一种枯草芽孢杆菌及其用途
【专利摘要】本发明提供了一种抗逆性强、益生功能优异、安全可靠的枯草芽孢杆菌（Bacillus?subtilis）K018、含有上述枯草芽孢杆菌（Bacillus?subtilis）K018的生物饲料添加剂及其用途。本发明的枯草芽孢杆菌（Bacillus?subtilis）K018能够耐人工胃酸、耐胆盐、耐人工肠液、耐高温，对肠道中致病性金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌等有较强抑制作用，产淀粉酶能力和产纤维素酶能力较强，可以降解淀粉和纤维素。
【专利说明】一种枯草芽孢杆菌及其用途
【技术领域】
[0001]本发明属于生物【技术领域】，具体而言，涉及一种枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)及其用途。
【背景技术】
[0002]我国是一个畜禽产品生产大国。近年来，随着畜禽饲养的规模化、集约化，出现了一些严重制约养殖业进一步发展的问题，例如，畜禽粪便中产生的恶臭味道污染环境、抗生素残留、养殖成本高等。特别是，抗生素存在的药物残留和耐药性等负面效应已对人类的健康构成威胁，越来越多的国家开始禁用抗生素。在我国，耐药菌株的比率不断增加，治疗细菌性传染病的难度越来越大，人们对饲用抗生素的反对意识愈发强烈，因此，饲用抗生素在我国的应用也必将受到限制。
[0003]在此情况下，急需开发出一种新型的饲料添加剂，它既能大大降低动物粪便臭味，又能提高饲料转化率，提高动物的免疫力和抗病力，促进其健康快速生长。包含益生菌的饲料添加剂是一种十分理想的抗生素替代品。益生菌能够竞争性地抑制病原微生物，使其不能定植、占位、生长、繁殖，促使病原微生物随粪便排出体外。我国农业部公布的可用于微生态制剂生产的菌种包括乳酸杆菌、芽孢杆菌、粪链球菌、酵母菌和双歧杆菌等。
[0004]枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)属于芽孢杆菌属。与通常的乳酸杆菌等益生菌相比，枯草芽孢杆菌是好氧菌，在一定条件下产生芽孢。因此，枯草芽孢杆菌具有耐高温、耐酸碱、耐压等特点。枯草芽孢杆菌能够耐受饲料加工过程中的影响以及胃酸和肠道中的胆盐和消化液的破坏，在进入肠道后，通过激活与快速增殖，消耗肠道中大量的游离氧气，降低了肠道内氧气的浓度，改善了乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧菌的生长环境，同时使肠道中原本存在的需氧有害菌(如大肠杆菌、沙门氏菌等)的生长因缺氧受到抑制，从而减少肠道疾病的发生机率。因而能够促进肠道有益菌生长，抑制有害菌，促进肠道微生态平衡，提高畜禽免疫力和抗病力，提高饲料转化率，降低粪便臭味。
[0005]至今，一些饲料企业都在积极寻找和开发新的绿色环保的微生物饲料添加剂，但是市场上的此类添加剂均存在抗逆性(例如，抗消化道生理环境能力和抗饲料加工能力)差、抑菌效果不够显著、安全性不可靠等缺陷。
【发明内容】
[0006]针对现有技术中的不足，本发明人进行了广泛深入的研究，最终完成了本发明。
[0007]因此，本发明的一个目的是提供一种抗逆性强、益生功能优异、安全可靠的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)K018。该菌能够耐人工胃酸、耐胆盐、耐人工肠液、耐高温,对肠道中致病性金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌等有较强抑制作用，产淀粉酶能力和产纤维素酶能力较强，可以降解淀粉和纤维素。
[0008]本发明的另一个目的是提供上述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)K018在制备生物饲料添加剂中的用途。[0009]本发明的再一个目的是提供一种生物饲料添加剂，其包含上述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) K018。
[0010]根据本发明的一个方面,提供了一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)K018。本发明所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) K018能够耐人工胃酸、耐胆盐、耐人工肠液、耐高温，对肠道中致病性金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌等有较强抑制作用，产淀粉酶能力和产纤维素酶能力较强，可以降解淀粉和纤维素。
[0011]本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)K018保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC N0.6101，保藏日期为2012年5月11曰。
[0012]本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)K018委托中国科学院微生物研究所进行菌种鉴定，鉴定结果为Bacillus subtilis枯草芽孢杆菌。
[0013]细胞形态和理化试验结果:
【权利要求】
1. 一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) K018,其保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC N0.6101。
2.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis) K018在制备生物饲料添加剂中的用途。
3.一种生物饲料添加剂，其包含权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis) K018。
4.如权利要求3所述的生物饲料添加剂，其通过以下步骤制备: 种子液培养:将保藏的枯草芽孢杆菌K018接种到固体培养基上，于37°C培养20~24小时，挑取单菌落接种到种子培养基中，于37°C，180~220rpm培养20~24小时，得到枯草芽孢杆菌摇瓶种子液，其中，所述种子培养基包含:蔗糖，硫酸铵，麸皮，柠檬酸钠，K2HPO4.3H20, MgS04.7H20, FeS04.7H20 ； 扩大培养:摇瓶种子液接种到装有发酵培养基的发酵罐中，于30~37°C，搅拌速度180~200rpm，通气量为I~3V/V.min，培养24至28小时，其中，所述发酵培养基包含:蔗糖，硫酸铵，麸皮，柠檬酸钠，K2HPO4.3H20, MgSO4.7H20, MnSO4, FeSO4.7H20, CuSO4,消泡剂； 固体发酵:以麸皮为主要原料，添加糖蜜和玉米浆作为固体发酵培养基，待培养基灭菌冷却后，将将扩大培养后的菌株K018接种到固体发酵培养基上，30°C厌氧发酵，发酵完成后60°C烘干，即得所述生物饲料添加剂。
【文档编号】C12N1/20GK103614327SQ201310616703
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年11月27日 优先权日:2013年11月27日
【发明者】李光智 申请人:北京昕大洋科技发展有限公司