技术领域本发明涉及医药领域，具体涉及一种青环海蛇抗菌肽Hc-CATH的改造体抗菌肽HC-30凝胶剂及其制备方法。
背景技术：
Cathelicidins是脊椎动物体内一个重要的抗菌肽家族，主要在上皮组织，如皮肤、消化道、呼吸道和生殖道表面表达，在宿主抵抗微生物感染过程中发挥了重要作用。Cathelicidins具有广谱高效的抗微生物活性。目前已经发现的cathelicidins家族抗菌肽对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌、霉菌、支原体、衣原体、原虫和部分有包膜病毒均有极强的活性。另一方面，cathelicidins家族抗菌肽杀菌作用迅速，一般在几分钟内即可杀死细菌。研究表明青环海蛇cathelicidins家族抗菌肽Hc-CATH具有广谱高效的抗微生物活性，对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌均具有极强的活性，对多株临床分离金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞杆菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度值(minimalinhibitoryconcentration,MIC)均小于10μM。以Hc-CATH为模板进行分子改造研究，得到的抗菌肽HC-30具有分子量小，抗菌活性强、结构稳定、毒性低等特点，不易引起人体不良反应，并且结构简单，生产成本低。目前，一些发明专利涉及很多关于凝胶剂的制备，但是关于青环海蛇抗菌肽Hc-CATH的改造体抗菌肽HC-30凝胶剂类产品尚未有任何报道。多肽类药物易受强酸、强碱、氧化剂和还原剂等因素的破坏，导致药物丧失原有的药理作用。因此，选择合适的辅料和制备工艺对制备出高效的抗菌肽HC-30凝胶剂具有广泛的重要意义。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种青环海蛇抗菌肽Hc-CATH的改造体抗菌肽HC-30凝胶剂及其制备方法，使得该凝胶剂具有制备工艺简单、性质稳定的效果。为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：本发明所述的凝胶剂，其各组份原料按如下质量百分比制备而成：抗菌肽0.2％-0.7％、凝胶基质0.25％-0.75％、透皮吸收促进剂1％-3％、保湿剂10％-30％、适量的PH调节剂、纯化水补足至100％。本发明所述的凝胶剂，抗菌肽为青环海蛇抗菌肽Hc-CATH的改造体HC-30。本发明所述的凝胶剂，凝胶基质选自卡波姆、泊洛沙姆、聚乙二醇、壳聚糖、羧甲基纤维素钠、聚乙二醇中的一种或几种。本发明所述的凝胶剂，凝胶基质为卡波姆940。本发明所述的凝胶剂，透皮吸收促进剂选自氮酮、薄荷油、亚油酸中的一种或几种。本发明所述的凝胶剂，保湿剂选自丙二醇和甘油中的一种或两种混合。本发明所述的凝胶剂，PH调节剂选自三乙醇胺、氢氧化钠、乙二胺、月桂胺、残酸氢钠中的一种。抗菌肽凝胶剂，其制备方法包括如下工艺步骤：(1)称取凝胶基质分散至适量纯化水中，放置过夜，搅拌均匀，得到溶液A；(2)称取青环海蛇抗菌肽Hc-CATH的改造体抗菌肽HC-30粉末加入到适量纯化水中，超生处理充分混匀，得到溶液B；(3)将透皮吸收促进剂和保湿剂混合均匀后缓慢加入到溶液A中，得到溶液C；(4)将溶液B加入到溶液C中，补足纯化水，溶液朝同一方向搅拌均匀；(5)缓慢加入适量的PH调节剂，搅拌均匀，溶液变为胶状，即可得到抗菌肽凝胶剂。本发明所述的凝胶剂工艺步骤(5)中，其PH值调节至5-7。本发明以青环海蛇抗菌肽Hc-CATH的改造体抗菌肽HC-30为主药，其抗菌效果是通过直接杀菌而发挥作用，而非抑制细菌生长。抗菌肽HC-30可通过静电相互作用选择性作用于细菌细胞膜，在膜上形成跨膜的离子通道，破坏了膜的完整性，造成细胞内容物泄漏，从而杀死细胞，具有广谱抗菌活性，并且具有杀菌速度快、对热稳定、不易引起细菌耐用性等特点。本发明以卡波姆-940作为载药基质，此基质对酸、碱、醇等都有一定的耐受性；能耐受低温储存和高压湿热灭菌，安全无毒、无刺激性，具有良好的水溶性，制备出的凝胶剂外观透明、细腻，容易涂布，附着力强等优点，是一种理想的凝胶基质。由以上技术方案可知，本发明填补了目前国内在抗菌肽凝胶剂方面研究的空白，选择合适的辅料及简单的制备工艺，适合大批量的生产，具有极大的应用前景，为同类产品的产生提供了参考。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明，实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的原料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径购买。实施例1，一种抗菌肽凝胶剂，其各组分百分含量分别为：抗菌肽HC-300.5％、卡波姆-9400.5％、氮酮2％、甘油20％、适量的三乙醇胺、纯化水补足至100％。将以上原料按照以下方法制备：(1)称取卡波姆-940粉末分散至适量纯化水中，放置过夜，搅拌均匀，得到溶液A；(2)称取抗菌肽HC-30粉末加入到适量纯化水中，超生处理充分混匀，得到溶液B；(3)将氮酮和甘油混合均匀后缓慢加入到溶液A中，得到溶液C；(4)将溶液B加入到溶液C中，补足纯化水，溶液朝同一方向搅拌均匀；(5)缓慢加入三乙醇胺，搅拌均匀，调节PH至6，溶液变为胶状，即得到抗菌肽凝胶剂。实施例2，一种抗菌肽凝胶剂，其各组分百分含量分别为：抗菌肽HC-300.5％、卡波姆-9400.5％、氮酮2％、丙二醇20％、适量的氢氧化钠、纯化水补足至100％。将以上原料按照以下方法制备：(1)称取卡波姆-940粉末分散至适量纯化水中，放置过夜，搅拌均匀，得到溶液A；(2)称取抗菌肽HC-30粉末加入到适量纯化水中，超生处理充分混匀，得到溶液B；(3)将氮酮和丙二醇混合均匀后缓慢加入到溶液A中，得到溶液C；(4)将溶液B加入到溶液C中，补足纯化水，溶液朝同一方向搅拌均匀；(5)缓慢加入氢氧化钠，搅拌均匀，调节PH至6，溶液变为胶状，即得到抗菌肽凝胶剂。实施例3，一种抗菌肽凝胶剂，其各组分百分含量分别为：抗菌肽HC-300.2％、卡波姆-9400.25％、氮酮1％、丙二醇10％、适量的三乙醇胺、纯化水补足至100％。将以上原料按照以下方法制备：(1)称取卡波姆-940粉末分散至适量纯化水中，放置过夜，搅拌均匀，得到溶液A；(2)称取抗菌肽HC-30粉末加入到适量纯化水中，超生处理充分混匀，得到溶液B；(3)将氮酮和丙二醇混合均匀后缓慢加入到溶液A中，得到溶液C；(4)将溶液B加入到溶液C中，补足纯化水，溶液朝同一方向搅拌均匀；(5)缓慢加入三乙醇胺，搅拌均匀，调节PH至6，溶液变为胶状，即得到抗菌肽凝胶剂。实施例4，一种抗菌肽凝胶剂，其各组分百分含量分别为：抗菌肽HC-300.5％、卡波姆-9400.5％、氮酮2％、丙二醇20％、适量的三乙醇胺、纯化水补足至100％。制备方法与条件同实施例3。实施例5，一种抗菌肽凝胶剂，其各组分百分含量分别为：抗菌肽HC-300.7％、卡波姆-9400.75％、氮酮3％、丙二醇30％、适量的三乙醇胺、纯化水补足至100％。制备方法与条件同实施例3。上述实施例的抗菌肽HC-30凝胶剂处方总结于表1中，对该凝胶剂的外观、PH值、粘稠度、涂展性、成胶性和含量进行检测结果如表2：表1：凝胶剂处方总结表2：凝胶剂各项指标检测结果按照实施例4所述的比例制备2组凝胶剂，保湿剂选择丙二醇或甘油，每组试验平行3次，将制备好的凝胶剂均匀涂布在相同面积的载玻片上，相同条件下室温放置，在不同时间点计算平均失重百分比结果如下表3：表3：两组凝胶剂平均失重百分比结果有上述实验结果可以看出，以外观、PH值、粘稠度、涂展性、成胶性、含量和保湿效果为评价指标，其中实施例4为最佳实施例。本发明涉及药物的初步稳定性方法如下：取实施例4方法制备的凝胶，共3组，分别在50℃保存12h，4℃保存12h，3500转离心15min，检查药物各项指标。表4：凝胶剂初步稳定性检测结果由表4可知，实施例4的抗菌肽HC-30凝胶剂稳定性良好，在各项因素检测后，其外观、PH值、粘稠度和含量均未发生明显的变化，表明该处方及制备工艺稳定，可以满足大规模生产的需要。以上实施例描述了本发明的制备过程和实施效果，实施例仅用于例证的目的，不限制本发明的范围，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。