含有链球菌菌株和乳杆菌菌株的组合的药物制剂的制作方法
专利名称：含有链球菌菌株和乳杆菌菌株的组合的药物制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于葡萄球菌Staphylococcus)引起的感染和疾患的预防和治疗的药物制剂，有关所述药物制剂的药盒，用于葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的方法，和所述药物制剂或药盒的用途。
背景技术：
葡萄球菌感染一直以来为全世界广泛散布的问题，且由于对用于治疗葡萄球菌感染的不同抗生素药物的抗性的发展而逐渐加剧。葡萄球菌是我们日常环境中常见的球形革兰氏阳性细菌。在显微镜下它们呈圆形且形成葡萄样群集。葡萄球菌属包括三十个以上的种，例如，金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)禾口腐生葡萄球菌 (Staphylococcus saprophyticus)。金黄色葡萄球菌属于正常人类细菌菌群并存在于皮肤上、粘膜上和鼻孔(nostrils/nares)中。表皮葡萄球菌存在于皮肤上、鼻孔中和口腔中，而腐生葡萄球菌存在于尿道中。当这些菌株被允许在储存不当的食物中生长时产生的葡萄球菌肠毒素是导致呕吐和腹泻的食物中毒的常见原因。表皮葡萄球菌主要存在于人类的皮肤上且可引起伴有皮肤下脓液形成的感染，尤其对于具有降低的免疫抵抗力的人。这些菌株还可引起脓毒，尤其是对于严重患病的患者， 例如，接受长期静脉导管术的患者。腐生葡萄球菌很少引起疾病，但在某些情形下可引起尿道感染。特别地，金黄色葡萄球菌通过毒素产生或侵入在人类和动物中引起多种疾病。金黄色葡萄球菌，简称为S. aureus，也称作golden staph，是葡萄球菌感染的最常见原因，并能够导致从轻微皮肤感染到威胁生命的疾病的一系列疾病，所述轻微皮肤感染比如丘疹、 脓疱疮、疮、蜂窝组织炎毛囊炎、疖、痈、烫伤样皮肤综合征和脓肿，所述威胁生命的疾病比如肺炎、脑膜炎、骨髓炎心内膜炎、中毒性休克综合征(TSS)和败血病。其发生范围从皮肤、 软组织、呼吸道、骨、关节和血管内到创伤感染。其还是经常导致外科手术后创伤感染的医院感染的四种最常见原因之一。S. aureus可在人类皮肤上作为共生体而存在，且在大约三分之一的人群中，其还常常存在于鼻中，但较少存在于咽喉中。这些环境下S. aureus的存在并不一定表示感染且因此并不一定需要治疗。其可在诸如狗、猫、猪和马的家畜上生存。其可在干燥环境表面生存几个小时。当诸如皮肤或粘膜内层的正常屏障被破坏时，S. aureus能够感染其它组织。 这导致了疖(疮)和痈(疖的集合)。在婴儿中S. aureus感染能够导致称为葡萄球菌烫伤样皮肤综合征(SSSQ的严重疾病。S. aureus感染可经与来自感染创伤的脓液相接触、通过产生破坏组织的透明质酸酶而与感染者的皮肤-皮肤相接触、和与感染者所使用的诸如毛巾、褥单、衣服或体育器材的物体相接触而被传播。深位S. aureus感染可能是非常严重的。 假关节使人处于脓毒性关节炎的特定风险中，且表皮葡萄球菌(心脏瓣膜的感染)使人处于快速传播的肺炎的风险中。S. aureus在遗传过敏性皮炎患者中非常流行，该患者比其他人对S. aureus具有较少抗性。其常导致并发症。该疾病最有可能发现于人体的增殖活跃的部位，以及腋窝、毛发和头皮中。当这些区域中的大型丘疹爆发时，将导致最严重的感染。 S. aureus的一些菌株产生中毒性休克综合征毒素，其为中毒性休克综合征的病原体。以上也提到，一些产生肠毒素的S. aureus菌株是葡萄球菌食物中毒的原因。此外，S. aureus是乳牛中乳腺炎的致病因子之一。葡萄球菌菌株具有对抗生素产生抗性的超常能力。葡萄球菌对青霉素的抗性由青霉素酶(β_内酰胺酶的一种形式)产生所介导，该酶分解青霉素分子的内酰胺环。抗青霉素酶的青霉素比如甲氧西林(methicillin)、苯唑西林(oxacillin)、5-甲基-3-邻氯苯基-4-异噁唑青霉素(cloxacillin)、双氯西林(dicloxacillin)和萘夫西林 (nafcillin)，能够抵抗葡萄球菌青霉素酶的降解。目前，S. aureus已对多种常用抗生素产生抗性。在英国，所有S. aureus分离株中仅有2%对青霉素敏感，与世界上其它地方的情形相似，这是由青霉素酶所导致的，该酶是 β -内酰胺酶的一种类型。已开发了抗β -内酰胺酶的青霉素(甲氧西林、苯唑西林、5-甲基-3-邻氯苯基-4-异噁唑青霉素和氟氯西林)来治疗抗青霉素的S. aureus并且仍用作一线治疗。甲氧西林是该种类中首次使用的抗生素。其在1959年被引入，但仅两年后在英格兰报道了首例抗甲氧西林的S. aureus (以下简称为MRSA)。尽管如此，甚至在医院环境下，MRSA—般仍罕见，直到20世纪90年代医院中MRSA 流行爆发时，目前是地方性流行的。医院环境和社区环境中的MRSA感染常用非β-内酰胺抗生素诸如克林霉素 (clindamycin)(一禾中林可胺(Iincosamine))禾口复方磺胺甲口,惡唑(co-trimoxazole)(也常称作三甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑)进行治疗。对这些抗生素的抗性也已导致了新型广谱抗革兰氏阳性抗生素的使用，比如利奈唑胺(linezolid)，因为其作为口服药物的可用性。目前用于MRSA导致的严重侵入性感染的一线治疗包括糖肽抗生素(万古霉素 (vancomycin)和替考拉宁(teicoplanin))。这些抗生素具有许多问题，主要集中于对静脉内施用的需要(没有可用的口服制剂)、毒性和通过血液测试定期监测药物水平的需要。还注意到糖肽抗生素并不良好渗透到感染的组织中。这对于脑和脑膜的感染和心内膜炎特别重要。由于治疗结果差，糖肽不能用来治疗甲氧西林敏感的S. aureus。由于对青霉素的高水平抗性，且由于MRSA对万古霉素产生抗性的可能性，疾病控制和预防中心已出版了适当使用万古霉素的指南。在已知MRSA感染的发生率高的状况下， 主治医师可选择使用糖肽抗生素，直到知道感染有机体的身份。当证实感染由S. aureus的甲氧西林敏感的菌株引起时，则适当地将治疗改变为氟氯西林或甚至青霉素。然而，一些新发现的MRSA菌株甚至对万古霉素和替考拉宁表现出抗生素抗性。抗万古霉素的S. aureus (VRSA)是对糖肽产生抗性的一种S. aureus菌株。1996 年在日本报道了首例万古霉素中度耐药S. aureus (VISA)，但首例真正抗糖肽抗生素的 S. aureus仅在2002年被报道。2005年在美国报道了三例VRSA感染。葡萄球菌感染，包括MRSA，最常在医院和卫生机构的人群中发生。发生于其他最近未住院或未经受任何医疗程序的健康人中的MRSA感染也称为社区相关(CA)MRSA感染。 MRSA的定植可以是长期静止的，有时为多年。
MRSA可定植于人体中的不同部位，比如耳中、鼻咽区域中、胃肠区域中、尿中和皮肤上。皮肤感染的例子为疮、脓肿、睑腺炎(眼睑线的感染)、痈、蜂窝组织炎和脓疱疮。如果定植在血液中或体内其它器官或部分中，则发生感染，例如败血病(血中毒)、脓毒性休克、脓毒性关节炎、骨髓炎、内部脓肿、脑膜炎、肺炎和心内膜炎。长期携带者具有较高的感染风险并还可将MRSA传播至其他人。葡萄球菌感染的预防是困难的，接种疫苗不是非常有效的途径。对葡萄球菌菌株显示出抗生素抗性的人通常在感染诊所或相应的机构被隔离以避免感染的传播。因此，尤其是MRSA，在许多国家中已成为主要的问题并且不得不预防MRSA传播。如上所述，MRSA的治疗取决于人是被感染金黄色葡萄球菌还是仅被定植。大多数 MRSA感染将需要在医院治疗并且抗生素治疗可能需要持续数周。如果人被MRSA定植且需要进入医院进行手术，他需要除去MRSA的治疗，例如，在皮肤上或在鼻内使用特殊的抗生素乳剂以除去细菌。可能还需要用杀菌洗发剂和洗剂洗涤皮肤和头发。还需要医院中的单间来阻止MRSA传播。如上所述，需要葡萄球菌引起的感染的改进的治疗和预防，且需要预防葡萄球菌从携带葡萄球菌、特别是抗性葡萄球菌菌株的个体(无论是否发生感染)进一步传播。发明_既述本发明的目的是减少或消除以上公开的与葡萄球菌引起的感染和疾患有关的问题。根据本发明，该目的通过在人类和动物中用于葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和治疗的药物制剂来实现，其中，其包括以下的组合a) 一种或多种活的α -链球菌(α -Streptococcus)菌株，所述α -链球菌菌株选自由登录号为 NCIMB 40104、NCIMB 40105、NCIMB 40106 和 NCIMB 40873 的血链球菌 lKStreptococcus sanguis II)菌株、登录号为 NCIMB 40107 和 NCIMB 40874 的缓症链球菌菌株(Sti^ptococcus mitis)、登录号为NCIMB 40875和NCIMB 40876的口腔链球菌菌株(Str印tococcusoralis)、登录号为 NCIMB 40157 的乳链球菌菌株(Streptococcus lactis)LlA，和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；和b) 一种或多种活的乳杆菌菌株(LactcAacillus)，所述乳杆菌菌株选自由登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株(Lactobacillus rhamnosus)LB21、登录号为DSM 17852的植物乳杆菌菌株(Lactobacillus plantarum) LB3和登录号为DSM 17853的植物乳杆菌菌株LB7和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；在其中所述菌株维持其存活力的至少一种药学上可接受的介质中。并且，本发明涉及用于葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的药盒，其中，其包括两种或多种独立的制剂，所述两种或多种独立的制剂预期同时或在预定的时间段内依次施用给需要其的人或动物，其中所述药盒包括以上的a)和b)的组合且药盒中的每种制剂包括至少一种根据以上的a)的菌株和/或至少一个根据以上的b)的菌株。本发明还涉及用于葡萄球菌引发的感染或疾患的预防和/或治疗的方法，其中根据本发明的药物制剂或药盒被施用给需要其的人或动物。在另一方面，本发明涉及根据本发明的药物制剂或药盒在用于制备人和动物中葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和/或治疗的药物的用途。
根据本发明的药物制剂或药盒还可用于制备用于上呼吸道中的病毒感染的预防和/或治疗的药物，所述病毒诸如鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒和腺病毒。根据以下包括实验的本发明的详细描述和所附权利要求书，本发明的目的、问题、 解决方法和特征的进一步公开将是明显的。优选实施方案的详细描述本发明人惊奇地发现多种已知的微生物菌株的新组合在葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗过程中产生了不可预见的有利作用，即，其对诸如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的葡萄球菌菌株具有抑制作用、阻遏作用、竞争作用和/或杀灭作用。组合的菌株来源于两种主要的微生物组，更确切地为α-链球菌菌株和乳杆菌菌株。虽然在体外试验中在肠中LB21对金黄色葡萄球菌已大致显示出轻微的有益作用，但是这两种主要的微生物组中没有一组先前独立地显示出对葡萄球菌的任何相似的良好作用。这些菌株的组合产生了令人惊奇地有利的协同作用。根据本发明的药物制剂中的链球菌菌株中的一些先前在W090/09186 (Essum AB)中被公开。在该文献中公开了这些链球菌菌株可用于β-链球菌性扁桃体炎的预防和/或治疗的药物制剂。所述的血链球菌II 菌株和缓症链球菌菌株于1989年2月3日保藏于iTorry Research Station, POBox 31,135 Abbey Road,Aberdeen AB9 8DG,Great Britain的英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心 (NCIMB)，且登录号分别为 NCIMB 40104,NCIMB 40105,NCIMB 40106 和 NCIMB 40107。这四种菌株的通用交叉名称为α 89a、α 502、α 505和α 7213。WO 90/09186中详细公开了这些链球菌菌株的分离、分型和医学功能。已证明这些α-链球菌菌株对由β-链球菌引起的扁桃体炎的抑制作用高度取决于由α-链球菌所产生的细菌素的存在。WO 99/53932 (Bacterum AB)中公开了用于急性中耳炎(耳的炎症)和中耳炎(中耳的炎症)的预防和/或治疗的药物制剂。所述制剂包含根据本发明的组合的药物制剂中存在的链球菌菌株中的一些，即，登录号为NCIMB 40104的微生物菌株血链球菌、登录号为 NCIMB 40873的血链球菌、登录号为NCIMB 40875的口腔链球菌(也称作α 4)、登录号为 NCIMB40876的口腔链球菌(也称作α 6)和登录号为NCIMB 40107和NCIMB40874的缓症链球菌菌株，以及，任选地，其它具有基本相同的能力的α-链球菌菌株，所述能力即，抑制流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、月市炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)禾口卡他莫拉菌(Moraxellacatarrhalis)的能力。菌株 NCIMB 40873、40874、40875 和 40876 于 1997 年 3 月 19 日保藏于 23 St. Machar Drive, Aberdeen, AB2 1RY,Great Britain 的英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心(NCMB)。登录号为NCIB40104的菌株于1989年2月3 日保藏(参见以上的WO 90/09186)，且从此指定为NCIMB 40104。WO 99/53932中详细公开了这些菌株的分离、分型和医学功能。还参见α-链球菌作为复发的链球菌性扁桃体炎的补充治疗——一项随机的安慰剂-对照研究。Roos K. Holm SE, Grahn E, Lind L. Scand J Infect Dis25 31-35,1993 ；用于复发的链球菌性咽扁桃体炎的预防的选定的α-链球菌的再定植
(Recolonization)-一项随机的安慰剂-对照多中心研究。RoosK，Holm SE, Grahn Ε,
Lagergren L. Scand J Infect Dis沘459_462，1996 ；在链球菌性咽炎的复发中干扰 α-链球菌的耐受性和效力——一项安慰剂-对照研究。Falck G，Grahn Hakansson Ε， Holm SEjRoos K, Lagergren L. ActaOto-Laryngologica，119 :944_948，1999 ；在儿童中“干扰” α-链球菌的再定植对急性和分泌性中耳炎的复发的作用随机安慰剂对照试验。Roos K, GrahnHakansson E, Holm SE. BMJ,322 :210-212,2001 W090/00850公开了 α -乳链球菌菌株LlA且登录号为NCIMB 40157。该菌株当时被分类为α-链球菌菌株，为α-溶血性链球菌，但此后被重新分类为乳酸乳球菌菌株。按照原始分类，该菌株被归于根据本发明的组合中的链球菌菌株a)。WO 98/55131 (Essum AB)公开了用于人和动物中的胃肠疾患的预防和/或治疗的药物制剂，其中所述制剂包含以登录号为NCIMB 40564的干酪鼠李糖乳杆菌 (Lactobacillus casei rhamnosus)菌株LB21和/或一种或多种具有基本相似功能的其变体的形式的活的微生物菌株。以上所述的LB21菌株于1993年6月11日保藏于23 St. Machar Drive, Aberdeen, AB2 1RY，Great Britain的英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心(NCIMB)。WO 98/55131详细公开了该LB21菌株的分离、分型和医学功能。干酪鼠李糖乳杆菌LB21，以替代术语鼠李糖乳杆菌LB21被包括在根据本发明的组合的药物制剂的b)部分中，其分离自婴儿的粪便中并且已证明对于对人类中不同类型的肠道感染重要的大多数细菌中具有特别显著的抑制作用，比如常见的金黄色葡萄球菌，但不是MRSA，但大体上涉及不同的菌种，比如沙门氏菌(Salmonella)、志贺氏菌(Siigella)、 假单胞杆菌(Pseudomonas)、克雷白杆菌-肠杆菌(Klebsiella-Enterobacter)、弯曲杆菌(Campylobacter)、艰难梭菌(Clostridium difficile)、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)等。LB21对肠病原菌的明确地强烈抑制作用可能由于其产生特定的酸和特定的低分子蛋白或特定的低分子肽的事实引起的，所述低分子量的蛋白或肽是热稳定的，具有低于5000道尔顿的分子量，并以独特形式对肠病原菌产生有害影响。登录号为DSM 17852的植物乳杆菌菌株LB3和登录号为DSM 17853的植物乳杆菌菌株 LB7 于 2006 年 1 月 6 日保藏于 Mascheroder Weg lb, D-38124 Braunschweig 的德国微生物菌禾中保藏中心(Deutsche Sammlungvon Mikroorganismen und Zellkulturen)，并还有效作为根据本发明的药物制剂中的乳杆菌菌株。以下实施例中所提到的其它乳杆菌菌株，例如，LB45、LB64、LB66、LB87、LB99、LB931和LB hs_l，在根据本发明的药物制剂中也是有用的。LB45、LB64、LB66、LB87 和 LB99 还未保藏，但可购自 Essum AB, Box 3160,903 04 Umea, Sweden。胚芽乳杆菌(Lactobacillusplantarum)菌株 LB931 的登录号为 DSM 11918 且发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)菌株 LB Ess-I 的登录号为 DSM 17851。 其分别于1998年1月9日和2006年1月6日保藏于Deutsche Mascheroder Weg lb, D_38124Braunschweig0根据本发明的药物制剂中的细菌菌株的独特组合发挥了有利的协同作用，这是由于，首先，链球菌菌株占据表皮细胞、基质和粘膜，且皮肤创造了一种物理屏障并防止葡萄球菌粘附于这些细胞。因此，机体患处的菌群被平衡且增强。另一方面，根据本发明的乳杆菌菌株产生抑制诸如MRSA的葡萄球菌生长的物质，但主要通过由这些乳杆菌菌株的细菌细胞壁而非这些乳杆菌菌株产生的代谢物调节天然免疫系统和适应性免疫系统来增强天然防御。对三位供血者进行实验，在mRNA水平上进行测量，显示LB21没有增高静息T细胞的INF-Y水平或IL-4水平，但对于激活的T细胞LB21增高了或降低了细胞因子反应。在体内通过在鼻中喷雾LB21并随后取样鼻咽液体来测量细胞因子而进行的研究显示了喷雾治疗后IL-8显著增高。IL-8是天然免疫系统反应中免疫反应的重要中介体。α-链球菌
8和乳杆菌的特定菌株的体内协同作用可能取决于抗微生物成分，例如，来自α-链球菌的细菌素和其在粘膜上的物理屏障，连同由乳杆菌菌株和免疫系统的刺激产生的特定的酸。根据本发明的细菌菌株的组合在以减少或消除粘膜上和皮肤上的有害葡萄球菌菌株为目的的体外和体内实验中都显示出良好的结果。如果仅单独使用根据本发明的菌株 a)和菌株b)中的任何一个，则不会获得这样的良好效果。虽然LB21菌株在体外试验过程中仅对肠中一般的金黄色葡萄球菌表现出有利的作用，LB21和组a)中链球菌菌株中的一种或多种的组合表现了大为改善的体外作用。该组合对所有类型的葡萄球菌菌株表现出良好的作用，特别是金黄色葡萄球菌菌株，例如MRSA，即作为世界性大问题的抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌。根据本发明，可使用权利要求1中所界定的根据本发明的a)组和b)组的每组中的多于一种的菌株。在一个实施方案中，使用血链球菌菌株α 89a、α 502和α 505作为链球菌菌株。在另一个实施方案中，在b)组中使用了鼠李糖乳杆菌LB21和，任选地，植物乳杆菌菌株LB3、LB7和LB931中的一种或多种作为乳杆菌菌株。在另一个有用的实施方案中，使用了血链球菌08如和鼠李糖乳杆菌1^21的组合。a)组和b)组中的菌株的其它组合也是有效的。此外，具有相同或基本相似作用的其它链球菌菌株和乳杆菌菌株在根据本发明的药物制剂中的菌株的组合中也是有用的。本文所用的表达“具有相同或基本相似作用的其它链球菌菌株和乳杆菌菌株”意指以组合的形式在体内消除或杀伤葡萄球菌的这些菌株。在体内获得了最佳效果。在体外，PBS滤液结果已显示利用根据本发明的组合在6 小时内彻底杀灭了 MRSA，更确切地为利用菌株α 89a和LB21的组合。在相同的治疗条件下仅利用LB21，在16小时内杀灭了 MRSA，且仅利用α -链球菌，MRSA不被杀灭而仅是减少了数量。表达“葡萄球菌引起的感染和疾患”意指导致伴随组织疼痛肿胀的感染的不希望的葡萄球菌菌株繁殖，以及由于葡萄球菌感染导致的由其它微生物引起的任何其它疾病或感染。该表达还意在包括个体被葡萄球菌定植的疾患，即，葡萄球菌的携带者，例如，MRSA携带者，但还未发展为感染，即，未患有任何疾病。然而，这样的个体具有在长期过程中将葡萄球菌传播至其他个体的能力。这样的个体也处于发生MRSA感染的高风险中。肺炎、软组织感染和中心静脉导管感染是最常见的感染。如上所述，其它感染和疾患的实例为诸如丘疹、 脓疱疮、疮、蜂窝组织炎毛囊炎、疖、痈、烫伤样皮肤综合征和脓肿的轻微皮肤感染以及诸如脑膜炎、骨髓炎心内膜炎、中毒性休克综合征(TSS)和败血病的威胁生命的疾病。表达“预防葡萄球菌引起的感染和疾患”意指预防非葡萄球菌的携带者的个体和葡萄球菌的携带者的个体免于发生感染或发生另外的葡萄球菌引起的疾患，并阻止携带者将其传播至其他人。本文所用的表达“即用型(ready-to-use)制剂”意指待施用给人或动物的最终制剂。本文所用的表达“预定的时间段”意指药盒中的两种或更多种不同制剂可被施用， 同时还保持对葡萄球菌菌株的可接受的杀伤或抑制作用的最大时间段。在一个实施方案中，根据本发明的药物制剂的菌株组合中的a)组中限定的菌株和b)组中限定的菌株必须要求不存在于同一个制剂中。虽然同一个制剂中的组合具有一些更有利的理由，例如有利于生产和施用，但a)组中的菌株和b)组中的菌株可存在于独立的制剂中并可同时或在预定的时间段内独立地被施用。在这样的实施方案中，取决于a)组和b)组中的每组分别将包括多少种不同菌株，本发明构成含有两种或更多种不同制剂的药盒，每种制剂含有来自a)组的至少一种菌株和/或来自b)组的至少一种菌株。该药盒还可包含含有属于a)组的两种或更多种菌株的一种制剂或每种都含有属于a)组的一种菌株的多种制剂。该药盒还可包含含有属于b)组的两种或更多种菌株的一种制剂或每种都含有属于b)组的一种菌株的多种制剂。关于协同作用，应该在尽可能小的时间段内，优选地同时将药盒中所述含有属于a)组的菌株的一种或多种制剂和所述含有属于b)组的菌株的一种或多种制剂施用给需要其的人或动物。所述含有属于a)组的菌株的一种或多种制剂和所述含有属于b)组的菌株一种或多种制剂之间的预定时间段可以长达M小时，更优选地为12小时，且最优选为同时。药盒中这样的一种或多种制剂的施用顺序并不重要。根据本发明的药物制剂或药盒可期望用于口服制剂、口腔粘膜制剂、咽剂型、鼻制剂、牙科制剂、皮肤(cutaneous/skin)制剂、阴道制剂、直肠制剂、耳制剂或透析制剂。如上所述，本发明的药盒实施方案中的不同制剂施用之间的预定时间段不可太长，以致无法获得协同作用，例如，由于非最佳的定植或不希望的与其它菌株的相互作用，并且如上所述， 至多为24小时。药学上可接受的介质可以是医学领域常规使用的任何介质，还包含常规使用的辅助剂和赋形剂，或可以是变酸或发酵的乳制品、优选地为酸奶、酸乳酪和牛奶，或果汁、冰淇淋、糖和水果饮料。当将根据本发明的制剂施用给动物时，药学上可接受的介质还可以是 NaCl溶液，葡萄糖溶液或脱脂乳，或是动物饲料，优选地为乳清、干饲料或浓缩悬液。根据本发明的药品和药盒中的菌株可以即用型产品的冻干形式存在。为治疗葡萄球菌在口腔或咽喉中引起的感染或疾患，可将药物制剂以例如喷雾剂 (例如咽喷雾剂或颊面喷雾剂)、粉末、片剂、扁囊剂、颗粒、胶囊、优选的介质中的悬液、漱口剂或饮料、糖浆或溶液的形式来施用。为治疗葡萄球菌在皮肤上或皮肤中引起的感染和疾患，将药物制剂以凝胶、药膏、 软膏、泡沫、糊剂、洗液、乳剂、贴片、棒剂、乳膏(例如，洗涤膏)或油悬浮液的形式来施用。为治疗葡萄球菌在胃肠道中引起的感染和疾患，将根据本发明的药物制剂以片剂 (任选持续释放的片剂)、胶囊(优选肠溶衣和/或结肠衣胶囊)、悬浮液、溶液、饮料、糖浆或汤的形式来施用。根据本发明的药物制剂还令人惊奇地被证实防止病毒在上呼吸道中引起的感染和疾患，例如由诸如鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒和腺病毒的这些病毒菌株所引起的。更确切地，仅利用乳杆菌菌株LB21进行的先前实验已显示，在130位儿童中与未被施用LB21 的儿童相比在上呼吸道和肠道中发生的病毒感染减少。根据本发明的组合似乎进一步降低了病毒感染的数量。因此，在一个实施方案中，乳杆菌菌株LB21可用于生产用来治疗病毒在上呼吸道引起的感染和疾患的药物。在另一个实施方案中，乳杆菌菌株LB21和α -血链球菌II菌株α 89a的组合可用于相同的目的。对M位患有SOM(分泌性中耳炎)的儿童进行临床研究，所述儿童在SOM前经常发生病毒感染。将LB21和α 89a的组合作为鼻喷雾剂来施用，且活性剂组中的37位儿童中的 18位(48%)病情有很大好转或痊愈，相比之下安慰剂组中的17位儿童中有3位(17%)。表达“病毒诱导的感染和疾患”意指导致感染的不希望的病毒增殖，比如感冒、咽喉痛、流鼻涕、鼻塞、打喷嚏和咳嗽。在根据本发明的药物制剂中，可选地在根据本发明的药盒中，所述一种或多种链球菌菌株以IO4-IO11Cfu (菌落形成单位)/ml，优选105-101QCfu/ml，最优选106-109cfu/ml的即用型制剂的总量存在。相应地，在根据本发明的药物制剂中，可选地在根据本发明的药盒中，所述一种或多种乳杆菌菌株以1(^-10^(^11(菌落形成单位)/ml，优选IO5-IOiciCfVml,最优选 106-109CfU/ml即用型制剂的总量存在。
实施例实施例1体外试验乳杆菌PBS滤液的生产将乳杆菌LB21在5ml的MRS肉汤中培养(37°C,5% C02，8小时)。将(450 μ 1) 的LB21培养物再接种到含45ml新鲜预热的MRS肉汤的6个管中并在37°C和5% CO2下孵育16小时。然后管在20°C下以3800rpm离心20分钟。弃去上清液并将沉淀重悬于5ml预热的PBS中并在37°C，5% CO2下培养5小时。每小时一次轻轻混合管。孵育之后，管在8°C 下以3800rpm离心20分钟。将所有上清液收集到新管中，并测量p!K4. 0-4. 3)。然后将上清液通过0.22 μ m过滤器无菌过滤。滤液以IOml管中Iml的等分试样在_20°C贮存待用。对照PBS滤液的生产将25ml PBS溶液的pH值调节至4. 3。然后将溶液通过0. 22 μ m过滤器无菌过滤并以IOml管中Iml的等分试样在_20°C贮存待用。干扰试验将5种不同的MRSA菌株02、沈、28、四和33 ；分离自MRSA定植的患者)于5ml的 TH肉汤中在37°C下培养6小时。然后，将1 % (50 μ 1)的MRSA培养物再接种到5ml新鲜预热的TH肉汤中，且在37°C下孵育17小时。然后将菌株在PBS中稀释，并添加到LB21PBS滤液中，添加到LB21/链球菌(a89a)滤液的混合物中，并添加到PBS中的对照中，终浓度为 104-105cfu/ml的。还将5% TH肉汤添加到所有PBS滤液中。将管在37°C下孵育并在O小时和M小时后取样。将样品在适当稀释后培养于大豆胰蛋白胨琼脂板和血琼脂培养板上。 单独的LB21上清液抑制所有MRSA的生长并还杀灭其中的一种(MRSA^)，而LB21和α 89a 的组合在M小时内杀灭所有的被试验的MRSA，如表格中标题为“活性剂上清液”一列所示。 在对照组中，MRSA生长至约107-108cfu/ml。LB21上清液，和LB21上清液+ α 89a上清液混合物的干扰；pH 4. 权利要求
1.一种在人类和动物中用于葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和治疗的药物制剂，其中，所述药物制剂包括以下的组合a)一种或多种活的α-链球菌菌株，所述α-链球菌菌株选自由登录号为NCIMB 40104、NCIMB 40105、NCIMB 40106 和 NCIMB 40873 的血链球菌 II 菌株、登录号为 NCIMB 40107和NCIMB 40874的缓症链球菌菌株、登录号为NCIMB 40875和NCIMB 40876的口腔链球菌菌株、登录号为NCIMB 40157的乳链球菌菌株L1A，和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；和b)一种或多种活的乳杆菌菌株，所述乳杆菌菌株选自由登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株LB21、登录号为DSM 17852的植物乳杆菌菌株LB3和登录号为DSM 17853的植物乳杆菌菌株LB7和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；在其中所述菌株维持其存活力的至少一种药学上可接受的介质中。
2.根据权利要求1所述的药物制剂，其中所述药物制剂包括以下的组合a)登录号为 NCIMB 40104和NCIMB 40106的血链球菌菌株，和登录号为NCIMB 40876的口腔链球菌菌株，和b)登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株LB21。
3.根据权利要求2所述的药物制剂，其中所述药物制剂包括以下的组合登录号为 NCIMB 40104的血链球菌II菌株和登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株LB21。
4.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述一种或多种链球菌菌株以 104-10"、优选105-101(1、最优选IO6-IO9菌落形成单位/毫升即用型制剂的总量存在，且其中所述一种或多种乳杆菌菌株以104-10"、优选105-101(1、最优选IO6-IO9菌落形成单位/毫升即用型制剂的总量存在。
5.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述一种或多种具有相同或基本相同作用的乳杆菌菌株的变体是LB45、LB64、LB66、LB87、LB99、LB931和LB Ess-I。
6.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述药物制剂为口服制剂、口腔粘膜制剂、牙龈制剂、鼻制剂、牙科制剂、皮肤制剂、阴道制剂、直肠制剂或耳制剂。
7.根据权利要求6所述的药物制剂，其中所述药物制剂具有以下形式粉末、颗粒、扁囊齐 、胶囊、片齐 、糊齐 、乳膏、凝胶、软膏、药膏、泡沫、糊齐 、洗液、乳膏、油悬浮液、喷雾齐U、 悬浮液、溶液、乳液、贴片、棒剂、喷雾剂，优选鼻喷雾剂或口腔喷雾剂、漱口剂、或饮料或溶液。
8.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述药学上可接受的介质是变酸或发酵的乳制品、优选酸奶、酸乳酪和牛奶，或果汁、冰淇淋、汤和水果饮料。
9.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中当将根据本发明的制剂施用给动物时，所述药学上可接受的介质是动物饲料，优选地为乳清、干饲料或浓缩悬液。
10.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述药物制剂中的所述菌株是冻干的。
11.根据权利要求10所述的药物制剂，其中所述药物制剂存在于NaCl溶液、葡萄糖溶液或脱脂乳中。
12.一种用于葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的药盒，其中所述药盒包括两种或多种独立制剂，所述两种或更多种独立制剂预期被同时或在预定的时间段内，优选24小时内依次被施用给需要其的人或动物，其中所述药盒包括根据权利要求la)的菌株和根据权利要求lb)的菌株的组合，其中所述药盒中的每种制剂包括至少一种根据权利要求 la)的菌株和/或至少一种根据权利要求lb)的菌株。
13.一种用于葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和/或治疗的方法，其中将根据权利要求1-11所述的药物制剂或根据权利要求12的药盒施用给需要其的人或动物，优选MRSA携带者。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述葡萄球菌引起的感染或疾患是由金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和/或腐生葡萄球菌菌株引起的，尤其是多重抗性的金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株引起的。
15.根据权利要求14所述的方法，其中所述葡萄球菌引起的感染或疾患存在于口腔区域、耳区域、鼻区域和/或咽区域中、胃肠道中、皮肤上、或体内的其它部位或器官。
16.根据权利要求13所述的方法，其中所述葡萄球菌引起的感染或疾患是轻微皮肤感染以及威胁生命的疾病，所述轻微皮肤感染优选丘疹、脓疱疮、疮、蜂窝组织炎毛囊炎、疖、 痈、烫伤样皮肤综合征和脓肿，所述威胁生命的疾病优选肺炎、脑膜炎、骨髓炎、心内膜炎、 中毒性休克综合征(TSQ和败血病。
17.根据权利要求1-11中任一项所述的药物制剂或根据权利要求12的药盒制备用于预防和/或治疗在人和动物中葡萄球菌引起的感染或疾患的药物的用途。
18.根据权利要求1-11中任一项所述的药物制剂或根据权利要求12的药盒制备用于预防和/或治疗上呼吸道病毒感染的药物的用途，所述上呼吸道病毒感染优选地为鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒和腺病毒。
全文摘要
公开了在人类和动物中用于葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和治疗的药物制剂，以及用于葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的药盒和葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的方法，及用途，其中该药物制剂包含以下的组合a)一种或多种活的α-链球菌菌株，所述α-链球菌菌株选自由登录号为NCIMB 40104、NCIMB 40105、NCIMB 40106和NCIMB 40873的血链球菌II菌株、登录号为NCIMB 40107和NCIMB40874的缓症链球菌菌株、登录号为NCIMB 40875和NCIMB 40876的口腔链球菌菌株、登录号为NCIMB 40157的乳链球菌菌株L1A，和具有相同的或基本相似的作用的它们的一种或多种变体组成的组；和b)一种或多种活的乳杆菌菌株，所述乳杆菌菌株选自由登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株LB21、登录号为DSM 17852的植物乳杆菌菌株LB3和登录号为DSM 17853的植物乳杆菌菌株LB7和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；在其中所述菌株维持它们的存活力的至少一种药学上可接受的介质中。
文档编号A61P11/00GK102215849SQ200980145762
公开日2011年10月12日 申请日期2009年11月17日 优先权日2008年11月17日
发明者克里斯蒂安·鲁斯, 艾瓦·格兰哈肯森 申请人:埃索姆股份公司
技术领域：
本发明涉及用于葡萄球菌Staphylococcus)引起的感染和疾患的预防和治疗的药物制剂，有关所述药物制剂的药盒，用于葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的方法，和所述药物制剂或药盒的用途。
背景技术：
葡萄球菌感染一直以来为全世界广泛散布的问题，且由于对用于治疗葡萄球菌感染的不同抗生素药物的抗性的发展而逐渐加剧。葡萄球菌是我们日常环境中常见的球形革兰氏阳性细菌。在显微镜下它们呈圆形且形成葡萄样群集。葡萄球菌属包括三十个以上的种，例如，金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)禾口腐生葡萄球菌 (Staphylococcus saprophyticus)。金黄色葡萄球菌属于正常人类细菌菌群并存在于皮肤上、粘膜上和鼻孔(nostrils/nares)中。表皮葡萄球菌存在于皮肤上、鼻孔中和口腔中，而腐生葡萄球菌存在于尿道中。当这些菌株被允许在储存不当的食物中生长时产生的葡萄球菌肠毒素是导致呕吐和腹泻的食物中毒的常见原因。表皮葡萄球菌主要存在于人类的皮肤上且可引起伴有皮肤下脓液形成的感染，尤其对于具有降低的免疫抵抗力的人。这些菌株还可引起脓毒，尤其是对于严重患病的患者， 例如，接受长期静脉导管术的患者。腐生葡萄球菌很少引起疾病，但在某些情形下可引起尿道感染。特别地，金黄色葡萄球菌通过毒素产生或侵入在人类和动物中引起多种疾病。金黄色葡萄球菌，简称为S. aureus，也称作golden staph，是葡萄球菌感染的最常见原因，并能够导致从轻微皮肤感染到威胁生命的疾病的一系列疾病，所述轻微皮肤感染比如丘疹、 脓疱疮、疮、蜂窝组织炎毛囊炎、疖、痈、烫伤样皮肤综合征和脓肿，所述威胁生命的疾病比如肺炎、脑膜炎、骨髓炎心内膜炎、中毒性休克综合征(TSS)和败血病。其发生范围从皮肤、 软组织、呼吸道、骨、关节和血管内到创伤感染。其还是经常导致外科手术后创伤感染的医院感染的四种最常见原因之一。S. aureus可在人类皮肤上作为共生体而存在，且在大约三分之一的人群中，其还常常存在于鼻中，但较少存在于咽喉中。这些环境下S. aureus的存在并不一定表示感染且因此并不一定需要治疗。其可在诸如狗、猫、猪和马的家畜上生存。其可在干燥环境表面生存几个小时。当诸如皮肤或粘膜内层的正常屏障被破坏时，S. aureus能够感染其它组织。 这导致了疖(疮)和痈(疖的集合)。在婴儿中S. aureus感染能够导致称为葡萄球菌烫伤样皮肤综合征(SSSQ的严重疾病。S. aureus感染可经与来自感染创伤的脓液相接触、通过产生破坏组织的透明质酸酶而与感染者的皮肤-皮肤相接触、和与感染者所使用的诸如毛巾、褥单、衣服或体育器材的物体相接触而被传播。深位S. aureus感染可能是非常严重的。 假关节使人处于脓毒性关节炎的特定风险中，且表皮葡萄球菌(心脏瓣膜的感染)使人处于快速传播的肺炎的风险中。S. aureus在遗传过敏性皮炎患者中非常流行，该患者比其他人对S. aureus具有较少抗性。其常导致并发症。该疾病最有可能发现于人体的增殖活跃的部位，以及腋窝、毛发和头皮中。当这些区域中的大型丘疹爆发时，将导致最严重的感染。 S. aureus的一些菌株产生中毒性休克综合征毒素，其为中毒性休克综合征的病原体。以上也提到，一些产生肠毒素的S. aureus菌株是葡萄球菌食物中毒的原因。此外，S. aureus是乳牛中乳腺炎的致病因子之一。葡萄球菌菌株具有对抗生素产生抗性的超常能力。葡萄球菌对青霉素的抗性由青霉素酶(β_内酰胺酶的一种形式)产生所介导，该酶分解青霉素分子的内酰胺环。抗青霉素酶的青霉素比如甲氧西林(methicillin)、苯唑西林(oxacillin)、5-甲基-3-邻氯苯基-4-异噁唑青霉素(cloxacillin)、双氯西林(dicloxacillin)和萘夫西林 (nafcillin)，能够抵抗葡萄球菌青霉素酶的降解。目前，S. aureus已对多种常用抗生素产生抗性。在英国，所有S. aureus分离株中仅有2%对青霉素敏感，与世界上其它地方的情形相似，这是由青霉素酶所导致的，该酶是 β -内酰胺酶的一种类型。已开发了抗β -内酰胺酶的青霉素(甲氧西林、苯唑西林、5-甲基-3-邻氯苯基-4-异噁唑青霉素和氟氯西林)来治疗抗青霉素的S. aureus并且仍用作一线治疗。甲氧西林是该种类中首次使用的抗生素。其在1959年被引入，但仅两年后在英格兰报道了首例抗甲氧西林的S. aureus (以下简称为MRSA)。尽管如此，甚至在医院环境下，MRSA—般仍罕见，直到20世纪90年代医院中MRSA 流行爆发时，目前是地方性流行的。医院环境和社区环境中的MRSA感染常用非β-内酰胺抗生素诸如克林霉素 (clindamycin)(一禾中林可胺(Iincosamine))禾口复方磺胺甲口,惡唑(co-trimoxazole)(也常称作三甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑)进行治疗。对这些抗生素的抗性也已导致了新型广谱抗革兰氏阳性抗生素的使用，比如利奈唑胺(linezolid)，因为其作为口服药物的可用性。目前用于MRSA导致的严重侵入性感染的一线治疗包括糖肽抗生素(万古霉素 (vancomycin)和替考拉宁(teicoplanin))。这些抗生素具有许多问题，主要集中于对静脉内施用的需要(没有可用的口服制剂)、毒性和通过血液测试定期监测药物水平的需要。还注意到糖肽抗生素并不良好渗透到感染的组织中。这对于脑和脑膜的感染和心内膜炎特别重要。由于治疗结果差，糖肽不能用来治疗甲氧西林敏感的S. aureus。由于对青霉素的高水平抗性，且由于MRSA对万古霉素产生抗性的可能性，疾病控制和预防中心已出版了适当使用万古霉素的指南。在已知MRSA感染的发生率高的状况下， 主治医师可选择使用糖肽抗生素，直到知道感染有机体的身份。当证实感染由S. aureus的甲氧西林敏感的菌株引起时，则适当地将治疗改变为氟氯西林或甚至青霉素。然而，一些新发现的MRSA菌株甚至对万古霉素和替考拉宁表现出抗生素抗性。抗万古霉素的S. aureus (VRSA)是对糖肽产生抗性的一种S. aureus菌株。1996 年在日本报道了首例万古霉素中度耐药S. aureus (VISA)，但首例真正抗糖肽抗生素的 S. aureus仅在2002年被报道。2005年在美国报道了三例VRSA感染。葡萄球菌感染，包括MRSA，最常在医院和卫生机构的人群中发生。发生于其他最近未住院或未经受任何医疗程序的健康人中的MRSA感染也称为社区相关(CA)MRSA感染。 MRSA的定植可以是长期静止的，有时为多年。
MRSA可定植于人体中的不同部位，比如耳中、鼻咽区域中、胃肠区域中、尿中和皮肤上。皮肤感染的例子为疮、脓肿、睑腺炎(眼睑线的感染)、痈、蜂窝组织炎和脓疱疮。如果定植在血液中或体内其它器官或部分中，则发生感染，例如败血病(血中毒)、脓毒性休克、脓毒性关节炎、骨髓炎、内部脓肿、脑膜炎、肺炎和心内膜炎。长期携带者具有较高的感染风险并还可将MRSA传播至其他人。葡萄球菌感染的预防是困难的，接种疫苗不是非常有效的途径。对葡萄球菌菌株显示出抗生素抗性的人通常在感染诊所或相应的机构被隔离以避免感染的传播。因此，尤其是MRSA，在许多国家中已成为主要的问题并且不得不预防MRSA传播。如上所述，MRSA的治疗取决于人是被感染金黄色葡萄球菌还是仅被定植。大多数 MRSA感染将需要在医院治疗并且抗生素治疗可能需要持续数周。如果人被MRSA定植且需要进入医院进行手术，他需要除去MRSA的治疗，例如，在皮肤上或在鼻内使用特殊的抗生素乳剂以除去细菌。可能还需要用杀菌洗发剂和洗剂洗涤皮肤和头发。还需要医院中的单间来阻止MRSA传播。如上所述，需要葡萄球菌引起的感染的改进的治疗和预防，且需要预防葡萄球菌从携带葡萄球菌、特别是抗性葡萄球菌菌株的个体(无论是否发生感染)进一步传播。发明_既述本发明的目的是减少或消除以上公开的与葡萄球菌引起的感染和疾患有关的问题。根据本发明，该目的通过在人类和动物中用于葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和治疗的药物制剂来实现，其中，其包括以下的组合a) 一种或多种活的α -链球菌(α -Streptococcus)菌株，所述α -链球菌菌株选自由登录号为 NCIMB 40104、NCIMB 40105、NCIMB 40106 和 NCIMB 40873 的血链球菌 lKStreptococcus sanguis II)菌株、登录号为 NCIMB 40107 和 NCIMB 40874 的缓症链球菌菌株(Sti^ptococcus mitis)、登录号为NCIMB 40875和NCIMB 40876的口腔链球菌菌株(Str印tococcusoralis)、登录号为 NCIMB 40157 的乳链球菌菌株(Streptococcus lactis)LlA，和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；和b) 一种或多种活的乳杆菌菌株(LactcAacillus)，所述乳杆菌菌株选自由登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株(Lactobacillus rhamnosus)LB21、登录号为DSM 17852的植物乳杆菌菌株(Lactobacillus plantarum) LB3和登录号为DSM 17853的植物乳杆菌菌株LB7和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；在其中所述菌株维持其存活力的至少一种药学上可接受的介质中。并且，本发明涉及用于葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的药盒，其中，其包括两种或多种独立的制剂，所述两种或多种独立的制剂预期同时或在预定的时间段内依次施用给需要其的人或动物，其中所述药盒包括以上的a)和b)的组合且药盒中的每种制剂包括至少一种根据以上的a)的菌株和/或至少一个根据以上的b)的菌株。本发明还涉及用于葡萄球菌引发的感染或疾患的预防和/或治疗的方法，其中根据本发明的药物制剂或药盒被施用给需要其的人或动物。在另一方面，本发明涉及根据本发明的药物制剂或药盒在用于制备人和动物中葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和/或治疗的药物的用途。
根据本发明的药物制剂或药盒还可用于制备用于上呼吸道中的病毒感染的预防和/或治疗的药物，所述病毒诸如鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒和腺病毒。根据以下包括实验的本发明的详细描述和所附权利要求书，本发明的目的、问题、 解决方法和特征的进一步公开将是明显的。优选实施方案的详细描述本发明人惊奇地发现多种已知的微生物菌株的新组合在葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗过程中产生了不可预见的有利作用，即，其对诸如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的葡萄球菌菌株具有抑制作用、阻遏作用、竞争作用和/或杀灭作用。组合的菌株来源于两种主要的微生物组，更确切地为α-链球菌菌株和乳杆菌菌株。虽然在体外试验中在肠中LB21对金黄色葡萄球菌已大致显示出轻微的有益作用，但是这两种主要的微生物组中没有一组先前独立地显示出对葡萄球菌的任何相似的良好作用。这些菌株的组合产生了令人惊奇地有利的协同作用。根据本发明的药物制剂中的链球菌菌株中的一些先前在W090/09186 (Essum AB)中被公开。在该文献中公开了这些链球菌菌株可用于β-链球菌性扁桃体炎的预防和/或治疗的药物制剂。所述的血链球菌II 菌株和缓症链球菌菌株于1989年2月3日保藏于iTorry Research Station, POBox 31,135 Abbey Road,Aberdeen AB9 8DG,Great Britain的英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心 (NCIMB)，且登录号分别为 NCIMB 40104,NCIMB 40105,NCIMB 40106 和 NCIMB 40107。这四种菌株的通用交叉名称为α 89a、α 502、α 505和α 7213。WO 90/09186中详细公开了这些链球菌菌株的分离、分型和医学功能。已证明这些α-链球菌菌株对由β-链球菌引起的扁桃体炎的抑制作用高度取决于由α-链球菌所产生的细菌素的存在。WO 99/53932 (Bacterum AB)中公开了用于急性中耳炎(耳的炎症)和中耳炎(中耳的炎症)的预防和/或治疗的药物制剂。所述制剂包含根据本发明的组合的药物制剂中存在的链球菌菌株中的一些，即，登录号为NCIMB 40104的微生物菌株血链球菌、登录号为 NCIMB 40873的血链球菌、登录号为NCIMB 40875的口腔链球菌(也称作α 4)、登录号为 NCIMB40876的口腔链球菌(也称作α 6)和登录号为NCIMB 40107和NCIMB40874的缓症链球菌菌株，以及，任选地，其它具有基本相同的能力的α-链球菌菌株，所述能力即，抑制流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、月市炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)禾口卡他莫拉菌(Moraxellacatarrhalis)的能力。菌株 NCIMB 40873、40874、40875 和 40876 于 1997 年 3 月 19 日保藏于 23 St. Machar Drive, Aberdeen, AB2 1RY,Great Britain 的英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心(NCMB)。登录号为NCIB40104的菌株于1989年2月3 日保藏(参见以上的WO 90/09186)，且从此指定为NCIMB 40104。WO 99/53932中详细公开了这些菌株的分离、分型和医学功能。还参见α-链球菌作为复发的链球菌性扁桃体炎的补充治疗——一项随机的安慰剂-对照研究。Roos K. Holm SE, Grahn E, Lind L. Scand J Infect Dis25 31-35,1993 ；用于复发的链球菌性咽扁桃体炎的预防的选定的α-链球菌的再定植
(Recolonization)-一项随机的安慰剂-对照多中心研究。RoosK，Holm SE, Grahn Ε,
Lagergren L. Scand J Infect Dis沘459_462，1996 ；在链球菌性咽炎的复发中干扰 α-链球菌的耐受性和效力——一项安慰剂-对照研究。Falck G，Grahn Hakansson Ε， Holm SEjRoos K, Lagergren L. ActaOto-Laryngologica，119 :944_948，1999 ；在儿童中“干扰” α-链球菌的再定植对急性和分泌性中耳炎的复发的作用随机安慰剂对照试验。Roos K, GrahnHakansson E, Holm SE. BMJ,322 :210-212,2001 W090/00850公开了 α -乳链球菌菌株LlA且登录号为NCIMB 40157。该菌株当时被分类为α-链球菌菌株，为α-溶血性链球菌，但此后被重新分类为乳酸乳球菌菌株。按照原始分类，该菌株被归于根据本发明的组合中的链球菌菌株a)。WO 98/55131 (Essum AB)公开了用于人和动物中的胃肠疾患的预防和/或治疗的药物制剂，其中所述制剂包含以登录号为NCIMB 40564的干酪鼠李糖乳杆菌 (Lactobacillus casei rhamnosus)菌株LB21和/或一种或多种具有基本相似功能的其变体的形式的活的微生物菌株。以上所述的LB21菌株于1993年6月11日保藏于23 St. Machar Drive, Aberdeen, AB2 1RY，Great Britain的英国食品工业与海洋细菌菌种保藏中心(NCIMB)。WO 98/55131详细公开了该LB21菌株的分离、分型和医学功能。干酪鼠李糖乳杆菌LB21，以替代术语鼠李糖乳杆菌LB21被包括在根据本发明的组合的药物制剂的b)部分中，其分离自婴儿的粪便中并且已证明对于对人类中不同类型的肠道感染重要的大多数细菌中具有特别显著的抑制作用，比如常见的金黄色葡萄球菌，但不是MRSA，但大体上涉及不同的菌种，比如沙门氏菌(Salmonella)、志贺氏菌(Siigella)、 假单胞杆菌(Pseudomonas)、克雷白杆菌-肠杆菌(Klebsiella-Enterobacter)、弯曲杆菌(Campylobacter)、艰难梭菌(Clostridium difficile)、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)等。LB21对肠病原菌的明确地强烈抑制作用可能由于其产生特定的酸和特定的低分子蛋白或特定的低分子肽的事实引起的，所述低分子量的蛋白或肽是热稳定的，具有低于5000道尔顿的分子量，并以独特形式对肠病原菌产生有害影响。登录号为DSM 17852的植物乳杆菌菌株LB3和登录号为DSM 17853的植物乳杆菌菌株 LB7 于 2006 年 1 月 6 日保藏于 Mascheroder Weg lb, D-38124 Braunschweig 的德国微生物菌禾中保藏中心(Deutsche Sammlungvon Mikroorganismen und Zellkulturen)，并还有效作为根据本发明的药物制剂中的乳杆菌菌株。以下实施例中所提到的其它乳杆菌菌株，例如，LB45、LB64、LB66、LB87、LB99、LB931和LB hs_l，在根据本发明的药物制剂中也是有用的。LB45、LB64、LB66、LB87 和 LB99 还未保藏，但可购自 Essum AB, Box 3160,903 04 Umea, Sweden。胚芽乳杆菌(Lactobacillusplantarum)菌株 LB931 的登录号为 DSM 11918 且发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)菌株 LB Ess-I 的登录号为 DSM 17851。 其分别于1998年1月9日和2006年1月6日保藏于Deutsche Mascheroder Weg lb, D_38124Braunschweig0根据本发明的药物制剂中的细菌菌株的独特组合发挥了有利的协同作用，这是由于，首先，链球菌菌株占据表皮细胞、基质和粘膜，且皮肤创造了一种物理屏障并防止葡萄球菌粘附于这些细胞。因此，机体患处的菌群被平衡且增强。另一方面，根据本发明的乳杆菌菌株产生抑制诸如MRSA的葡萄球菌生长的物质，但主要通过由这些乳杆菌菌株的细菌细胞壁而非这些乳杆菌菌株产生的代谢物调节天然免疫系统和适应性免疫系统来增强天然防御。对三位供血者进行实验，在mRNA水平上进行测量，显示LB21没有增高静息T细胞的INF-Y水平或IL-4水平，但对于激活的T细胞LB21增高了或降低了细胞因子反应。在体内通过在鼻中喷雾LB21并随后取样鼻咽液体来测量细胞因子而进行的研究显示了喷雾治疗后IL-8显著增高。IL-8是天然免疫系统反应中免疫反应的重要中介体。α-链球菌
8和乳杆菌的特定菌株的体内协同作用可能取决于抗微生物成分，例如，来自α-链球菌的细菌素和其在粘膜上的物理屏障，连同由乳杆菌菌株和免疫系统的刺激产生的特定的酸。根据本发明的细菌菌株的组合在以减少或消除粘膜上和皮肤上的有害葡萄球菌菌株为目的的体外和体内实验中都显示出良好的结果。如果仅单独使用根据本发明的菌株 a)和菌株b)中的任何一个，则不会获得这样的良好效果。虽然LB21菌株在体外试验过程中仅对肠中一般的金黄色葡萄球菌表现出有利的作用，LB21和组a)中链球菌菌株中的一种或多种的组合表现了大为改善的体外作用。该组合对所有类型的葡萄球菌菌株表现出良好的作用，特别是金黄色葡萄球菌菌株，例如MRSA，即作为世界性大问题的抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌。根据本发明，可使用权利要求1中所界定的根据本发明的a)组和b)组的每组中的多于一种的菌株。在一个实施方案中，使用血链球菌菌株α 89a、α 502和α 505作为链球菌菌株。在另一个实施方案中，在b)组中使用了鼠李糖乳杆菌LB21和，任选地，植物乳杆菌菌株LB3、LB7和LB931中的一种或多种作为乳杆菌菌株。在另一个有用的实施方案中，使用了血链球菌08如和鼠李糖乳杆菌1^21的组合。a)组和b)组中的菌株的其它组合也是有效的。此外，具有相同或基本相似作用的其它链球菌菌株和乳杆菌菌株在根据本发明的药物制剂中的菌株的组合中也是有用的。本文所用的表达“具有相同或基本相似作用的其它链球菌菌株和乳杆菌菌株”意指以组合的形式在体内消除或杀伤葡萄球菌的这些菌株。在体内获得了最佳效果。在体外，PBS滤液结果已显示利用根据本发明的组合在6 小时内彻底杀灭了 MRSA，更确切地为利用菌株α 89a和LB21的组合。在相同的治疗条件下仅利用LB21，在16小时内杀灭了 MRSA，且仅利用α -链球菌，MRSA不被杀灭而仅是减少了数量。表达“葡萄球菌引起的感染和疾患”意指导致伴随组织疼痛肿胀的感染的不希望的葡萄球菌菌株繁殖，以及由于葡萄球菌感染导致的由其它微生物引起的任何其它疾病或感染。该表达还意在包括个体被葡萄球菌定植的疾患，即，葡萄球菌的携带者，例如，MRSA携带者，但还未发展为感染，即，未患有任何疾病。然而，这样的个体具有在长期过程中将葡萄球菌传播至其他个体的能力。这样的个体也处于发生MRSA感染的高风险中。肺炎、软组织感染和中心静脉导管感染是最常见的感染。如上所述，其它感染和疾患的实例为诸如丘疹、 脓疱疮、疮、蜂窝组织炎毛囊炎、疖、痈、烫伤样皮肤综合征和脓肿的轻微皮肤感染以及诸如脑膜炎、骨髓炎心内膜炎、中毒性休克综合征(TSS)和败血病的威胁生命的疾病。表达“预防葡萄球菌引起的感染和疾患”意指预防非葡萄球菌的携带者的个体和葡萄球菌的携带者的个体免于发生感染或发生另外的葡萄球菌引起的疾患，并阻止携带者将其传播至其他人。本文所用的表达“即用型(ready-to-use)制剂”意指待施用给人或动物的最终制剂。本文所用的表达“预定的时间段”意指药盒中的两种或更多种不同制剂可被施用， 同时还保持对葡萄球菌菌株的可接受的杀伤或抑制作用的最大时间段。在一个实施方案中，根据本发明的药物制剂的菌株组合中的a)组中限定的菌株和b)组中限定的菌株必须要求不存在于同一个制剂中。虽然同一个制剂中的组合具有一些更有利的理由，例如有利于生产和施用，但a)组中的菌株和b)组中的菌株可存在于独立的制剂中并可同时或在预定的时间段内独立地被施用。在这样的实施方案中，取决于a)组和b)组中的每组分别将包括多少种不同菌株，本发明构成含有两种或更多种不同制剂的药盒，每种制剂含有来自a)组的至少一种菌株和/或来自b)组的至少一种菌株。该药盒还可包含含有属于a)组的两种或更多种菌株的一种制剂或每种都含有属于a)组的一种菌株的多种制剂。该药盒还可包含含有属于b)组的两种或更多种菌株的一种制剂或每种都含有属于b)组的一种菌株的多种制剂。关于协同作用，应该在尽可能小的时间段内，优选地同时将药盒中所述含有属于a)组的菌株的一种或多种制剂和所述含有属于b)组的菌株的一种或多种制剂施用给需要其的人或动物。所述含有属于a)组的菌株的一种或多种制剂和所述含有属于b)组的菌株一种或多种制剂之间的预定时间段可以长达M小时，更优选地为12小时，且最优选为同时。药盒中这样的一种或多种制剂的施用顺序并不重要。根据本发明的药物制剂或药盒可期望用于口服制剂、口腔粘膜制剂、咽剂型、鼻制剂、牙科制剂、皮肤(cutaneous/skin)制剂、阴道制剂、直肠制剂、耳制剂或透析制剂。如上所述，本发明的药盒实施方案中的不同制剂施用之间的预定时间段不可太长，以致无法获得协同作用，例如，由于非最佳的定植或不希望的与其它菌株的相互作用，并且如上所述， 至多为24小时。药学上可接受的介质可以是医学领域常规使用的任何介质，还包含常规使用的辅助剂和赋形剂，或可以是变酸或发酵的乳制品、优选地为酸奶、酸乳酪和牛奶，或果汁、冰淇淋、糖和水果饮料。当将根据本发明的制剂施用给动物时，药学上可接受的介质还可以是 NaCl溶液，葡萄糖溶液或脱脂乳，或是动物饲料，优选地为乳清、干饲料或浓缩悬液。根据本发明的药品和药盒中的菌株可以即用型产品的冻干形式存在。为治疗葡萄球菌在口腔或咽喉中引起的感染或疾患，可将药物制剂以例如喷雾剂 (例如咽喷雾剂或颊面喷雾剂)、粉末、片剂、扁囊剂、颗粒、胶囊、优选的介质中的悬液、漱口剂或饮料、糖浆或溶液的形式来施用。为治疗葡萄球菌在皮肤上或皮肤中引起的感染和疾患，将药物制剂以凝胶、药膏、 软膏、泡沫、糊剂、洗液、乳剂、贴片、棒剂、乳膏(例如，洗涤膏)或油悬浮液的形式来施用。为治疗葡萄球菌在胃肠道中引起的感染和疾患，将根据本发明的药物制剂以片剂 (任选持续释放的片剂)、胶囊(优选肠溶衣和/或结肠衣胶囊)、悬浮液、溶液、饮料、糖浆或汤的形式来施用。根据本发明的药物制剂还令人惊奇地被证实防止病毒在上呼吸道中引起的感染和疾患，例如由诸如鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒和腺病毒的这些病毒菌株所引起的。更确切地，仅利用乳杆菌菌株LB21进行的先前实验已显示，在130位儿童中与未被施用LB21 的儿童相比在上呼吸道和肠道中发生的病毒感染减少。根据本发明的组合似乎进一步降低了病毒感染的数量。因此，在一个实施方案中，乳杆菌菌株LB21可用于生产用来治疗病毒在上呼吸道引起的感染和疾患的药物。在另一个实施方案中，乳杆菌菌株LB21和α -血链球菌II菌株α 89a的组合可用于相同的目的。对M位患有SOM(分泌性中耳炎)的儿童进行临床研究，所述儿童在SOM前经常发生病毒感染。将LB21和α 89a的组合作为鼻喷雾剂来施用，且活性剂组中的37位儿童中的 18位(48%)病情有很大好转或痊愈，相比之下安慰剂组中的17位儿童中有3位(17%)。表达“病毒诱导的感染和疾患”意指导致感染的不希望的病毒增殖，比如感冒、咽喉痛、流鼻涕、鼻塞、打喷嚏和咳嗽。在根据本发明的药物制剂中，可选地在根据本发明的药盒中，所述一种或多种链球菌菌株以IO4-IO11Cfu (菌落形成单位)/ml，优选105-101QCfu/ml，最优选106-109cfu/ml的即用型制剂的总量存在。相应地，在根据本发明的药物制剂中，可选地在根据本发明的药盒中，所述一种或多种乳杆菌菌株以1(^-10^(^11(菌落形成单位)/ml，优选IO5-IOiciCfVml,最优选 106-109CfU/ml即用型制剂的总量存在。
实施例实施例1体外试验乳杆菌PBS滤液的生产将乳杆菌LB21在5ml的MRS肉汤中培养(37°C,5% C02，8小时)。将(450 μ 1) 的LB21培养物再接种到含45ml新鲜预热的MRS肉汤的6个管中并在37°C和5% CO2下孵育16小时。然后管在20°C下以3800rpm离心20分钟。弃去上清液并将沉淀重悬于5ml预热的PBS中并在37°C，5% CO2下培养5小时。每小时一次轻轻混合管。孵育之后，管在8°C 下以3800rpm离心20分钟。将所有上清液收集到新管中，并测量p!K4. 0-4. 3)。然后将上清液通过0.22 μ m过滤器无菌过滤。滤液以IOml管中Iml的等分试样在_20°C贮存待用。对照PBS滤液的生产将25ml PBS溶液的pH值调节至4. 3。然后将溶液通过0. 22 μ m过滤器无菌过滤并以IOml管中Iml的等分试样在_20°C贮存待用。干扰试验将5种不同的MRSA菌株02、沈、28、四和33 ；分离自MRSA定植的患者)于5ml的 TH肉汤中在37°C下培养6小时。然后，将1 % (50 μ 1)的MRSA培养物再接种到5ml新鲜预热的TH肉汤中，且在37°C下孵育17小时。然后将菌株在PBS中稀释，并添加到LB21PBS滤液中，添加到LB21/链球菌(a89a)滤液的混合物中，并添加到PBS中的对照中，终浓度为 104-105cfu/ml的。还将5% TH肉汤添加到所有PBS滤液中。将管在37°C下孵育并在O小时和M小时后取样。将样品在适当稀释后培养于大豆胰蛋白胨琼脂板和血琼脂培养板上。 单独的LB21上清液抑制所有MRSA的生长并还杀灭其中的一种(MRSA^)，而LB21和α 89a 的组合在M小时内杀灭所有的被试验的MRSA，如表格中标题为“活性剂上清液”一列所示。 在对照组中，MRSA生长至约107-108cfu/ml。LB21上清液，和LB21上清液+ α 89a上清液混合物的干扰；pH 4. 权利要求
1.一种在人类和动物中用于葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和治疗的药物制剂，其中，所述药物制剂包括以下的组合a)一种或多种活的α-链球菌菌株，所述α-链球菌菌株选自由登录号为NCIMB 40104、NCIMB 40105、NCIMB 40106 和 NCIMB 40873 的血链球菌 II 菌株、登录号为 NCIMB 40107和NCIMB 40874的缓症链球菌菌株、登录号为NCIMB 40875和NCIMB 40876的口腔链球菌菌株、登录号为NCIMB 40157的乳链球菌菌株L1A，和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；和b)一种或多种活的乳杆菌菌株，所述乳杆菌菌株选自由登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株LB21、登录号为DSM 17852的植物乳杆菌菌株LB3和登录号为DSM 17853的植物乳杆菌菌株LB7和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；在其中所述菌株维持其存活力的至少一种药学上可接受的介质中。
2.根据权利要求1所述的药物制剂，其中所述药物制剂包括以下的组合a)登录号为 NCIMB 40104和NCIMB 40106的血链球菌菌株，和登录号为NCIMB 40876的口腔链球菌菌株，和b)登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株LB21。
3.根据权利要求2所述的药物制剂，其中所述药物制剂包括以下的组合登录号为 NCIMB 40104的血链球菌II菌株和登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株LB21。
4.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述一种或多种链球菌菌株以 104-10"、优选105-101(1、最优选IO6-IO9菌落形成单位/毫升即用型制剂的总量存在，且其中所述一种或多种乳杆菌菌株以104-10"、优选105-101(1、最优选IO6-IO9菌落形成单位/毫升即用型制剂的总量存在。
5.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述一种或多种具有相同或基本相同作用的乳杆菌菌株的变体是LB45、LB64、LB66、LB87、LB99、LB931和LB Ess-I。
6.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述药物制剂为口服制剂、口腔粘膜制剂、牙龈制剂、鼻制剂、牙科制剂、皮肤制剂、阴道制剂、直肠制剂或耳制剂。
7.根据权利要求6所述的药物制剂，其中所述药物制剂具有以下形式粉末、颗粒、扁囊齐 、胶囊、片齐 、糊齐 、乳膏、凝胶、软膏、药膏、泡沫、糊齐 、洗液、乳膏、油悬浮液、喷雾齐U、 悬浮液、溶液、乳液、贴片、棒剂、喷雾剂，优选鼻喷雾剂或口腔喷雾剂、漱口剂、或饮料或溶液。
8.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述药学上可接受的介质是变酸或发酵的乳制品、优选酸奶、酸乳酪和牛奶，或果汁、冰淇淋、汤和水果饮料。
9.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中当将根据本发明的制剂施用给动物时，所述药学上可接受的介质是动物饲料，优选地为乳清、干饲料或浓缩悬液。
10.根据前述权利要求中任一项所述的药物制剂，其中所述药物制剂中的所述菌株是冻干的。
11.根据权利要求10所述的药物制剂，其中所述药物制剂存在于NaCl溶液、葡萄糖溶液或脱脂乳中。
12.一种用于葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的药盒，其中所述药盒包括两种或多种独立制剂，所述两种或更多种独立制剂预期被同时或在预定的时间段内，优选24小时内依次被施用给需要其的人或动物，其中所述药盒包括根据权利要求la)的菌株和根据权利要求lb)的菌株的组合，其中所述药盒中的每种制剂包括至少一种根据权利要求 la)的菌株和/或至少一种根据权利要求lb)的菌株。
13.一种用于葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和/或治疗的方法，其中将根据权利要求1-11所述的药物制剂或根据权利要求12的药盒施用给需要其的人或动物，优选MRSA携带者。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述葡萄球菌引起的感染或疾患是由金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和/或腐生葡萄球菌菌株引起的，尤其是多重抗性的金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株引起的。
15.根据权利要求14所述的方法，其中所述葡萄球菌引起的感染或疾患存在于口腔区域、耳区域、鼻区域和/或咽区域中、胃肠道中、皮肤上、或体内的其它部位或器官。
16.根据权利要求13所述的方法，其中所述葡萄球菌引起的感染或疾患是轻微皮肤感染以及威胁生命的疾病，所述轻微皮肤感染优选丘疹、脓疱疮、疮、蜂窝组织炎毛囊炎、疖、 痈、烫伤样皮肤综合征和脓肿，所述威胁生命的疾病优选肺炎、脑膜炎、骨髓炎、心内膜炎、 中毒性休克综合征(TSQ和败血病。
17.根据权利要求1-11中任一项所述的药物制剂或根据权利要求12的药盒制备用于预防和/或治疗在人和动物中葡萄球菌引起的感染或疾患的药物的用途。
18.根据权利要求1-11中任一项所述的药物制剂或根据权利要求12的药盒制备用于预防和/或治疗上呼吸道病毒感染的药物的用途，所述上呼吸道病毒感染优选地为鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒和腺病毒。
全文摘要
公开了在人类和动物中用于葡萄球菌引起的感染或疾患的预防和治疗的药物制剂，以及用于葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的药盒和葡萄球菌引起的感染和疾患的预防和治疗的方法，及用途，其中该药物制剂包含以下的组合a)一种或多种活的α-链球菌菌株，所述α-链球菌菌株选自由登录号为NCIMB 40104、NCIMB 40105、NCIMB 40106和NCIMB 40873的血链球菌II菌株、登录号为NCIMB 40107和NCIMB40874的缓症链球菌菌株、登录号为NCIMB 40875和NCIMB 40876的口腔链球菌菌株、登录号为NCIMB 40157的乳链球菌菌株L1A，和具有相同的或基本相似的作用的它们的一种或多种变体组成的组；和b)一种或多种活的乳杆菌菌株，所述乳杆菌菌株选自由登录号为NCIMB 40564的鼠李糖乳杆菌菌株LB21、登录号为DSM 17852的植物乳杆菌菌株LB3和登录号为DSM 17853的植物乳杆菌菌株LB7和一种或多种具有相同的或基本相似的作用的它们的变体组成的组；在其中所述菌株维持它们的存活力的至少一种药学上可接受的介质中。
文档编号A61P11/00GK102215849SQ200980145762
公开日2011年10月12日 申请日期2009年11月17日 优先权日2008年11月17日
发明者克里斯蒂安·鲁斯, 艾瓦·格兰哈肯森 申请人:埃索姆股份公司
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0190503... 来自[中国] 2024年03月29日 04:52受益匪浅
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