使用极光激酶抑制剂治疗癌症的方法

使用极光激酶抑制剂治疗癌症的方法
【专利摘要】本发明揭示治疗各种细胞增生性病症的方法。本发明具体来说揭示通过投与极光(Aurora)A激酶的选择性抑制剂与基于紫杉烷的化学疗法(例如太平洋紫杉醇(paclitaxel)或多西他赛(docetaxel))的组合来治疗各种细胞增生性病症的方法。
【专利说明】使用极光激酶抑制剂治疗癌症的方法

【技术领域】
[0001] 本发明涉及治疗各种细胞增生性病症的方法。具体来说，本发明提供通过投 与极光（Aurora)A激酶的选择性抑制剂与基于紫杉烷的化学疗法（例如太平洋紫杉醇 (paclitaxel)或多西他赛（docetaxel))的组合来治疗各种细胞增生性病症的方法。

【背景技术】
[0002] 癌症是美国第二最常见死亡原因且在世界范围内占全部死亡人数的八分之 一。在2010年间，美国癌症学会（AmericanCancerSociety)估计仅在美国将诊断出约 1，529, 560例新癌症病例，且估计有569, 490名美国人将死于癌症。在2008年，估计在世界 范围内诊断出12. 4百万例新癌症病例，且有7. 6百万人死于癌症。尽管医学进步已改良癌 症存活率，但仍需要新的且更有效的治疗。
[0003] 癌症的特征在于不受控的细胞繁殖。由于抗有丝分裂剂和抗微管剂在细胞分裂周 期中起重要作用，因此已探索将其作为癌症疗法的靶标。调节从静止到细胞增生的转变的 细胞分裂周期包含四个阶段：G1期、S期（DNA合成）、G2期和M期（有丝分裂）。未分裂细 胞停留在静止期G0。抑制有丝分裂机构导致众多种结果，主要导致细胞死亡或停滞。
[0004] 由于抗有丝分裂剂的效应并不仅限于癌细胞，因此这些药物在临床环境中的剂量 限制性毒性通常体现在快速分裂组织中，且在抗微管剂情形下经常伴随严重的周围神经病 变。因此，抗有丝分裂剂的窄治疗指数使得需要了解这些药物的作用机制以使合理研发这 些疗法的机会最大化。
[0005] 传统抗有丝分裂剂包括直接干扰微管动力学者，所述微管动力学对有丝分裂纺锤 体组装和随后的DNA对齐和分离到子代细胞中至关重要。目前在临床环境中使用抗微管 齐U，例如紫杉烷。举例来说，太平洋紫杉醇和多西他赛具有相似临床活性谱，包括卵巢癌、肺 癌、乳癌、膀胱癌和前列腺癌。
[0006] 紫杉烷通过改变微管解聚合的动力学来稳定微管。在培养物中生长的哺乳动物 细胞中，高浓度的太平洋紫杉醇使聚集的微管稳定（席夫（Schiff)和霍维茨（Horwitz) (1980)美国国家科学院院刊（ProcNatlAcadSciUSA) 77 :1561-1565)。在类似于临床环 境中实现的暴露的较低浓度下，太平洋紫杉醇的主要效应是稳定微管，且因此降低有效纺 锤体组装所需的微管的动态不稳定性。由于此降低，微管不能快速生长和收缩，且其在有丝 分裂期间结合凝集染色体的能力受损。有效染色体对齐由此受影响，且此染色体对齐失败 导致经由纺锤体组装检查点介导的有丝分裂延迟。
[0007] 纺锤体组装检查点确保染色体在细胞分裂后期开始之前适当对齐到中期板，在后 期中姊妹染色单体分离到相对极。有趣的是，在低浓度的太平洋紫杉醇下，已显示出现无效 染色体对齐且未延长有丝分裂停滞，且因此太平洋紫杉醇的效应并不依赖于其诱导有丝分 裂停滞或延迟的能力（陈（Chen)和霍维茨（2002)癌症研究（CancerRes) 62 :1935-1938); 凯林（Kelling)等人（2003)癌症研究 63 :2794-2801)。
[0008] 对于太平洋紫杉醇以及其类似物多西他赛来说，活体外研究已证实，即使在不出 现延长有丝分裂停滞的浓度下，也存在异常DNA含量和细胞死亡（陈和霍维茨（2002)癌 症研究62 :1935-1938 ;埃尔南德斯-瓦格斯（Hernandez-Vargas)等人（2007)细胞周期 (细胞Cycle)6 :780-783 ;埃尔南德斯-瓦格斯等人（2007)细胞周期6 :2662-2668)。与 此发现一致，在异种移植模型中的临床前研究未能证实在有丝分裂停滞程度与肿瘤生长 抑制之间存在明确联系（加恩（Gan)等人（1998)癌症化疗与药理学（CancerChemother Pharmacol)42 :177-182;米尔若斯（Milross)等人（1996)国立癌症研究所杂志（JNatl CancerInst) 88 :1308-1314 ;希明（Schimming)等人（1999)癌症化疗与药理学 43 : 165-172)，且在临床环境中已报导类似发现（西曼斯（Symmans)等人（2000)临床癌症研究 (ClinCancerRes)6 :4610-4617)。
[0009] 已经充分证实，抗有丝分裂化合物损害细胞执行成功分裂的能力。细胞将无法 分裂且有丝分裂停滞延长，从而直接导致细胞死亡；或细胞异常分裂且DNA分配不均（加 斯科因（Gascoigne)和泰勒（Taylor) (2008)癌症细胞（CancerCell) 14 :111-122;里 德（Rieder)和马亚托（Maiato) (2004)发育细胞学（DevCell)7 :637-651;威弗维尔 (Weaver)和克利夫兰（Cleveland) (2005)癌症细胞8 :7-12)。在此失败分裂后，细胞可继续 循环或经历细胞周期停滞或死亡。此在用抗有丝分裂剂治疗后的结果多样性已显示取决于 细胞类型以及所用抗有丝分裂剂的浓度（加斯科因和泰勒（2008)癌症细胞14 :111-122 ; 奥尔特（Orth)等人，（2008)分子癌症治疗学（MolCancerTher) 7 :3480-3489 ;时（Shi)等 人，（2008)癌症研究 68 :3269-3276)。
[0010] 延长的有丝分裂停滞模型表明，抗肿瘤效应需要持续高浓度的药物。使用每周一 次紫杉烷疗法（其与每三周一次紫杉烷疗法的时间表具有相当的功效）的发现表明，拆分 所投与药物的总剂量可获得相同效应。
[0011] 与太平洋紫杉醇和多西他赛相关的毒性类似，且包括作为主要剂量限制性毒性的 嗜中性白血球减少症以及显著周围神经病变。事实上，在经重度预治疗的患者中通常减小 剂量以减轻这些毒性的严重程度。在临床研究中，剂量减小并未减小药剂的临床反应，此表 明最优生物学剂量可能低于最大耐受剂量（萨米宁（Salminen)等人（1999)临床肿瘤学杂 志（JClinOncol) 17:1127)。业内已更常使用每周投与紫杉烷，因为临床数据证实骨髓抑 制降低且临床反应未减小（冈萨雷斯-安古洛（Gonzalez-Angulo)等人（2008)临床肿瘤 学杂志26 :1585)。在乳癌研究中，每周一次太平洋紫杉醇显示比每三周一次给药好的反应 率（塞德曼（Seidman)等人，临床肿瘤学杂志26 :1642 (2008))。然而，每周一次太平洋紫 杉醇已显示比每三周一次时间表严重的神经病变。
[0012] 细胞分裂周期还涉及各种蛋白质激酶，这些激酶在癌细胞中通常过表达。例如， 极光A激酶是参与若干肿瘤类型的发病机制的关键有丝分裂调节剂。极光激酶首先是 在酵母（Ipll)、爪蟾（Xenopus) (Eg2)和果蝇（Drosophila)(极光）中识别，其是有丝 分裂的关键调节剂。（欧洲分子生物学组织期刊（EmboJ) (1998) 17,5627-5637;遗传学 (Genetics) (1993) 135,677-691;细胞（Cell) (1995)81，95-105;细胞科学杂志（JCell Sci) (1998) 111 (Pt5)，557-572)。在人类中，极光激酶存在三种同种型，包括极光A、极光B 和极光C。极光A和极光B通过有丝分裂在细胞的正常进展中发挥关键作用，而极光C的活 性在很大程度上局限于减数分裂细胞。极光A和极光B在结构上密切相关。其催化结构域 位于C-末端，其中二者仅相差几个氨基酸。在其非催化性N-末端结构域中差异较大。极 光A与极光B在此区域中的序列差异使得其与不同蛋白质配偶体相互作用，从而使得这些 激酶可在有丝分裂细胞中具有独特亚细胞定位和功能。
[0013] 尽管极光B激酶和极光A激酶二者均是极光激酶家族的成员，但其在有丝分裂过 程期间具有不同作用。在正常细胞有丝分裂过程中，细胞组织两极纺锤体和两个放射状微 管阵列，每一阵列在一端集中到纺锤体极且在另一端与染色体相连。在姊妹染色单体即将 分离到子代细胞中之前，染色体布置成直线（'中期板'）。此组织两极有丝分裂纺锤体和 完全对齐染色体的过程用于确保细胞的整套染色体在有丝分裂期间的完整性。
[0014] 极光A基因（AURKA)定位于染色体20ql3. 2上，其在众多种肿瘤类型中通常以高 发生率扩增或过表达。（欧洲分子生物学组织期刊（1998) 17,3052-3065 ;国际癌症杂志 (IntJCancer) (2006) 118,357-363 ;细胞生物学杂志（JCellBiol) (2003) 161,267-280 ; 分子癌症治疗学（2007)6,1851-1857;国立癌症研究所杂志（2002)94,1320-1329)。已将 增加的极光A基因表达与癌症的病因学和恶化的预后相关联。（国际肿瘤学杂志（IntJ Oncol) (2004) 25,1631-1639 ;癌症研究（2007) 67,10436-10444 ;临床癌症研究（2004) 10， 2065-2071 ;临床癌症研究（2007) 13,4098-4104 ;国际癌症杂志（2001) 92, 370-373 ; 英国癌症杂志（BrJCancer) (2001) 84,824-831 ;国立癌症研究所杂志（2002) 94， 1320-1329)。此概念已在实验模型中得到支持，从而证实极光A过表达导致致癌转化。 (癌症研究（2002)62,4115-4122 ;分子癌症研究（MolCancerRes) (2009)7,678-688 ;肿 瘤学（Oncogene) (2006)25,7148-7158 ;细胞研究（CellRes) (2006) 16,356-366 ;肿瘤学 (2008)27,4305-4314;自然-遗传学（NatGenet) (1998)20,189-193)。人们怀疑极光A激 酶的过表达导致极光A与其调节配偶体的间的化学计量失衡，从而引起染色体不稳定和后 续转化事件。极光A的潜在致癌作用已使得对靶向此激酶用于治疗癌症相当感兴趣。
[0015] 作为有丝分裂的关键调节剂，极光A在有丝分裂启动和细胞通过有丝分裂正常 进展中具有至关重要的作用。（自然评论：分子细胞生物学（NatRevMolCellBiol) (2003)4,842-854;发育生物学当代课题（CurrTopDevBiol) (2000)49,331-42;自然评 论：分子细胞生物学（2001)2(1)，21-32)。在正常细胞周期期间，极光A激酶首先在G2阶段 表达，其中其定位到中心体且在中心体成熟和分离以及在细胞进入有丝分裂中发挥作用。 在有丝分裂细胞中，极光A激酶主要定位到中心体和初期有丝分裂纺锤体的近端部分。在 此处其与一组不同蛋白质相互作用并将其磷酸化，所述蛋白质在有丝分裂纺锤体极和纺锤 体的形成、纺锤体在着丝点处到姊妹染色单体的附接、随后的染色体对齐和分离、纺锤体组 装检查点和细胞质分裂中共同起作用。（细胞科学杂志（2007) 120,2987-2996;细胞生物 学发展趋势（TrendsCellBiol) (1999)9,454-459;自然评论：分子细胞生物学（2003)4， 842-854 ;细胞生物学发展趋势（2005) 15, 241-250)。
[0016] 尽管选择性抑制极光A激酶导致延迟有丝分裂启动（生物化学期刊（TheJournal ofbiologicalchemistry) (2003) 278, 51786-51795)，但通常细胞尽管具有无活性极光A 激酶却仍进入有丝分裂。已选择性抑制极光A激酶的细胞显示多种有丝分裂缺陷，包括异 常有丝分裂纺锤体（单极或多极纺锤体）和染色体对齐过程中的缺陷。随着时间流逝，单 极和多极纺锤体可分解形成两个相对纺锤体极，但这些缺陷中的一些可经由缺陷型有丝分 裂立即导致细胞死亡。尽管由极光A激酶抑制所致的纺锤体缺陷可能借助活化纺锤体组装 检查点而诱导有丝分裂延迟，但细胞最终以接近未处理细胞的频率分裂。（分子细胞生物学 (2007) 27 (12) ,4513-25 ;细胞周期（2008)7(17),2691-704.;分子癌症治疗学（2009)8(7)， 2046-56.)。此不适当的细胞分裂在由于缺少极光A激酶功能所致的对纺锤体组装检查点 的缓慢作用抑制后出现。（细胞周期（2009) 8 (6)，876-88)。在不存在极光A激酶功能时形 成的两极纺锤体通常显示染色体对齐和分离缺陷，包括中期的染色体集合缺陷、后期的落 后染色体和末期桥。
[0017] 与染色体分离缺陷一致，经极光A激酶的选择性抑制剂MLN8054处理的细胞发生 随时间而增强的非整倍性。在经由缺陷型有丝分裂反复继代后，经MLN8054处理的细胞通 常将经历衰老，即具有独特形态学特征的不可逆生长停滞。（分子癌症研究（2010)8(3)， 373-84)。在一些细胞系中，MLN8054处理的细胞退出有丝分裂并活化p53依赖性有丝分裂 后Gl检查点，其随后诱导p21和Bax，从而导致Gl停滞且随后诱导细胞凋亡。（分子癌症治 疗学（Mol.CancerTher) (2009) 8 (7)，2046-56)。一些细胞也可退出有丝分裂而不发生细胞 质分裂。这些细胞进入细胞周期的Gl期且正常DNA含量倍增，且因此称作Gl四倍体细胞。 最后，一些细胞可分裂，但却伴随严重的染色体分裂缺陷（分子细胞生物学（2007)27(12)， 4513-25)。在后两种结果中，异常有丝分裂导致引起细胞死亡或停滞的有害的非整倍性。或 者，这些细胞中的一部分可耐受这些最终结果并再次进入细胞周期，因为已证实非整倍性 是肿瘤细胞生长的抑制剂也是其促进剂。
[0018] 考虑到参与驱动细胞周期的蛋白质激酶的重要性，如果可研发出靶向这些激酶的 更有效治疗方案将是有益的。具体来说，与抗有丝分裂剂组合的治疗方案可有助于患有细 胞增生性病症的患者，且甚至有可能降低复发率或克服有时在这些患者中观察到的对特定 抗癌剂的抗性。
[0019] 药物耐受性和副作用的盛行率在编制用于治疗细胞增生性病症的剂量和时间表 选择中是重要考虑因素。举例来说，需要使用导致严重不良事件（例如嗜中性白血球减少 症）的治疗剂（例如紫杉烷）的治疗可由于患者顺应性不足或由于无法向患者投与有效治 疗剂量而无效。类似地，在较长时段中产生活性成份的较高有效浓度的治疗可提供增加的 治疗功效。因此，业内需要新颖癌症治疗方案（包括组合疗法），其避免或改善因毒性导致 的严重副作用，同时通过实现改良的暴露功效来提供增加的治疗功效。

【专利附图】

【附图说明】
[0020] 图1显示阿立塞替（alisertib)与太平洋紫杉醇的组合在NCI-H69小细胞肺癌肿 瘤模型中的抗肿瘤活性（平均肿瘤体积随时间的变化）。
[0021] 图2显示阿立塞替与太平洋紫杉醇的组合在NCI-H82小细胞肺癌肿瘤模型中的抗 肿瘤活性（平均肿瘤体积随时间的变化）。
[0022] 图3显示阿立塞替与太平洋紫杉醇的组合在CTG-0166原发性小细胞肺癌肿瘤模 型中的抗肿瘤活性（平均肿瘤体积随时间的变化）。

【具体实施方式】
[0023] 1.一般说明
[0024] 如上文所论述，业内仍需要提供用于治疗癌症的替代性疗法，尤其那些避免或改 善现有疗法的严重副作用者。尽管极光A激酶的选择性抑制剂与紫杉烷的组合已显示加性 和协同性抗肿瘤活性，但嗜中性白血球减少症仍是常见剂量限制性毒性。
[0025] 本
【发明者】已发现，将标准每周太平洋紫杉醇剂量从约80mg/m2降低到约60mg/m2允 许实现显著较高的阿立塞替（MLN8237)剂量，且具有可接受的耐受性特征而不损失功效。 约IOmg BID(每天两次）的阿立塞替剂量是可与约80mg/m2太平洋紫杉醇的标准每周剂量 组合实现的最大耐受剂量。意外的是，在将每周太平洋紫杉醇剂量降低到约60mg/m2时，可 耐受高达约40mg BID的更高的阿立塞替剂量与太平洋紫杉醇的组合。
[0026] 因此，本发明涉及治疗细胞增生性病症的方法，其包含向有需要的患者投与极光A 激酶的选择性抑制剂且同时或依序投与紫杉烷（例如太平洋紫杉醇或多西他赛），其中每 一药剂的量在组合使用时是治疗有效的。
[0027] 2.定义
[0028] 如本文所用，术语"细胞增生性病症"和"癌症"是指以以下为特征的细胞病症：不 受控制或失调的细胞增生、降低的细胞分化、侵入周围组织和/或在异位位点建立新生长 的不适当能力。术语"细胞增生性病症"和"癌症"包括（但不限于）实体肿瘤和血源性肿 瘤。术语"细胞增生性病症"和"癌症"涵盖皮肤、组织、器官、骨、软骨、血液和血管的疾病。 术语"细胞增生性病症"和"癌症"进一步涵盖原发性和转移性癌症。如本文所用，术语"细 胞增生性病症"包括（但不限于）癌性过度增生性病症（例如，脑癌、肺癌、鳞状细胞癌、 膀胱癌、胃癌、胰脏癌、乳癌、头癌、颈癌、肾脏癌症、肝癌、肾癌、卵巢癌、前列腺癌、结肠直肠 癌、结肠癌、表皮样癌、食道癌、睾丸癌、妇科癌症或甲状腺癌、急性骨髓性白血病、多发性骨 髓瘤、间皮瘤、非小细胞肺癌（NSCLC)、神经母细胞瘤和急性淋巴细胞性白血病（ALL));非 癌性过度增生性病症（例如，皮肤的良性增生（例如，牛皮癣）、再狭窄和良性前列腺肥大 (BPH));和与血管发生或血管生成相关的疾病（例如，肿瘤血管生成、血管瘤、神经胶质瘤、 黑色素瘤、卡波西氏肉瘤（Kaposi'ssarcoma)和卵巢癌、乳癌、肺癌、胰脏癌、前列腺癌、结 肠癌和表皮样癌）。
[0029] 如本文所用，术语"患者"意指动物，优选地哺乳动物，且最优选地人类。在一些实 施例中，患者在根据本发明方法开始治疗之前已经药剂（例如，极光A激酶选择性抑制剂或 紫杉烷）治疗。在一些实施例中，患者是具有发生或经历增生性病症复发的风险的患者。
[0030] 表述"治疗有效的"和"治疗效应"是指包括（但不限于）对本文所论述的增生 性病症的症状的治疗或改善的益处。应了解，药剂的治疗有效量或提供治疗效应所需的量 将视预期应用（活体外或活体内）或所治疗的个体和疾病状况（例如，待治疗病况的严重 性、特定抑制剂、投与途径以及个别患者的年龄、体重、一般健康情况和反应）而变化，其可 由所属领域的技术人员容易地确定。举例来说，与一定量的紫杉烷组合的极光A激酶的选 择性抑制剂的量如果足以实现治疗或改善本文所论述增生性病症的症状，那么是治疗有效 的。
[0031] 表述"预防有效的"和"预防效应"是指包括（但不限于）对本文所论述增生性病症 的症状的预防的益处。应了解，药剂的预防有效量或提供预防效应所需的量将视预期应用 (活体外或活体内）或所预防个体和疾病状况（例如，待预防病况的严重性、特定抑制剂、投 与途径以及个别患者的年龄、体重、一般健康情况和反应）而变化，其可由所属领域的技术 人员容易地确定。举例来说，与一定量的紫杉烷组合的极光A激酶的选择性抑制剂的量如 果足以实现本文所论述增生性病症的症状的预防，那么是预防有效的。
[0032] 如本文所用，术语"极光A激酶"是指参与有丝分裂进展的丝氨酸/苏氨酸激酶。 极光A激酶还称作AIK、ARK1、AURA、BTAK、STK6、STK7、STK15、极光 2、MGC34538 和AURKA。 众多种在细胞分裂中发挥作用的细胞蛋白质是极光A激酶的磷酸化底物，包括（但不限于） p53、TPX-2、XIEg5(在爪蟾中）和D-TACC(在果蝇中）。极光A激酶本身也是自身磷酸化 (例如在Thr288)的底物。优选地，极光A激酶是人类极光A激酶。
[0033] 术语"极光A激酶的抑制剂"或"极光A激酶抑制剂"用于表示能与极光A激酶相 互作用并抑制其酶活性的化合物。抑制极光A激酶酶活性意指降低极光A激酶磷酸化底物 肽或蛋白质的能力。在不同实施例中，极光A激酶活性的所述降低是至少约75%、至少约 90 %、至少约95 %或至少约99 %。在不同实施例中，降低极光A激酶酶活性所需极光A激酶 抑制剂的浓度低于约1μM、低于约500nM、低于约IOOnM或低于约50nM。优选地，抑制极光 A激酶酶活性所需浓度低于抑制极光B激酶酶活性所需的抑制剂浓度。在各种实施例中，降 低极光A激酶酶活性所需极光A激酶抑制剂的浓度是降低极光B激酶酶活性所需抑制剂浓 度的至多约2分之一、至多约5分之一、至多约10分之一、至多约20分之一、至多约50分 之一、至多约100分之一、至多约500分之一或至多约1000分之一。
[0034] 抑制极光A和抑制极光B产生显著不同的细胞表现型。（国家科学院院刊 (2007) 104 :4106;分子癌症治疗学（2009) 8 (7)，2046-56;生物化学杂志（ChemBiol.) (2008) 15 ￠) 552-62)。举例来说，在不存在极光B抑制时抑制极光A导致有丝分裂指数增 力口，如通过量化丝氨酸10上的磷酸化组蛋白H3 (pHisH3)所测量。pHisH3是极光B在生理 学系统（例如完整细胞）中的唯一底物。与之相比，抑制极光B或双重抑制极光A和极光 B使pHisH3减少。因此，如本文所用，术语"极光A激酶的选择性抑制剂"或"选择性极光A 激酶抑制剂"是指在有效抗肿瘤浓度下展现极光A激酶抑制剂表现型的抑制剂。在一些实 施例中，在以血浆中的游离部分调节浓度（CaJ等效于以最大耐受剂量（MTD)在人类血浆 中实现的游离部分调节浓度的剂量投与小鼠时，选择性极光A激酶抑制剂引起瞬时有丝分 裂延迟，如通过量化pHisH3所测量。如本文所用，"游离部分调节浓度"是指游离药物（未 结合蛋白质）的血浆浓度。
[0035] 如本文所用，术语"紫杉烷"是指一类由紫杉属（TaxuS(红豆杉））植物产生的二 萜。紫杉烷的实例包括（但不限于）太平洋紫杉醇(TAXOL?)、多西他赛(TAXOTERE?) 和ABRAXANE? (太平洋紫杉醇注射剂）。
[0036] 如本文所用，术语"组合"是指在治疗同一患者的同一疾病或病况中使用选择性极 光A激酶抑制剂和紫杉烷二者。如下文进一步描述，除非明确指明，否则术语"组合"不限 制投与选择性极光A激酶抑制剂或紫杉烷的定时。
[0037] 如本文所用，术语"约（about) "意指大约（approximately)、在......的附近（in theregionof)、大概（roughly)或大约（around)。在术语"约"结合数值范围使用时，其 通过将边界扩展到高于和低于所述数值来修饰此范围。通常，本文使用术语"约"将数值修 饰为高于和低于所述数值10%的变化。
[0038] 如本文所用，术语"包含"意指"包括（但不限于）"。
[0039] 如本文所用，术语"脂肪族"或"脂肪族基团"意指经取代或未经取代的直链、具支 链或环状CV12烃，其完全饱和或其含有一或多个不饱和单元但其不为芳香族。举例来说，适 宜脂肪族基团包括经取代或未经取代的直链、具支链或环状烷基、烯基、炔基和其杂合体， 例如（环烧基）烧基、（环稀基）烧基或（环烧基）稀基。
[0040] 单独或作为更大部分中的一部分使用的术语"环脂肪族"是指具有3元到约14元 的饱和或部分不饱和环状脂肪族环系统，其中所述脂肪族环系统任选经取代。在一些实施 例中，环脂肪族是具有3-8个或3-6个环碳原子的单环烃。非限制性实例包括环丙基、环丁 基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基、环庚烯基、环辛基、环辛烯基和环辛二烯 基。在一些实施例中，环脂肪族是具有6-12个、6-10个或6-8个环碳原子的桥接或稠合二 环烃，其中所述二环环系统中的任一个别环具有3-8个成员。
[0041] 在一些实施例中，环脂肪族环上的两个相邻取代基连同中间环原子一起形成具有 0-3个选自由0、N和S组成的群组的环杂原子的任选经取代的稠合5元到6元芳香族环或3 元到8元非芳香族环。因此，术语"环脂肪族"包括稠合到一或多个芳基、杂芳基或杂环基环 的脂肪族环。非限制性实例包括二氢茚基、5,6, 7,8-四氢喹喏啉基、十氢萘基或四氢萘基， 其中所述基团或附接点位于脂肪族环上。术语"环脂肪族"可与术语"碳环（carbocycle)"、 "碳环基（carbocyclyl)"、"碳环（carbocyclo)"或"碳环（carbocyclic)"互换使用。
[0042] 单独或作为更大部分中的一部分使用的术语"芳基"和"芳（例如"芳烷基"、"芳 烷氧基"或"芳氧基烷基"）是指包含1到3个环的C6到C14芳香族烃，每一环任选经取代。 优选地，芳基是C6_1(l芳基。芳基包括（但不限于）苯基、萘基和蒽基。在一些实施例中，芳 基环上的两个相邻取代基连同中间环原子一起形成具有0-3个选自由0、N和S组成的群组 的环杂原子的任选经取代的稠合5元到6元芳香族环或4元到8元非芳香族环。因此，如本 文所用，术语"芳基"包括芳香族环稠合到一或多个杂芳基、环脂肪族或杂环基环的基团，其 中所述基团或附接点位于芳香族环上。所述稠合环系统的非限制性实例包括吲哚基、异吲 哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、 异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喏啉基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩恶嗪 基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、芴基、二氢茚基、菲啶基、四氢萘基、吲哚啉基、吩恶嗪基、苯 并二恶烷基和苯并间二氧杂环戊烯基。芳基可为单环、二环、三环或多环，优选为单环、二环 或三环，更优选为单环或二环。术语"芳基"可与术语"芳基"、"芳基部分"和"芳基环"互换 使用。
[0043] "芳烷基"或"芳基烷基"包含共价附接到烷基的芳基，此二者中的任一者独立地任 选经取代。优选地，芳烷基是c6_1(l芳基（CV6)烷基、c6_1(l芳基（Cp4)烷基或c6_1(l芳基（CV3) 烧基，包括（但不限于）节基、苯乙基和奈基甲基。
[0044] 单独或作为更大部分中的一部分使用的术语"杂芳基"和"杂芳（例如，杂芳烷 基或"杂芳烷氧基"）是指具有5到14个环原子、优选5、6、9或10个环原子的基团；其具 有6、10或14个以环状阵列共享的π电子，且除碳原子外具有1到4个杂原子。术语"杂 原子"是指氮、氧或硫，且包括氮或硫的任何氧化形式以及碱性氮的任何季铵化形式。杂芳 基包括（但不限于）噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、恶唑基、异恶 唑基、恶二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲嗪基、嘌 呤基、萘啶基和蝶啶基。在一些实施例中，杂芳基上的两个相邻取代基连同中间环原子一起 形成具有0-3个选自由0、Ν和S组成的群组的环杂原子的任选经取代的稠合5元到6元芳 香族环或4元到8元非芳香族环。因此本文所用，术语"杂芳基"和"杂芳亦包括杂芳香 族环稠合到一或多个芳基、环脂肪族或杂环基环的基团，其中所述基团或附接点位于杂芳 香族环上。非限制性实例包括吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、 吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喏啉基、 4H-喹嗪基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩恶嗪基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基和吡 啶并[2,3-b]-l，4-恶嗪-3(4H)_酮。杂芳基可为单环、二环、三环或多环，优选为单环、二 环或三环，更优选为单环或二环。术语"杂芳基"可与术语"杂芳基环"、"杂芳基"或"杂芳 香族"互换使用，所述术语中的任一者包括任选经取代的环。术语"杂芳烷基"是指经杂芳 基取代的烷基，其中烷基和杂芳基部分独立地任选经取代。
[0045] 如本文所用，术语"杂环"、"杂环基"、"杂环基团"和"杂环环"可互换使用且是指稳 定3元到7元单环或稠合7元到10元或桥接6元到10元二环杂环部分，其饱和或部分不 饱和且除碳原子外具有一或多个、优选到4个如上文所定义的杂原子。在提及杂环的环原 子使用时，术语"氮"包括经取代的氮。作为实例，在具有1-3个选自氧、硫或氮的杂原子的 杂环基环中，氮可为N(如在3,4-二氢-2H-吡咯基中）、NH(如在吡咯烷基中）或+NR(如 在N-经取代吡咯烷基中）。杂环环可在产生稳定结构的任一杂原子或碳原子处附接到其 侧基，且任一环原子可任选经取代。所述饱和或部分不饱和杂环基团的实例包括（但不限 于）四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、哌啶基、吡咯啉基、四氢喹啉基、四氢 异喧琳基、十氧喧琳基、恶卩坐烧基、脈嚷基、-恶烧基、_氧戊环基、-氣呼基、氧氣呼基、硫 氣呼基、吗琳基和査宁环基。
[0046] 在一些实施例中，杂环环上的两个相邻取代基连同中间环原子一起形成具有0-3 个选自由〇、N和S组成的群组的环杂原子的任选经取代的稠合5元到6元芳香族环或3元 到8元非芳香族环。因此，术语"杂环"、"杂环基"、"杂环基环"、"杂环基"、"杂环部分"和 "杂环基团"在本文中可互换使用且包括杂环基环稠合到一或多个芳基、杂芳基或环脂肪族 环的基团，例如吲哚啉基、3H-吲哚基、色满基、菲啶基或四氢喹啉基，其中所述基团或附接 点位于杂环基环上。杂环基可为单环、二环、三环或多环，优选为单环、二环或三环，更优选 为单环或二环。术语"杂环基烷基"是指经杂环基取代的烷基，其中烷基和杂环基部分独立 地任选经取代。
[0047] 如本文所用，术语"部分不饱和"是指在环原子之间包括至少一个双键或三键的环 部分。术语"部分不饱和"打算涵盖具有多个不饱和位点的环，但不打算包括如本文所定义 的芳基或杂芳基部分。
[0048]术语"卤代脂肪族"、"卤代烷基"、"卤代烯基"和"卤代烷氧基"是指任选地经一或 多个卤素原子取代的脂肪族基团、烷基、烯基或烷氧基。如本文所用，术语"卤素"或"卤基" 意指F、Cl、Br或I。术语"氟代脂肪族"是指卤素为氟的卤代脂肪族。
[0049] 术语"亚烷基"是指二价烷基。"亚烷基链"是聚亚甲基，即-(CH2)n-,其中η是正 整数，优选1到6、1到4、1到3、1到2或2到3。经取代亚烷基链是一或多个亚甲基氢原子 经取代基替代的聚亚甲基。适宜取代基包括下文针对经取代脂肪族基团描述的那些。亚烷 基链也可在一或多个位置经脂肪族基团或经取代脂肪族基团取代。
[0050] 如本文所用，术语"经取代"意指指定部分的氢基经特定取代基的基团替代，前提 是取代产生稳定或化学上可行的化合物。本文所用片语"一或多个取代基"是指取代基的 数目等于1到基于可用键结位点的数目可能的最大取代基数目，前提是满足上述稳定性和 化学可行性条件。除非另外指明，否则任选经取代的基团可在基团的每一可取代位置具有 取代基，且取代基可相同或不同。
[0051] 芳基（包括芳烷基、芳烷氧基、芳氧基烷基等中的芳基部分）或杂芳基（包 括杂芳烷基和杂芳烷氧基等中的杂芳基部分）可含有一或多个取代基。芳基或杂 芳基的不饱和碳原子上的适宜取代基的实例包括-卤基、-N02、-CN、-R*、-C(R*)= C(R*)2、-CEc-R*、-OR*、-SR。、-S(O)R。、-S02R。、-S03R。、-SO2N(R+)2、-N(R+)2、-NR+C(O) R*、-NR+C(O)N(R+) 2、-NR+C02R。、-O-CO2R*、-OC(O)N(R+) 2、-O-C(0)R*、-CO2R*、-C(O)-C(O) R*、-C(0)R*、-C(0)N(R+)2、-C(0)N(R+)C( =NR+)-N(R+)2、-N(R+)C( =NR+)-N(R+)-C(0) R*、-C( =NR+)-N(R+)2、-C( =NR+) -OR*、-N(R+)-N(R+)2、-N(R+)C( =NR+)-N(R+) 2、-NR+SO2R0 、-NR+SO2N(R+)2、-P(0) (R*)2、-P(0) (OR*) 2、-O-P(0) -OR* 和-P(0) (NR+)-N(R+) 2 ;或两个相邻 取代基连同其中间原子一起形成具有0-3个选自由N、0和S组成的群组的环原子的5-6元 不饱和或部分不饱和环。
[0052] 芳基（包括芳烷基、芳烷氧基、芳氧基烷基等中的芳基部分）或杂芳基（包 括杂芳烷基和杂芳烷氧基等中的杂芳基部分）可含有一或多个取代基。芳基或杂 芳基的不饱和碳原子上的适宜取代基的实例包括-卤基、-N0 2、-CN、-R*、_C(R*)= C(R*)2、-C E c-R*、-OR*、-SR。、-S(O)R。、-S02R。、-S03R。、-SO2N(R +)2、-N(R+)2、-NR+C(O) R*、-NR +C (O)N (R+) 2、-NR+C02R。、-O-CO2R*、-OC (O)N (R+) 2、-O-C (0)R*、-CO2R*、-C(O)-C(O) R*、-C (0) R*、-C (0) N (R+) 2、-C (0) N (R+) C ( = NR+) -N (R+) 2、-N (R+) C ( = NR+) -N (R+) -C (0) R*、-C ( = NR+) -N (R+) 2、-C ( = NR+) -OR*、-N (R+) -N (R+) 2、-N (R+) C ( = NR+) -N (R+) 2、-NR+SO2R0 、-NR+SO2N (R+) 2、-P (0) (R*) 2、-P (0) (OR*) 2、-O-P (0) -OR* 和-P (0) (NR+) -N (R+) 2 ;或两个相邻 取代基连同其中间原子一起形成具有0-3个选自由N、0和S组成的群组的环原子的5-6元 不饱和或部分不饱和环。
[0053] 每一 R+独立地为氢或任选经取代的脂肪族基团、芳基、杂芳基或杂环基，或同一氮 原子上的两个R+连同所述氮原子一起形成除所述氮原子外具有0-2个选自N、0和S的环 杂原子的5-8元芳香族或非芳香族环。每一 R*独立地为氢或任选经取代的脂肪族基团、芳 基、杂芳基或杂环基。每一 R°是任选经取代的脂肪族或芳基。
[0054] 脂肪族基团或非芳香族杂环可经一或多个取代基取代。脂肪族基团或非芳香族杂 环的饱和碳上的适宜取代基的实例包括（但不限于）上文针对芳基或杂芳基的不饱和碳列 示的那些和以下：=〇、= S、= C(R*)2、= N-N(R*)2、= N-0R*、= N-NHC(0)R*、= N-NHCO2R' =N-NHSO2R。或=N-R*，其中每一 R*和R°如上文所定义。
[0055] 非芳香族杂环的氮原子上的适宜取代基包括-R*、-N (R*)2、-C(O) R*、-CO2R*、-C (O)-C (0)R*、-C (O)CH2C (0)R*、-SO2R*、-SO2N (R*)2、-C ( = S) N (R*)2、-C (= NH)-N(R*)2和-NR*S02R* ;其中每一 R*如上文所定义。
[0056] 除非另有说明，否则本文所绘示结构打算包括不同之处仅在于存在一或多个同位 素富集原子的化合物。举例来说，具有本发明结构但氢原子经氘或氚替代或碳原子经 13C或 14C富集碳替代的化合物在本发明范围内。
[0057] 所属领域的技术人员应了解，本文所述的某些化合物可以互变异构形式存在，所 述化合物的所有所述互变异构形式均在本发明范围内。除非另有说明，否则本文所绘示结 构也打算包括所述结构的所有立体化学形式；即每一不对称中心的R和S构型。因此，本发 明化合物的单一立体化学异构物以及镜像异构和非镜像异构混合物在本发明范围内。
[0058] 3.【具体实施方式】
[0059] 极光A激酶的选择性抑制剂
[0060] 在本发明的方法、医药组合物和试剂盒中可使用任何能选择性抑制极光A激酶 酶活性的分子。在一些实施例中，选择性极光A激酶抑制剂是小分子量化合物。具体来 说，极光A激酶的选择性抑制剂包括本文所述的化合物以及诸如以下中所揭示的化合物： 美国公开案第 2008/0045501 号、美国专利第 7, 572, 784 号、TO05/111039、TO08/021038、 美国专利第7, 718, 648号、W008/063525、美国公开案第2008/0167292号、美国专利第 8, 026, 246 号、TO10/134965、美国公开案第 2010/0310651 号、TO11/014248、美国公开案 第2011/0039826号和美国公开案第2011/0245234号，每一者以全文引用的方式并入本 文中；4_{[9_氯-7-(2-氟-6-甲氧基苯基）-5H-嘧啶并[5,4-d][2]苯并氮呼-2-基] 氨基}-2_甲氧基苯甲酸钠、KW-2449(日本共和（Kyowa))、ENMD-2076(英创远达公司 (EntreMed))和MK-5108(威泰克斯（Vertex)/默克公司（Merck))。这些化合物中任一者 的溶剂化和水合形式也适用于本发明的方法、医药组合物和试剂盒中。所述化合物中任一 者的医药上可接受的盐和所述盐的溶剂化和水合形式也适用于本发明的方法、医药组合物 和试剂盒中。这些选择性极光A激酶抑制剂可以有机合成领域的技术人员熟知的多种方式 来制备，包括（但不限于）本文所提及的参考文献中详细描述的合成方法。
[0061] 可在活体外或活体内分析极光A激酶抑制剂的选择性结合和/或抑制极光A激酶 的能力。活体外分析包括用以测定对极光A激酶磷酸化底物蛋白或肽的能力的选择性抑制 的分析。替代性活体外分析量化化合物选择性结合极光A激酶的能力。选择性抑制剂结合 可通过在结合之前对抑制剂进行放射性标记、分离抑制剂/极光A激酶复合物和测定所结 合放射性标记的量来测量。或者，选择性抑制剂结合可通过运行竞争性实验来测定，其中将 新抑制剂与结合到已知放射性配体的极光A激酶一起培育。也可分析化合物影响由极光A 激酶活性介导的细胞或生理学功能的能力。为评价对极光A激酶相对于极光B激酶的选择 性，也可使用类似于上文针对极光A激酶所述的分析的分析在活体外和活体内分析抑制剂 选择性结合和/或抑制极光B激酶的能力。可在活体外和活体内通过对pHisH3的免疫荧 光检测来分析抑制剂在不存在极光B激酶抑制时抑制极光A激酶的能力。（国家科学院院 刊（2007) 104,4106)。对这些活性中每一者的分析均是业内已知的。
[0062] 在一些实施例中，选择性极光A激酶抑制剂表不为式（V):

【权利要求】
1. 一种阿立塞替与太平洋紫杉醇组合用于治疗有需要的个体的细胞增生性病症的用 途，其中按28天投药时间表向所述个体投与每天两次剂量的阿立塞替与每周一次剂量的 太平洋紫杉醇的组合，其中 阿立塞替的所述所投与每天两次剂量为约30mg到约50mg，且是在所述28天时间表的 第1到3天、第8到10天和第15到17天投与；且 太平洋紫杉醇的所述所投与每周一次剂量为约50mg/m2到约70mg/m2,且是在所述28天 时间表的第1天、第8天和第15天投与。
2. 根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述投与与太平洋紫杉醇的所述投与 同时进行。
3. 根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约40mg到约 50mg〇
4. 根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约30mg到约 40mg〇
5. 根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约35mg。
6. 根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约40mg。
7. 根据权利要求1所述的用途，其中阿立塞替的所述每天两次剂量为约45mg。
8. 根据权利要求1所述的用途，其中太平洋紫杉醇的所述每周一次剂量为约60mg/m2 到约 70mg/m2。
9. 根据权利要求1所述的用途，其中太平洋紫杉醇的所述每周一次剂量为约60mg/m2。
10. 根据权利要求1到9中任一权利要求所述的用途，其中所述细胞增生性病症是癌 症。
11. 根据权利要求10所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌、乳癌、前列腺癌、胃癌、头颈 癌、膀胱癌、肺癌、胰脏癌或AIDS相关性卡波西氏肉瘤。
12. 根据权利要求10所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌、乳癌、肺癌或AIDS相关性卡 波西氏肉瘤。
13. 根据权利要求10所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌。
14. 根据权利要求10所述的用途，其中所述癌症是小细胞肺癌。
15. -种阿立塞替的用途，其用于制造用于治疗有需要的个体的细胞增生性病症的医 药，其中所述医药与太平洋紫杉醇组合使用，根据此按28天投药时间表向所述个体投与每 天两次的所述医药与每周一次剂量的太平洋紫杉醇的组合，其中 所述每天两次投与的医药包含约30mg到约50mg阿立塞替，且是在所述28天时间表的 第1到3天、第8到10天和第15到17天投与；且 太平洋紫杉醇的所述所投与每周一次剂量为约50mg/m2到约70mg/m2,且是在所述28天 时间表的第1天、第8天和第15天投与。
16. 根据权利要求15所述的用途，其中所述医药的所述投与与太平洋紫杉醇的所述投 与同时进行。
17. 根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约40mg到约 50mg阿立塞替。
18. 根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约30mg到约 40mg阿立塞替。
19. 根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约35mg阿立塞 替。
20. 根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约40mg阿立塞 替。
21. 根据权利要求15所述的用途，其中所述每天两次投与的医药包含约45mg阿立塞 替。
22. 根据权利要求15所述的用途，其中太平洋紫杉醇的所述每周一次剂量为约60mg/ m2 到约 70mg/m2。
23. 根据权利要求15所述的用途，其中太平洋紫杉醇的所述每周一次剂量为约60mg/ m2〇
24. 根据权利要求15到23中任一权利要求所述的用途，其中所述细胞增生性病症是癌 症。
25. 根据权利要求24所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌、乳癌、前列腺癌、胃癌、头颈 癌、膀胱癌、肺癌、胰脏癌或AIDS相关性卡波西氏肉瘤。
26. 根据权利要求24所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌、乳癌、肺癌或AIDS相关性卡 波西氏肉瘤。
27. 根据权利要求24所述的用途，其中所述癌症是卵巢癌。
28. 根据权利要求24所述的用途，其中所述癌症是小细胞肺癌。
29. -种试剂盒，其包含阿立塞替或其医药上可接受的盐；太平洋紫杉醇或其医药上 可接受的盐；和用于投与所述阿立塞替或其医药上可接受的盐与所述太平洋紫杉醇或其医 药上可接受的盐的组合的说明书。
【文档编号】A61K31/337GK104271129SQ201380015806
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2013年3月19日 优先权日:2012年3月20日
【发明者】阿里吉特·查克拉瓦蒂, 杰弗里·A·埃切迪, 罗伯特·W·克莱因菲尔德, 卡·N·莱, 文·希·徐, 卡尔蒂克·文卡塔克里希南 申请人:米伦纽姆医药公司