吡唑衍生物及其作为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的用途的制作方法

专利名称：吡唑衍生物及其作为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的用途的制作方法
吡唑衍生物及其作为细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的用
途近年来，通过对酶和其它与疾病相关的生物分子的结构的更好理解，极大地有助 于新的治疗药物的研究。一类重要的酶是蛋白激酶，其已经是很多研究的对象。蛋白激酶组成一个结构上相关的酶的大家族，其负责控制细胞内多种信号转导过 禾呈(Hardie, G 禾口 Hanks, S. The Protein Kinase Facts Book, land II, Academic Press, San Diego, Calif. :1995)。由于它们结构和催化功能的保守性，蛋白激酶被认为由普通的 祖先基因进化而来。几乎所有的激酶包含类似的250-300个氨基酸的催化域。根据它们 磷酸化的底物可以将激酶分类成不同家族(例如蛋白质_酪氨酸、蛋白质_丝氨酸/苏氨 酸、脂类等)。通常相应于每个激酶家族的序列模体已经得到鉴定(参见例如Hanks，S. K.， Hunter, Τ.，FASEB J. 1995，9，576-596 ；Knighton 等人，Science 1991，253，407-414 ；Hiles 等人，Cell 1992，70，419-429 ；Kunz 等人，Cell 1993，73，585-596 ；Garcia-Bustos 等人， EMBO J.1994，13,2352-2361)。通常，蛋白激酶通过影响核苷三磷酸至蛋白质受体(其参与信号传导途径)的磷 酰基转移来介导细胞内信号传导。这些磷酸化事件用作分子开/关功能，其可以调控或调 节靶蛋白的生物功能。这些磷酸化事件最终触发多种细胞外和其它刺激的响应。此类刺 激的实例包括环境和化学应激信号(例如渗透性休克、热休克、紫外辐射、细菌内毒素和 H2O2)、细胞因子(例如白介素-I(IL-I)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α))以及生长因子(例 如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和成纤维细胞生长因子(FGF))。细胞外刺激 可能影响一种或多种与细胞生长、迁移、分化、激素分泌、转录因子活化、肌肉收缩、葡萄糖 代谢、蛋白质合成控制和细胞周期调节相关的细胞响应。很多疾病与上述蛋白激酶介导的事件触发的异常细胞响应相关。这些疾病包括但 不限于自身免疫疾病、炎性疾病、骨疾病、代谢疾病、神经和神经变性疾病、癌症、心血管疾 病、变态反应和哮喘、阿尔茨海默病和激素相关疾病。因此，需要在药物化学上付出大量努 力，以发现能有效作为治疗药物的蛋白激酶抑制剂。哺乳动物细胞周期的开始、进行和完成是由多种细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK) 复合物(其对于细胞生长是至关重要的)调节的。这些复合物包括至少一个催化亚单位 (CDK自身)和调节亚单位(细胞周期蛋白)。某些对于细胞周期调节更重要的复合物包括 细胞周期蛋白A(CDK1(也称为cdc2)和CDK2)、细胞周期蛋白B1-B3 (CDKl)和细胞周期蛋白 Dl-D3(⑶K2、⑶K4、⑶K5、⑶K6)、细胞周期蛋白E(⑶K2)。每种复合物参与细胞周期的特定 阶段。但是，不是所有的⑶K家族成员都唯一参与细胞周期控制。因此，⑶K7、⑶K8和⑶K9 参与转录调节，并且CDK5在神经元和分泌细胞功能中发挥作用。CDK的活性是在翻译后通过与其它蛋白质短暂联合以及通过它们的细胞内定位改 变来调节的。肿瘤发展与遗传改变以及CDK和它们的调节剂的失调密切相关，这表明CDK 抑制剂可以用于抗癌治疗。事实上，早期结果表明转化细胞和正常细胞的不同之处在于它 们对例如细胞周期蛋白A/CDK2的需求是不同的，并且开发新的没有常规细胞毒和细胞生 长抑制药所观察到的常见宿主毒性的抗肿瘤药是可能的。虽然在例如肿瘤学应用中抑制细胞周期相关的CDK显然是有关的，但是对于抑制RNA聚合酶-调节CDK可能不是这种情 况。另一方面，抑制⑶K9/细胞周期蛋白T功能最近与阻止HIV复制和发现新的⑶K生物 学相关，因此，对于CDK抑制剂继续打开了新的治疗指示(Sausville，Ε. A. Trends Molec. Med. 2002，8，S32-S37)。⑶K的功能是磷酸化，从而活化或灭活某些蛋白质，包括例如成视网膜细胞瘤蛋 白、核纤层蛋白、组蛋白Hl和有丝分裂纺锤体的组分。由CDK介导的催化步骤包括从ATP 至大分子酶底物的磷酸转移反应。发现化合物的数个基团借助CDK-特异性ATP拮抗作用 具有抗增殖性质(例如 Fischer，P.M. Curr. Opin. Drug Discovery Dev. 2001，4，623-634 中 所综述的)。在分子水平下cdk/细胞周期蛋白复合物活性的调节需要一系列刺激和抑制磷酸 化或去磷酸化事件。cdk磷酸化是通过一组cdk活化激酶(CAK)和/或激酶(例如weel、 Mytl和Mikl)来完成的。去磷酸化是通过磷酸酶(例如cdc25 (a&c)、pp2a或KAP)来完成 的。cdk/细胞周期蛋白复合物活性可以进一步通过两个家族的内源性细胞蛋白质 (Kip/Cip家族或INK家族)抑制剂来调节。INK蛋白质特异性结合cdk4和cdk6。pl6ink4(也 称为MTS1)是潜在的肿瘤抑制基因，其在大多数原发性癌症中突变或缺失。Kip/Cip家族包 括例如p21_’Waf1、p27Kipl和p57kip2的蛋白质。如先前讨论的，p21是由p53诱导的并且能 够失活cdk2/细胞周期蛋白(E/A)和cdk4/细胞周期蛋白(D1/D2/D3)复合物。在乳腺癌、 结肠癌和前列腺癌中已经观察到非典型低水平P27表达。相反，在实体瘤中细胞周期蛋白E 的过表达表现出与较差的患者预后相关。细胞周期蛋白Dl的过表达与食道癌、乳腺癌、鳞 状癌和非小细胞肺癌相关。cdk和它们相关的蛋白质在协同和驱动增殖细胞的细胞周期中的关键作用已经在 上面描述。还描述了其中Cdk发挥关键作用的某些生物化学途径。因此，应用通常靶向Cdk 或特异性Cdk的治疗，开发用于治疗增殖性障碍(例如癌症)的单一治疗可能是非常需要 的。Cdk抑制剂还可以用于治疗其它病症，例如病毒感染、自身免疫疾病和神经变性疾病。 当与现存的或新的治疗药物组合治疗应用时，Cdk靶向的治疗在治疗上述疾病中还可以提 供临床优势。Cdk靶向抗癌治疗相比很多目前的抗肿瘤药物潜在地具有优势，因为它们不直 接与DNA相互作用，并且因此应当降低了继发性肿瘤发生的危险。因此，还需要发现新的用于治疗人类疾病的治疗药物。因此，急需开发蛋白激酶 (例如 CDK1、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK8 和 CDK9)抑制剂。发明概述仍然需要新的用于蛋白激酶相关障碍的治疗和疗法。还需要用于治疗或预防或改 善癌症、移植排斥反应和自身免疫疾病的一种或多种症状的化合物。另外，需要应用本文提 供的化合物来调节蛋白激酶(例如⑶K1、⑶K2、⑶K4、⑶K5、⑶K6、⑶K7、⑶K8和⑶K9)的活 性的方法。一个方面，本发明提供了式Ia化合物 其中Rla是H、烷基、链烯基、炔基、芳基、环烷基、烷基芳基、烷氧基、烷基环烷基、羟 基、het、烷基het、芳基环烷基、het环烷基、C(Q_6)RllaR12a、环烷基芳基或环烷基het，其可以 是未取代的或取代的；R2a是H、烷基、链烯基、炔基、羟基、卤素、CN、CONH2、烷基或环烷基，其可以是未取代 的或取代的；R3a 是 H、烷基、链烯基、炔基、环烷基、het、羟基、卤素、CN、CHO、0R7a、NHR7a、NHS02R7a、 NHCONHR7a, NHCOOR7a, CH2OR7a, CONR8aR9a,其可以是未取代的或取代的；R7\ R8a和R9a独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、het、芳基，其可以是未取代 的或取代的；Xa是N或CRltla,其中Rltla是H、卤素、烷基、链烯基或炔基；栌是札烷基、链烯基、炔基、环烷基、het或卤素，其可以是未取代的或取代的；R13a是H、烷基、链烯基、炔基、环烷基或(V6)RllaR12a,其可以是未取代的或取代的，R11IP R12Ii立地是 H、键、NHto_2)、-0-、羟基、芳基、烷基、链烯基、炔基、C(0)C(Q_6)、 烷氧基、卤素、环烷基、het、C(0)0Cto_6)、CN，其可以是未取代的或取代的；het是5至7元单环杂环，其可以是芳族的或非芳族的，包含1至4个选自N、0和 S的杂环原子；或者是8至12元稠环系，其包含一个5至7元杂环，其可以是芳族的或非芳 族的，包含1、2或3个选自N、0和S的杂环原子，该het是未取代的或取代的；并且Rla、R2\ R3\ R4a、R7\ R8a、R9a、Rlla、R12a 和 R13a 可以被一个或多个烷基、链烯基、炔基、 烷基芳基、环烷基、卤素、烷氧基、het、芳基、烷基芳基、羟基、CF3、COO烷基、CR3a和羰基取代。另一方面，本发明提供了式I化合物或可药用盐 其中R1是Cp6-烷基、C3_14_环烷基、3至14元环杂烷基、C6_14芳基、CV6-烷氧基、C1^烷 基c6_14芳基、CV6烷基C3_14环烷基、Cp6烷基-3至14元环杂烷基、CV6烷基-5至14元杂芳 基、CV6烷基OR7、CV6烷基NR5R6、CV6烷氧基C6_14芳基、C1^6烷基CN或CV6烷基C (0) OR7,其 可以是未取代的或者被一个或多个Cp6-烷基、C6_14-芳基、羟基、Cp6-烷基卤素、Cp6烷氧基 商素、商素、C1^6-烷氧基、CV6烷基C6_14芳基、C (0) OR8、CN、氧代或NR9Rw取代；R2是H、CV6-烷基、C2_6_链烯基、C2_6_炔基、羟基或卤素；
R3和R4独立地是H、Cp6-烷基、C3_14_环烷基或卤素，其可以是未取代的或取代的；R5、R6、R7、R8、R9 和 Riq 独立地是氢、C1^6-烷基、C2_6_ 链烯基、C2_6_ 炔基、C3_14_ 环烷 基、5至14元杂芳基、C6_14-芳基、C(O)OR11或C(O)R11,其可以是未取代的或取代的；X是N或CR12，其中R11和R12独立地是H、卤素或C^6-烷基。在本发明的一个方面中，蛋白激酶是蛋白酪氨酸激酶。在一个实施方案中，蛋白激 酶选自 abl、ATK、ber-abl、Blk、Brk> Btk、c_fms、e_kit、c_met、c_src、CDK> cRafl、CSFIR、 CSK, EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、ERK, Fak, fes、FGFRI、25FGFR2、FGFR3、FGFR4、FGFR5、Fgr、 FLK-4、flt-1、Fps、Frk, Fyn, GSK, Gst-Flkl、Hck、Her_2、Her_4、IGF-1R、INS-R、Jak, JNK, KDR, Lck, Lyn, MEK, p38, PANHER, PDGFR, PIK, PKC, PYK2, Raf, Rho, ros, SRC, t' ell t' e2、 TRK, TYK2、UL97、VEGFR、Yes和Zap70。在另一个实施方案中，蛋白激酶选自CDKU CDK2、 ⑶K4、⑶K5、⑶K6、⑶K7、⑶K8和⑶K9。在另一个实施方案中，蛋白激酶是⑶K4。在本发明的另一方面中，蛋白激酶是在细胞培养物中。另一个方面，蛋白激酶是在 哺乳动物中。另一方面，本发明提供了治疗蛋白激酶相关障碍的方法，其中该方法包括给需要 的个体施用可药用量的式I化合物，从而治疗蛋白激酶相关障碍。在一个实施方案中，蛋白 激酶选自⑶K1、⑶K2、⑶K4、⑶K5、⑶K6、⑶K7、⑶K8和⑶K9。在一个特别的实施方案中，蛋 白激酶是⑶K4。另一方面，本发明提供了治疗丝氨酸/苏氨酸激酶相关障碍的方法，其中该方法 包括给需要的个体施用可药用量的式I化合物，从而治疗丝氨酸/苏氨酸激酶相关障碍。在 一个实施方案中，障碍选自CDK1、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK8和CDK9。在一个特别 的实施方案中，蛋白激酶是CDK4。在另一个实施方案中，蛋白激酶相关障碍选自血管增殖障碍、纤维变性障碍、系膜 细胞增殖障碍、代谢障碍、变态反应、哮喘、血栓形成、神经系统疾病和癌症。在另一个实施方案中，蛋白激酶相关障碍是癌症。在另一个实施方案中，癌症选自 乳腺癌、胃癌、卵巢癌、结肠癌、肺癌、脑癌、喉癌、淋巴系统癌、泌尿生殖道(包括膀胱和前 列腺)癌、卵巢癌、胃癌、骨癌和胰腺癌。在另一个实施方案中，蛋白激酶相关障碍选自器官移植排斥反应、异体移植、狼 疮、多发性硬化、类风湿性关节炎、银屑病、1型糖尿病和糖尿病并发症、癌症、哮喘、特应性 皮炎、自身免疫性甲状腺障碍、溃疡性结肠炎、克隆病、阿尔茨海默病和白血病。在另一个实施方案中，疾病选自免疫响应、自身免疫疾病、神经变性疾病或者实体 或血液恶性。在另一个实施方案中，疾病选自变应性或I型超敏反应、哮喘、移植物抗宿主 疾病、类风湿性关节炎、肌萎缩性侧索硬化、多发性硬化、家族性肌萎缩性侧索硬化、白血病 或淋巴瘤。另一方面，本发明提供了治疗自身免疫疾病的方法，其中治疗包括给需要的个体 施用可药用量的式I化合物，从而治疗自身免疫疾病。在一个实施方案中，自身免疫疾病选 自自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性新生儿血小板减少、特发性血小板减少性紫癜、自身 免疫性细胞减少、溶血性贫血、抗磷脂综合征、皮炎、变应性脑脊髓炎、心肌炎、复发性多软 骨炎、风湿性心脏病、肾小球肾炎、多发性硬化、神经炎、眼色素层炎、多内分泌腺病、紫癜、 赖特尔病、僵人综合征、自身免疫性肺炎、孤独症、吉-巴综合征、胰岛素依赖性糖尿病、自身免疫性炎性眼病、自身免疫性甲状腺炎、甲状腺功能减退症、系统性红斑狼疮、古德帕斯 丘综合征、天疱疮、受体自身免疫、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性血小板减少性紫癜、 类风湿性关节炎、混合性结缔组织疾病、多肌炎/皮肌炎、恶性贫血、特发性艾迪生病、不孕 症、肾小球肾炎、大疱性类天疱疮、舍格伦综合征、糖尿病、肾上腺素能抗药性、慢性活动性 肝炎、原发性胆汁性肝硬化、白癜风、血管炎、心肌梗塞后、心切开术综合征、荨麻疹、特应性 皮炎、哮喘、炎性肌病、慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化和T-细胞介导的超敏反应疾 病。另一方面，本发明提供了治疗癌症的方法，其中该方法包括给需要的个体施用可 药用量的式I化合物，从而治疗癌症疾病或障碍。在一个实施方案中，癌症选自膀胱癌、头 颈癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、结肠癌、肺癌、脑癌、喉癌、淋巴系统癌、泌尿生殖道癌、胃肠道 癌、卵巢癌、前列腺癌、胃癌、骨癌、小细胞肺癌、神经胶质瘤、结肠直肠癌和胰腺癌。在本发明的另一方面中，式I或其盐与抗炎药、抗增殖药、化学治疗药、免疫抑制 剂、抗癌药、细胞毒药物或除式I化合物或其盐之外的激酶抑制剂同时或依次施用。在一 个实施方案中，式I化合物或其盐与一种或多种以下药物同时或依次施用PTK抑制剂、环 孢菌素 A、CTLA4-Ig、抗体(选自抗 ICAM-3、抗-IL-2 受体、抗-CD45RB、抗-CD2、抗-CD3、 抗-⑶4、抗-⑶80、抗-⑶86和单克隆抗体0KT3)、⑶40和gp39相互作用的阻滞剂、⑶40 和gp39构成的融合蛋白、NF-K B功能抑制剂、非甾体抗炎药、甾体类、金化合物、抗增殖药、 Π(506、麦考酚酸吗乙酯、细胞毒药物、TNF-α抑制剂、抗-TNF抗体或可溶性TNF受体、雷帕 霉素、来氟米特、环加氧酶-2抑制剂、紫杉醇、顺钼、卡钼、多柔比星、去甲柔红霉素、柔红霉 素、氨基蝶呤、甲氨蝶呤、甲基叶酸、丝裂霉素C、海鞘素743、泊非霉素、5-氟尿嘧啶、6-巯嘌 呤、吉西他滨、阿糖胞苷、鬼白毒素、依托泊苷、依托泊苷磷酸盐、替尼泊苷、美法仑、长春碱、 长春新碱、异长春碱、埃博霉素、长春地辛、环氧长春碱或其衍生物。另一方面，本发明提供了成套的蛋白激酶相关障碍治疗，其中该治疗包括调节蛋 白激酶的式I化合物，其与使用有效量的调节蛋白激酶的化合物以治疗蛋白激酶相关障碍 的说明书一起包装。发明详述本发明涉及用于治疗蛋白激酶相关障碍的化合物(例如吡唑基吡啶和吡唑基嘧 啶化合物)、其中间体以及包含化合物的药物组合物。本发明还涉及本发明化合物或其组合 物，其作为 Jakl、Jak2 和 Jak3 以及 CDK1、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK8 和 CDK9 的调 节剂。本发明还涉及组合治疗的方法，其应用本发明化合物或药物组合物或其药盒用于抑 制细胞中的蛋白激酶活性或者用于治疗、预防或改善患者的癌症、移植排斥反应和自身免 疫疾病的一种或多种症状。一方面，本发明提供了式Ia化合物 其中Rla是H、烷基、链烯基、炔基、芳基、环烷基、烷基芳基、烷氧基、烷基环烷基、羟 基、het、烷基het、芳基环烷基、het环烷基、C(Q_6)RllaR12a、环烷基芳基或环烷基het，其可以 是未取代的或取代的；R2a是H、烷基、链烯基、炔基、羟基、卤素、CN、CONH2、烷基或环烷基，其可以是未取代 的或取代的；R3a 是 H、烷基、链烯基、炔基、环烷基、het、羟基、卤素、CN、CHO、0R7a、NHR7a、NHS02R7a、 NHCONHR7a, NHCOOR7a, CH2OR7a, CONR8aR9a,其可以是未取代的或取代的；R7\ R8a和R9a独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、环烷基、het、芳基，其可以是未取代 的或取代的；Xa是N或CRltla,其中Rltla是H、卤素、烷基、链烯基或炔基；R4a是H、烷基、链烯基、炔基、环烷基、het或卤素，其可以是未取代的或取代的；R13a是H、烷基、链烯基、炔基、环烷基或Cto_6)RllaR12a，其可以是未取代的或取代的；R11IP R12Ii立地是 H、键、NH(Q_2)、-0-、羟基、芳基、烷基、链烯基、炔基、C(0)C(Q_6)、 烷氧基、卤素、环烷基、het、C(0)0Cto_6)、CN，其可以是未取代的或取代的；het是5至7元单环杂环，其可以是芳族的或非芳族的，包含1至4个选自N、0和 S的杂环原子；或者是8至12元稠环系，其包含一个5至7元杂环，其可以是芳族的或非芳 族的，包含1、2或3个选自N、0和S的杂环原子，该het是未取代的或取代的；并且Rla、R2\ R3\ R4a、R7\ R8a、R9a、Rlla、R12a 和 R13a 可以被一个或多个烷基、链烯基、炔基、 烷基芳基、环烷基、卤素、烷氧基、het、芳基、烷基芳基、羟基、CF3、COO烷基、CR3a和羰基取代。在一个实施方案中，本发明包括式(Ia)化合物，其中Rla是het、环烷基芳基、烷基 芳基、(V6)RllaR12a或烷基het，其可以是取代的或未取代的，并且R13a是H。在另一个实施方案中，本发明包括式(Ia)化合物，其中Rla是het或环烷基芳基， 其可以是取代的或未取代的；1^是札卤素或烷基，其中烷基可以是取代的或未取代的；R3a 是H或烷基，其中烷基可以是取代的或未取代的；并且R4a是烷基或环烷基，其可以是取代的 或未取代的。在进一步的实施方案中，本发明包括式Ia化合物，其中俨选自 R3a是甲基或异丙基。
另一方面，本发明提供了式I化合物或可药用盐
(I)其中R1是Cp6-烷基、C3_14_环烷基、3至14元环杂烷基、C6_14芳基、CV6-烷氧基、C1^烷 基c6_14芳基、CV6烷基C3_14环烷基、Cp6烷基-3至14元环杂烷基、CV6烷基-5至14元杂芳 基、CV6烷基OR7、CV6烷基NR5R6、CV6烷氧基C6_14芳基、C1^6烷基CN或CV6烷基C (0) OR7,其 可以是未取代的或者被一个或多个Cp6-烷基、C6_14-芳基、羟基、Cp6-烷基卤素、Cp6烷氧基 商素、商素、C1^6-烷氧基、CV6烷基C6_14芳基、C (0) OR8、CN、氧代或NR9Rw取代；R2是H、CV6-烷基、C2_6_链烯基、C2_6_炔基、羟基或卤素；R3和R4独立地是H、Cp6-烷基、C3_14_环烷基或卤素，其可以是未取代的或取代的；R5、R6、R7、R8、R9 和 Riq 独立地是氢、C1^6-烷基、C2_6_ 链烯基、C2_6_ 炔基、C3_14_ 环烷 基、5至14元杂芳基、C6_14-芳基、C(O)OR11或C(O)R11,其可以是未取代的或取代的；X是N或CR12，其中R11和R12独立地是H、卤素或C^6-烷基。在进一步的实施方案中，本发明包括式I化合物，其中R1是Cp6-烷基、C3_14-环烷 基、C6_14芳基、3至14元环杂烷基、 Ci-6 焼基 C6-H 芳基、 Ci-6 焼基 C3_14 环烷基、 烷基_3至 14元环杂烷基或Cp6烷基-5至14元杂芳基，其可以是未取代的或者被一个或多个Cp6-烷 基、C6_14-芳基、羟基、C1^6-烷基卤素、卤素、CV6-烷氧基、Cp6烷基C6_14芳基取代。在另一个优选的式I化合物的实施方案中，R1是C3_14_环烷基、C6_14芳基、3至14 元环杂烷基、(V6烷基c6_14芳基或Ch6烷基c3_14环烷基，其可以是未取代的或者被一个或多 个Ch6-烷基或c6_14-芳基取代。在进一步的实施方案中，本发明包括式Ia化合物，其中R1选自
,并且R3是甲基或异丙基。在另一个优选的式I化合物的实施方案中，R3和R4独立地是H、Cp6-烷基或 13-14 -环烷基。在另一个优选的式I化合物的实施方案中，R3和R4之一是H并且R3和R4中的另 一个是Cp6-烷基或C3_14_环烷基。在另一个优选的式I化合物的实施方案中，R4是H，并且R3是甲基、乙基或丙基。 在另一个优选的实施方案中，R3是异丙基。
公认的是提及的式I也旨在表示式Ia，并且提及的式Ia也旨在表示式I。在另一个优选的式I化合物的实施方案中，X是N或CH。在另一个优选的式I化 合物的实施方案中，X是N。在另一个实施方案中，本发明包括药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的 式I或Ia化合物。在另一个实施方案中，本发明包括医学特别是癌症中的式I或Ia化合物。在另一个实施方案中，本发明包括治疗患有增殖性疾病的哺乳动物的方法，该方 法包括给需要治疗的所述的哺乳动物施用治疗有效量的式I或Ia化合物。在另一个实施 方案中，本发明包括抑制细胞增殖的方法，该方法包括给需要的细胞或哺乳动物施用有效 量的式I或Ia化合物以抑制细胞增殖。在某些实施方案中，本发明化合物进一步的特征在于作为蛋白激酶调节剂，所述 的蛋白激酶包括但不限于 abl、ATK、ber-abl、Blk、Brk, Btk、c-fms、e_kit、c_met、c_src、 CDK、cRafl、CSFIR、CSK、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、ERK, Fak, fes、FGFRI、25FGFR2、FGFR3、 FGFR4、FGFR5、Fgr、FLK-4、flt-1、Fps、Frk、Fyn、GSK、Gst-Flkl、Hck、Her_2、Her_4、IGF-1R、 INS-R、Jak, JNK, KDR、Lck、Lyn, MEK, p38、PANHER、PDGFR、PLK, PKC, PYK2、Raf、Rho, ros、 SRC、t，ell t，e2、TRK、TYK2、UL97、VEGFR、YesiPZap70。在优选的实施方案中，蛋白激酶选自⑶K1、⑶K2、⑶K4、⑶K5、⑶K6、⑶K7、⑶K8和 ⑶K9。在另一个优选的实施方案中，蛋白激酶选自Jakl、Jak2和Jak3。在一个特别优选的 实施方案中，蛋白激酶选自Jak3和CDK4。在其它实施方案中，本发明化合物用于治疗蛋白激酶相关障碍。本文所用的术语 “蛋白激酶相关障碍”包括与蛋白激酶(例如CDK4和Jak3)的活性相关的障碍和状态(例 如疾病状态)。蛋白激酶相关障碍的非限制性实例包括血管增殖障碍、纤维变性障碍、系膜 细胞增殖障碍、代谢障碍、变态反应、哮喘、血栓形成、神经系统疾病、器官移植排斥反应、自 身免疫疾病和癌症。在另一个实施方案中，本发明化合物进一步的特征在于作为蛋白激酶 (例如Jak3和⑶K4)的组合的调节剂。在某些实施方案中，本发明化合物用于蛋白激酶相关疾病，以及本发明化合物作 为任何一种或多种蛋白激酶的抑制剂的用途。用途可以是抑制一种或多种蛋白激酶的同种 型的治疗。本发明化合物是细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的抑制剂。无需结合理论，抑制 CDK4/细胞周期蛋白Dl复合物阻断了 Rb/无活性E2F复合物的磷酸化，从而阻止活化的E2F 的释放并且最终阻断E2F-依赖性DNA转录。这具有诱导G1细胞周期停滞的作用。特别的 是，CDK4途径已经显示出具有肿瘤特异性失调和细胞毒作用。另外，本发明化合物具有潜在阻断自身反应性或同种异体反应性T细胞的扩展， 从而对自身免疫疾病以及移植排斥反应具有有益作用。本发明包括治疗癌症、移植排斥反应和自身免疫疾病以及上述蛋白激酶相关障碍 的一种或多种症状，但是本发明并不旨在限制于这种方法，通过该方法化合物完成其预期 的治疗疾病的功能。本发明包括以任何方法治疗本文描述的疾病，其允许治疗发生，例如癌 症、移植排斥反应和自身免疫疾病。在某些实施方案中，本发明提供了任何本发明化合物的药物组合物。在相关的实施方案中，本发明提供了任何本发明化合物与任何这些化合物的可药用载体或赋形剂的药 物组合物。在某些实施方案中，本发明包括作为新的化学实体的化合物。在一个实施方案中，本发明包括成套的蛋白激酶相关障碍的治疗。该成套的治疗 包括本发明化合物，其与对于预期用途而使用有效量的本发明化合物的说明书一起包装。本发明化合物适合作为药物组合物中的活性剂，特别是对于治疗蛋白激酶相关障 碍，例如癌症、移植排斥反应和自身免疫疾病，该药物是有效的。在多个实施方案中的药物 组合物具有药用有效量的本发明的活性剂以及其它可药用赋形剂、载体、填充剂、稀释剂 等。本文所用的短语“药用有效量”表示为了获得治疗效果(特别是调节、调控或抑制蛋白 激酶活性，例如抑制蛋白激酶的活性，或者治疗癌症、移植排斥反应或自身免疫疾病)而给 宿主或者宿主的细胞、组织或器官施用所需的量。在其它实施方案中，本发明提供了抑制蛋白激酶活性的方法。该方法包括将细胞 和任何本发明化合物接触。在相关的实施方案中，该方法进一步提供了以该化合物以选择 性抑制蛋白激酶的活性的有效量存在。在其它实施方案中，本发明提供了任何本发明化合物在制备用于治疗个体的癌 症、移植排斥反应或自身免疫疾病的药物中的用途。在其它实施方案中，本发明提供了制备药物的方法，该方法包括配制用于治疗个 体的任何本发明化合物。^X术语“治疗”包括减少或改善与所治疗的状态、障碍或疾病相关的或由其引起的至 少一种症状。在某些实施方案中，治疗包括诱导蛋白激酶相关障碍，随后活化本发明化合 物，其反过来将减少或改善与所治疗的蛋白激酶相关障碍相关的或由其引起的至少一种症 状。例如，治疗可以是减少障碍的一种或数种症状或者完全根除障碍。术语“个体”旨在包括有机体，例如原核生物和真核生物，其能够患有或遭受与蛋 白激酶活性相关的疾病、障碍或病症。个体的实例包括哺乳动物，例如人、狗、牛、马、猪、绵 羊、山羊、猫、小鼠、兔子、大鼠和转基因非人动物。在某些实施方案中，个体是人，例如患有、 存在患有的风险或可能患有癌症、移植排斥反应和自身免疫疾病以及本文描述的其它疾病 或病症的人。在另一个实施方案中，个体是细胞。语言“调节蛋白激酶的化合物”、“蛋白激酶的调节剂”或“蛋白激酶抑制剂”指的 是调节(例如抑制或改变)蛋白激酶活性的化合物。调节蛋白激酶的化合物的实例包括式 I化合物以及表1和2和本文描述的其它实施例化合物(包括其可药用盐以及其对映异构 体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、非对映异构体、阻转异构体或外消旋体)。另外，本发明的方法包括给个体施用有效量的调节蛋白激酶的本发明化合物(例 如调节蛋白激酶的式I化合物)以及表1和2和本文描述的其它实施例的化合物(包括其 可药用盐以及其对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、非对映异构体、阻转异 构体或外消旋体)。本文所用的术语“烷基”包括饱和的脂肪族基团，包括直链烷基(例如甲基、乙基、 丙基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等)、支链烷基(异丙基、叔丁基等)；环烷基(脂环)(环 丙基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基)；烷基取代的环烷基和环烷基取代的烷基。本文所用的“环烷基”指的是非芳族碳环基团，包括环化的烷基、烯基和炔基。环烷基可以是单环(例如环己基)或多环(例如包含稠合的环系、桥连的环系和/或螺环系)， 其中碳原子位于环系的内部或外部。环烷基作为整体可以具有3至14个环原子(例如对 于单环环烷基具有3至8个碳原子，并且对于多环环烷基具有7至14个碳原子)。环烷基 的任何适合的环位置可以共价连接到定义的化学结构上。环烷基的实例包括环丙基、环丁 基、环戊基、环己基、环庚基、环戊烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚三烯基、降冰片基、降菔 基、降蒈基、金刚烷基和螺[4. 5]癸基以及它们的同系物、异构体等。在某些实施方案中，环 烷基可以任选被至多4个独立地选自-L，-R5和-L，-R10的基团取代，其中L，、R5和Riq如 本文所定义的。例如，环烷基可以被一个或多个氧代基团取代。本文所用的“杂原子”指的是除了碳或氢之外的任何元素的原子，包括例如氮、氧、 硫、磷和硒。本文所用的“环杂烷基”指的是非芳族环烷基，其包含至少一个(例如一个、两个、 三个、四个或五个)选自0、N和S的环杂原子，并且任选包含一个或多个(例如一个、两个 或三个)双键或三键。环杂烷基作为整体可以具有3至14个环原子，并且包含1至5个环 杂原子(例如对于单环环杂烷基具有3至6个环原子，并且对于多环环杂烷基具有7至14 个环原子)。环杂烷基可以在任何杂原子或碳原子上共价连接到定义的化学结构上，形成稳 定的结构。环杂烷基环中的一个或多个N或S原子可以是氧化的(例如吗啉N-氧化物、硫 代吗啉S-氧化物、硫代吗啉S，S-二氧化物)。在某些实施方案中，环杂烷基的氮原子可以 带有取代基，例如-L’ -R5和-L’ -Rltl,其中L’、R5和Rltl如本文所描述的。环杂烷基还可以 包含一个或多个氧代基团，例如对酞内酰胺基(Phthalimidyl)、哌啶酮基、噁唑烷酮基、2， 4 (1H，3H) - 二氧代-嘧啶基、吡啶-2 (IH)-酮基等。环杂烷基的实例包括吗啉基、硫代吗啉 基、吡喃基、咪唑烷基、咪唑啉基、噁唑烷基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡咯烷基、吡咯啉基、四氢 呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、哌嗪基等。在某些实施方案中，环杂烷基可以任选被至多4个 独立地选自-L，-R5和-L，-Rltl的基团取代，其中L，、R5和R10如本文所描述的。本文所用的“芳基”指的是芳族单环烃环系或多环系，其中环系中至少一个环是芳 族烃环，并且环系中任何其它芳族环仅包括烃类。在某些实施方案中，单环芳基可以具有6 至14个碳原子，并且多环芳基可以具有8至14个碳原子。芳基可以在任何碳原子上共价连 接到定义的化学结构上，形成稳定的结构。在某些实施方案中，芳基可以仅具有芳族碳环， 例如苯基、1-萘基、2-萘基、蒽基、菲基等。在其它实施方案中，芳基可以是多环环系，其中 至少一个芳族碳环与一个或多个环烷基或环杂烷基环稠合(即具有一个共同的键)。此类 芳基的实例包括环戊烷的苯并衍生物(即茚满基，其是5，6-二环环烷基/芳族环系)、环己 烷的苯并衍生物(即四氢萘基，其是6，6- 二环环烷基/芳族环系)、咪唑啉的苯并衍生物 (即苯并咪唑啉基，其是5，6-二环环杂烷基/芳族环系)以及吡喃的苯并衍生物(即苯并 吡喃基，其是6，6- 二环环杂烷基/芳族环系)。芳基的其它实例包括苯并二噁烷基、苯并 间二氧杂环戊烯基、色满基、二氢吲哚基等。在某些实施方案中，每个芳基可以任选被至多 4个独立地选自-L，-R5和-L，-R10的基团取代，其中L，、R5和Riq如本文所描述的。本文所用的“杂芳基”指的是包含至少一个选自0、N和S的环杂原子的芳族单环环 系或者其中环系中至少一个环是芳族的并且包含至少一个环杂原子的多环环系。杂芳基作 为整体可以具有5至14个环原子并且包含1至5个环杂原子。在某些实施方案中，杂芳基 可以包括与一个或多个芳族碳环、非芳族碳环或非芳族环杂烷基环稠合的单环杂芳基。杂芳基可以在任何杂原子或碳原子上共价连接到定义的化学结构上，形成稳定的结构。通常， 杂芳基环不包含0-0、S-S或S-O键。但是，杂芳基中的一个或多个N或S原子可以是氧化 的(例如吡啶N-氧化物、噻吩S-氧化物、噻吩S，S- 二氧化物)。杂芳基的实例包括例如 下面所示的5-元和6-元单环和5-6 二环环系
其中T是0、S、NH、N-L，-R5或N-L，-Rlt1,其中L，、R5和Rltl如本文所定义的。此 类杂芳基环的实例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三唑基、 四唑基、吡唑基、咪唑基、异噻唑基、噻唑基、噻二唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、吲哚 基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、喹啉基、2-甲基喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑 啉基、苯并三唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并异噁唑基、苯并噁二唑基、 苯并噁唑基、噌啉基、IH-吲唑基、2H-吲唑基、中氮茚基、异苯并呋喃基、萘啶基、酞嗪基、 蝶啶基、嘌呤基、噁唑并吡啶基、噻唑并吡啶基、咪唑并吡啶基、呋喃并吡啶基、噻吩并吡啶 基、吡啶并嘧啶基、吡啶并吡嗪基、吡啶并哒嗪基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪 唑基等。杂芳基的进一步的实例包括4，5，6，7_四氢吲哚基、四氢喹啉基、苯并噻吩并吡啶 基、苯并呋喃并吡啶基等。在某些实施方案中，杂芳基可以被至多4个独立地选自-L’ -R5 或-L，-R10的基团取代，其中L，、R5和Rw如本文所描述的。当两个取代基与共同键合氮一起是het时，应该理解为产生的杂环是含氮的环， 例如氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯(azole)、哌啶、哌嗪、吗啉、吡咯(pyrrole)、吡唑、噻唑、噁 唑、吡啶、嘧啶、异噁唑等，其中此类het可以是未取代的或者如上文定义的那样被取代。本文所用的“het”指的是包含至少一个S、0或N环杂原子的杂芳基和杂环化合物。 更特别的是，“het”是包含1至4个选自N、0和S的杂原子的5至7元杂环，或者是包含至少 一个5至7元杂环的8至12元稠环系，其包含1、2或3个选自N、0和S的杂原子。本文所 用的het的实例包括但不限于未取代的和取代的吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶 基、哌嗪基、嘌呤基、四氢吡喃基、吗啉代、1，3-二氮杂环庚烷基、1，4_ 二氮杂环庚烷基、1， 4-氧杂氮杂环庚烷基、1，4-氧杂硫杂环庚烷基、呋喃基、噻吩基、吡咯基(pyrryl)、吡咯基 (pyrrolyl)、吡唑基、三唑基、四唑基、吲唑基、噁二唑基、咪唑基、吡咯烷基(pyrrolidyl)、 吡咯烷基(pyrro 1 idiny 1)、噻唑基、噁唑基、吡啶基、吡唑基、吡嗪基、嘧啶基、异噁唑基、吡嗪基、喹啉基、异喹啉基、吡啶并吡嗪基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基、喷哚基、苯并呋喃 基、苯并噻吩基、苯并吲哚基、苯并噻吩基、吡唑基、哌啶基、哌嗪基、二氢吲哚基、吗啉基、苯 并噁唑基、吡咯并喹啉基、吡咯并[2，3_b]吡啶基、苯并三唑基、氧代苯并-噁唑基、苯并[1， 3]间二氧杂环戊烯基、苯并咪唑基、喹啉基、茚满基等。杂芳基在het的定义范围内。杂芳 基的实例是吡啶基、嘧啶基、喹啉基、噻唑基和苯并噻唑基。最优选的het是吡啶基、嘧啶基 和噻唑基。het可以是未取代的或者如本文描述的那样被取代。优选其是未取代的，或者 如果取代，其是在碳原子上被卤素(特别是氟或氯)、羟基、CrC4烷基(例如甲基和乙基)、 C1-C4烷氧基(特别是甲氧基和乙氧基)、硝基、-O-C(O)-C1-C4烷基或-C(O)-O-C1-C4烷基、 SCN或硝基取代，或者在氮原子上被C1-C4烷基(特别是甲基或乙基)、-O-C(O)-C1-C4烷基 或-C(O)-O-C1-C4烷基(例如甲酯基或乙酯基)取代。当两个取代基与共同键合氮一起是het时，应该理解为产生的杂环是含氮的环， 例如氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯(azole)、哌啶、哌嗪、吗啉、吡咯(pyrrole)、吡唑、噻唑、噁 唑、吡啶、嘧啶、异噁唑等，其中此类het可以是未取代的或者如上文定义的那样被取代。“卤素”是氟、氯、溴或碘，特别是氟和氯。除非另外特别说明，上面或组合中的“烷基”包括直链或支链烷基，例如甲基、乙 基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和支链戊基、正己基和支链己基等。未取代的旨在表示氢是唯一的取代基。除本文描述之外，任何上面定义的芳基、het、烷基、链烯基、炔基或环烷基可以是 未取代的或者独立地被至多4个、优选一个、两个或三个选自下面的取代基取代卤素(例 如Cl或Br)；羟基；低级烷基(例如C1-C3烷基)；可以被本文定义的任何取代基取代的低 级烷基；低级链烯基；低级炔基；低级烷酰基；低级烷氧基(例如甲氧基)；芳基(例如苯基 或萘基)；取代的芳基(例如氟苯基或甲氧基苯基)；芳基低级烷基，例如苄基、氨基、单或 二-低级烷基(例如二甲基氨基)；低级烷酰基氨基乙酰基氨基；氨基低级烷氧基(例如乙 氧基胺)；硝基；氰基；氰基低级烷基；羧基；低级烷氧羰基(例如甲氧基羰基、正丙氧基羰 基或异丙氧基羰基)；低级芳酰基，例如苯甲酰基；氨基甲酰基；N-单-或N，N 二-低级烷 基氨基甲酰基；低级烷基氨基甲酸酯；脒基；胍；脲基；巯基；磺基；低级烷基硫代；磺氨基； 氨磺酰基；苯并氨磺酰基；磺酸酯；硫烷基低级烷基(例如甲基硫烷基)；磺氨基；芳基氨磺 酰基；卤素取代的或未取代的芳基磺酸酯(例如氯_苯基磺酸酯)；低级烷基亚磺酰基 ’芳 基亚磺酰基；芳基_低级烷基亚磺酰基；低级烷基芳基亚磺酰基；低级烷磺酰基；芳基磺酰 基；芳基-低级烷基磺酰基；低级芳基烷基；低级烷基芳基磺酰基；商素_低级烷基巯基； 卤素_低级烷基磺酰基，例如三氟甲磺酰基；膦酰基(-P ( = 0) (OH) 2)；羟基-低级烷氧基 磷酰基或二 _低级烷氧基磷酰基；脲和取代的脲；烷基氨基甲酸酯或氨基甲酸酯(例如乙 基-N-苯基-氨基甲酸酯)；或低级烷基(例如甲基、乙基或丙基)。在一个实施方案中，上面提及的烷基、环烷基和芳基独立地是未取代 的或者被低级烷基、芳基、芳基低级烷基、羧基、低级烷氧羰基并且特别是卤 素、-OH、-SH、-OCH3> -SCH3> _CN、-SCN 或硝基取代。本文所用的术语“烷基芳基”指的是通过桥连的亚烷基连接至主链的芳基。实例 包括但不限于苄基、苯乙基、萘基甲基等。类似地，烷基氰基指的是桥连的亚烷基连接至主 链的氰基。同样类似地，烷基环烷基指的是通过桥连的亚烷基连接至主链的环烷基。“烷基
15het”指的是通过烷基桥连至主链的het基团。另一方面，术语“芳基烷基”指的是通过芳基(例如亚苯基)桥连至主链的烷基。 实例包括但不限于甲基苯基、乙基苯基等。类似地，“芳基环烷基”指的是通过芳基桥连至主 链的环烷基。术语“het环烷基”指的是通过het桥连至主链的环烷基。“环烷基芳基”指的是通 过环烷基桥连至主链的芳基，并且“环烷基het”指的是通过环烷基桥连至主链的het。每 个“het环烷基”、“环烷基芳基”和“环烷基het ”可以是两个基团的合并环。术语“烷氧基”指的是通过氧原子连接至主链的本文定义的烷基。“烷氧基”还指 的是其中具有醚官能团的烷基，即在任何位置的主链中具有氧-ο-的烷基。实例包括但不 限于甲氧基、乙氧基等。应当理解的是，术语C(O)指的是-C = O基团，不论其是酮、醛或酸或酸衍生物。类 似地，S(O)指的是-S = O基团。“羟基”指的是-OH基团。在癌症和自身免疫疾病中的用涂本发明化合物具有有价值的药理学性质并且用于治疗疾病。在某些实施方案中， 本发明化合物用于治疗增殖性疾病或癌症。增殖性疾病主要是肿瘤疾病(或癌症)(和/或任何转移)。本发明化合物特别 用于治疗肿瘤，所述的肿瘤是乳腺癌、泌尿生殖器癌、肺癌、胃肠癌、表皮样癌、多发性骨髓 瘤、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、神经母细胞瘤、鼻、头和/或颈癌或膀胱癌，或者在更广意义中 是肾、脑或胃癌；特别是(i)乳腺肿瘤；表皮样肿瘤，例如表皮样头和/或颈肿瘤或口腔肿 瘤；肺肿瘤，例如小细胞或非小细胞肺肿瘤；胃肠肿瘤，例如结肠直肠肿瘤；或泌尿生殖器 肿瘤，例如前列腺肿瘤(特别是激素抵抗的前列腺肿瘤)；或(ii)对其它化学治疗具有抗 性的增殖性疾病；或(iii)由于多药抗性而对其它化学治疗具有抗性的肿瘤。在本发明的更广意义中，增殖性疾病进一步可以是高增殖性病症，例如白血病、增 生、纤维变性(特别是肺纤维变性，还包括其它类型的纤维变性，例如肾纤维变性)、血管生 成、银屑病、动脉粥样硬化和血管中平滑肌增生，例如狭窄或血管成形术后的再狭窄。当提及肿瘤、肿瘤疾病、癌或癌症时，还选择性地或进一步表示原发器官或组织和 /或任何其它位置中的转移，不管肿瘤和/或转移的位置。本发明化合物选择性地对快速增殖的细胞具有毒性，或比对正常细胞具有更高的 毒性，特别是在人癌细胞(例如癌性肿瘤)中，化合物具有显著的抗增殖作用和促进分化， 例如细胞周期停滞和细胞凋亡。 在其它某些实施方案中，本发明化合物用于治疗自身免疫疾病。用本发明化合物 治疗的自身免疫疾病的实例包括但不限于自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性新生儿血小 板减少、特发性血小板减少性紫癜、自身免疫性细胞减少、溶血性贫血、抗磷脂综合征、皮 炎、变应性脑脊髓炎、心肌炎、复发性多软骨炎、风湿性心脏病、肾小球肾炎、多发性硬化、神 经炎、眼色素层炎、多内分泌腺病、紫癜、赖特尔病、僵人综合征、自身免疫性肺炎、孤独症、 吉_巴综合征、胰岛素依赖性糖尿病、自身免疫性炎性眼病、自身免疫性甲状腺炎、甲状腺 功能减退症、系统性红斑狼疮、古德帕斯丘综合征、天疱疮、受体自身免疫、自身免疫性溶血 性贫血、自身免疫性血小板减少性紫癜、类风湿性关节炎、混合性结缔组织疾病、多肌炎/ 皮肌炎、恶性贫血、特发性艾迪生病、不孕症、肾小球肾炎、大疱性类天疱疮、舍格伦综合征、糖尿病、肾上腺素能抗药性、慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、白癜风、血管炎、心肌 梗塞后、心切开术综合征、荨麻疹、特应性皮炎、哮喘、炎性肌病、慢性活动性肝炎、原发性胆 汁性肝硬化和T-细胞介导的超敏反应疾病。还应当考虑的是本发明化合物用于治疗眼部疾病，包括年龄相关的黄斑变性。术语“用途”分别包括一种或多种下列本发明的实施方案在治疗蛋白激酶相关障 碍中的用途；在制备用于治疗这些疾病的药物组合物中的用途，例如在制备药物中的用途； 在治疗这些疾病中应用本发明化合物的方法；具有用于治疗这些疾病的本发明化合物的药 物制剂；以及用于治疗这些疾病的本发明化合物；正如适当的和有利的并且如果没有另外 说明。特别的是，待治疗的并且因此优选应用本发明化合物的疾病选自癌症、移植排斥反应 或自身免疫疾病，以及那些依赖蛋白激酶活性的疾病。术语“用途”进一步包括本文组合物 的实施方案，该组合物结合蛋白激酶，足以用作示踪剂或标签，以便当偶联荧光素或标签， 或具有放射性时，可以用作研究试剂或者诊断或成像试剂。本发明化合物抑制蛋白激酶活性可以应用本领域可获得的多种分析来测定。此类 分析的实例在下面实施例部分中描述。药物组合物语言化合物的“有效量”指的是治疗或预防蛋白激酶相关障碍所需的或充足的量， 例如预防蛋白激酶相关障碍和/或本文描述的疾病或病症的多种形态学和身体症状。在一 个实例中，本发明化合物的有效量指的是足以治疗个体的蛋白激酶相关障碍的量。有效量 可以取决于多种因素而不同，这些因素例如个体的大小和体重、疾病类型或特别的本发明 化合物。例如，本发明化合物的选择可以影响“有效量”的构成。本领域的普通技术人员能 够研究本文包含的因素并且做出关于本发明化合物有效量的决定，而无需过多的试验。施用方法可以影响有效量的构成。本发明化合物可以在蛋白激酶相关障碍发作前 或后施用于个体。进一步的是，数个分开的剂量以及交错的剂量可以每天或依次施用，或剂 量可以是连续输注的或可以是推注的。进一步的是，本发明化合物的剂量可以根据治疗或 预防情况的紧急事件所示的按比例增加或减少。本发明化合物可以用于治疗本文描述的状态、障碍或疾病，或者用于制备用于治 疗这些疾病的药物组合物。在治疗这些疾病中应用本发明化合物的方法，或者具有用于治 疗这些疾病的本发明化合物的药物制剂。语言“药物组合物”包括适合施用于哺乳动物(例如人)的制剂。当本发明化合 物作为药物施用于哺乳动物(例如人)时，它们可以以本身的形式施用或者作为包含例如 0. 1至99. 5%、更优选0. 5至90%的活性成分与可药用载体组合的药物组合物施用。短语“可药用载体”是技术公认的并且包括适合给哺乳动物施用本发明化合物的 可药用材料、组合物或介质。该载体包括液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包囊 材料，其参与将目标试剂从身体一个器官或部分运输或转运至身体的另一个器官或部分。 每种载体必须是“可接受的”，从这个意义上说与制剂的其它成分相容并且对患者无害。可 以用作可药用载体的材料的某些实例包括糖类，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉类，例如 玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维 素；粉末西黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石粉；赋形剂，例如可可脂和栓剂石蜡；油类，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二元醇类，例如丙二醇；多元醇类， 例如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯类，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂， 例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原的水；等渗的盐水；Ringer氏溶液；乙醇；磷酸 盐缓冲溶液；以及药物制剂中所用的其它无毒相容的物质。润湿剂、乳化剂和润滑剂(例如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁)以及着色剂、释放 剂、包衣剂、甜味剂、矫味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可以存在于该组合物中。可药用抗氧化剂的实例包括水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸、盐酸半胱氨酸、硫 酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸棕榈酸酯、丁基羟基苯甲 醚(BHA)、丁基羟基甲苯(BHT)、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；以及金属螯合剂，例 如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸等。本发明的制剂包括适合口服、鼻腔、局部、含服、舌下、直肠、阴道和/或非肠道施 用的那些制剂。该制剂通常可以以单位剂型存在，并且可以通过药学领域中众所周知的任 何方法来制备。可以与载体材料组合制备单个剂型的活性成分的量通常是产生治疗作用的 化合物的量。通常，从100%中计算，该量范围从约1 %至约99%的活性成分，优选从约5% 至约70%，最优选从约10%至约30%。制备这些制剂或组合物的方法包括将本发明化合物与载体，以及任选一种或多种 助剂组合的步骤。通常，制剂是通过均勻并且紧密地将本发明化合物与液体载体或细微分 开的固体载体或两者组合来制备的，然后如果需要，使产物成型。适合口服的本发明的制剂可以是胶囊剂、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(应用矫味基 质，通常是蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶)、散剂、颗粒剂的形式，或者作为在水性或非水性液 体中的溶液剂或混悬剂，或者作为水包油型或油包水型液体乳剂，或者作为酏剂或糖浆剂， 或者作为软锭剂(应用惰性基质，例如明胶和甘油或者蔗糖和阿拉伯胶)和/或作为口洗 剂等，每种包含预定量的本发明化合物作为活性成分。本发明化合物还可以作为大丸剂、药 糖剂(electuary)或糊剂施用。在用于口服施用的本发明的固体剂型(胶囊剂、片剂、丸剂、锭剂、散剂、颗粒剂 等)中，活性成分与一种或多种可药用载体(例如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或下列任何物 质混合的填充剂或膨胀剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；粘合剂，例 如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；保湿剂，例如甘 油；崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；溶液阻 滞剂，例如石蜡；吸收促进剂，例如季胺类化合物；湿润剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯； 吸收剂，例如高岭土和硼润土 ；润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、 十二烷基硫酸钠以及它们的混合物；以及着色剂。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况中，药物组 合物还可以包含缓冲剂。相似类型的固体组合物还可以作为填充物用于软和硬填充的明胶 胶囊剂中，应用赋形剂例如乳糖(lactose)或乳糖(milk sugars)以及高分子量的聚乙二 醇等。片剂可以通过任选与一种或多种助剂一起压制或模制进行制备。压制片剂可以应 用粘合剂(例如明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如淀 粉羟乙酸钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂来制备。模制片剂可以通过在适 合的机器中将用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物模制来制备。
本发明的药物组合物的片剂和其它固体剂型(例如锭剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂)可以任选刻痕或者用包衣和外壳(例如制药领域众所周知的肠溶包衣和其它包衣)制备。 还可以配制它们以提供缓慢或控制释放其中的活性成分，应用例如不同比例的羟丙基甲基 纤维素，以提供预期的释放特性；其它聚合物基质、脂质体和/或微球。它们可以通过例如 经截留细菌的过滤器过滤或者通过掺入无菌固体组合物(可以将其溶于无菌水中)形式的 灭菌剂或者某些其它使用前即用的无菌可注射介质来灭菌。这些组合物还可以任选包含遮 光剂，并且可以是仅或优选在胃肠道的某部位任选以延迟的方式释放活性成分的组合物。 可以应用的包埋组合物的实例包含聚合物质和石蜡。活性成分还可以是微囊化的形式，如 果适合的话，与一种或多种上述赋形剂一起。用于口服施用的本发明化合物的液体剂型包括可药用乳剂、微乳剂、溶液剂、混悬 齐U、糖浆剂和酏剂。除了活性成分之外，液体剂型可以包含本领域常用的惰性稀释剂，例如 水或其它溶剂；增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄 酯、丙二醇、1，3_ 丁二醇、油类(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚油、橄榄油、蓖麻油和芝 麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和脱水山梨醇脂肪酸酯以及它们的混合物。除了惰性稀释剂，口服组合物还可以包含佐剂，例如润湿剂、乳化剂和助悬剂、甜 味剂、矫味剂、着色剂、芳香剂和防腐剂。除了活性化合物之外，混悬剂可以包含助悬剂，例如乙氧基化的异硬脂醇、聚氧乙 烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、硼润土、琼脂和西黄蓍胶以及它们的 混合物。用于直肠或阴道施用的本发明的药物组合物的制剂可以作为栓剂存在，其可以通 过将一种或多种本发明化合物与一种或多种适合的无刺激赋形剂或载体(包括例如可可 月旨、聚乙二醇、栓剂石蜡或水杨酸酯)混合来制备，并且其在室温下是固体，但是在体温下 是液体，因此将在直肠或阴道腔内熔化并且释放活性化合物。适合于阴道施用的本发明的制剂还包括阴道环、卫生栓、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡 沫剂或喷雾制剂，其包含本领域已知的并且适合的载体。用于局部或透皮施用的本发明化合物的剂型包括散剂、喷雾剂、软膏剂、糊剂、乳 膏剂、洗剂、凝胶剂、溶液剂、贴剂和吸入剂。活性化合物可以在无菌条件下与可药用载体和 可能需要的任何防腐剂、缓冲剂或抛射剂混合。除了本发明活性化合物之外，软膏剂、糊剂、乳膏剂和凝胶剂可以包含赋形剂，例 如动物和植物脂肪、油类、蜡类、石蜡、淀粉、西黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、硼润 土、硅酸、滑石粉和氧化锌或者它们的混合物。除了本发明化合物之外，散剂和喷雾剂可以包含赋形剂，例如乳糖、滑石粉、硅酸、 氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末或者这些物质的混合物。喷雾剂还可以包含常规的抛射剂， 例如氯氟烃类和挥发性未取代的烃类，例如丁烷和丙烷。透皮贴剂具有提供控制递送本发明化合物至体内的额外优点。此类剂型可以通过 将化合物溶于或分散于适合的介质中来制备。吸收促进剂还可以用于增加化合物穿过皮肤 的流量。该流量的速率可以通过提供速率控制膜或将活性化合物分散于聚合物基质或凝胶 中来控制。眼用制剂、眼软膏剂、散剂、溶液剂等也被认为是在本发明的范围内。
适合于非肠道施用的本发明的药物组合物包含一种或多种本发明化合物以及一 种或多种可药用无菌等渗水性或非水性溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂或者无菌粉末(其 在使用前可以重新配制在无菌可注射溶液或分散液中)，其可以包含抗氧化剂、缓冲剂、抑 菌剂、溶质(其使制剂与预期受试者的血液等渗)或者助悬剂或增稠剂。本发明药物组合物中可以应用的适合的水性和非水性载体的实例包括水、乙醇、 多元醇(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)和其适合的混合物、植物油(例如橄榄油)和可注 射的有机酯(例如油酸乙酯)。适合的流动性可以例如通过应用包衣材料(例如卵磷脂)、 在分散剂的情况下通过维持所需的颗粒大小以及通过应用表面活性剂来维持。这些组合物还可以包含佐剂，例如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。预防微生物 的作用可以通过包含多种抗细菌剂和抗真菌剂(例如对羟基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚 山梨酸等)来保证。组合物中还可以希望包含等渗剂，例如糖、氯化钠等。另外，延长吸收 的可注射药物形式可以通过包含延迟吸收的试剂(例如单硬脂酸铝和明胶)来实现。
在某些情况中，为了延长药物的作用，希望延缓皮下或肌内注射中药物的吸收。这 可以通过应用具有较差水溶性的结晶或无定形物质的液体混悬液来实现。然后药物的吸收 速率取决于其溶解速率，反过来溶解速率取决于晶体大小和结晶形式。可选择的是，非肠道 施用的药物形式的延迟吸收是通过将药物溶于或混悬于油性介质中来实现的。可注射的储库形式是通过将目标化合物的微囊基质成形在生物可降解的聚合物 (例如聚乳酸-聚乙醇酸)中制备的。取决于药物与聚合物的比例和所用的特别聚合物的 性质，可以控制药物释放速率。其它生物可降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸 酐)。储库可注射制剂也是通过将药物包埋于与身体组织相容的脂质体或微乳中制备的。本发明的制剂可以通过口服、非肠道、局部或直肠施用给出。当然它们是以适合每 种施用途径的形式给出的。例如，它们以片剂或胶囊剂形式施用，通过注射剂、吸入剂、眼洗 齐U、软膏剂、栓剂等施用，通过注射、输入或吸入施用；通过洗剂或软膏剂局部施用；以及通 过栓剂直肠施用。优选口服和/或静脉内注射施用。本文所用的短语“非肠道施用”指的是除了肠内和局部施用之外的施用方式，通常 通过注射施用，并且包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、真皮内、腹 膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内和胸骨内注射和输注。本文所用的短语“全身施用”和“外周施用”指的是除了直接进入中枢神经系统之 外的化合物、药物或其它物质的施用，从而其进入患者的系统，并且因此其经历代谢和其它 过程，例如皮下施用。这些化合物可以通过任何适合的施用途径施用于人和其它动物用于治疗，所述的 施用途径包括口服、鼻施用例如通过喷雾剂、直肠、阴道内、非肠道、池内和局部施用例如通 过散剂、软膏剂或滴剂，包括含服和舌下施用。不管所选择的施用途径，将可以以适合的含水形式应用的本发明化合物和/或本 发明的药物组合物通过本领域技术人员已知的常规方法制备为可药用剂型。本发明的药物组合物中的活性成分的实际剂量水平可以是不同的，以获得活性成 分的量，对于特别的患者、组合物和施用方式，该量有效地获得预期的治疗响应并且对患者
O所选的剂量水平将取决于多种因素而不同，包括所用的本发明的特别化合物或其酯、盐或酰胺的活性、施用途径、施用时间、所用的特别化合物的排泄速率、治疗持续时间、 与所用的特别化合物组合应用的其它药物、化合物和/或物质、所治疗的患者的年龄、性 另IJ、体重、情况、一般健康和先前的医疗史以及医学领域中众所周知的因素。具有本领 域普通技术的医师或兽医可以容易地确定和开处所需的有效量的药物 组合物。例如医师或兽医可以以低于获得预期的治疗作用所需的水平开始药物组合物中所 用的本发明化合物的剂量，并且逐渐增加剂量直至获得预期的作用。通常，本发明化合物的适合的日剂量将是化合物的那个量，该量是产生治疗作用 的最低有效剂量。该有效剂量通常取决于上述因素。通常，当用于所示的镇痛作用时，对于 患者，本发明化合物的静脉内和皮下剂量的范围从约0. 0001至约100mg/kg体重/天，更优 选从约0. 01至约50mg/kg/天，并且更优选从约1. 0至约100mg/kg/天。有效量是治疗蛋 白激酶相关障碍的量。如果需要，活性化合物的有效日剂量可以是在一天中以适合的间隔分开施用的二 个、三个、四个、五个、六个或更多个亚剂量，任选以单位剂型施用。对于本发明化合物，当单独施用是可能时，优选作为药物组合物来施用化合物。合成方法本发明化合物应用本领域技术人员已知的方法从通常可获得的化合物来制备，包 括但不限于任何一种或多种下列条件在本文的范围内，除非上下文另外说明，只有容易除去的基团被指定为“保护基”， 该基团不构成本发明化合物的特别预期的终产物。通过这些保护基来保护官能团、保护 基自身和它们的裂解反应例如在标准的参考著作中有描述，例如Science of Synthesis Houben-Weyl Methods ofMolecular Transformation (合成禾斗学Houben_Weyl 分子转化 法).GeorgThieme Verlag, Stuttgart, Germany. 2005.第 41627 页.(URL :http://www. science-of-synthesis. com(电子版，48 卷))；J. F. W. McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry ( Wl/l^^Φ WiS^S ) PlenumPress, London and New York 1973 ； Τ· W. Greene禾口P. G. Μ· Wuts，“Protective Groups in Organic Synthesis (有机合成中的保 护基)”，第三版，Wiley，New York 1999 ；"The P印tides (肽类)”；第 3卷(编辑Ε· Gross和 J. Meienhofer),Academic Press,London and New York 1981 ；“Methodender organischen Chemie” (Methods of Organic Chemistry (有机化学的方法))，Houben Weyl,第四 版，第 15/1 卷，Georg Thieme Verlag, Stuttgartl974 ；H. -D. Jakubke 禾口 H. Jeschkeit, "Aminosauren, Peptide, Proteine“ (Amino acids, Peptides, Proteins ( M S 月太、蛋白质))，Verlag Chemie, ffeinheim, Deerfield Beach 和 Basel 1982 ；以及 Jochen Lehmann, "Chemieder Kohlenhydrate -Monosaccharide und Derivate" (Chemistry ofCarbohydrates Monosaccharides and Derivatives (^ ^禾口 tit 物))，Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974。保护基的特征在于它们可以容易地除去 (即无需发生不希望的继发反应)，例如通过溶剂解、还原、光解或可选择地在生理学条件 下(例如通过酶裂解)。具有至少一个盐形成基团的本发明化合物的盐可以以自身已知的方法来制备。例 如，具有酸基团的本发明化合物的盐可以例如通过用金属化合物(例如适合的有机羧酸的 碱金属盐，例如2-乙基己酸的钠盐)、用有机碱金属或碱土金属化合物(例如相应的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，例如氢氧化钠或氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾或者碳酸氢钠或碳酸 氢钾)、用相应的钙化合物或者用氨或适合的有机胺处理化合物来形成，优选应用化学计算 量或者仅少过量的盐形成试剂。本发明化合物的酸加成盐是以常规方法获得的，例如通过 用酸或适合的阴离子交换试剂处理化合物。包含酸性和碱性盐形成基团(例如游离的羧基 和游离的氨基)的本发明化合物的内盐可以例如通过将盐(例如酸加成盐)中和至等电点 (例如用弱碱)或者通过用离子交换剂处理来形成。 可以以常规方法将盐转化为游离化合物；金属和铵盐是可以例如通过用适合的酸 处理进行转化，并且酸加成盐可以例如通过用适合的碱性试剂处理进行转化。根据本发明可获得的异构体的混合物可以以自身已知的方法分离为单独的异构 体；非对映异构体可以例如通过在多相溶剂混合物间分配、重结晶和/或色谱分离(例如经 硅胶或者通过例如经反相柱的中压液相色谱法)来分离，并且外消旋体可以例如通过与旋 光纯的盐形成试剂形成盐来分离，并且由此可获得的非对映异构体混合物的分离例如借助 级分结晶或者通过经旋光活性柱材料的色谱法。中间体和最终产物可以根据标准方法来处理和/或纯化，例如应用色谱法、分布 法、(重)结晶等。通用方法条件通常下列适用于本公开提及的所有方法。合成本发明化合物的方法步骤可以在自身已知的反应条件下进行，包括特别提及 的那些条件，不存在或常规存在溶剂或稀释剂，包括例如对所用试剂是惰性的并且溶解它 们的溶剂或稀释剂，不存在或存在催化剂、缩合剂或中和剂，例如离子交换剂，例如阳离子 交换剂，例如H+形式，这取决于反应和/或反应物的性质，在降低、正常或升高的温度下，例 如温度范围从约-100°C至约190°C，包括例如从约-80°C至约150°C，例如-80至-60°C、室 温、-20至40°C或回流温度，在大气压下或在密闭容器中，其中在适合的压力下，和/或在惰 性气氛中，例如在氩气或氮气气氛下。在反应的所有阶段，可以将形成的异构体的混合物分离为单独的异构体(例如 非对映异构体或对映异构体)或者分离为任何预期的异构体混合物(例如外消旋体或 非对映异构体混合物)，例如类似于Science of Synthesis =Houben-Weyl Methods of Molecular Transformation (合成禾斗学Houben_Weyl 分子转化法)· Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Germany. 2005 中描述的方法。适合于任何特别反应而可以选择的那些溶剂包括特别提及的那些或者例如水、酯 类(例如低级烷基-低级链烷酸酯，例如乙酸乙酯)、醚类(脂肪族醚类，例如乙醚或环醚 类，例如四氢呋喃或二噁烷)、液体芳族烃类(例如苯或甲苯)、醇类(例如甲醇、乙醇或者 1-或2-丙醇)、腈类(例如乙腈)、卤代烃类(例如二氯甲烷或氯仿)、酰胺类(例如二甲 基甲酰胺或二甲基乙酰胺)、碱类(例如杂环氮碱，例如吡啶或N-甲基吡咯烷-2-酮)、羧 酸酐类(例如低级链烷酸酐，例如乙酸酐)、环状、线性或支链烃类(例如环己烷、己烷或异 戊烷)或这些溶剂的混合物，例如水溶液，除非在方法描述中另外说明。此类溶剂混合物还 可以用于处理，例如通过色谱法或分配。化合物(包括它们的盐)还可以以水合物形式获得，或者它们的结晶可以例如包 含结晶所用的溶剂。可以存在不同的结晶形式。
本发明还涉及那些方法的形式，其中将作为任何方法阶段的中间体可获得的化合 物用作原料并且进行剩下的方法步骤，或者其中原料是在反应条件下形成的或以衍生物的 形式应用的，例如以保护形式或以盐形式，或者通过本发明的方法可获得的化合物是在方 法条件下制备的并且在原位进一步处理。MM本发明还包括包含本发明化合物的可药用前药的药物组合物以及通过施用本发 明化合物的可药用前药治疗蛋白激酶相关障碍的方法。例如，可以将具有游离氨基、酰胺 基、羟基或羧基的本发明化合物可以转化为前药。前药包括这些化合物，其中将氨基酸残基 或者两个或多个(例如2、3或4个)氨基酸残基的多肽链通过酰胺键或酯键共价键合至本 发明化合物的游离氨基、羟基或羧基上。氨基酸残基包括但不限于由3个字母符号表示的 20种天然氨基酸，并且还包括4-羟基脯氨酸、羟基赖氨酸、锁链赖氨酸(demosine)、异锁链 赖氨酸、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、β-丙氨酸、Y-氨基丁酸、瓜氨酸高半胱氨酸、高丝氨 酸、鸟氨酸和甲硫氨酸砜。还包括其它类型的前药。例如，可以将游离羧基衍生化为酰胺或 烷基酯。应用AdvancedDrug Delivery Reviews (先进的药物递送综述)，1996，19，115中 列出的基团(包括但不限于半琥珀酸酯、磷酸酯、二甲基氨基乙酸酯和磷酰基氧基甲基氧 基羰基)可以将游离的羟基衍生化。正如是碳酸酯前药，羟基和氨基的氨基甲酸酯前药还 包括羟基的磺酸酯和硫酸酯。还包括将羟基衍生化成(酰基氧基)甲基和(酰基氧基)乙 基醚，其中酰基可以是烷基酯，任选被基团取代所述的基团包括但不限于醚、胺和羧酸官能 团；或者其中酰基是上述的氨基酸酯。该类型的前药在J.Med. Chem. 1996，39，10中有描述。 还可以将游离胺衍生化成酰胺、磺酰胺或磷酰胺(phosphonamide)。所有这些前药基团可以 引入基团，所述的基团包括但不限于醚、胺和羧酸官能团。因此任何涉及本发明化合物的应当理解为还表示本发明化合物的相应的前药，正 如适当的和有利的。本发明化合物还可以与其它药物组合应用，所述的其它药物例如是或者不是本发 明化合物的另外的蛋白激酶抑制剂，用于治疗个体的蛋白激酶相关障碍。术语“组合”指的是在一个剂量单位形式中的固定组合或者用于组合施用的部分的药盒，其中本发明化合物和组合伴侣可以独立地在相同时间施用或者在时间间隔内分开 施用，其特别使组合伴侣表现出合作的作用例如协同作用，或者其任何组合。本发明化合物可以与除式I化合物或其盐之外的抗炎药、抗增殖药、化学治疗药、 免疫抑制剂、抗癌药、细胞毒剂或激酶抑制剂同时或依次施用。可以与本发明化合物组合施 用的药物的进一步的实例包括但不限于PTK抑制剂、环孢菌素A、CTLA4-Ig、抗体(选自抗 ICAM-3、抗-IL-2受体、抗-⑶45RB、抗-⑶2、抗-⑶3、抗-⑶4、抗-⑶80、抗-⑶86和单克隆 抗体0KT3)、⑶40和gp39相互作用的阻滞剂、⑶40和gp39构成的融合蛋白、NF-κ B功能 抑制剂、非留体抗炎药、留体类、金化合物、抗增殖药、Π(506、麦考酚酸吗乙酯、细胞毒药物、 TNF- α抑制剂、抗-TNF抗体或可溶性TNF受体、雷帕霉素、来氟米特、环加氧酶_2抑制剂、 紫杉醇、顺钼、卡钼、多柔比星、去甲柔红霉素、柔红霉素、氨基蝶呤、甲氨蝶呤、甲基叶酸、丝 裂霉素C、海鞘素743、泊非霉素、5-氟尿嘧啶、6-巯嘌呤、吉西他滨、阿糖胞苷、鬼白毒素、依 托泊苷、依托泊苷磷酸盐、替尼泊苷、美法仑、长春碱、长春新碱、异长春碱、埃博霉素、长春地辛、环氧长春碱或其衍生物。本发明化合物和任何另外的药物可以配制在分开的剂型中。可选择的是，为了减 少施用于患者的剂型数量，可以将本发明化合物和任何另外的药物一起配制在任何组合 中。例如，可以将本发明化合物抑制剂配制在一个剂型中，并且可以将另外的药物一起配制 在另一个剂型中。任何分开的剂型可以在相同时间或不同时间施用。可选择 的是，本发明组合物包含本文描述的另外的药物。每种组分可以存在于单 独的组合物中、组合的组合物中或单个组合物中。本发明的实施例本发明通过下列实施例进一步说明，所述的实施例不应当认为是进一步的限制。 除非另外说明，本发明的实施将应用常规的细胞生物学技术、细胞培养、分子生物学、转基 因生物学、微生物学和免疫学，这些是在本领域技术之内。通用合成方法用于合成本发明化合物的所有原料、结构单元、试剂、酸、碱、脱水剂、溶剂和催 化剂是可商购获得的或者通过本领域普通技术人员已知的有机合成方法可以制备的 (Houben-Weyl 第 4 版· 1952，Methods of OrganicSynthesis (有机合成方法)，Thieme，第 21卷)。进一步的是，本发明化合物可以通过本领域普通技术人员已知的有机合成方法制 备，正如下列实施例中所示的。缩略语BINAP (士)_ (1，1，_ 联萘 _2，2，- 二基)双(二苯基膦)DIEA 二乙胺DIPEA 二异丙基乙基胺DMF二甲基甲酰胺HPLC 高压液相色谱法HRMS 高分辨质谱法HBTU 0-苯并三唑-1-基-N，N，N，，N，-四甲基脲鐺六氟磷酸盐HOBt 1-羟基-IH-苯并三唑LC/MS 液相色谱法/质谱法NMM N-甲基吗啉NMP N-甲基吡咯烷RT室温THF 四氢呋喃Et乙基NBS N-溴琥珀酰亚胺DIAD 偶氮二甲酸二异丙酯Ts甲苯磺酰基TBAF 四-正丁基氟化铵
实施例本发明化合物可以根据下列方法制备。
实施例1和14[4- (5-异丙基-IH-吡唑_4_基)-吡啶_2_基]-(2_甲基-苄基)_胺 在0°C下，在二异丙基胺(12. 6mL，89. 9mmol)的无水THF(50mL)溶液中滴加正丁基 锂(42.2mL，1.6M，在己烷中)。在0°C下30分钟后，加入2-氟-4-甲基吡啶(5g，45mmol)。 将产生的混合物在0°C下搅拌30分钟。在0°C下加入异丁酸甲酯(5.4mL，47.3mmol)后，将 反应混合物搅拌过夜。将反应混合物在0°C下用乙酸猝灭，用水稀释并且用乙醚萃取。将 有机层经硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物经快速色谱法(Si02，EtOAc/庚烷7 93至 60 40)纯化，得到4.8g l-(2-氟-吡啶-4-基)-3_甲基-丁-2-酮，为淡黄色固体。LCMS 182 (M+H)+。在1-(2-氟-吡啶-4-基)-3_甲基-丁-2-酮(4. 8g，26. 5mmol)的无水甲苯 (20mL)溶液中加入N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(16. OmL, 120. 6mmol)。将反应在90°C下 加热4小时。将混合物真空浓缩，得到粗产物，1- 二甲基氨基-2- (2-氟-吡啶-4-基)-4-甲 基-戊-1-烯-3-酮。粗产物直接应用。LCMS 237 (M+H)+。在0°C下，在I-二甲基氨基-2-(2-氟-吡啶-4-基)-4-甲基-戊烯_3_酮 (粗品，26. 5mmol)的甲醇(50mL)溶液中加入胼(0. 84mL, 26. 5mmol)。将反应混合物搅拌4 小时，用EtOAc稀释并且用水洗涤。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且真空浓缩。通 过快速色谱法(SiO2, EtOAc/庚烷5 1)纯化，得到3. 8g的2-氟-4-(5-异丙基-IH-吡 唑-4-基)-吡啶，为白色固体。LCMS 206 (M+H) +1HNMR (CDC13, 400ΜΗζ) δ 8. 18 (d, 1H)，7. 69 (s, 1H)，7. 18 (m, 1H)，3. 29 (m, 1H)， 1. 33(d，6H)。在2-氟-4-(5-异丙基-IH-吡唑_4_基)-吡啶(30mg，0. 15mmol)的无水 DMSO(0. 25mL)溶液中加入2-甲基-苄基胺(37 μ L，0. 3mmol)。将反应混合物在150°C 下搅拌过夜，用EtOAc稀释，并且用水和盐水洗涤。将有机层经硫酸钠干燥并且真空浓 缩。将粗产物通过制备HPLC纯化，得到18. Smg的[4-(5-异丙基-IH-吡唑-4-基)-吡 啶-2-基]-(2-甲基-苄基)-胺。(实施例1)LCMS 307 (M+H) +实施例2-82通过重复实施例1中描述的方法，应用适合的原料，获得下列化合物。化合物表 1列出的所有数值是以μ mo Γ1表示的IC50值。
实施例83禾口 176(R)-茚满-1-基-[4-(3-异丙基-IH-吡唑_4_基)_嘧啶_2_基]-胺 在0°C下，在二异丙基胺(10. lmL,71.8mmol)的无水THF(50mL)溶液中滴加正丁 基锂(33.61^，1.6厘，在己烷中)。在0°C下30分钟后，加入4-甲基_2_(甲基硫代)啼 唳(5mL，35.9mmol)。将产生的混合物在0°C下搅拌30分钟。在0°C下加入异丁酸甲酯 (4. 3mL,37. 7mmol)后，将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物在0°C下用乙酸猝灭，用水 稀释并且用乙醚萃取。将有机层经硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物通过快速色谱法 (Si02，Et0Ac/庚烷7 93至40 60)纯化，得到4. 3g的3-甲基-1-(2-甲基硫烷基-啼 啶-4-基)_ 丁-2-酮。LCMS 211. 1(M+H) +在3-甲基-1-(2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)_ 丁-2-酮(4. 3g，20. 5mmol)的无 水甲苯(20mL)溶液中加入N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(15. OmL，112. 9mmol)。将反应 在90°C下加热4小时。将混合物真空浓缩，得到粗产物1- 二甲基氨基-4-甲基-2-(2-甲基硫烷基_嘧啶-4-基)_戊-1-烯-3-酮。粗产物直接应用。LCMS 266. 3(M+H) +在0 °C下，在1- 二甲基氨基-4-甲基-2-(2_甲基硫烷基-嘧 啶-4-基)_戊-1-烯-3-酮(粗品，20. 5mmol)的甲醇(20mL)溶液中加入胼(0. 65mL， 20.5mmol)。将反应混合物搅拌4小时，用EtOAc稀释并且用水洗涤。将有机层用盐水洗 涤，经硫酸钠干燥，并且真空浓缩。通过快速色谱法(Si02，EtOAc/庚烷5 1)纯化，得到 4. 28g的4-(3-异丙基-IH-吡唑-4-基)_2_甲基硫烷基-嘧啶，为黄色固体。LCMS 235. 1 (M+H) +在0°C下，在4- (3-异丙基-IH-吡唑_4_基)_2_甲基硫烷基-嘧啶(2. Og, 8. 5mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中加入mCPBA(5. 2g，21. 3mmol)。将反应混合物搅拌2 小时，用20% Na2S2OyK溶液猝灭，并且用二氯甲烷萃取。将萃取液用饱和的NaHCO3溶液 和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且真空浓缩。将残留物通过快速色谱法(Si02，EtOAc/庚烷 10 1)纯化，得到1.79g的4-(3-异丙基-IH-吡唑-4-基)-2-甲磺酰基-嘧啶，为白色 固体。LCMS 267. 1 (M+H) +在4- (3-异丙基-IH-吡唑-4-基)-2-甲磺酰基-嘧啶(40mg，0. 15mmol)的无水 DMSO (0. 25mL)溶液中加入(R)-茚满基胺(58yL，0. 45mmol)。将反应混合物在150°C下 搅拌过夜，用二氯甲烷稀释，并且用水洗涤。将有机层经硫酸钠干燥并且真空浓缩。将粗产 物通过制备HPLC纯化，得到20mg的(R)-茚满-1-基-[4- (3-异丙基-IH-吡唑-4-基)-嘧 啶-2-基]-胺。(实施例83)。LCMS 320. 2(M+H) +实施例84-191通过重复实施例83中描述的方法，应用适合的原料，获得下列化合物。表2列出的所有数值是以μ mo Γ1表示的IC50值。
牛物学活件p-pRb/S780ELISA 细胞试验将Maxisorp板(Nunc 442404)用在DPBS (磷酸缓冲盐溶液)中稀释的50 μ L 1 μ g/mL总的磷酸化的视网膜母细胞蛋白(pRb)抗体(4H1细胞信号传导9309L)在4°C 下包被过夜。第二天，将板用在TBST中的Superblock(Pierce 37535)封闭1小时至过 夜，期间更换封闭液一次。将细胞在50-60%融合时置于含IOOyL完全培养基(该培养 基包含胎牛血清(Gibco 1600-044)、2mM L-谷氨酰胺(Gibco 25030)和青霉素/链霉 素(Gibcol5140-122))的 96 孔板(Corning 3585)中，并且在 37°C禾口 5% CO2 的潮湿箱中 培养过夜。将化合物(在DMSO中)稀释在培养基中以产生7点系列稀释的化合物，其浓 度范围从11(^11至0.02711|1。将10 μ L稀释的化合物加入至细胞中，细胞中最终浓度范 围从10 μ M至0. 002 μ Μ。将细胞在37°C和5% CO2的潮湿箱中处理24小时。将化合物温 育后，将细胞用 40 μ L/孔裂解缓冲液(50mM Tris-HCl pH 7. 5 (Invitrogen 15567-027)、 120mMNaCl(Promega V4221)、lmM EDTA(Gibco 15575-038)、6mM EGTA(Fisher 02783-100)、 1% Nonidet P40 (Fluka R02771))裂解。将板在 4°C 的 Titerplate 摇床(Labline model 4625)上放置5分钟，以裂解细胞。裂解后，将10 μ L细胞裂解物和50 μ L IXPBS/10% Superblock(Gibco 10010和Pierce 37535)加入至预包被和封闭的Maxisorp板的每孔 中，并且在室温下、在Oribtron旋转器II (Boekel Industries Model 260250)上结合2 小时。然后应用安装有Biostack的Biotek洗板机将板用lXTBST(Tekn0Va T9201)洗 涤3次。最后洗涤液没有抽吸。将最后洗涤液通过轻弹并且在纸巾上轻叩板来除去。将 ppRbS780 抗体(细胞信号传导 9307L)以 1 1000 稀释在 1 XPBS/10% Superblock(Gibco
7210010和Pierce 37535)中，并且每孔加入50 μ L。然后将板在Oribtron旋转器II (Boekel Industries Model 260250)上温育1小时。然后将板如上述那样洗涤。将山羊抗兔 HRP (Promega W401B)以 1 2500 稀释在 1 XPBS/10% Superblock(Gibco 10010 和 Pierce 37535)中，并且每孔加入50 μ L。然后，将板在Oribtron旋转器II上温育30分钟。然后 将板如上述那样洗涤。然后，每孔加入50 μ L Ultra TMB ELISA(Pierce 34028)。将板温 育5-20分钟直至显蓝色。然后，每孔加入50yL 2M硫酸(Mallinckrodt 2468-46)终止反 应。每板在450nm处的吸收是在Spectramax Plus (Molecular Devices)上读取的。该试 验结果归纳在表1和2中。BrdU 试验将 Roche Diagnostic(Cat. # 11647229001，9115 Hague Road, Indianapolis, IN 50414)的细胞增殖ELISA BrdU(色度法)试剂盒用于该试验。简而言之，将细胞在50-60% 融合时置于含RMPI 1640培养基的96孔板中。第二天，将细胞用预期浓度范围的化合物 处理，然后在37°C和5% CO2的潮湿箱中温育24小时。根据试剂盒提供的方法，将细胞用 BrdU标记试剂标记2小时，然后用200 μ L的FixDenat在室温下固定30分钟。将100 μ L的 抗-BrdU抗体加入至细胞中并且在室温下温育2小时。然后将细胞用200 μ L/孔的PBS洗 涤3次，然后每孔加入100 μ L显色液。温育5-10分钟后，吸收在370nm处应用Spectramax Plus (Molecular Devices)读取。该试验的结果归纳在表1和2中。上面优选的实施方案用于说明本发明的范围和精神。本文提供的描述将使得其它 实施方案和实施例对于本领域技术人员是显而易见的。这些其它的实施方案和实施例是在 本发明的考虑之内。因此，本发明应当仅被所附的权利要求限制。
权利要求
式I化合物或可药用盐其中R1是C1-6-烷基、C3-14-环烷基、3至14元环杂烷基、C6-14芳基、C1-6-烷氧基、C1-6烷基C6-14芳基、C1-6烷基C3-14环烷基、C1-6烷基-3至14元环杂烷基、C1-6烷基-5至14元杂芳基、C1-6烷基OR7、C1-6烷基NR5R6、C1-6烷氧基C6-14芳基、C1-6烷基CN或C1-6烷基C(O)OR7，其可以是未取代的或者被一个或多个C1-6-烷基、C6-14-芳基、羟基、C1-6-烷基卤素、C1-6烷氧基卤素、卤素、C1-6-烷氧基、C1-6烷基C6-14芳基、C(O)OR8、CN、氧代或NR9R10取代；R2是H、C1-6-烷基、C2-6-链烯基、C2-6-炔基、羟基或卤素；R3和R4独立地是H、C1-6-烷基、C3-14-环烷基或卤素，其可以是未取代的或取代的；R5、R6、R7、R8、R9和R10独立地是氢、C1-6-烷基、C2-6-链烯基、C2-6-炔基、C3-14-环烷基、5至14元杂芳基、C6-14-芳基、C(O)OR11或C(O)R11，其可以是未取代的或取代的；X是N或CR12，其中R11和R12独立地是H、卤素或C1-6-烷基。FPA00001143237000011.tif
2.权利要求1的式I化合物，其中R1是Cp6-烷基、C3_14-环烷基、C6_14芳基、3至14元 环杂烷基、Cp6烷基C6_14芳基、CV6烷基C3_14环烷基、Cp6烷基-3至14元环杂烷基或Cp6烷 基-5至14元杂芳基，其可以是未取代的或者被一个或多个Cp6-烷基、C6_14-芳基、羟基、 CV6-烷基卤素、卤素、Cp6-烷氧基、CV6烷基C6_14芳基取代。
3.权利要求1至2中任意一项的式I化合物，其中R1是C3_14-环烷基、C6_14芳基、3至 14元环杂烷基、Cp6烷基C6_14芳基或CV6烷基C3_14环烷基，其可以是未取代的或者被一个或 多个Cp6-烷基或c6_14-芳基取代。
4.权利要求1至3中任意一项的式I化合物，其中R3和R4独立地是H、CV6-烷基或 13-14 -环烷基。
5.权利要求1至4中任意一项的式I化合物，其中R3和R4之一是H，并且R3和R4中的 另一个是Cp6-烷基或C3_14-环烷基。
6.权利要求1至5中任意一项的式I化合物，其中R4是H，并且R3是甲基、乙基或丙基。
7.权利要求1至6中任意一项的式I化合物，其中X是N或CH。
8.权利要求1至7中任意一项的式I化合物，其中X是N。
9.权利要求1至8中任意一项的式I化合物，其中R1选自 R3是甲基或异丙基。
10.药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的权利要求1至9中任意一项的式I化 合物。
11.治疗患有增殖性疾病的哺乳动物的方法，该方法包括给需要治疗的所述哺乳动物 施用治疗有效量的权利要求1至9中任意一项的式I化合物。
12.抑制细胞增殖的方法，该方法包括给需要的细胞或哺乳动物施用有效量的权利要 求1至9中任意一项的式I化合物以抑制细胞增殖。
13.权利要求1至9中任意一项的式I化合物，其用于药物。
14.权利要求1至9中任意一项的式I化合物，其用于癌症。
全文摘要
本发明描述了用于治疗、预防和/或改善疾病的式(I)的有机化合物，特别描述了抑制蛋白激酶的吡唑化合物和衍生物。该有机化合物用于治疗增殖性疾病。
文档编号C07D401/14GK101883764SQ200880118751
公开日2010年11月10日 申请日期2008年12月8日 优先权日2007年12月7日
发明者C·T·布雷恩, 侯英, 武成, 赵英伸 申请人:诺瓦提斯公司;阿斯泰克斯治疗有限公司