用tor 激酶抑制剂治疗癌症的制作方法
【专利摘要】本文提供了用于治疗或预防ETS过表达的尤文氏肉瘤的方法，包括向患有ETS过表达的尤文氏肉瘤的患者给予有效量的TOR激酶抑制剂。
【专利说明】用TOR激酶抑制剂治疗癌症
[0001] 本申请要求2012年3月15日提交的美国临时申请号61/611，370的权益，以及要 求2012年10月18日提交的美国临时申请号61/715, 329的权益，其各自的全部内容以引 入方式结合于本文作为参考。 1.
【技术领域】
[0002] 本文提供了治疗或预防ETS过表达的尤文氏肉瘤（尤文氏肉瘤）的方法，包括向 患有ETS过表达的尤文氏肉瘤的患者给予有效量的TOR激酶抑制剂。 2.
【背景技术】
[0003] 异常的蛋白磷酸化与疾病的原因或结果之间的关系已经为人们所知超过20年。 因而，蛋白激酶已成为非常重要的药物靶标组。参见Cohen，Nature，1:309-315(2002)。 多种蛋白激酶抑制剂已经用于临床治疗多种的疾病，例如癌症和慢性炎性疾病，包括糖 尿病和中风。参见Cohen，Eur.J.Biochem. ,268:5001-5010 (2001),ProteinKinase InhibitorsfortheTreatmentofDisease:ThePromiseandtheProblems,Handbook ofExperimentalPharmacology,SpringerBerlinHeidelberg,167(2005)〇
[0004] 蛋白激酶是的一个大且多样的酶家族，其催化蛋白磷酸化并在细胞信号转导中 起关键性作用。蛋白激酶可发挥正调节或负调节作用，这取决于它们的靶蛋白。蛋白激 酶参与调节细胞功能的特定信号通路，所述细胞功能例如但不限于代谢、细胞周期进程、 细胞粘附、血管功能、细胞凋亡和血管生成。细胞信号转导的功能失调与许多疾病有关， 其中最具特征性的疾病包括癌症和糖尿病。通过细胞因子调结信号转导以及信号分子 与原癌基因和肿瘤抑制基因的相关性已经有充分记载。同样，已证明了糖尿病及相关 病症与蛋白激酶的去调节水平之间的联系。参见例如Sridhar等人，Pharmaceutical Research, 17(11) :1345-1353 (2000)。病毒感染和与其有关的病症也与蛋白激酶的调节有 关。Park等人，Cell101 (7) :777-787(2000)。
[0005] 因为蛋白激酶调节几乎每一个细胞过程，包括代谢、细胞增殖、细胞分化和细胞存 活，所以它们对于各种疾病状态的治疗性干预而言都是极具吸引力的靶标。例如，细胞周期 调控和血管生成（其中蛋白激酶起至关重要的作用）是与多种病症相关的细胞过程，所述 病症例如但不限于癌症、炎性疾病、异常血管生成及与其有关的疾病、动脉粥样硬化、黄斑 变性、糖尿病、肥胖和疼痛。
[0006] 对于癌症的治疗，蛋白激酶已成为极具吸引力的革巴标。Fabbro等，Pharmacology &Therapeutics93:79-98(2002)。已有人提出，蛋白激酶引起人类恶性肿瘤的发生可在以 下情况下出现：（1)基因组重排（例如在慢性髓细胞性白血病中的BCR-ABL) ;(2)导致连续 有活性的激酶活性的突变，例如急性髓细胞性白血病和胃肠肿瘤；（3)激酶活性因癌基因 的活化或肿瘤抑制功能的丧失而去调节，例如在具有致癌性RAS的癌症中；(4)激酶活性因 过表达而去调节，如在EGFR的情况下；和（5)可影响肿瘤表型的发生和维持的生长因子的 异位表达。Fabbro等，Pharmacology&Therapeutics93:79-98(2002)。
[0007] 对蛋白激酶途径的错综程度和在各种蛋白激酶和激酶途径中和在两者之间的关 系和相互作用的复杂性的阐明突出了开发能够作为对多种激酶或多种激酶途径具有有益 活性的蛋白激酶调节剂（modulator)、调控剂（regulator)或抑制剂起作用的药物的重要 性。因此，对于新的激酶调制剂仍有需求。
[0008] 被称为mTOR(雷帕霉素的哺乳动物靶标，其也被称为FRAP、RAFTI或RAPT1)的 蛋白质，是一种2549个氨基酸的Ser/Thr蛋白激酶，已经证明其在调节细胞生长和增殖 的mT0R/PI3K/Akt途径中是最关键的蛋白质之一。Georgakis和Younes，ExpertRev· AnticancerTher. 6 (1):131-140 (2006)。mTOR存在于两种复合物（mTORCl和mT0RC2)中。 虽然mTORCl对雷帕霉素类似物（例如坦罗莫司或依维莫司）敏感，但是mT0RC2对雷帕霉 素非常不敏感。值得注意的是，雷帕霉素不是TOR激酶抑制剂。几种mTOR抑制剂已经或正 在评估在临床试验中对癌症治疗的效果。坦罗莫司已在2007年被批准用于肾细胞癌，西 罗莫司已在1999年被批准用于预防肾移植排斥反应。依维莫司在2009年被批准用于经 历国血管内皮生长因子受体抑制剂治疗的肾细胞癌患者；在2010年被批准用于需要治疗 但不准备进行外科切除术的患者中与结节性硬化（TS)相关的室管膜下巨细胞星形细胞瘤 (SEGA);在2011年被批准用于患有不可切除的、局部晚期或转移性疾病的患者中的胰脏来 源的进行性神经内分泌瘤（PNET)。存在需要另外的TOR激酶抑制剂。
[0009] 尤文氏家族的肉瘤是骨和软组织侵袭性肿瘤，由染色体易位导致的E-26 (ETS)基 因融合所定义。最常见的融合基因构建体包括与ETS转录因子（FLI-1、ETVl或ERG)的 DNA结合区域融合的尤文氏肉瘤尤文氏肉瘤断点区域-I(EWS)基因。得到的嵌合蛋白的 失调与异常增殖、侵袭和肿瘤发生有关。Brenner等，BiochemicaetBiophysicaActa 1796:201-215 (2009)。通过siRNA对DNA-PK或PARPl进行抑制在体外抑制了ETS+尤文 氏肉瘤的肿瘤细胞侵袭，且ETS+尤文氏肉瘤对在体内用PARP-I抑制剂治疗敏感（Brenner 等，CancerRes. 1月27日印刷前的电子版（2012))。此外，ETS融合蛋白在两种细胞系 和原发瘤中与mTOR途径相关，且雷帕霉素暴露能下调ETS嵌合蛋白水平并抑制肿瘤细 胞增殖。Mateo-Lozano等，Oncogene22:9282-9287(2003);Zanali等，Ann.Clin.Lab. Sci. 39(2) :160-166(2009)。
[0010] 本申请第二部分对任意参考文献的引用和鉴定不应解释为承认该参考文献为本 申请的现有技术。 3.
【发明内容】
[0011] 本文提供了治疗或预防E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤的方法，包括向患有ETS 过表达的尤文氏肉瘤的患者给予有效量的TOR激酶抑制剂。
[0012] 在某些实施方式中，本文提供了用于改善患者的实体瘤疗效评价标准（Response EvaluationCriteriainSolidTumor)(RECISTL1)的方法，包括向患有ETS过表达的尤 文氏肉瘤的患者给予有效量的TOR激酶抑制剂。
[0013] 在一些实施方式中，TOR激酶抑制剂是如本文描述的化合物。
[0014] 参照【具体实施方式】部分和实施例（其旨在例举非限制性的实施方式），可以更全 面地理解本发明的实施方式。
[0015]4.发明详沭
[0016] 4.1 ^SI
[0017] "烷基"基团是指具有1-10个碳原子、通常具有1-8个碳原子或在一些实施方式中 具有1-6个、1-4个或2-6个碳原子的饱和、部分饱和或不饱和直链或支链非环状烃。代表性 的烷基基团包括-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基和-正己基；而饱和支链烷基 包括 -异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基、甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基 戊基、2, 3-二甲基丁基等。不饱和烷基基团的实例包括，但不限于，乙烯基、烯丙基、-CH= CH(CH3)、-CH = C (CH3) 2、-C (CH3) = CH2、-C (CH3) = CH(CH3)、-C (CH2CH3) = CH2、-C E CH、-C E C(CH3)、-C三c(CH2CH3)、-CH2C三CH、-CH2C三c(CH3)和-CH2C三c(CH7CH3)等。烷基可以是取代 或未取代的。在某些实施方式中，当本文中的烷基被描述为"取代的"时，它可以被本文描述 的示例性化合物和实施方式中出现的任意（一个或多个）取代基，以及卤素（氯、碘、溴或 氣）；轻基；烧氧基；烧氧基烧基；氣基；烧基氣基；竣基；硝基；氛基；疏基；硫酿；亚胺；醜 亚胺；脒；胍；烯胺；氨基羰基；酰基氨基；磷酸盐；磷烷；硫羰基；磺酰基；砜；磺胺；酮；醛； 酯；尿素；尿烷；肟；羟基胺；烷氧基胺；芳烷氧基胺；甲氧氮芥；肼；酰肼；腙；叠氮化物；异 氰酸酯；异硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；B(OH)2，或0(烷基）氨基羰基所取代。
[0018] "烯基"基团是指具有2-10个碳原子，典型地具有2-8个碳原子，并包含至少一个 碳-碳双键的直链或支链非环状烃。代表性的直链和支链（C2-C8)烯基包括-乙烯基、-丙 稀基、_1_ 丁稀基、_2_ 丁稀基、-异丁稀基、-1-戊稀基、_2_戊稀基、_3_甲基-1- 丁稀 基、-2_甲基_2_ 丁稀基、_2, 3_二甲基_2_ 丁稀基、-1-己稀基、_2_己稀、_3_己稀、-1-庚 稀基、_2_庚稀基、_3_庚稀基、-1-半稀基、_2_半稀基、_3_半稀基等等。稀基的双键可以 与另外的不饱和基团不共轭或共轭。烯基可以是未取代的或取代的。
[0019] "环烷基"基团是指具有单一的环或多个稠合的或桥连的环的3-10个碳原子的饱 和的、部分饱和的或不饱和的环状烷基，其可选地被1-3个烷基取代。在一些实施方式中， 环烷基具有3-8元环，然而在其他实施方式中，环碳原子数目在3-5、3-6、或3-7个的范围 内。举例而言，这样的环烷基包括单环结构例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环 辛基、1-甲基环丙基、2-甲基环戊基、2-甲基环辛基，等等，或者多环或桥环结构例如金刚 烷基等等。不饱和环烷基的实例包括环己烯基、环庚烯基、环己二烯基、丁间二烯基、戊二烯 基、己二烯基，等等。环烷基可以是取代或未取代的。举例而言，这样的取代的环烷基团括 环己酮等等。
[0020] "芳基"基团是指具有单环（例如，苯基）或多个稠合的环（例如，萘基或蒽基）的 6-14个碳原子的芳香碳环基团。在一些实施方式中，芳基含有6-14个碳原子，而在其他实 施方式中该基团的环部分为6-12个或甚至6-10个碳原子。具体的芳基包括苯基、联苯基、 萘基等等。芳基可以是取代或未取代的。短语"芳基基团"也包括含有稠环的基团，例如稠 合芳香-脂肪环系统（例如，茚满基、四氢萘基，等等）。
[0021] "杂芳基"基团是指在杂芳环系统中具有一至四个杂原子作为环原子的芳香环系 统，其中其余的原子是碳原子。在一些实施方式中，杂芳基含有5-6个环原子，而在其他实 施方式中，该基团的环部分为6-9个或甚至6-10个原子。合适的杂原子包括氧、硫和氮。 在某些实施方式中，杂芳基环系统是单环或双环。非限制性实例包括但不限于，例如以下的 基团：吡咯基（pyrroIy1)、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、批 咯基（pyrolyl)、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基 (例如，异苯并呋喃-1，3-二亚胺）、吲哚基、氮杂吲哚基（例如，吡咯并吡啶基或IH-吡咯 并[2, 3-b]批啶基）、吲唑基、苯并咪唑基（例如，IH-苯并[d]咪唑基）、咪唑并吡啶基（例 如，氮杂苯并咪唑基、3H-咪唑并[4, 5-b]吡啶基或IH-咪唑并[4, 5-b]吡啶基）、吡唑并吡 啶基、三唑并吡啶基、苯并三唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、异噁唑并吡啶 基、硫茚基、嘌呤基、黄嘌呤基（xanthinyl)、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹 啉基、喹喔啉基、和喹唑啉基。
[0022] "杂环基"是指芳香族环烷基（也称为杂芳基）或非芳香族环烷基，其中一至四个 环碳原子独立地被选自〇、S和N的杂原子所替代。在一些实施方式中，杂环基团包括3-10 个环成员，而其他的这种基团具有3-5个、3-6个或3-8个环成员。杂环基还可在任意环 原子处（即，杂环的任意碳原子或杂原子处）被连接至其他基团。杂环烷基团可被取代或 未被取代。杂环基团包括不饱和、部分饱和和饱和的环系统，例如，咪唑基、咪唑啉基和咪 唑烷基团。短语杂环基包括稠环类，包括具有稠合芳香族和非芳香族基团的稠环，例如，苯 并三唑基、2, 3-二氢苯并[1，4]二氧杂环戊烯基和苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基。该术 语还包括具有杂原子的桥连的多环环系统，例如，但不限于，喹宁环基。杂环基团的代表性 实例包括，但不限于，吖丙啶基、吖丁啶基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噻唑烷基、四氢 苯硫基、四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基（dioxolyl)、呋喃基、苯硫基、吡咯基、吡咯啉基、咪 唑基、咪唑啉基、吡唑基、吡唑啉基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻唑啉基、 异噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、四氢吡喃基（例如，四 氢-2H-吡喃基）、四氢硫代吡喃基、氧硫杂环己烷、二氧杂环己烯基（dioxyl)、二硫杂环己 烷基（dithianyl)、吡喃基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、二氢吡啶基、二氢二 硫丽基、--Mi-硫丽基、1?脈嚷基、喧宁环基、喷噪基、喷噪琳基、异喷噪基、氣杂喷噪基（批 咯并吡啶基）、吲唑基、吲嗪基、苯并三唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并苯硫基、苯并噻 唑基、苯并噁二唑基、苯并噁嗪基、苯并二硫酮基、苯并氧硫杂环己二烯基、苯并噻嗪基、苯 并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基、吡唑吡啶基、咪唑 并吡啶基（氮杂苯并咪唑基；例如，IH-咪唑并[4, 5-b]吡啶基或IH-咪唑并[4, 5-b]吡 啶-2 (3H)-酮基）、三唑吡啶基、异噁唑吡啶基、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹 啉基、异喹啉基、喹嗪基、喹噁啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、萘啶基、蝶啶基、硫代萘基、 -氧苯并唾嚷基、-氧苯并咲喃基、-氢^引噪基、_氧苯并_氧杂环戊稀基、四氧Π引噪基、四 氢吲唑基、四氢苯并咪唑基、四氢苯并三唑基、四氢吡咯并吡啶基、四氢吡唑吡啶基、四氢咪 唑并吡啶基、四氢三唑吡啶基和四氢喹啉基团。代表性取代的杂环基团可以被单取代或取 代一次以上，例如，但不限于，吡啶基或吗啉基，其被例如下文列举的各种取代基2-、3-、4_、 5_或6-取代或双取代。
[0023] "环烷基烷基"基团是指下式的基团：_烷基-环烷基，其中烷基和环烷基如上文定 义。取代的环烧基烧基可以在烧基、环烧基处被取代，或者该基团的烧基和环烧基部分均被 取代。代表性的环烷基烷基包括但不限于，环戊基甲基、环戊基乙基、环己基甲基、环己基乙 基和环己基丙基。代表性的取代的环烧基烧基可以被单取代或被取代一次以上。
[0024] "芳烷基"基团是指下式的基团：_烷基-芳基，其中烷基和芳基如上文定义。取代 的芳烷基团可以在烷基、芳基处被取代，或者该基团的烷基和芳基部分均被取代。代表性的 芳烷基团包括但不限于苄基和苯乙基，以及稠合（环烷基芳基）烷基，例如4-乙基-茚满 基。
[0025] "杂环基烷基"基团是指下式的基团：-烷基-杂环基，其中烷基和杂环基如上文 定义。取代的杂环基烧基团可以在烧基、杂环基处被取代，或者该基团的烧基和杂环基部 分均被取代。代表性的杂环基烷基团包括但不限于，4-乙基-吗啉基、4-丙基吗啉基、呋 喃-2-基甲基、呋喃-3-基甲基、吡啶-3-基甲基、（四氢-2H-吡喃-4-基）甲基、（四 氢-2H-吡喃-4-基）乙基、四氢呋喃-2-基甲基、四氢呋喃-2-基乙基和吲哚-2-基丙基。 [0026] "齒素"是氟、氯、溴或碘。
[0027] "羟基烷基"基团是指被一个或多个羟基取代的上述烷基。
[0028] "烷氧基"基团是指-0_(烷基），其中烷基如上文所述。
[0029] "烷氧基烷基"基团是指-(烷基）-0-(烷基），其中烷基如上文所述。
[0030] "氨基"基团是指下式的基团：-nh2。
[0031] "烷基氨基"基团是指下式的基团：-NH-烷基或-N(烷基）2，其中每个烷基独立地 如上文所述。
[0032] "羧基"基团是指下式的基团：-C(0)0H。
[0033] "氨基羰基"基团是指下式的基团：-C(0)N(R#)2、-C(O)NH(Rs)或-C(O)NH2，其中每 一个Rs独立地为如上文定义的取代或未取代的烷基、环烷基、芳基、芳烷基或杂环基。
[0034] "酰氨基"基团是指下式的基团：_NHC(0) (Rs)或-N(烷基）C(0) (R#)，其中每个烷 基和Rs独立地如上文所述。
[0035] "烷基磺酰氨基"基团是指下式的基团：NHSO2(Rs)或-N(烷基）S02(R#)，其中每个 烷基和Rs如上文所述。
[0036] "脲"基团是指下式的基团：-N(烷基）C(0)N(R#)2、-N(烷基）C(0)NH(R#)、-N(烷 基）C(0)NH2、-NHC(0)N(Rs)2、-NHC(0)NH(Rs)或-NH(CO)NHRs，其中每一个烷基和Rs 独立地如 上文所述。
[0037] 当本文描述的基团，除了烷基之外，被称为"被取代"时，它们可被任意合适的取 代基所取代。取代基的示意性实例为在本文中披露的示例性化合物和实施方式中的那 些取代基，以及齒素（氣、鹏、漠或氣）；烧基；轻基；烧氧基；烧氧基烧基；氣基；烧氣基； 羧基；硝基；氰基；巯基；硫醚；亚胺；酰亚胺；脒；胍；烯胺；氨基羰基；酰氨基；磷酸酯基 (phosphonato);膦；硫代羰基；磺酰基；砜；磺酰胺；酮；醛；酯；脲；尿烷；肟；羟胺；烷氧基 胺；芳烷氧基胺；N-氧化物；肼；酰肼；腙；叠氮化物；异氰酸酯；异硫氰酸酯；氰酸酯；硫代 氰酸酯；氧（ = 〇) ;B(0H)2,0(烷基）氨基羰基；环烷基，其可以是单环或者稠合或非稠合的 多元环（例如，环丙基、环丁基、环戊基或环己基），或者杂环基，其可以是单环或者稠合或 非桐合的多环（例如，批略烧基、脈陡基、脈嚷基、吗琳基或唾嚷基）；单环或者桐合或非桐 合的多环芳基或杂芳基（例如，苯基、萘基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、苯硫基、咪唑基、噁唑 基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、吡啶基、喹啉基、异喹啉基、吖啶基、吡嗪基、 咕嗪基、啼陡基、苯并咪唑基、苯并苯硫基（benzothiophenyl)或苯并呋喃基）芳氧基；芳烧 氧基；杂环氧基；以及杂环基烧氧基。
[0038] 本文所用的术语"药学可接受的盐"是指由药学可接受的无毒的酸或碱（包括无 机酸和无机碱以及有机酸和有机碱）制备的盐。TOR激酶抑制剂的合适的药学可接受的碱 加成盐包括，但不限于，由铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌制备的金属盐，或由赖氨酸、N，N'-二 苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺（N-甲基葡糖胺）和普鲁卡因 制备的有机盐。适用的无毒性酸包括，但不限于，无机酸和有机酸，例如醋酸、褐藻酸、邻 氨基苯甲酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙烯磺酸、甲酸、富马酸、糠酸、半乳糖醛 酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、乙醇酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、 扁桃酸、甲基磺酸、粘酸、硝酸、扑酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、磺 胺酸、硫酸、酒石酸以及对甲苯磺酸。具体的无毒酸包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和甲磺 酸。具体的盐的实例包括盐酸盐和甲磺酸盐。其他的实例已为本领域公知的，例如，参见 Remington's Pharmaceutical Sciences,第18版,Mack Publishing,Easton PA(1990)或 Remington:The Science and Practice of Pharmacy,第19版，Mack Publishing, Easton PA(1995)。
[0039] 除非另有说明，否则本文所用的术语"包合物"是指具有包埋在晶格内空间（例 如，通道）的客体分子（例如，溶剂或水）的晶格形式的TOR激酶抑制剂或其盐，或者是指 其中TOR激酶抑制剂是客体分子的晶格。
[0040] 除非另有说明，否则本文所用的术语"溶剂化物"是指进一步包括通过非共价分子 间力结合的化学计量或非化学计量量的溶剂的TOR激酶抑制剂或其盐。在一种实施方式 中，该溶剂化物为水合物。
[0041] 除非另有说明，否则本文所用的术语"水合物"是指进一步包括通过非共价分子间 力结合的化学计量或非化学计量量的水的TOR激酶抑制剂或其盐。
[0042] 除非另有说明，否则本文所用的术语"前药"是指在生物条件下（体外或体内）能 够水解、氧化或以其他方式反应以提供活性化合物特别是TOR激酶抑制剂的TOR激酶抑制 剂衍生物。前药的实例包括，但不限于，包含如可生物水解的酰胺基、可生物水解的酯、可生 物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲、以及可生物水解的磷酸酯 类似物的可生物水解部分的TOR激酶抑制剂的衍生物和代谢产物。在某些实施方式中，具 有羧基官能团的化合物的前药为羧酸的低级烷基酯。该羧酸酯可通过对该分子上存在的任 意羧酸部分进行酯化而方便地得到。前药通常可采用公知方法进行制备，例如在Burger's MedicinalChemistryandDrugDiscovery第6版（DonaldJ.Abraham编著，2001，Wiley) 和DesignandApplicationofProdrugs(H.Bundgaard编著，1985,HarwoodAcademic PublishersGmfh)中描述的方法。
[0043] 除非另有说明，否则本文所用的术语"立体异构体"或"立体异构纯"是指TOR激 酶抑制剂的一种立体异构体，其基本上没有该化合物的其他立体异构体。例如，具有一个手 性中心的化合物的立体异构纯化合物基本没有该化合物的相对的对映体。具有两个手性 中心的化合物的立体异构纯化合物将基本没有该化合物的其他非对映异构体。典型的立 体异构纯化合物包含大于约80wt%的该化合物的一种立体异构体和少于约20wt%的该化 合物其他立体异构体,大于约90wt%的该化合物的一种立体异构体和少于约IOwt%的该 化合物其他立体异构体，大于约95wt%的该化合物的一种立体异构体和少于约5wt%的该 化合物其他立体异构体，或者大于约97wt%的该化合物的一种立体异构体和少于约3wt% 的该化合物其他立体异构体。所述TOR激酶抑制剂可具有多个手性中心并可作为外消旋 体、单独的对映异构体或非对映异构体及其混合物存在。所有这些异构体形式包含在本文 中披露的实施方式中，包括它们的混合物。这种TOR激酶抑制剂的立体异构体纯形式的用 途以及这些形式的混合物的用途包含在本文披露的实施方式中。例如，含有等量或不等量 的特定TOR激酶抑制剂对映体的混合物可用于本文披露的方法和组合物。这些异构体可 通过如手性柱或手性拆分试剂等标准技术进行不对称合成或拆分。例如，参见，Jacques， J.等人，Enantiomers,RacematesandResolutions(ffiley-Interscience,NewYork, 1981) ;Wilen,S.H.等人，Tetrahedron33:2725(1977) ;Eliel,E.L·，Stereochemistryof CarbonCompounds(McGraw-Hill,NY, 1962);和Wilen,S.H·，TablesofResolvingAgents andOpticalResolutions第 268 页（E.L.Eliel编著，Univ.ofNotreDamePress,Notre Dame,IN,1972)。
[0044] 还应指出，所述TOR激酶抑制剂可包括E异构体和Z异构体或它们的混合物，及顺 式和反式异构体或它们的混合物。在特定的实施方式中，所述TOR激酶抑制剂被分离为顺 式或反式异构体。在其他实施方式中，所述TOR激酶抑制剂为顺式和反式异构体的混合物。
[0045] "互变异构体"是指彼此平衡的化合物的异构体形式。异构体形式的浓度取决于化 合物所在的环境，还可取决于，例如，化合物是否为固体或是否在有机或水溶液中。例如，在 水溶液中，吡唑可以如下异构体形式存在，其被称为彼此的互变异构体：
[0046] HNxJ 'J〇
[0047] 本领域技术人员可容易地理解，多种官能团和其他结构可显示互变异构性，且所 述TOR激酶抑制剂的所有互变异构体均在本发明的范围内。
[0048] 应当指出，所述TOR激酶抑制剂可在一个或多个原子处包含非天然比例的原子 同位素。例如，该化合物可通过放射活性同位素，例如氚（ 3H)、碘-125(12?、硫-35(3?) 或碳-H(14C)进行放射性标记，或者是同位素富集的，例如具有氘（2H)、碳-13(1?)或 氮-15(15N)。本文所用的"同位素体（isotopologue)"是同位素富集的化合物。术语"同位 素富集的"是指具有不同于该原子天然同位素组成的同位素组成的原子。"同位素富集的" 还指包含了具有不同于该原子天然同位素组成的同位素组成的原子的化合物。术语"同位 素组成"是指在给定原子中各同位素存在的量。放射性标记和同位素富集的化合物可用作 治疗性药剂，例如，癌症或炎症治疗药剂，研究试剂，例如结合测定试剂，诊断性药剂，例如 体内成像药剂。本文所述的TOR激酶抑制剂的所有同位素变体，不管是否具有放射性，均意 在落入本文提供的实施方式的范围内。在一些实施方式中，提供了TOR激酶抑制剂的同位 素体，例如，氘、碳-13或氮-15富集的杂芳基化合物的同位素异构体。
[0049] 本文所用的"治疗"是指完全或部分减轻ETS过表达的尤文氏肉瘤或其症状，或者 减缓或停止ETS过表达的尤文氏肉瘤或其症状的进一步发展或恶化。
[0050] 本文所用的"预防"是指完全或部分预防ETS过表达的尤文氏肉瘤或其症状的发 作、复发或扩散。
[0051] 与TOR激酶抑制剂连用的术语"有效量"是指能够部分或完全减轻与ETS过表达 的尤文氏肉瘤相关的症状，或者减缓或停止这些症状的进一步发展或恶化，或者治疗或预 防ETS过表达的尤文氏肉瘤的量。有效量的TOR激酶抑制剂，例如在药物组合物中，可以是 能够实现期望效果的水平；例如，口服或肠胃外给药的单位剂量中约0. 005mg/kg受试者体 重至约lOOmg/kg患者体重。预期本文公开的有效量的TOR激酶抑制剂可以根据所治疗的 迹象的严重程度发生变化对于本领域技术人员而言显而易见的。
[0052] 本文所用的术语"患者"和"受试者"包括动物，包括，但不限于，动物如牛、猴、马、 羊、猪、鸡、火鸡、鹌鹑、猫、狗、小鼠、大鼠、兔或豚鼠，在一种实施方式中为哺乳动物，在另一 种实施方式中为人。在一种实施方式中，"患者"和"受试者"是患有ETS过表达的尤文氏肉 瘤的人。在一种实施方式中，"患者"和"受试者"是患有组织学或细胞学确认的ETS过表达 的尤文氏肉瘤的人，包括已经接受过（或不能耐受）标准抗癌治疗的受试者，或未接受过标 准抗癌治疗的受试者。
[0053] 在ETS过表达的尤文氏肉瘤情况下，抑制可通过以下方式进行评估：对疾病进展 的抑制、对肿瘤生长的抑制、原发瘤和/或继发瘤的减小、肿瘤相关症状的减轻、生活质量 的改善、对肿瘤分泌因子的抑制（包括肿瘤分泌激素，如对类癌综合征有作用的那些）、原 发瘤和/或继发瘤的延迟表现、原发瘤和/或继发瘤的减缓发展、原发瘤和/或继发瘤的减 少出现、疾病副效应的减缓或降低严重性、停滞的肿瘤生长和肿瘤退化，等等。在某些实施 方式中，ETS过表达的尤文氏肉瘤的治疗可通过在循环血和/或肿瘤细胞和/或皮肤活检 或肿瘤活检/涂片（aspirates)中用TOR激酶抑制剂治疗之前、之中和/或之后对S6RP、 4E-BP1和/或AKT的磷酸化抑制来进行评价。在其他实施方式中，ETS过表达的尤文氏肉 瘤的治疗可通过在皮肤样品和/或肿瘤活检/涂片中对DNA依赖蛋白激酶（DNA-PK)的活 性抑制来进行评价，例如通过在TOR激酶抑制剂治疗之前、之中和/或之后作为DNA损伤途 径生物标志物的DNA-PKS2056的量进行评价。在一种实施方式中，用UV光辐照皮肤样品。 在极端情况下，完全抑制在本文中是指预防或化学预防。在此情形下，术语"预防"包括整 体预防临床显著的ETS过表达的尤文氏肉瘤的开始或预防ETS过表达的尤文氏肉瘤临床前 显著阶段的开始。此定义还意味着涵盖了对转化成恶性细胞的预防，或者俘获或逆转前恶 性细胞向恶性细胞的进展。这包括对于具有发展性ETS过表达的尤文氏肉瘤风险的患者的 预防性治疗。
[0054]4. 2【专利附图】
【附图说明】
[0055] 图1提供了使用ETS阳性和ETS阴性细胞系进行的化合物1的无性系生长抑制分 析。
[0056] 图2提供了ETS阳性细胞中化合物1对DNA损伤的增强作用。
[0057]4. 3TOR激酶抑制剂
[0058] 本文提供的化合物通常是指"TOR激酶抑制剂"。在一种【具体实施方式】中，TOR激 酶抑制剂不包括雷帕霉素或雷帕霉素类似物（rapalogs)。
[0059] 在一种实施方式中，TOR激酶抑制剂包括具有下式（I)的化合物：
[0060]
【权利要求】
1. 一种治疗E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤的方法，包括向患有ETS过表达的尤文氏 肉瘤的患者给予有效量的TOR激酶抑制剂。
2. 权利要求1所述的方法，其中，所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径被激活的尤文氏肉瘤。
3. 权利要求2所述的方法，其中，所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径由于PTEN缺失、PIK3Ca突变或EGFR过表达或其组合而被激活的尤文氏肉瘤。
4. 权利要求1所述的方法，其中，所述患者被给予约0. 5mg/天至约120mg/天的TOR激 酶抑制剂。
5. 权利要求4所述的方法，其中，所述患者被给予0. 5mg/天、lmg/天、2mg/天、4mg/天、 8mg/天、16mg/天、20mg/天、30mg/天、45mg/天、60mg/天、90mg/天或 120mg/天的 TOR 激酶 抑制剂。
6. 权利要求1所述的方法，其中，所述患者被给予包括0· 25mg、l. 0mg、5. 0mg、7. 5mg或 lOmg的TOR激酶抑制剂的单位剂量形式。
7. -种改善患者实体瘤疗效评价标准（RECIST 1. 1)的方法，包括向患有E-269(ETS) 过表达的尤文氏肉瘤的患者给予有效量的TOR激酶抑制剂。
8. 权利要求7所述的方法，其中，所述ETS过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/mT0R途径 被激活的尤文氏肉瘤。
9. 权利要求8所述的方法，其中，所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径由于PTEN缺失、PIK3Ca突变或EGFR过表达或其组合而被激活的尤文氏肉瘤。
10. -种用于抑制患有E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤的患者的生物样品中S6RP、 4E-BP1和/或AKT的磷酸化的方法，包括向所述患者给予有效量的TOR激酶抑制剂，并将 TOR激酶抑制剂给药前后获得的患者生物样品中磷酸化的S6RP、4E-BP1和/或AKT的量进 行比较，其中所述TOR激酶抑制剂给药后获得的所述生物样品中的磷酸化S6RP、4E-BP1和 /或AKT的量比所述TOR激酶抑制剂给药前获得的所述生物样品中的磷酸化S6RP、4E-BP1 和/或AKT的量少则说明存在抑制。
11. 权利要求10所述的方法，其中，所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径被激活的尤文氏肉瘤。
12. 权利要求11所述的方法，其中，所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径由于PTEN缺失、PIK3Ca突变或EGFR过表达或其组合而被激活的尤文氏肉瘤。
13. -种用于抑制患有E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤的患者的皮肤样品中DNA依赖 蛋白激酶（DNA-PK)活性的方法，包括向所述患者给予有效量的TOR激酶抑制剂，并将所述 TOR激酶抑制剂给药前后获得的患者生物样品中磷酸化DNA-PK的量进行比较，其中所述 TOR激酶抑制剂给药后获得的所述生物样品中的磷酸化DNA-PK的量比所述TOR激酶抑制剂 给药前获得的所述生物样品中的磷酸化DNA-PK的量少则说明存在抑制。
14. 权利要求13所述的方法，其中，所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径被激活的尤文氏肉瘤。
15. 权利要求14所述的方法，其中，所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径由于PTEN缺失、PIK3Ca突变或EGFR过表达或其组合而被激活的尤文氏肉瘤。
16. -种用于检测患有E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤的患者中S6RP、4E-BP1或AKT 磷酸化抑制的方法，包括向所述患者给予有效量的TOR激酶抑制剂，检测所述患者中的磷 酸化S6RP、4E-BP1或AKT的量，并将所述磷酸化S6RP、4E-BP1或AKT的量与该患者在给予 有效量的TOR激酶抑制剂之前的这些量进行比较。
17. 权利要求16所述的方法，其中，所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径被激活的尤文氏肉瘤。
18. 权利要求17所述的方法，其中，所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径由于PTEN缺失、PIK3Ca突变或EGFR过表达或其组合而被激活的尤文氏肉瘤。
19. 一种用于检测患有E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤的患者的皮肤样品中DNA-PK S2056的磷酸化抑制的方法，包括向所述患者给予有效量的TOR激酶抑制剂，检测皮肤样品 中的磷酸化DNA-PK S2056的量，并将所述磷酸化DNA-PK S2056的量与给予有效量的TOR 激酶抑制剂之前所述患者的皮肤样品中的量进行比较。
20. 权利要求19所述的方法，其中所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径被激活的尤文氏肉瘤。
21. 权利要求20所述的方法，其中所述E-26(ETS)过表达的尤文氏肉瘤是其中PI3K/ mTOR途径由于PTEN缺失、PIK3Ca突变或EGFR过表达或其组合而被激活的尤文氏肉瘤。
22. -种包含TOR激酶抑制剂和监控患者对给予所述TOR激酶抑制剂的应答的工具的 试剂盒，其中所述患者患有E-26 (ETS)过表达的尤文氏肉瘤。
【文档编号】A61P35/00GK104302295SQ201380025102
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2013年3月14日 优先权日:2012年3月15日
【发明者】徐水蟾, 克里斯汀·梅·海格 申请人:西格诺药品有限公司