吡咯并三嗪化合物的晶型的制作方法

专利名称：：吡咯并三嗪化合物的晶型的制作方法吡咯并三。秦化合物的晶型发明领域本发明涉及吡咯并三嗪化合物[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯的晶型。本发明还通常涉及含有至少一种晶型的药物组合物，以及使用这种晶型治疗诸如癌症等增殖性疾病和与受生长因子受体如HER1、HER2和HER4操控的信号传导途径相关的其它疾病的方法，并涉及获得这种晶型的方法。发明概述本发明提供了吡咯并三嗪化合物[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三"秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯的N-2晶型。在第二个实施方式中，本发明提供了吡咯并三"秦化合物[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l，2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基曱基酯的H-l—水合物晶型。在第三个实施方式中，本发明提供了吡咯并三嗪化合物[4-[[l-(3-氟苯基)曱基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三溱-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯的盐酸盐的N-l晶型。在第四个实施方式中，本发明提供了药物组合物，其含有吡咯并三漆化合物[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-曱基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯的N-2、H-l或N-1晶型中的至少一种和药学上可接受的载体或稀释剂。在第五个实施方式中，本发明提供了治疗诸如癌症等增殖性疾病的方法，所述方法包括对有此需要的温血动物施用治疗有效量的吡p各并三溱化合物[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,1-￡][1,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯的N-2、H-1或N-1晶型中的至少一种。本文用于表征特定形式如"N-1"等的名称不能理解为对具有类似或相同物理和化学特性的任何其它物质构成了限制，而应理解为，这些命名仅仅是标识符，应根据本文中同时出现的特征信息进行解释。附图简述图1显示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三。秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯N-2晶型的观察到的和模拟的粉末X射线衍射图(CuKaX=l.5418A，T=22°C)。图2显示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三溱-6-基]-氨基曱酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯H-l晶型的观察到的和模拟的粉末X射线衍射图(CuKaX=1.5418A，T=22°C)。图3显示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三n秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯N-l晶型的观察到的和模拟的粉末X射线衍射图(CuKaX=l.5418A,T=22°C)。图4显示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三"秦-6-基]-氨基曱酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯N-2晶型的示差量热曲线(DSC)。图5显示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l，2,4]三。秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯的盐酸盐的H-l晶型的示差量热曲线和热解重量损失(TGA)。图6显示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三溱-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯的盐酸盐的N-l晶型的示差量热曲线。发明详述本发明涉及在文中描述并表征的化合物Ia的晶型。以下是用于本说明书的术语的定义。除非另有说明，在此提供给某一基团或术语的初始定义单独地应用于整篇说明书中的该基团或术语，或作为其它基团的一部分。文中，"多晶型物"指含有相同化学组分但形成晶体的分子和/或离子有不同空间排列的晶型。文中，"溶剂化物"指还包含掺入晶格结构中的一种或多种溶剂分子的分在。溶剂化物可包含化学计量或非化学计量量的溶剂分子。例如，溶剂化物可损失部分溶剂从而形成含有非化学计量量溶剂分子的溶剂化物。溶剂分子可以以晶格结构中含有一个以上溶剂分子的二聚体或寡聚体出现。文中，"无定型"指分子和/或离子的非晶体的固体形式。无定型固体不呈现具有尖峰的确定的X射线衍射图。文中，当用来描述晶型时"基本纯的"表示以化合物的重量计，该化合物具有大于化合物的90重量％的纯度，包括大于90、91、92、93、94、95、96、97、98和99重量％，且还包括等于约100重量％的纯度。其余物质包括/或制备过程中形成的反应杂质和/或其加工杂质。例如，当化合物Ia的晶型的纯度大于90重量％化合物Ia的晶型时，可认为是基本纯的，其纯度通过本领域现在已知的且通常被接受的方法测定，其中剩余不到10重量％的物质包括化合物Ia的其它形式和/或反应杂质和/或加工杂质。可通过本领域已知的分析技术如色谱法、核磁共振光谱、质谱或红外光谱测定反应杂质和/或加工杂质的存在。文中，晶胞参数"分子/晶胞"指晶胞中化合物Ia的分子数。本发明至少部分地提供了化合物Ia、其盐和其溶剂化物的晶型。化合物Ia是[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三溱-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，其结构为在本发明的一个方面，提供了化合物Ia的晶型。该晶型是包含化合物Ia的纯晶型，在本文称为"N-2"型。在一个实施方式中，该N-2晶型可通过基本等于下述值的晶胞参数表征晶胞大小a=10.16Ab=10.46Ac=12.48人a=96.4度空间群PI分子/晶胞2体积1277.5A3密度(计算值)1.379g/cm3其中，在约25。C的温度下测量所述晶型。在另一个实施方式中，该N-2晶型可表征为在温度约22t时，粉末X射线衍射图包含选自下组的4个或更多个，优选地5个或更多个26值(CuKaX=1.5418A):7.3、8.6、12.0、17.8、19.3、20.1和25.6。在本发明的另一个方面，提供了化合物Ia的不同晶型。该晶型是含有化合物Ia和水的一水合物晶体，在文中称为"H-1"型。在一个实施方式中，该H-1晶型可通过基本等于下述值的晶胞参数表征晶胞大小a=8.78Ab=10.78人c=14.08Aa=99.6度卩=95.8度Y=93.3度空间群PI分子/晶胞2体积1303.9A3密度(计算值)1.397g/cm3其中，在约25t的温度下测量所述晶型。在另一个实施方式中，该H-1晶型可表征为在温度约22。C时，粉末X射线衍射图包含选择下组的4个或更多个、优选地5个或更多个26值(CuKaX=1.5418A):6.5、10.2、11.4、15.5、18.3、22.9、25.8和28.4。在本发明的另一个方面，提供了化合物Ia的盐酸盐的晶型。该晶型是在盐酸和化合物Ia之间形成的盐，在文中^皮称为"N-l"型。在一个实施方式中，该N-1晶型可通过基本等于下述值的晶胞参数表征晶胞大小a=5.32Ab=10.92人c=22.95人a=90.0度P=94.9度Y=90.0度空间群P2i分子/晶胞2体积1327.6A3密度(计算值)1.418g/cm3其中，在约25。C的温度下测量所述晶型。在另一个实施方式中，该N-1晶型可表征为在温度约22。C时，粉末X射线衍射图包含选自下组的4个或更多个、优选地5个或更多个26值(CuKaX=1.5418A):3.9、9.0、11.3、14.2、16.8、25.3和26.9。在本发明的一个实施方式中，以基本纯的形式提供化合物Ia的晶型，例如N-l、N-2或H-l型。这种基本纯形式的化合物Ia的晶型可用于药物组合物，所述药物组合物中可任选含有一种或多种例如选自下组的其它组分赋形剂、载体、以及一种其它活性药物成分或具有不同分子结构的活性化学分子。优选地，该晶型具有基本纯的相均一性，表现为在通过实验测得的PXRD图中少于10%、优选少于5%、更优选少于2%的总峰面积是由模拟PXRD图中不存在的额外峰产生的。最优选的是，晶型具有基本纯的相均一性，在通过实验测得的PXRD图中少于1%的总峰面积是由模拟PXRD图中不存在的额外峰产生的。在一个实施方式中，提供了基本由化合物Ia的N-2晶型构成的组合物。以组合物中化合物Ia的重量计，该实施方式的组合物可含有至少90重量％的化合物Ia的N-2晶型。在另一个实施方式中，提供了基本由化合物Ia的H-l晶型构成的组合物。以组合物中化合物Ia的重量计，该实施方式的組合物可含有至少90重量％的化合物Ia的H-l晶型。在另一个实施方式中，提供了基本由化合物Ia的N-1晶型构成的组合物。以组合物中化合物Ia的重量计，该实施方式的组合物可含有至少90重量％的化合物Ia的N-1晶型。用途和效用式I的吡咯并三。秦化合物，如化合物Ia,能抑制HER受体家族成员的蛋白酪氨酸激酶活性。这些抑制剂可用于治疗增殖性疾病，如那些依赖于这些受体中的一种或多种进行信号传导的疾病。这种疾病包括银屑病、类风湿性关节炎以及肺、头和颈、乳腺、结肠、卵巢和前列腺的实体瘤。化合物可作为药物組合物施用，该组合物含有式I的吡咯并三漆化合物或者其药学上可接受的盐或溶剂化物以及药学上可接受的载体。该吡咯并三溱化合物可用于治疗哺乳动物的超增殖性疾病。具体地说，预计该药物组合物可抑制与HER1(EGF受体)和HER2相关的原发性和复发性实体瘤生长，尤其是那些明10显依赖于HER1或HER2生长和扩散的肿瘤，包括例如膀胱癌、鳞状细胞癌、头癌、结肠直肠癌、食管癌、妇科癌症(如卵巢癌)、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、外阴癌、皮月夫癌、脑癌、泌尿生殖道癌、淋巴系统的癌症(如甲状l泉癌)、胃癌、喉癌和肺癌。在另一实施方式中，式I的吡咯并三"秦化合物也可用于治疗非癌性疾病，如银屑病和类风湿性关节炎。优选的式I的吡咯并三溱化合物是式Ia的吡咯并三溱化合物。更优选地，式Ia的吡p各并三溱化合物以晶型N-2提供。因此，根据本发明的另一个方面，提供了式Ia的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于在温血动物如人类中产生抗增殖效应的药物中的应用。优选地，该药物包含式Ia的化合物的N-2、H-l或N-1(盐酸盐)晶型。更优选地，该药物包含式Ia的化合物的N-2晶型。由于其抑制HER1、HER2和HER4激酶的能力，式I的吡咯并三嗪化合物可用于治疗包括银屑病和癌症在内的增殖性疾病。已显示HER1受体激酶在包括头颈癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌和乳腺癌在内的许多实体瘤中表达和激活。类似地，已显示HER2受体激酶在乳腺癌、卵巢癌、肺癌和胃癌中过量表达。下调HER2受体丰度或抑制HER1受体信号传导的单克隆抗体在临床前和临床研究中已显示出抗肝瘤功效。因此，预计HER1和HER2激酶抑制剂在治疗依赖于这两种受体的任何一个进行信号传导的肺瘤中将具有功效。此外，这些化合物在抑制依赖于HER受体杂二聚体信号传导的肿瘤中将具有功效。预计这些化合物作为单一药剂或与诸如紫杉醇、阿霉素和顺铂等其它化疗剂组合(同时或依次施用)时具有功效。由于已显示HER1和HER2信号传导能调节血管生成因子如血管内皮生长因子(VEGF)和白介素8(IL8)的表达，因此预计这些化合物除抑制肿瘤细胞增殖和存活外还能抑制血管发生因此具有抗肺瘤功效。已显示HER2受体参与类风湿性关节炎中滑液细胞的超增殖，并且可能促进该炎性疾病状态的血管生成组分。因此，预计本发明所述的抑制剂具有治疗类风湿性关节炎的功效。这些化合物抑制HER1的能力进一步促进了它们作为抗血管生成剂的用途。可参见在此引用的以下文献和参考资料SchlessingerJ.,"Cellsignalingbyreceptortyrosinekinases",Cell103(2)，第2U-225页(2000);Cobleigh，M.A.，Vogel,C.L.，Tripathy,D.，Robert,N.J.，Scholl，S.，Fehrenbacher，L.,Wolter，J.M.，Paton，V"Shak,S.，Lieberman,G.和Slamon,D.J.，"Multinationalstudyoftheefficacyandsafetyofhumanizedanti-HER2monoclonalantibodyinwomenwhohaveHER2隱overexpressingmetastaticbreastcancerthathasprogressedafterchemotherapyformetastaticdisease",J.ofClin.Oncol17(9)，第2639-2648页(1999);Baselga，J.，Pfister，D.,Cooper,M.R.，Cohen,R.，Burtness，B.，Bos，M.，D'Andrea，G.,Seidman,A.，Norton,L.，Gunnett，K.，Falcey，J.,Anderson,V.,Waksal，H.和Mendelsohn,J.，"PhaseIstudiesofanti-epidermalgrowthfactorreceptorchimericantibodyC225aloneandincombinationwithcisplatin",J.Clin.Oncol.18(4)，第904-914页(2000);Satoh，K.，Kikuchi，S.，Sekimata，M.，Kabuyama，Y.,Homma，M.K.禾口HommaY.，"InvolvementofErbB-2inrheumatoidsynovialcellgrowth",ArthritisRheum.44(2)，第260-265页(2001)。本文之前定义的抗增殖治疗可作为单一疗法采用，或者除式I的吡咯并三嗪化合物外可涉及一种或多种其它物质和/或治疗。这种联合治疗可通过同时、依次或单独施用各治疗組分而实现。式I的吡咯并三溱化合物也可与已知的4元癌剂和细胞毒剂以及包括放疗在内的疗法组合J吏用。如果^皮制成固定剂量，这种組合产品将采用下述剂量范围内的式I的吡咯并三"秦化合物和批准剂量范围内的其它药物活性剂。当组合制剂不适用时，可先后使用式I的吡咯并三,化合物和已知的4元癌剂或细胞毒剂以及包括放疗在内的疗法。在医学胂瘤学领域，使用不同治疗形式的組合来治疗各癌症患者是常见的操作。在医学胂瘤学中，除上面定义的抗增殖治疗，这种联合治疗的其它内容有手术、放疗或化疗。如上所述，对式I的吡咯并三溱化合物的抗增殖功效感兴趣。预计这种化合物可用于包括癌症、银屑病和类风湿性关节炎在内的广泛的疾病状态。更具体地说，式I的化合物可用于治疗各种癌症，其中包括但不限于以下这些-癌，包括膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、包括小细胞肺癌在内的肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌、和包括鳞状细胞癌在内的皮肤癌；-间质细胞来源的肝瘤，包括纤维肉瘤和4黄紋肌肉瘤；-中枢和外周神经系统的肿瘤，包括星形细胞瘤、成神经细胞瘤、胶质瘤和神经鞘瘤；和-其它肺瘤，包括黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎瘤和骨肉瘤。鉴于激酶在调节细胞增殖中的关键作用，抑制剂可作为可逆的细胞生长抑制剂，它可用于治疗任何以细胞异常增殖为特征的疾病过程，例如良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病、神经纤维瘤病、肺纤维化、关节炎、银屑病、肾小球肾炎、血管成形术或血管外科后的再狹窄、肥厚性瘢痕形成和炎性肠病。式I的吡咯并三溱化合物，包括式Ia的吡咯并三"秦化合物，尤其适用于治疗具有酪氨酸激酶活性高发病率的胂瘤，如结肠、肺和胰腺肿瘤。通过施用含有式I的吡咯并三嗪化合物的組合物(或组合)可减緩哺乳动物宿主的肝瘤发展。式I的吡咯并三嗪化合物还可用于治疗癌症之外的与通过生长因子受体如HER1(EGF受体)、HER2或HER4进行的信号传导途径相关的疾病。含有活性成分的本发明的药物组合物可采取适合口服的形式，如片剂、含片、锭剂、水性或油性悬剂、可分散的粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、或者糖浆剂或酏剂。意在用于口服的組合物可按照药物组合物制造领域已知的任何方法制造。所述药物组合物可采取无菌可注射水性溶液的形式。可采用的可接受的载体和溶剂包括水、林格溶液(Ringer'ssolution)和等渗氯化钠溶液。当将本发明的化合物施用至人类对象时，日剂量将通常由处方医生决定，该剂量一般会根据随患者的年龄、体重、性别和反应以及患者症状的严重性而改变。如果被制成固定剂量，这种组合产品将采用上述剂量范围内的本发明的化合物和批准剂量范围内的其它药物活性剂。当组合制剂不适用时，可先后施用式I的化合物和已知的抗癌剂或细胞毒剂。本发明不限于施用顺序；可在施用已知抗癌剂或细胞毒剂之前或之后施用式I的化合物。该化合物的剂量范围约为0.05-200毫克/千克/天，优选地低于100毫克/千克/天，以单剂量或2-4次分份剂量施用。在一个实施方式中，提供了含有N-2、H-l或N-1(盐酸盐)晶型的化合物Ia以及药学上可接受的载体或稀释剂的药物组合物。优选N-2晶型。含有N-2形式的药物组合物可同时具有化学和/或物理稳定性，从而能被制备成具有可接受的均匀性和/或储存稳定性的剂型。N-2形式不易于流失水分和转化成其它形式。制备方法除非另有说明，所有温度用摄氏度(t:)表示。制备型反相(RP)HPLC纯化在C18反相(RP)柱YMCS5ODS柱上进行，用含0.1%TFA的90%甲醇水溶液作为缓冲液进行洗脱，并在220nm监测。进行分析型HPLC时采用0.2%磷酸代替TFA。所有合成化合物至少通过质子NMR和LC/MS表征。在反应期间，除非另有说明，用疏酸镁(MgS04)干燥有机提取物。用以下缩写来表示常用试剂。Et20:二乙醚、Na2S04:硫酸钠HC1:盐酸、NaOH:氢氧化钠、NaCl:氯化钠、Pd/C:碳载钯、K2HP04:磷酸氢钾、K2C03:碳酸钾、NaHC03:碳酸氢钠、MgS04:硫酸镁、LiOH:氢氧化锂、TMSC1:三甲基氯硅烷、H2S04:疏酸、RT:室温、TFA:三氟醋酸、DMF:二甲基甲酰胺。其它缩写有，h:小时、L:升、ml:毫升。可用各种方法制备晶型，例如其中包括从合适的溶剂结晶或重结晶、升华、从熔融物生长、从其它相固态转化、从超临界液体结晶、以及喷射喷雾(jetspraying)。使晶体形式从溶剂混合物中结晶或重结晶出来的技术包括，例如，蒸发溶剂、降低溶剂混合物的温度、在分子和/或盐的过饱和溶剂混合物中加入晶种、冻干溶剂混合物以及在溶剂混合物中加入抗溶剂(反萃溶剂)。可采用高通量结晶技术来制备包括多晶型物的晶型。药物晶体(包括多晶型物)、制备方法以及药物晶体的表征描述于Solid-stateChemistryofDrugs,S.R.Bym，R.R.Pfeiffer和J.G.Stowell，第二版，SSCI,WestLafayette,Indiana(1999)。就采用溶剂的结晶技术而言，一种或多种溶剂的选择通常取决于一种或多种因素，如化合物的溶解度、结晶技术以及溶剂的蒸气压。可采用溶剂组合，例如，可将化合物溶于第一溶剂以提供溶液，然后加入抗溶剂以降低化合物在该溶液中的溶解度并使晶体形成。抗溶剂是化合物在其中具有低溶解度的溶剂。在一种制备晶体的方法中，将化合物悬浮于合适溶剂和/或在合适溶剂中搅拌以得到浆状物，可加热该浆状物以促进溶解。术语"浆状物"在文中表示化合物的饱和溶液，它可含有额外量的化合物以在给定温度下提供化合物和溶剂的不均匀混合物。可在任何结晶混合物中加入晶种以促进晶体。可通过接种来控制特定多晶型物的生长或控制晶体产品的粒度分布。因此，所需晶种量的计算取决于可用晶种的大小以及所需平均产品粒度，如例如"ProgrammedCoolingofBatchCrystallizers"，J.W.Mullin和J.Nyvlt，ChemicalEngineeringScience，1971，26，369-377所述。通常，需要小尺寸的晶种来有效控制一批中晶体的生长。可通过筛选、研磨或微粉化大的晶体或通过溶液的微结晶来产生小尺寸的晶种。在研磨或微粉化晶体时需要小心以免所需晶型的结晶性发生任何改变(即变为无定型或其它多晶型物)。可在真空下过滤冷却的结晶混合物，并可用合适的溶剂如冷的重结晶溶剂洗涤分离的固体，并可在氮气吹扫下干燥以提供所需晶型。可通过诸如固态核磁共振、示差扫描量热法、X射线粉末衍射等合适的光谱或分析技术分析分离的固体以确保形成优选的产物晶型。以最初用于结晶过程的化合物的重量计，所得晶型的量超过约70重量％的分离产物，优选超过90重量o/。的分离产物。需要的话可对产物进行共研磨或过筛以除去块状产物。可从制备化合物Ia的最终过程的反应介质中直接制备晶型。例如，这可通过在最终的工艺步骤中加入能使化合物Ia结晶的溶剂或溶剂混合物来实现。或者可通过蒸馏或溶剂添加技术来获得晶型。用于此目的的合适溶剂包16溶剂和极性溶剂，包括质子极性溶剂如醇类和非质子极性溶剂如酮类。可通过诸如粉末X射线衍射(PXRD)或固态核磁共振波谙学的技术来确定样品中是否存在一种以上的晶型和/或多晶型物。例如，在实验测得的PXRD图与模拟PXRD图比较中存在额外的峰可能表明样品中存在一种以上的晶型和/或多晶型物。可从单晶X射线数据计算模拟PXRD，参见Smith，D.K.，"AFORTRANProgramforCalculatingX-RayPowderDiffractionPatterns",Lawrence放射实验室，Livermore,California,UCRL-7196(1963-4)。可采用各种技术表征本发明的化合物la的形式，其操作是本领域普通技术人员熟知的。可采用基于固定分析温度下对某形式单个晶体晶胞测量的单晶X射线衍射表征和区分各种形式。关于晶胞的详细描述提供于Stout和Jensen,X-RayStructureDetermination:APracticalGuide，Macmillan乂>司，NewYork(1968)，第3章，其内容通过引用纳入本文。或者，可根据观察到的原子份数坐标来表征原子在晶格内的空间关系的独特排列。另一种表征晶体结构的方法是通过粉末X射线衍射分析，其中将衍射曲线与代表纯粉末材料的模拟曲线进行比较，这两种曲线都在相同分析温度下获得，且将待检形式的测量值表征为一系列26值(通常为4个或更多)。可采用其它表征形式的方法，如固态核磁共振(NMR)、示差扫描量热法、热成像法以及大体检测晶体或无定型形态学。这些参数也可組合应用以表征待检形式。可通过在标准操作条件和温度下进行的单晶X射线衍射测量来表征N-l、N-2和H-l晶型。可在例如25°C的样品温度下测量近似晶胞大小(单位埃(A))以及晶胞体积、空间群、分子/晶胞和晶体密度。可用下述一种或多种检测方法分析各晶型。单晶X射线测量收集实施例1-3各自的单晶X射线数据。进行该分析时使用Bruker-NoniusCAD4系列衍射仪(BrukerAxs公司，MadisonWI);或采用CuKa辐射(人=1.5418A)的Bruker-NoniusKappaCCD2000系统。通过对实-险书亍射4义的25个大角度反射的设定进行的最小二乘分析获得晶胞参数。采用恒温CuKa辐射(X=1.5418A)和6-26变量扫描技术测量强度，且对其仅进行Lorentz极化因子校正。在扫描的半禾呈时间中在扫描的极端(extremes)收集背景计数(backgroundcounts)。用Collect程序套件(R.Hooft,NoniusB.V.(1998))中的HKL2000软件包索引和处理测得的强度数据。当指示时，在数据采集时用Oxford低温系统的令气流^令却晶4本。可通过直接方法解出结构并用具有最小局部修饰的SDP软件包SDP(结构测定包，Enraf-Nonius，Bohemia,N.Y.)或结晶软件包MAXUS(maXus解析和细4匕專欠j牛套装S.Mackay,CJ.Gilmore，C.Edwards,M.Tremayne,N.Stewart和K.Shankland)基于观察到的反射细化结构。maXus是一种从衍射数据解析和细化晶体结构的计算机程序。粉末X射线衍射用BrukerGADDS(通用面积检测器衍射系统)手动x平台测角仪获得X射线粉末衍射(PXRD)数据。将粉末样品置于直径为1mm或更小的薄壁玻璃毛细管内；在数据收集期间旋转该毛细管。样品检测器的间距为17cm。辐射为CuKa(X=1.5418A)。收集3<26<35°的数据，样品曝光时间至少300秒。通过全矩阵最小二乘法细化衍生的原子参数(坐标和温度因子)。细化中最小化的函数是2w(IF。HFcl)2。R被定义为2IIFHFII/2IF。1,而Rw=[Ew(IF。HFcl)2/Ew|F。|2]1/2，其中w是基于观测强度误差的适当加权函数。在细化的所有阶段检测差分图。氢原子被引入具有各向同性温度因子的理想位置，但没有氢参数发生改变。融点通过热台显微术测定晶体的融点。将晶体置于玻璃载玻片上，盖上盖玻片，并用固定在显孩i镜上的LinkhamLTS350热台(LinkhamScientificInstruments公司，Tadworth,英国)加热。从室温到300°C的加热速率控制在1(TC/分。从视觉上观察晶体以了解相转变、双折射变化、不透明度、融化和/或分解证据。示差扫描量热法用TAInstrumentsQ1000型仪器对各晶型进行示差扫描量热法(DSC)。每次分析时用100毫升/分钟的超高纯氮气吹扫DSC小室/样品室。用高纯铟校准该仪器。从25-300。C的加热速率为1(TC/分。将根据样品重量标准化的热流对测得的样品温度绘图，该数据的单位为瓦特/克("W/g")。该图中有指向下方的吸热峰。评价外推的开始温度的吸热炫化峰(融点)。以下非限制性实施例例证了本发明。实施例1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>o，、、、、0，^[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯(Ia)A.制备2-,基氨基-3-鞋基-丙酸和2-二千基氨基-3-鞋基-丙酸在反应容器中加入固体盐酸L-丝氨酸甲酯(l.OOO当量)。加入甲醇(2.85体积)并开始振荡。历时10分钟加入三乙胺(l当量)同时维持温度在约14-18°C。持续搅拌直到所有固体溶解。将混合物冷却至10°C,历时15分钟加入苯甲醛(0.99当量)同时维持温度在约11-15°C。反应在约8-12。C维持30分钟。历时2小时加入固傳L硼氢化钠(4当量氢化物)同时维持温度在约10-20°C。反应在约14-16。C维持30分钟，然后通过HPLC分析。在另一烧瓶中加入甲醇(1.15体积)和7jc(1.72体积)。加入50重量％的氢氧化钠水溶液(3.04当量)，并将所得溶液冷却至15°C。历时1小时在该混合物中加入Schiff碱，将内部温度维持在16-22°C。反应在20°C维持30分钟并通过HPLC分析甲基酯的消耗。加水(l.72体积)，然后加入12.2M的浓HC1水溶液(2.67当量)并将温度维持在15-25°C以将pH调至9.5。将混合物过滤并用2份水(每份0.58体积)洗涤滤饼。将洗涤液与分液漏斗的滤液合并。合并的水性部分用乙酸乙酯洗涤两次(每次5.75体积)。将该物质从分液漏斗转移至烧瓶。将混合物从25。C冷却至15°C，加入12.2M的浓HC1水溶液(0.89当量)直到混合物的pH达到6.5，同时将温度维持在17-22°C。将混合物在5°C维持15-25小时，然后通过过滤漏斗收集固体。滤饼用两份水(每份1.43体积)和两份庚烷(每份1.43体积)洗涤。将湿的固体转移到干燥盘中并于45。C干燥21小时，产率为61%。B.制备4-千基-5-氧代-吗啉-3-羧酸在反应器中加入N-千基-L-丝氨酸(l.O当量)和THF(6.1体积)。将所得溶液冷却至0土5。C并加入预冷的(0-5。C)碳酸钾(3.0当量)的水(6.1体积)溶液。然后经加料漏斗加入氯乙酰氯(1.4当量)并维持内部温度低于5°C。使该两相反应混合物在0±5°C陈化约30分钟。陈化后对混合物取样进行HPLC分析。如果6%以上的面积存在剩余的N-千基-L-丝氨酸则再加入氯乙酰氯。一旦满足反应完成的要求，加入50重量％氢氧化钠并保持内部温度为5-10。C直到pH保持>13.5不变。当HPLC分析显示小于1%的面积(总和)为中间体时认为反应完成。将混合物加热至25"C并加入庚烷(2.03体积)。将混合物迅速搅拌10分钟，然后将各相分离。弃去上部有机相，再用庚烷(3.04体积)处理富含水的相。迅速搅拌10分钟后使各相静置并弃去上部的有机相。将富含水的部分冷却至-5至0。C，加入37wt。/。盐酸并维持物料温度〈(TC直到pH<2。将所得浆状物在-10至Ot保持至少4小时。用Whatman1号滤纸或等价物过滤该浆状物并用预冷的(3-7。C)水(2x4.57体积)洗涤。将湿的滤饼在40-45t真空干燥。干燥后获得1.475kg(84.9%，未校正)4-千基-5-氧代-吗啉-3-羧酸。HPLC保留时间1.82分钟(YMCS5ODS柱4.6x50mm,4分钟含0.2%磷酸的10-90%甲醇水溶液梯度，4mL/分钟，在220nm检测)；手性HPLC保留时间7.94分钟，e.e.100%,(ChiralcelOJ-R，150x4.6mm,5jiM，洗脱液MeOH:0.2%H3P04水溶液[50:50]，流速lmL/分钟，210nm)。C.制备盐酸[R-(4-千基-吗啉-3-基)]-甲醇氮气下在4-千基-5-氧代-吗啉-3-羧酸(1当量)和无水THF(16体积)的混合物中边搅拌边加入三乙胺(1.19当量)。在此混合物中加入硼烷-甲基^6克醚复合物(7.45当量)，加入的速率维持反应混合物的温度低于10°C。加料历时1小时。使反应混合物在氮气下温和回流(65t)5.5小时。冷却混合物并緩慢加入MeOH(1.39体积)(加料期间维持内部温度低于25°C,加料历时1小时)。在此所得混合物中加入水(4.18体积)并将混合物室温搅拌过夜。将混合物真空浓缩并用2N氢氧化钠水溶液(4.59当量)和水(1.74体积)稀释。用乙酸乙酯(2x7体积)萃取该混合物。合并的乙酸乙酯萃取液用20%氯化钠水溶液(4.18体积)洗涤。然后真空浓缩乙酸乙酯萃取液以得到粗制油状物。用乙酸乙酯(10.2体积)和甲醇(0.52体积)稀释该油状物。在该溶液中逐滴加入三甲基氯硅烷(352mL，0.61体积)直到溶液的pH呈酸性。加入三甲基氯硅烷期间维持物料温度低于20°C。在加料结束后历时2小时将混合物冷却至0。C，通过过滤收集沉淀，以92%的产率得到白色固体状的盐酸[R-(4-千基-吗啉-3-基)]-甲醇(547g)。HPLC:样品制备取20uL用1mL苛性碱处理15分钟；6.19分钟时AP=98%(YMCPackODS-A,3pm柱，6.0x150mm,20分钟含0.2%磷酸的10-90%乙腈水溶液梯度，2mL/分钟，在220nm和254mn监测)。LC/MS:M+H=208手性HPLC:RT=8.38min，e.e.100%，(ChiralcelOD-RH，150x4.6mm,洗脱液乙腈MeOH:20mm碳酸氢铵，pH7.8(15:15:70)，流速1mL/分钟，210nM)D.制备3-((R)-鞋基甲基)-吗啉-4-羧酸叔丁酯搅拌盐酸[R-(4-千基-吗啉-3-基)]-甲醇(1当量)，K3P04水溶液(4.6当量)和EtOAc的混合物直到观察到澄清的两相。分离EtOAc层并用新鲜的EtOAc萃取含水层。将合并的EtOAc层加入含20重量％Pd(OH)2/C(湿的，含50%水，以进料重量计为0.10当量)的烧瓶。加入二碳酸二叔丁酯(1.2摩尔)。将混合物在15psi下氢化4小时。通过HPLC发现氢化完全后通过硅藻土过滤混合物并将溶剂更换成环己烷。从环己烷(7-10体积)结晶产物得到白色固体状的标题化合物(产率为82%)。^NMR(CDCl3)51.45(s,9H)，3.17(m,1H),3.47(dt，1H，J=3.1，11.4Hz)，3.56(dd,1H，J=3.5,11.9Hz)，3.7-4.0(m,6H);13CNMR(CDC13)S28.21，40.01，52.09，59.59，65.97，66.49，80.23，155.30;MS:218(M+H)+;doHwN04的计算值C,55.28;H，8.81;N,6.44。实测值C,55.45;H，8.87;N，6.34;Pd〈5ppm;HPLC保留时间5.28分钟(YMCPackODS-A，3pm，4.6x50mm柱，10分钟梯度，2.5mL/分钟)；100%ee[手性HPLC保留时间13.6分钟(ChiralcelOD-RH,5|im,4.6x150mm柱，20分钟wasocratic法，lmL/分钟)]。E.制备5-硝基-l-(3-氟千基)吲唑(16)在容器内装入5-硝基吲唑(1当量)、碳酸铯(l.l当量)和DMF(5体积)。将混合物加热至70-80°C并历时75分钟加入3-氟,基溴。通过HPLC检测到反应完成(混合的异构体中的硝基"引唑〈2AP)，然后冷却至20。C。将该盐过滤并用DMF(2.7体积)洗涤滤饼。在15-21t:时通过加水(1.35-1.45体积)将产物结晶。将晶状浆状物放置4小时，滤出晶体并依次用2:1的DMF:水混合物(2.1体积)、水(2体积)和3:1的冷CAN:水混合物(1.5体积)洗涤。在低于45°C时干燥湿的滤饼直到L0D<1%，产率约为49%。力NMR(CDCl3)55.64(s，2H),6.87(d，1H，J=9.4Hz)，6.95(m,2H),7.30(m,1H)，7.42(d，1H,J=9.2Hz)，8.23(dd，1H,片10Hz和2Hz)，8.26(s，1H),8.72(d，1H，J=2Hz);MS:272(M+H)+;HPLC保留时间6.99分钟(YMCODS-A3um,4.6><50mm柱，10分钟梯度，2.5mL/分钟)。化合物16F.制备l-(3-氟-千基)-lH-吲唑-5-基胺(化合物c)化合物C在氢化器中加入千基硝基吲唑(l当量)，加入THF(8体积)并在30-40°C下于15psi下氢化。将反应混合物放置约1小时(HPLC显示s,m,3。/c0冷却至25°C,滤出催化剂并用THF(0.9体积)洗涤混合物。将混合物转移至另一容器，再用THF(0.4体积)冲洗，在常压下蒸馏至所需体积(5.5体积)，并在47-60。C下历时1小时加入庚烷(15体积)。历时1.5小时将该浆状物冷却至18-23°C。将该浆状物放置l小时，过滤，用THF/庚烷(1:4，10.4体积)洗涤并在低于45°C的烘箱内干燥(LOD<1%)，产率为84%。融点=130°C。HPLC保留时间9.09分钟。G.制备4-[l-(3-氟-千基)-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][1,2,4]三嗪-6-羧酸乙酯(19)在三颈烧瓶内加入5-甲基-4-氧代-3,4-二氢-吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-羧酸乙酯(l.OO当量)和无水甲苯(15体积)。一次性加入POCl3(1.2当量)，然后緩慢加入DIEA(l.l当量)，其加入速率使温度维持在低于30。C。历时24小时将所得悬浮液加热至111°C，悬浮液在80t时变得均匀。用2MMeNH2/THF(10pL反应混合物，20pLMeNH2/THF,溶于200pL乙腈)淬灭后通过HPLC监测反应。反应完成后将反应物冷却至-2t并加入K2HP04(3.98当量)的水(15.6体积)溶液同时温度维持在低于10°C。将溶液在-22t搅拌20分钟。通过硅藻土垫过滤所得浅色悬浮液并分离各层。依次用23.5重量％K2HP04的H20(2.94体积)溶液和水(2.47体积)洗涤有机层。将溶液过滤并通过在22-58。C加热来浓缩溶液；直到HPLC显示曱苯相对4-氯-5-甲基吡咯并[2,l-f][1,2,4]三嗪-6-羧酸乙酯的比率为26-36%。将溶液从58°C冷却至40-50°C。在所得悬浮液中加入l画(3-氟画千基)隱lH画"引唑画5-基胺(0.988当量)和DIEA(l.l当量)。将反应物加热至70-80。C并维持在该温度直到HPLC显示反应完成。将溶液冷却至55°C并加入异丙醇(15.5体积)。历时1.8-2.2小时将混合物从55°C冷却至22°C,然后过滤。用冷的异丙醇(2x5.5体积)洗涤滤饼并在5(TC以下真空干燥，得到乳白色晶体固体状产物，产率为84%。^画R(500MHz，CDC13)51.39(t,3H,J=7.15Hz),2.93(s，3H)，4.35(q，2H，J=7.15Hz),5.59(s,2H)，6.86(d，1H，J=9.34H),6.97(m，2H)，7.26(ddd,1H，J=6.04,8.24,14.29Hz),7.35(d,1H，J=8.80Hz)，7.42(brs，1H)，7.49(dd，1H,J=1.65，8.80Hz)，7.91(s，IH)，8.00(s，IH)，8.07(s，IH)，8.09(s，1H);MS:445(M+H)+;HPLC保留时间3.847分钟(YMCS5ODS4.6x50mm柱，4分钟梯度，3mL/分钟)。H.制备4-[l-(3-氟-千基)-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][1,2,4]三溱-6-羧酸(20)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>在装有机械搅拌器的烧瓶中加入4-[1-(3-氟-千基)-111-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-fj[l,2,4]三口秦-6-羧酸乙酯(19)(1当量)、THF(4体积)和MeOH(2.5^本积)。将悬浮液冷却至5°(:并緩慢加入50%NaOH(5.3当量)同时维持温度低于15°C。历时4小时使所得溶液升温至60°C，然后冷却至25°C。在反应体系中加入THF(7体积)并緩慢加入浓HC1(9.95当量)至pH达到3同时维持温度低于35。C。所得浆状物在室温下搅拌过夜，然后过滤。滤饼用H20(3x5体积)洗涤并在滤器上千燥1小时。滤饼用庚烷(lxl体积)洗涤并于5(TC真空干燥以得到灰白色固体状产物，产率为88%。^NMR(500MHz5DMSO-J6)S2.86(s，3H),5.71(s，2H)，7.04(m,2H)，7.10(dd，m，J=1.65，8.80Hz)，7.17(d，1H，J=7.70Hz)，7.25(t,1H，J=7.70Hz)，7.37(dd，(1H，J=7.70，13.74Hz)，7.57(dd，1H，J=1.65，8.80Hz)，7.73(d,1H，J=8.80Hz),7.87(s，1H)，8.05(d,1H,J=8.35Hz)，8.16(s，1H)，8.83(s，1H)，12.47(s,1H);MS:417(M+H)+;HPLC保留时间3.350分钟(YMCS5ODS4.6x50mm柱，4分钟梯度，3mL/分钟)。I.制备3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)曱基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2,l-f][l,2，4]三。秦-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基]-4-吗啉羧酸，(3S)-l,l-二甲基乙基酯(21)200680028886.4说明书第25/31页<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>在烧瓶中加入4-[1-(3-氟-苄基)-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三。秦-6-羧酸(20)(1当量)和甲苯(15体积)。通过共沸蒸馏除去残余的水并分析上清液的水含量(KF:<200ppm7jc)。然后在约77°C时在烧瓶中加入3-鞋基甲基-吗啉-4-羧酸叔丁酯(1.05当量)。在77-85。C之间加入三乙胺(1.2当量)和二苯基磷酰基叠氮化物(1.2当量)。在约87t加热反应物直到通过HPLC发现反应完成。将反应物冷却至25°C,用THF(15体积)稀释并分别用10%K2CO3(10体积)、饱和NaCl(104本积)和水(10体积)洗涤。精致过滤(polishfilter)富含产物的有机层并在室压下蒸馏直到坩锅温度HO(TC。加入甲苯将终体积调至15体积(如果必要的话)。将混合物冷却至80°C，加水(l当量)并使产物结晶。历时l小时将浆状物冷却至25t并保持17小时。通过过滤收集固体并用甲苯(2x2体积)冲洗滤饼。将固体空气干燥过夜，然后在50。C真空干燥以得到产物，产率为82%。iHNMR(DMSO)S1.38(s,9H)，2.53(m，3H)，3.35-4.34(m，顧)，5.71(s，2H)，7.03-7.37(m，4H)，7.57(dd，1H，J=9Hz和1.7Hz)，7.70(d，1H，J=9Hz)，7.82(s,1H),8.08(d，1H，J=lHz),8.15(s，1H)，8.58(s，1H);MS:631(M+H)+;HPLC保留时间5.01分钟(YMCODS-A3um，4.6x50mm柱，IO分钟梯度，2.5mL/分钟)。J.制备[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l，2,4]三。秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯(Ia)在烧瓶中加入3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)甲基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基]-4-吗啉羧酸，(3S)-l,l-二甲基乙基酯(21)(1当量)，7体积水、1体积甲醇和浓HC1溶液(5.0当量)。将此浆状物加热至70。C并保持在该温度直到通过HPLC发现反应完成。反应完成后在热的反应混合物中加入水(3体积)，然后将混合物冷却至45-55。C。将混合物过滤，然后用乙酸乙酯(2x6体积)萃取滤液。在分离的水相中加入乙酸乙酯(10体积)、甲醇(2-3体积)和BHA(2.7重量％)。用50%NaOH溶液将混合物的pH调至pH9-13。将各相分离。收集富含产物的有机层并历时15-30分钟在55-60。C的混合物中加入水(10体积)。加入水之后将混合物在55-60。C保持30分钟，然后历时1小时冷却至19-25°C。将产物滤出并用乙酸乙酯(2x3体积)洗涂。加入乙酸乙酯(15体积)和BHA(2.7重量％)使滤饼重新形成浆状物。在室压下蒸馏所得浆状物以除去水分。将混合物的体积调至8-10体积同时维持物料温度在74-78°C。历时1小时将混合物冷却至19-25°C。通过过滤收集固体并用乙酸乙酯(2.2体积)洗涤滤饼。在45。C真空干燥固体以得到晶体固体(N-2形式)，产率为77%(HPLCAP99.2)。^NMR(DMSO)52.51(m，1H)，2.57(s，3H)，3.10-4.04(m，IOH)，4.35(m，2H)，5.71(s，2H)，7.03-7.13(m，3H)，7.37(m,1H)，7.59(m，1H)，7.71(m，1H)，7.83(s,2H)，8.07(s，1H)，8.15(s,1H)，8.61(s，1H)，9.47(s，1H)，9.87(s,1H);MS:531(M+H)+;HPLC保留时间4.55分钟(YMCODS-A3um,4.6x50mm柱，10分钟梯度，2.5mL/分钟)。实施例2制备化合物Ia的一水合物晶型H-1在1升的烧瓶中加入3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)甲基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，l-f][l,2，4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]曱基]-4-吗啉羧酸，(3S)-l，l-二甲基乙基酯(39.8g，63.2mmol)和甲醇(300mL)。历时15分钟在此悬浮液中加入浓HCl(26mL，316mmol)(最高温度达到30°C)。将所得溶液在55t搅拌2小时。将反应物冷却至25。C并用DM水(600mL)稀释。所得溶液通过5号滤纸过滤以除去小颗粒。将溶液转移至2升的分液漏斗。加入乙酸乙酯(500mL)并将分液漏斗的内容物搅拌5分钟。使各相分离。收集富含产物的下层并如上所述再用乙酸乙酯(300mL)洗涤。将富含产物的下层加入2升的烧瓶。加入乙酸乙酯(30011110并搅拌(>11=1.3)。用50%NaOH溶液(约25mL)将混合物的pH调至pH10。将混合物转移至2升的分液漏斗。使各相分离。收集富含产物的有机层。水层用乙酸乙酯(300mL)萃取。用MgS04干燥合并的富含产物的有机萃取液。过滤除去MgS04。将滤液真空浓缩成褐色固体，以得到31.8克化合物Ia。元素分析%计算值％C，59.17;%H，5.32;%N,20.45。%实测值％C，58.94;%H，5.31;%N，20.07。KF湿度3.18%(0.97摩尔)。制备化合物la的一水合物晶型H-l(另一种方法)在烧瓶中加入3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)曱基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2,l-f][l,2,4]三"秦-6-基]氨基]羰基]氧基]曱基]-4-吗啉羧酸，(3S)-l,l-二甲基乙基酯(l当量)、7体积水、1体积甲醇以及浓HC1溶液(5.0当量)。将此浆状物加热至70。C并维持在该温度直到通过HPLC显示反应完成。反应完成后在热的反应混合物中加入水(3体积)，将混合物冷却至45-55t。将混合物过滤，然后用乙酸乙酯(2x6体积)萃取滤液。在分离的水相中加入乙酸乙酯(IO体积)和BHA(2.7重量％)。用25%NaOH溶液将混合物的pH调至pH9-13。将该混合物在19-25。C保持2小时。从混合物中滤出结晶产物，并依次用水(4体积)和乙酸乙酯(4体积)洗涤。将湿的滤饼空气干燥后得到白色晶体固体状的一水合物(HPLC99.2AP)。实施例3制备N-1晶型化合物Ib<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>化合物lb是化合物la的盐酸盐。在5升的烧瓶中加入3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)甲基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基]-4-吗啉羧酸，(3S)-l,l-二甲基乙基酯(330g，0.51mol)和甲醇(2.5L)。历时15分钟在此悬浮液中加入浓HCl(170mL，2.04mol)(最高温度达到30°C)。所得溶液在55。C搅拌2小时。将反应物冷却至25°C并用DM7jc(5L)稀释。所得溶液通过5号滤纸过滤以除去小颗粒。将溶液转移至10升的容器内。加入乙酸乙酯(5L)并搅拌5分钟。使各相分离。收集富含产物的下层并如上所述再用乙酸乙酯(2L)洗涤。将富含产物的下层重新加入10升的反应器内。加入乙酸乙酯(2.5L)并搅拌(pH=1.3)。用50%NaOH溶液(约190mL)将混合物的pH调至pH9.5-10。使各相分离。收集富含产物的有机层。水层用乙酸乙酯(2.5L)萃取。过滤合并的富含产物的有机萃取液(通过5号滤纸)。将滤液真空浓缩成固体。滗去固体上的水。使用乙酸乙酯(2L)和甲醇(2L)将固体转移至10升的反应器内。将所得悬浮液加热至50°C以得到均匀溶液。历时15分钟緩慢加入浓HC1(41mL,0.49mol)。有固体从溶液中结晶出来并形成浆状物。历时l小时将该浆状物冷却至25°C。过滤收集该固体并用1:1乙酸乙酯甲醇(lx500mL)和乙酸乙酯(1x500mL)沖洗滤饼。将此结晶固体空气干燥1小时，然后在45t真空干燥以得到204克化合物Ib，其为化合物Ia的盐酸盐。(HPLCAP99.6)。&NMR(DMSO)52.51(m,1H),2.57(s,3H),3.10-4.04(m，IOH)，4.35(m，2H),5.71(s，2H)，7.03-7.13(m，3H)，7.37(m,1H)，7.59(m，1H)，7.71(m，1H),7.83(s，2H)，8.07(s，1H)，8.15(s，1H),8.61(s，1H)，9.47(s，1H)，9.87(s,1H);MS:531(M+H)+;HPLC保留时间4.55分钟(YMCODS画A3um，4.6x50mm柱，10分4中梯度，2.5mL/分钟)。实施例4[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯(Ia)的晶型通过X射线和其它技术表征实施例1-3中制备的晶型。将晶胞参数制成表2的表格。这些晶胞参数获自单晶X射线结晶学分析。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>表3粉末X射线衍射图的若干峰(26值)(CuKaX=1.5418A)<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>图5显示了化合物Ia的一水合物形式(H-l)的热解重量损失。在温度为115°C时H-1形式显示出约3.4重量％的脱水重量损失。一水合物形式H-1脱水的理论重量损失为3.5重量％。权利要求1.化合物Ia的晶型其包含形式N-2。2.如权利要求1所述的晶型，其基本上由形式N-2形式組成。3.如权利要求2所述的晶型，其中所述N-2形式为基本纯的形式。4.如权利要求l所述的晶型，其特征在于，其晶胞参数基本等于下述值:晶胞大小a=10.16Ab=10.46Ac=12.48Aa=96.4度(3=103.3度Y=93.7度空间群PI分子/晶胞2其中，在温度约25°C时测量所述晶型。5.如权利要求l所述的晶型，其特征在于，在温度约22t:时，粉末X射线衍射图包含选择下组的4个或更多个26值(CuKa^1.5418A):7.3、8.6、12.0、17.8、19.3、20.1和25.6。6.如权利要求l所述的晶型，其具有以下一个或多个特征a)基本等于下述值的晶胞参数晶胞大小a=10.16Ab=10.46Ac=12.48人a=96.4度(3=103.3度Y=93.7度空间群PI分子/晶胞2其中，在温度约25°C时测量所述晶型；b)在温度约22t时，粉末X射线衍射图包含选择下组的4个或更多个26值(CuKoa-1.5418A):7.3、8.6、12.0、17.8、19.3、20.1和25.6;和/或c)融点范围为166-174°C。7.药物组合物，其包含基本纯的形式的如权利要求1所述的晶型，和药学上可接受的载体或稀释剂。8.治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括对有此需要的温血动物施用治疗有效量的如权利要求1所述的晶型。全文摘要本发明提供了吡咯并三嗪化合物[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯的晶型和含有至少一种晶型的药物组合物，以及使用这种晶型治疗增殖性疾病的方法和获得这种晶型的方法。式(I)的化合物，包括[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，可用于抑制生长因子受体如HER1、HER2和HER4的酪氨酸激酶活性，从而可将它们用作抗增殖剂以治疗癌症和其它疾病。文档编号A61P35/00GK101263143SQ200680028886公开日2008年9月10日申请日期2006年6月9日优先权日2005年6月10日发明者J·Z·古古塔斯,约翰·D·迪玛科,贝瑞特·P·帕泰尔申请人:布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司