033] A、植物乳杆菌的活化：
[0034] 量取IOmL质量浓度0.9%的生理盐水于试管内，经121°C灭菌20分钟冷却至 37°C，挑取植物乳杆菌rwh，在无菌状态下接种到0. 9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在 37°C恒温箱中静止活化30分钟，备用；
[0035] B、母发酵剂的制备：
[0036] 取IOOmL MRS培养基于250mL三角瓶内，经121°C灭菌20分钟冷却至37°C，将步 骤一活化后的菌液按体积百分含量10%的比例接种到MRS培养基中，在37°C静止培养24 小时，作为母发酵剂。
[0037] C、生产发酵剂的制备：
[0038] 首先配制200mL质量百分比浓度为10%的脱脂奶乳浊液置于500mL三角瓶内， 121 °C灭菌20分钟，然后冷却至37°C，将步骤二制备的母发酵剂按体积百分含量3%的比例 接种到脱脂奶乳浊液中，37°C静止培养，培养至发酵液活菌数> IO9个/mL，作为生产发酵 剂；
[0039] D、粉末冻干菌种的制备：
[0040] 将步骤三制备的生产发酵剂在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度0. 8?1cm， 加盖瓶塞后放入_30°C冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘盛放，放入冻干机进行冷冻干 燥，制备植物乳杆菌发酵剂冻干粉。其它与【具体实施方式】二相同。
【具体实施方式】 [0041] 四：本实施方式利用上述植物乳杆菌制备果蔬酱的方法，按以下步 骤进行：
[0042] 一、原料选择：选用新鲜、无腐烂且无虫蚀的果蔬，用水清洗；
[0043] 二、打浆：将清洗后的果蔬切成块，用胶体磨磨成浆；
[0044] 三、灭菌：采用142°C 3秒超高温瞬时灭菌机灭菌，冷却至37°C ;
[0045] 四、植物乳杆菌发酵：按果蔬酱中固形物重量的0.020%添加植物乳杆菌发酵剂 冻干粉，37°C厌氧发酵48小时；
[0046] 五、无菌灌装：将发酵好的果蔬酱在无菌条件下包装即为植物乳杆菌发酵果蔬酱。
[0047] 步骤四中植物乳杆菌发酵剂冻干粉的制备方法为：
[0048] A、植物乳杆菌的活化：
[0049] 量取IOmL质量浓度0.9%的生理盐水于试管内，经121°C灭菌20分钟冷却至 37°C，挑取植物乳杆菌rwh，在无菌状态下接种到0. 9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在 37°C恒温箱中静止活化30分钟，备用；
[0050] B、母发酵剂的制备：
[0051] 取IOOmL MRS培养基于250mL三角瓶内，经121°C灭菌20分钟冷却至37°C，将步 骤一活化后的菌液按体积百分含量10%的比例接种到MRS培养基中，在37°C静止培养24 小时，作为母发酵剂。
[0052] C、生产发酵剂的制备：
[0053] 首先配制200mL质量百分比浓度为10%的脱脂奶乳浊液置于500mL三角瓶内， 121 °C灭菌20分钟，然后冷却至37°C，将步骤二制备的母发酵剂按体积百分含量3%的比例 接种到脱脂奶乳浊液中，37°C静止培养，培养至发酵液活菌数> IO9个/mL，作为生产发酵 剂；
[0054] D、粉末冻干菌种的制备：
[0055] 将步骤三制备的生产发酵剂在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度lcm，加盖瓶 塞后放入-30°C冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘盛放，放入冻干机进行冷冻干燥，制备 植物乳杆菌发酵剂冻干粉；
[0056] 为验证本发明的有益效果，进行以下实验：
[0057] ( -）植物乳杆菌对食品中常出现的细菌、酵母菌、霉菌的抑菌率实验
[0058] 抑菌实验：将植物乳杆菌发酵剂冻干粉溶解于0. 9 %生理盐水中，配置一系列不 同浓度的乳酸菌发酵剂的培养基。细菌制成含合适菌落数的菌悬液，接种于平板37 °C培养， 酵母菌和霉菌接种于沙氏液体培养基30°C摇床培养。以含有等量0. 9%生理盐水的培养基 作对照试验，以纯培养基作空白试验，每个浓度试验做2个平行样。
[0059] 抑菌率计算：细菌按稀释分离平板菌落计算法，酵母菌用美兰染色液处理后在显 微镜下直接计算，抑菌率=N0-N1/N0 X 100%，式中NO为空白条件下的细菌数，Nl为植物乳 杆菌发酵剂下的细菌数。霉菌以干中法计算，将三角瓶中的培养液菌体用定量滤纸抽滤收 集后，于105°C烘至恒重，抑菌率=M0-M1/M0X 100%，式中MO为空白条件下的菌体干质量 (g)，Ml植物乳杆菌发酵剂浓度下的菌体干质量（g)。
[0060] 表1植物乳杆菌发酵剂对细菌的抑菌率（％ )
[0061]
【主权项】
1. 一株植物乳杆菌，其特征在于该菌株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum) rwh，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北 辰西路1号院3号，保藏日期为2014年11月28日，保藏编号为CGMCC No. 10075。
2. 利用植物乳杆菌制备果蔬酱的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行： 一、 原料选择：选用新鲜、无腐烂且无虫蚀的果蔬，用水清洗； 二、 打浆：将清洗后的果蔬切成块，用胶体磨磨成浆； 三、 灭菌：采用142°C 3秒超高温瞬时灭菌机灭菌，冷却至37°C ; 四、 植物乳杆菌发酵：按果蔬酱中固形物重量的〇. 020%添加植物乳杆菌发酵剂冻干 粉，37°C厌氧发酵48小时； 五、 无菌灌装：将发酵好的果蔬酱在无菌条件下包装即为植物乳杆菌发酵果蔬酱。
3. 根据权利要求2所述的利用植物乳杆菌制备果蔬酱的方法，其特征在于步骤四中植 物乳杆菌发酵剂冻干粉的制备方法为： A、 植物乳杆菌的活化： 量取IOmL质量浓度0. 9 %的生理盐水于试管内，经121 °C灭菌20分钟冷却至37°C，挑 取植物乳杆菌rwh，在无菌状态下接种到0. 9 %的生理盐水中，震荡使其溶解，在37°C恒温 箱中静止活化30分钟，备用； B、 母发酵剂的制备： 取IOOmL MRS培养基于250mL三角瓶内，经121°C灭菌20分钟冷却至37°C，将步骤一 活化后的菌液按体积百分含量10%的比例接种到MRS培养基中，在37°C静止培养24小时， 作为母发酵剂。 C、 生产发酵剂的制备： 首先配制200mL质量百分比浓度为10%的脱脂奶乳浊液置于500mL三角瓶内，121°C灭 菌20分钟，然后冷却至37°C，将步骤二制备的母发酵剂按体积百分含量3%的比例接种到 脱脂奶乳浊液中，37°C静止培养，培养至发酵液活菌数> IO9个/mL，作为生产发酵剂； D、 粉末冻干菌种的制备： 将步骤三制备的生产发酵剂在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度0. 8?lcm，加盖 瓶塞后放入-30°C冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘盛放，放入冻干机进行冷冻干燥，制 备植物乳杆菌发酵剂冻干粉。
【专利摘要】一株植物乳杆菌及利用该菌株制备果蔬酱的方法，涉及一株植物乳杆菌及果蔬酱的制备方法。本发明提供一株植物乳杆菌及利用该菌株制备果蔬酱的方法，为了解决现有的果蔬酱为保证口感和色泽添加较多的糖、果胶、防腐剂和色素，易对人身体产生危害的问题。该菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2014年11月28日，保藏编号为CGMCC？No.10075。方法：一、原料选择；二、打浆；三、灭菌，冷却；四、植物乳杆菌发酵：添加植物乳杆菌发酵剂冻干粉，厌氧发酵；五、无菌灌装，即为果蔬酱。本发明以植物乳杆菌发酵剂制备果蔬酱，不含糖、果胶、防腐剂和色素，保持原本色彩和口味，富含多酚类化合物和乳酸菌。CGMCC No.1007520141128
【IPC分类】A23L1-24, C12N1-20, A23L1-06, C12R1-25
【公开号】CN104560794
【申请号】CN201410782803
【发明人】高媛, 董艳, 杨庆丽, 刘宇峰, 姬妍茹, 王月明, 张正海, 于宗玄
【申请人】黑龙江省科学院大庆分院
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月16日