流分初 始体积10%的亚硫酸钢的10%水溶液。
[0195] W下实施例表示单次注射的输出。也可合并来自多次注射的输出并处理。收集 3.5L的产物流分体积（包括亚硫酸钢）并采用氨氧化钢溶液将抑调节至4. 0-4. 5。用2 L二氯甲烧洗涂水溶液并分离和弃去有机层。
[0196] 采用氨氧化钢将水层的抑调节至7. 5-8. 5并用2. 4L二氯甲烧提取产物4次。在 每一次提取之前用氨氧化钢或MSA将pH再次调节至7. 5-8. 5 合并4份二氯甲烧层并浓缩至约200mU然后将其缓慢加入到（经约10分钟的时间期 间）剧烈揽拌的正庚烧（2. 5L)中。在室溫下揽拌混悬液约10分钟并用正庚烧1. 5L缓 慢稀释（经5分钟的时间期间）。使浆状物冷却至0-5Γ并揽拌1-2小时。过滤悬浮的固 体并用3X150mL份的正庚烧洗涂。在40°C真空干燥产物至少24小时，直到得到恒重并 且所有残留溶剂的水平在规定范围内。分离为黄色固体的约13.6g9-(2'，2'-二甲基丙 基氨基甲基）米诺环素游离碱。
[0197] 实施例3:化合物1的晶体肥1盐的制备 使化合物1 (13g)溶于丙酬（300mL)中，过滤并用丙酬另外洗涂滤器。使合并的滤 液和洗液冷却至5°C。向合并的滤液和洗液中，在伴随剧烈揽拌下缓慢加入浓肥1 (3. 9mL) 在丙酬（79mL)中的溶液。在冰浴中揽拌生成的浆状物15分钟并滤出。
[019引用冷的丙酬和戊烧洗涂第一批收获的固体并真空干燥48小时，得到13. 7g黄色 无定形固体。用侣锥遮盖含有饱和滤液的烧瓶并放置2周，期间观察到单晶生长。经过滤 收集晶体并用庚烧洗涂。
[0199] 实施例4:化合物1的晶体甲横酸盐的制备 向在惰性氮气氛下的25-mL3颈烧瓶中，加入3mL异丙醇（IPA)。通过向烧瓶中加入 225mg化合物1的无定形游离碱制备浆状物。将浆状物溫热至45°C的溫度。然后向浆状 物中加入甲横酸水合物巧8.0mg)。在45°C下揽拌浆状物1小时，然后冷却至22°C，产生 稠的晶体浆状物。过滤浆状物并用IPA(2X1mL)洗涂。通过在55°C下干燥多于2小时 自晶体滤饼除去过量的IPA，得到恒重。分离化合物1的晶体甲横酸（甲烧横酸）盐（180 mg)。测定到晶体甲横酸盐在5°C下不稳定。
[0200] 实施例5:化合物1的晶体甲苯横酸盐的制备（采用浆状物方法） 向在惰性氮气氛下的5-L3颈烧瓶中，加入2.0L异丙醇（IPA)。通过向烧瓶中加入289g化合物1的无定形游离碱制备浆状物。然后向浆状物中加入对-甲苯横酸水合物巧7.0 g)在IPA(400mL)中的溶液。在伴随加入水巧mL)下，将浆状物上清液的水含量调节至 0.6g/l，并在20-25Γ下揽拌浆状物18小时，产生稠的晶体浆状物。过滤浆状物并用IPA (2X500mL)洗涂。经吹送干燥氮气通过滤饼24小时自晶体滤饼除去过量的IPA。固体 含有3重量％(wt%)的IPA，在70-75%相对湿度下，吹送湿润的氮气通过滤饼24小时进一 步干燥滤饼。滤饼保留有0.9wt%的IPA，其通过该方法没有进一步减少。然后经吹送干 燥氮气通过滤饼24小时，自滤饼除去过量的水。分离为澄色粉末的化合物1的甲苯横酸盐 (337g)。所分离的化合物1的甲苯横酸盐为仅有一种形式被观察到的晶体：非化学计量的 半水化合物，如通过X-射线粉末衍射（XPRD)和热解重量（thermogravimetricTG)分析测 定的那样。
[0201] 实施例6:化合物1的晶体甲苯横酸盐的制备（采用溶液方法） 向在惰性氮气氛下的5-L3颈烧瓶中，加入1.7L甲醇和1.7L甲基叔下基酸。伴随 揽拌下向烧瓶中加入对-甲苯横酸一水合物（209g)和化合物1的无定形游离碱巧56g)， 得到澄明的溶液。加入晶种量（3g)的化合物1的W甲苯横酸盐W引发结晶并加入另外量 的甲醇（0. 1L)和甲基叔下基酸（0. 5L)。在约20°C下揽拌生成的浆状物22小时，产生稠 的晶体浆状物。过滤浆状物并先后用1. 1L甲醇与1. 3L甲基叔下基酸的混合物和甲基叔 下基酸（2X2.4L)洗涂。分离为澄色粉末的化合物1的甲苯横酸盐。经吹送干燥氮气通 过滤饼24小时自晶体滤饼除去过量的溶剂。然后在约3(TC下真空干燥滤饼直到固体包含 约6重量％(wt%)的溶剂。在约45°C下进一步真空干燥滤饼直到固体包含少于3重量％ (wt%)的溶剂。所分离的化合物1的甲苯横酸盐为如通过X-射线粉末衍射狂PRD)测定的 被观察到的1型的晶体。
[0202] 实施例7:化合物1的甲苯横酸盐的表征 所分离化合物1的甲苯横酸盐的XRPD图在5. 6、8. 0、8. 6、11. 4、13. 0、15. 5、18. 8、20. 4 和24. 5度包含2Θ值。
[0203] 在氮气流下，于10°C/分钟的加热速率下，使晶体甲苯横酸盐经历热解重量（TG) 分析。由于失水，在高达81. 3°C下观察到重量减轻3. 9%。
[0204] 在干燥下，化合物1的晶体甲苯横酸盐中的水含量被计算为0. 5%。在于室溫下放 置24小时后，该值增加5%。与无定形化合物1相反，化合物1的晶体甲苯横酸盐在室溫下 稳定数周和数月，保持水含量为约5%。
[0205] 采用对称水蒸汽吸附分析仪测定受试晶体甲苯横酸盐的吸湿性，并且报告为作为 25°C下W5%间隔自5%-95%-1%百分比相对湿度饼RH)的函数得到的wt%。观察到在95%RH 下最大增重12wt%，伴随解吸轻微滞后，并观察到由于IPA造成2wt%减少。
[0206] 晶体甲苯横酸盐被测定具有概述于W下表6中的溶解度。通过在环境溫度下混合 过量的固体与溶剂2小时，随后过滤上清液测定溶解度。通过高效液相色谱法0PLC)测定 上清液浓度。通过在0.5mL水中平衡56. 8mg受试晶体甲苯横酸盐和在1.0mL水中平衡 122. 1mg受试晶体甲苯横酸盐得到澄明溶液。122. 1mg受试晶体甲苯横酸盐在1.0血水 中的抑被测定为5. 70。
[0207] 表6
实施例8:化合物1的XRPD 在采用CuΚα福射（40kV, 40mA)、Θ-Θ角度计、V20发散（divergence)和接收狭 缝、石墨二级单色光镜和闪烁计数器的SiemensD5000衍射仪上收集X-射线粉末衍射图。 采用认证的Corundum标准（NIST1976)检查仪器性能。用于数据收集的软件为DifTrac PlusX畑Commanderv2. 3.1 并采用DiffracPlusEVAV11,0. 0.2 或V13. 0.0. 2 分析并 呈现数据。
[020引将粉末状样品制备为平板样本使用。将约35mg样品轻轻填装到切割为平滑的零 背景巧10)娃晶片腔体内。在分析期间W其自身平面旋转样品。数据收集的细节为： 角度范围：2-42° 2 Θ步长：0.05° 2 Θ 收集时间：4秒/步 在采用化Κα福射（40kV, 40mA)、自动化別Z镜台、用于自动样品定位的激光视频 显微镜和化Star2维平面检测器的化址erAXSC2GA孤S衍射仪上收集高分辨X-射线粉 末衍射图。X-射线光学仪器由连接于0.3mm针孔型准直仪的单一G加el多层镜组成。
[0209] 样品上的光束发散度即X-射线光束的有效大小为约4mm。Θ-Θ连续扫描模式 用于样品-检测器距离为20 cm,得到3.2° -29.7°的有效2Θ范围。通常，使样品曝露于 X-射线光束120秒。用于数据收集的软件为用于WNT4.1. 16的GADDS并且采用DifTrac PlusEVAV9. 0. 0. 2或V13. 0. 0. 2分析并呈现数据。
[0210] 实施例9:溫度和水分稳定性研究 通过用高效液相色谱法0PLC)对每一种盐在曝露于各种溫度和/或湿度条件时监 测杂质分布变化，对化合物1的甲苯横酸盐和甲横酸盐实施稳定性研究。将每一个样品置 于密闭容器中并曝露于Ξ种受到控制的环境条件下：冷藏巧°C)、20°C和60%相对湿度及 40°C和75%相对湿度。在2周后，晶体甲苯横酸盐被测定为化合物1的最稳定晶型。继续 晶体甲苯横酸盐的稳定性研究。
[0211] 通过W下反相HPLC杂质分布方法，对甲苯横酸盐在时间点0、1、2、4周（表7)和 3个月（表8);和对甲横酸盐在时间点0、1和2周（表9)分析样品。
[0212] 尽管期望采用相似或等同的柱子分析得到相似的结果，但是采用SYMMETRY 甜IELDRP18柱（4. 6X250mm, 5pm粒度）实施反相HPLC分析。流动相组分为（A)在 pH3. 3下于水中和度）于乙腊中的0. 01Μ乙酸锭。流动相组成为于5分钟内自6%增加至 15%Β，在15%Β下保持15分钟，于10分钟内自15%增加至60%Β，然后于2分钟内自60% 增加至90%Β，并然后在6%Β下再次平衡系统4分钟的梯度。流速为1.0mL/分钟，并且注 射体积为10. 0μL。柱溫保持在30°C下。经在280皿下紫外光0JV)检测。化合物1的 保留时间为约15. 7分钟。将样品溶液W流动相A制备至最终浓度为2. 0mg/mL。
[021 引 表7
*RH意指相对湿度 ^當杂质包括具体批次中的所有杂质""RRT1.26意指β-差向异构体。 [0214] 表8
*RH意指相对湿度 "^當杂质包括具体批次中的所有杂质 表9
W上数据证明了当在冷藏和/或20°C与60%RH条件下储存至少4周时，化合物1的 甲苯横酸盐是稳定的。化合物1的甲苯横酸盐在〇°C-70°C范围内，或在5°C-50°C范围内， 或在20°C-30°C范围内是稳定的。
[021 引 实施例10:光稳定性研究 对化合物1的甲苯横酸盐实施光稳定性研究。在澄明的玻璃有盖培养皿中制备两个样 品。一个样品用侣锥包裹用作对照样品。将两个样品置于ES 2000化viro皿ental Li曲t 10化amber中并曝露于12千勒的冷白色巧光光线（fluorescent li曲t)总计47小时。然 后经HPLC杂质分布方法分析样品并且结果概述于表10中。
[0216]表10
等价物 本领域技术人员应认识到或者能够采用不多于常规实验确定在此所描述的具体实施 方案和方法的许多等价物。运样的等价物打算包括在W下权利要求书的范围内。
[0217] 本文所引用的所有的专利、专利申请及参考文献均通过参照明确地结合到本文 中。
【主权项】
1. 化合物1的晶形：2. 化合物1的甲苯磺酸盐：3. 权利要求2的盐的晶形。4. 权利要求3的晶形的多晶型物，其特征在于X-射线粉末衍射图与在图8中显示的粉 末衍射图基本相似。5. 权利要求4的多晶型物，其特征在于采用Cu Ka辐射在约8. 06、13. 02和18. 83 ° 2Θ包含峰的X-射线粉末衍射图。6. 权利要求4的多晶型物，其特征在于采用Cu Ka辐射在约8. 06、11.41、13. 02、 18. 83、20. 54和24. 53° 2 Θ包含峰的X-射线粉末衍射图。7. 权利要求4的多晶型物，其特征在于采用Cu Ka辐射在约5. 60、8. 06、8. 57、11. 41、 13. 02、15. 58、18. 83、20· 54和24. 53° 2 Θ包含峰的X-射线粉末衍射图。8. 通过使以下化合物1的甲苯磺酸盐自异丙醇中结晶得到的权利要求4的多晶型物：9. 一种制备化合物1的稳定晶体甲苯磺酸盐的方法：其中该方法包括： 使化合物1的游离碱溶于第一种溶剂或溶剂组合中，形成第一种溶液； 使对-甲苯磺酸溶于第二种溶剂或溶剂组合中，形成第二种溶液； 和混合所述第一和第二种溶液，形成第三种溶液。10. 权利要求9的方法，其中第一种溶剂或溶剂组合与第二种溶剂或溶剂组合为相同 或者不同的。11. 权利要求9的方法，其中第一种溶剂组合与第二种溶剂组合各自独立地为醇溶剂 的组合。12. 权利要求11的方法，其中溶剂的每一种组合独立地为两种醇溶剂的组合。13. 权利要求12的方法，其中两种醇溶剂为乙醇和异丙醇。14. 权利要求13的方法，其中乙醇和异丙醇以2:1的体积：体积比存在。15. 权利要求9的方法，其中溶剂的每一种组合包含醇溶剂和抗溶剂。16. 权利要求15的方法，其中醇溶剂为甲醇。17. 权利要求15的方法，其中抗溶剂选自酮、醚和酯。18. 权利要求17的方法，其中醚为甲基叔丁基醚。19. 权利要求9的方法，其中溶剂的每一种组合包含甲醇和甲基叔丁基醚。20. 权利要求19的方法，其中甲醇和甲基叔丁基醚以1:1. 2的体积：体积比存在。21. 权利要求9的方法，其中对-甲苯磺酸以相对于所述化合物1的量的25-75 wt%的 量提供。22. 权利要求9的方法，其中对-甲苯磺酸以对-甲苯磺酸一水合物的形式提供。23. 权利要求9的方法，该方法进一步包括向所述第三种溶液中加入化合物1的1型多 晶型物甲苯磺酸盐以形成第四种溶液。24. 权利要求23的方法，其中第四种溶液在搅拌时形成浆状物。25. 权利要求24的方法，该方法进一步包括干燥所述浆状物。26. 按照权利要求9的方法得到的化合物1的甲苯磺酸盐的多晶型物：27. -种药用组合物，所述组合物包含权利要求3的晶体盐和药学上可接受的稀释剂、 赋形剂或载体。28. -种药用组合物，所述组合物包含权利要求4的多晶型物和药学上可接受的稀释 剂、赋形剂或载体。29. 权利要求28的药用组合物，其中所述多晶型物以纯的形式存在。
【专利摘要】本文提供用于治疗四环素化合物敏感状态的化合物的晶形，包括盐和多晶型物在此被提供。晶体化合物用于治疗或预防疾病和病症例如细菌感染和肿瘤以及其它对于四环素类化合物通常已知的用途。
【IPC分类】C07C309/30, C07C303/32, C07C237/26, C07C231/24
【公开号】CN105348138
【申请号】CN201510647227
【发明人】R.维托维奇, T.瓦乔尔
【申请人】帕拉特克药品公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2009年5月26日
【公告号】CA2724897A1, CN102105058A, CN102105058B, CN104844472A, EP2296464A1, EP2296464A4, EP2296464B1, EP2807926A1, US8383610, US9227921, US20100113399, US20140005420, WO2009143509A1