专利名称：选择蛋白抑制的方法和组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及抗炎物质领域，更尤其涉及作为称为选择蛋白的哺乳动物粘着蛋白拮抗剂的新化合物。
背景技术：
在血管炎症初期，在流动血液中的白细胞和血小板通过附着血管内皮和通过表现出的滚动行为减慢速度。该分子粘连事件通过称为选择蛋白的钙依赖性家族或“C-型”凝集素与白细胞表面上的配体特异性结合介导。还有可造成有害性引发选择蛋白介导细胞粘着的一些疾病，例如自身免疫性疾病、血栓形成疾病、寄生虫病和肿瘤细胞的转移扩散。
选择蛋白的胞外域的特征在于N-末端凝集素样区域，即表皮生长因子样区域和各种数目的短共有序列重复。已鉴定出三种人选择蛋白，包括P-选择蛋白(以前称PADGEM或GMP-140)、E-选择蛋白(以前称ELAM-1)和L-选择蛋白(以前称LAM-1)。通过其转录激活促炎细胞因子诱导在内皮细胞上的E-选择蛋白表达。L-选择蛋白基本上在白细胞上表达，它似乎在淋巴细胞归巢中起关键作用。P-选择蛋白储存在血小板的α颗粒和内皮细胞的怀布尔-帕拉德(Weibel-Palade)体中，因此在响应促炎刺激时，可在这些细胞种类的表面快速表达。选择蛋白通过与白细胞表面上的配体分子特异性相互作用介导粘着。通常，选择蛋白的配体至少部分由碳水化合物部分组成。例如，E-选择蛋白与具有以下末端结构的碳水化合物结合
也和具有以下末端结构的碳水化合物结合 其中R为碳水化合物链残基。这些碳水化合物是已知的血类抗原，通常分别称为Sialyl Lewis x和Sialyl Lewis a。单独存在于内皮细胞表面的Sialyl Lewis x抗原可足以促使与表达E-选择蛋白的细胞结合。E-选择蛋白还与具有以下末端结构的碳水化合物结合 至于E-选择蛋白，每种选择蛋白似乎与各种碳水化合物结合的亲和力不同。选择蛋白介导的粘着事件强度(结合亲和力)还取决于细胞表面上选择蛋白的密度和环境。
包括Gly CAM-1、CD34、ESL-1和PSGL-1的结构不同的糖蛋白配体可与具有表观高亲和力的选择蛋白结合。PSGL-1是通过实际上所有白细胞亚型表达的粘蛋白样同源二聚体糖蛋白，并由三种选择蛋白中的每一种来识别。但是，PSGL-1的独特性在于它是白细胞上的主要高亲和力P-选择蛋白配体，与PSGL-1结合的高亲和力P-选择蛋白需要含O-聚糖的SLex和PSGL-1多肽阴离子N-末端内的一个或多个硫酸酪氨酸残基(参见Sako，D.等Cell 1995；82(2)323-331；Pouyani，N.等，Cell 1995；82(2)333-343；Wilkins，P.P.等J.Biol.Chem.1995；27039 22677-22680，它们均通过引用整体结合到本文中)。L-选择蛋白还识别PSGL-1的N-末端区域和具有与P-选择蛋白类似的硫酸化依赖性结合需求。E-选择蛋白对配体的需求似乎不十分苛刻，因为它可与含PSGL-1的聚糖和其它糖蛋白的SLex结合。尽管有P-选择蛋白剔除和P/E选择蛋白双剔除小鼠出现血嗜中性粒细胞水平升高这一事实，但这些小鼠出现减弱的DTH反应和迟发的硫基乙醇酸盐(酯)诱发的腹膜炎(TIP)反应(见Frenette，P.S.等，ThrombHaemost 1997；781，60-64，其通过引用结合到本文中)。可溶性PSGL-1例如rPSGL-Ig在许多动物模型上显示有效(参见Kumar，A.等，Circulation.1999，99(10)1363-1369；Takada，M.等J.Clin.Invest 1997，99(11)，2682-2690；Scalia，R.等Circ Res.1999，84(1)，93-102，它们均通过引用整体结合到本文中。
此外，已鉴定出P-选择蛋白配体蛋白和编码该蛋白的基因。参见美国专利号5,840,679，其通过引用整体结合到本文中。经缺乏P-选择蛋白/LDLR的小鼠证实，P-选择蛋白抑制代表用于治疗动脉粥样硬化的有用靶(参见Johnson，R.C.等，J.Clin.Invest.1997 99 1037-1043，其通过引用结合到本文中)。有报道称，在动脉粥样硬化损害部位上P-选择蛋白表达增加，而P-选择蛋白表达的幅度似乎与损害的大小相关。P-选择蛋白介导的单核细胞附着可能导致动脉粥样硬化性斑块发展(参见Molenaar，T.J.M.等Biochem.Pharmacol.2003(66)859-866，其通过引用整体结合到本文中)。选择蛋白在包括炎症和附着过程的许多重要生物过程中产生作用和在疾病例如动脉粥样硬化中产生作用，可以理解对新的可用于治疗特征在于或涉及选择蛋白活性的各种疾病和病症的选择蛋白抑制剂有持续的需求。本发明涉及这些和其它重要的目的。
发明概述在一个方面，本发明提供治疗患有特征在于选择蛋白介导的胞间粘着过程的病症的哺乳动物的化合物和方法。在一个方面，本发明提供可用于这些方法的化合物，这些化合物具有式I 其中
L为CO2H、其酯或药学上可接受的酸类似物；Y为O、(CR3R4)p或NR5；p为1-3；X为氢、OH、OR3、OC1-6烷基、OC(＝O)芳基、OC(＝O)C1-6烷基、OC(＝O)OC1-6烷基或NR3R3′；R1、R2、R3、R3和R4各自独立为氢、C1-6烷基、C1-6全卤烷基、OC1-6烷基、OC1-6全卤烷基、卤素、烷硫基、CN、OH、SH、(CH2)nOSO3H、(CH2)nSO3H、(CH2)nCO2R6、OSO3R6、SO2R6、SO3R6、PO3R6R7、(CH2)nSO2NR8R9、(CH2)nC(＝O)NR8R9、NR8R9、C(＝O)R12、芳基、杂环基(heterocyclo)、C(＝O)芳基、C(＝O)杂环基、OC(＝O)芳基、OC(＝O)杂环基、O芳基、O杂环基、芳烷基、C(＝O)芳烷基、OC(＝O)芳烷基、O芳烷基、烯基、炔基或NHCOR8，其中任何所述烷基、O烷基、芳基、杂环基、C(＝O)芳基、C(＝O)杂环基、O-C(＝O)芳基、O-C(＝O)杂环基、O-芳基、O-杂环基、芳烷基、C(＝O)芳烷基、O-C(＝O)芳烷基、O-芳烷基、烯基或炔基可任选被最多达三个选自卤素、C1-6烷基、OC1-6烷基和CN的取代基取代；R6和R7各自独立为氢或任选被最多达三个选自OH、CF3、SH和卤素的取代基取代的C1-6烷基；R5、R8和R9各自独立为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、烷硫基、OH、(CH2)IOSO3H、(CH2)ISO3R10、(CH2)nCO2R10、SO3R10、PO3R10R11、(CH2)nSO2(CH2)nNR10R11、(CH2)nCONR10R11、COR10、芳基、杂环基、C(＝O)芳基、C(＝O)杂环基、O-C(＝O)芳基、O-C(＝O)杂环基、O芳基、O杂环基、芳烷基、C(＝O)芳烷基、OC(＝O)芳烷基、O芳烷基、烯基或炔基，其中任何所述烷基、芳基、杂环基、C(＝O)芳基、C(＝O)杂环基、OC(＝O)芳基、OC(＝O)杂环基、O芳基、O杂环基、芳烷基、C(＝O)芳烷基、OC(＝O)芳烷基、O芳烷基、烯基或炔基可任选被最多达三个选自卤素、C1-6烷基、OC1-6烷基和CN的取代基取代；各n为独立选自0-6的整数；
各I为独立选自1-6的整数；R10和R11各自独立为氢和任选被最多达三个选自OH、CF3、SH和卤素的取代基取代的C1-6烷基；各R12独立为氢、C1-6烷基、C1-6全卤烷基、OC1-6烷基、OC1-6全卤烷基、烷硫基、OH、(CH2)IOSO3H、(CH2)ISO3H、(CH2)ICO2R6、(CH2)ISO2NR8R9、(CH2)IC(＝O)NR8R9、NR8R9、烯基、炔基或NHCOR8，其中任何所述烷基、O烷基、烯基或炔基可任选被最多达三个选自卤素、C1-6烷基、OC1-6烷基和CN的取代基取代；和Z为芳基、芳烷基、杂芳基或杂环基，其中所述芳基、芳烷基、杂芳基和杂环基各自任选被取代。
在某些优选的实施方案中，化合物具有式II 在某些实施方案中，Y为CR3R4，优选CH2。在某些实施方案中，Y为CH2，且X为OH。在再一些实施方案中，Z选自(a)含1-3个选自N、S或O的环杂原子的5元杂环；其中所述5元杂环任选被1-3个选自以下的取代基取代卤素、C1-10烷基、OC1-10烷基、NO2、NH2、CN、CF3和CO2H；(b)含1-3个选自N、S或O环杂原子的6元杂环；其中所述6元杂环任选被1-3个选自以下的取代基取代卤素、C1-10烷基、OC1-10烷基、CHO、CO2H、C(＝O)R20、SO2R20、NO2、NH2、CN、CF3和OH；(c)任选含1-3个选自N或OI环杂原子的双环部分；其中所述双环部分任选被1-3个选自以下的取代基取代卤素、C1-6烷基、OC1-6烷基、CHO、NO2、NH2、CN、CF3、CO2H、C(＝O)R20、SO2R20和OH；和
(d)苄基、萘基或苯基环，其中每一个任选被选自以下的1-3个取代基取代卤素、C1-6烷基、苯基、苄基、O苯基、O苄基、SO2NH2、SO2NH(C1-6烷基)、SO2N(C1-6烷基)2、CH2COOH、CO2H、CO2Me、CO2Et、CO2iPr、C(＝O)NH2、C(＝O)NH(C1-6烷基)、C(＝O)N(C1-6烷基)2、OH、SC1-6烷基、OC1-6烷基、NO2、NH2、CF3和CN；其中各R20独立选自C1-10烷基、OC1-10烷基和NR6R7。
在某些实施方案中，Z为芳基。
在某些实施方案中，R1和R2各自独立为氢、C1-6烷基、C1-6全卤烷基、OC1-6烷基、OC1-6全卤烷基、卤素、烷硫基、CN、OH、SH、(CH2)nOSO3H、(CH2)nSO3H、(CH2)nCO2R6、OSO3R6、SO3R6、PO3R6R7、(CH2)nSO2NR8R9、(CH2)nC(＝O)NR8R9、NR8R9、芳基、杂环基、C(＝O)R12、C(＝O)芳基、C(＝O)杂环基、OC(＝O)芳基、OC(＝O)杂环基、O芳基、O杂环基、C(＝O)芳烷基、OC(＝O)芳烷基、O芳烷基、烯基、炔基或NHCOR8。
在某些优选的实施方案中，Y为CH2，X为OH，且Z选自以上(a)、(b)、(c)和(d)在某些优选的实施方案中，化合物具有式III 其中R21和R22独立为氢、卤素、OH、CN、SH、C1-6烷基、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基、C1-6烷硫基、芳基或或杂芳基；其中所述芳基和所述杂芳基可各自任选被最多达三个选自以下的取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、C1-6烷基、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基；和其中所述C1-6烷基、OC1-6烷基和C1-6烷硫基可各自任选被最多达三个选自以下的取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基；和R23为芳基或杂芳基，其中所述芳基和所述杂芳基可各自任选被最多达三个选自以下的取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、C1-6烷基、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基。
在某些实施方案中，R21和R22各自独立为氢、C1-6烷基、卤素、芳基、杂芳基或OC1-6烷基，其中所述杂芳基为3-呋喃基或3-噻吩基和所述芳基为未取代的苯基；且其中所述C1-6烷基和所述OC1-6烷基可各自任选被最多达三个选自以下的取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基；和R23为4′-位被卤素、C1-6烷基、SC1-6烷基或OC1-6烷基取代的苯基。
在再一些实施方案中，R1和R2位于喹啉环7和8位并独立选自H、甲基和未取代的苯基；和R23为4′-位被Cl或OCF3取代的苯基。
在再一些实施方案中，R1位于喹啉环的7位，且R2位于喹啉环的8位；和R1为CH3，R2为CH3及R23为4-氯苯基；或R1为H，R2为未取代的苯基，和R23为4-氯苯基。
在某些实施方案中，本发明提供化合物a)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲基-喹啉-4-甲酸；b)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲氧基-喹啉-4-甲酸；c)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-异丙基喹啉-4-甲酸；d)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-甲基喹啉-4-甲酸；e)2-(4-氯苄基)-8-乙基-3-羟基喹啉-4-甲酸；f)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-(噻吩-3-基)喹啉-4-甲酸；g)8-溴-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸；h)8-(仲丁基)-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸；i)2-(4-氯苄基)-3-羟基-6-苯基喹啉-4-甲酸；j)2-(4-氯苄基)-8-(呋喃-3-基)-3-羟基喹啉-4-甲酸；
k)2-(4-氯苄基)-8-氟-3-羟基喹啉-4-甲酸；l)2-(4-氯苄基)-8-氟-3-羟基喹啉-4-甲酸；m)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-(2，2，2-三氟-1-羟基-1-三氟甲基-乙基)-喹啉-4-甲酸；和n)2-(4-氯苄基)-3-羟基-喹啉-4-甲酸。
根据本发明，还提供含药学有效量的本发明化合物和药学上可接受的载体或赋形剂的组合物。
本发明还提供使用本文中公开化合物的方法。在某些实施方案中，本发明提供在哺乳动物中抑制选择蛋白介导的胞内粘着的方法，所述方法包括给予哺乳动物有效量的本发明化合物。
在再一些实施方案中，本发明提供在哺乳动物中抑制与疾病、障碍、病症或不期望过程有关的选择蛋白介导的胞内粘着的方法，该方法包括给予哺乳动物有效量的本发明化合物。
在某些优选的实施方案中，疾病、障碍、病症或不期望过程是炎症、感染、转移、不期望的免疫过程或不期望的血栓形成过程。
在某些实施方案中，疾病、障碍、病症或不期望过程是动脉粥样硬化、再狭窄、心肌梗塞、Reynauld氏综合征、炎性肠病、骨关节炎、急性呼吸窘迫综合征、哮喘、肺气肿、迟发型过敏反应、热损伤、实验性变应性脑脊髓炎、创伤继发的多发性器官损害综合征、嗜中性白细胞皮肤病(斯威特(Sweet)病)、肾小球肾炎、溃疡性结肠炎、节段性回肠炎、坏死性小肠结肠炎、细胞因子诱发的毒性、龈炎、牙周炎、溶血性尿毒性综合征、银屑病、系统性红斑狼疮、自身免疫性甲状腺炎、多发性硬化、类风湿性关节炎、格雷夫斯病、与血液透析或白细胞提取法治疗有关的免疫介导的副作用、与粒细胞输入有关的综合征、深静脉血栓形成、不稳定型心绞痛、短暂性缺血发作、周围血管性疾病、与癌有关的转移或充血性心力衰竭。
在某些实施方案中，疾病、障碍、病症或不期望过程是细菌、病毒或寄生虫介导的不期望的感染过程，例如龈炎、牙周炎、溶血性尿毒性综合征或与粒细胞输入有关的综合征。
在再一些实施方案中，疾病、障碍、病症或不期望过程是与癌有关的转移。
在再一些实施方案中，疾病、障碍、病症或不期望过程是与不期望的免疫过程有关的疾病或病症，例如银屑病、系统性红斑狼疮、自身免疫性甲状腺炎、多发性硬化、类风湿性关节炎、格雷夫斯病和与血液透析或白细胞提取法治疗有关的免疫介导的副作用。
在再一些实施方案中，疾病、障碍、病症或不期望过程是与不期望的血栓形成过程有关的病症，例如深静脉血栓形成、不稳定型心绞痛、短暂性缺血发作、周围血管性疾病或充血性心力衰竭。
在再某些实施方案中，本发明提供缓解移植器官中不期望免疫过程的方法，该方法包括联合给予所述器官免疫抑制剂和本发明化合物。
在再某些实施方案中，本发明提供包括以下的方法鉴别具有涉及选择蛋白介导的胞内粘着疾病或病症的生物标记的人、哺乳动物或动物；和给予所述人、哺乳动物或动物治疗有效量的本文公开的化合物。在某些实施方案中，生物标记是一种或多种CD 40、CD 40配体、MAC-1、TGFβ、ICAM、VCAM、IL-1、IL-6、IL-8、嗜酸性粒细胞特异性趋化因子(Eotaxin)、RANTES、MCP-1、PIGF、CRP、SAA和血小板单核细胞聚集体。
发明详述在某些实施方案中，本发明提供拮抗选择蛋白介导的胞间粘着的方法和化合物。干扰或防止这种胞间粘着可用于治疗各种疾病和病症，以及缓解这类疾病或病症的一种或多种症状。因此，在某些实施方案中，本发明提供抑制哺乳动物选择蛋白介导的胞内粘着的方法，尤其是当这种选择蛋白介导的胞内粘着与哺乳动物的疾病、障碍、病症或不期望过程有关时，该方法包括给予哺乳动物有效量的本发明化合物。
适宜本发明方法的疾病、障碍、病症和不期望过程包括所有全部或部分特征在于不需要的选择蛋白介导的胞间粘着的那些，例如炎症、感染(例如由细菌、病毒或寄生虫介导的，包括如龈炎、牙周炎、溶血性尿毒性综合征和与粒细胞输入有关的综合征)、转移(例如与癌有关)、不期望的免疫过程和不期望的血栓形成过程。前述非限定性实例包括动脉粥样硬化、再狭窄、心肌梗塞、Reynauld氏综合征、炎性肠病、骨关节炎、急性呼吸窘迫综合征、哮喘、肺气肿、迟发型过敏反应、热损伤例如灼伤或冻伤、实验性变应性脑脊髓炎、创伤继发的多发性器官损害综合征、嗜中性白细胞皮肤病(斯威特病)、肾小球肾炎、溃疡性结肠炎、节段性回肠炎、坏死性小肠结肠炎、细胞因子诱发的毒性、龈炎、牙周炎、溶血性尿毒性综合征、银屑病、系统性红斑狼疮、自身免疫性甲状腺炎、多发性硬化、类风湿性关节炎、格雷夫斯病、与血液透析或白细胞提取法治疗有关的免疫介导的副作用、与粒细胞输入有关的综合征、深静脉血栓形成、不稳定型心绞痛、短暂性缺血发作、周围血管性疾病、中风和充血性心力衰竭。
感染过程涉及选择蛋白介导的胞间粘着。因此，本发明还提供治疗或预防哺乳动物的不期望的感染过程的方法，该方法包括给予所述哺乳动物本发明化合物。感染可由细菌、病毒或寄生虫介导，这种感染过程的实例包括龈炎、牙周炎、溶血性尿毒性综合征和与粒细胞输入有关的综合征。
涉及选择蛋白介导的胞间粘着的疾病和病症的更多实例包括癌转移和与不期望的免疫过程有关的疾病或病症，例如银屑病、系统性红斑狼疮、自身免疫性甲状腺炎、多发性硬化、类风湿性关节炎、格雷夫斯病和与血液透析或白细胞提取法治疗有关的免疫介导的副作用。
再一个实例是器官移植，其中患者通常接受免疫抑制治疗以使器官排斥的可能性最小。用于此类治疗方案的典型的免疫抑制剂包括环胞菌素、雷帕霉素和他克莫司。在本发明的某些实施方案中，可联合给予接受器官移植的患者本发明化合物和一种或多种此类免疫抑制剂。因此，在某些实施方案中，本发明化合物可给予移植器官，通过例如将化合物给予移植前患者、给予移植后患者或在移植前或移植后直接给予(例如通过灌注)移植器官本身，或以任何联合给予。因此，在优选的实施方案中，可联合给予器官本发明化合物和一种或多种免疫抑制剂；即化合物可与免疫抑制剂同时，或有效量的免疫抑制剂在器官或患者中存在的任何时间内给予。
适宜本发明方法的涉及选择蛋白介导胞间粘着过程的更多实例包括与不期望的血栓形成过程有关的病症，例如深静脉血栓形成、不稳定型心绞痛、短暂性缺血发作、周围血管性疾病或充血性心力衰竭。
本发明化合物还具有治疗镰状细胞(sickle)综合征例如镰状细胞性贫血和缓解一种或多种此类病症症状的用途。
在某些实施方案中，当与其它治疗药物联合给药时，本发明化合物具有治疗前述疾病和/或病症的用途。例如，在某些实施方案中，本发明化合物和抗血小板药物(例如氯吡格雷或阿司匹林)和/或脂质调节剂(例如他汀类药物(statins))可有利的一起给予患有以下病症的患者血管病，例如CAD(冠状动脉性疾病，包括但不限于急性冠状动脉综合征(例如MI和中风))、包括PAD(周围动脉性疾病)的周围血管性疾病和深静脉血栓形成。其它适宜的抗血小板药和脂质调节剂对本领域技术人员而言是显而易见的。
本发明化合物还具有治疗由本领域已知的生物标记推断的疾病和病症的用途。非限定性生物标记包括例如CD 40、CD 40配体、MAC-1、TGFβ、ICAM、VCAM、IL-1、IL-6、IL-8、嗜酸性粒细胞特异性趋化因子、RANTES、MCP-1、PIGF、CRP和SAA以及血小板单核细胞聚集体。
根据某些优选的实施方案，本发明方法包括给予一种或多种具有式I的化合物 其中成分变量定义同上。
在某些实施方案中，Y-Z位于喹啉的2-位。在再一些实施方案中，X位于喹啉的3-位。在再一些实施方案中，L位于喹啉的4-位。在某些实施方案中，L、Y-Z和X分别位于喹啉的4、3和2-位。
在本发明化合物和方法的某些实施方案中，式I化合物具有式II 其中成分变量定义同上。
在再某些实施方案中，式I化合物具有式III 其中成分变量定义同上。
在本发明化合物和方法的某些实施方案中，Y为CR3R4，优选CH2，且更优选其中X为OH。在某些特别优选的实施方案中，Y为CH2，X为OH，且Z为芳基，更优选苯基或取代的苯基。在某些尤其优选的实施方案中，Z为4′-位取代的苯基。在某些实施方案中，此类4′-取代基为小疏水性基团，例如卤素、C1-6烷基、C1-6全卤烷基、OC1-6烷基、OC1-6全卤烷基、C1-6烷硫基、CN、烷基磺酰胺基和一-和二-烷基胺基。
在本发明化合物和方法的某些实施方案中，其中Y为CH2，且X为OH、Z选自(a)含1-3个选自N、S或O环杂原子的5元杂环；其中所述5元杂环任选被1-3个选自以下的取代基取代卤素、C1-C10烷基、OC1-C10烷基、NO2、NH2、CN、CF3和CO2H；(b)含1-3个选自N、S或O环杂原子的6元杂环；其中所述6元杂环任选被1-3个选自以下的取代基取代卤素、C1-C10烷基、OC1-C10烷基、CHO、CO2H、C(＝O)R20、SO2R20、NO2、NH2、CN、CF3和OH；(c)任选含1-3个选自N或O环杂原子的双环部分；其中所述双环部分任选被1-3个选自以下的取代基取代卤素、C1-C6烷基、OC1-C6烷基、CHO、NO2、NH2、CN、CF3、CO2H、C(＝O)R20、SO2R20和OH；和
(d)苄基、萘基或苯基环，其中每一个任选被1-3个选自以下的取代基取代卤素、C1-C6烷基、苯基、苄基、O苯基、O苄基、SO2NH2、SO2NH(C1-6烷基)、SO2N(C1-6烷基)2、CH2COOH、CO2H、CO2Me、CO2Et、CO2iPr、C(＝O)NH2、C(＝O)NH(C1-6烷基)、C(＝O)N(C1-6烷基)2、OH、SC1-6烷基、OC1-6烷基、NO2、NH2、CF3和CN。
在某些优选的实施方案中，优选但不限于以下那些其中Y为CH2，X为OH，且Z如上所述为苯基或取代的苯基，R1和R2为小疏水性基团，例如卤素、C1-6烷基、C1-6全卤烷基、OC1-6烷基、OC1-6全卤烷基、C1-6烷硫基、CN、C1-6烷基磺酰胺基、C1-6一-和二-烷基胺基，或具有最多达8个碳原子的芳基或取代的芳基，其中取代基选自卤素、C1-10烷基、OC1-10烷基、CHO、CO2H、NO2、NH2、CN、CF3和-OH。在某些实施方案中，R1和R2中的一个为小疏水性基团，且R1和R2中的另一个为具有最多达8个碳原子的芳基或取代的芳基。
在其中式I化合物具有式III的某些实施方案中，R21和R22独立选自H、C1-6烷基、卤素、芳基、杂芳基和OC1-6烷基，其中所述杂芳基为3-呋喃基或3-噻吩基，且所述芳基为未取代的苯基；和R23为4′-位被卤素、C1-6烷基、SC1-6烷基或OC1-6烷基取代的苯基。
在再一些此类实施方案中，R21和R22位于喹啉环的7和8位，并且独立选自H、甲基和未取代的苯基；和R23为4′-位被Cl或OCF3取代的苯基。
在还再一些此类实施方案中，R21位于喹啉环的7位，且R22位于喹啉环的8位；和R21为CH3；R22为CH3，且R23为4-氯苯基；或R21为H；R22为未取代的苯基，且R23为4-氯苯基。
在其中化合物具有式III的某些实施方案中，R21和R22独立选自H、C1-6烷基、卤素、芳基、杂芳基和OC1-6烷基，其中所述杂芳基为3-呋喃基或3-噻吩基，且所述芳基为未取代的苯基；和所述C1-6烷基和所述OC1-6烷基可各自任选被最多达3个选自以下的取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基；和R23为4′-位被卤素、C1-6烷基、SC1-6烷基或OC1-6烷基取代的苯基。
在某些优选的实施方案中，本发明还提供化合物1)2-(4-氯苄基)-3-羟基-7，8-二甲基-喹啉-4-甲酸；2)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-苯基-喹啉-4-甲酸；或选自1)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲基-喹啉-4-甲酸；2)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲氧基-喹啉-4-甲酸；3)02-(4-氯苄基)-3-羟基-8-异丙基喹啉-4-甲酸；4)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-甲基喹啉-4-甲酸；5)2-(4-氯苄基)-8-乙基-3-羟基喹啉-4-甲酸；6)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-(噻吩-3-基)喹啉-4-甲酸；7)8-溴-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸；8)8-(仲丁基)-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸；9)2-(4-氯苄基)-3-羟基-6-苯基喹啉-4-甲酸；10)2-(4-氯苄基)-8-(呋喃-3-基)-3-羟基喹啉-4-甲酸；11)2-(4-氯苄基)-8-氟-3-羟基喹啉-4-甲酸；和12)2-(4-氯苄基)-8-氟-3-羟基喹啉-4-甲酸，它们可用于本发明方法。
应理解式I、II和III化合物可具有一个或多个手性中心，并存在对映体或非对映体。应理解本发明延伸至包括外消旋体的所有此类对映体、非对映体及其混合物。
本发明还将包括本文中所述化合物的所有可能的质子化和非质子化形式以及溶剂合物、互变异构体及其药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，取代基L为CO2H、其酯或药学上可接受的酸类似物。本文中使用的术语“酸类似物”应包括模拟生物分子中酸官能团的部分。此类酸类似物的实例在本领域中已知，包括但不限于-OH和以下所示那些
其中Ra选自-CF3、CH3、苯基或苄基，其中苯基或苄基任选被最多达3个选自以下的相同或不同的基团取代C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、-CF3、卤素、-OH或COOH；Rb选自-CF3、-CH3、-NH2、苯基或苄基，其中苯基或苄基任选被最多达3个选自以下的相同或不同的基团取代C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、-CF3、卤素、-OH或COOH；和Rc选自-CF3和C1-6烷基。
根据本发明，可使用本发明化合物的酯形式(例如其中L为CO2H酯的化合物)，包括本领域中已知的药学上可接受的酯形式，包括可在动物体内代谢为游离酸形式的那些，例如游离羧酸形式，例如相应的烷基酯(例如1-10个碳原子的烷基)、环烷基酯(例如3-10个碳原子的)、芳基酯(例如6-20个碳原子的)及其杂环类似物(例如3-20个环原子的，其中1-3个可选自氧、氮和硫杂原子)，其中优选烷基酯、环烷基酯和芳基酯，且醇残基还可带取代基。特别优选C1-C8烷基酯，优选C1-C6烷基酯，例如甲酯、乙酯、丙酯、异丙酯、丁酯、异丁酯、叔丁酯、戊酯、异戊酯、新戊酯、己酯、环丙酯、环丙基甲基酯、环丁酯、环戊酯、环己酯或芳基酯例如苯酯、苄酯或甲苯酯。
本文中作为基团或基团的一部分使用的术语烷基应指烃基，例如1-20个、例如1-6个碳原子的烃基，包括直链、支链和环烃，包括例如但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、环丁基、环丙基甲基、正戊基、异戊基、叔戊基、环戊基、环戊基甲基、正己基、环己基等。在整个本说明书中，应理解术语烷基将包括非环烃基和环烃基。在本发明化合物的某些实施方案中，烷基为非环状的。在再一些实施方案中，烷基为环状，且在再一些实施方案中，烷基不但为环状，而且为非环状。
本发明化合物和方法的烷基可包括由1个卤素至最多达全卤代的任选取代。在某些实施方案中，优选全氟基团。任选被卤素取代的烷基实例包括CF3、CH2CF3、CCl3、CH2CH2CF2CH3、CH(CF3)2和(CH2)6-CF2CCl3。
本文中使用的术语烯基应表示含至少一个双键的例如2-20、优选2-6个碳原子的烷基，包括例如但不限于乙烯基、烯丙基、2-甲基-烯丙基、4-丁-3-烯基、4-己-5-烯基、3-甲基-丁-2-烯基、环己-2-烯基等。
本文中使用的术语炔基应表示含至少一个三键的例如2-20、优选2-6个碳原子的烷基，包括例如但不限于丁-1-炔基、丙炔基、戊-2-炔基、乙炔基-环己基等。
定义同上的烷基、烯基和炔基也可任选被取代，即它们可任选还具有取代基。某些优选的取代基包括羟基、烷氧基(即O-烷基，优选O-C1-6烷基)、一、二或三卤烷氧基(例如-O-CX3，其中X为卤素)、-(CH2)nNH2和-(CH2)nNHBoc。
在本说明书中各处，本发明化合物的取代基按类或范围公开。本发明尤其应包括各个此类和范围内的成员和此类和范围的成员的每一个单独子组合。例如，术语“C1-6烷基”尤其指分别公开了甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基等。本文中使用的术语卤素具有其包括F、Cl、Br和I的7种元素的正常含义。
本文中使用的术语“碳环”应表示饱和的、部分饱和的或芳环系统，其中环原子为各个碳。
本文中作为基因或基团部分使用的术语芳基应表示例如6-20、优选6-10个碳原子的芳烃系统，例如苯基、萘基、菲基、蒽基、芘基等。在某些实施方案中，芳基分别为萘环或苯环，其中每一个任选被1-3个选自以下的取代基取代卤素、C1-C6烷基、苯基、苄基、O-苯基、O苄基、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C6烷基)、-SO2N(C1-C6烷基)2、-CH2COOH、-CO2H、-CO2Me、-CO2Et、-CO2iPr、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NH(C1-C6)、-C(＝O)N(C1-C6)2、-OH、-S-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-NO2、-NH2、-CF3、OCF3和CN。
本文中使用的术语芳烷基应表示式-烷基-芳基基团，其中芳基和烷基具有以上定义。在某些实施方案中，芳烷基为任选被1-3个选自以下的取代基取代的苄基卤素、C1-6烷基、苯基、苄基、O苯基、O苄基、SO2NH2、SO2NH(C1-6烷基)、SO2N(C1-6烷基)2、CH2COOH、CO2H、CO2Me、CO2Et、CO2iPr、C(＝O)NH2、C(＝O)NH(C1-6)、C(＝O)N(C1-6)2、OH、SC1-6烷基、OC1-6烷基、NO2、NH2、CF3、OCF3和CN。
本文中作为基团或基团的一部分使用的术语杂环基应表示含1-3个选自O、N和S杂(即非碳)原子和例如3-20个环原子的单环或双环环系统。杂环基包括完全饱和和部分饱和的含环杂原子的部分(例如不含或含一个或多个双键)。此类完全和部分饱和的非芳环基团在本文中也统称为“杂环烷基”。杂环基还包括含至少一个芳环的含环杂原子的部分。此类完全和部分芳族部分在本文中也统称为“杂芳基”。在某些实施方案中，杂环基为(a)含1-3个选自N、S或O环杂原子的5元杂环，例如但不限于呋喃、咪唑、咪唑烷、异噻唑、异唑、噻唑、唑、唑啉、吡唑、吡唑烷、吡唑啉、吡咯、吡咯烷、吡咯啉、噻唑啉或噻吩，任选被1-3个选自以下的取代基取代的5元杂环卤素、C1-10烷基优选C1-6烷基、OC1-10烷基优选OC1-6烷基、NO2、NH2、CN、CF3、CO2H；或(b)含1-3个选自N、S或O环杂原子的6元杂环，例如但不限于吗啉、嗪、哌嗪、哌啶、吡喃、吡嗪、哒嗪、吡啶、嘧啶、噻二嗪或噻嗪，任选被1-3个选自以下的取代基取代的6元杂环卤素、C1-10烷基、OC1-10烷基、CHO、CO2H、C(＝O)R20、SO2R20、NO2、NH2、CN、CF3或OH；或(c)任选含1-3个选自N或O环杂原子的双环部分，例如但不限于苯并二氧杂环己烯、苯并间二氧杂环戊烯、苯并呋喃、色烯、肉啉、吲唑、吲哚、二氢吲哚、中氮茚、异吲哚、异吲哚啉、异喹啉、萘、1，5-二氮杂萘(napthyridine)、2，3-二氮杂萘、嘌呤、喹唑啉、喹啉或喹嗪，任选被1-3个选自以下的取代基取代的双环部分卤素、C1-6烷基、OC1-6烷基、CHO、NO2、NH2、CN、CF3、CO2H、C(＝O)R20、SO2R20或OH。
本发明化合物可以药学上可接受的盐存在，包括由包括无机酸和有机酸的药学上可接受的酸制备的药学上可接受的酸加成盐。此类酸包括乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、二氯乙酸、甲酸、富马酸、葡萄糖酸、谷氨酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、草酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、草酸、对-甲苯磺酸等。药学上可接受的盐的更多代表性实例可在Journalof Pharmaceutical Science，66，2(1977)中找到，该文献通过引用结合到本文中。使本发明化合物与一种或多种适当活性碱的等同物反应也可制备碱式盐。期望单和多阴离子盐两种盐，取决于可用于脱质子的酸性氢数目。适宜的碱性质上可以是有机或无机碱。例如无机碱，例如NaHCO3、Na2CO3、KHCO3、K2CO3、Cs2CO3、LiOH、NaOH、KOH、NaH2PO4、Na2HPO4、Na3PO4和其它碱是适宜的。包括胺、烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、各种环胺(例如吡咯烷、哌啶等)和其它有机胺的有机碱是适宜的。也可通过使本发明化合物与适当活性的有机亲电试剂(例如甲基碘或三氟甲磺酸乙酯)反应制备烷基季铵盐。也可以脂质体形式给予本文中所述化合物。如本领域中已知的那样，脂质体通常衍生自磷脂或其它脂质物质，通过分散在水介质中的单或多层水化液体晶体形成。可使用能够形成脂质体的任何无毒的药理学上可接受的脂质。
根据本发明，除式I、II或III化合物外，含组合物的脂质体还可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂质包括天然的和合成的磷脂，包括磷脂酰胆碱(卵磷脂)。形成脂质体的方法在本领域中已熟知，对熟练的技术人员来讲是显而易见的。
本发明还包括式I、II和III化合物的前药形式。一般而言，当暴露于其中存在适当的内源性酶或活性物质的胃液、血浆或在任何组织或室中时，在本发明化合物上引入生理上不稳定的基团会导致需要的化合物再生。此类生理上不稳定基团的一个非限定性实例包括式I或II化合物羧酸的烷基酯。已知此类酯在肠被胃液或在血浆中被各种内源性酯酶水解为游离酸。另一个非限定性实例是用式O-G基团，其中G是通过肝脏或肠代谢酶除去的烷基，或用从天然存在氨基酸中除去α羧基或氨基后的剩余部分，置换式I或II中的基团X。提供生理上不稳定的官能团的任何此类结构在本文使用前药的定义范围内。
可得到作为化合物合成直接产物的酸或碱加成盐。或者，可将游离碱溶于含适当酸或碱的适宜溶剂中，通过蒸发溶剂或将盐和溶剂分开来分离盐。用熟练技术人员已知的方法，本发明化合物可形成具有标准低分子量溶剂的溶剂合物。
本发明组合物可按单位剂型便利地给予，并可通过制药领域熟知的任何方法，例如在Remington′s Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.，Easton，PA，1980)中描述的方法制备。
本发明化合物可单独用作药物中的活性剂，或可与可促进该化合物疗效的其它活性成分联合使用。
本发明化合物或其溶剂合物或生理功能衍生物可用作药用组合物中的活性成分，尤其用作选择蛋白抑制剂。术语“选择蛋白抑制剂”应表示干扰(即拮抗)胞间粘着中选择蛋白正常生理功能的化合物。
本发明药用组合物上下文中，术语活性成分应表示药用组合物的组分，相对于通常认为不提供药物益处的惰性成分，它们提供主要的药物益处。术语药用组合物应表示含至少一种活性成分和至少一种不是活性成分的成分(例如但不限于填充剂、染料或缓释结构)的组合物，因此组合物适合用于在哺乳动物(例如但并不限于人)中产生特定的有效结果。
式I、II和III化合物可用于治疗或预防哺乳动物包括但不限于人的多发性病症。可通过口、舌下、肠胃外、直肠、局部给药或通过透皮贴剂给予本发明化合物。透皮贴剂通过提供以有效方式吸收药物且药物降解最少的控制速率分配药物。典型地，透皮贴剂包括不渗透的衬背层、单一压力敏感性粘合层和具有释放衬里的可除去保护层。本领域普通技术人员会理解和认识到，适用于制备需要的有效透皮贴剂的技术取决于技术人员的需要。
需要不同量的本发明化合物以达到需要的生物作用。该量取决于多种因素，例如具体的化合物、预定的用途、给药方式、接受治疗个体的条件，且所有这些给药参数均在医学领域的普通技术人员的水平内。预期通常的剂量在0.001-200mg/kg哺乳动物体重。单位剂量可含1-200mg本发明化合物，可每日一次或多次，以单剂量或多剂量给药。
药用组合物包括可用作活性成分的至少一种本文中公开的化合物和/或其药理学上可接受的盐或溶剂合物，以及组合应用的一种或多种载体或赋形剂。此类组合物可用于治疗适用选择蛋白抑制剂治疗的临床病症。一种或多种活性成分可与固体或液体形式的载体组合成为单位剂量的制剂。可通过任何适宜的方法制备制剂，通常通过使一种或多种活性化合物与液体或固体载体细粉或两者按需要的比例均匀混合，然后如需要，将得到的混合物形成需要的形状。
常规赋形剂例如粘合剂、填充剂、可接受的湿润剂、压片润滑剂和崩解剂可用于口服给药的片剂和胶囊剂。口服给药的液体制剂可以是溶液、乳液、水或油混悬液和糖浆形式。或者，口服制剂可以是临用前可用水或其它适宜的液体溶媒溶解的干粉形式。可将其它添加剂例如悬浮剂或乳化剂、非水溶媒(包括食用油)、防腐剂、矫味剂和着色剂加入液体制剂中。可通过将本发明化合物溶于适宜的液体溶媒中，将溶液过滤灭菌，然后灌装在适宜的小瓶或安瓿中，密封，从而制备肠胃外剂型。这些只是本领域熟知制备剂型的许多合适方法的几个实例。
应注意当选择蛋白抑制剂用作药用组合物中的活性成分时，将指不仅用于人，也可用于非人的哺乳动物。本领域普通技术人员可容易地相信并理解此类化合物在此类情况下的效用。
本发明还提供制备式I化合物的方法，该方法包括以下步骤之一
a)使其中R1和R2定义同权利要求1的下式化合物 与下式化合物反应 其中Ac为乙酰基，且Y和Z定义同权利要求1，得到相应的式I化合物，其中L为4位上的CO2H，且X为3位上的OH；或b)将式I化合物转化为其药学上可接受的盐，或反之将其药学上可接受的盐转化为式I化合物。
可根据多种合成方案，容易地制备本发明化合物，本领域技术人员熟悉其中所有方法。在以下流程1中描述了代表性通用合成方法。
流程1制备式I化合物的通用合成流程
本领域技术人员会认识到，可按照流程1制备各种本发明化合物。例如，通过用适当取代的苯乙酰氯为原料，人们可制备许多在喹啉2-位不同取代的苄基。类似地，本领域技术人员还认识到可购买或制备各种取代的苯胺，用于构建相应取代的喹啉。另外，例如通过酯化或其它掩蔽反应保护羧酸，使位于喹啉环上的3-羟基选择性烷基化或官能化。
在合成本文中所述多种化合物时，在合成期间，可用保护基团保护各种官能团。适用于各种合成转化的代表性保护基团在Greene和Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第2版，John Wiley &Sons，New York，1991中公开，该文献通过引用整体结合到本文中。
虽然按照其优选的某些实施方案特征性描述了本发明，但以下实施例仅用于举例说明本发明，并不限定本发明。
实施例合成化合物可按照本文中所述，通过流程1中概括的以下通用合成方法，用市售原料制备式I化合物。
实施例1制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-7，8-二甲基-喹啉-4-甲酸(化合物1)按以下流程2制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-7，8-二甲基-喹啉-4-甲酸流程2制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-7，8-二甲基-喹啉-4-甲酸(化合物1) 中间体11-氯-3-(4-氯-苯基)-丙-2-酮在30min内，将30g(158.7mmol)对-氯苯甲酰甲基氯的200ml乙醚溶液加入420ml重氮甲烷的乙醚溶液(0.57mmol/ml)中，同时在冰浴中搅拌。[用在Org.Syn.Coll.Vol.II第165-167页中所述方法制备重氮甲烷]。将反应物在冰中搅拌3h，然后在室温下搅拌过夜。随后在0-4℃，使和缓无水HCl气流通入该重氮酮溶液约5-8min，直至氮气生成停止。再在冰浴中1小时后，将反应物倾入700ml碎冰-水中。将混合物搅拌15min，用400ml乙醚稀释，将有机相用750ml5％碳酸钠溶液洗涤，然后用500ml半饱和盐水洗涤。将合并的有机层干燥(硫酸钠)，将乙醚溶液蒸发，得到25.5g粗中间体1，为浅黄色固体。
将粗产物的溶液溶于30-35ml二氯甲烷，经500g硅胶60(Merck0.04-0.063mm)快速层析纯化。用乙酸乙酯-己烷20∶80洗脱柱(40×6cm)，得到21.1g(65.3％收率)纯中间体1，为无色结晶。
1H NMR(CDCl3，300MHz)，δppm 3.88(s，2H)4.11(s，2H)7.16(d，J＝8.59Hz，2H)7.32(d，J＝8.59Hz，2H).
中间体2乙酸3-(4-氯-苯基)-2-氧代-丙基酯在温和回流下，向21.1g(103.9mmol)中间体1的200ml乙醇溶液中一次性加入21.94g(114.3mmol，1.1当量)乙酸铯的100ml水和10ml冰乙酸溶液。回流3h后，反应达到最佳阶段(TLC乙酸乙酯∶己烷20∶80，钼酸铵喷雾)。将大多数乙醇通过蒸发除去，使得到的油性混合物在2×800ml乙酸乙酯和2×500ml冰冷半饱和碳酸氢钠溶液之间分配。将有机层依次用500ml盐水洗涤，经硫酸钠干燥，真空蒸发。使残渣的30ml二氯甲烷溶液经500g硅胶快速层析纯化。用乙酸乙酯∶己烷20∶80至30∶70洗脱柱，得到12.09g(51.3％)中间体2，为无色结晶固体。用乙醚∶己烷重结晶，得到11.7g纯中间体2。还回收到1.88g原料。
1H NMR(CDCl3，300MHz)，δppm 2.16(s，3H)3.72(s，2H)4.69(s，2H)7.15(d，J＝8.59Hz，2H)7.31(d，J＝8.59Hz，2H).
中间体3N-(2，3-二甲基-苯基)-2-羟基亚氨基-乙酰胺通过Rewcastle等在J.Med.Chem.，1991，34，217中所述靛红合成制备该化合物。将水合氯醛(45g，0.27mol)、盐酸羟胺(205g，1.25mol)和硫酸钠(226.5g，1.6mol)放入2L圆底烧瓶中，加入750mL水。向该悬浮液中加入含浓HCl(25mL)的2，3-二甲基苯胺(29.05g，0.24mol)的250mL水溶液。在N2下，用90min将悬浮液加热至45℃，然后45min内加热至52℃，最后加热至75℃，保持60min。将反应混合物冷却至室温。将沉淀过滤收集，用水、石油醚洗涤，在真空干燥器中干燥过夜，得到粗肟基中间体3(40.1g，87％)。
中间体46，7-二甲基-1H-吲哚-2，3-二酮在70℃-80℃下，在1小时内，搅拌下，将中间体3(20g，0.1mol)分小批量加入80mL CH3SO3H中。完成加入后，在同一温度下，再保持15分钟，然后倾入盛有碎冰的烧杯中。继续加入冰直至接触烧杯外壁感觉到冷。然后将沉淀收集，溶于1N NaOH水溶液。用乙酸中和，将沉淀杂质滤除，酸化(HCl)滤液，得到靛红中间体4，为固体(12.8g，70％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□ppm 2.09(s，3H)2.27(s，3H)6.89(d，J＝7.58Hz，1H)7.25(d，J＝7.58Hz，1H)11.02(s，1H).
2-(4-氯苄基)-3-羟基-7，8-二甲基-喹啉-4-甲酸(化合物1)在100-2℃下，将中间体4(8.00g，45.67mMol)一次性加入70mL6N KOH，将深色悬浮液搅拌直至得到澄清黄色溶液。
然后在1.5h内，小批量、分次加入过量中间体2(18.63g，82.20mMol，1.8当量)的140mL微温EtOH溶液，同时在100-2℃下搅拌、加热。将反应物温和回流1.5h时间，冷却至室温，在剧烈磁搅拌下，用400mL H2O缓慢稀释。通过极缓慢滴加2.4N HCl将得到的混浊溶液酸化。通过倾析/过滤除去在pH～12形成的棕红色胶状物。在剧烈磁搅拌下，进一步缓慢酸化滤液，最终产生持续黄色沉淀。在pH～6.5-6下，有些粘性沉淀开始妨碍搅拌。加入几滴6N KOH溶解胶状物，将黄色固体过滤分离，用150mL水洗涤。将滤液进一步酸化至pH 0，开始仅得到粘性副产物，然后得到一些未反应的6，7-二甲基靛红。将在pH～6.5得到的固体悬浮于200mL 1N HCl中，在室温下搅拌过夜，过滤收集，用少量水分几次洗涤，通过抽真空部分干燥。通过与3400mL MeCN部分共沸，减压蒸发除去残留水。将残渣在800mL MeCN中搅拌过夜，过滤，在高真空中干燥，得到8.00g(51.2％)化合物1，为淡黄色固体。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)□ppm 2.40(s，3H)2.61(s，3H)4.33(s，2H)7.30-7.37(m，4H)7.39(d，J＝8.55Hz，1H)8.21(d，J＝8.54Hz，1H).
实施例2制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-苯基-喹啉-4-甲酸(化合物2)按以下流程3制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-苯基-喹啉-4-甲酸流程3制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-苯基-喹啉-4-甲酸(化合物2) 中间体52-羟基亚氨基-N-(2-碘-苯基)-乙酰胺按Yang等(J.Am.Chem.Soc.，1996，118，9557)所述方法制备中间体5，和按Marvel和Hiers(Org.Synth.Coll.第I卷，327)所述使靛红环化。将盐酸羟胺(11.4g，0.165mol)和硫酸钠(52g，0.366mol)放入1L圆底烧瓶，加入310mL水、16mL 2M盐酸水溶液和2-碘苯胺(Aldrich，10g，46mmol)。然后加入水合氯醛(9.1g，55mmol)，将混合物在搅拌下、55℃加热过夜。冷却至室温后，过滤收集略微块状沉淀，用水洗涤一次，真空下干燥，得到肟基中间体5，为浅褐色固体(11.0g，83％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□ppm 6.99(t，J＝7.71Hz，1H)7.41(t，1H)7.63(s，1H)7.76(dd，J＝8.08，1.26Hz，1H)7.90(dd，J＝7.83，1.26Hz，1H)9.38(s，1H)12.42(s，1H).
中间体67-碘-1H-吲哚-2，3-二酮进行环化步骤，搅拌下，将中间体5(11.0g，38.0mmol)分次、少量加入30mL浓硫酸中，已在125mL锥形瓶中将该硫酸加热至55℃。将溶液温度保持在70℃以下直至加入所有肟基化合物，然后升至80℃，再保持10分钟。然后将该深色溶液冷却至室温，倾入150mL碎冰上，静置10分钟。将沉淀过滤收集，用水洗涤3次，在真空下干燥，得到靛红6，为纯度足以用于下步反应的深红色粉末(8.30g，80％收率，以2-碘苯胺计为66％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□ppm 6.89(t，J＝7.71Hz，1H)7.50(d，J＝7.33Hz，1H)7.95(d，J＝6.82Hz，1H)11.01(s，1H).
中间体77-苯基-1H-吲哚-2，3-二酮按Lisowski等J.Org.Chem.，2000，65，4193所述方法制备该化合物。向配有回流冷凝器的1L 3颈圆底烧瓶中加入中间体6(2.0g，7.33mmol)和四[三苯膦]合钯(0.424g，0.367mmol)，随后加入225mL 1，2-二甲氧基乙烷。通过连通真空，然后连通正压氮气(3×)使反应容器内气氛成为惰性。加入苯基硼酸(Aldrich，0.983g，8.06mmol)和碳酸氢钠(1.23g，14.7mmol)的225mL水溶液，再重复抽空/氮气过程一次。然后将反应混合物回流，直至t.l.c.(10％乙酸乙酯/二氯甲烷溶液)显示7-碘靛红完全消失(1-2小时)。冷却至室温后，将1，2-二甲氧基乙烷减压除去。将残渣用1M盐酸水溶液稀释，萃取到乙酸乙酯(3×)中。将有机层用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸发，得到粗7-苯基靛红7。
将上述过程再重复8次。使合并的粗产物经硅胶快速层析纯化，用1％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱，得到纯苯基靛红中间体7，为橙色针状结晶(10.94g，以18g 7-碘靛红计收率74％)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□ppm 7.18(t，J＝7.58Hz，1H)7.48(m，6H)7.59(d，J＝8.84Hz，1H)10.91(s，1H).
2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-苯基-喹啉-4-甲酸(化合物2)按Cragoe等J.Org.Chem.，1953，18，561所述方法制备该化合物。在配有回流冷凝器的50mL 2颈圆底烧瓶中，将7-苯基靛红7(0.79g，3.5mmol)悬浮于4mL 6M氢氧化钾水溶液中，加热至100℃。然后在1小时内，通过注射器少量、分批加入中间体2(1.00g，4.41mmol)的4mL热乙醇溶液。加入结束后，再将反应混合物回流4小时。然后将其冷却至室温，将乙醇减压除去。将残渣用20mL水稀释，冷却1/2小时，过滤，用1M盐酸水溶液将滤液酸化至pH 1。将粗酸沉淀过滤收集，经硅胶层析(重力柱，用70乙酸乙酯∶5乙腈∶2.5甲醇∶2.5水[+0.5％三乙胺])纯化，冷冻，得到纯产物，为三乙铵盐。然后将该盐溶于20％乙腈水溶液，将溶液用浓盐酸酸化，萃取到乙酸乙酯(3×)中。将该乙酸乙酯溶液用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，蒸发，冷冻，得到纯酸化合物2，为蓬松亮黄色固体(0.149g，11％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□4.23(s，2H)7.27(m，2H)7.32(m，2H)7.37(m，3H)7.52(m，2H)7.56(dd，J＝7.3，1.5Hz，1H)7.63(m，1H)8.46(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H).
C23H16ClNO3理论值C，70.86；H，4.14；N，3.67。实测值C，70.58；H，4.33；N，3.43。
实施例3制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲基-喹啉-4-甲酸(化合物3)按以下流程4所示制备该化合物。
流程4制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲基-喹啉-4-甲酸(化合物3) 2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲基-喹啉-4-甲酸(化合物3)按上述化合物2的方法合成该化合物，使市售靛红、7-三氟甲基-1H-吲哚-2，3-二酮(1.00g，4.31mmol)与乙酸3-(4-氯苯基)-2-氧代丙基酯(中间体2，1.22g，5.38mmol)反应。在反应期间，酸化后处理不产生固体沉淀，所以通过乙酸乙酯萃取(3×)，将乙酸乙酯溶液用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，蒸发得到粗酸。使该粗产物经硅胶快速层析纯化，用70乙酸乙酯∶5乙腈∶2.5甲醇∶2.5水(+0.5％三乙胺)洗脱，冷冻，得到纯三乙铵盐。为将该盐转化回游离酸形式，将该盐溶于1∶1的乙腈/水中，用浓盐酸酸化，然后用另外的水稀释至20％乙腈水溶液。酸沉淀析出，过滤收集，真空下干燥，得到化合物3的纯产物，为灰白色粉末(0.695g，42％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□4.32(s，2H)7.34(m，4H)7.68(t，1H)7.94(d，J＝7.3Hz，1H)8.83(d，J＝8.6Hz，1H).
C18H11ClF3NO3理论值C，56.64；H，2.90；N，3.67。实测值C，56.47；H，2.73；N，3.53。
实施例4制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲氧基-喹啉-4-甲酸(化合物4)该化合物的制备如以下流程5所示。
流程5制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲氧基-喹啉-4-甲酸(化合物4) 2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲氧基-喹啉-4-甲酸(化合物4)按上述化合物3的方法合成和纯化该化合物，使靛红(7-三氟甲氧基-1H-吲哚-2，3-二酮，1.00g，4.03mmol)与中间体2(1.14g，5.04mmol)反应。得到纯产物，为乳白色粉末(化合物4)，0.264g，16％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□4.33(s，2H)7.33(m，4H)7.56(d，J＝7.8Hz，1H)7.61(t，1H)8.57(dd，J＝8.5，1.4Hz，1H).
C18H11ClF3NO4理论值C，54.36；H，2.79；N，3.52。实测值C，54.12；H，2.75；N，3.33。
实施例5制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-异丙基喹啉-4-甲酸(化合物5)按以下流程6制备该化合物。
流程6制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-异丙基喹啉-4-甲酸(化合物5) 2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-异丙基喹啉-4-甲酸(化合物5)按上述化合物3的方法合成和纯化该化合物，使靛红(7-异丙基-1H-吲哚-2，3-二酮，1.00g，4.85mmol)与中间体2(1.37g，6.06mmol)反应。使经层析和盐酸处理后得到的游离酸在乙腈中重结晶，得到纯产物化合物5，为黄色粉末(0.228g，13％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□1.25(d，J＝7.1Hz，6H)4.11(septet，1H)4.33(s，2H)7.34(s，4H)7.43(dd，J＝7.3，1.0Hz，1H)7.51(m，1H)8.26(dd，J＝8.5，1.4Hz，1H).
C20H18ClNO3理论值C，67.51；H，5.10；N，3.94。实测值C，67.22；H，4.99；N，3.89。
实施例6制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-甲基喹啉-4-甲酸(化合物6)按以下流程7制备该化合物。
流程7制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-甲基喹啉-4-甲酸(化合物6)
2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-甲基喹啉-4-甲酸(化合物6)按上述化合物2的方法合成该化合物，使7-甲基-1H-吲哚-2，3-二酮(1.00g，6.21mmol)与中间体2(1.76g，7.76mmol)反应。按上述化合物3的方法纯化粗酸，得到化合物6，为亮黄色粉末(0.774g，38％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□2.65(s，3H)4.33(s，2H)7.35(m，4H)7.44(m，2H)8.30(dd，J＝8.1，1.3Hz，1H).
实施例7制备2-(4-氯苄基)-8-乙基-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物7)按以下流程8制备该化合物。
流程8制备2-(4-氯苄基)-8-乙基-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物7) 2-(4-氯苄基)-8-乙基-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物7)按上述化合物2的方法合成该化合物，使7-乙基-1H-吲哚-2，3-二酮(1.00g，5.71mmol)与中间体2(1.62g，7.14mmol)反应。按上述化合物3的方法纯化粗酸，得到产物，为亮黄色粉末(化合物7，0.488g，25％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□1.21(t，J＝7.5Hz，3H)3.11(q，J＝7.3Hz，2H)4.32(s，2H)7.34(s，4H)7.40(d，J＝7.1Hz，1H)7.46(t，1H)8.32(d，J＝8.1Hz，1H)；HRMS(ESI+)C19H17ClNO3(MH+)理论值342.0892，实测值342.0890。
实施例8制备7-噻吩-3-基-1H-吲哚-2，3-二酮按以下流程9制备该。
流程9制备7-噻吩-3-基-1H-吲哚-2，3-二酮(化合物8) 中间体87-噻吩-3-基-1H-吲哚-2，3-二酮按Lisowski等J.Org.Chem.，2000，65，4193所述方法，制备该化合物。向配有回流冷凝器的1L 3颈圆底烧瓶中加入中间体6(2.0g，7.3mmol)和四[三苯膦]合钯(0.424g，0.367mmol)，随后加入115mL乙二醇二甲醚。通过连通真空，然后连通正压氮气(3×)使反应容器内气氛成为惰性。随后，加入3-噻吩硼酸(Aldrich，1.03g，8.06mmol)和碳酸氢钠(1.23g，14.7mmol)的115mL水溶液，再重复抽空/氮气过程一次。然后将反应混合物回流，直至t.l.c.(10％乙酸乙酯/二氯甲烷)显示7-碘靛红6完全消失(1-3小时)。冷却至室温后，将有机溶剂减压除去。将残渣用1M盐酸水溶液稀释，萃取到乙酸乙酯(3×)中。将有机层用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸发。使粗产物经硅胶快速层析纯化，用3％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱，得到7-(噻吩-3-基)靛红中间体8，为亮红色结晶物质(0.91g，54％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□7.15(t，1H)7.36(dd，J＝4.9，1.4Hz，1H)7.50(dt，J＝7.3，1.0Hz，1H)7.68(d，J＝1.5Hz，1H)7.71(m，2H)7.75(dd，J＝2.9，1.4Hz，1H)10.86(s，1H).
2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-(噻吩-3-基)喹啉-4-甲酸(化合物8)按上述实施例2方法合成该化合物，使中间体8(0.91g，3.97mmol)与中间体2(1.12g，4.96mmol)反应。按上述化合物3的方法纯化粗酸，得到产物，为亮黄色粉末(化合物8，0.582g，37％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□4.34(s，2H)7.36(dd，4H)7.47(dd，J＝5.1，3.0Hz，1H)7.54(m，1H)7.58(m，1H)7.79(m，2H)8.36(dd，J＝8.5，1.1Hz，1H)；HRMS(ESI/FTMS)C21H15ClNO3S(MH+)理论值396.0456，实测值396.0459。
实施例9制备8-溴-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物9)按以下流程10制备该化合物。
流程10制备8-溴-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物9)8-溴-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物9)按上述化合物2的方法合成该化合物，使7-溴-1H-吲哚-2，3-二酮(1.00g，4.42mmol)与中间体2(1.25g，5.53mmol)反应。按上述化合物3的方法纯化粗酸，然后用乙腈重结晶，得到产物，为大的亮黄色结晶(化合物9，0.398g，23％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□4.35(s，2H)7.35(m，4H)7.46(dd，J＝8.6，7.6Hz，1H)7.92(dd，J＝7.5，1.1Hz，1H)8.50(dd，J＝8.6，1.3Hz，1H)；HRMS(ESI/FTMS)C17H12BrClNO3(MH+)理论值391.9684，实测值391.9689。元素分析C17H11BrClNO3理论值C，52.00；H，2.82；N，3.57。实测值C，51.72；H，2.77；N，3.53。
实施例10制备8-(仲丁基)-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物10)按以下流程11制备该化合物。
流程118-(仲丁基)-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物10)按上述化合物2的方法合成该化合物，使7-仲丁基靛红(1.00g，4.92mmol)与乙酸3-(4-氯苯基)-2-氧代丙基酯(1.39g，6.15mmol)反应。按上述化合物3的方法纯化粗酸，和用盐酸处理三乙铵盐的乙腈/水溶液后，萃取到乙酸乙酯(3×)中，用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，蒸发，冷冻。然后纯化(制备HPLC，用乙腈/水/三乙胺洗脱)，转化回游离酸，再按上述方法萃取并蒸发一次。最后冷冻步骤得到产物化合物10，为蓬松亮黄色固体(72mg，3.9％收率)
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□0.74(t，J＝7.3Hz，3H)1.22(d，J＝6.8Hz，3H)1.61(m，2H)3.91(m，1H)4.32(dd，2H)7.34(m，4H)7.39(d，J＝6.1Hz，1H)7.51(dd，J＝8.6，7.3Hz，1H)8.25(dd，J＝8.3，1.3Hz，1H)；HRMS(ESI/FTMS)C21H21ClNO3(MH+)理论值370.1205，实测值370.1204。元素分析C21H20ClNO3理论值C，68.20；H，5.45；N，3.79。实测值C，67.97；H，5.47；N，3.53。
实施例11制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-6-苯基喹啉-4-甲酸(化合物11)按以下流程12制备该化合物。
流程12制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-6-苯基喹啉-4-甲酸(化合物11) 中间体95-苯基-1H-吲哚-2，3-二酮按上述合成7-(噻吩-3-基)靛红中间体8的方法，使5-碘靛红(2.00g，7.33mmol)与苯基硼酸(0.983g，8.06mmol)反应，直至LC-MS显示5-碘靛红完全消失(2小时)。通过硅胶快速层析(3％乙酸乙酯/二氯甲烷)纯化粗靛红，得到纯中间体9(0.73g，45％收率)
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□7.01(d，J＝8.1Hz，1H)7.36(tt，1H)7.46(t，J＝7.5Hz，2H)7.66(m，2H)7.77(d，J＝2.0Hz，1H)7.91(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)11.13(s，1H).
2-(4-氯苄基)-3-羟基-6-苯基喹啉-4-甲酸(化合物11)按上述合成化合物2的方法，使5-苯基靛红(0.73g，3.3mmol)与乙酸3-(4-氯苯基)-2-氧代丙基酯(0.926g，4.09mmol)反应。然后按上述化合物3的方法将粗酸纯化，得到纯产物，为亮黄色粉末(化合物11，0.181g，14％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□4.35(s，2H)7.36(s，4H)7.43(t，J＝7.3Hz，1H)7.54(t，J＝7.6Hz，2H)7.74(d，J＝7.3Hz，2H)7.87(dd，J＝8.5，1.9Hz，1H)8.01(d，J＝8.6Hz，1H)9.10(br.s，1H).
实施例12制备2-(4-氯苄基)-8-(呋喃-3-基)-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物12)按以下流程13制备该化合物。
流程13制备2-(4-氯苄基)-8-(呋喃-3-基)-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物12)
中间体107-呋喃-3-基-1H-吲哚-2，3-二酮按上述7-(噻吩-3-基)靛红的方法合成该化合物，使7-碘靛红中间体8(2.00g，7.33mmol)与3-呋喃硼酸(0.902g，8.06mmol)反应，直至LC-MS显示7-碘靛红完全消失(2小时)。通过硅胶快速层析(3％乙酸乙酯/二氯甲烷)纯化粗靛红，得到中间体10，其纯度使其足以在下步反应中使用1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□6.90(dd，J＝1.9，0.9Hz，1H)7.14(t，1H)7.48(dt，J＝7.3，1.0Hz，1H)7.72(dd，J＝7.8，1.3Hz，1H)7.83(t，1H)8.12(t，1H)10.76(s，1H).
2-(4-氯苄基)-8-(呋喃-3-基)-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物12)按上述化合物2的方法合成该化合物，使7-(呋喃-3-基)靛红中间体10(0.84g，3.9mmol)与乙酸3-(4-氯苯基)-2-氧代丙基酯中间体2(1.11g，4.91mmol)反应。按上述化合物3的方法将粗酸纯化，得到纯产物，芥末黄色粉末化合物12(0.217g，15％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)□4.40(s，2H)7.09(d，J＝1.8Hz，1H)7.39(q，J＝8.6Hz，4H)7.56(dd，J＝8.46，7.5Hz，1H)7.67(t，J＝1.8Hz，1H)7.84(dd，J＝7.3，1.3Hz，1H)8.07(s，1H)8.30(dd，J＝8.6，1.0Hz，1H).
实施例13制备2-(4-氯苄基)-8-氟-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物13)按以下流程14制备该化合物。
流程14制备2-(4-氯苄基)-8-氟-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物13)
2-(4-氯苄基)-8-氟-3-羟基喹啉-4-甲酸(化合物13)按上述化合物2的方法合成该化合物，使7-氟靛红(1.00g，6.06mmol)与乙酸3-(4-氯苯基)-2-氧代丙基酯中间体2(1.72g，7.57mmol)反应。按上述化合物3的方法将粗酸纯化，然后用乙醇/苯重结晶，得到纯产物，为灰白色粉末化合物13(0.206g，10％收率)1HNMR(400MHz，DMSO-D6)□4.34(s，2H)7.37(m，5H)7.55(m，1H)8.34(d，J＝8.6Hz，1H).
实施例14制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-6-三氟甲氧基-喹啉-4-甲酸(化合物14)按以下流程15制备该化合物。
流程15制备2-(4-氯苄基)-3-羟基-6-三氟甲氧基-喹啉-4-甲酸(化合物14) 2-(4-氯苄基)-3-羟基-6-三氟甲氧基-喹啉-4-甲酸(化合物14)按上述化合物2的方法合成该化合物，使5-三氟甲氧基靛红(1.4g，6.06mmol)与乙酸3-(4-氯苯基)-2-氧代丙基酯中间体2(1.72g，7.57mmol)反应。将粗酸用乙醇重结晶，得到纯产物，为黄色粉末化合物14(1.2g，50％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 4.32(s，2h)7.26-7.40(m，4H)7.47(d，j＝9.09Hz，1H)8.00(d，j＝8.84Hz，1H)8.86(s，1H)。
合成化合物15实施例15制备化合物15中间体112-亚氨基-N-[2-(2，2，2-三氟-1-羟基-1-三氟甲基-乙基)-苯基]-乙酰胺使用Yang等(J.Am.Chem.Soc.，1996，118，9557)所述合成靛红的方法。将水合氯醛(2.4g，14.9mmol)、盐酸羟胺(3.3g，47.8mmol)、硫酸钠(19g，133.8mmol)、2-(2-氨基-苯基)-1，1，1，3，3，3-六氟-丙-2-醇(12.6mmol)、HCl水溶液(10mL，1N)和90mL水的混合物在55℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至25℃。将沉淀过滤，收集，用水洗涤，真空下干燥过夜，得到中间体11，使用时无需进一步纯化。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 7.20-7.29(m，1H)，7.48-7.52(m，2H)，7.58(s，1H)，8.45(m，1H)，10.07(s，1H)，10.67(s，1H)，12.47(s，1H).
中间体127-(2，2，2-三氟-1-羟基-1-三氟甲基-乙基)-1H-吲哚-2，3-二酮在25℃下，将以上中间体11与11mL浓硫酸混合。将得到的溶液逐步加热至85℃，在该温度下保持10min。然后将反应混合物冷却至25℃。加入50mL碎冰，使反应混合物在0℃下保持30min。将沉淀过滤，收集，用水洗涤，真空下干燥过夜，得到靛红12，下步使用时无需进一步纯化。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 7.14-7.33(m，1H)，7.47-7.55(m，1H)，7.60-7.72(m，1H)，9.45(s，1H)，12.48(s，1H).
2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-(2，2，2-三氟-1-羟基-1-三氟甲基-乙基)-喹啉-4-甲酸(化合物15)使用Cragoe等(J.Org.Chem.，1953，18，561)所述方法。在100℃下，在1小时内，向靛红13(3.48mmol)在2mL EtOH和4mL 6M KOH水溶液的混合物中少量、分批加入热乙酸3-(4-氯苯基)-2-氧代丙基酯(0.9g，3.98mmol)的2mL EtOH溶液。加入结束后，将反应混合物再回流1h。除去溶剂，将得到的黄色胶状物用1N HCl水溶液酸化至pH～1。在碱性条件下，使沉淀经HPLC，得到固体，在0℃下，将它用1N HCl水溶液酸化至pH～1。将沉淀离心，收集，用水洗涤，真空下干燥，得到化合物15，为浅褐色固体。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 4.28(s，2H)，7.26-7.42(m，4H)，7.53(d，J＝6.32Hz，1H)，7.53(d，J＝6.44Hz，1H)，9.60(dd，J＝6.32，6.44Hz，1H)，13.22(s，1H).
合成化合物16实施例16制备化合物162-(4-氯苄基)-3-羟基-喹啉-4-甲酸(化合物16)用上述合成化合物15的方法，使靛红和乙酸3-(4-氯苯基)-2-氧代丙基酯反应，得到化合物16，为黄色固体。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 4.36(s，2H)，7.26-7.42(m，5H)，7.51-7.68(m，2H)，7.88-8.02(m，1H)，8.78(bs，1H).
实施例17测定本发明化合物可用任何本领域中已知方法测定本发明化合物的选择蛋白抑制活性。一种方便方法是用Biacore测定抑制P-选择蛋白与P-选择蛋白糖蛋白配体-1(PSGL-1)结合的IC50值。
Biacore 3000是在传感器芯片表面上用表面胞质团共振检测溶液相分析物与固定配体结合的仪器。使用微流体系统将分析物样品在流动下进样。分析物与配体结合导致在传感器芯片上的折射光角度发生改变，通过Biacore仪器测量，以共振单位(RUs)计。
SGP-3是纯化的人PSGL-1的磺基糖肽形式，它含有结合P-选择蛋白的决定物(参见Somers等2000，Cell 103，467-479)。使SGP-3通过胺化学在独特的赖氨酸残基C-末端生物素化，并固定在涂布链霉抗生物素的SA传感器芯片上。将含由凝集素和EGF域(P-LE)组成的可溶性重组截短形式人P-选择蛋白的溶液释放至SGP-3涂布的传感器芯片上。P-LE溶液含100mM HEPES，150mM NaCl，1mMCaCl2，1mM MgCl2，0.05％P40，10％DMSO。用该Biacore测定形式(Somers等，同上)，通常计算出的KD值为约778+/-105nM。
将小分子P-选择蛋白抑制剂在100mM HEPES，150mM NaCl，1mM CaCl2，1mM MgCl2，0.05％P40，10％DMSO中温育1小时，然后将它们加入Biacore 3000中。如果形成可见沉淀，则将溶液过滤。将可溶性P-LE加入终浓度分别为500nM和500μM的小分子溶液中。样品按一式两份上样，将各化合物至少测定两次。
Biacore测定法测量存在抑制剂或不存在抑制剂时，P-LE与SGP-3结合产生的以RU为单位的信号。通过用1-抑制信号/未抑制信号×100计算结合的抑制百分率。用2倍稀释度系列，再次测定500μM时抑制大于50％的抑制剂。用由该滴定得到数据作RU值对浓度的图，通过在图上用外推法确定IC50。在确定抑制百分率和IC50前，所有RU值均为减去空白和对照的值。用在1mM下抑制50％的Glycerrhizzin作阳性对照。
按上述方法测定化合物1-14。这些化合物中有12个的IC50值在125μM-1000μM范围内。一个化合物在1000μM下显示23％抑制，和一个化合物在500μM下未显示抑制。
本专利文件提及的各专利、申请和包括书籍的印刷出版物通过引用整体结合到本文中。本申请要求2003年11月10日提交的美国临时申请顺序号60/518,950的优先权，该临时申请通过引用整体结合到本文中。
如本领域技术人员认识到的那样，本发明优选的实施方案可进行许多变化和修改，而不会背离本发明的宗旨。所有此类改变均将落入本发明范围内。
权利要求
1.一种具有式I的化合物或其药学上可接受的盐 其中L为CO2H、其酯或其药学上可接受的酸类似物；Y为O、(CR3R4)p或NR5；p为1-3；X为氢、OH、OR3、OC1-6烷基、OC(＝O)芳基、OC(＝O)C1-6烷基、OC(＝O)OC1-6烷基或NR3R3′；R1、R2、R3、R3和R4各自独立为氢、C1-6烷基、C1-6全卤烷基、OC1-6烷基、OC1-6全卤烷基、卤素、烷硫基、CN、OH、SH、(CH2)nOSO3H、(CH2)nSO3H、(CH2)nCO2R6、OSO3R6、SO2R6、SO3R6、PO3R6R7、(CH2)nSO2NR8R9、(CH2)nC(＝O)NR8R9、NR8R9、C(＝O)R12、芳基、杂环基、C(＝O)芳基、C(＝O)杂环基、OC(＝O)芳基、OC(＝O)杂环基、O芳基、O杂环基、芳烷基、C(＝O)芳烷基、OC(＝O)芳烷基、O芳烷基、烯基、炔基或NHCOR8，其中任何所述烷基、O烷基、芳基、杂环基、C(＝O)芳基、C(＝O)条环基、O-C(＝O)芳基、O-C(＝O)杂环基、O-芳基、O-杂环基、芳烷基、C(＝O)芳烷基、O-C(＝O)芳烷基、O-芳烷基、烯基或炔基可任选被最多达三个选自卤素、C1-6烷基、OC1-6烷基和CN的相同或不同取代基取代；R6和R7各自独立选自氢和任选被最多达三个选自OH、CF3、SH和卤素的相同或不同取代基取代的C1-6烷基；R5、R8和R9各自独立选自氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、烷硫基、OH、(CH2)1OSO3H、(CH2)ISO3R10、(CH2)nCO2R10、SO3R10、PO3R10R11、(CH2)nSO2(CH2)nNR10R11、(CH2)nCONR10R11、COR10、芳基、杂环基、C(＝O)芳基、C(＝O)杂环基、O-C(＝O)芳基、O-C(＝O)杂环基、O芳基、O杂环基、芳烷基、C(＝O)芳烷基、OC(＝O)芳烷基、O芳烷基、烯基或炔基，其中任何所述烷基、芳基、杂环基、C(＝O)芳基、C(＝O)杂环基、OC(＝O)芳基、OC(＝O)杂环基、O芳基、O杂环基、芳烷基、C(＝O)芳烷基、OC(＝O)芳烷基、O芳烷基、烯基或炔基可任选被最多达三个选自卤素、C1-6烷基、OC1-6烷基和CN的相同或不同取代基取代；各n为独立选自0-6的整数；各I为独立选自1-6的整数；R10和R11各自独立选自氢和任选被最多达三个选自OH、CF3、SH和卤素的相同或不同取代基取代的C1-6烷基；各R12独立为氢、C1-6烷基、C1-6全卤烷基、OC1-6烷基、OC1-6全卤烷基、烷硫基、OH、(CH2)IOSO3H、(CH2)ISO3H、(CH2)ICO2R6、(CH2)ISO2NR8R9、(CH2)IC(＝O)NR8R9、NR8R9、烯基、炔基或NHCOR8，其中任何所述烷基、O烷基、烯基或炔基可任选被最多达三个选自卤素、C1-6烷基、OC1-6烷基和CN的相同或不同取代基取代；和Z为芳基、芳烷基、杂芳基或杂环基，其中所述芳基、芳烷基、杂芳基和杂环基各自任选被取代。
2.权利要求1的化合物，所述化合物具有式II 其中R1、R2、X、Y和Z定义同权利要求1。
3.权利要求1或权利要求2的化合物，其中R1和R2各自独立为氢、C1-6烷基、C1-6全卤烷基、OC1-6烷基、OC1-6全卤烷基、卤素、烷硫基、CN、OH、SH、(CH2)nOSO3H、(CH2)nSO3H、(CH2)nCO2R6、OSO3R6、SO3R6、PO3R6R7、(CH2)nSO2NR8R9、(CH2)nC(＝O)NR8R9、NR8R9、芳基、杂环基、C(＝O)R12、C(＝O)芳基、C(＝O)杂环基、OC(＝O)芳基、OC(＝O)杂环基、O芳基、O杂环基、C(＝O)芳烷基、OC(＝O)芳烷基、O芳烷基、烯基、炔基或NHCOR8。
4.权利要求1或权利要求2的化合物，其中R1和R2独立为H、卤素、OH、CN、SH、C1-6烷基、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基、C1-6烷硫基、芳基或杂芳基；其中所述芳基和所述杂芳基可各自任选被最多达三个选自以下的相同或不同取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、C1-6烷基、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基；和其中所述C1-6烷基、OC1-6烷基和C1-6烷硫基可各自任选被最多达三个选自以下的相同或不同取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基；和。
5.权利要求1或权利要求2的化合物，其中R1和R2独立选自H、C1-6烷基、卤素、芳基、杂芳基和OC1-6烷基，其中所述杂芳基为3-呋喃基或3-噻吩基，且所述芳基为未取代的苯基；和所述C1-6烷基和所述OC1-6烷基可各自任选被最多达三个选自以下的相同或不同取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基。
6.权利要求1或权利要求2的化合物，其中R1和R2独立选自H、甲基和未取代的苯基。
7.权利要求1-6中任一项的化合物，其中R1和R2位于喹啉环的7位和8位。
8.权利要求1或权利要求2的化合物，其中R1位于喹啉环的7位，而R2位于喹啉环的8位；和R1为CH3，R2为CH3，或R1为H，R2为未取代的苯基。
9.权利要求1-8中任一项的化合物，其中Y为CR3R4。
10.权利要求1-8中任一项的化合物，其中Y为CH2。
11.权利要求1-10中任一项的化合物，其中X为OH。
12.权利要求1-10中任一项的化合物，其中Z任选被1-3个选自以下的相同或不同取代基取代卤素、C1-10烷基、-OC1-10烷基、CHO、SO2R20、C(＝O)R20、-SO2R20、苯基、苄基、O苯基、O苄基、SO2NH2、SO2NH(C1-6烷基)、SO2N(C1-6烷基)2、CH2COOH、CO2H、CO2Me、CO2Et、CO2iPr、C(＝O)NH2、C(＝O)NH(C1-6烷基)、C(＝O)N(C1-6烷基)2、OH、SC1-6烷基、OC1-6烷基、NO2、NH2、CF3和CN；其中各R20独立选自C1-10烷基、OC1-10烷基和NR6R7。
13.权利要求1-11中任一项的化合物，其中Z选自(a)含1-3个选自N、S或O的环杂原子的5元杂环；其中所述5元杂环任选被1-3个选自以下的相同或不同取代基取代卤素、C1-10烷基、OC1-10烷基、NO2、NH2、CN、CF3和CO2H；(b)含1-3个选自N、S或O环杂原子的6元杂环；其中所述6元杂环任选被1-3个选自以下的相同或不同取代基取代卤素、C1-10烷基、OC1-10烷基、CHO、CO2H、C(＝O)R20、SO2R20、NO2、NH2、CN、CF3和OH；其中各R20独立选自C1-10烷基、OC1-10烷基和NR6R7；(c)任选含1-3个选自N或O环杂原子的双环部分；其中所述双环部分任选被1-3个选自以下的相同或不同取代基取代卤素、C1-6烷基、OC1-6烷基、CHO、NO2、NH2、CN、CF3、CO2H、C(＝O)R20、SO2R20和OH；和(d)苄基、萘基或苯基环，其中每一个任选被1-3个选自以下的相同或不同取代基取代卤素、C1-6烷基、苯基、苄基、O苯基、O苄基、SO2NH2、SO2NH(C1-6烷基)、SO2N(C1-6烷基)2、CH2COOH、CO2H、CO2Me、CO2Et、CO2iPr、C(＝O)NH2、C(＝O)NH(C1-6烷基)、C(＝O)N(C1-6烷基)2、OH、SC1-6烷基、OC1-6烷基、NO2、NH2、CF3和CN。
14.权利要求1-12中任一项的化合物，其中Z为芳基。
15.权利要求1-11中任一项的化合物，其中Z为R23，其中R23为芳基或杂芳基，其中所述芳基和所述杂芳基可各自任选被最多达三个选自以下的相同或不同取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、C1-6烷基、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基。
16.权利要求1-11中任一项的化合物，其中Z为R23，其中R23为4′-位被卤素、C1-6烷基、SC1-6烷基或OC1-6烷基取代的苯基。
17.权利要求1-11中任一项的化合物，其中Z为R23，其中R23为4′-位被Cl或OCF3取代的苯基。
18.权利要求1的化合物，所述化合物具有式III 其中R21和R22独立为H、卤素、OH、CN、SH、C1-6烷基、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基、C1-6烷硫基、芳基或杂芳基；其中所述芳基和所述杂芳基可各自任选被最多达三个选自以下的取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、C1-6烷基、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基；和其中所述C1-6烷基、OC1-6烷基和C1-6烷硫基可各自任选被最多达三个选自以下的取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基；和R23为芳基或杂芳基，其中所述芳基和所述杂芳基可各自任选被最多达三个选自以下的取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、C1-6烷基、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基。
19.权利要求18的化合物，其中R21和R22独立选自H、C1-6烷基、卤素、芳基、杂芳基和OC1-6烷基，其中所述杂芳基为3-呋喃基或3-噻吩基，且所述芳基为未取代的苯基；和所述C1-6烷基和所述OC1-6烷基可各自任选被最多达三个选自以下的取代基取代卤素、OH、CN、SH、NH2、OC1-6烷基、C1-6全卤烷基和C1-6烷硫基；和R23为4′-位被卤素、C1-6烷基、SC1-6烷基或OC1-6烷基取代的苯基。
20.权利要求18的化合物，其中R21和R22位于喹啉环的7位和8位，并独立选自H、甲基和未取代的苯基；和R23为4′-位被Cl或OCF3取代的苯基。
21.权利要求18的化合物，其中R21位于喹啉环的7位，且R2位于喹啉环的8位；和或者R21为CH3，R22为CH3，且R23为4-氯苯基；或R21为H，R22为未取代的苯基，且R23为4-氯苯基。
22.权利要求1的化合物，所述化合物为2-(4-氯苄基)-3-羟基-7，8-二甲基喹啉-4-甲酸。
23.权利要求1的化合物，所述化合物为2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-苯基喹啉-4-甲酸。
24.权利要求1的化合物，所述化合物选自a)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲基-喹啉-4-甲酸；b)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-三氟甲氧基-喹啉-4-甲酸；c)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-异丙基喹啉-4-甲酸；d)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-甲基喹啉-4-甲酸；e)2-(4-氯苄基)-8-乙基-3-羟基喹啉-4-甲酸；f)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-(噻吩-3-基)喹啉-4-甲酸；g)8-溴-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸；h)8-(仲丁基)-2-(4-氯苄基)-3-羟基喹啉-4-甲酸；i)2-(4-氟苄基)-3-羟基-6-苯基喹啉-4-甲酸；j)2-(4-氯苄基)-8-(呋喃-3-基)-3-羟基喹啉-4-甲酸；k)2-(4-氯苄基)-8-氟-3-羟基喹啉-4-甲酸；l)2-(4-氯苄基)-8-氟-3-羟基喹啉-4-甲酸；m)2-(4-氯苄基)-3-羟基-8-(2，2，2-三氟-1-羟基-1-三氟甲基-乙基)-喹啉-4-甲酸；和n)2-(4-氯苄基)-3-羟基-喹啉-4-甲酸；或其药学上可接受的盐。
25.一种组合物，所述组合物包含权利要求1-24中任一项的化合物或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的载体。
26.一种在哺乳动物中抑制与疾病、障碍、病症或不期望过程有关的选择蛋白介导的胞内粘着的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效量的权利要求1-24中任一项的化合物或其药学上可接受的盐。
27.权利要求26的方法，其中所述疾病、障碍、病症或不期望过程选自炎症、感染、转移、不期望的免疫过程和不期望的血栓形成过程。
28.权利要求26的方法，其中所述疾病、障碍、病症或不期望过程选自动脉粥样硬化、再狭窄、心肌梗塞、Reynauld氏综合征、炎性肠病、骨关节炎、急性呼吸窘迫综合征、哮喘、肺气肿、迟发型过敏反应、热损伤、实验性变应性脑脊髓炎、创伤继发的多发性器官损害综合征、嗜中性白细胞皮肤病(斯威特病)、肾小球肾炎、溃疡性结肠炎、节段性回肠炎、坏死性小肠结肠炎、细胞因子诱发的毒性、龈炎、牙周炎、溶血性尿毒性综合征、银屑病、系统性红斑狼疮、自身免疫性甲状腺炎、多发性硬化、类风湿性关节炎、格雷夫斯病、与血液透析或白细胞提取法治疗有关的免疫介导的副作用、与粒细胞输入有关的综合征、深静脉血栓形成、不稳定型心绞痛、短暂性缺血发作、周围血管性疾病、与癌症有关的转移和充血性心力衰竭。
29.权利要求26的方法，其中所述疾病、障碍、病症或不期望过程为由细菌、病毒或寄生虫介导的不期望的感染性过程。
30.权利要求29的方法，其中所述不期望的感染性过程为龈炎、牙周炎、溶血性尿毒性综合征或粒细胞输入。
31.权利要求26的方法，其中所述疾病、障碍、病症或不期望过程为与癌相关的转移。
32.权利要求26的方法，其中所述疾病、障碍、病症或不期望过程为与选自以下的不期望免疫过程有关的疾病或障碍银屑病、系统性红斑狼疮、自身免疫性甲状腺炎、多发性硬化、类风湿性关节炎、格雷夫斯病和与血液透析或白细胞提取法治疗有关的免疫介导的副作用。
33.权利要求26的方法，其中所述疾病、障碍、病症或不期望过程为与选自以下的不期望的血栓形成过程有关的病症深静脉血栓形成、不稳定型心绞痛、短暂性缺血发作、周围血管性疾病和充血性心力衰竭。
34.一种缓解器官移植中不期望的免疫过程的方法，所述方法包括联合给予所述器官免疫抑制剂和权利要求1-24中任一项的化合物或其药学上可接受的盐。
35.一种制备权利要求1的式I化合物的方法，所述方法包括以下步骤之一a)使下式化合物 其中R1和R2定义同权利要求1，与下式化合物反应 其中Ac为乙酰基，且Y和Z定义同权利要求1，得到相应的式I化合物，其中L为4位的CO2H，且X为3位的OH；或b)将式I化合物转化为其药学上可接受的盐，或反过来，将其药学上可接受的盐转化为式I化合物。
36.一种方法，所述方法包括鉴定具有涉及选择蛋白介导的胞内粘着的疾病或障碍的生物标记的人、哺乳动物或动物；和给予所述人、哺乳动物或动物治疗有效量的权利要求1-24中任一项的化合物或其药学上可接受的盐。
37.权利要求36的方法，其中所述生物标记为一种或多种CD40、CD 40配体、MAC-1、TGFβ、ICAM、VCAM、IL-1、IL-6、IL-8、嗜酸性粒细胞特异性趋化因子、RANTES、MCP-1、PIGF、CRP、SAA和血小板单核细胞聚集体。
全文摘要
本发明涉及抗炎物质领域，更具体地说涉及用作称为选择蛋白的哺乳动物粘着蛋白拮抗剂的新化合物。在一些实施方案中，提供治疗选择蛋白介导的疾病的方法，这类方法包括给予式(I)化合物其中成分变量在本文中定义。
文档编号C07D215/50GK1902179SQ200480039757
公开日2007年1月24日 申请日期2004年11月9日 优先权日2003年11月10日
发明者N·凯拉, S·L·德伯纳多, K·M·詹兹, R·T·坎豪森, P·W·贝达德 申请人:惠氏公司