专利名称：一种具有泌乳功能的药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种药物及其制备方法，特别是涉及一种具有泌乳功能的药物及其制备方法本发明目的是通过如下技术方案实现的王不留行100-150重量份通草100-150重量份熟地黄125-190重量份 当归50-75重量份白芍80-125重量份 川芎36-56重量份益母草100-150重量份 天花粉100-150重量份以上八味，熟地黄，当归，川芎用70-80％乙醇作溶剂，进行渗漉，渗漉液回收乙醇，浓缩备用；通草加水浸泡1-3小时，煎煮1-3小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮1-3次，每次1-2小时，滤过，滤液备用，天花粉用热水温浸1-3小时，滤过，滤液与上述各提取液合并，浓缩，静置过夜，取上清液浓缩至清膏。加入制剂上可接受的辅料或赋型剂，制成临床可接受的剂型，如片剂、胶囊、口服液体制剂、颗粒剂、煎膏剂等。
本发明药物组合物制备的煎膏剂的质量控制方法包括鉴别和/或含量测定方法。其中鉴别方法可以选自下列鉴别方法中的一种或几种1、取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml，边加边搅拌，再搅拌8-12分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20ml使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取2-4次，每次10-30ml，合并正丁醇液，用3-5％氨水溶液洗涤1-3次，每次10-30ml，再用饱和氯化钠溶液洗涤2-4次，每次10-30ml，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加60-90℃石油醚10-30ml，加热回流1-1.5小时，滤过，滤渣挥干，加乙醇20-30ml，加热回流20-35分钟，放冷；滤过，滤液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20-30ml使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以14-16∶38-41∶20-24∶8-11氯仿-醋酸乙酯--甲醇--水5～10℃以下放置10-12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；2、取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml边加边搅拌，再搅拌8-12分钟，静置，倾取上层液，加乙醚25-35ml，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7ml，乙醚3ml，超声处理10-20分钟，取上层液，蒸干残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇18-22ml，加热回流0.5-1小时，放冷，滤过滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以1-2∶1-2的60-90℃石油醚-醋酸乙醇为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点；3、取本发明煎膏剂8g，精密称定，加水18-22ml充分搅拌使溶解，通过大孔吸附树脂柱，湿法装柱，内径12-16mm，用水150-250ml洗脱，弃去水液，再用乙醇60-80ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇13-16ml，超声处理11-20分钟，滤过，滤液转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取上述溶液15ml，蒸干，残渣加甲醇1-2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以38-42∶3-6∶8-12∶0.1-0.3氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4、取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml边加边搅拌，再搅拌8-12分钟，静置，倾取上层液，加乙醚25-35ml，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7ml，乙醚3ml，超声处理8-12分钟，取上层液，蒸干残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml含1m重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl，对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以6-10∶1-2∶1-2∶2-4正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在100-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明方法制备的煎膏剂的质量控制方法中含量测定方法为照高效液相色谱法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；24-26∶70-80甲醇--水为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷计算应不低于3000；对照品溶液的制备，精密称取芍药苷对照品10mg，置50ml量瓶中、加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取5ml，置10ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，每1ml含芍药苷0.1mg。供试品溶液的制备，取本发明煎膏剂8g，精密称定，加水20ml充分搅拌使溶解，通过大孔吸附树脂柱，湿法装柱，内径12-16mm，用水150-250ml洗脱，弃去水液，再用乙醇60-80ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇12-16ml，超声处理12-16分钟，滤过，滤液转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明煎膏剂每1g含芍药苷(C23H28O11)不得少于0.25mg。
本发明药物组合物制备的煎膏剂(增乳膏)对实验性泌乳不足的SD纯系大鼠，给予增乳膏14-28g/kg灌胃3日，可使仔鼠吸奶量明显增多，仔鼠体。重增长加速、小鼠灌胃10，20以及40g/kg增乳膏后，无论是实验性泌乳不足或正常泌乳母鼠，血清催乳素分泌水平均有所提高，乳腺中高柱状细胞增多，仔鼠生长速度加快，耐力提高。电子显微镜观察结果表明，在实验性缺奶母鼠，大剂量组增乳膏使腺垂体催乳素细胞体积增大，粗面内质网数量和芽现象增多。运输小体较丰富。
下列实验材料均适用于本说明书的动物实验例。
1、受试药物增乳膏(即增乳膏)，4g生药/ml，由漳州市药物研究所研制并提供，批号940202。灭吐灵(盐酸甲氧氯普胺)，20mg/1ml，天津氨基酸公司人民制药厂生产，批号930507。
2、动物SD纯系大鼠，250-280g，购自上海田Sippr-BK实验动物供应有限公司，清洁级合格证沪医实动单项准字第65号；昆明种小鼠，26-30g，购自福建省卫生防疫站实验动物场。普通级合格证闽医动单项准92001号。动物实验室普通级合格证闽医动条94007。实验例1对实验性泌乳泌不足大鼠仔鼠吸奶量及体重的影响取同日分娩且仔鼠数有少于8只/窝的SD纯系大鼠30窝，剔弃多余仔鼠，使每窝哺育的仔鼠数均为8只供实验，并随机分为5组，每组6窝(仔鼠48只)。将母鼠与仔鼠分居6小时，用TG927C型单盘电光分析天平称取各仔鼠做为基础体重。接着将母鼠放归原窝授乳1小时，同上法称仔鼠体重。以二次体重之差值做为各仔鼠的吸乳量指标求给药前组内均值及标准差。然后给各组母鼠腹腔注射(ip)己烯雌酚8mg/kg，隔日一次(q.o.d)共2次，并分别灌胃(ig)给予增乳膏7，14，28g/kg，阳性对照组ig灭吐灵10mg/kg，阴性对照组ig水11.21/kg，qd，连续3日，末次给药后24小时，再测各仔鼠的体重和吸奶量，分别与给药的比较，进行t检验，详见表1和表2。
表1增乳膏对泌乳不足大鼠的仔鼠吸奶量的影响母鼠给药情况 仔鼠吸奶量(mg/h，xSD)组别 母仔数 仔鼠数(ig，qd×3)给药前给药后1、 水11.2ml/kg 6 480.327±0.144 0.293±0.0982、 灭吐灵10mg/kg6 480.335±0.095 0.363±0.10**3、 增乳膏28g/kg 6 480.302±0.064 0.409±0.092***4、 增乳膏7g/kg 6 480.330±0.083 0.375±0.119**5、 增乳膏 6 480.321±0.075 0.331±0.088*P＜0.05，**P＜001，***P＜0.001与组1比较(下同)从表1可见，给药前各组仔鼠每小时(h)吸奶量均值相近(P＞0.05)，注射己烯雌酚造成泌乳不足模型并给于不同的药物处理后，各组仔鼠每小时吸奶量均值则不同，吸奶量从组1至组5分别变值是-10.4％，8.8％，35.43％，13.64％以及3.12％，结果表明，对泌乳不足SD系母鼠ig增乳膏14和28g/kg可显著增加其泌乳量，大剂量组的疗效超过阳性对照药灭吐灵组(P2.3＜0.05)。
表2增乳膏对实验性泌乳不足大鼠的仔鼠生长速度的影响母鼠给药情况 仔鼠吸奶量(mg/h，x±SD)组别 仔鼠数(ig，qd×3)给药前给药后1、 水11.2ml/kg 488.026±0.938 3.48±0.7532、 灭吐灵10mg/kg487.994±1.24 3.861±0.381**3、 增乳膏28g/kg 488.218±0.722 3.886±0.713*4、 增乳膏14g/kg 488.103±0.883 3.61±0.6115、 增乳膏7g/kg 488.117±0.927 3.416±0.703表2提示，增乳膏对己烯雌酚诱发的泌乳不足SD大鼠哺育的幼鼠有促进生长作用，大剂量组仔鼠的增重率(11.64％)与阴性对照组比较差异有显著意义(P＜0.05)。实验例2对正常泌乳小鼠及其仔鼠的影响昆明种小鼠50窝，于产后第5日保留仔鼠数均为9只/窝，随机取40窝分为5组，每组8窝，仔鼠72只。与母仔鼠分离6小时用扭力天称取各仔鼠体重，分别给母鼠ig灭吐灵7mg/kg，增乳膏10，20，40g/kg，或者水20ml/kg，qd×7日。次日同法再称仔鼠体重并测定各仔鼠游泳耐久性(表3)。采用放射免疫法测定(催乳素药盒购自北方免疫试剂研究所)母鼠血清催乳素(PRL)水平(表4)并取乳腺活检表3增乳膏对仔鼠生长速度及游泳耐久力的影响母乳给药情况仔鼠体重(g，x±SD) 仔鼠游泳时间组别 仔鼠数(ig，pd×7) 基础体重7日增重值 (秒，x±SD)1、 水20ml/kg 72 3.314±0.4372.60±0.2565.6±19.72、 灭吐灵7mg/kg72 3.151±0.41 2.768±0.39** 67.3±19.93、 增乳膏40g/kg72 3.153±0.5592.954±0.267*** 113.1±53.1***4、 增乳膏20g/kg72 3.117±0.3872.762±0.573 82.8±27.7***5、 增乳膏10/kg 72 3.131±0.5212.631±0.61 64.3±23.5从表3可以看出，对正常泌乳的昆明种母鼠所哺育的仔鼠，给母鼠由的增乳膏有一定的促进仔鼠生长、增强游泳耐力的作用，大剂量组与阴性对照组比较，上述二个指标的p值均小于0.001。
表4增乳膏对正常泌乳母鼠血清PR1水平的影响给药情况 血清PRL水平 PRL组别 鼠数(ig，qd×7)(mg/ml，x±SD) 升高率(％) P值1、水20ml/kg 8 6.35±2.242、灭吐灵7mg/kg 8 7.82±2.41 23.15 ＞0.053、增乳膏40g/kg 8 11.36±2.58 78.90 ＜0.014、增乳膏20g/kg 8 9.25±3.30 45.67 ＜0.055、增乳膏10g/kg 8 7.31±3.41 15.12 ＞0.05表4提示，大、中量增乳膏能促进哺乳期母鼠分泌催乳素，其作用超过阳性对照药灭吐灵(P2，3＜0.05)。
乳腺片(H.E染色)光镜检查结果，所有被检小鼠的乳腺组织均呈哺乳期变化，小叶间纤维组织层菲薄；甚至见不到纤维组织分隔。以分泌旺盛的乳腺高柱状上皮细胞为指标，阴性对照组不超过40％，而增乳膏大剂量组乳腺的高柱状上皮细胞占明显多数，提示其乳汁分泌活动更活跃。实验例3对实验性泌乳不足小鼠及其仔鼠的影p向昆明种小鼠40窝，于分娩后第4日保留仔鼠数8只/窝，随机分为5组，每组8窝。母鼠分别ip己烯雌酚11mg/kg，gd×3日，同时按表5所示ig增乳膏或对照药，连续5日。末次给药后次日，同前法测仔鼠体重增值，游泳耐力。母鼠血清PRL水平，乳腺活检，同时观察腺垂体催乳素细胞超微结构。结果见表5，6。
表5增乳膏对实验性泌乳不足小鼠的仔鼠体重及耐力的影响母鼠给药情况 仔鼠体重(g，x±SD) 仔鼠耐力(秒，组别 仔鼠数(ig，qd×5) 基础值 5日增重值 x±SD)1、 水20ml/kg 642.792±0.572 1.412±0.452 74.8±17.02、 灭吐灵7mg/kg642.822±0.442 1.669±0.403** 84.0±17.5**3、 增乳膏40g/kg642.794±0.334 1.819±0.442***96.1±7.0***4、 增乳膏20g/kg642.851±0.542 1.650±0.222** 86.3±21.5**5、 增乳膏10g/kg642.796±0.611 1.420±0.344 79.8±18.1表5提示，增乳膏口服可使实验性泌乳，不足母鼠哺育的仔鼠生长有较明显加速，并增强其游泳耐久力。
表6增乳膏对实验性泌乳不足小鼠血清PR1水平的影响给药情况 血清PRL水平 PRL组别 鼠数(ig，qd×7) (mg/ml，x±SD)升高率(％)P值1、 水20ml/kg8 7.52±1.002、 灭吐灵7mg/kg 8 9.60±1.0727.66 ＜0.0013、 增乳膏40g/kg 8 9.41±1.9025.13 ＜0.054、 增乳膏20g/kg 8 8.55±2.2813.70 ＞0.055、 增乳膏10g/kg 8 7.76±1.963.19 ＞0.05从表6可见，增乳，保育膏对乙烯雌酚诱发的泌乳，不足母鼠有促进PRL释放作用，大剂量组与阴性对照组比较，差异有显著意义(P＜0.05)。
乳腺切片(H.E染色)光镜检查结果表明，大剂量组增乳膏明显增加高柱状细胞所占比例。腺垂体PR1细胞(醋酸钠、构椽酸铅染色)超薄切片电子显微镜观察发现，与阴性对照组(G)比较，大剂量增乳膏组腺垂体PR1细胞体积较大，粗面内质网数量及芽生现象较多，运输小泡较丰富，提示PRL细胞的机能较旺盛。实验例4增乳膏对初产妇及缺乳初产妇催乳作用的临床试验诊断标准缺乳诊断标准产妇乳汁分泌减少成全无，无奶胀，检查乳房不充盈，挤压时无乳汁分泌或二少许；缺乳程度(1)轻度每日需补授1/3～＜1/2量的代乳品(或库乳)；(2)中度每日需补授1/2～2/3量的代乳品(或库乳)；(3)重度每日需补授2/3以上的代乳品(或库乳)。
观测指标催乳作用观测指标，间接测量乳汁分泌量每日从上午8时至下午8时逐次测量喂乳前后婴儿体重(用精确磅秤测量)，间接计算产妇12小时泌乳量。并按1g＝1ml换算；逐日计算补授乳量；检测产后2小时内和出院时血清泌乳素，上午空腹抽血。
治疗方法试验组(包括扩大组) 增乳膏每次25ml，每日3次；饭后开水冲服。疗程于产后当天开始服药，连服3-5天，并于产后第二天开始观测上述各项指标，连续观测3天(催乳素检测按规定时间)。缺乳初产妇就诊时开始服药，连服6天。对照组四物汤(膏)每次25ml，每日3次，饭后开水冲服。疗程同试验组；试验组与对照组按1∶1随机分配，肓法投药。试验期间停用一切具有催乳作用的中西药物。
结果1、试验组与对照组两组一般情况对比(见表7)表7试验组与对照组两组一般情况对比例年龄 分娩过程 婴儿情况 疗程 缺乳程度数(岁)足月非足月非良好不良(天)轻中 重顺产顺产试验组 26.63±2.79 50 0 50 0 4.70±0.51 \\\初产妇50对照组 26.84±2.50 50 0 50 0 4.98±0.62 \\\试验组 27.80±3.02 9 6 15 0 5.2±0.9 861缺乳 15初产妇对照组 27.06±2.73 7 8 15 0 5.8±1.2 933
表7两组资料经统计学处理，P值均＞0.1提示两组在年龄、分娩过程、婴儿健康情况，疗程和缺乳程度等方面基本相同或相似，有较好的可比性。
2、初产妇催乳作用的观察(一)初产妇治疗前后泌乳量和对婴儿补授乳量的影响(见表8)表8初产妇治疗前后泌乳量和对婴儿补授乳量的影响(X±SD)例数 泌乳量(m1/12h) 例数 补授乳量(ml/2h)治前 122.01±52.04 21.00±33.21试验组 5050治后 228.94±122.74**ΔΔ12.90±32.76治前 89.60±37.67 23.50±29.26对照组 5050治后 132.56±57.67**17.80±27.07*治前 94.41±69.35扩大 46治后 197.82±62.21**治疗前后对比*P＜0.01试验组与对照纽比ΔP＞0.05**P＜0.001 ΔΔP＜0.001表8所示，通过测量12小时(h)婴儿喂乳前后增重的情况，间接测量产妇的泌乳量(1g＝1ml换算)，结果表明，试验组、对照组和扩大组均能明显增加产妇的泌乳量，分别由122.01ml/12h上升至288.94ml/12h，89.6ml/12h上升至132.56ml/12h和94.4ml/12h上升至197.82ml/12h。治疗前后对比，差异非常显著，P值均＜0.001。而且试验组的泌乳量明显优于对照组，P＜0.001。在增加产妇泌乳的同时，还能减少婴儿的补授乳量，试验组与对照组治疗前后对比，差异非常显著，P＜0.01。但试验组末见优于对照组，P＞0.05。
3、初产妇治疗前后对泌乳素分泌的影响(见表9)
表9、初产妇治疗前后对泌乳素分泌的影响例数 泌乳素(ug/l)治前 164.32±119.29试验组 50治后 207.46±129.58**治前 169.32±132.61对照组 50治后 169.01±97.28治疗前后对比**P＜0.05*P＞0.05表9所示，试验组治疗后能明显促进初产妇泌，与治疗前比，差异显著，P＜0.05，而对照组未见有此作用。
4、缺乳初产妇催乳作用的观察缺乳初产妇治疗前后对婴儿补授乳量的影响(见表10)表10缺乳初产妇治疗前后对婴儿补授乳量的影响(X±SD)例数 补授乳量(ml/日)治前74.66±25.03试验组 15治后2.00±7.74*Δ治前78.00±46.08对照组 15治后22.00±26.77*治前159.16±103.76扩大组 15治后46.68±80.63*Δ治疗前后*P＜0.001试验组、扩大组与对照组比ΔP＜0.01。
表10所示，试验组、对照组、扩大组三组均能明显减少缺乳初产妇对婴儿的补授乳量，分别由74.66ml/日下降至2ml/日E，78ml/日下降至22ml/日，159.16ml/日下降至46.68ml/日。其中试验组、扩大组均优于对照组。
5、缺乳初产妇治疗前后对泌乳素分泌的影响(见表11)
表11缺乳初产妇治疗前后对泌乳素分泌的影响(x±SD)例数泌乳素(ug/L)治前 60.66±15.9515治后 100.80±27.95*P＜0.001表11所示，增乳膏治疗后能明显促进缺乳初产妇泌乳素的分泌，与治疗前对比，差异非常显著，P＜0.001。
6、不良反应的观察增乳膏治疗前后共检测血、尿带规146例。ALT、BUN、心电图各65例。其中治前Hb＜100g/L29例(生理性贫血)，治后4例恢复正常，其它未见加重；WBC治前＞10×109/L＞10例，治后均恢复正常外，其它检测项目均末见异常改变，对服用增乳膏146例的临床观察，均未见不良反应，有个别产妇反映本品口感稍差，提示本品的临床用量是安全的。
通过对146例初产妇和66例缺乳初产妇的临床试验结果表明，增乳膏能明显增加产妇的泌乳量、减少婴儿的补授乳量，促进产妇泌乳素分泌，临床观察未见不良反应，是一种有效安全的纯天然催乳剂，为响应世界卫生组织的号召，提倡、推广母乳喂养提供条件。实施例1王不留行133g 通草133g熟地黄167g 当归67g白芍111g 川芎50g益母草133g 天花粉133g以上八味，熟地黄，当归，川芎用70％乙醇作溶剂，进行渗漉，渗漉液回收乙醇，浓缩备用；通草加水浸泡2小时，煎煮1小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮2次，每次1.5小时，滤过，滤液备用，天花粉用热水温浸2小时，滤过，滤液与上述各提取液合并，浓缩，静置过夜，取上清液浓缩至清膏，制成煎膏剂1000g。实施例2王不留行133g 通草133g 熟地黄167g当归67g 白芍111g 川芎50g益母草133g天花粉133g以上八味，熟地黄用80％乙醇，当归，川芎用70％乙醇作溶剂，进行渗漉，渗漉液回收乙醇，浓缩备用；通草加水浸泡1小时，煎煮2小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮1次，1.5小时，滤过，滤液备用，天花粉用热水温浸2小时，滤过，滤液与上述各提取液合并，浓缩，静置过夜，取上清液浓缩至清膏，加糊精制成300g颗粒剂。实施例3本发明药物组合物制备的煎膏剂的质量控制方法取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20ml使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用5％氨水溶液洗涤2次，每次20ml，再用饱和氯化钠溶液洗涤3次，每次20ml，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15ml，超声处 15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加60-90℃石油醚20ml，加热回流1小时，滤过，滤渣挥干，加乙醇25ml，加热回流30分钟，放冷；滤过，滤液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20ml使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以15∶40∶22∶10氯仿-醋酸乙酯--甲醇---水5～10℃以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30ml，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7ml，乙醚3ml，超声处理10分钟，取上层液，蒸干残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇20ml，加热回流0.5小时，放冷，滤过滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以2∶1的60-90℃石油醚-醋酸乙醇为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点；取本发明煎膏剂8g，精密称定，加水20ml充分搅拌使溶解，通过D101大孔吸附树脂柱，湿法装柱，内径15mm，用水200ml洗脱，弃去水液，再用乙醇70ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取上述溶液15ml，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以40∶5∶10∶0.2氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30ml，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7ml，乙醚3ml，超声处理10分钟，取上层液，蒸干残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml含1m重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl，对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以8∶2∶2∶3正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25∶75甲醇--水为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷计算应不低于3000；对照品溶液的制备，精密称取芍药苷对照品10mg，置50ml量瓶中、加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取5ml，置10ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，每1ml含芍药苷0.1mg。供试品溶液的制备，取本发明煎膏剂8g，精密称定，加水20ml充分搅拌使溶解，通过D101大孔吸附树脂柱，湿法装柱，内径15mm，用水200ml洗脱，弃去水液，再用乙醇70ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明煎膏剂每1g含芍药苷(C23H28O11)不得少于0.25mg。
权利要求
1.一种具有泌乳功能的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药制成的王不留行100-150重量份通草100-150重量份熟地黄125-190重量份 当归50-75重量份白芍80-125重量份 川芎36-56重量份益母草100-150重量份 天花粉100-150重量份
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药制成的王不留行133重量份通草133重量份熟地黄167重量份 当归67重量份白芍111重量份川芎50重量份益母草133重量份 天花粉133重量份
3.如权利要求1或2所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为熟地黄，当归，川芎用70-80％乙醇作溶剂，进行渗漉，渗漉液回收乙醇，浓缩备用；通草加水浸泡1-3小时，煎煮1-3小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮1-3次，每次1-2小时，滤过，滤液备用，天花粉用热水温浸1-3小时，滤过，滤液与上述各提取液合并，浓缩，静置过夜，取上清液浓缩至清膏。加入制剂上可接受的辅料或赋型剂，制成临床可接受的剂型。
4.如权利要求3所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为熟地黄，当归，川芎用70％乙醇作溶剂，进行渗漉，渗漉液回收乙醇，浓缩备用；通草加水浸泡2小时，煎煮1小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮2次，每次1.5小时，滤过，滤液备用，天花粉用热水温浸2小时，滤过，滤液与上述各提取液合并，浓缩，静置过夜，取上清液浓缩至清膏，制成煎膏剂。
5.如权利要求3所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法为熟地黄用80％乙醇，当归，川芎用70％乙醇作溶剂，进行渗漉，渗漉液回收乙醇，浓缩备用；通草加水浸泡1小时，煎煮2小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草中煎煮1次，1.5小时，滤过，滤液备用，天花粉用热水温浸2小时，滤过，滤液与上述各提取液合并，浓缩，静置过夜，取上清液浓缩至清膏，加糊精制成颗粒剂。
6.如权利要求1或2所述药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法可以选自下列鉴别方法中的一种或几种a、取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml，边加边搅拌，再搅拌8-12分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20ml使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取2-4次，每次10-30ml，合并正丁醇液，用3-5％氨水溶液洗涤1-3次，每次10-30ml，再用饱和氯化钠溶液洗涤2-4次，每次10-30ml，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15ml，超声处理10-20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加60-90℃石油醚10-30ml，加热回流1-1.5小时，滤过，滤渣挥干，加乙醇20-30ml，加热回流20-35分钟，放冷；滤过，滤液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20-30ml使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以14-16∶38-41-∶20-24∶8-11氯仿-醋酸乙酯--甲醇---水5～10℃以下放置10-12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b、取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml边加边搅拌，再搅拌8-12分钟，静置，倾取上层液，加乙醚25-35ml，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7ml，乙醚3ml，超声处理10-20分钟，取上层液，蒸干残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇18-22ml，加热回流0.5-1小时，放冷，滤过滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以1-2∶1-2的60-90℃石油醚-醋酸乙醇为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点；c、取本发明煎膏剂8g，精密称定，加水18-22ml充分搅拌使溶解，通过大孔吸附树脂柱，湿法装柱，内径12-16mm，用水150-250ml洗脱，弃去水液，再用乙醇60-80ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇13-16ml，超声处理11-20分钟，滤过，滤液转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取上述溶液15ml，蒸干，残渣加甲醇1-2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以38-42∶3-6∶8-12∶0.1-0.3氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。d、取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml边加边搅拌，再搅拌8-12分钟，静置，倾取上层液，加乙醚25-35ml，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7ml，乙醚3ml，超声处理8-12分钟，取上层液，蒸干残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml含1m重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl，对照品溶液1μl，分别点于同-硅胶重量份薄层板上，以6-10∶1-2∶1-2∶2-4正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在100-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.如权利要求6所述的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法可以选自下列鉴别方法中的一种或几种a.取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20ml使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用5％氨水溶液洗涤2次，每次20ml，再用饱和氯化钠溶液洗涤3次，每次20ml，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加60-90℃石油醚20ml，加热回流1小时，滤过，滤渣挥干，加乙醇25ml，加热回流30分钟，放冷；滤过，滤液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20ml使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以15∶40∶22∶10氯仿-醋酸乙酯--甲醇---水5～10℃以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30ml，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7ml，乙醚3ml，超声处理10分钟，取上层液，蒸干残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇20ml，加热回流0.5小时，放冷，滤过滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以2∶1的60-90℃石油醚-醋酸乙醇为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点；c.取本发明煎膏剂8g，精密称定，加水20ml充分搅拌使溶解，通过D101大孔吸附树脂柱，湿法装柱，内径15mm，用水200ml洗脱，弃去水液，再用乙醇70ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取上述溶液15ml，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶重量份薄层板上，以40∶5∶10∶0.2氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。d.取本发明煎膏剂50ml，加无水乙醇70ml边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30ml，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7ml，乙醚3ml，超声处理10分钟，取上层液，蒸干残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml含1m重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl，对照品溶液1μl，分别点于同-硅胶重量份薄层板上，以8∶2∶2∶3正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
8.如权利要求1或2所述药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法为照高效液相色谱法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；24-26∶70-80甲醇--水为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷计算应不低于3000；对照品溶液的制备，精密称取芍药苷对照品10mg，置50ml量瓶中、加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取5ml，置10ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，每1ml含芍药苷0.1mg。供试品溶液的制备，取本发明煎膏剂8g，精密称定，加水20ml充分搅拌使溶解，通过大孔吸附树脂柱，湿法装柱，内径12-16mm，用水150-250ml洗脱，弃去水液，再用乙醇60-80ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇12-16ml，超声处理12-16分钟，滤过，滤液转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明煎膏剂每1g含芍药苷(C23H28O11)不得少于0.25mg。
9.如权利要求8所述的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法为照高效液相色谱法测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；25∶75甲醇--水为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷计算应不低于3000；对照品溶液的制备，精密称取芍药苷对照品10mg，置50ml量瓶中、加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取5ml，置10ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，每1ml含芍药苷0.1mg。供试品溶液的制备，取本发明煎膏剂8g，精密称定，加水20ml充分搅拌使溶解，通过D101大孔吸附树脂柱，湿法装柱，内径15mm，用水200ml洗脱，弃去水液，再用乙醇70ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明煎膏剂每1g含芍药苷(C23H28O11)不得少于0.25mg。
10.如权利要求1或2所述的药物组合物在制备具有增强泌乳量或者提高血清催乳素分泌水平的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种具有泌乳功能的药物组合组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药制成的王不留行100－150重量份、通草100－150重量份、熟地黄125－190重量份、当归50－75重量份、白芍80－125重量份、川芎36－56重量份、益母草100－150重量份、天花粉100－150重量份，本发明药物具有增强泌乳量或者提高血清催乳素分泌水平的作用。
文档编号A61P15/14GK1416861SQ0214671
公开日2003年5月14日 申请日期2002年11月4日 优先权日2002年11月4日
发明者何建文, 潘杰, 陈纪鹏, 唐志杰, 赵水连 申请人:漳洲片仔癀药业股份有限公司