2;实测值413.1 (M+H) +. 进一步洗脱得到l〇〇mg(25%) N，N-二乙基-11-(2-氣乙基)-7-甲氧基-6,11-二氨苯并 嚷喃并[4,3-b]日引噪-6-甲酯胺，为白色固体。结构通过iH Mffi(300MHz, CDCh)确定：δΗ 1.04 (3Η, t, J = 7 Hz, N(C也C單）a), 1.40 (3Η, t, J = 7 Hz, N(C也C西）0，3.23- 3.71 (4H, m, N(C單C也）2)，3.88 (3H, s, OC西），4.45-5.00 (4H, m, NC單巧2F) ,5.53 (IH, s, CgCOWt2)，6.52(lH，d，J = 8Hz，8-qp，7.00(lH，d，J = 8Hz，10-巧），7.10-7.17 (2H, m, 9-巧和 A巧），7.25 (IH, dt, J = 8 和 1 Hz, A巧），7.42 (IH, dd, J = 8 和 1 Hz, A巧）和 7.59 (IH, d, J = 8 Hz, A巧）；"F NMR (283 MHz, CDCl3):S广220.0. LC-MS:关于 C23 也5FN2O2S，m/z 计算值412.2;实测值413.1 (M+H) +. 用W下条件用SFC手性分离分出S-对映异构体。
[0053] S-对映异构体:保留时间：7,3min，纯度95〇/〇 R-对映异构体:保留时间：9，Imin，纯度99% 实施例3:外消旋体的结合剂/非结合剂分析 用从4个供体全血样品得到的人血小板制备膜蛋白。基于PBR28结合亲和性，运些供体 样品中的2个W前确定为具有高亲和性，2个确定为具有低亲和性。使血小板团块在10ml缓 冲液l(〇.32mM薦糖，5mM Tris碱，ImM MgCl2，pH 7.4,4°C)中均化。使均浆在4°C在Beckman J2-MC离屯、机中在48,000 X g离屯、15分钟。去除上清液，使团块重新悬浮于至少10ml缓冲液 2(50mM Tris碱，ImM MgCl2，pH 7.4,4°C)，并通过在4°C在缓冲液2中在48,000 X g离屯、15 分钟洗涂。使膜悬浮于2ml缓冲液2,并用Protein Assay Kit II(Bio Rad cat # 500-0002)测定蛋白质浓度。将等分试样在-80°C储存，直至使用。
[0054] 使膜悬浮体的等分试样解冻，并用分析缓冲液3(50mM化is碱，140mM化Cl，1.5mM MgCl2,5mM KCl，1.5mM CaCb，pH 7.4,37°C)均化。对于竞争性结合试验，在Beckman Biomek 2000工作站WlOOyM至InM的11个系列稀释度稀释非标记PBR28(ABX cat # 1653)或 PK11195,并加到包含5nM pH]PK11195(Perkin Elmer Cat # 肥T885001MC)的非结合96孔 微量板。在Beckman Biomek 2000工作站WlyM至O.OlnM的11个系列稀释度稀释化合物1。W 10化Μ至InM的11个系列稀释度稀释GE180。也进行总体和非特异结合评价。对于20化L/孔最 终体积，将稀释到3化g/mL的16化L血小板膜加到分析板。将分析板在37°C培育至少1小时， 并通过过滤到在盐水中0.1% PEI中预浸60分钟的GF/B玻璃纤维板(Perkin Elmer; cat # 6005177)上终止培育。在化rkin Elmer Filtermate 196上用冰冷缓冲液4(50mM Tris碱， 1.4mM MgCh，pH 7.4, 4°C)清洗分析板5至6次。然后使板干燥，将底部密封，并向各孔加 入50化MicroScint 20(Perkin Elmer cat # 6013621)。在密封顶部后，使板平衡至少30 分钟，并在化rkin Elmer TopCount NTX上对捕集放射性活度计数。用化合物1作为外消旋 体。在[3扣PK11195竞争性结合分析中一式Ξ份检验化合物，通过用GraphPad Prism 5.0分 析数据测定化合物的亲和性，并计算低:高亲和性比率。
巧化引实施例4:经拆分对映异构体的结合剂/非结合剂分析 如实施例2中所述使化合物1拆分成对映异构体，并用从相同的4个人供体全血样品分 离的血小板进行竞争性结合分析。关于竞争性结合分析遵循与实施例3中相同的分析步骤， 并W10化Μ至InM的11个系列稀释度使用化合物PK11195, PBR28, GE180和化合物1的对映 异构体。在[3H]PK11195竞争性结合分析中一式Ξ份检验所有化合物，通过用GraphPad Prism 5.0分析数据测定化合物的亲和性，并计算低:高亲和性比率。
[0056] 地1 =R对映异构体;E2=S对映异构体
【主权项】
1. 一种以下结构的化合物：或其盐或溶剂化物。2. -种用于制备权利要求1的化合物的前体化合物，其中所述前体化合物为式I的化合 物：或其盐或溶剂化物； 其中LG为离去基团。3. 权利要求2的前体化合物，其中LG为氯、溴、碘、甲苯磺酸酯（OTs)、硝基苯磺酸酯 (ONs)、甲磺酸酯(OMs)或三氟甲磺酸酯(OTf)。4. 一种制备权利要求1的化合物的方法，所述方法包括使权利要求2或权利要求3的式I 的前体化合物与适合的[ 18F]氟化物源反应，以得到所述化合物。5. 权利要求4的方法，所述方法是自动的。6. -种用于进行权利要求5的方法的盒，所述盒包括： (i) 含有权利要求2或权利要求3的前体化合物的容器;和 (ii) 用适合的[18F]氟化物源洗脱步骤(i)的容器的装置。7. 权利要求6的盒，所述盒另外包含： (iii) 用于去除过量[18F]氟化物的离子交换柱;和/或 (iv) -个或多个用于纯化[18F]标记反应混合物的固相萃取柱。8. -种放射性药物组合物，所述放射性药物组合物包含权利要求1的化合物与适用于 哺乳动物给药形式的生物相容性载体。9. 一种用于测定受试者的易位蛋白（TSPO)表达的分布和/或程度的体内成像方法，所 述方法包括： (i) 给予所述受试者权利要求1的化合物； (ii) 使所述化合物结合到在所述受试者表达的TSP0; (iii) 用正电子发射断层摄影(PET)检测由所述化合物的放射性同位素发射的信号； (iv) 产生表达所述信号位置和/或量的图像;和 (V)测定所述受试者中TSPO表达的分布和程度，其中所述表达直接与所述化合物发射 的所述信号相关。10. 权利要求9的体内成像方法，所述体内成像方法在所述受试者的治疗方案过程期间 重复进行，所述方案包括给药对抗TSPO疾病。11. 权利要求1的用于权利要求9或权利要求10的体内成像方法的化合物。12. 权利要求1的化合物，用于制备权利要求9或权利要求10的体内成像方法所用的权 利要求9的放射性药物组合物。13. -种诊断其中增量调节TSPO的疾病的方法，所述方法包括权利要求9的体内成像方 法以及将TSPO表达的分布和程度归于具体临床图像的另外的步骤(vi)。14. 权利要求1的化合物，用于权利要求13的诊断方法。15. 权利要求1的化合物，用于制备权利要求13的诊断方法所用的权利要求8的放射性 药物组合物。
【专利摘要】本发明涉及体内成像，具体地讲，涉及易位蛋白(TSPO，以前称为外周苯并二氮杂受体)的体内成像。本发明提供解决与已知TSPO结合放射示踪剂相关问题的吲哚基体内成像剂。本发明还提供用于合成本发明的体内成像剂的前体化合物及合成所述前体化合物的方法。本发明的其它方面包括用本发明的前体化合物合成本发明的体内成像剂的方法、用于进行所述方法的试剂盒和用于进行所述方法的自动方案的盒。另外，本发明提供包含本发明的体内成像剂的放射性药物组合物和使用所述体内成像剂的方法。
【IPC分类】A61P25/00, A61K31/407, A61K51/04, A61P35/00, A61K31/404, C07D495/04
【公开号】CN105530962
【申请号】CN201480051649
【发明人】W.J.特里格, P.A.琼斯
【申请人】通用电气健康护理有限公司
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2014年9月19日
【公告号】EP3046591A1, WO2015040151A1