氯甲 烷和氯仿是经过氢化钙回流干燥得到。乙酸乙酯，石油醚，正己烷，N，N-二甲基乙酰胺和N，N-二甲基甲酰胺是经无水硫酸钠事先干燥使用。
[0086] 以下反应一般是在氮气或氩气正压下或在无水溶剂上套一干燥管（除非其他方 面表明），反应瓶都塞上合适的橡皮塞，底物通过注射器打入。玻璃器皿都是干燥过的。
[0087] 色谱柱是使用硅胶柱。硅胶（300-400目）购于青岛海洋化工厂。核磁共振光 谱以⑶Cl3,d6-DMS0,ra30D或d6-丙酮为溶剂（报导以ppm为单位），用TMS(Oppm)或氯 仿（7.25ppm)作为参照标准。当出现多重峰的时候，将使用下面的缩写：S(Singlet，单 峰），d(doublet，双峰），t(triplet，三重峰），m(multiplet，多重峰），br(broadened，宽 峰），dd(doubletofdoublets，四重峰），dt(doubletoftriplets，双三重峰）。偶合常 数，用赫兹（Hz)表示。
[0088] 低分辨率质谱（MS)数据通过配备G1312A二元栗和aG1316ATCC(柱温保持在 30°C)的Agilent6320系列LC-MS的光谱仪来测定的，G1329A自动采样器和G1315BDAD 检测器应用于分析，ESI源应用于LC-MS光谱仪。
[0089] 低分辨率质谱（MS)数据通过配备G1311A四元栗和G1316ATCC(柱温保持在 30°C)的Agilent6120系列LC-MS的光谱仪来测定的，G1329A自动采样器和G131?DAD 检测器应用于分析，ESI源应用于LC-MS光谱仪。
[0090] 以上两种光谱仪都配备了AgilentZorbaxSB-C18柱，规格为2. 1X30_，5μm。 注射体积是通过样品浓度来确定；流速为〇· 6mL/min;HPLC的峰值是通过在210nm和254nm 处的UV-Vis波长来记录读取的。流动相为0. 1%的甲酸乙腈溶液（相A)和0. 1%的甲酸 超纯水溶液（相B)。梯度洗脱条件如表1所示：
[0091]表1
[0092]
[0093] 化合物纯化是通过Agilent1100系列高效液相色谱（HPLC)来评价的，其中UV检 测在 210nm和 254nm处，ZorbaxSB-C18 柱，规格为 2. 1X30_，4μm，10 分钟，流速为 0· 6mL/ min，5-95%的（0. 1%甲酸乙腈溶液）的（0. 1%甲酸水溶液），柱温保持在40°C。
[0094] 下面简写词的使用贯穿本发明：
[0095]Me0H，CH30H甲醇
[0096]CH2C12，DCM 二氯甲烷
[0097] THF四氢呋喃
[0098] DMFN，N-二甲基甲酰胺
[0099] DMS0 二甲基亚砜
[0100] TBSC1 叔丁基二甲基氯硅烷
[0101] 合成方案
[0102] 中间体8
[0104] 本发明化合物8可以通过下列合成方法得到：化合物1通过TBSC1保护得到化合 物2,化合物2与乙基3-溴-2-氧代-丙酸乙酯反应成环得到化合物3,化合物3脱保护得 到化合物4,在碱性条件下，通过与苄基溴反应得到化合物5,然后再碱性条件下水解得到 化合物6,化合物6与氨基硫脲反应得到化合物7,然后通过三溴化硼反应得到化合物8。
[0105] 中间体11
[0107] 本发明化合物11可以通过下列合成方法得到：化合物9与二硫化碳反应得到化合 物10,化合物10与苯基（5-(叔丁基）异唑-3-基）氨基甲酸酯在碱性条件下反应得到化 合物11。
[0108] 中间体14
[0109] 本发明化合物14可以通过下列合成方法得到：化合物12与3-(4-吗啉）-1_丙醇 反应得到化合物13,化合物13与三氯氧磷反应，经水淬灭后得到化合物14。
[0113] 本发明化合物4a可以通过下列合成方法得到：化合物la与化合物2a在碱性条件 下反应得到化合物3a，化合物3a与R(CH2)n-Cl反应得到化合物4a。其中，E1、E2、E3、E4、E、 G、η和R具有如本发明所述的含义。
[0114] 合成方案2
[0116] 本发明化合物4a可以通过下列合成方法得到：化合物5a与化合物6a在碱性条件 下反应得到化合物4a。其中，E1、E2、E3、E4、E、G、η和R具有如本发明所述的含义。
[0117] 下面的实施例可以对本发明做进一步的描述，然而，这些实施例不应作为对本发 明的范围的限制。
[0118] 实施例
[0119] 实施例1 :
[0120] 1-(5-(叔丁基）异恶唑-3-基）-3_ (5-(7-(2-吗啉代乙氧基）苯并[d]咪唑并 [2,Ι-b]噻唑-2-基）-1，3, 4-噻二唑-2-基）脲
[0122] 步骤1)6-((叔丁基二甲基甲硅烷基）氧基）苯并[d]噻唑-2-胺
[0123]在氮气保护下，将2-氨基苯并[d]噻唑-6-醇（3. 0g, 18.Ommol)溶于DMF(25mL)， 依次加入咪挫（2.5g,36.Ommol)和TBSC1 (3.3g,21. 7mmol)，混合溶液于室温下搅拌反应过 夜，减压浓缩，加水（100mL)淬灭反应，乙酸乙酯（500mL)萃取，有机相用水（150mL)洗，饱 和氯化钠溶液（l〇〇mL)洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析分离（V(乙酸乙酯）/V(石油 醚）=1/2)，得到白色固体4. 5g，收率89%。
[0124] MS-ESI: (ESI,pos. ion)m/z：281. 1[M+1] +
[0125] 步骤2)乙基7-((叔丁基二甲基甲硅烷基）氧基）苯并[d]咪唑并[2, 1-b]噻 唑-2-羧酸酯
[0126] 在氮气保护下，将6_((叔丁基二甲基甲硅烷基）氧基）苯并[d]噻唑-2-胺 (5.6g,20.Ommol)溶于THF(40mL)，滴加乙基3-溴 _2_ 氧代-丙酸乙酯（3.OmL, 24mmol)，溶 液于室温下反应过夜，然后加无水乙醇（20mL)，加热回流反应6小时，减压浓缩，直接柱层 析分离（V(乙酸乙酯）/V(石油醚）=1/2)，得到白色固体6.3g，收率84%。
[0127] MS-ESI: (ESI,pos. ion)m/z：377. 2[M+1] +
[0128] 步骤3)乙基7-羟基苯并[d]咪唑并[2, 1-b]噻唑-2-羧酸酯
[0129] 将乙基7-((叔丁基二甲基甲硅烷基）氧基）苯并[d]咪唑并[2,Ι-b]噻唑-2-羧 酸酯（4.7g，12. 48mmol)溶于THF(20mL)，冷却到0度，滴加四正丁基氟化铵THF溶液（lmol/ L，20mL)，缓慢恢复到室温搅拌反应30分钟，TLC监测反应已经完全，加饱和氯化铵水溶液 (50mL)淬灭反应，乙酸乙酯（400mL)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩并且充分干燥后直接 用于下一步反应，得到产物2.8g，收率86 %。
[0130] MS-ESI: (ESI,pos. ion)m/z :263.0[M+l] +
[0131] 步骤4)乙基7_(苄氧基）苯并[d]咪唑并[2, 1-b]噻唑-2-羧酸酯
[0132] 将乙基7-羟基苯并[d]咪唑并[2,Ι-b]噻唑-2-羧酸酯（2.15g，8.2mmol)溶于 DMF(30mL)，依次加入碳酸钾（5. 7g，41.2mmol)和苄基溴（2.OmL, 16.8mmol)，溶液加热到45 度搅拌反应2小时，加饱和氯化钠水溶液（100mL)淬灭反应，乙酸乙酯（500mL)萃取，有机 相水（100mL)洗，饱和氯化钠水溶液（100mL)洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析分离 (V(乙酸乙酯）/V(石油醚）=1/2)，得到白色固体2. 5g，收率90%。
[0133] MS-ESI: (ESI,pos. ion)m/z：353. 1[M+1] +
[0134] 步骤5) 7-(苄氧基）苯并[d]咪唑并[2, 1-b]噻唑-2-羧酸
[0135] 将乙基7-(苄氧基）苯并[d]咪唑并[2,Ι-b]噻唑-2-羧酸酯（2. 5g，7. 09mmol) 溶于乙醇和水的混合溶剂（1/1，50mL)，加入氢氧化钠（0. 4g,lOmmol)，溶液加热回流反应1 小时后，TLC监测反应已经完全，减压浓缩，再加水（50mL)稀释，滴加浓盐酸调节溶液的PH =2,乙酸乙酯（500mL)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩并且充分干燥后直接用于下一步 反应，得到产物2. 07g，产率90 %。
[0136]MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z：325. 1[M+1] +
[0137] 步骤6)5-(7-(苄氧基）苯并[d]咪唑并[2, 1-b]噻唑-2-基）-1, 3, 4-噻二 唑-2-胺
[0138] 将7-(苄氧基）苯并[d]咪唑并[2,Ι-b]噻唑-2-羧酸（880mg，2. 7mmol)和氨基 硫脲（371mg，4. 07mmol)加入到烧瓶中，滴加1,4-二氧六环（50mL)和三氯氧磷（10mL)，溶 液加热回流反应2小时后，冰水浴冷却，滴加冰水（20mL)淬灭，然后再加热回流反应2小 时，冰水浴冷却，滴加氢氧化钠溶液（lmol/L，50mL)调节溶液的PH= 10,乙酸乙酯（500mL) 萃取，有机相水（100mL)洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析分离（V(MeOH)/V(DCM)= 1/10)，得到油状物800mg，收率77. 7%。
[0139]MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z：380. 1[M+1] +
[0140] 步骤7) 2-(5-氨基-1，3, 4-噻二唑-2-基）苯并[d]咪唑并[2, 1-b]噻唑-7-醇
[0141] 将5-(7-(苄氧基）苯并[d]咪唑并[2,Ι-b]噻唑-2-基）-1，3,4_噻二唑-2-胺 (800mg, 2.lmmol)溶于无水二氯甲烧（40mL)，冷却到0度，滴加三溴化硼（10mL)，缓慢恢复 到室温搅拌反应5小时，加甲醇（50mL)淬灭反应，减压浓缩并且充分干燥后直接用于下一 步反应，得到产物490mg，产率80 %。
[0142]MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z:290.0[M+l] +
[0143] 步骤8) 1-(5-(叔丁基）异恶唑-3-基）-3-(5-(7-羟基苯并[d]咪唑并[2, 1-b] 噻唑-2-基）-1，3, 4-噻二唑-2-基）脲
[0144] 将2- (5-氨基-1，3, 4-噻二唑-2-基）苯并[d]咪唑并[2,Ι-b]噻唑-7-醇 (490mg, 1. 70mmol)和苯基（5_(叔丁基）异唑-3-基）氨基甲酸酯（1. 05g, 4.lmmol)溶于 无水乙腈（20mL)，滴加三乙胺（2.OmL)，溶液加热回流反应过夜，减压浓缩，直接柱层析分 离以〇^0!1)/￥(001)=1/10)，得到油状物 54211^，收率70%。
[0145]MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z：456. 1[M+1] +
[0146] 步骤9) 1-(5-(叔丁基）异恶唑-3-基）-3-(5-(7-(2-吗啉代乙氧基）苯并[d] 咪唑并[2, 1-b]噻唑-2-基）-1，3, 4-噻二唑-2-基）脲
[0147] 将1-(5-(叔丁基）异恶唑-3-基）-3-(5-(7-羟基苯并[d]咪唑并[2,1-b] 噻唑-2-基）-1，3, 4-噻二唑-2-基）脲（542mg，1.2mmol)和4-(2-氯乙基）吗啉 (450mg, 3.Ommol)溶于DMF(20mL)，加入碳酸钾（690mg, 5.Ommol)，溶液加热到45度搅拌反 应2小时，减压浓缩，直接柱层析分离（V(MeOH)/V(DCM) = 1/10)，得到白色固体478mg，收 率70%。
[0148]MS-ESI: (ESI,pos.ion)m/z：569. 2[M+1] +
[0149] 4NMR(400MHz,CD30D)δ8· 58 (d,J= 9. 1Hz, 1H)，7· 80 (dd,J=