植物耐旱性相关蛋白OsERF71及其编码基因与应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种植物耐旱性相关蛋白OsERF71及其编码基因与应用。本发明所提供的蛋白来源于旱稻IRAT109，名称为OsERF71，由序列表序列1所示的氨基酸序列组成。实验证明，将含有序列表序列2的第81位至第1166位所示DNA分子（即所述蛋白的编码基因）的重组表达载体35S::OsERF71转化水稻日本晴得到的OsERF71基因超表达的T2代转基因株系，在20%PEG、250mmol/L甘露醇和土壤断水三种干旱胁迫实验下，植株的存活率或生长势均显著高于野生型水稻日本晴。本发明为提高植物耐旱性提供了一个新的基因和方法，在植物遗传改良和耐旱性研究方面具有重要意义。
【专利说明】植物耐旱性相关蛋白0sERF71及其编码基因与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种植物耐旱性相关蛋白〇sERF71及其编码基因与应用。
【背景技术】
[0002] 水稻是世界三大粮食作物之一，干旱是制约水稻可持续发展的主要限制因素。据 统计，世界上有50多个国家和地区处于干旱半干旱区，43%的耕地为干旱半干旱区。我国干 旱和半干旱耕地5. 7亿亩，占全国耕地面积的38%，每年因缺水造成粮食减产高达700-800 亿公斤；即使在南方非干旱地区，也会因降雨量的时空分布不均而经常发生强季节性干旱， 这些都严重影响了我国水稻的生产。因此培育抗旱水稻品种以达到高产稳产的目的显得尤 为重要。
[0003] 利用传统育种方法培育抗旱水稻品种周期长、偶然性大，所培育的品种不稳定，进 展比较缓慢；而利用基因工程技术可以直接在基因水平上改造植物的遗传背景，定向改造 植物的遗传性状。外源基因的转入丰富了基因资源，弥补了常规育种方法的不足，是抗旱品 种选育的有效途径之一。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种植物耐旱性相关蛋白0SERF71及其编码基因与应用。
[0005] 本发明所提供的与植物耐旱性相关的蛋白质，来源于旱稻品种IRAT109,名称为 0sERF71，是如下a)或b)的蛋白质：
[0006]a)由序列表序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
[0007]b)将序列表序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和 /或添加且与植物耐旱性相关的由（a)衍生的蛋白质。
[0008] 序列表序列1所示的氨基酸序列由362个氨基酸残基组成。
[0009] 为了使上述（a)中的蛋白便于纯化，可在由序列表序列1所示的氨基酸序列组成 的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。
[0010] 表1标签的序列
[0011]
【权利要求】
1. 一种蛋白质，是如下a)或b)的蛋白质： a) 由序列表序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质； b) 将序列表序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或 添加且与植物耐旱性相关的由（a)衍生的蛋白质。
2. 权利要求1所述蛋白质的编码基因。
3. 根据权利要求2所述的基因，其特征在于：所述蛋白质的编码基因为如下1) -5)基 因中的任意一种： 1) 其核苷酸序列是序列表序列2的第63位至第1167位所示的DNA分子； 2) 其核苷酸序列是序列表序列2的第81位至第1166位所示的DNA分子； 3) 其核苷酸序列是序列表序列2的第1位至第1676位所示的DNA分子； 4) 与1)或2)或3)限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少 具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具 有99%同源性且编码所述蛋白质的DNA分子； 5) 在严格条件下与1)或2)或3)或4)限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白质的DNA 分子。
4. 含有权利要求2或3所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病 毒； 所述重组载体具体可为在载体PMDC32的Asc I和Pac I位点间插入序列表序列2的 第63位至第1167位核苷酸序列所示的DNA片段得到的重组载体。
5. 权利要求1所述的蛋白质或权利要求2或3所述的基因在调控目的植物耐旱性中的 应用。
6. -种提高植物耐旱性的方法，包括将权利要求2或3所述基因导入目的植物中的步 骤。
7. -种培育抗旱转基因植物的方法，是将权利要求2或3所述基因导入目的植物中，得 到耐旱性大于目的植物的转基因植物。
8. 根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于：所述导入是通过权利要求4所述重 组载体实现的。
9. 根据权利要求5-8中任一所述的应用或方法，其特征在于：所述目的植物为单子叶 植物或双子叶植物，所述单子叶植物具体可为水稻。
10. 根据权利要求5- 9中任一所述的应用或方法，其特征在于：所述耐旱性表现为与 如下A-C性状中的至少一种正相关： A、 经PEG胁迫后的存活率； B、 经甘露醇胁迫后的生长势； C、 经断水胁迫后的存活率。
【文档编号】C12N5/10GK104341492SQ201310322576
【公开日】2015年2月11日 申请日期:2013年7月29日 优先权日:2013年7月29日
【发明者】李自超, 赵炎, 李金杰, 张洪亮, 张明辉, 郭萧 申请人:中国农业大学