换;高、中和低压液相色谱方法和装置;小规模分析;模拟移动床 (SMB)和制备薄层或厚层色谱法，W及小规模薄层和快速色谱法的技术。
[0080] 另一类分离方法设及用试剂处理混合物，选择所述试剂W结合到所需产物、未结 合起始材料、反应副产物等或W其他方式使它们可分离。运类试剂包括吸附剂或吸收剂，诸 如活性碳、分子筛、离子交换介质等。或者，试剂可W是酸(就碱性材料而言）、碱(就酸性材 料而言）、结合试剂(诸如抗体）、结合蛋白、选择性馨合剂(诸如冠酸）、液体/液体离子萃取 试剂化IX)等。
[0081] 适当分离方法的选择取决于所设及的材料的性质。例如，蒸馈和升华中的沸点和 分子量，色谱法中极性官能团的存在或不存在，多相萃取中酸性和碱性介质中材料的稳定 性等。本领域技术人员将会应用最可能实现所需分离的技术。
[0082] 通过本领域技术人员熟知的方法，诸如通过色谱法和/或分步结晶，可基于非对映 异构体混合物的物理化学差异将它们分离成其单独的非对映异构体。对映异构体可如下分 离:通过与适当的光学活性化合物(例如手性助剂，诸如手性醇或Mosher氏酷基氯)反应，将 对映异构体混合物转化成非对映异构体混合物，分离所述非对映异构体并将单独的非对映 异构体转化(例如水解)成对应的纯对映异构体。同样，本文所描述的式I至VII化合物中的 一些可W是阻转异构体(例如，取代的联芳基)并且被认为是本发明的一部分。也可使用手 性HPLC柱来分离对映异构体。
[0083] 使用诸如用光学活性拆分剂形成非对映异构体的方法化Iiel,E.和Wilen, S. ('Stereochemistry of Organic Compounds John Wiley&Sons , Inc. ,New York, 1994; LochmulIer，C.H.，（ 1975) J. Chromatogr.，113(3): 283-302)，通过拆分外消旋混合物，可得 到实质上不含有其立体异构体的单一立体异构体，例如对映异构体。本文所描述的式I至 VII手性化合物的外消旋混合物可通过任何合适的方法分离和分开，所述方法包括：（1)用 手性化合物形成离子性非对映异构体的盐并通过分步结晶或其他方法分离，（2)用手性衍 生试剂形成非对映异构体化合物，分离非对映异构体并转化成纯的立体异构体，W及(3)在 手性条件下直接分离实质上纯的或富集的立体异构体。参见："化Ug Stereochemishy, Analytical Methods and Pharmacology,"Irving W.Wainer编,Marcel Dekker,Inc.,New York(1993)〇
[0084] 在方法（I)下，非对映异构体盐可通过对映异构纯的手性碱(诸如马钱子碱、奎宁、 麻黄碱、番木整碱、a-甲基-0-苯乙胺(安非他明）等）与带有酸性官能团（诸如簇酸和横酸） 的不对称化合物的反应形成。通过分步结晶或离子色谱法可诱导非对映异构体盐的分离。 对于氨基化合物的光学异构体的分离，添加手性簇酸或横酸(诸如精脑横酸、酒石酸、扁桃 酸或乳酸)可导致非对映异构体盐的形成。
[0085] 或者，通过方法(2)，使要拆分的底物与手性化合物的一种对映异构体反应，W形 成非对映异构体对化.和Wilen,S.''Stereochemist;ry of Organic Compounds",John WiI巧&Sons，Inc.，1994,第322页）。通过使不对称化合物与对映异构体纯的手性衍生试剂 (诸如薄荷基衍生物)反应，可形成非对映体化合物，随后分离所述非对映异构体并水解产 生纯的或富集的对映异构体。测定光学纯度的方法设及制备外消旋混合物的手性醋，诸如 薄荷基醋（例如，在碱存在下制备(-)氯甲酸薄荷醋），或Mosher醋、乙酸a-甲氧基-a-(S氣 甲基）苯醋(Jacob III.J.Org.Chem. ,(1982)47:4165)，并分析Ih NMR光谱中的两种阻转异 构对映异构体或非对映异构体的存在。按照分离阻转异构糞基-异哇嘟的方法(WO 96/ 15111 )，通过正相和反相色谱法，可使阻转异构体化合物的稳定非对映异构体分离和分开。 通过方法（3)，两种对映异构体的外消旋混合物可通过色谱法使用手性固定相来分离 (('Chiral Liquid Chromatography" (1989 )W. J 丄 ough 编，Chapman and Hall ,New York； Okamoto，J.C虹omatogr. ,(1990)513:375-378)。通过用于区分具有不对称碳原子的其它手 性分子的方法，诸如旋光度和圆二色性，可区分富集或纯化的对映异构体。
[00化]施用和药物制剂
[0087] 式（I)化合物可通过适合于要治疗的病状的任何便利途径来施用。适当的途径包 括口服、肠胃外（包括皮下、肌内、静脉内、动脉内、真皮内、銷内和硬膜外）、透皮、直肠、鼻 部、局部(包括口腔和舌下）、阴道、腹膜内、肺内和鼻内。
[0088] 所述化合物可W任何适当的施用形式来施用，所述施用形式例如片剂、粉末、胶 囊、溶液、分散剂、混悬剂、糖浆、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳剂、贴片等。此类组合物可含有药物 制剂中的常规组分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、甜味剂、填充剂和其它活性剂。如果希望 肠胃外施用，则组合物将是无菌的并且呈适用于注射或输注的溶液或混悬液形式。
[0089] 通过将式（I)化合物与载体或赋形剂混合来制备典型的制剂。合适的载体和赋形 剂是本领域技术人员所熟知的并且详细地描述于例如：Ansel ,Howard C.等，Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia: Lippincott,Williams&WiIkins,2004;Gennaro,Alfonso R.等，Remington:The Science and Practice of Pharmacy. PhiIadelphia:Lippincott,WilIiams&WiIkins ,2000;和 Rowe,Raymond C.Handbook of Pharmaceutical Excipients .Chic曰go,Phsrmsceuticsl Press,2005中。制剂还可包括一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、湿润剂、润滑剂、乳 化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、乳浊剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、调味 剂、稀释剂和其它已知添加剂W提供药物（即式（I)化合物或其药物组合物）的优良外观或 有助于制造医药产品（即药剂）。
[0090] -个实施方案包括包含式（I)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。进一 步实施方案提供一种包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐W及药学上可接受的载体或 赋形剂的药物组合物。
[0091] 用式(I)化合物治疗的方法
[0092] 式（I)化合物可用于通过施用一种或多种式（I)化合物或其药学上可接受的盐来 治疗或预防疾病或病状。在一个实施方案中，用可检测到抑制CHKl活性的量的式（I)化合物 或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体、佐剂或媒介物治疗人类患者。
[0093] -种预防或治疗由CHKl和/或CHK2调节的疾病或病症的方法可包括对需要此治疗 的哺乳动物施用有效量的式(I)化合物。
[0094] 在另一个实施方案中，提供一种治疗哺乳动物的过度增生性疾病的方法，所述方 法包括对所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
[0095] 在另一个实施方案中，提供一种治疗或预防需要此治疗的哺乳动物的癌症(包括 下文所确认的病状)的方法，其中所述方法包括对所述哺乳动物施用治疗有效量的式(I)化 合物或其药学上可接受的盐。
[0096] 在某些实施方案中，式（I)的CHKl抑制剂（即，式（I)化合物）与DNA损伤剂组合施 用。通常，DNA损伤剂将在式（I)的C皿1抑制剂之前施用。DNA损伤剂包巧Gemzar巧（吉西他 滨）、Camp化sar? (伊立替康或CPT-11)、Temodar? (替莫挫胺）、Xeloda愈（卡培他滨）、 Hycamtin? (托泊替康）、顺销、Eloxatin? (奥沙利销）、Paraplatin⑥（卡销）、喜树碱、 ara-C (阿糖胞巧）、5-FU (氣尿喀晚）、Cytoxa打朦（环憐酷胺）、E妨PO协QS够或Vep紛id? (憐酸依托泊巧）、Vum〇n? (替尼泊巧）、AdriamycinP：FS⑧或Adriamycin：RDF⑥（阿霉 素）、柔红霉素、Alimta愈（培美曲塞)和福射。在某些实施方案中，DNA损伤剂选自由W下组 成的组:吉西他滨、伊立替康、替莫挫胺、卡培他滨、喜树碱、顺销、ara-c和5-即。在某些实施 方案中，DNA损伤剂选自吉西他滨、伊立替康、替莫挫胺和卡培他滨。在某些实施方案中，DNA 损伤剂选自吉西他滨、伊立替康、顺销、奥沙利销、卡销和阿糖胞巧。在某些实施方案中，DNA 损伤剂选自吉西他滨和伊立替康。DNA损伤剂W其批准或推荐剂量施用。
[0097] 由于CHKl抑制剂能提高许多抗癌剂活性的能力，预期可通过本文所描述的组合物 和方法治疗广范围的肿瘤类型。运些病状包括但不限于：屯、脏：肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、 横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤）、粘液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂肪瘤和崎胎瘤;肺:支气管癌(鱗状细 胞、未分化小细胞、未分化大细胞、腺癌）、肺泡(细支气管)癌、支气管腺瘤、肉瘤、淋己瘤、软 骨瘤型错构瘤、间皮瘤；胃肠:食道(鱗状细胞癌、腺癌、平滑肌瘤、淋己瘤）、胃（癌、淋己瘤、 平滑肌瘤）、膜腺(导管腺癌、膜岛瘤、膜高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、舒血管肠肤瘤）、小 肠(腺癌、淋己瘤、类癌瘤、卡波济氏肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤）、 大肠(腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤）；泌尿生殖道：肾（腺癌、威廉氏肿瘤 [肾母细胞瘤]、淋己瘤、白血病）、膀脫和尿道(鱗状细胞癌、移行细胞癌、腺癌）、前列腺(腺 癌、肉瘤）、睾丸(精原细胞瘤、崎胎瘤、胚胎癌、崎胎癌、绒毛膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维 瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤、脂肪瘤）；肝:肝细胞瘤(肝细胞癌）、胆管细胞癌、肝母细胞瘤、血管 肉瘤、肝细胞腺瘤、血管瘤;骨:骨原性肉瘤(骨肉瘤）、纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、软骨 肉瘤、尤因氏肉瘤、恶性淋己瘤（网状细胞肉瘤）、多发性骨髓瘤、恶性巨细胞瘤脊索瘤、骨软 骨瘤(骨软骨外生骨痛）、良性软骨瘤、软骨母细胞瘤、软骨肌瘤样纤维瘤、骨样骨瘤和巨细 胞瘤;神经系统：烦骨(骨瘤、血管瘤、肉芽肿、黄色瘤、崎形性骨炎）、脑膜(脑膜瘤、脑膜肉 瘤、神经胶质瘤）、脑(星形细胞瘤、髓母细胞瘤、神经胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体 瘤]、多形胶质母细胞瘤、少突神经胶质细胞瘤、神经銷瘤、视网膜母细胞瘤、先天性肿瘤）、 脊髓癌神经纤维瘤、脑膜瘤、神经胶质瘤、肉瘤）；妇科: