专利名称：一种预防和治疗骨科疾病的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种预防和治疗骨科疾病的药物组合物，具体地说是淫羊藿和知母有效提取物组成的药物组合物。
背景技术：
骨科疾病是一个世界范围的、越来越引起人们重视的健康问题。例如，目前全世界约2亿人患有骨质疏松，其发病率已跃居常见病、多发病的第七位。最新研究表明，在我国一直被认为是老年人特有疾病的骨质疏松症，实际上在儿童时期就已存在。随着人口老龄化日趋明显，作为中老年多发的退行性疾病--骨质疏松症及其并发症，已成为一个社会性的健康问题而备受老年病学者的关注，并引起了社会的高度重视。目前医学上还未有安全而有效的根治方法，帮助已疏松的骨骼恢复原状。骨科方面还有关节炎、骨质增生等疾病的发病率也越来越高，严重影响了人们的生活质量的提高。因此，开发一种能有效预防和治疗骨科疾病的药物有重要的医学和社会意义。
淫羊藿为小檗科淫羊藿属植物淫羊藿的叶。《本草纲目》记载其具有“益精气，坚筋骨，补腰膝，强心力”等功效；淫羊藿的作用广泛，如对心血管系统、中枢神经系统、血液系统、免疫系统、抗炎、抗骨质疏松、抗衰老、抗肿瘤等均用作用。淫羊藿是传统的补肾壮阳中药，传统中药中许多治疗骨质疏松症的方剂中均含有淫羊藿。现代药理学研究证明淫羊藿的主要化学成分为黄酮与多糖，大量的研究表面淫羊藿治疗骨质疏松症的有效部位为黄酮(中国天然药物，2004，7，2(4)，235-239)，它能促进成骨细胞增殖和(或)增强其矿化能力，有效的防治骨质疏松症。
知母为百合科植物知母(Anemarrhena asphodeloides)的根茎，味苦甘，性寒、入肺、胃、肾经。具有清热泻火、生津润燥等功效。知母化学成分主要为甾体皂苷、双苯吡酮类(芒果苷、异芒果苷)、木脂素类、多糖类(知母多糖A~D)、有机酸类(烟酸、鞣酸等)、大量的粘液质、微量无素(铁、锌、铜、锰、钴、镍等，其中以铁、锌含量最高)、其它(二十五烷酸乙烯酯、β-谷甾醇、β-豆甾醇)。知母主含皂苷，根茎含皂苷约6％。知母芒果苷有显著的抗炎作用。动物模型证实知母总多糖(TPA)对多种致炎剂引起的急性毛细血管通透性增高、炎性渗出增加及组织水肿均有明显的抑制作用。对慢性肉芽肿增生有显著抑制作用。研究认为，TPA可增强肾上腺功能，减少ACTH分泌、释放，并且抑制PGE的合成或释放。
现代医学中治疗骨科疾病的药物通常是含雌激素的化学药物，临床使用时药物副作用大，中药因其疗效独特和副作用小而深得医生和患者的青睐。检索现有的文献和专利发现淫羊藿和知母广泛用于中医治疗骨质疏松和抗炎的方剂中，但其处方通常是多味甚至几十味中药同时使用，使用方法通常为简单的丸剂和散剂。我们研究发现仅淫羊藿和知母两种药物提取物组成的组方便能很好的发挥它们的协同作用，与它们单独使用相比能显著的提高药效和临床疗效。经研究，我将这种药物组合物制成临床上先进的胶囊、注射剂和注射用冻干粉针剂，提高了药效也为临床使用提供了一种起效快，疗效明确的治疗骨科疾病全新的中药注射剂。同时简化了组方和药物制备方法便于工业实施和临床应用，为临床预防与治疗骨科疾病提供了一种新的有效的药物组合。
发明内容
经过我们大量的科学研究和临床试验，发现了淫羊藿提取物与知母提取物的组合物有很强的预防和治疗骨科疾病的作用，并对此发明做了进一步的完善，将这种组合物制成便于临床实施应用的药物制剂。
本发明的一个目的是提供一种能有效预防和治疗骨科疾病的淫羊藿提取物与知母提取物的药物组合物，经药理和临床试验证明其作用比单独使用淫羊藿和知母更为有效。
本发明的另一个目的是提供一种制备以上组合物的生产工艺。
称取淫羊藿5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小时，回收乙醇，水浴浓缩，蒸干得淫羊藿总黄酮。
取知母干燥根茎用80~90℃的水浸3次。每次5h，合并水浸液，浓缩。浓缩液经大孔树脂碎柱色谱，收集10％~70％乙醇洗脱部分，回收溶剂至干，得知母总皂甙。
本发明的药物组合物的配方如下淫羊藿提取物1-99重量比知母提取物1-99重量比采用现有的医药工业领域的制剂技术，可以将上述配方的药物组合物制成各种适合临床使用的药物剂型。
以下内容为验证本发明药物组合物的药理学试验结果(1)本品对实验性骨质疏松症的影响试验动物Wistar大鼠60只，雌性，16周龄，体重220~240g。
实验仪器双能X线骨密度检测量仪美国Nodand公司生产，仪器型号XR226.
实验方法大鼠实验性骨质疏松症实验各组大鼠分笼饲养于不锈钢金属笼内，每笼5只，室温调节在22-26℃，湿度控制在50％~70％，自由饮食和摄水。动物称重，采用分层随机法将大鼠60只分为6组，即空白对照组0.9％氯化钠注射液(10ml/kg)；模型对照组0.9％氯化钠注射液(10ml/kg)；本品大剂量组(500mg/Kg)；本品中剂量组(250mg/Kg)；本品小剂量组(125mg/Kg)；治疗骨质疏松药物对照组骨松宝颗粒剂(2.7g/Kg)。
实验过程中每组称重一次，根据大鼠体重调节给药量。空白组在整个实验过程中只给等量生理盐水，模型组、骨松宝颗粒剂组、本品胶囊各剂量组于实验第1~15天均给予维甲酸(70mg·g-1Dd-1)灌胃，同时骨松宝颗粒组加服骨松宝颗粒，本品组加服本品各相应的剂量，14d后各组停用维甲酸，空白组、模型组给于等量生理盐水，给药组继续给予所试药物，剂量不变，第29天，麻醉动物并腹主动脉取血，分离血清用全自动生化仪测定血钙、血磷，处死动物，分离了两侧完整的股骨、第2~4腰椎进行骨密度的检测。
试验结果表1本品胶囊对大鼠骨密度变化的影响(x±s，n＝10)
注与模型对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01本品对大鼠骨密度的影响本品高、中、低剂量组对实验性大鼠骨质疏松症导致的骨密度降低有明显抑制作用，可升高大鼠股骨和腰椎骨密度的作用(P＜0.05~0.001)，骨松宝也有升高大鼠股骨和腰椎骨密度的作用(P＜0.05)。
表2 本品胶囊对大鼠血钙、血磷的影响(x±s，n＝10)
本品对大鼠血钙、血磷的影响本品三个剂量组对维甲酸性导致骨质疏松症大鼠的血钙水平有显著的升高作用，和模型组比较有显著差异(P＜0.05)，骨松宝也有升高大鼠血钙、血磷的作用(P＜0.05)。本品对大鼠血磷无明显作用。
(2)镇痛作用2.1小鼠化学刺激法引起拟痛反应(扭体法)实验一级ICR小鼠60只，体重18～22g，随机分为5组，每组12只，雌雄各半，分组及给药情况见表3。
表3 对醋酸致小鼠扭体反应的影响试验给药及分组情况
各组动物按上表给药，除阳性组于注射醋酸前15min一次性腹腔注射给药，其它各组每天给药1次，连续7天，于末次给药后45min，各鼠腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，观察15min内各动物扭体反应次数。计算药物镇痛百分率。
结果见表4表4 对醋酸致小鼠扭体反应的影响
注与空白对照组比较，***p＜0.001；**p＜0.01。
表4结果表明，本专业品对醋酸致小鼠扭体反应具有明显抑制作用，与空白对照组比较，高剂量组p＜0.001，中剂量组p＜0.01，提示本品对醋酸致痛具有明显止痛作用。
2.2热传导引起小鼠拟痛反应(热板法)实验一级ICR小鼠，体重18～22g，雌性；RB-200智能热板仪，程控温度55±0.5℃，以小鼠舔后足为致痛指标，出现舔后足时所用的时间即为其痛阈值，测量各鼠正常痛阈值，选泽正常痛阈值在5～30s之间的小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分组及给药情况见表5。
表5 对小鼠热板致痛的影响试验给药及分组情况
测定正常痛阈值后，各组动物按上表给药，给药后30、60、90min(度冷丁组为15、60、90min)分别测定各鼠给药后痛阈值，计算痛阈提高百分率。
统计学处理采用SPSS10.0软件单因素方差分析进行统计，数据结果用均数加减标准差(x±s)表示。
结果见表6。
表6 对小鼠热板致痛的影响
与空白对照组比较，***p＜0.001；**p＜0.01；*p＜0.05。
表6结果表明，本品能明显提高热板致痛小鼠的痛阈值，与空白对照组比较，60min时高中低剂量组p＜0.01，90min时高、中剂量组p＜0.05。提示本品对热板致痛小鼠有明显的止痛作用。
(3)本品胶囊抗炎症实验研究3.1对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响雄性ICR小鼠60只，按体重随机分为模型对照组、阳性对照组，本品胶囊高、中、低剂量组，共5组，每组12只。高中低剂量组大鼠分别灌胃给予本品500、250、125mg/kg，阳性对照组灌胃给予醋酸地塞米松片1.0mg/kg，模型组给予等体积生理盐水，每大1次，连续7天，末次给药后1小时，将50μl二甲苯涂于每只小鼠右耳前后两面。4小时后脱颈处死，剪下双耳，用直径为8mm不锈钢冲子冲下左右耳片，称重，以两耳片重量之差作为衡量肿胀程度的指标，抗炎作用强度以抑制率(％)表示，用SPSS11.5软件包进行统计分析。结果见表7。
表7 对小鼠耳肿胀的影响(x±s)
与模型对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001实验结果表明，本品胶囊对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用，其高剂量组与模型组比较有极显著差异。
3.2对小鼠腹腔毛细血管通透性升高的抑制作用雄性ICR小鼠60只，按体重随机分为模型对照组、阳性对照组，本品胶囊高、中、低剂量组，共5组，每组12只。高中低剂量组大鼠分别灌胃给予本品500、250、125mg/kg，阳性对照组灌胃给予醋酸地塞米松片1.0mg/kg，模型组给予等体积生理盐水，每天1次，连续7天，于末次给药后30min，尾静脉注射0.5％伊文思蓝溶液0.1ml/10g体重，立即腹腔注射0.6％冰醋酸溶液0.2ml/只。20min后，剪开腹腔皮肤，用5ml生理盐水冲洗腹腔，吸出全部腹腔洗液，于751型分光光度计上测量其吸光值。以OD值反映其腹腔毛细血管通透性情况。结果见表8。
表8 对小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响(x±s)
与模型对照组比较*p＜0.05，**p＜0.01。
注表中动物数为注射成功、纳入统计分析的小鼠数。
上表结果表明，本品胶囊对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加具有明显的抑制作用，高剂量组与模型对照组比较有显著差异。
具体实施例以下为结合具体实施方式
对本发明所作的进一步的详细描述，并不对本发明作任何限制
实施例1胶囊处方及工艺处方(按1000粒计)淫羊藿提取物20g知母提取物 20g淀粉150ml微粉硅胶10g制成1000粒称取淫羊藿5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小时，回收乙醇，水浴浓缩，蒸干得淫羊藿总黄酮。
取知母干燥根茎用80~90℃的水浸3次。每次5h，合并水浸液，浓缩。浓缩液经大孔树脂碎柱色谱，收集10％~70％乙醇洗脱部分，回收溶剂至干，得知母总皂甙。
取处方量淫羊藿提取物、知母提取物、淀粉，微粉硅胶混均，装胶囊。
实施例2粉针处方及工艺处方(按1000瓶计)淫羊藿提取物10g知母提取物 5g甘露醇 250g制成1000瓶提取方法同上。成型工艺为取处方量淫羊藿提取物、知母提取物、甘露醇、聚乙二醇400、80％处方量注射用水溶解；初滤后再用0.2um微孔滤膜精滤；补足注射用水至全量；分装；冻干；包装。
实例3注射液处方及工艺处方(按1000瓶计)淫羊藿提取物 10g知母提取物5g注射用水 加至2000ml制成 1000瓶提取方法同上。成型工艺为取处方量淫羊藿提取物、知母提取物、50％处方量注射用水溶解；活性炭初滤后再用0.2um微孔滤膜精滤；补足注射用水至全量；测定含量；分装；灭菌；灯检；包装。
实例4片剂处方及工艺处方 (按1000片计)淫羊藿提取物 20g知母提取物20g淀粉 150g羟丙基纤维素 7g羟甲基淀粉钠 7g微粉硅胶 10g制成 1000片提取方法同上。成型工艺为取处方量淫羊藿提取物、知母提取物、淀粉，羧甲基淀粉钠，用5％羟丙基纤维素作黏合剂，制软材，20目筛制粒，60℃干燥，加入微粉硅胶整粒，压片。
实例5滴丸处方及工艺处方 (按1000粒计)淫羊藿提取物 20g知母提取物20g聚乙二醇6000 200g制成 1000粒提取方法同上。成型工艺为取聚乙二醇6000于油浴上加热至90-100℃，待全部溶解后，加入淫羊藿提取物和知母提取物搅拌至溶解，转移至贮液瓶中，密闭并保温再80-90℃，调节滴液定量阀门，滴入10-15℃的液体石蜡中，将形成的滴丸沥干并擦除液体石蜡，干燥。
权利要求
1.一种预防和治疗骨科疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物的配方为淫羊藿提取物1-99重量比，知母提取物1-99重量比。
2.一种预防和治疗骨科疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物的配方为淫羊藿提取物55-70重量比，知母提取物30-45重量比。
3.按照权利要求1所述的预防和治疗科疾病的药物组合物，其特征在于淫羊藿提取物可用淫羊藿原药材代替，知母提取物可用知母原药材代替。
4.按照权利要求1所述的预防和治疗科疾病的药物组合物，其特征在于淫羊藿提取物中淫羊藿总黄酮重量比为10-100，知母提取物中知母总皂甙重量比为10-100。
5.按照权利要求1所述的预防和治疗骨科疾病的药物组合物，其特征在于其临床上适用于治疗骨质疏松症、关节疾病、骨质增生，骨髓炎和筋骨伤痛等骨科疾病。
6.按照权利要求1所述预防和治疗骨质疏松症和抗炎的药物组合物，其特征在于它的剂型是适合临床应用的注射液(包括输液、冻干粉针)、丸剂、滴丸、片剂(包括分散片、口崩片等)、缓释片、胶囊、软胶囊、颗粒剂、散剂、锭剂、煎膏剂、口服液(合剂)、糖浆剂、软膏剂、搽剂、涂膜剂等药剂学上可以接受的剂型中的任何一种药物剂型。
7.一种预防和治疗骨科疾病的药物组合物的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤(1)称取淫羊藿5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小时，回收乙醇，水浴浓缩，蒸干得淫羊藿提取物；(2)取知母干燥根茎用80~90℃的水浸3次。每次5h，合并水浸液，浓缩。浓缩液经大孔树脂碎柱色谱，收集10％~70％乙醇洗脱部分，回收溶剂至干，得知母提取物；(3)取10g淫羊藿提取物、5g知母提取物、50％处方量注射用水溶解；活性炭初滤后再用0.2um微孔滤膜精滤；补足注射用水至全量；测定含量；分装；灭菌；灯检；包装，制成本发明的中药注射剂1000瓶。
全文摘要
本发明提供了一种能有效的预防和治疗骨科疾病的中药组合物，即淫羊藿和知母组成的药物组合物。它们的组合应用在预防和治疗骨科疾病方面有很好的协同作用，治疗效果明显，强于淫羊藿和知母单独应用。
文档编号A61K9/08GK1907424SQ20051008883
公开日2007年2月7日 申请日期2005年8月2日 优先权日2005年8月2日
发明者孙毅 申请人:孙毅