苯甲酸衍生物及其制备与降糖应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了苯甲酸衍生物及其制备方法与应用。本发明所提供的苯甲酸衍生物为如式I或式II所示的化合物；所述式I中，R1和R2为如下a）-d）中任一：a）R1=CH3，R2=COOH；b）R1=CH3，R2=COOCH3；c）R1=CH3，R2=CHO；d）R1=CH2OH，R2=CH2OCH3；所述式II中，R1为如下e）-g）中任一：e）R1=CH2CH2CH2COOH；f）R1=CH(COOH)CH(CH3)CH2CH3；g）R1=CH(COOH)CH2CH(CH3)CH3。实验证明，本发明化合物具有很强的抑制α-葡萄糖苷酶的活性，且可明显降低Ⅱ型糖尿病模型大鼠的血糖值。本发明所提供的化合物及其可药用盐为开发治疗和/或预防II型糖尿病的创新药物、开发抑制α-葡萄糖苷酶的创新型降糖药物，以及开发具有上述功能的食品、功能保健品等提供了新的物质基础，具有潜在巨大的社会效益和经济效益。式Ⅰ式Ⅱ。
【专利说明】苯甲酸衍生物及其制备与降糖应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及苯甲酸衍生物及其制备方法与应用，特别涉及两类共7种苯甲酸衍生物、制备方法，以及在作为α -葡萄糖苷酶抑制剂中的应用。
【背景技术】
[0002]II型糖尿病已成为世界范围内严重影响人类健康的非传染性疾病，在我国糖尿病患者有2000万以上，其中近90%为II型糖尿病，并且出现多发性、年轻化的特点，严重威胁国民健康。II型糖尿病患者的胰岛素处于相对缺乏状态，故其治疗可以不必完全依赖胰岛素而使用其它药物。目前治疗糖尿病的主要方法为胰岛素治疗和口服磺脲类、双胍类等降血糖药物，但胰岛素治疗价格昂贵，而其它类型药物存在疗效有限、毒副作用明显等特点。[0003]α-葡萄糖苷酶作用于小肠内的蔗糖等寡糖，最终产生葡萄糖并经小肠吸收进入血液，是餐后血糖升高的主要原因。餐后高血糖可引起机体对胰岛素的敏感性降低从而加II型糖尿病患者病情，甚至导致一系列并发症。因而α -葡萄糖苷酶抑制剂将显著提高对糖尿病的控制。目前市场上使用的α-葡萄糖苷酶抑制剂主要为阿卡波糖、伏格列波糖、米格列醇等，但是值得注意的是，目前使用的这些抑制剂都带来了不同程度上的毒副作用，如胃肠道副作用、荨麻疹、肝功能障碍、心脏系统风险等。因此，积极发展更安全、更强效的α-葡萄糖苷酶抑制剂是必要和紧迫的。
【发明内容】
[0004]本发明的一个目的是提供两类共7种苯甲酸衍生物。
[0005]本发明所提供的苯甲酸衍生物，为如式I和式II所示的化合物:
[0006]
【权利要求】
1.化合物，如式I或式II所示:
2.权利要求1所述化合物或其可药用盐在如下(A1)- (A4)任一中的应用: (Al)作为α -葡萄糖苷酶抑制剂； (Α2)制备治疗和/或预防II型糖尿病的药物； (A3)制备抑制α -葡萄糖苷酶的药物； (Α4)制备具有降糖作用的食品或功能保健品。
3.治疗和/或预防II型糖尿病的药物，其活性成分为权利要求1所述化合物或其可药用盐。
4.抑制α-葡萄糖苷酶的药物，其活性成分为权利要求1所述化合物或其可药用盐。
5.具有降糖作用的食品或功能保健品，其活性成分为权利要求1所述化合物或其可药用盐。
6.权利要求1所述化合物的制备方法，包括如下步骤: (1)将粗毛韧革菌(Stereumhirsutum)接种到固体培养基上进行固体发酵培养； (2)向步骤(1)发酵后的体系中加入有机溶剂浸泡提取得到含有权利要求1中式I所示化合物和式II所示化合物的提取液，将所述提取液于36-40℃减压浓缩，真空干燥，得到含有所述式I所示化合物和所述式II所示化合物的粗提物。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于:步骤(1)中，所述固体培养基为如下al)或 a2): al)由1重量份基材和1-1.5重量份水组成的培养基；a2)由I重量份基材、1-1.5重量份水和0.02-0.1重量份糖组成； 所述基材为籼米、小麦、芡实、燕麦、粳米、玉米、糯米和薏米中的至少一种；所述糖为葡萄糖； 步骤(1)中，所述固体发酵培养的温度为22-28°C，方式为避光静置培养，时间为10-50天。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于:步骤(2)中，所述有机溶剂为乙酸乙酯；或 步骤(2)中，所述浸泡提取得到含有权利要求1中式I所示化合物和式II所示化合物的提取液的方法包括如下bl) -b4)的步骤: bl)第一次浸泡提取:向步骤(1)发酵后的体系中加入乙酸乙酯浸泡7天，期间每隔8h超声处理一次，浸泡后取上清液； b2)第二次浸泡提取:向步骤bl)的剩余物中加入乙酸乙酯浸泡7天，期间每隔8h超声处理一次，浸泡后取上清液； b3)第三次浸泡提取:向步骤b2)的剩余物中加入乙酸乙酯浸泡7天，期间每隔8h超声处理一次，浸泡后取上清液； b4)合并步骤bl)-b3)的上清液，即得到所述含有式I所示化合物和所述式II所示化合物的提取液。
9.根据权利要求6- 8中任一所述的方法，其特征在于:所述方法还包括如下步骤(3)- (5): (3)将步骤(2)获得的所述含有式I所示化合物和式II所示化合物的粗提物进行硅胶柱层析分离，以氯仿和丙酮的混合液作为流动相，按照流动相中氯仿和丙酮的体积比依次为 100:0、100:1、50:1、30:1、20:1、10:1、8:2、7:3、6:4 和 0:1 的洗脱梯度进行梯度洗脱，每个梯度的流动相的洗脱体积均为1500毫升；收集氯仿和丙酮的体积比为50:1的流动相的前500毫升的洗脱液，记为溶液甲；收集氯仿和丙酮的体积比为20:1的流动相的后500毫升的洗脱液，以及氯仿和丙酮的体积比为10:1的流动相的前500毫升的洗脱液，混合后溶液记为溶液乙； (4)将步骤(3)获得的溶液甲进行凝胶过滤层析，以甲醇作为流动相进行洗脱；收集第140毫升-180毫升的洗脱液，于36-40°C压浓缩，真空干燥，即得权利要求1中所述化合物Sterenol A ;收集第200毫升-240毫升的洗脱液,于36-40°C减压浓缩,真空干燥，即得权利要求I中所述化合物Sterenol B ;收集第260毫升-340毫升的洗脱液，于36_40°C减压浓缩，真空干燥，即得权利要求1中所述化合物Sterenol C。 (5)将步骤(3)获得的溶液乙进行ODS反相硅胶层析，以甲醇和水的混合液作为流动相，按照流动相中甲醇和水的体积比依次为20:80、30:70、40:60、50:50、60:40、85:15和0:1的洗脱梯度进行梯度洗脱，每个梯度的流动相的洗脱体积均为200毫升；收集甲醇和水的体积比为40:60的流动相的后100毫升的洗脱液，于36-40°C减压浓缩，真空干燥，即得权利要求1中所述化合物Sterenol D ;收集甲醇和水的体积比为50:50的流动相的后100毫升的洗脱液，于36-40°C减压浓缩，真空干燥，即得权利要求1中所述化合物Sterenin E ；收集甲醇和水的体积比为60:40 的流动相的后100毫升的洗脱液，于36-40°C减压浓缩，真空干燥，即得权利要求1中所述化合物Sterenin F ;收集甲醇和水的体积比为85:15的流动相的后100毫升的洗脱液，于36-40°C减压浓缩，真空干燥，即得权利要求1中所述化合物Sterenin G0
10.根据权利要求6-9中任一所述的方法，其特征在于:所述粗毛韧革菌(Stereumhirsutum)为粗毛韧革菌(Stereum hirsutum) THG20。
【文档编号】A61K31/235GK103880678SQ201410111365
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2014年3月24日 优先权日:2014年3月24日
【发明者】刘宏伟, 王波涛, 马轲, 齐秋月, 韩俊杰 申请人:中国科学院微生物研究所