8, 78.1, 77.3, 77.0, 76.7, 65.7, 28.3，22.9，20.2; HRMS 化SI-TOF) m/z: Calcd. for C24H23化化Os [M+Na]+: 493.0626;化und: 493.0626. 本发明的式（DMorusignin L及其衍生物具有重要的抗肿瘤活性，体外对人肺癌细胞 (A549)，人白血病细胞化562)，人前列腺(PC-3)共S株肿瘤细胞的细胞毒性试验表明：此 类式（1)所示的结构的Morusignin L及其衍生物对肿瘤细胞生长具有抑制作用，有可能发 展成为新的防治肿瘤药物或防治肿瘤药物先导化合物。必须说明，本发明的药理实施例是 用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属 于本发明要求保护否认范围。
[0012]药理实施例 1 :Mo;rusi即in L及其衍生物5a, 5b, 5c, 5d, Se, 6a, 6c_l, 6c_2, 6e-l, 6e-2, 6e-3, 7c或7e对A549细胞的细胞毒性 A549(人非小细胞肺癌肺癌）用DMEM培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清，100 U/mL 的青霉素和lOOU/mL链霉素。细胞W每孔4000个细胞的浓度加入到96孔中，在37°C含5% 0)2 潮湿空气的培养箱中培养24小时。
[0013] 细胞存活率的测定用改良MlT法。细胞经过24小时的解育后，分别将新配的化合物 Morusignin L及其衍生物5a, 5b, 5c, 5d, Se, 6a, 6c-l, 6c-2, 6e-l, 6e-2, 6e-3, 7c或7e的二甲基亚讽溶液W浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物最终浓度分别为6.25 y mol/L, 12.5 umol/L, 25 umol/L, 50 皿ol/L 和 100 皿〇1凡。48小时后，每孔加入 10 化 MTT巧mg/mU的憐酸盐缓冲液，再继续在37 T培养4小时后，离屯、5分钟除去未转化的 MTT，每孔中加入150 JiL二甲基亚讽。W溶解还原的MTT晶体甲臘(formazan)，用酶标仪在 490 nm波长测定OD值。其中Morusi即in L及其衍生物5a, 5b, 5c, 5d, Se, 6日，6c-l, 6c-2, 6e-l, 6e-2, 6e-3, 7c或7e对A549细胞半抑制浓度IC日日由SPSS软件（19版本)分析得 至Ijo Morusignin L对A549肿瘤细胞的IC日日为12.21邮〇1几;化合物5a对A549肿瘤细胞的 ICso为38.34皿〇1/1;化合物化对A549肿瘤细胞的ICso为27.42皿〇1/1;化合物5c对A549肿 瘤细胞的1〔5〇为29.36皿〇1/1;化合物5(1对4549肿瘤细胞的1〔5〇为35.65皿〇1/1;化合物56 对A549肿瘤细胞的ICso为38.17皿〇1/1;化合物6a对A549肿瘤细胞的ICso为8.65皿〇1/1;化 合物6c-l对A549肿瘤细胞的ICso为4.60皿〇1/1;化合物6c-2对A549肿瘤细胞的ICso为1.20 皿〇1/1;化合物6e-l对A549肿瘤细胞的ICso为9.84皿〇1/1;化合物6e-2对A549肿瘤细胞的 ICso为2.87皿〇1/1;化合物6e-3对A549肿瘤细胞的ICso为7.65皿〇1/1;化合物7c对A549肿 瘤细胞的ICso为22.61皿〇1/1;化合物7e对A549肿瘤细胞的ICso为24.而阳性对照 顺销对A549肿瘤细胞的ICso为28.4皿ol/L。
[0014] 实验结论:A549细胞是测试化合物对肿瘤细胞的细胞毒性的有效工具和评价指 标。本实验表明此类式（1)所示的Morusignin L及其衍生物对A549细胞具有较强的细胞毒 性，和肿瘤治疗一线用药顺销同一数量级或活性比顺销更好，有可能发展成新的具有抗肿 瘤作用的药物或药物先导化合物。
[0015] 药理实施例2:Morusi即in L及其衍生物5a, 5b, 5c, 5d, Se, 6日，6c-l, 6c-2, 6e-l, 6e-2, 6e-3, 7c或7e对K562细胞的细胞毒性 K562(人慢性髓系白血病细胞)用RPMI-1640培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清， 100 U/mL的青霉素和100 U/mL链霉素。细胞W每孔5000个细胞的浓度加入到96孔中，在37 °C含5% C〇2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
[0016] 细胞存活率的测定用改良MTT法。具体方法如药理实施例UMorusignin L对K562 肿瘤细胞的ICsq为10.24 wnol/l;化合物5a对K562肿瘤细胞的ICsq为28.54 wnol/l;化合物 化对1(562肿瘤细胞的眼()为15.40皿〇1/1;化合物5(3对1(562肿瘤细胞的1〔5()为17.31皿〇1/ L化合物5d对K562肿瘤细胞的ICso为25.15 Miol/!;化合物5e对K562肿瘤细胞的ICso为 28.12皿〇1/1;化合物6a对K562肿瘤细胞的ICso为7.65皿〇1/1;化合物6c-l对K562肿瘤细胞 的ICso为2.21皿〇1/1;化合物6c-2对K562肿瘤细胞的ICso为1.19皿〇1/1;化合物6e-l对 K562肿瘤细胞的ICso为7.24皿〇1/1;化合物6e-2对K562肿瘤细胞的ICso为1.07皿〇1/1;化 合物66-3对1(562肿瘤细胞的1〔5〇为5.25皿〇1/1;化合物7(3对1(562肿瘤细胞的1〔5〇为12.9化 111〇1/1;化合物76对1(562肿瘤细胞的1〔5〇为22.69皿〇1/1;;而阳性对照顺销对1(562肿瘤细胞 的ICsq为22.4 umol/L。
[0017] 实验结论:K562细胞是测试化合物对肿瘤细胞的细胞毒性的有效工具和评价指 标。本实验表明此类式（1)所示的Morusignin L及其衍生物对K562细胞具有较强的细胞毒 性，和肿瘤治疗一线用药顺销同一数量级或活性比顺销更好，有可能发展成新的具有抗肿 瘤作用的药物或药物先导化合物。
[001 引药理实施例3:Morusi即in L及其衍生物5a, 5b, 5c, 5d, Se, 6日，6c-l, 6c-2, 6e-l, 6e-2, 6e-3, 7c或7e对PC-3细胞的细胞毒性 PC-3(人前列腺癌)细胞用RPMI-1640培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清，lOOU/mL 青霉素及lOOU/mL的链霉素。细胞W每孔5000个细胞的浓度加入到96孔中，在37 °C含5% C02潮湿空气的培养箱中培养24小时。
[0019] 细胞存活率的测定用改良MTT法。具体方法如药理实施例UMorusignin L对PC-3 肿瘤细胞的1(：日日为9.14皿〇1/1;齡^31即1111对?(：-3肿瘤细胞的1(：日日为15.71皿〇1/1;化 合物5曰对?(：-3肿瘤细胞的1〔5〇为47.54曲1〇1/1;化合物化对?(：-3肿瘤细胞的1〔5〇为37.12^ 111〇1/1;化合物5(3对?(：-3肿瘤细胞的1〔5〇为25.32皿〇1/1;化合物5(1对?(：-3肿瘤细胞的1〔5〇 为25.75曲1〇1/1;化合物56对?(：-3肿瘤细胞的1〔5()为28.19曲1〇1/1;化合物6曰对?(：-3肿瘤细 胞的1〔5〇为18.65皿〇1/1;化合物6(3-1对?(：-3肿瘤细胞的1〔5〇为10.64皿〇1/1;化合物6(3-2 对口(：-3肿瘤细胞的1〔5〇为11.80皿〇1/1;化合物66-1对?(：-3肿瘤细胞的1〔5〇为19.54皿〇1/ L化合物6e-2对PC-3肿瘤细胞的ICsq为8.97 wnol/l;化合物6e-3对PC-3肿瘤细胞的ICso为 9.05皿〇1/1;化合物7。对?(：-3肿瘤细胞的眼〇为32.61皿〇1/1;化合物76对?(：-3肿瘤细胞的 ICso为34.67皿〇1/1;而阳性对照顺销对PC-3肿瘤细胞的ICso为26.2皿ol/L。
[0020] 实验结论:PC-3细胞是测试化合物对肿瘤细胞的细胞毒性的有效工具和评价指 标。本实验表明此类式（1)所示的Morusignin L及其衍生物对PC-3细胞具有较强的细胞毒 性，和肿瘤治疗一线用药顺销同一数量级或活性比顺销更好，有可能发展成新的具有抗肿 瘤作用的药物或药物先导化合物。
[0021] 从W上药理实施例中我们可W看出运些Morusignin L及其衍生物对运S株肿瘤 细胞都显示有一定的细胞毒性。可见运些化合物具有开发成为抗肿瘤药物或药物先导化合 物的潜力，值得继续深入研究下去。
【主权项】
1. 一种Morusignin L在制备防治肿瘤疾病药物的应用，其特征在于:该化合物具有如 通式(I)所示的结构；2. 根据权利要求1所述的Morusignin L的衍生物，其特征在于：该衍生物具有如通式 (II)所示的结构：式中，R1为1?素、羟基、氢或甲氧基;R2为1?素、羟基、氢或甲氧基；3. 根据权利要求2所述的Morusignin L的衍生物在制备防治肿瘤疾病药物的应用。4. 一种如权利要求1所述的Morusignin L的制备方法，其特征在于：由2,4-二甲氧基苯 甲酰氯la与丙二酸单乙酯钾盐先发生酰化脱羧反应，生成中间体2a，然后中间体2a再与丁 烯酮发生Michael加成反应，得到了中间体3a，然后中间体3a与间苯三酚发生成环反应，生 成中间体4a,中间体4a再与异戊烯醛发生成环反应，生成中间体5a，然后中间体5a通过与 甲基格氏试剂发生Aldol加成反应生成中间体6a，最后中间体6a发生脱甲基化反应得到最 终产物Morusignin L; Morusignin L合成路线如下：5. -种如权利要求2所述的Morusignin L的衍生物的制备方法，其特征在于：由相应取 代的苯甲酰氯1与丙二酸单乙酯钾盐先发生酰化脱羧反应，生成中间体2,然后中间体2再与 丁烯酮发生Michael加成反应，得到了中间体3,然后中间体3与间苯三酚发生成环反应，生 成中间体4,中间体4再与异戊稀醛发生成环反应，生成Morusignin L衍生物5，Morusignin L衍生物5通过与各种取代的格氏试剂发生Aldol加成反应生成Morusignin L衍生物6 ;或 Morusignin L衍生物5通过硼氢化钠还原羰基得到Morusignin L衍生物7; Morusignin L衍生物合成路线如下：
【专利摘要】本发明公开了一种Morusignin？L及衍生物的应用与制备方法，本发明通过采用Morusignin？L全合成技术路线，或在Morusignin？L全合成的过程中，通过更换反应底物的取代基对Morusignin？L进行结构修饰，合成了Morusignin？L及其一系列衍生物。它是一类重要的抗肿瘤活性先导化合物，它们的合成可以为抗肿瘤活性筛选提供化合物源，对寻找新型的抗肿瘤活性先导化合物具有重要的意义。本发明操作简单易行，原料合成便宜易得，可以在各种有机溶剂中进行，也具有较好的空气稳定性，适用性广，对于各种取代基都有很好的兼容性。这些衍生物发现具有一定的抑制肿瘤细胞生长活性，可作为抗肿瘤药物或抗肿瘤药物先导化合物用途。
【IPC分类】A61K31/352, C07D493/04, A61P35/00
【公开号】CN105663112
【申请号】CN201610020375
【发明人】周英, 陆毅, 黄俊飞, 刘雄利, 周根, 巩艺, 林冰, 俸婷婷, 郭丰敏
【申请人】贵州大学
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2016年1月13日