专利名称：喹唑啉酮衍生物及制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物化合物，具体涉及喹唑啉酮衍生物及制备方法和应用。尤其涉及 3-取代或6-苄取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物及其合成和应用。目前，临床上常采用的避孕方法主要有安全套、绝育手术、节育环和药物避孕等。 安全套虽然应用广泛，但因影响性快感，且易造成3. 6%的失败率，很大一部分男性不愿意 使用。绝育手术对一对夫妇只生一个孩子后顾之忧大，节育环存在着出血、带环妊娠等问 题。而药物避孕目前主要有激素类药物，该类药物会打破正常人体内代谢平衡，副作用较 大。因此寻觅新的、可逆的、非激素类的、高效的、经济的避孕药物非常必要。顶体(acrosome)是一个覆盖于精子细胞核前面的扁囊状结构。作为一种特化的 溶酶体，顶体内含有很多与受精相关的酶，顶体酶(acrosin)就是其中之一。该酶属于丝氨 酸超家族一员，在顶体反应中由顶体酶原(proacrosin)活化而来。它们在精星体及早期受 精卵形成方面具有十分重要的作用。顶体酶既可以分散顶体基质，又能作为次级配体维持 精子结合在卵子透明带(ZP)上进行顶体反应。顶体反应后，顶体酶能水解卵细胞透明带， 促使精子穿过透明带与卵细胞融合，最终完成受精。因此抑制顶体酶的活性便可以阻止受 精，从而避孕。顶体酶在受精过程中的关键作用及独特的细胞特异性，使其成为发展新型男 性抗生育药物的靶点。
发明内容
本发明要解决的技术问题在于研究设计抑制人精子顶体酶的男性避孕药。本发明人通过同源模建的方法首次构建了人顶体酶的三维蛋白结构，又采用多拷 贝同时搜寻(MCSS)方法进一步深入分析人顶体酶活性位点的空间特征、关键立场和关键 功能残基的分布，确定重要的药物结合位点，在此基础上，基于人顶体酶活性位点设计合成 了喹唑啉酮衍生物，具体为3-取代或6-苄取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物。本发明提供了一种喹唑啉酮衍生物，如下列结构式I所示
背景技术：
其中X，Y分别为C或N;R1为氢、C1^8直链或支链烷基或卤代的C"烷基；
R2为氢或4-卤代芳基，但所述R2中的卤素不为氯；或为其中R4为
烷基取代或未取代的五元或六元杂环芳基，但所述R4不为嘧啶-2-基；R3为氢或卤素。本发明提供的喹唑啉酮衍生物包括3-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物II和6-取 代-4(3H)-喹唑啉酮类化合物III。本发明提供的3-取代_4 (3H)-喹唑啉酮类化合物II如下列结构式所示
IN U2 Π5
TI其中X为C，Y为N，R3为卤素，R1为单或多卤代的Cb烷基；或X为N，Y为N，R2和R3各为氢，R1为C1^8直链或支链烷基；或
ηX为C，Y为C，R1和R3各为氢，R2为-R4其中R4为烷基取代或未取
代的五元或六元杂环芳基，但所述R4不为嘧啶-2-基；或X为C，Y为C，R1和R3各为氢，R2为4_卤代芳基，但所述R2中的卤素不为氯；或X为C，Y为N，R3为卤素，R1为三卤代甲基；或X为N，Y为N，R2和R3各为氢，R1为C1^直链烷基；或
η
HX为C，Y为C，R1和R3各为氢，R2为-N-R4其中R4为2位为C1^烷
基取代的噁唑-4-基或噻唑-2-基，4位为C"烷基取代的嘧啶-2-基；或X为C，Y为N，R3为氯，R1为三氟甲基；或X为N，Y为N，R2，R3为氢，Rl为甲基；或
ηX为C，Y为C，R1和R3各为氢，R2为-!J-R4其中R4为2_甲基-噁
唑-4-基；噻唑-2-基或4-甲基-嘧啶-2-基。本发明提供的6-取代-4 (3Η)-喹唑啉酮类化合物III，如下列结构式所示
Η2。\ ^^其中Rl 为
(1)芳环上有取代的苯胺，其中芳环上的取代为1到2个基团取代，芳环上的取代 基位于芳环的邻、间或对位，取代基团为CV8直链烷基、C1^8直链烷氧基、卤代的Ci_8直链烷 基、苯胺基或末端胺基上有芳杂环取代的磺酰胺基，所述的芳杂环为取代或未取代的含有 两个杂原子的五元或六元杂环，所述的杂原子为氧、硫或氮原子；或(2)芳杂环取代的胺基，其中所述的芳杂环为吡啶-4-基或6，9_卤素-9H-嘌 呤-3-基；或(3)(V12的长链脂肪胺基；或(4)单取代哌啶-1-基，其中所述的哌啶的取代基为氢或C"烷基，所述取代位置 在哌啶的2-位或4-位；或(5)在4位氮原子上有C"直链烷基取代的哌嗪-1-基；或(6) IH-咪唑-1-基；或(7) 5-烷基取代的吡啶-1(2H)_基，所述的烷基为直链烷基；或(8) OR2，其中R2为吡咯烷-2，5_ 二酮_1基。本发明提供的6-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物III，优选的如下其中Rl 为(1)芳环上有单取代基的苯胺，所述芳环上的取代基位于芳环的邻、间或对位，取 代基团为C"烷基、CV8烷氧基、C1^8卤代烷基或苯胺基；或(2)芳环上有单取代基的苯胺，所述芳环上的取代基位于芳环的间位或对位，取代 基团为C"烷基、CV8烷氧基、C"卤代烷基或苯胺基；或(3)芳环上有单取代基的苯胺，所述芳环上的取代基位于芳环的间位或对位，取代 基团为Ci_8烷基，CV8烷氧基、C1^8的三卤代烷基或苯胺基。本发明提供的6-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物III，更优选的如下其中Rl 为(1)末端胺基上有芳杂环取代的磺酰胺基，其中所述的芳杂环为噻唑-2-基、5-烷 基-异噁唑-3-基或4，6-二烷基取代的嘧啶-2-基，其中所述的烷基为CV8的直链或支链 烷基；或(2)末端胺基上有芳杂环取代的磺酰胺基，其中所述的芳杂环为噻唑-2-基、5-烷 基_异噁唑-3-基或4，6- 二烷基取代的嘧啶-2-基，其中所述的CV8烷基为的直链烷基； 或(3)芳杂环取代的胺基，其中所述的芳杂环为6，9- 二氯-9H-嘌呤_3_基；或(4)C4_8的长链脂肪胺基。本发明的另一目的是提供了上述一种喹唑啉酮衍生物的制备方法。以2-氨基-6 甲基苯甲酸为原料，与丙酸酐反应后，得到的中间体2与含氨基的3-取代化合物直接反应 得3-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物II ；或得到的中间体2与甲酰胺反应后，经NBS溴代， 再与含氨基的6-取代化合物反应得6-取代_4 (3H)-喹唑啉酮类化合物III。本发明提供了 3-取代-4 (3H)_喹唑啉酮类化合物的制备方法，包括以下步骤
(1)2 —乙基6 —甲基苯并噁嗪-4-酮(中间体2)的制备取2-氨基-6甲基苯甲酸0.04mol，丙酸酐50ml，加热搅拌回流3h_5h，停止反应， 放冷至室温后冰箱内放置过夜，滤集析出白色片状晶体，得粗品。用无水乙醇重结晶得淡黄 色中间体2。(2)(目标物3)3-取代-4(3H)_喹唑啉酮类化合物的制备取中间体2(0.005mol)，等摩尔3_取代物，溶解于IOml N, N 二甲基甲酰胺(DMF) 和50ml的四氢呋喃的混合溶液，加入0. 5g的催化剂二环己基碳二亚胺(DCC)，搅拌回流反 应10h。过滤后，将滤液旋蒸除去混合溶剂，得3-取代_4 (3H)-喹唑啉酮类化合物的粗品 3- (4-氯苯胺)-2-乙基-6-甲基-4 (3H)-喹唑啉酮粗品。所述3-取代物为4-氯苯胺时，目标化合物为3- (4-氯苯胺)-2-乙基-6-甲 基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号1)；所述3-取代物为3-甲基-2-氨基嘧啶时，目标化合物为2-乙基-6-甲 基-3-(4-甲基嘧啶)-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号2)；所述3-取代物为6-氯-4-三氟甲基-2-氨基-吡啶时，目标化合物为 3-(6-氯-4-三氟甲基-吡啶)-2-乙基-6-甲基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号 3)；所述3-取代物为4-甲基异噁唑苯磺酰胺时，目标化合物为3- (4-甲基异噁唑) 苯磺酰胺-2-乙基-6-甲基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号4)；所述3-取代物为噻唑-苯磺酰胺时，目标化合物为3-噻唑-苯磺酰胺-2-乙 基-6-甲基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号5)；所述3-取代物为3-甲基嘧啶-苯磺酰胺时，目标化合物为3-(3_甲基嘧啶)苯 磺酰胺-2-乙基-6-甲基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号6)；所述3-取代物为嘧啶苯磺酰胺时，目标化合物为3-嘧啶苯磺酰胺-2-乙基-6-甲 基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号7)。本发明化合物1-8按此法制备。本发明另一目的是提供了 6-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物的制备方法，包括以 下步骤
10 (1)2 —乙基6 —甲基苯并噁嗪-4-酮(中间体2)的制备取2-氨基-6甲基苯甲酸0.04mol，丙酸酐50ml，加热搅拌回流3h_5h，停止反应， 放冷至室温25°C后冰箱内放置过夜，滤集析出白色片状晶体，得粗品。用无水乙醇重结晶得 淡黄色中间体2。(2) 2—乙基6—甲基-4-(3H)-喹唑啉酮(中间体3)的制备取化合物2 (0. 043mol)和30ml甲酰胺搅拌反应7h。冷却至室温25 V，滤集析出 棕褐色针状结晶，少量水洗三次，60°C烘干得中间体3。(3) 2—乙基6 —溴甲基-4-(3H)-喹唑啉酮(中间体4)的制备取化合物3 (0. 032mol)和N-溴代丁 二酰亚胺(NBS) 0. 037mol,偶氮二异丁腈 (AIBN)O. 3g，溶于150ml氯仿(CHCl3)中，搅拌回流4h。冷却至室温25°C，滤集析出黄白色 固体，60°C烘干得中间体4。(4)(目标物5) 6-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物的制备喹唑啉酮衍生物的制备取中间体4(lg，0. 0037mol)溶解于IOmL N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，加入等摩 尔的6-取代物，三乙胺lmL，常温搅拌反应10h，至薄层板检测反应完全，得(目标物5)6-取 代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物的制备喹唑啉酮衍生物。所述6-取代物为2，5_ 二甲基苯胺时，目标化合物为6-(2，5_ 二甲基苯胺)甲 基-2-乙基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号8)；所述6-取代物为3-甲氧基苯胺时，目标化合物为2-乙基-6((3_甲氧基苯 胺)_甲基)4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号9)；所述6-取代物为N-苯胺-1，二胺时，目标化合物为2-乙基-6 ((4_苯胺-苯胺) 甲基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号10)；所述6-取代物为4-氨基嘧啶时，目标化合物为2-乙基-6((4_氨基嘧啶)甲 基-4(3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号11)；所述6-取代物为2-噻唑苯磺酰胺时，目标化合物为6-((2_噻唑苯磺酰胺)甲 基)-2-乙基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号12)；所述6-取代物为2-嘧啶苯磺酰胺，目标化合物为6-((2_嘧啶苯磺酰胺)甲 基)-2-乙基-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号13)；所述6-取代物为5-甲基异恶唑苯磺酰胺，目标化合物为6-((5_甲基异恶唑苯磺 酰胺)甲基)-2-乙基_4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号14)；所述6-取代物为3，4- 二甲基嘧啶苯磺酰胺，目标化合物为6- ((3,4- 二甲基嘧啶 苯磺酰胺)甲基)-2-乙基_4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号15)；所述6-取代物为辛胺，目标化合物为2-乙基-6 ((辛胺)甲基)-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号16)；所述6-取代物为1 (2H)-5-甲基嘧啶，目标化合物为2_乙基_6((1 (2H)_5_甲基 嘧啶)甲基)_4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号17)；所述6-取代物为IH-咪唑，目标化合物为6((1H_咪唑)甲基)_2_乙基_4 (3H)-喹 唑啉酮(表1中化合物编号18)；所述6-取代物为1-哌嗪，目标化合物为2-乙基-6 ((1-哌嗪)甲基)_4 (3H)-喹 唑啉酮(表1中化合物编号19)；所述6-取代物为3-三氟甲基苯胺，目标化合物为2-乙基-6 ((3_三氟甲基苯胺) 甲基)-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号20)；所述6-取代物为4-乙氧基苯胺，目标化合物为2-乙基-6 ((4-乙氧基苯胺)甲 基)-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号21)；所述6-取代物为2，5-吡咯烷二酮-N-醇，目标化合物为2_乙基_6 ((2，5_吡咯 烷二酮)甲氧基)"4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号22)；所述6-取代物为6，9-二氯-2-氨基-9H-嘌呤，目标化合物为2_乙基_6 ((6， 9- 二氯-2-氨基-9H-嘌呤)甲基)-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号23)；所述6-取代物为4-甲基哌啶，目标化合物为2-乙基-6((4_甲基哌啶)甲 基)-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号24)；所述6-取代物为己胺，目标化合物为2-乙基_6((己胺)甲基)-4(3H)_喹唑啉 酮(表1中化合物编号25)；所述6-取代物为4-甲基哌嗪，目标化合物为2-乙基-6((4_甲基哌嗪)甲 基)-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号26)；所述6-取代物为2-甲基哌啶，目标化合物为2-乙基-6((2_甲基哌啶)甲 基)-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物编号27)。本发明化合物9-27均按此法制备。本发明的又一目的是提供了上述一种喹唑啉酮衍生物在制备抗生育药物中的应用。本发明的再一目的是提供了上述3-取代_4 (3H)_喹唑啉酮类化合物在制备抗生 育药物中的应用。本发明的还有一个目的是提供了上述6-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物在制备 抗生育药物中的应用。本发明人通过测试喹唑啉酮衍生物体外抑制人精子顶体酶活性，结果表明，与公 认的顶体酶抑制剂TLCK相比，本发明的喹唑啉酮衍生物对人精子顶体酶有抑制活性。本发明人通过测试实施例得到的各个目标化合物(化合物1-27)体外抑制人精子 顶体酶活性，结果表明，与公认的顶体酶抑制剂TLCK相比，目标化合物对人精子顶体酶均 具有抑制活性，其中化合物3，5，8，9，12，13，14，15，16，23，24，25对人精子顶体酶具有较强 的抑制活性。本发明首次公开和合成了 3-取代或6-苄取代_4 (3H)_喹唑啉酮类化合物，并提 供了化该类合物在抗生育药物中的应用。为临床提供新的男性避孕后选药物，有较大的应 用价值。
1具体实施例方式实施例13-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物(化合物1)的合成方法，包括以下步骤
H3C
COOHο O
NH2
H3C
DCC1DMF
操作步骤
(1)2—乙基6 —甲基苯并噁嗪-4-酮(中间体2)的制备 取2-氨基-6甲基苯甲酸0. 04mol，丙酸酐50ml，加热搅拌回流3h_5h，停止反应， 放冷至室温后冰箱内放置过夜，滤集析出白色片状晶体，得粗品。用无水乙醇重结晶得淡黄 色中间体2 (5. 24g)。(2)目标物3 (化合物1)的制备取中间体2(1.5g，0. 005mol)，等摩尔3_取代物4_氯苯胺0. 635g，溶解于IOmlN, N 二甲基甲酰胺(DMF)和50ml的四氢呋喃的混合溶液，加入0. 5g的催化剂二环己基碳二亚 胺(DCC)，搅拌回流反应10h。过滤后，将滤液旋蒸除去混合溶剂，得粗品0.60g。实施例2-7 (化合物2-7的制备)方法同实施例1，但是步骤(2)的化合物2-8的3-取代物与目标物不同，见下表，
3-取代物目标物收量3-甲基-2-氨基嘧啶2 0.68 g
6-氯-4-三氟甲基-2-氨基-吡啶3 0.47g4-甲基异噁唑苯磺酰胺4 0.46g噻唑-苯磺酰胺5 0.72 g3-甲基嘧啶-苯磺醜胺6 1.02g嘧啶苯磺酰胺7 1.89 g
实施例8
6_取代_4 (3H)-喹唑啉酮类化合物(化合物8)的合成方法，包括以下步骤
操作步骤(1)2—乙基6 —甲基苯并噁嗪-4-酮(中间体2)的制备取2-氨基-6甲基苯甲酸6. Og (0. 04mol)，丙酸酐50ml，加热搅拌回流3h_5h，停止 反应，放冷至室温25°C后冰箱内放置过夜，滤集析出白色片状晶体，得粗品5.82g。用无水 乙醇8ml，重结晶得淡黄色化合物25. 24g。(2) 2—乙基6—甲基-4-(3H)-喹唑啉酮(中间体3)的制备取化合物2(0. 043mol)和30ml甲酰胺搅拌反应7h。冷却至室温25°C，滤集析出 棕褐色针状结晶，少量水洗10mlX3，烘干得化合物36. IOgo(3) 2—乙基6 —溴甲基-4-(3H)-喹唑啉酮(中间体4)的制备取化合物3 6. IOg (0. 032mol)和 N-溴代丁二酰亚胺(NBS) 6. 59g(0. 037mol)，偶氮 二异丁腈(AIBN)O. 3g，溶于150ml氯仿(CHCl3)中，搅拌回流4h。冷却至室温25°C，滤集析 出黄白色固体，烘箱60°C烘干8h得化合物47. Sg。(4)目标5 (化合物8)的制备取化合物4(lg，0. 0037mol)溶解于IOmL N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，加入等摩尔 的氨基取代物2，5- 二甲基苯胺0. 45g，三乙胺lmL，常温搅拌反应10h，至薄层板检测反应完 全，得到6-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物6- (2，5- 二甲基苯胺)甲基_2_乙基-4 (3H)-喹 唑啉酮0. 2g。实施例9-27 (化合物9-27的制备)方法同实施例9，但是步骤(3)的6-取代物与目标物不同，见下表
6_取代物目标物收量3-甲氧基苯胺90.64gN-苯胺-1，二胺100.82g4-氨基嘧啶110.27g2-噻唑苯磺酰胺120.60g2-嘧啶苯磺酰胺130.29g5-甲基异恶唑苯磺酷胺140.66g3，4-二甲基嘧啶苯磺酰胺150.12g辛胺16l.llg1 (2H) -5-甲基嘧啶170.46gIH-咪唑180. 08g1-哌嗪190.28g3-三氟甲基苯胺200.39g4-乙氧基苯胺210.64g2, 5-吡咯烷二酮-N-醇220.17g6, 9-二氯-2-氨基-9H-嘌呤231.48g4-甲基哌啶240.38g己胺250.96g4-甲基哌嗪260.44g2-甲基哌啶270.50g
按上述实施例制得的化合物1-27如下 本发明化合物1-27的结构式如表1所示
O H /~\S N^ch3O J/F123叩喊分Hr3 4CH3 5CH3 6
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252627表2化合物结构及其核磁共振谱数据 表3化合物熔点 注温度计未经校正实施例28本发明实施例化合物1-27抗生育活性试验1、试验目的测试各个目标化合物体外抑制人精子顶体酶活性。2、检测原理人精子顶体酶是受精过程中必不可少的蛋白水解酶，抑制该酶活性可达到避孕目 的。27个不同浓度的待测目标化合物与具有生理活性人精子作用，以N-苯甲 酰-DL-精氨酸-对消极苯甲酰胺盐酸盐(ΒΑΡΝΑ)为底物，与精子释放的顶体酶反应， 显色，得到与不同浓度化合物作用后的顶体酶的活性值。并与公开的顶体酶抑制剂 TLCK (N-tosyl-L-lysine chloromethyl ketone)进 亍比较评价。3、检测材料与仪器精子顶体酶试剂盒自江苏省南京欣迪生物药业工程有限公司。试剂盒包括分离剂、顶体酶激活剂、抑制剂、反应底物剂；N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基酮(TLCK)购自Fluka公司；人精子经医学伦理委员会讨论通过，在知情同意情况下，采自健康已生育男性。由 长海医院生殖医学中心提供，并提供分析检测报告；精子、微生物动(静)态图像分析系统(荧光版5.0)，清华同方；BB16UV/BB5060UV CO2 培养箱，Heraeus ；XW-80A漩涡混合器；BIORAD smartSpec 3000 分光光度计；Hettich Uni 32R冷冻高速离心机；THZ-C恒温振荡器。4、检测步骤a、精子计数新鲜精液液化后用精子、微生物动(静)态图像分析系统计数，以X 百万/ml表示密度，计数后，按每管7. 5 X IO6精子数计算每管所需精液量。b、化合物与精子作用目标化合物以5% DMSO配成不同浓度梯度。将标为实验管 0\-1；管)的试管中加入7. 5X IO6个精子的精液后，加入一定摩尔数化合物，以生理盐水调 整总量为1ml。另配两管含7. 5 X IO6个精子的5% DMSO/生理盐水溶液，标为对照管(C1J2管)。 其中C1为试剂盒空白对照，C2为无抑制的正常精子顶体酶活性值对照。将T1In管，C1^C2管震荡混勻，置于培养箱25 37°C孵育5分钟。
C、提取精子将T1In管，(^、(2管1000G/5min离心，小心吸除上清，保留沉淀精子。 用Iml 5% DMSO/生理盐水加入后震荡洗涤，1000G/5min再次离心，小心吸除上清，保留约 200 μ 1溶液。d、测顶体酶活性计算取两组1. 5ml eppondoff离心管，分别标记为TT广TTn管； CC1, CC2管。各管加入分离剂0. 5ml，将对应T广Tn、C1, C2管内约2001溶液吹打混勻后贴壁 小心加到对应的TT广TTpCC1、CC2管内的分离剂液面上，离心1500G/20min，仔细吸除上层液 体，保留沉淀精子。TT广TTn、CC1, CC2管先加顶体酶激活剂各900ul，后加反应底物剂100 μ 1，C1管再 加抑制剂ΙΟΟμΙ。充分混勻，置于培养箱25 37°C孵育90min，期间取出震荡广2次。90分 钟后，各TT广TTn管和C2管加抑制剂100 μ 1，终止反应，震荡混勻，离心1500g/5min。每管 取上清700 μ 1，分光光度计测λ = 410nm时OD值，以蒸馏水调零。计算公式精子顶体酶活性(IU/106精子)=(T管OD值-C1管OD值)X 329正常对照组的酶活性参考值正常精子顶体酶活性(IU/106精子)=(C2管OD值-C1管OD值)X 329抑酶比值=(精子正常对照酶活性值-样品酶活性值)+精子正常对照酶活性值。5、实验结果表3表3化合物抑酶活性结果 6、结论采用体外实验，检测了本发明实施例化合物1-27不同浓度的化合物与具有生育活性的人精子顶体酶作用，通过改良的Kennedy法检测残余酶活性。并与经典的顶体酶抑 制剂TLCK作比较。结构表明所有测试的化合物对人精子顶体酶均具有抑制活性，且都比 阳性对照品TLCK抑制活性强，其中化合物3，5，8，9，12，13，14，15，16，23，24，25具有较强抑 制人精子顶体酶活性。
权利要求
一种喹唑啉酮衍生物，其特征在于如下列结构式I所示其中X，Y分别为C或N；R1为氢、C1 8直链或支链烷基或卤代的C1 8烷基；R2为氢或4 卤代芳基，但所述R2中的卤素不为氯；或为其中R4为烷基取代或未取代的五元或六元杂环芳基，但所述R4不为嘧啶 2 基；R3为氢或卤素。FSA00000086489700011.tif,FSA00000086489700012.tif
2.根据权利要求1所述一种喹唑啉酮衍生物，其特征在于所述喹唑啉酮衍生物为3-取 代_4(3Η)-喹唑啉酮类化合物II如下列结构式所示 其中X为C，Y为N，R3为卤素，R1为单或多卤代的C"烷基。
3.根据权利要求2所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的X为N，Y为N，R2和 R3各为氢，R1为CV8直链或支链烷基。
4.据权利要求2所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的X为C，Y为C，R1和R3各为氢,R2为 其中R4为烷基取代或未取代的五元或六元杂环芳基，但所述R4不为嘧啶-2-基。
5.据权利要求2所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的X为C，Y为C，R1和R3 各为氢，R2为4-卤代芳基，但所述R2中的卤素不为氯。
6.据权利要求2所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的X为C，Y为N，R3为卤 素，R1为三卤代甲基。
7.据权利要求2所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的X为N，Y为N，R2和R3 各为氢，R1为CV8直链烷基。
8.据权利要求2所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的X为C，Y为C，R1和R3各 为氢，R2为 其中R4为2位为CV8烷基取代的噁唑-4-基或噻唑-2-基， 4位为CV8烷基取代的嘧啶-2-基。
9.据权利要求2所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的X为C，Y为N，R3为氯， R1为三氟甲基。
10.X为N，Y为N，R2，R3为氢，Rl为甲基。
11.根据权利要求2所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的X为C，Y为C，R1和 R3各为氢，R2为 其中R4为2－甲基－噁唑-4-基；噻唑-2-基或4-甲基_嘧啶-2-基。
12.根据权利要求1所述一种喹唑啉酮衍生物，其特征在于所述喹唑啉酮衍生物为 6-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物III，如下列结构式所示 其中的R1为芳环上有取代的苯胺，其中芳环上的取代为1到2个基团取代，芳环上的 取代基位于芳环的邻、间或对位，取代基团为C"直链烷基、CV8直链烷氧基、卤代的C"直 链烷基、苯胺基或末端胺基上有芳杂环取代的磺酰胺基，所述的芳杂环为取代或未取代的 含有两个杂原子的五元或六元杂环，所述的杂原子为氧、硫或氮原子。
13.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为芳杂环取代的 胺基，其中所述的芳杂环为吡啶-4-基或6，9-卤素-9H-嘌呤-3-基；或
14.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为CV12的长链脂 肪胺基。
15.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为单取代哌 啶-1-基，其中所述的哌啶的取代基为氢或CV8烷基，所述取代位置在哌啶的2-位或4-位。
16.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为在4位氮原子 上有Ci_8直链烷基取代的哌嗪-1-、IH-咪唑-1-基、5-烷基取代的吡啶-ι (2H)-基，所述的 烷基为C"直链烷基或OR2，其中R2为吡咯烷-2，5- 二酮-1基。
17.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为芳环上有单取 代基的苯胺，所述芳环上的取代基位于芳环的邻、间或对位，取代基团为CV8烷基、C"烷氧 基、C"卤代烷基或苯胺基。
18.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为芳环上有单取 代基的苯胺，所述芳环上的取代基位于芳环的间位或对位，取代基团为Cp8烷基、C"烷氧 基、C"卤代烷基或苯胺基。
19.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为芳环上有单取 代基的苯胺，所述芳环上的取代基位于芳环的间位或对位，取代基团为C18烷基，C18烷氧 基、C18的三卤代烷基或苯胺基。
20.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为末端胺基上有 芳杂环取代的磺酰胺基，所述的芳杂环为噻唑-2-基、5-烷基-异噁唑-3-基或4，6- 二烷 基取代的嘧啶-2-基，所述的烷基为C"的直链或支链烷基；或
21.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为末端胺基上有 芳杂环取代的磺酰胺基，所述的芳杂环为噻唑-2-基、5-烷基-异噁唑-3-基或4，6- 二烷 基取代的嘧啶-2-基，所述的烷基为C"的直链烷基。
22.根据权利要求12所述衍生物，其特征在于所述衍生物为其中的R1为芳杂环取代的 胺基，所述的芳杂环为6，9- 二氯-9H-嘌呤-3-基或R1为C4_8的长链脂肪胺基。
23.如权利要求2-11中任一项所述喹唑啉酮衍生物的制备方法，其特征在于该方法包 括以下步骤(1)2-乙基6-甲基苯并噁嗪-4-酮中间体2的制备取2-氨基-6甲基苯甲酸0. 04mol，丙酸酐50ml，加热搅拌回流3h_5h，停止反应，放冷 至室温后冰箱内放置过夜，滤集析出白色片状晶体，得粗品，用无水乙醇重结晶得淡黄色中 间体2 ；(2)目标物33-取代-4(3H)-喹唑啉酮类化合物的制备取中间体20. 005mol，等摩尔3-取代物，溶解于IOml N, N 二甲基甲酰胺和50ml的四 氢呋喃的混合溶液，加入0. 5g的催化剂二环己基碳二亚胺，搅拌回流反应10h，过滤后，将 滤液旋蒸除去混合溶剂，得3-取代-4 (3H)-喹唑啉酮类化合物的粗品；所述3-取代物为4-氯苯胺时，目标化合物为3-(4_氯苯胺)-2_乙基-6-甲 基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物1 ；所述3-取代物为3-甲基-2-氨基嘧啶时，目标化合物为2-乙基-6-甲基-3-(4-甲 基嘧啶)-4 (3H)-喹唑啉酮化合物2 ；所述3-取代物为6-氯-4-三氟甲基-2-氨基-吡啶时，目标化合物为3- (6-氯-4-三 氟甲基-吡啶)-2-乙基-6-甲基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物3 ；所述3-取代物为4-甲基异噁唑苯磺酰胺时，目标化合物为3-(4-甲基异噁唑)苯磺 酰胺-2-乙基-6-甲基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物4)；所述3-取代物为噻唑-苯磺酰胺时，目标化合物为3-噻唑-苯磺酰胺-2-乙基-6-甲 基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物5 ；所述3-取代物为3-甲基嘧啶-苯磺酰胺时，目标化合物为3-(3-甲基嘧啶)苯磺酰 胺-2-乙基-6-甲基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物编号6 ；所述3-取代物为嘧啶苯磺酰胺时，目标化合物为3-嘧啶苯磺酰胺-2-乙基-6-甲 基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物7。
24.如权利要求12-21中任一项所述喹唑啉酮衍生物的制备方法，其特征在于该方法 包括以下步骤(1)2-乙基6-甲基苯并噁嗪-4-酮中间体2的制备取2-氨基-6甲基苯甲酸0. 04mol，丙酸酐50ml，加热搅拌回流3h_5h，停止反应，放冷 至室温25°C后冰箱内放置过夜，滤集析出白色片状晶体，得粗品。用无水乙醇重结晶得淡黄 色中间体2 ；(2)2-乙基6-甲基-4-(3H)-喹唑啉酮中间体3的制备取化合物2(0. 043mol)和30ml甲酰胺搅拌反应7h。冷却至室温25°C，滤集析出棕褐 色针状结晶，少量水洗三次，60°C烘干得中间体3 ；(3)2-乙基6-溴甲基-4-(3H)_喹唑啉酮(中间体4)的制备取化合物30. 032mol和N-溴代丁二酰亚胺0. 037mol，偶氮二异丁腈0. 3g，溶于150ml 氯仿中，搅拌回流4h。冷却至室温25°C，滤集析出黄白色固体，60°C烘干得中间体4 ；(4)目标物56-取代_4(3H)-喹唑啉酮类化合物的制备喹唑啉酮衍生物的制备取中间 体40. 0037mol溶解于IOmL N, N-二甲基甲酰胺中，加入等摩尔的6-取代物，三乙胺lmL， 常温搅拌反应10h，至薄层板检测反应完全，得目标物5 6-取代_4 (3H)-喹唑啉酮类化合 物的制备喹唑啉酮衍生物；所述6-取代物为2，5_二甲基苯胺时，目标化合物为6-(2，5_二甲基苯胺)甲基-2-乙 基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物8 ；所述6-取代物为3-甲氧基苯胺时，目标化合物为2-乙基-6 ((3-甲氧基苯胺)_甲 基)4 (3H)-喹唑啉酮化合物9 ；所述6-取代物为N-苯胺-1，二胺时，目标化合物为2-乙基-6 ((4-苯胺-苯胺)甲 基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物10 ；所述6-取代物为4-氨基嘧啶时，目标化合物为2-乙基-6((4-氨基嘧啶)甲 基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物11 ；所述6-取代物为2-噻唑苯磺酰胺时，目标化合物为6-((2_噻唑苯磺酰胺)甲 基)-2-乙基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物12 ；所述6-取代物为2-嘧啶苯磺酰胺，目标化合物为6-((2-嘧啶苯磺酰胺)甲基)-2_乙 基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物13 ；所述6-取代物为5-甲基异恶唑苯磺酰胺，目标化合物为6-((5_甲基异恶唑苯磺酰 胺)甲基)-2-乙基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物14 ；所述6-取代物为3，4- 二甲基嘧啶苯磺酰胺，目标化合物为6- ((3,4- 二甲基嘧啶苯磺酰胺)甲基)-2-乙基-4 (3H)-喹唑啉酮化合物15 ；所述6-取代物为辛胺，目标化合物为2-乙基-6 ((辛胺)甲基)-4 (3H)-喹唑啉酮化 合物16 ；所述6-取代物为1 (2H) -5-甲基嘧啶，目标化合物为2-乙基-6 ((1 (2H) -5-甲基嘧啶) 甲基)-4 (3H)-喹唑啉酮化合物17 ；所述6-取代物为IH-咪唑，目标化合物为6 ((1H-咪唑)甲基)-2-乙基-4 (3H)-喹唑 啉酮化合物18 ；所述6-取代物为1-哌嗪，目标化合物为2-乙基-6 ((1-哌嗪)甲基)-4 (3H)-喹唑啉 酮化合物19 ；所述6-取代物为3-三氟甲基苯胺，目标化合物为2-乙基_6 ((3-三氟甲基苯胺)甲 基)-4 (3H)-喹唑啉酮化合物20 ；所述6-取代物为4-乙氧基苯胺，目标化合物为2-乙基-6((4-乙氧基苯胺)甲 基)-4 (3H)-喹唑啉酮化合物21 ；所述6-取代物为2，5-吡咯烷二酮-N-醇，目标化合物为2-乙基-6 ((2，5-吡咯烷二 酮)甲氧基)_4 (3H)-喹唑啉酮化合物22 ；所述6-取代物为6，9- 二氯-2-氨基-9H-嘌呤，目标化合物为2-乙基-6 ((6，9- 二 氯-2-氨基-9H-嘌呤)甲基)-4 (3H)-喹唑啉酮化合物23 ；所述6-取代物为4-甲基哌啶，目标化合物为2-乙基-6 ((4-甲基哌啶)甲 基)-4 (3H)-喹唑啉酮化合物24 ；所述6-取代物为己胺，目标化合物为2-乙基-6 ((己胺)甲基)-4 (3H)-喹唑啉酮化 合物25 ；所述6-取代物为4-甲基哌嗪，目标化合物为2-乙基-6((4-甲基哌嗪)甲 基)-4 (3H)-喹唑啉酮(表1中化合物26)；所述6-取代物为2-甲基哌啶，目标化合物为2-乙基-6((2-甲基哌啶)甲 基)-4 (3H)-喹唑啉酮化合物27。
25.一种如权利要求1所述喹唑啉酮衍生物在制备抗生育药物中的应用。
26.如权利要求2-11中任一项所述喹唑啉酮衍生物在制备抗生育药物中的应用。
27.如权利要求12-21中任一项所述喹唑啉酮衍生物在制备抗生育药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种喹唑啉酮衍生物如结构式I。包括3-取代-4(3H)-喹唑啉酮衍生物(化合物1-8)和6-取代-4(3H)-喹唑啉酮衍生物(化合物9-27)。通过测试本发明各个目标化合物的体外抑制人精子顶体酶活性，结果表明，与公开报道的顶体酶抑制剂TLCK(N-甲苯磺酰-L-赖氨酰-氯甲基酮)相比较，所有目标化合物对人精子顶体酶均具有抑制活性。本发明喹唑啉酮衍生物可用于制备抗生育药物，为临床提供新的男性避孕药物，有较大的应用价值。本发明提供了所述衍生物I的制备方法。
文档编号C07D473/40GK101899010SQ20101014824
公开日2010年12月1日 申请日期2010年4月15日 优先权日2010年4月15日
发明者刘雪飞, 吕加国, 吴蕴琦, 周有骏, 宁微微, 宋云龙, 朱驹, 盛春泉, 祈晶晶, 章玲, 薛博亮, 郑灿辉 申请人:中国人民解放军第二军医大学;黑龙江成功药业有限公司