一种肥胖相关基因的检测方法及其应用与流程

文档序号:14590145发布日期:2018-06-02 06:31阅读:427来源:国知局

本发明属于核酸分子检测领域,具体涉及一种肥胖相关基因的检测方法及其应用。



背景技术:

肥胖基因是一种食欲与能量平衡调节途径的组成部分,而这种途径的失衡直接或者间接导致体脂肪的积累和体重增加。

随着社会经济发展,人们的生活日益富足,肥胖也成为人们日益关注的问题。中国肥胖者已超过9000万,超重者高达2亿。肥胖不但会导致糖尿病、高血压、癌症等诸多疾病,还会使人早逝。有数据表明,肥胖者早逝的危险是非肥胖者的1.3—2倍。

许多科学研究表明,基因与肥胖存在千丝万缕的联系。肥胖与遗传有很大关系,肥胖基因在肥胖的发生中起重要作用。肥胖是多基因遗传病,已研究发现的与肥胖相关的基因或染色体区域已达200多个,遗传对肥胖的影响作用占40%-60%,一半左右的肥胖是由遗传基因决定的。因此,提供一种肥胖相关基因的检测方法具有重要的意义。



技术实现要素:

针对现有技术的不足,本发明的主要目的在于提供一种肥胖相关基因的检测方法及其应用。

为实现前述发明目的,本发明采用的技术方案包括:本发明提供了一种肥胖相关基因的检测方法,其包括先选取带有荧光标记的探针和提取目的基因,之后将探针和基因混合;若发出光亮,则提取的基因含有肥胖相关基因;若不发出光亮,则提取的基因不含有肥胖相关基因。

在一些实施方案之中,所述荧光标记为羟基荧光素或四氯荧光素。

在一些实施方案之中,所述探针的基因序列为SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2。

本发明还提供了一种包含上述探针的肥胖相关基因诊断试剂盒。

在一些实施方案之中,所述试剂盒内还包括PCR 反应缓冲液、dNTPs、引物组、Taq 酶和ddH2O。

在一些较为具体的实施方案之中,所述PCR 反应缓冲液包括浓度为8—10μmol/L的上游引物和下游引物各1.5μL,浓度为10—16ng/μL的DNA模板1μL。

在一些更为具体的实施方案之中,所述PCR反应缓冲液的体积为20μL。

在一些实施方案之中,所述PCR扩增反应的条件为:温度为90—100℃的环境下预变性3—6min,温度为95—100℃的环境下变性30s,温度为55—60℃的环境下退火40—60s,温度为70—80℃的环境下延伸30s,循环40个,最后在温度为2—6℃的条件下保存即可。

与现有技术相比,本发明的优点包括:本发明提供了一种肥胖相关基因的检测方法,能够及时准确的对肥胖基因进行检测,且本发明提供的探针序列能够快速的与肥胖基因结合,从而提高检测速度。本发明还提供了一种包含上述探针的肥胖相关基因诊断试剂盒,便于随时携带、使用对肥胖相关基因进行检测。

具体实施方式

下文将对本发明的技术方案作更为详尽的解释说明。但是,应当理解,在本发明范围内,本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合,从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅,在此不再一一累述。

本发明提供了一种肥胖相关基因的检测方法,其包括先选取带有荧光标记的探针和提取目的基因,之后将探针和基因混合;若发出光亮,则提取的基因含有肥胖相关基因;若不发出光亮,则提取的基因不含有肥胖相关基因。

其中,所述荧光标记为羟基荧光素或四氯荧光素。所述探针的基因序列为SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2。

进一步的,本发明还提供了一种包含上述探针的肥胖相关基因诊断试剂盒。所述试剂盒内还包括PCR 反应缓冲液、dNTPs、引物组、Taq 酶和ddH2O。所述PCR 反应缓冲液包括浓度为8—10μmol/L的上游引物和下游引物各1.5μL,浓度为10—16ng/μL的DNA模板1μL。

进一步的,所述PCR反应缓冲液的体积为20μL。

进一步的,所述PCR扩增反应的条件为:温度为90—100℃的环境下预变性3—6min,温度为95—100℃的环境下变性30s,温度为55—60℃的环境下退火40—60s,温度为70—80℃的环境下延伸30s,循环40个,最后在温度为2—6℃的条件下保存即可。

实施例一

本发明提供了一种肥胖相关基因的检测方法,其包括先选取带有荧光标记的探针和提取目的基因,之后将探针和基因混合;若发出光亮,则提取的基因含有肥胖相关基因;若不发出光亮,则提取的基因不含有肥胖相关基因。

其中,所述荧光标记为羟基荧光素或四氯荧光素。所述探针的基因序列为SEQ ID NO:1。

进一步的,本发明还提供了一种包含上述探针的肥胖相关基因诊断试剂盒。所述试剂盒内还包括PCR 反应缓冲液、dNTPs、引物组、Taq 酶和ddH2O。所述PCR 反应缓冲液包括浓度为8μmol/L的上游引物和下游引物各1.5μL,浓度为10ng/μL的DNA模板1μL。

进一步的,所述PCR反应缓冲液的体积为20μL。

进一步的,所述PCR扩增反应的条件为:温度为90℃的环境下预变性3min,温度为95℃的环境下变性30s,温度为55℃的环境下退火40s,温度为70℃的环境下延伸30s,循环40个,最后在温度为2℃的条件下保存即可。

实施例二

本发明提供了一种肥胖相关基因的检测方法,其包括先选取带有荧光标记的探针和提取目的基因,之后将探针和基因混合;若发出光亮,则提取的基因含有肥胖相关基因;若不发出光亮,则提取的基因不含有肥胖相关基因。

其中,所述荧光标记为羟基荧光素或四氯荧光素。所述探针的基因序列为SEQ ID NO:2。

进一步的,本发明还提供了一种包含上述探针的肥胖相关基因诊断试剂盒。所述试剂盒内还包括PCR 反应缓冲液、dNTPs、引物组、Taq 酶和ddH2O。所述PCR 反应缓冲液包括浓度为10μmol/L的上游引物和下游引物各1.5μL,浓度为16ng/μL的DNA模板1μL。

进一步的,所述PCR反应缓冲液的体积为20μL。

进一步的,所述PCR扩增反应的条件为:温度为100℃的环境下预变性6min,温度为100℃的环境下变性30s,温度为60℃的环境下退火60s,温度为80℃的环境下延伸30s,循环40个,最后在温度为6℃的条件下保存即可。

本发明的技术内容及技术特征已揭示如上,然而熟悉本领域的技术人员仍可能基于本发明的教示及揭示而作种种不背离本发明精神的替换及修饰,因此,本发明保护范围应不限于实施例所揭示的内容,而应包括各种不背离本发明的替换及修饰,并为本专利申请权利要求所涵盖。

<110> 光瀚健康咨询管理(上海)有限公司

<120> 一种肥胖相关基因的检测方法及其应用

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<170> PatentIn version 3.3

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<212> DNA

<213> 人工序列

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<213> 人工序列

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