专利名称：一种制备印度苦木素类化合物的方法
技术领域：
本发明属于中药化学领域，涉及一种制备印度苦木素类化合物的方法。
背景技术：
苦木科(Simaroubaceae)植物，主要分布于热带和亚热带地区。我国有4属，约10种，分布于长江以南各省，是一类重要的药用植物资源。该科植物所含化学成分主要为苦木苦味素(Quassinoids)和生物碱，其次为三萜、留醇、皂苷、香豆素、醌类等。印度苦木Quassia indica (Gaertn. ) Nooteboom中分离得到苦木素类化合物印度苦木素C和印度苦木素X。印度苦木素C和X均具有细胞毒活性，体外对KB细胞IC5tl分别为I. 00 μ g/mL、O. 60 μ g/mL ;印度苦木素X还具有抗肿瘤活性，浓度为10 μ g/mL时刻抑制中性白细胞粘附 于由肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞。现有技术中，尚没有适用于印度苦木素类化合物工业化大生产的制备工艺报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种制备印度苦木素类化合物的方法，该方法提取率高、操作过程简单、能耗低、成本低。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种制备印度苦木素类化合物的方法，其特征在于包括以下步骤
以印度苦木茎为原料放入高速组织匀浆捣碎机中，在IOOOOrpm条件下保持IOmin后，加入一定量的水，再加入O. 5%的纤维素酶，在超声功率400-700W、35-40 °C条件下酶解30min,再低温干燥，加入乙醇加热回流,合并回流液,滤过,取滤液,减压回收乙醇至尽,用正丁醇和水的混合溶液进行5-6级逆流萃取，合并萃取液，减压浓缩，加到氧化镁柱层析，正己烷-乙酸乙酯洗脱，收集含印度苦木素的洗脱液，减压回收试剂并干燥即得。所述多级逆流萃取步骤中，正丁醇和水的体积比为10:1。所述正己烷-乙酸乙酯洗脱，按正己烷-乙酸乙酯体积比5:1、3:1、I: I、1:3进行
梯度洗脱。本发明采用组织破碎、酶解和超声萃取处理物料，并利用多级逆流萃取和柱层析技术分离提取出印度苦木素类物质，具有提取率高、操作过程简单、能耗低、成本低等优点。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
取印度苦木茎2kg先切成小段，再放入高速组织匀浆捣碎机中，在IOOOOrpm条件下保持IOmin后，加入6kg水，再加入O. 5%纤维素酶，在超声功率500W、38°C条件下酶解30min，再在65°C干燥，加入8L60%乙醇加热回流提取I次，提取2h，收集提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至尽，用体积比为10:1的正丁醇-水混合溶液进行5级逆流萃取，合并萃取液，减压回收试剂，将浓缩液加入氧化镁柱层析(浓缩液与氧化镁用量比为1:3)，按正己烷-乙酸乙酯体积比5:1、3:1、I: I、1:3进行梯度洗脱，每个梯度用量400ml，收集合并印度苦木素流分，减压浓缩干燥、粉碎制得印度苦木素粉末。实施例2:
取印度苦木茎2kg先切成小段，再放入高速组织匀浆捣碎机中，在IOOOOrpm条件下保持IOmin后，加入6kg水，再加入O. 5%纤维素酶，在超声功率700W、40°C条件下酶解30min，再在70°C干燥，加入10L70%乙醇加热回流提取3次，提取I. 5h，收集提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至尽，用体积比为10:1的正丁醇-水混合溶液进行6级逆流萃取，合并萃取液，减压回收试剂，将浓缩液加入氧化镁柱层析(浓缩液与氧化镁用量比为1:5)，按正己烷-乙酸乙酯体积比5:1、3:1、I: I、1:3进行梯度洗脱，每个梯度用量400ml，收集合并印度苦木素流分，减压浓缩干燥、粉碎制得印度苦木素粉末。 实施例3: 取印度苦木茎2kg先切成小段，再放入高速组织匀浆捣碎机中，在IOOOOrpm条件下保持IOmin后，加入IOkg水，再加入O. 5%纤维素酶，在超声功率400W、35°C条件下酶解30min，再在75°C干燥，加入6L65%乙醇加热回流提取2次，提取2h，收集提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至尽，用体积比为10:1的正丁醇-水混合溶液进行5级逆流萃取，合并萃取液，减压回收试剂，将浓缩液加入氧化镁柱层析(浓缩液与氧化镁用量比为1:4)，按正己烷-乙酸乙酯体积比5:1、3:1、I: I、1:3进行梯度洗脱，每个梯度用量400ml，收集合并印度苦木素流分，减压浓缩干燥、粉碎制得印度苦木素粉末。
权利要求
1.一种制备印度苦木素类化合物的方法，其特征在于包括以下步骤以印度苦木茎为原料放入高速组织勻衆捣碎机中，在IOOOOrpm条件下保持IOmin后,加入一定量的水,再加Λ O. 5%的纤维素酶，在超声功率400-700W、35-40°C条件下酶解30min，再低温干燥，加入乙醇加热回流，合并回流液，滤过，取滤液，减压回收乙醇至尽，用正丁醇和水的混合溶液进行5-6级逆流萃取，合并萃取液，减压浓缩，加到氧化镁柱层析，正己烷-乙酸乙酯洗脱，收集含印度苦木素的洗脱液，减压回收试剂并干燥即得。
2.如权利要求I所述的一种制备印度苦木素类化合物的方法，其特征在于所述多级逆流萃取步骤中，正丁醇和水的体积比为10: I。
3.如权利要求I所述的一种制备印度苦木素类化合物的方法，其特征在于所述正己烷-乙酸乙酯洗脱，按正己烷-乙酸乙酯体积比5:1、3:1、1:1、1:3进行梯度洗脱。
全文摘要
本发明公开了一种制备印度苦木素类化合物的方法，以印度苦木为原料，先通过组织破碎、纤维素酶酶解和超声萃取的方法将要萃取的物质从原料中分离出来，然后用正丁醇-水混合溶液进行多级逆流萃取和氧化镁柱层析技术分离提取出印度苦木素类物质。该方法具有提取率高、操作过程简单、能耗低、成本低等特点。
文档编号C07D493/10GK102838615SQ201210350170
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月20日 优先权日2012年9月20日
发明者刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司