体、△5-胆甾烯-3β-7α-二醇作为胆甾醇的第一降解产物在肝中形成，但不具有生理活性;β-异构体;△5-胆甾烯-3β，7β-二醇(以及它的7-酮类似物)在所有哺乳动物的胸腺中形成，它是哺乳动物免疫防御的通用信号物质。它具有完全指向恶性肿瘤细胞表面的活性，因为它被LDL(低密度脂蛋白)非特定地束缚。
本发明的新甾族和非甾族化合物可用于药物制剂形式中，该制剂包括药理有效量的该种化合物并和常用的药学上可接受的载体混合。这些制剂可用已知的方法进行配制。在这些方面，参见如Remington的Pharmaceutical Sciences，Chapter 43，14th Ed.，(Mack Publishing Co.，Easton，PA 18042，USA)这些制剂可以任何合适的方式服用，例如口服，可采用片剂、糖锭剂、明胶胶囊、软胶囊、溶液、乳液或悬浮液的形式，或肠胃外给药，如采用合适的pH如约7.5的注射液的形式，或表面给药，如采用乳脂形式。
本发明以及实施的最佳方法均由下列实施例阐述。
实施例1胆甾烯基4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷的制备
在装有搅拌器、回流冷凝器和温度计的2升三颈瓶中，将5.0g(＝0.02mole)分子碘溶于搅拌着的300ml苯中。向所得的酒红色溶液中加入27.2g(＝0.10mole)3，4，6-三-O-乙酰基-D-己烯糖和38.6g(0.10mole)胆甾醇(△5-胆甾烯-3β-醇)的700ml苯溶液。将混合物加热至70-75℃历时2小时。用IR光谱监测反应，仅当己烯糖峰1650cm-1(图1)消失时，终止反应。反应溶液的红色无关紧要。在撤去烧瓶加热器后，将反应溶液在水浴中迅速冷却至约20-30℃。在移至2升分液漏斗后，用500ml+10% 0.1N＝12.5g+10%＝13.8g Na2S2O3水溶液处理并充分振荡冷却的酒红色反应溶液直至无色，用水洗涤两次，用活性碳处理，用无水Na2SO4干燥，最后真空蒸馏除去溶剂。
粗产量58.3g(＝97.4% th.)将该产物，胆甾烯基4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷，由2升CH3OH中重结晶。
产量56.95g(＝95.1% th.)MP118-120℃IR光谱图2NMR谱图3本发明不仅包括上述苷产品，而且包括通过上述方法使用等当量的己烯糖(或其他合适的己烯糖)和选择用于糖基化的糖苷配基化合物为起始原料而制得其他苷。合适的糖苷配基化合物选自(已知它们可作为糖苷配基化合物)上述具有伯、仲或叔官能团(即-OH、-SH、-NH2、-NHR1)的脂族、脂环族、脂族-芳香族或芳香族化合物，优选在前面a)至y)段中所列化合物或在Merck Index XI(上述)的THER-5至THER-29页中所列化合物。由上述方法制得的特别优选的苷产品分别是下述的糖苷配基化合物的4，6-二-O-酰基或乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷，这些DDH吡喃糖苷产品可用参考文献中得到的已知的IR和NMR谱数据来确证。
羟基糖苷配基 The Merck Index 用途化合物 IX登录号胆酸 2206 利胆药棒酸 2342 抗菌剂羟氨苄青霉素 610 抗菌剂柔红霉素 2825 抗肿瘤药Lovastatin 5460 抗血胆甾醇过多药Mevastatin 6088 抗血胆甾醇过多药Simvastatin 8491 抗血脂过多药在苯中于70℃下进行的上述糖基化反应有利于得到α异构体而不是β异构体，因此，该反应一般地得到α与β胆甾烯基糖基化异构体之比(α∶β)大于20∶1，同样，在THF中于67℃下和室温下，该反应在此两种情况下一般得到α∶β之比为约9∶1。
用于此的另一常用方法是用具有至少一个官能团(如OH、SH和/或-COOH)的起始原料(即底物)代替胆甾醇。该方法详细地阐述如下一般方法将底物(1当量)于室温下加到搅拌着的己烯糖(0.5-1.0g)和碘(20mol%)的THF溶液中。用薄层色谱法监测反应，对每一化合物列出反应时间。反应完成后，溶液用乙醚稀释用10%Na2S2O3水溶液洗涤。分离各层，水层用另外的乙醚萃取。合并的有机层用Na2S2O4干燥，浓缩、用230-400目SiO2柱色谱纯化。除了有确定熔点的化合物外，所有产物都以粘性油的形式回收。
注硫醇在低温下作为每一加合物的指示剂而加入。
例举的物质醇(总共90%产率α-异构体∶β-异构体＝5-8∶1)甲醇乙醇异丙醇叔丁醇苄醇烯丙醇酚(α-异构体∶β-异构体＝6-8∶1)苯酚(70%)对甲氧基苯酚(约65%)对硝基苯酚(约60%)硫醇(高反应性)乙硫醇 α-异构体∶β-异构体＝1.6∶1(-78℃至-55℃)(35%)异丙硫醇 α-异构体∶β-异构体＝15∶1(-78℃至-0℃)(77%)叔丁硫醇 仅有α-异构体(-25℃)(68%)硫代苯酚 α-异构体∶β-异构体＝20∶1(室温)(50%)羧酸乙酸 α-异构体∶β-异构体＝10∶1(催化的)(80%)醇(ROH)、酚(ArOH)和羧酸(RCOOH)加合物的光谱数据
R＝Me(反应时间＝30min，产率＝87%)1H NMR(CDCl3300MHz)δ2.087(s，3H)，2.111(s，3H)，3.457(s，3H)，4.05-4.13(m，1H)，4.188(1H)和4.266(1H)(ABq，JAB＝12.1Hz;4.188峰进一步分裂为d J＝2.5Hz;4.266峰进一步分裂为d J＝5.3Hz)，4.934(s，1H)，5.322(dd，1H，J＝9.7，1.4Hz)，5.834(1H)和5.894ppm(1H)(ABq，J＝10.6Hz;5.834峰进一步分裂为dd J＝2.0，2.0Hz)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ20.56、55.70、63.26、65.75、67.35、95.60、128.15、129.38、170.08、170.36ppm。IR(KBr)1048、1072、1107、1137、1148、1188、1233、1372、1438、1449、1456、1744、2910、2939、2956cm-1。R＝Et(反应时间＝50min，产率＝97%)m.p.(己烷＝76-77.5℃)。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ 1.256(d，J＝7.1Hz，3H)，2.084(s，3H)，2.105(s，3H)，3.584(1H)和3.837(1H)(ABq，JAB＝9.7Hz;该两峰进一步分裂为q J＝7.1Hz)，4.09-4.14(m，1H)，4.174(1H)和4.261(1H)(ABq，JAB＝12.2Hz;4.174峰进一步分裂为dd J＝2.8，2.8Hz;4.261峰进一步分裂为d J＝5.3Hz)，5.050(s，1H)，5.319(dd，J＝9.6，1.4Hz，1H)，5.837(1H)和5.891ppm(1H)(ABq，JAB＝10.2Hz5.837峰进一步分裂为dd J＝1.7，1.4Hz)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ15.31、20.66、20.83、63.30、64.25、65.75、67.25、94.40、128.37、129.13.170.17、170.53ppm。
IR(KBr)1019、1052、1084、1108、1120、1133、1137、1189、1229、1239、1257、1274、1372、1382、1738、2902、2980cm-1。
R＝i-Pr(反应时间＝65min，产率＝96%)1H NMR(CDCl3300MHz)δ 1.186(d，J＝6.2Hz，3H)，1.258(d，J＝6.2Hz，3H)，2.081(s，3H)，2.096(s，3H)，3.988(dq，J＝6.2，6.2Hz，1H)，4.12-4.28(m，3H)，5.133(s，1H)，5.301(dd，J＝9.5，1.4Hz，1H)，5.804(1H)和5.875ppm(1H)(ABq，JAB＝10.3Hz);5.804峰进一步分裂为dd J＝2.6，2.5Hz，1H)。
13C NMR(CDCL375.5MHz)δ20.59，20.83、22.06、23.54、63.42、65.87、67.22、70.83、93.06、128.82、128.91 170.18、170.55ppm。
IR(KBr)1035、1101、1125、1185、1231、1372、1457、1744、2933、2973cm-1。
R＝t-Bu(反应时间＝2hr，产率＝74%)1H NMR(CDCl3;300MHz)δ 1.292(s，9H)，2.075(9S，3h)，2.085(s，3H)，4.12-4.28(m，3H)，5.271(d，1H，J＝8.0Hz)，5.321(dd，1H，J＝1.3，1.3Hz)5.744(1H)，和5.844ppm(1H)(ABq，JAB＝10.2，Hz;5.744峰进一步分裂为dd J＝2.8，2.8Hz)。
13C NMR(CDCl3;75.5MHz)δ 20.72、20.93、28.79、63.35、65.49、66.72、75.23、89.02、128.13、129.67、170.17、170.57ppm。
IR(KBr)1025、1044、1100、1183、1196、1235、1370、1392、1746、2935、2976cm-1。
R＝Ph(反应时间＝8hr，产率＝70%)1H NMR(CDCl3;300MHz)δ1.976(s，3H)，2.017(s，3H)，4.10-4.30(m，3H)，5.387(d，J＝11.4Hz，1H)，5.698(s，2H)，7.00-7.33ppm(m，5H)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ20.54、20.84、62.66、65.13、67.85、92.12、117.10、122.42、127.14、129.40、130.06、157.08、170.06、170.46ppm。
IR(KBr)1005、1029、1047、1076、1096、1187、1222、1371、1491、1589、1598、1744cm-1。
R＝p-MeO-ph(反应时间＝12hr，产率＝75%)m.p.(己烷)＝77-77.5℃。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ 2.023(s，3H)，2.109(s，3H)，3.774(s，3H)，4.14-4.30(m，3H)，5.376(d，J＝9.1Hz，1H)，5.567(s，1H)，6.007(s，1H)，6.830(2H)和7.047ppm(2H)(ABq，JAB＝9.0Hz)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ 20.61 20.85、55.77、63.03、65.60、67.94、94.23、114.85、115.11、116.21、118.90、127.51、130.08、170.32、170.75ppm。
IR(KBr)1010、1037、1053、1184、1227、1243、1255、1270.1380、1507、1741、2922、2934、2958cm-1。
R＝CH2ph(反应时间＝80min，产率＝95%)1H NMR(CDCl3300MHz)δ 2.081(s，3H)，2.102(s，3H)，4.09-4.29(m，3H)，4.601(1H)和4.809(1H)，(ABq，JAB＝11.7Hz)，5.139(s，1H)，5.334(dd，J＝9.4，1.3Hz，1H)，5.875(ABq，2H)，7.29-7.40ppm(m，5H)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ 20.63、20.81、63.19、65.74、67.50、70.35、93.83、127.00、128.56，128.56、129.46、170.17、170.59ppm。
IR(KBr)1026、1038、1101、1137.1151、1186、1227.1370、1405、1436、1454、1743、2904、2937、2953、3032cm-1。
R＝CH2CH＝CH2(反应时间＝80min，产率88%)1H NMR(CDCl3300MHz)δ 2.086(s，3H)，2.106(s，3H)，4.05-4.30(m，5H)，5.084(s，1H)，5.212(d，J＝10.3Hz，1H)，5.28-5.35(m，2H)，5.848(1H)和5.899(1H)(ABq，JAB＝10.3Hz)，5.92-5.99ppm(m，1H)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ20.73、20.91、63.00、65.35、67.05、69.22、93.65、117.35、127.86、129.27、134.27、170.18、170.62ppm。
R＝CH2C(CH3)3(反应时间＝30min，产率＝97%)1H NMR(CDCl3300MHz)δ 0.931(s，9H)，2.086(s，3H)，3.133和3.481(ABq，JAB＝8.8Hz，2H)，4.07-4.27(m，3H)，4.985(s，1H)，5.305(d，J＝9.5Hz，1H)，5.850和5.859(ABq，JAB＝10.5Hz，2H;和5.850ppm峰进一步分裂为dd J＝2.7和2.6Hz)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ20.73、20.91、63.00、65.35、67.05、69.22、93.65、117.35、127.86、129.27、134.27、170.18、170.62ppm。
R＝OAc(反应时间24h，产率＝81%)(使用乙酸20mol%)。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ2.082(s，3H)，2.095(s，3H)，2.098(s，3H)，4.06-4.28(m，3H)，5.368(d，J＝10.5Hz，1H)，5.850和6.011(ABq，JAB＝10.6Hz，2H;5.850ppm峰进一步分裂为dd J＝2.7和2.2Hz)，6.294ppm(s，1H)。
硫醇(RSH)加合物的光谱数据R＝Et(-78 to -55℃，反应时间＝3.5hr.产率＝35%)。
1H NMR(CDCl3300NHz)δ1.252(t，J＝7.1Hz，3H)，2.080(s，3H)，2.099(s，3H)，3.581(1H)和3.832(1H)(ABq，JAB＝9.7Hz;两峰均进一步分裂为dq J＝7.1，7.1Hz)，4.08-4.29(m，3H)，5.043(s，1H)，5.315(dd，J＝9.6，1.3Hz，1H)，5.831(1H)和5.883ppm(1H)(ABq，JAB＝10.3Hz)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ15.31、20.72、20.92、63.15、64.30、65.52、67.02、94.30、128.09、129.03、170.20、170.66ppm。
IR(KBr)1049、1079、1182、1232、1371、1437、1451、1743、2930、2964cm-1。
R＝i-Pr(-78 to 0℃，反应时间＝6hr.产率＝77%)。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ1.337(d，3H，J＝6.8Hz)，1.342(d，3H，J＝6.8Hz)，2.085(s，6H)，3.145(dq，1H，J＝6.8，6.8Hz)，4.15-4.38(m，3H)，5.349(d，1H，J＝9.6Hz)，5.638(s，1H)，5.761(1H)，和5.935ppm(1H)(ABq，JAB＝10.1Hz)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ20.66、20.92、23.88，36.3、63.14、65.25、66.93、79.61、126.74、129.39、170.21、170.60ppm。
IR(KBr)1050、1078、1122、1157、1181、1229、1369、1419、1452、1743、2868、2927、2960cm-1。
R＝t-Bu(-25 to 0℃，反应时间＝2hr.产率＝68%)。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ 1.404(s，9H)，2.070(s，3H)，2.080(s，3H)，4.13-4.37(m，3H)，5.325(dd，1H，J＝9.3，1.8Hz)，5.739(d，1H，J＝1.7Hz)，5.753(1H)和5.902ppm(1H)(ABq，J＝10.9Hz)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ20.70、20.94、31.51、44.33、63.22、65.16、66.84、78.17、126.61、129.67、170.30、170.72ppm。
IR(KBr)1054、1078、1164、1236、1368、1744、2962cm-1。
用同样的方法，但使用Mevinolin(Lovastatin)作为底物而不是用胆甾醇，所得的加合物(产率约60%)是具有下式的Lovastatin4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷
该反应在温和的条件下如优选室温进行1小时，使用三乙酰基-D-己烯糖(1.0当量)、碘(20mol%)的以THF作为溶剂的溶液。
R＝Lovastatin(反应时间＝1h，产率＝55%)1H NMR(CDCl3;300MHz)δ0.873(t，J＝7.5Hz，3H)，0.892(d，J＝7.0Hz，3H)，1.074(d，J＝7.4Hz，3H)，1.105(d，J＝6.9Hz，3H)，2.091(s，3H)，2.094(s，3H)，3.99-4.05(m，1H)，4.14-4.28(m，3H)，4.29-4.34(m，1H)，4.52-4.61(m，1H)，5.134(s，1H)，5.323(dd，J＝9.6，1.3Hz，1H)，5.373(d，J＝2.7Hz，1H)，5.75-5.91(m，2H)，5.909(ABq，部分JAB＝11.1Hz，1H)，5.992ppm(d，J＝9.7Hz，1H)。
13C NMR(CDCl375.5MHz)δ11.67、13.92、16.23、20.70、20.88、22.85、24.23、26.79、27.51、30.77、32.77、33.22、35.01、35.73、36.65、37.46、41.45、62.98、65.26、67.38、67.85、68.65、76.70、93.12、127.44、128.44、129.49、129.72、131.65、132.94、169.32、170.07、170.47、176.39ppm。
用同样方法，但使用甲酚甘油醚或辣椒辣素作为底物而不是用Mevinolin。所得的加合物分别是甲酚甘油醚4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷和辣椒辣素4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃苷。
R＝甲酚甘油醚(反应时间＝1h，产率＝85%)1H NMR(CDCl3;300 MHz)δ 2.068(s，3H)，2.071(s，3H)，2.077(s，3H)，2.080(s，3H)，2.214(brs，3H)，3.70-3.82(m，3H)，3.99-4.40(m，11H)，5.06-5.12(m，1H)，5.28-5.39(m，3H)，5.78-5.99(m，4H)，6.81-6.91(m，3H)，7.11-7.19ppm(m，2H)。
R＝辣椒辣素(反应时间＝8h.THF中回流，产率＝60%)。
1H NMR(CDCl3300 MHz)δ0.834(d，J＝6.6Hz，3H)，0.948(d，J＝6.7Hz，3H)，2.091(s，3H)，2.093(s，3H)，3.850(s)，5.27-5.35(m，2H)，5.45-5.90(m，4H)，6.71-6.88(m，3H)。
用该方法由胆酸或胆酸类似物得到的加合物如下鹅去氧胆酸
条件三乙酰基D-己烯糖(2.0当量);碘(20mol%);THF，室温，4h结果二加合物(89%)鹅去氧胆酸3，12-二-(4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-已-2-烯吡喃糖苷)去氧胆酸
条件三乙酰基D-己烯糖(2.0当量);碘(20mol%);THF，室温，4h结果二加合物(91%)去氧胆酸3，12-二(4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-已-2-烯吡喃糖苷)胆酸
条件三乙酰基D-己烯糖(3.0-5.0当量)，碘(20mol%)，THF，回流，8h
结果二和三加成物的混合物(85%)胆酸3，7-二(DDH 吡喃糖苷);
胆酸3，12-二(DDH吡喃糖苷);
胆酸3，7，12-二(DDH吡喃糖苷);
用此方法由氯霉素得到的加成物如下氯霉素
条件三乙酰基D-己烯糖(2.0当量);碘(20mol%);THF，室温，6h结果二加成物(85%)，氯霉素1，3-二(DDH吡喃糖苷)。
附图3、7和8中的数据列之如下
(2)附图7中的NMR条件
(3)附图8中的数据稀释比为1/10、1/80和1/320的溶液中的TU/ml培养液和乙醇的量
1/100.4mg TU/ml培养液0.9%存在于培养中的乙醇1/800.03mg TU/ml培养液0.10%存在于培养中的乙醇1/3200.007mg TU/ml培养液0.030%存在于培养中的乙醇已描述了本发明，要求保护的本发明的所有权或特权具体如下
权利要求
1.制备吡喃糖苷化合物的方法，其中选自具有伯、仲或叔官能团的脂族、脂环族，脂族-芳香族或芳香族化合物的糖苷配基化合物被糖基化，其特征在于糖苷配基化合物在溶剂中与下式3，4，6-三-O-酰基-已烯糖
在作为催化剂的卤素存在下，进行反应得到所述糖苷配基化合物的相应的4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-已-2-烯吡喃糖苷，其中酰基是低级酰基。
2.根据权利要求1的方法，其特征在于糖苷配基化合物是△5-3β-醇甾烯基化合物。
3.根据权利要求2的方法，其特征在于胆甾醇化合物在溶剂中与3，4，6-三-O-乙酰基-D-己烯糖反应得到相应的4，6-O-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
4.根据权利要求3的方法，其特征在于用苯或甲苯作为溶剂。
5.根据权利要求3的方法，其特征在于用氧化剂氧化4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷得到7-酮胆甾烯基4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷，然后，用金属氢化物作为还原剂还原得到7β-羟基胆甾烯基2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
6.根据权利要求5的方法，其特征在于氧化剂选自铬酸正丁酯、吡啶-三氧化铬和吡啶-氯铬酸盐。
7.根据权利要求5的方法，其特征在于用LiALH4、NaBH4、KBH4中的一个或多种作为还原剂。
8.根据权利要求5的方法，其特征在于7β-羟基胆甾烯基吡喃糖苷用色谱分离。
9.根据权利要求8的方法，其特征在于分离通过使用含二氯甲烷和丙酮的溶剂混合物的色谱分离来完成。
10.下式羟基甾烯基2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷化合物。
11.下式羟基甾烯基2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
其中R是下式甾烯基部分
12.下式酮甾烯基4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
13.下式酮甾烯基4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
其中R是下式酮甾烯基部分
14.一种抑制肿瘤细胞生长的药剂，它包括以药理上可接受的剂量形式抑制肿瘤细胞生长有效量的下式吡喃糖苷，
15.根据权利要求14的药剂，它能有效地抑制白血病细胞生长。
16.根据权利要求14的药剂，它包括一种液体载体，它选自a)水、b)乙醇、c)丙二醇、或a)、b)和c)的两种或多种混合物。
17.胆甾烯基4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
18.胆甾烯基4，6-二-O-乙酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
19.选自胆甾醇、胆汁盐、甾类激素和维生素D化合物的羟基化合物的2，3-二-O-酰基-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
20.根据权利要求19的吡喃糖苷，其中糖苷配基化合物选自胆酸及衍生物，25-羟基-胆甾醇、25-羟基-钙化醇、孕甾烯醇酮、17α-羟基黄体酮、17α-羟基-孕甾烯醇酮、11-脱氧皮质甾酮、11-脱氧-皮质甾醇、皮质甾酮、皮质甾醇、可的松、多萜醇、雄甾酮、睾甾酮、雌甾酮、17β-雌甾二醇、雌甾三醇-3，16α，17β，3α，5β-四氢-皮质甾酮、5-羟色胺、尿皮质醇和别皮酮四醇。
21.胆酸3，7，12-三-(4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷)。
22.棒酸4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
23.羟氨苄青霉素4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
24.柔红霉素4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
25.Lovastatin 4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
26.Mevastatin 4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
27.Simvastatin 4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
28.甲酚甘油醚4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
29.辣椒辣素4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
30.选自前述段a)至y)中所列糖苷配基化合物的4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷。
31.胆酸3，7-二-(4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷)。
32.胆酸3，12-二-(4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷)。
33.鹅去氧胆酸3，7-二-(4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷)。
34.去氧胆酸3，12-二-(4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷)。
35.氯霉素1，3-二-(4，6-二-O-酰基-2，3-二脱氧-α-D-赤式-己-2-烯吡喃糖苷)。
全文摘要
本发明提供了新的苷类化合物，特别是甾族和非甾族苷，以及制备他们的新方法。制备新苷的新方法是使用分子或离子化卤素作为反应催化剂，用三-O-酰基己烯糖糖基化糖苷配基化合物。由此方法得到的甾族和非甾族苷具有有用的药理活性。特别是，胆甾醇苷在体内表现出对恶性肿瘤细胞具有选择性细胞破坏活性。该活性与它们各自的未糖基化的糖苷配基化合物的活性是一样的。该活性可包括促进(兴奋)活性和抗炎(抑制免疫或免疫调节)活性。
文档编号A61K31/7028GK1073179SQ9210974
公开日1993年6月16日 申请日期1992年7月21日 优先权日1991年7月22日
发明者R·-E·克莱姆克, M·科里达 申请人:哈里埃有限公司