专利名称：p38 MAP激酶抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一系列氨基酸和氨基酸酯化合物，含有其的组合物，其制备方法及其药物用途，即作为P38MAP抑制剂来治疗自身免疫和炎症性疾病，包括类风湿性关节炎、牛皮癣、炎性肠病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、慢性阻塞性肺病、哮喘、多发性硬化、糖尿病、特应性皮炎、移植物抗宿主病、系统性红斑狼疮等。
背景技术：
白细胞(包括单核细胞、巨噬细胞和嗜中性粒细胞)的异常活动可导致细胞因子如TNF-α、ILl-β和IL_8的产生量增加，这是包括类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘和牛皮癣在内的炎症性疾病的病理特征。炎症细胞产生细胞因子是由于响应多种外部刺激引起的，从而导致多种胞内信号转导机制的活化。其中显著的是有丝分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)超家族，它由高度保守的信号转导激酶组成，这些激酶调控细胞生长、分化和应激反应。哺乳动物细胞含有至少三个MAPK家族P42/44胞外信号调控的激酶(ERK)MAPK、c-Jun NH2-端激酶(JNKs)和p38MAPK(也称作p38a/Mpk2/RK/SAPK2a/CSBPl/2)。p38MAPK在被鉴定为一种用脂多糖(LPS)刺激单核细胞后会酪氨酸磷酸化的激酶，其随后首次被克隆[Han等，Science 1994，265，808]。还描述了其它哺乳动物 P38 的同源物，包括 ρ38β [Jiang 等，J. Biol. Chem，1996，271，17920]、p38y [Li等,Biochem. Biophys. Res. Commun.,1996,228,334]和 p38 δ [Jiang等,J. Biol.Chem. 1997, 272, 30122] 虽然p38 α和p38 β是普遍表达的，ρ38γ则主要限于骨骼肌，而ρ38δ在肺和肾中优势表达。宿主防御细胞释放细胞因子以及白细胞对细胞因子和其它促炎性刺激的应答，均在不同程度上受到Ρ38ΜΑΡΚ的调控[Cuenda等，FEBS Lett, 1995，364，229-233]。在其它细胞类型中，P38MAPK控制应激反应，例如支气管上皮细胞经TNF-α刺激产生IL_8，LPS-刺激的内皮细胞中细胞粘附分子ICAM-I上调。P38MAPK活化后，可通过双重特异性激酶MKK3和MKK6使TGY位点双重磷酸化，从而使转录因子和其它激酶磷酸化而发挥作用。已鉴定MAP激酶活化的蛋白激酶-2 (MAPKAPK-2)是p38的磷酸化位点。已证明缺乏MAPKAP-K2的小鼠[Kotlyarov等，Nat. Cell Biol. 1999，1，94-97]在响应LPS/半乳糖胺介导的内毒素休克时TNF-a、IL-I β、IL-6、IL-10和IFN-Y的释放水平下降。这些细胞因子以及C0X-2的调控水平是mRNA水平。TNF- α水平是通过TNF- a mRNA中富含AU元件的3’ -UTR对其翻译控制而调控的，而MAPKAP-K2信号转导可促进TNF- a mRNA的翻译。MAPKAP-K2信号转导导致C0X-2、IL-6和巨噬细胞炎性蛋白的mRNA稳定性提高。MAPKAP K2具有位于其C末端的核定位信号和核输出信号作为其自身抑制域的一部分，从而决定了 p38 MAPK的细胞定位及其信号转导途径[Engel等，EMBO J. 1998，17，3363-3371]。在应激细胞中，MAPKAP-K2和p38 MAPK从核迁移到胞质中，该迁移仅在p38 MAPK具有催化活性时才发生。研究者认为这种迁移是由p38 MAPK磷酸化引起的MAPKAP-K2核输出信号的暴露所驱动的[Meng等，J.Biol. Chem. 2002, 277，37401-37405]。此外，p38 MAPK直接或间接导致多种介导炎症反应的转录因子的磷酸化，包括ATF1/2 (活化转录因子1/2)、CH0P-10/GADD-153 (生长停滞和DNA损伤可诱导基因153)、SAP-I (血清反应因子辅助蛋白-I)和MEF2C(肌细胞增强因子-2)[Foster 等，Drug News Perspect.2000, 13, 488-497]。已证明在几种情况下，通过小分子抑制P38MAPK活性有利于治疗多种细胞因子分泌异常所介导的疾病，包括类风湿性关节炎、C0PD、哮喘和脑缺血。该特征是几篇综述的主题[Salituro 等，Current Medicinal Chemistry, 1999, 6, 807-823 ；Kumar 等，NatureReviews Drug Discovery 2003,2,717-726]。 已有实验表明p38的抑制剂在类风湿性关节炎动物模型中有效，例如胶原诱导的关节炎大鼠模型[Revesz 等,Biorg. Med. Chem. Lett. , 2000, 10, 1261-1364]和佐剂诱导的关节炎大鼠模型[Wadsworth 等,J. Pharmacol. Exp. Ther. , 1999, 291, 1685-1691]。在胰腺炎诱导的肺损伤小鼠模型中，用p38 MAPK抑制剂预处理减少了呼吸道和肺水肿中 TNF-α 的释放[Denham 等，Crit. Care Med. , 2000, 29, 628 and Yang etal, Surgery, 1999, 126, 216] 0在卵清蛋白(OVA)致敏的过敏性消化道炎症模型小鼠中，于卵清蛋白激发前抑制p38 MAPK可减少消化道内细胞因子和炎症细胞的聚集[Underwood等，J. Pharmacol. Exp. Ther.，2000，293，281]。在炎性肠病的患者中可见p38MAP激酶活性提高[Waetzig 等，J. Immunol, 2002，168，5432-5351]。已有实验表明 p38MAPK 抑制剂在心脏肥大大鼠模型[Behr et al, Circulation, 2001, 104, 1292-1298]和局灶性脑缺血大鼠模型中[Barone et al, J. Pharmacol. Exp. Ther.，2001，296，312-321]有效。我们现在发现了一组化合物，它们是p38 MAPK (ρ38 α、β、Y和δ )及其同功酶和剪接变体，特别是P38 α、Ρ38 β和ρ38 β 2有效的和选择性的抑制剂。因此，该化合物可用作药物，例如用于治疗和预防本文所述的免疫和炎性疾病。该化合物的特征在于分子内存在可通过胞内羧酸酯酶水解的氨基酸酯基基序或氨基酸基序(motif)。本发明的化合物具有亲脂性的氨基酸酯基序，可穿过细胞膜，并由胞内羧酸酯酶水解成酸。极性的水解产物不能轻易穿过细胞膜，从而在细胞内聚集。因此，细胞内化合物的p38 MAP激酶活性被延长并增强。本发明的化合物与国际专利申请W003076405中所述的p38 MAP激酶抑制剂相关，但由于本发明的化合物具有上述氨基酸酯基序，因此与其不同。
发明内容
根据本发明，提供了式(I)的化合物
D
..J.R, (丨)
O N N °
II U P
其中 G 是 _N=或 _CH=；D是任选取代的二价单-或双环芳基或杂芳基，具有5-13个环成员；R6是氢或任选取代的C1-C3烷基；P代表氢，U代表式(IA)基团；或U代表氢，P代表式(IA)基团；-A-(CH2)z-X1-L1-Y-NH-CHR1R2(IA)其中A代表任选取代的二价单-或双环碳环或杂环基，具有5-13个环成员；z 是O或 I;Y 是键、-C (=0) -、-S (=0) 2_、-C (=0) NR3->-C (=S) -NR3、-C (=NH) NR3 或 _S (=0) 2NR3_，其中R3是氢或任选取代的C1-C6烧基；L1 是式(Alk1)m(Q)n(Alk2)p-的二价基团，其中m，n和P分别是O或1，Q是(i)任选取代的二价单-或双环碳环或杂环基，具有5-13个环成员，或(ii)，条件是当m和P均为O时,为式-X2-Q1-或-Q1-X2-,其中X2是-O-, S-或NRa-,其中Ra是氧或任选取代的C1-C3烷基，Q1是任选取代的二价单-或双环碳环或杂环基，具有5-13个环成员，Alk1和Alk2分别代表任选取代的二价C3-C7环烷基，或任选取代的直链或支链C1-C6亚烷基、C2-C6亚烯基、或C2-C6亚炔基(alkynyIene),其任选的含有或以醚(_0_)、硫醚(-S-)或氨基(-NRa-)连接终止，其中Ra是氢或任选取代的C1-C3烧基,和X1 代表键；-C(=0);或-S (=0)2-;-NR4C (=0)-;-C (=0) NR4-;-NR4C (=0)NR5- ；-NR4S(=0)2-或-S(=0)2NR4-;其中R4和R5分别是氢或任选取代的C1-C6烷基。R1是羧基(-C00H)，或可以被一种或多种胞内酯酶水解成羧酸基团的酯基；和R2是天然或非天然α -氨基酸的侧链。式(I)化合物可以制备成盐的形式，特别是其药学上可接受的盐、N-氧化物、水合物、及其溶剂化物。任何本文所要求、或所称的“本发明的化合物”、“本发明有关的化合物”、“式(I)化合物”等包括这些化合物的盐、N-氧化物、水合物和溶剂化物。虽然上述定义可能包括高分子量的分子，优选根据药物化学实践的一般原理，本发明的化合物的分子量应不大于600。在本发明的另一个大方面，提供了如上所述的式(I)化合物，或其N-氧化物、盐、水合物或溶剂化物在制备可抑制p38 MAP激酶活性的组合物时的用途。本发明的化合物可用于在体外或体内抑制p38 MAP激酶活性。在本发明的一个方面，本发明的化合物可用于制备一种治疗自身免疫或炎症性疾病的组合物，特别是那些上文所述的P38 MAP激酶活性起作用的疾病。在另一个方面，本发明提供了一种治疗上述疾病类型的方法，包括对患有这些疾病的患者施用有效量的如上定义的式(I)的化合物。术语术语“酯”或“酯化羧基”表示基团RxO(C=O)-,其中Rx是酯的特征性基团，理论上衍生自醇Rx0H。
如本文所用的术语“(Ca-Cb)烷基”，其中a和b是整数，指具有a到b个碳原子的直链或支链烷基。因此例如当a是I、b是6时，术语包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。本文所用的术语“二价(Ca-Cb)亚烷基”，其中a和b是整数，指具有a到b个碳原子和两个不饱和价键的饱和烃链，。本文所用的术语“(Ca-Cb)链烯基”，其中a和b是整数，指具有a到b个碳原子和至少一个可适用E或Z立体化学的双键的直链或支链烯基。术语包括例如乙烯基、丙烯基(allyl)、I-和2- 丁稀基和2-甲基-2-丙稀基。本文所用的术语“二价(Ca-Cb)亚链烯基”指具有a到b个碳原子、至少一个双键和两个未饱和价键的烃链。本文所用的术语“(Ca-Cb)炔基”，其中a和b为整数，指具有a到b个碳原子和另 一个三键的直链或支链烃基。术语应包括例如乙炔基、I-丙炔基、I-和2-丁炔基、2-甲基-2-丙炔基、2-戍炔基、3-戍炔基、4-戍炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基和5-己炔基。本文所用的术语“二价(Ca-Cb)亚炔基”，其中a和b是整数，指具有a到b个碳原子和至少一个三键的二价烃链。本文所用的术语“碳环”指单_、双-或三环基团，其最多具有16个环原子，且均为碳原子；术语还包括芳基和环烷基。本文所用的术语“环烷基”指具有3-8个碳原子的单环饱和碳环基团，并包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。本文所用的术语“芳基”指单_、双-或三环碳环芳基，包括具有两个直接通过共价键连接的单环碳环芳环的基团。这些基团的例子是苯基、联苯基和萘基。本文所用的无限制术语“杂芳基”指含有一个或多个选自S、N和O的杂原子的单_、双-或三环芳基，还包括含有两个这样的单环的基团、或一个这样的单环和一个单环芳环的基团，两基团间通过共价键直接连接。这样的基团的例子是噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、吡咯基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑基、异噻唑基、苯并异噻唑基、吡唑基、曙唑基、苯并B恶唑基、异曙唑基、苯并异囉唑基、异噻唑基、三唑基、苯并三唑基、噻二唑基、嗯二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、喷哚基、喷唑基。本文所用的无限制术语“杂环基”或“杂环”包括如上定义的“杂芳基”，其非芳族意义中涉及单_、双_、或三环非芳族基团，其含有一个或多个选自S、N和O的杂原子，以及由一个含有一个或多个这样的杂原子的单环非芳族基团与另一个这样的基团或单环碳环基共价连接所组成的基团。这些基团的例子是吡咯基、呋喃基、噻吩基、哌啶基、咪唑基、MJT唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、吡唑基、吡啶基、吡咯烷基、嘧啶基、哌嗪基、吲哚基、吗啉基、苯并呋喃基、吡喃基、异Bg唑基、苯并咪唑基、亚甲基二氧苯基、亚乙基二氧苯基、马来酰亚氨基和琥珀酰亚氨基。“二价亚苯基、亚吡啶基、亚嘧啶基、或亚吡嗪基”是具有两个不饱和价键的苯、批啶、嘧啶或吡嗪环，包括1，3-亚苯基、1，4-亚苯基和如下
除非在文中出现时另外说明，如用于本文中任何基团，术语“取代的”意味着被多达4个相容的取代基取代，每个单独可以是例如(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羟基、羟基(C1-C6)烷基、巯基、巯基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷硫基、苯基、卤代(包括氟、溴和氯)、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、腈基(-CN)、氧代、-C00H、-COORa、_C0RA、_S02RA、-CONH2、-SO2NH2、-CONHR\ -SO2NHRa, -CONRaRb^-SO2NRaRb、-NH2、-NHRa、-NRaRb' -OCONH2、-OCONHRa, -OCONRaRb、-NHCORa, -NHC00R\ -NRbCOORa, -NHSO2ORa, -NRbSO2OH, -NRbSO2ORa, -NHCONH2, -NRaCONH2, -NHCONHRb, -NRaCONHRb、-NHC0NRaRb、或-NRaCONRaRb，其中Ra和Rb分别是(C「C6)烷基、(C3-C6)环烷基、苯基或具有5或6个环原子的单环杂芳基、“任选取代的”可以是上述取代基之一。术语“天然或非天然α -氨基酸侧链”指式具有NH2-CH(Ry)-COOH结构式的天然或非天然氨基酸中的基团RY。天然α-氨基酸的侧链的例子包括丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、5-羟基赖氨酸、4-羟基脯氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、α-氨基己二酸、α -氨基-正丁酸、3，4- 二羟基苯丙氨酸、高丝氨酸、α -甲基丝氨酸、鸟氨酸、哌可酸和甲 状腺素。在其特征性侧链中含有功能性取代基，例如氨基、羧基、羟基、巯基、胍基、咪唑基、或吲哚基的天然α -氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸、组氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和半胱氨酸。当本发明化合物的R2是这些侧链之一时，功能性取代基可被任意保护。当用于天然α -氨基酸侧链中的功能性取代基时，术语“被保护”意味着该取代基的一个衍生物，它基本是非功能性的。例如，羧基可以被酯化(例如作为C1-C6烷基酯)、氨基可以转化成酰胺(例如作为NHCOC1-Qg基酰胺)或羧酰胺(例如作为NHC (=0)0(^-(;烷基或NHC (=0) OCH2Ph羧酰胺)，羟基可以转化成醚(例如OC1-C6烷基或O (C1-C6烷基)苯基醚)或酯(例如OC(ZO)C1-C6烷基酯)，和硫醇基团可以转化成硫醚(例如叔丁基或苄基硫醚)或硫酯(例如SC(ZO)C1-C6烷基硫酯)。非天然α-氨基酸侧链的例子包括下文讨论的适用于本发明化合物的R2基团中所述的那些。本文所用的术语“盐”包括碱加成、酸加成和季铵盐。酸性的本发明的化合物可以与碱，例如碱金属氢氧化物(例如氢氧化钠和钾)；碱土金属氢氧化物(例如氢氧化钙、钡和镁)；有机碱(例如N-甲基-D-葡糖胺、三(羟甲基)氨基甲烷胆碱、L-精氨酸、L-赖氨酸、N-乙基哌啶、二苄胺等)形成盐，包括药学上可接受的盐。碱性的式(I)化合物可以与无机酸，例如氢卤酸(例如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸或磷酸等；有机酸，例如乙酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、苹果酸、水杨酸、柠檬酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、苯甲酸、苯磺酸、谷氨酸、乳酸和扁桃酸等形成盐，包括药学上可接受的盐。对合适的盐的综述可见Stahl和Wermuth 的“Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties, Selection, and Use，，〈〈药用盐手册性质、选择及使用》(威利-VCH，德国威汉姆(Wiley-VCH，Weinheim，Germany)，2002)。本文所用的术语“溶剂化物”描述一种分子复合物，它含有本发明的化合物和化学计量的一种或多种药学上可接受的溶剂分子，例如乙醇。当所述溶剂为水时，使用术语“水合物”。由于不对称碳原子的存在，含有一个或多个实际或可能手性中心的本发明的化合物可能以对映体或多种非对映异构体的形式存在，在每个手性中心具有R或S立体化学。本发明包括所有这些对映体、非对映异构体及其混合物。 如上所述，本发明的酯可被胞内酯酶转化成羧酸。这些酯和羧酸本身都可能具有P38MAP抑制活性。本发明的化合物因此不仅包括酯，还包括对应的羧酸水解产物。本发明关注的化合物中基团DD是任选取代的二价单-或双环芳基或杂芳基，具有5-13个环成员。现在优选B是任选的苯基或任选取代的吡啶基。优选的B上的取代基包括氯、氟、甲基、甲氧基、和三氟甲基，例如当B是2，4- 二氯苯基时。取代基R6R6是氢或任选取代的C1-C3烷基。目前优选R6是氢或甲基。P/U区域异构体目前优选P是氢，而U是如上定义的式(IA)的基团。基团A在式(IA)的基团中，目前优选A是任选取代的1，4-亚苯基。在这种情况下，优选的任选取代基包括氟和氯。A还可以是任何下列基团，其可被任选取代
权利要求
1.式⑴的化合物
2.如权利要求I所述的化合物，其中A是任选取代的1，4-亚苯基。
3.如权利要求I所述的化合物，其具有式(IIA)，(IIB)和(IIC):
4.如权利要求3所述的化合物，其中所述化合物具有式(IIA)，且其中R11是F，R12是F，R13 是 F，和 R14 是 F。
5.如权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中-Y-L1-X1-[CH2]z-基团是-CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH2O-, -CH2CH2O-, -CH2CH2CH2O-, -CH2CH2CH2CH2O-, -C (=0) -CH2-,或-C (=0) -CH2O-。
6.如权利要求4所述的化合物，其中-Y-L1-X1-[CH2] z_基团是-CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH2O-, -CH2CH2O-, -CH2CH2CH2O-, -CH2CH2CH2CH2O-, -C (=0) -CH2-,或-C (=0) -CH2O-。
7.如权利要求I所述的化合物，其中R14是乙基、环戊基或叔丁基。
8.如权利要求6所述的化合物，其中R14是乙基、环戊基或叔丁基。
9.如权利要求I所述的化合物，其中R1是式-(C=O)OR14的酯基，其中R14是环戊基，R2是C1-C6烧基。
10.如权利要求1-9中任一项所述的化合物，它是药学上可接受的盐的形式。
11.一种药物组合物，其含有如权利要求1-10中任一项所述的化合物，和药学上可接受的载体。
12.权利要求1-10中任一项所述的化合物在制备治疗自身免疫疾病或炎症性疾病的组合物中的用途。
全文摘要
式(I)的化合物是p38MAP激酶的抑制剂，因此能被用于治疗炎性病况等，包括类风湿性关节炎和COPD(I)，其中G是-N=或-CH=；D是任选取代的二价单-或双环芳基或杂芳基，具有5-13个环成员；R6是氢或任选取代的C1-C3烷基；P代表氢，U代表式(IA)所示基团；或U代表氢，P代表式-A-(CH2)z-X1-L1-Y-NH-CHR1R2基团，其中A代表任选取代的二价单-或双环碳环或杂环基，具有5-13个环成员；z、Y、L1和X1如说明书中定义；R1是羧酸基(-COOH)、或可被一个或多个胞内酯酶水解成羧酸基的酯基；R2是天然或非天然α-氨基酸的侧链。
文档编号A61K31/4418GK102942520SQ201210457450
公开日2013年2月27日 申请日期2007年5月1日 优先权日2006年5月4日
发明者D·C·F·莫法特, S·平特, S·戴维斯 申请人:色品疗法有限公司