专利名称：Myt1激酶抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及膜缔合酪氨酸和苏氨酸激酶(“myt1激酶”)抑制剂，含有这种化合物的药用组合物，以及鉴定所述组合物的方法和用所述组合物治疗各种形式的癌症和过度增殖疾病的方法。
进入有丝分裂是由促M期因子(MPF)启动的，该因子是含有cdc2蛋白激酶和细胞周期蛋白B的复合物。正确调节MPF能确保有丝分裂只能在细胞周期的初期阶段结束之后出现。在Tyr-15和Thr-14上对cdc2进行磷酸化，可以在分裂间隙(G1、S和G2)抑制所述活性。在G2-M过渡期，在Tyr-15和Thr-14位置上对cdc2进行脱磷酸化，使MPF能对其有丝分裂底物进行磷酸化。已知一个独特的cdc-调节激酶家族(Weel)控制cdc Tyr-15的磷酸化。最近报导了该家族的一个新成员Myt1是Thr-14和Tyr-15-专一性cdc2激酶，并证实它是cdc2/细胞周期蛋白B激酶活性的重要调节物(“科学”27086-90,1995；“分子细胞生物学”，17卷571,1997)。抑制cdc2的磷酸化作用对于进入有丝分裂的定时来说是重要的。研究已经证实，cdc2的提前激活会导致有丝分裂的彻底失败和细胞死亡。Myt1的抑制预计能够导致cdc2的提前激活，并因此能杀死快速增殖的细胞。另外，预计Myt1抑制作用能降低对传统DNA破坏性化疗的耐受性，因为避免细胞死亡的机制，涉及细胞周期G2期抑制作用，并在分裂之前修复DNA损伤。通过阻断cdc2的Myt1抑制磷酸化作用，可以防止所述抑制作用。因此，强制细胞提前进入有丝分裂。
Myt1激酶是一种重要的细胞周期调节物，特别是G2/M期的调节物。因此，抑制剂有希望用于治疗癌症。现有的癌症疗法包括外科手术、辐射、和化疗，这些方法通常在治愈这种疾病方面是不成功的。患者群体很大，例如，仅结肠癌一项在美国每年有160,000个新的病历，并有60,000人死亡。在世界上每年新增600,000个结肠癌病历，而肺癌患者的数量是结肠癌的两倍。对大型固体肿瘤进行化疗的最大的缺陷是大多数患者没有反应。这是因为细胞周期调节和随后的DNA损伤或有丝分裂器官、大多数有效化疗剂靶的修复。Myt1激酶提供了一个介入点，该介入点位于肿瘤细胞产生抗性的机制的下游。Myt1的抑制本身是具有减弱肿瘤增殖的作用。此外，还可用于与传统的化疗法结合，以便克服抗药性。
根据以上说明，有必要鉴定有效的myt1激酶抑制剂，用于治疗各种适应症，包括癌症，这些疾病与本发明的受体相关。
本发明涉及由下面的式(Ⅰ)所表示的化合物，含有该化合物的药用组合物和用该化合物拮抗myt1激酶受体的方法。
本发明提供了下面的式(Ⅰ)所示的化合物 式(Ⅰ)其中A表示共价键，或1,2、1,3或1,4-二取代芳香胺环，选自下列一组 其中R独立地选自H、OMe、Cl、Br、F、NO2和CN；n是1-4的整数；每一个X独立地选自H、Br、CH3、NO2、CN和NR1R2；每一个Ar各自是视需要取代的苯基或视需要取代的五或六员杂环，包括选自N、O和S的一个或几个杂原子；和R1和R2各自是H或C1-4烷基，分支的或环状的，视需要含有O或N。
本发明的优选化合物选自下列一组二[2-(4-苯基-5-甲基)噻唑基]胺，二[2-(4-(2-吡啶基)噻唑基]胺，二[2-[4-(3-吡啶基)噻唑基)胺，N,N-二(5(3,4-二氯苯基)-2-噻唑基)胺，N,N-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基)胺，1,4-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基氨基)苯，1,3-二[4-(3-吡啶基)-2-噻唑基氨基]苯，1,4-二[4-氟苯基-2-噻唑基氨基]苯；和1,4-二(4-(4-甲氧基苯基)-2-噻唑基氨基)苯。
本发明更优选的化合物选自下列一组二[2-(4-苯基-5-甲基)噻唑基]胺，1,4-二(4-(4-甲氧基苯基)-2-噻唑基氨基)苯，N,N-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基)胺，1,4-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基氨基)苯，1,4-二[4-氟苯基-2-噻唑基氨基]苯，二[2-(4-(2-吡啶基)噻唑基]胺，和二[2-[4-(3-吡啶基)噻唑基)胺。本发明的最优选的化合物选自下列一组二[2-(4-苯基-5-甲基)噻唑基]胺，1,4-二(4-(4-甲氧基苯基)-2-噻唑基氨基)苯，N,N-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基)胺，和1,4-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基氨基)苯氢溴化物。
在本文中，“烷基”是指视需要取代过的通过碳-碳单键连接在一起的烃基。烷基烃基可以是线型的、分支的或环状的，饱和的或不饱和的。所述基团优选为饱和的线型或环状的。
本发明的化合物可以含有一个或几个不对称碳原子，并可以外消旋和光学活性形式存在。上述所有化合物及非对映体都属于本发明的范围。
本发明化合物还可以制成可以药用的盐及其复合物。可以药用的盐在给药量和浓度下是无毒的盐。
可以药用的盐包括酸加成盐，如包括硫酸盐、氢氯酸盐、富马酸盐、马来酸盐、磷酸盐、氨基磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、环己基氨基磺酸盐、奎尼酸盐等盐。可以药用的盐可以从酸获得，如氢氯酸、马来酸、硫酸、磷酸、氨基磺酸、乙酸、柠檬酸、乳酸、酒石酸、马来酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己基氨基磺酸、富马酸和奎尼酸。
可以药用的盐还包括碱加成盐，如包括双苄基亚乙基二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、麦格鲁明、普鲁卡因、铝、钙、锂、镁、钾、钠、铵、烷基胺、和锌等盐，此时存在酸性官能团，如羧酸或苯酚。
优选的盐包括氢溴酸盐、二氢溴酸盐和双三氟乙酸盐。
本发明的化合物容易通过下面的方法制备方案1 相应的二噻唑化合物是通过二硫代缩二脲(如反应式1)或任何其它二硫代缩二脲，如1,3-苯基二硫代缩二脲(如反应式2)与两当量的适当取代过的溴酮，如2-溴-1-苯基丙-1-酮，在诸如乙醇或丙酮或任何其它合适溶剂中缩合而合成的。将反应混合物加热到70-50℃保持数小时(4-12小时)。冷却该反应混合物，得到二氢溴酸盐形式的所需产物。二噻唑化合物的一溴化可以通过在有诸如氟硼酸或任何其它合适的质子存在的条件下，在诸如乙腈或任何其它合适的溶剂中，让N-溴琥珀酰亚胺反应而完成的，该方法披露于有关文献中(Oberhauser,T.有机化学杂志，1997,62,4504-4506)。二溴化作用可以通过任何已知的溴化反应完成，如使二噻唑与N-溴琥珀酰亚胺在乙酸中回流DMSO或乙腈或溴进行反应，或用本领域化学家所公知的任何其它方法进行。
通过适当操作和保护任何化学官能团，可以用与上文所述类似的方法合成式(Ⅰ)中的其余化合物。为了用式(Ⅰ)的化合物或其可以药用的盐治疗人类和其它哺乳动物，通常按照标准的药理学方法将其制备成药用组合物。
本发明的配体可以通过不同方式施用，包括静脉、腹膜内、皮下、肌内、口服、外用、表皮使用、或粘膜使用。对于系统性给药来说，优选口服。对于口服来说，例如，所述化合物可以制成常规的口服剂型，如胶囊、片剂，和液体制剂，如糖浆、酏剂和浓缩的滴剂。
另外，可以采用注射(肠胃外施用)，例如，肌内、静脉内、腹膜内、皮下注射。对注射来说，本发明的化合物被制成液体溶液，优选溶解在生理学上相容的缓冲液或溶液中，如盐水溶液、Hank′s溶液，或Ringer′s溶液，另外，所述化合物可以制成固体形式，并在使用之前重新溶解或悬浮。也可以生产冷冻干燥形式。
系统性给药还可以经粘膜或经表皮方式。对于经粘膜或经表皮给药来说，在该制剂中使用适于穿透阻隔层的穿透剂。所述穿透剂在本领域中是众所周知的，并且例如包括，胆酸盐和羧链孢酸的衍生物。另外，还可以用洗涤剂增强渗透性。经粘膜的服用，例如，可以通过鼻腔喷雾、直肠栓剂、或阴道栓剂使用。
为了通过表皮给药，本发明的化合物可以制成软膏、敷膏、凝胶、或霜剂，如本领域所公知的。所服用的各种化合物的量可以通过标准方法确定，要考虑以下因素，如该化合物的IC50、EC50、该化合物的生物学半衰期、患者的年龄、体形和体重、以及患者所患的疾病。需要考虑的所述因素以及其它因素的重要性为本领域普通技术人员所公知。
给药量还取决于给药的途径和口服生物利用率的程度。例如，对于具有较低的口服生物利用率的化合物来说，必须服用较大的剂量。
优选的组合物为单位剂型。对于口服使用来说，例如可以片剂或胶囊形式，对于鼻腔使用来说，可以施用计量过的气溶胶剂，对于经表皮使用来说，可以使用外用制剂或膏贴，而对于经粘膜使用来说，可以使用口腔含片。在每一种情况下，用药方案是这样的，使患者可以取用单一剂量。
用于口服的每一个剂量单位包括0.01-500mg/Kg是合适的，优选0.1-50 mg/Kg式(Ⅰ)的化合物或其可以药用的盐，该数字是以游离碱形式计算的。肠胃外、鼻腔、口腔吸入、经粘膜或经表皮途径施用的日用剂量，合适的是0.01-100 mg/Kg的式(Ⅰ)化合物。外用制剂含有0.01-5.0％的式(Ⅰ)化合物是合适的。每天可以服用活性成分1-6次，优选1次，足于表现出所需要的活性，正如本领域技术人员很容易理解的。
在本文中，疾病的“治疗”包括(但不限于)疾病的避免、阻滞和预防。在本文中，可以用本发明化合物治疗的“疾病”包括(但不限于)白血病、固体肿瘤癌、转移癌、软组织癌、脑癌、食道癌、胃癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、膀胱癌、骨癌、前列腺癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、睾丸癌、肾癌、头癌和颈癌、慢性炎性增殖疾病，如牛皮癣和类风湿性关节炎；增殖性心血管疾病，如再狭窄、增殖性视觉疾病，如糖尿病性视网膜病和良性过度增殖病，如血管瘤。
口服有活性的式(Ⅰ)的组合物及其可以药用的盐，可以制成糖浆、片剂、胶囊和锭剂。糖浆制剂通常包括将所述化合物或盐悬浮在液体载体中组成的悬浮液或溶液，所述载体如乙醇、花生油、橄榄油、甘氨酸或水以及香味剂或着色剂。当所述组合物是片剂形式时，可以使用通常被用于制备固体制剂的任何药用载体。所述载体的例子包括硬脂酸镁、石膏粉、滑石、凝胶、阿拉伯胶、硬脂酸、淀粉、乳糖和蔗糖。当所述组合物是胶囊形式时，任何胶囊化方法都可以采用，例如，将上述载体用于硬的凝胶胶囊壳中。当所述化合物是软的凝胶壳胶囊形式时，通常用于制备分散剂或悬浮剂的任何药用载体都可以使用，例如含水胶、纤维素、硅酸盐或油，并将其填入软的凝胶胶囊中壳。
典型的肠胃外组合物包括一种化合物或盐溶解在无菌水或非水载体中的溶液或悬浮液，视需要含有可以肠胃外使用的油，例如聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、花生油和芝麻油。
用于吸入的典型组合物为溶液、悬浮液或乳液形式，以上剂型可以干粉形式或气溶胶形式用常规的推进剂，如二氯二氟甲烷或三氯氟甲烷服用。
典型的栓剂配方包括适宜的化合物或其有活性的可以药用的盐，该化合物在以这种方式服用时可加入结合剂和/或润滑剂，例如聚乙二醇、凝胶、可可油或其它低熔点植物蜡或脂肪或其合成类似物。
典型的表皮和透皮制剂含有传统的含水或无水载体，例如，栓剂、软膏、洗液或糊剂或者是膏药、膏贴或膜。
所述组合物优选为单位剂量形式，例如片剂、胶囊或计量的气溶胶剂型，以便患者可以服用一个剂量。
当本发明的化合物用本发明的方法服用时，不会出现不可接受的毒理学作用。
式(Ⅰ)化合物的生物学活性通过下面所述的试验证实。体外测定可以用下文所述的体外测定和细胞测定鉴定能够抑制myt1激酶的化合物。所述测定的变化形式对本发明技术人员来说是显而易见的。GST-Myt1的表达构建GST-Myt1表达载体，该载体具有通过一个接头与Myt1激酶的氨基末端融合的谷胱甘肽-S-转移酶基因，所述接头含有凝血酶裂解位点，该克隆在Myt1的362号氨基酸上被截短，该位点正好处在跨膜域的前面。将该结构克隆到杆状病毒表达载体pFASTBAC上，并且将其制备用于随后感染的病毒菌株。用表达GST-Myt1的病毒感染草地贪夜蛾细胞(Sf21)，并让所述细胞生长3天，然后收获并冷冻。GST-Myt1的纯化按如下方法纯化GST-Myt1蛋白将表达GST-Myt1的Sf21细胞沉淀物在冰上重新悬浮于10毫升的溶胞缓冲液(50mM Tris-HCl,pH7.5,250mM NaCl,1mM二硫苏糖醇(DTT),0.1％NP-40,5％(v/v)蛋白酶抑制剂混合物，1mM原矾酸钠)中，通过超声波使细胞溶解，并以100,000×g的速度离心30分钟。将上清液加至5毫升的(包装体积)谷胱甘肽Sepharose4B上，用洗涤缓冲液(20mM Tris-HCl,pH7.0,10mM MgCl2,100mM NaCl,1mM DTT,0.5％(v/v)蛋白酶抑制剂混合物，1mM原矾酸钠)平衡。将该混合物振动30分钟。以500×g的速度离心5分钟使所述树脂和结合的GST-Myt1沉淀，并用14毫升洗涤缓冲液洗涤。按上述方法使珠粒旋转，并重新悬浮在另外14毫升洗涤缓冲液中。将悬浮液转移到一个柱上，并进行充填，然后让洗涤缓冲液通过重力的作用流动。用10mM谷胱甘肽将GST-Myt1从所述柱上洗脱，洗脱液是用50mM Tris-HCl,pH8.0制备的，洗脱物的馏分为500微升。用Bio-Rad′s蛋白测定试剂盒按照说明书的说明测定所述组分的蛋白浓度。收集含有GST-Myt1的馏分，并稀释到大约0.5mg/ml的浓度，并在4℃下透析缓冲液(20mM HEPES,pH7.0,1mM乙酸镁，100mM NaCl,0.05％Brij-35,10％甘油，1mM DTT,0.2％(v/v)蛋白酶抑制剂混合物，1mM原矾酸钠)透析4小时。将所述蛋白等分，并保存在-80℃下。酶测定GST-Myt1自磷酸化-DELFIA测定在96孔NUNC maxisorp板上进行延迟荧光免疫测定(DELFIA)，每孔添加50微升0.25微克GST-Myt1溶解在缓冲液A(50mM HEPES,pH7.4,2mM乙酸锰，5μM ATP,1mM DTT)的溶液。为了测定最佳pH值，使用二价阳离子，而ATP的Km，合适的成分按照附图
所示改变。通过添加溶解在缓冲液中的GST-Myt1开始自磷酸化反应，并在室温下，让该反应在摇动条件下进行20分钟。添加终浓度为20mM的EDTA终止所述反应。并让所述蛋白与所述孔继续结合40分钟。用300微升TBS/Tween(50mM Tris,pH7.4,150mM NaCl,0.2％Tween-20)洗涤所述孔3次。洗涤之后用溶解在TBS中的Pierce′s Superblock封闭所述板，其浓度为100微升/孔。马上倾出封闭溶液，并再重复两次封闭。然后再次用300微升/孔的TBS-Tween洗涤所述板3次。然后将100微升Eu-标记的抗磷酸酪氨酸抗体在含有0.15mg/ml BSA的TBS/Tween中稀释到0.125微克/毫升，并添加到所述孔中，在室温下，在摇动条件下培养30分钟。然后用300微升TBS/Tween洗涤所述孔3次，每孔添加200微升增强溶液，并在摇动条件下培养10分钟。然后用购自Wallac公司的1420VICTOR平板记数器对所述平板进行计数。在进行抑制剂研究时使用相同的条件，所不同的是ATP的浓度为1μM，而抑制剂添加在二甲基亚砜(DMSO)中，最终浓度为1％。试验化合物预计能够抑制myt1自磷酸化作用的浓度范围为0.001-50μM。生理学研究细胞周期研究有关细胞作用的药物研究是在Hela S3粘着细胞系上进行的。以足够低的浓度以细胞铺板，以便在24小时之后这些细胞能达到10-20％的铺满度(通常为2×105/15cm e3)。然后通过重复的胸苷阻隔将细胞同步化在S期。简单地讲，用2mM胸苷处理细胞18小时，通过3次洗涤释放8小时，然后再用胸苷处理。在第二次除去胸苷之后，95％的细胞处在S期。然后将同步的细胞送回到含有DNA破坏药物的完全培养基中，所述药物如50mM topotecan(我们发现该剂量足于将细胞控制在G2期早期，而不会诱导细胞脱噬作用)，并与试验化合物结合处理18小时。然后以细胞核进行碘化丙锭染色法，针对细胞周期曲线进行细胞计数。(Vindelov等，细胞计量第3卷，No.5,1983,323-327)预计Myt1抑制剂能够逆转由所述DNA破坏剂导致的G2控制。所述活性的典型浓度范围为0.001-10μM。增殖/细胞脱噬作用研究增殖研究是在各种粘着和非粘着细胞系上进行的，包括Hela S3,HT29和Jurkat(删除***)。增殖研究使用比色变化进行，这种变化是由于由代谢的活细胞产生生成甲簪产物而使四唑制剂XTT减少造成的(Scudiero等，“癌症研究”，48,1981,4827-4833)。将细胞以100微升的体积接种到96孔板上，达到大致10％的铺满度(细胞浓度随细胞系而变化并生长24小时)。然后加入带有或不带有足够的含载体培养基的化合物，以便将细胞增加到200微升含化学试剂的最终体积，其中有0.2％DMSO。让细胞接受多种浓度的DNA破坏抗增殖药物，如topotecan，本发明试验化合物及组合处理在37℃下，5％二氧化碳条件下进行。72小时之后，将50微升XTT/吩嗪甲磺酸盐混合物加到每个孔中，并培养细胞90分钟。在450nm下对板进行计数，并与载体处理的细胞比较抗增殖效果。预计Myt1抑制剂能够抑制所述癌细胞系的增殖和/或增强DNA破坏化疗药物的细胞毒性。所述活性物的典型浓度范围为0.001-10μM。还可以用试验化合物进行细胞增殖或细胞毒性的其它研究，而且，这些研究为本领域技术人员所公知。
本发明包括，但不限于下面的实施例，在300MHz下，用BrukerAM300光谱仪记录核磁共振光谱。CDCl3是氘氯仿，DMSO-d6是六氘二甲基亚砜，而CD3OD是四氘甲醇。化学变化表示以每百万分之几份数表示，是根据内标四甲基硅烷测定的。NMR数据的缩写如下s=单峰，d=双峰，t=三峰，q=四峰，m=多峰，dd=双双峰，dt=双三峰，app=明显，br=宽。J表示以赫兹计算的NMR偶联常数。在Perkin-Elmer683红外线光谱仪上记录连续的红外(IR)光谱，并在NicoletImpact400D红外光谱仪上记录Fourier转化红外(FTIR)光谱。用过渡模式记录IR和FTIR光谱，而波带的位置以波数的倒数形式表示(cm-1)。在VG70FE,PGSyxAPIIII，或VGZABHF仪上测定质谱，使用快速原子轰击(FAB)或电子喷射(ES)离子化技术。元素分析是用Perkin-Elmer240C元素分析仪进行的。熔点是在Thomas-Hoover熔点装置上测定的，并且不进行修正。所有温度均以摄氏度表示。
将Analtech SILICA Gel GF和E.Merek SILICA Gel60F-254薄层板用于薄层层析。在E.Merck Kieselge160(230-400目)硅胶上进行快速和重力层析。在Rainin或Beckman层析仪上进行分析和制备HPLC。ODS表示十八烷基甲硅烷基衍生的硅胶层析支持物。5μApex-ODS表示十八烷基甲硅烷基衍生的硅胶层析支持物，其公称粒度为5μ，是由Jones色谱公司生产的，厂址为Littleton，克罗拉多。YMC ODS-AQ是ODS层析支持物，并且是YMC公司的注册商标，产地为Kyoto,日本。PRP-1是聚合(苯乙烯二乙烯苯)层析支持物，它是Hamilton公司的注册商标，产地为Reno,Nevada。Celite是过滤器辅助装置，由酸洗硅藻土制成，并且是Manville公司的注册商标，产地为丹佛，科罗拉多。
例1二[2-(4-苯基-5-甲基)噻唑基]胺氢溴酸MS(ES)m/e 363.7[M+H]+1H NMR(300MHz,DMSO-d) 7.74(d,J=10Hz,4H),7.52(t,J=6Hz,4H),7.39(t,J=11Hz,2H).
例2二[2-(4-(2-吡啶基)噻唑基]胺二氢溴酸MS(ES)m/e337.7[M+H]+1H NMR(300MHz,DMSO-d) 8.71(d,J=3Hz,2H),8.23(m,4H),8.05(s,2H),7.59(t,J=6Hz,2H)例3二[2-[4-(3-吡啶基)噻唑基)胺三氟乙酸MS(ES)m/e337.7[M+H]+1H NMR(300MHz,DMSO-d) 9.33(s,2H),9.04(d,J=10Hz,2H),8.75(d,J=5Hz,2H),8.08(t,J=11Hz,2H),7.88(s,2H)例4N,N-二(5(3,4-二氯苯)-2-噻唑基)胺二氢溴酸1H NMR(300MHz,DMSO-d) 8.33(s,1H),8.18(s,2H),7.94(d,J=8.2Hz,2H),7.82(s,2H),7.73(d,J=8.2Hz,2H).
例51,3-二[4-(3-吡啶基)-2-噻唑基氨基]苯二氢溴酸MS(ES)m/e428.8[M+H)+1H NMR(300MHz,DMSO-d) 10.44(s,2H),9.17(d,J=1.7Hz,2H),8.47(dd,J=1.7,4.7Hz,2H),8.23-8.29(m,4H),7.56(s.2H),7.39(dd,J=5.0,8.0Hz),7.32(s,2H).
用于本发明合物的药用制剂可以各种形式制备，并含有各种赋形剂。所述制剂的例子如下例6吸入式制剂从一个定量吸入器将式(Ⅰ)化合物(1-100毫克)气溶胶化，每次使用时输送所需量的药物。
例7片状制剂片剂/成分 每片1．活性成分40mg(式(Ⅰ)化合物)2．玉米淀粉20mg3．藻酸20mg
4．藻酸钠 20mg5．硬脂酸镁 1.3mg片剂的制备方法在合适的搅拌器/混合器中将成分1、2、3和4混合。分批向该混合物中加入足量的水，并在每次加水之后小心混合，直到该混合物的团块稠度使其能够转化成湿的颗粒。通过让所述湿团块通过具有8号网眼(2.38mm)的筛震动造粒机将其转变成颗粒。然后在140°F(60℃)的烘箱中将所述湿颗粒烘干直到干燥为止。用5号成分对干燥的颗粒进行润滑，并将润滑过的颗粒放在合适的压片机上压缩。
例8肠胃外制剂将合适量的式(Ⅰ)化合物溶解在聚乙二醇中并加热制备用于肠胃外给药的药用组合物，然后对该溶液进行稀释以用于注射(至100毫升)。然后通过0.22微米的滤膜过滤对该溶液进行消毒，并密封在无菌容器中。
本说明书所引用的所有文献，包括，但不限于专利和专利申请，都被收作本文的参考文献，就如同每一份文件被专门和分别指明收作本文的参考文献一样。
权利要求
1．一种如下面式(Ⅰ)所示的化合物 其中A表示共价键，或1,2、1,3或1,4-二取代芳香胺环，选自下列一组 其中R独立地选自H、OMe、Cl、Br、F、NO2和CN；n是1-4的整数；每一个X独立地选自H、Br、CH3、NO2、CN和NR1R2；每一个Ar各自是视需要取代的苯基或视需要取代的五或六员杂环，该杂环含有选自N、O和S的一个或多个杂原子；和R1和R2各自是H或C1-4烷基，分支的或环状的，视需要含有O或N。
2．如权利要求1的化合物，选自下列一组二[2-(4-苯基-5-甲基)噻唑基]胺，二[2-(4-(2-吡啶基)噻唑基]胺，二[2-[4-(3-吡啶基)噻唑基)胺，N,N-二(5(3,4-二氯苯基)-2-噻唑基)胺，N,N-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基)胺，1,4-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基氨基)苯，1,3-二[4-(3-吡啶基)-2-噻唑基氨基]苯，1,4-二[4-氟苯基-2-噻唑基氨基]苯；和1,4-二(4-(4-甲氧基苯基)-2-噻唑基氨基)苯。
3．如权利要求2的化合物，选自下列一组二[2-(4-苯基-5-甲基)噻唑基]胺，1,4-二(4-(4-甲氧基苯基)-2-噻唑基氨基)苯，N,N-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基)胺，1,4-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基氨基)苯，1,4-二[4-氟苯基-2-噻唑基氨基]苯，二[2-(4-(2-吡啶基)噻唑基]胺，和二[2-[4-(3-吡啶基)噻唑基)胺。
4．如权利要求3的化合物，选自下列一组二[2-(4-苯基-5-甲基)噻唑基]胺，1,4-二(4-(4-甲氧基苯基)-2-噻唑基氨基)苯，N,N-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基)胺，和1,4-二(4-(4′-联苯基)-2-噻唑基氨基)苯氢溴化物。
5．一种拮抗myt1激酶受体的方法，该方法包括给需要治疗的对象施用有效量的如权利要求1所述的化合物。
6．一种治疗选自下列疾病或病症的方法白血病、固体肿瘤癌、转移癌、软组织癌、脑癌、食道癌、胃癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、膀胱癌、骨癌、前列腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫癌、睾丸癌、肾癌、头癌和颈癌、慢性炎性增殖疾病，增殖性心血管疾病，增殖性视觉疾病，和良性过度增殖病，该方法包括给需要治疗的对象施用有效量的如权利要求1所述的化合物。
7．如权利要求4的方法，其中，所治疗的疾病或病症选自下列一组牛皮癣、类风湿性关节炎、糖尿病性视网膜病和血管瘤。
全文摘要
提供了新型myt1激酶受体拮抗剂以及使用该拮抗剂的方法。
文档编号C07D417/04GK1322719SQ00108199
公开日2001年11月21日 申请日期2000年5月10日 优先权日2000年5月10日
发明者M·A·拉戈 申请人:史密丝克莱恩比彻姆公司