/ = 7.0Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.24 (t, /= 7.0Hz, 3H).13CNMR(125MHz,DMSO)8 161.7, 146.9, 137.6, 129.9, 129.3, 128.9, 128.7, 128.3, 125.9, 59.7, 20.9, 14. 2.HRMS(ESI):m/zcalcdfor(C19H18N202+H) +:307. 1441;found: 307. 1447〇
[0020] 实施例5 5- (3-甲氧基苯基）-2-苯基-1片咪唑4-甲酸乙酯
合成步骤同实施例4,只是将（Z)-2-叠氮-3-(4-甲基苯基）丙烯酸乙酯换成（Z)-2-叠 氮-3-(3-甲氧基苯基）丙烯酸乙酯，得到白色固体，收率为80%。
[0021] Whitesolid,m.p. 127.4-129.l〇C，屮NMR(500MHz,CDC13)S10.60 (s， 1H), 7.96 (m, 2H), 7.59-7.38 (m, 5H), 7.30 (d, / = 7. 5Hz, 1H), 6.91 (d, / = 7.0 Hz, 1H), 4.31 (q, / = 7.0Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.37-1.23 (m, 3H).HRMS (ESI):m/zcalcdfor(C19H18N203+H) +:323. 1390;found: 323.1394。
[0022] 实施例6 5- (4-氯苯基）-2-苯基-1炉咪唑4-甲酸乙酯
合成步骤同实施例4,只是将（Z)-2-叠氮-3-(4-甲基苯基）丙烯酸乙酯换成（Z)-2-叠 氮-3-(4-氯苯基）丙烯酸乙酯，得到黄色固体，收率为84%。
[0023]Yellowsolid,m.p. : 209. 6-210. 1tHNMR(500MHz,CDC13)S10. 16 (s， 1H), 8.01-7.93 (m, 3H), 7.53-7.46 (m, 3H), 7.44-7.40 (m, 2H), 4.39 (q, / = 7.0 Hz, 2H), 1.38 (t, / = 7.0Hz, 3H).13CNMR(125MHz,DMSO)8159.7, 134.6, 130. 9, 130. 2, 129. 2, 128. 9, 128. 2, 128. 3, 126. 1, 61. 4, 14. 4.HRMS(ESI) :m/z calcdfor(C18H15C1N203+H)+: 327. 0895;found: 327.0899。
[0024] 实施例7 5-(2-呋喃基）-2-苯基-1炉咪唑4-甲酸乙酯
合成步骤同实施例4,只是将（Z)-2-叠氮-3-(4-甲基苯基）丙烯酸乙酯换成（Z)-2-叠 氮-3-(2-呋喃基）丙烯酸乙酯，得到棕色固体，收率为75%。
[0025] Brownsolid,m.p. : 222. 6-223. 7 〇C.屮NMR(500MHz,CDC13)S7. 97 (d， /=6. 5Hz, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.52-7.41 (m, 4H), 6.56 (dd, / = 3. 5, 2.0Hz, 1H), 4.45 (q, /= 7. 0Hz, 2H), 1.45 (t, / = 7. 0Hz, 3H).13CNMR(125MHz,DMSO) 8142.9, 130.1, 129.1, 128.8, 126.2, 112.6, 112.3, 61.2, 14.6.HRMS(ESI):m/ zcalcdfor(C16H14N203+H) +:283. 1077;found: 283. 1081〇
[0026] 实施例8 5- (2-呋喃基）-2- (4-甲基苯基）-1片咪唑4-甲酸乙酯
合成步骤同实施例7,只是将2-苄基肼-1-叔丁基甲酯换成2-(4_甲基苄基）肼-1-叔 丁基甲酯，得到棕色固体，收率为76%。
[0027]Brownsolid,m.p. : 229. 2-230. 4 〇C.屮NMR(500MHz,CDC13)S10. 26 (s， 1H), 7.88(s, 2H), 7. 47 (m, 2H), 7. 24 (d, / = 7. 0Hz, 2H),6. 54 (s, 1H), 4. 42 (q, /= 7.0Hz, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.40 (t, / = 7. 0Hz, 3H).HRMS(ESI):m/z calcdfor(C17H16N203+H)+:297. 1234;found: 297.1243。
[0028] 实施例9 抗肿瘤活性实验 以A431 (人表皮癌细胞）为测试细胞株，采用MTT法对合成化合物进行体外抗肿瘤细 胞活性评价，将待测化合物配成一定的浓度与A431细胞株共孵育72个小时，测定其对癌细 胞的抑制率，见表1. 检测方法具体如下： 1. 收集对数生长期的A431细胞，调节细胞悬液浓度为3500个/孔； 2. 加入待测化合物使其达到每孔的终浓度为20ymmol/L; 3. 在37 °C, 5%C02条件下孵育72个小时； 4. 每孔加入20yL的MTT溶液，继续培养4个小时； 5. 除去上清液，每孔加入150yL的DMS0,混合5分钟，在酶标仪570nm波长下检测其 吸光度值； 6. 抑制率的计算公式为：细胞抑制率=1-(加药组0D/对照组0D)。
【主权项】
1. 一种2, 4, 5-多取代咪唑类化合物，其特征在于，具有以下结构式：其中R1为吸电子和给电子取代的苯基或者呋喃，R 2为酯基，Ar为对位甲基取代和无取 代的苯基。2. 根据权利要求书1所述的2, 4, 5-多取代咪唑类化合物，其特征在于，选自以下任何 一种： 5- (4-乙氧基苯基）-2- (4-甲基苯基）-1片咪唑4-甲酸乙酯 5-(4-甲基苯基）-2-(4-甲基苯基）-1片咪唑4-甲酸乙酯 5_ (4-溴苯基）-2-(4-甲基苯基）-1片咪唑4-甲酸乙酯 5-(4-甲基苯基）-2-苯基-1片咪唑4-甲酸乙酯 5-(3-甲氧基苯基）-2-苯基-1片咪唑4-甲酸乙酯 5-(4-氯苯基）-2-苯基-1片咪唑4-甲酸乙酯 5-(2-呋喃基）-2-苯基-1片咪唑4-甲酸乙酯 5_ (2-呋喃基）-2-(4-甲基苯基）-1片咪唑4-甲酸乙酯。3. 根据权利要求1或2所述的一种2, 4, 5-多取代咪唑类化合物的制备方法，其特征在 于，通过以下步骤实现： (1)将烯烃叠氮类化合物、取代的肼基甲酸酯在有机溶剂中于130°C反应，反应时间为 8-10个小时，烯烃叠氮类化合物与取代的肼基甲酸酯的摩尔比为1:1. 1， 所述的烯烃叠氮类化合物的结构式为所述的取代肼基甲酸酯结构式为其中R3为甲基取代的芳基（_CH2Ar)或者是苄基，LG为叔丁氧基； (2 )将步骤（1)所得到的反应液浓缩后，用水和乙酸乙酯萃取，得到的有机相经干燥浓 缩后得到残留物，将残留物进行硅胶柱层析，得到权利要求1所述的2, 4, 5-多取代咪唑类 化合物； 反应式为：所述的Rp R2、Ar的定义同权利要求1。4. 根据权利要求3所述的2, 4, 5-多取代咪唑类化合物的制备方法，其特征在于，所述 的有机溶剂为乙腈、1，4-二氧六环、N，N-二甲基甲酰胺或甲苯。5. 根据权利要求1或2所述的2, 4, 5-多取代咪唑类在制备治疗肿瘤药物中的应用。
【专利摘要】本发明提供一种2,4,5-多取代咪唑类化合物，是在加热条件下，烯烃叠氮与取代的肼基甲酸酯选择性地发生反应合成官能团化咪唑类化合物，本发明提供的制备方法操作简单，原料易得，能同时引入多个取代基，产物易分离。本发明制备所得的2,4,5-多取代咪唑类化合物具有一定的体外抑制肿瘤细胞活性，可作为抗肿瘤先导化合物。其结构式为： 。
【IPC分类】A61K31/4172, A61P35/00, C07D405/04, A61K31/4178, C07D233/90
【公开号】CN104974095
【申请号】CN201510371663
【发明人】邵加安, 刘星雨, 舒可, 陈斌辉, 陈文腾, 俞永平
【申请人】浙江大学
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2015年6月30日