硫酸镁干 燥，抽滤旋干，进行柱层析分离，依次使用正己烷：乙酸乙酯体积比=5:1、3:1以及1:1的混 合溶液进行梯度洗脱，于正己烷：乙酸乙酯体积比= 1:1的洗脱液于得到2. Ig类白色固体 (化合物五），产率93.9%;
[0050] 6)氮气保护下将2. IOg化合物五，3-氯-4-氟苯胺I. IOg，异丙醇80ml混合于80-90 °C回流搅拌4-5小时，冷却抽滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤，干燥后得淡黄色固体3g，向该固体中 加入氨水调节PH至碱性，用二氯甲烷萃取，饱和氯化钠洗涤后，无水硫酸镁干燥，旋干得到 淡黄色固体2.40g(化合物六），产率83.9 % ;
[0051 ] 7)氮气保护下将2.4g化合物六溶于100mL甲醇和50mlTHF混合液中，加入Ig 5%钯 碳，通入氢气20-25°C搅拌反应2.5h，使用二氯甲烷：甲醇体积比= 10:1的混合溶液作为展 开剂进行TLC分析，原料反应完全后，抽滤，滤饼用二氯甲烷和甲醇混合液浸泡洗涤，滤液旋 干得到黄色粉末1.65g(化合物七）；
[0052] 8)20.Og三缩四乙二醇和10.2g三乙胺加入反应瓶中，加入300ml乙腈，冰浴降温至 0-5°C，将19.OgTsCl溶入100mL乙腈缓慢滴入上述溶液中，Ih滴完，滴完后升至20-25度下反 应12-14h，旋去溶剂，进行柱层析分离，依次使用正己烷：乙酸乙酯体积比=4:1以及1.5:1 的混合溶液进行梯度洗脱，于正己烷：乙酸乙酯体积比= 4:1的洗脱液中得到12.9g油状产 品（化合物十三），产率35.9 %，于正己烷：乙酸乙酯体积比=1.5:1的洗脱液中得到5.4g油 状物(化合物十四），产率1 〇. 4 %。
[0053] 9)MPGH制备：氮气保护下，将1.50g化合物七，8. OOg碳酸钾，120ml乙腈混合，升温 至95°C左右搅拌，将含有1.60g化合物十三的20ml乙腈溶液滴加进入上述体系，约60min加 完，加毕于95°C继续反应lh，使用二氯甲烷：甲醇体积比= 20:1的混合溶液作为展开剂进行 TLC分析，原料反应完全后，冷却抽滤，用二氯甲烷洗涤滤饼，滤液旋干过柱，依次使用二氯 甲烷：甲醇体积比=40:1、30:1以及20:1的混合溶液进行梯度洗脱，于二氯甲烷：甲醇体积 比= 20:1的洗脱液中得到油状产物1.7g，制备色谱分离后得到1.2g纯产品（化合物八），即 为EGFR TKI-MPGH化合物，两步产率41.4%;
[0054] 10)MPGF制备:氮气保护下将0.50g化合物八溶入20mL二氯甲烷中，降温至-5°C加 入0 · 24g三乙胺和0 · 12g DMAP，于-10°C加入0 · 93g TsCl，搅拌反应5-10min后撤去冰浴，自 然升至20-25°C反应3h，使用二氯甲烷：甲醇体积比= 20:1的混合溶液作为展开剂进行TLC 分析，原料基本反应完全后，旋去溶剂后快速柱层析分离，依次使用二氯甲烷：甲醇体积比 =50:1、40:1以及30:1的混合溶液进行梯度洗脱，于二氯甲烷：甲醇体积比=30:1的洗脱液 中得类白色固体，将产物溶于二氯甲烷中，加入lmL3.5M HCl/乙醇溶液成盐，旋去溶剂得到 白色固体0.40g(化合物九），产率61.0 % ;
[0055] 11)氮气保护下将3.60g化合物十四和0.85g氟化钾(KF)，2.70g氨基聚醚(K222)以 及30ml乙腈混合于90°C左右回流反应5h，旋干乙腈，加入乙酸乙酯，用饱和氯化钠溶液洗 涤，干燥旋干后进行柱层析分离，依次使用正己烷：乙酸乙酯体积比=3:1、2:1以及1:1的混 合溶液进行梯度洗脱，于正己烷：乙酸乙酯体积比=1:1的洗脱液中得到1. OOg油状产品（化 合物十五），产率39.8%;
[0056] 12)氮气保护下将0.48g化合物九，2.76g碳酸钾，20ml乙腈混合加热至回流，将 〇. 55g化合物十五溶入IOml乙腈中缓慢滴入上述含有化合物九的混合液中，约30min加完， 继续回流2h，使用二氯甲烷：甲醇体积比= 20:1的混合溶液作为展开剂进行TLC分析，原料 基本反应完全后，冷却抽滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，旋干，进行柱层析分离，依次使用二氯甲 烷：甲醇体积比=30:1以及20:1的混合溶液进行梯度洗脱，于二氯甲烷：甲醇体积比=20:1 的洗脱液中得到白色固体470mg，制备色谱分离，用乙酸乙酯和正己烷结晶得到白色晶体 〇. 30g(化合物十），即为EGFR TKI-MPGF化合物，产率51.3%。
[0057] MPGF以及MPGH的高效液相色谱(HPLC)结果分别如图3和图4所示，从HPLC结果可以 看出，本发明制备得到的MPGF以及MPGH药物纯度单一，无杂质。
[0058] MPGF以及MPGH的质谱结果分别如图5和图6所示。
[0059] 实施例2本发明MPGF和MPGH对EGFR19外显子缺失突变的非小细胞肺癌细胞系PC-9 的抑制作用试验
[0060] 1、供试化合物:MPGF，MPGH，由实施例1方法制备
[0061 ] 2、试验方法：
[0062]取对数生长期的EGFR19外显子缺失突变的非小细胞肺癌细胞系PC-9细胞，以 10000个/孔接种于96孔板中，于37°C5%C02条件下培养24小时后，给药组加入供试化合物 MPGH，使其终浓度分别为0·01、0·1、1·25、2·5、5、10、20、30、40Μ，空白对照组为0.08%二甲 基亚砜，于37°C5 % C02条件下分别培养48小时和72小时后，采用MTT比色法，于波长490nm处 测定吸光度A值。根据A值计算药物对非小细胞肺癌细胞生长的半数抑制率(IC50)。
[0063] 3、试验结果
[0064]图7为通过MTT法测定MPGF处理48小时后的细胞活力结果，从图7结果可以看出 MPGF可较强抑制PC9细胞活力，IC50 = 2.5938 ± 3.1568μΜ，说明MPGF对EGFR19外显子缺失突 变的非小细胞肺癌细胞系具有明显的抑制作用(Ρ〈〇. 05)。
[0065]图8为通过MTT法测定MPGH处理72小时后的细胞活力结果，从图8结果可以看出 MPGH可较强地抑制PC-9细胞活力，IC50 = 0.3536 ±0.1891μΜ，说明MPGH对EGFR19外显子缺 失突变的非小细胞肺癌细胞系PC-9具有明显的抑制作用(Ρ〈0.05)。
[0066] 以上结果说明，本发明化合物MPGF和MPGH，与ΗΗ53035相比，对突变EGFR肺癌细胞 系PC-9具有更强的抑制增殖作用。
【主权项】
1. 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂或其可药用的盐，命名为MPGF或MP細，其特征 在于所述的MPGF的分子结构式如式I所示，所述的MPGH的分子结构式如式II所示：2. 权利要求1所述的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂或其可药用的盐在制备促进 肿瘤细胞调亡的药物中的用途。3. 如权利要求2所述的用途。其特征在于所述的促进肿瘤细胞调亡是通过抑制表皮生 长因子受体酪氨酸激酶憐酸化而实现的。4. 如权利要求2或3所述的用途，其特征在于所述的肿瘤细胞为EGFR突变的非小细胞肺 癌细胞。5. -种制备权利要求1所述的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂或其可药用的盐的 方法，包括： 1) 氮气保护下在反应瓶中加入10.0 g 3-甲氧基-4-径基苯甲酸，19. Og碳酸钟，7. Og氯 化节和80毫升乙腊，该混合物于90°C回流反应2小时，使用正己烧：乙酸乙醋体积比=4:1的 混合物作为展开剂进行化C分析;原料完全反应